FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES EXACTA Y TECNOLOGIA

DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA
LABORATORIO SOBRE SOLUCIONES AMORTIGUADORAS
(MODALIDAD VIRTUAL)
Estudiante:
Zuleyka Palacio 8-972-496
zulypal3107@hotmail.com

Grupo:
2-1, biología

PROFESORES ASISTENTES
Alexander Arosemena
Humberto Alzola
Candelario Rodríguez
Adolfo Sauri
 José Veces

OBJETIVOS
♦ Identificar los instrumentos de laboratorios utilizados en la
preparación de las soluciones amortiguadoras.
♦ Familiarizar al estudiante con los aspectos teóricos relacionados con
las soluciones amortiguadoras.
♦ Preparar en forma precisa una solución amortiguadora realizando los
cálculos matemáticos y los procedimientos para obtener dichas
soluciones.
♦ Estudiar las propiedades de las soluciones amortiguadoras en términos
de la capacidad amortiguadora.

INTRODUCCIÓN
En muchas áreas de las investigaciones, los químicos necesitan
soluciones acuosas que resistan a cambios de pH, cuando se añaden
pequeñas cantidades de ácidos o bases (H + u OH-). Una solución
acuosa con esas funciones se denomina solución amortiguadora. Esta
solución es capaz de consumir iones de H + u OH- sin grandes cambios
de pH. Una solución amortiguadora se preparar mezclando un ácido
débil y su base conjugada o una base débil y su ácido conjugado.
HC2H3O2 H+ + C2H3O2-
Ácido acético acetato
(ácido débil) (base conjugada)
 Las estructuras y, por tanto, funciones de biomoléculas son sensibles a
cambio de pH, por lo que debe mantenerse por mecanismos
específicos dentro de valores más o menos constantes.
En la preparación de soluciones amortiguadoras es importante conocer
la relación del ácido a su base conjugada, ya que el pH de la solución
depende de esta relación, de acuerdo con la ecuación de Henderson-
Hasselbach.
pH= pKa + log[A-]/[HA] ( para ácido débil) o
pH= pka + log[B]/[BH+] (para base débil)
Una de las formas usuales de evaluar el potencial de una solución
amortiguadora, es mediante determinación de su capacidad
amortiguadora, la cual se define como la cantidad de milimoles (o
moles) de ácido o base que hay que agregar a 1 litro de la solución
problema para que su pH inicial cambie en una unidad. El rango de la
capacidad amortiguadora es a una unidad de pH por encima y por
debajo del valor de pKa. (es decir pKa 1)

La capacidad amortiguadora de un sistema depende de:

a) La distancia entre pH y pKa.

b) La concentración absoluta del sistema.

mL ( ácidoo base ) x M
β=
ΔpH x Vol . Amortig .( L)

Cambio de pH tras añadir ácido/base al Cambio de pH tras añadir ácido/base a

agua una disolución amortiguadora
 Fig. #1.
Cambio de pH en Medio ácido o básico

Las soluciones se clasifican como ácidas o básicas de acuerdo con su

concentración de iones hidrógeno relativa al agua pura. Las soluciones ácidas
tienen una concentración de H+ mayor que el agua (mayor a 1 × 10-7 M),
mientras que las soluciones básicas (alcalinas) tienen una concentración de
H+ menor (menor a 1 × 10-7 M). Normalmente, la concentración de iones
hidrógeno de una solución se expresa en términos de pH. El pH se calcula
como el logaritmo negativo de la concentración de iones hidrógeno en una
solución:
pH = –log [H+] ó [H3O+]
Los corchetes que encierran al H+  ó H3O+solo significan que nos referimos a
su concentración. Si introducimos la concentración de iones hidrógeno del
agua (1 × 10-7 M) en esta ecuación, obtendremos un valor de 7,0, también
conocido como pH neutro. En el cuerpo humano, tanto la sangre como el
líquido intracelular tienen valores de pH cercanos al neutro.
 Figura #2.
Escala de pH que va de 0 (muy ácido) a 12 (muy básico/alcalino)
y lista de los valores de pH de sustancias comunes.
El pH dentro de las células humanas (6,8) y el de la sangre (7,4) son muy
cercanos al neutro. Los valores de pH extremos, por arriba o por debajo de
7,0, generalmente se consideran desfavorables para la vida. Sin embargo, el
ambiente dentro de tu estómago es muy ácido, con un pH de entre 1 y 2.
¿Cómo resuelve este problema el estómago? La respuesta: ¡células
desechables! Las células estomacales, especialmente aquellas que entran en
contacto directo con el ácido estomacal y el alimento, mueren y son
constantemente reemplazadas por nuevas. De hecho, el recubrimiento del
estómago humano es sustituido por completo cada siete a diez días.
La mayoría de los organismos, incluidos los seres humanos, necesitan
mantener el pH dentro de un rango muy reducido para poder sobrevivir. Por
ejemplo, la sangre humana necesita mantener su pH justo alrededor de 7,4 y
evitar variaciones significativas hacia arriba o hacia abajo, aun cuando
sustancias ácidas o alcalinas entren o salgan del torrente sanguíneo.
Por ejemplo, una de las soluciones amortiguadoras que mantienen el
pH en la sangre humana está formada por el ácido carbónico (H2CO3) y su
base conjugada, el ion bicarbonato (HCO3-). El ácido carbónico se forma
cuando el dióxido de carbono entra al torrente sanguíneo y se combina con
el agua, y es la forma principal en la que el dióxido de carbono viaja en la
sangre entre los músculos (donde se produce) y los pulmones (donde es
liberado como producto de desecho).

H+ + HCO3- ↔ H2CO3

Si se acumulan demasiados iones H+ la ecuación de arriba se moverá hacia

la derecha y los iones bicarbonato absorberán los H+ para formar ácido
carbónico. De igual manera, si la concentración de H+ baja demasiado, la
ecuación irá hacia la izquierda y el ácido carbónico se convertirá en
bicarbonato, donando iones H+ a la solución. Sin este sistema amortiguador,
las variaciones en el pH del cuerpo humano serían tan grandes que pondrían
en riesgo la supervivencia.
El pH de una mezcla amortiguadora se puede conocer mediante
la ecuación de Henderson-Hasselbalch. En la disociación del ácido acético:

Fig. #3.
Curva de una
solución amortiguadora
 Teniendo en cuenta que el ácido acético es muy débil y, por tanto, el
equilibrio de disociación está casi totalmente desplazado hacia la izquierda
(desplazamiento favorecido por la presencia de cantidades notables de
acetato) podremos sustituir en la ecuación de Henderson-Hasselbalch, sin
introducir errores, la concentración de acético libre por la de acético total
([HAc]=[ácido]).
Análogamente, como el acetato sódico está completamente disociado
podemos considerar que la concentración del ion acetato coincide con la
concentración de sal ([Ac-]=[sal]).
Con estas modificaciones podemos expresar la ecuación de Henderson-
Hasselbalch de una forma válida para todos los amortiguadores (no sólo para
el acético/acetato):

A partir de esta fórmula se pueden deducir fácilmente las propiedades de los

amortiguadores:
1.- El pH de una disolución amortiguadora depende de la naturaleza del ácido
débil que lo integra (de su pK), de modo que para cantidades
equimoleculares de sal y de ácido, el pH es justamente el pK de este ácido.
Dicho de otra forma, se puede definir el pK de un ácido débil como el pH del
sistema amortiguador que se obtiene cuando [sal] = [ácido] (Fig. #3).
2.- El pH del sistema amortiguador depende de la proporción relativa entre la
sal y el ácido, pero no de las concentraciones absolutas de estos
componentes. De aquí se deduce que, añadiendo agua al sistema, las
concentraciones de sal y ácido disminuyen paralelamente, pero su cociente
permanece constante, y el pH no cambia. Sin embargo, si la dilución llega a
ser muy grande, el equilibrio de disociación del ácido se desplazaría hacia la
derecha, aumentando la [sal] y disminuyendo [ácido], con lo cual el cociente
aumenta y el pH también, de forma que se iría acercando gradualmente a la
neutralidad (pH 7).
3.- Cuando se añaden ácidos o bases fuertes a la disolución amortiguadora, el
equilibrio se desplaza en el sentido de eliminar el ácido añadido (hacia la
izquierda) o de neutralizar la base añadida (hacia la derecha). Este
desplazamiento afecta a las proporciones relativas de sal y ácido en el
equilibrio. Como el pH varía con el logaritmo de este cociente, la
modificación del pH resulta exigua hasta que uno de los componentes está
próximo a agotarse.
PROCEDIMIENTO

1- Realizar los cálculos utilizados para preparar 50 ml de solución

amortiguadora de acetato de pH 5,5; 4,8 y 4,0 las cuales deben tener
una concentración 0.1 M si el pKa es 4,74 a partir de las soluciones 0,1
M de HC2H3O2 y NaC2H3O2. Actividad 1

2- Preparación de soluciones diluidas a partir de las soluciones

amortiguadoras en el paso anterior; para ello se rotulan 6 vasos
químicos: dos con la letra A; 2 con la letra B y dos con la letra C. A la
letra A se agrega 20 ml de la solución original; a las letras B se le
agrega 5 ml de la solución original y 20 ml de agua y la letra C se le
agrega 5 ml de la diluida B y 20 ml de agua y calcular la concentración
de la solución en cada dilución con la fórmula V1xC1=V2x C2
Actividad 2

Fig. #4.

3- Un juego de soluciones A, B y C es titulada con HCl 0.1 M y otro juego

de A, B y C se titulan con NaOH 0.1 M. Con los volúmenes consumidos
por cada una de estas soluciones se determina la capacidad
amortiguadora (β) mediante la siguiente fórmula: Actividad 3
 mL ( ácidoo base ) x M
β=
ΔpH x Vol . Amortig .( L)

Actividad 1. calcular los ml de soluciones de ácido acético 0.1 M y acetato

de sodio 0.1M utilizados para preparar 50 ml de solución amortiguadora de
acetato de pH 5,5 las cuales deben tener una concentración 0.1 M si el pKa
es 4,74 a partir de las soluciones 0,1 M de HC2H3O2 y NaC2H3O2.
3 Ptos.
Actividad 1. calcular los ml de soluciones de ácido acético 0.1 M y
acetato de sodio 0.1M utilizados para preparar 50 ml de solución
amortiguadora de acetato de pH 4.8 las cuales deben tener una
concentración 0.1 M si el pKa es 4,74 a partir de las soluciones 0,1 M de
HC2H3O2 y NaC2H3O2.
3 Ptos.
Actividad 1. calcular los ml de soluciones de ácido acético 0.1 M y
acetato de sodio 0.1M utilizados para preparar 50 ml de solución
amortiguadora de acetato de pH 4.0 las cuales deben tener una
concentración 0.1 M si el pKa es 4,74 a partir de las soluciones 0,1 M de
HC2H3O2 y NaC2H3O2. 3 ptos.
Actividad 2 y 3. Preparación de soluciones diluidas a partir de las
soluciones preparadas en el paso anterior y calcular la concentración de la
solución en la dilución. Nota: [ ] = C
Con la fórmula V1xC1=V2x C2 se calcula la concentración de la dilución.
Por ejemplo: se quiere calcular la C2. C1 es la concentración original 0.1 M
y yo utilizo V1=5ml de esa solución original y a un volumen total de 25 ml
(por que se añadió 20 ml de agua), entonces V2= 25 ml, ¿la C2=?
C2= 0.1 M x 5ml/25ml C2=0.02M

Para Calcular β = ml HCl o NaOH x M HCl o NaOH/ Δp H x 0.020 L Sol. Amort.

Ptos. 12(*)
pH 5.5
M mLSol. H2O [ ]de sln. ml HCl ml NaOH β HCl β NaOH ΔpH
A 20 de A 0 0,1 M 14 ml 7.5 ml 58,33 31,25 1,20
B 5 de A 20 0,02 M 7 ml 3.7 ml 32,11 16,97 1,09
C 5 de B 20 0,004 M 1 ml 0.7 ml 4,90 3,43 1,02

pH 4.8
M mL Sol. H2O [ ]de sln. ml HCl ml β HCl β NaOH ΔpH
NaOH

A 20 de A 0 0,1 M 23 ml 3.5 ml 102,68 15,62 1,12

B 5 de A 20 0,02 M 15 ml 1,0 ml 69,44 4,63 1,08
C 5 de B 20 0,004 M 4 ml 0.1 ml 20,00 0,5 1,00

pH 4.0
M mL Sol. H2O [ ]de sln. ml HCl ml NaOH β HCl β NaOH ΔpH
A 20 de A 0 0,1 M 4 ml 20 ml 16,67 0,03 1,20
B 5 de A 20 0,02 M 1.5 ml 9.5 ml 6,70 42,41 1,12
C 5 de B 20 0,004 M 0.1 ml 3.5 ml 0,5 17,5 1,00
Justifique y realice todos los cálculos. Recuerde que los volúmenes de
los vasos son variados(*)
Actividad 4. Analiza los resultados obtenidos en la preparación de las
soluciones y en el cálculo de Capacidad Amortiguadora Ptos. 3
Los resultados obtenidos en la preparación de las soluciones demuestran que
al preparar la solución con un pH de 5,5 requirió una mayor cantidad de la
especie desprotonada, pues cuanto menor sea el pKa, más fuerte es el ácido
y mayor será su capacidad de donar protones, sin embargo, con la solución
con un pH 4,0 pasa lo contrario pues se requirió mayor cantidad de la especie
protonada, que es más básico y su capacidad de recibir protones es mayor.
Respecto a la solución con pH de 4,8 los valores de la pKa y del pH están muy
cerca entre sí por lo que significa que hay casi igual concentración de la
especie protonada y desprotonada y se requieren cantidades similares de
ácido acético y acetato de sodio.
Esto se confirma al realizar los cálculos de capacidad amortiguadora y ver
numéricamente la cantidad de especies necesaria para reparar dicho buffer.
A medida que la concentración disminuyo también lo hizo la capacidad
amortiguadora
Actividad 5. Resolver los Siguientes Problemas: Ptos. 5
1- Una solución amortiguadora de acetato tiene una concentración
de ácido acético de 0,0135 M y una concentración de acetato de
sodio de 0,0260 M. Calcular el pH de la solución amortiguadora,
sabiendo que el pKa para el amortiguador acetato es 4,75.

pH = pKa + log [A-]/[HA]

pH = 4,75 + log [0,0260M]/[0,0135]

pH = 4,75 + log 1,95

pH = 4,75 + 0,28

pH = 5,03

2- El amortiguador fosfato tiene importancia en la regulación del

pH corporal, ya que su pKa (6,8) es cercano al pH existente en el
organismo (7,4). ¿Cuál será el valor de la relación [Na2HPO42-] /
[NaH2PO4–] de la ecuación de Henderson-Hasselbalch para un valor
de pH = 7,35 y un pKa = 6,8?

pH = pKa + log [Na2HPO42-] / [NaH2PO4–]

7,35 = 6,8 + log [Na2HPO42-] / [NaH2PO4–]

7,35 – 6,8 = log [Na2HPO42-] / [NaH2PO4–]

0,55 = log [Na2HPO42-] / [NaH2PO4–]

100,55 = [Na2HPO42-] / [NaH2PO4–]

3,55 = [Na2HPO42-] / [NaH2PO4–]

Actividad 6. CUESTIONARIO 11 ptos.

1. En base a la definición de capacidad amortiguadora ¿Cuál

amortiguador de los tres que se preparó resultó ser más eficiente y
resistente a la adición de ácido y base? 1 ptos.
Las soluciones que se prepararon con un pH de 4,8, ya que el pH está
muy cercano a la pKa y cuando el pH es igual o próximo al pKa del
ácido, hay igual cantidad de las formas protonada y desprotonada de la
molécula por lo que se necesitara mayor cantidad de mmol o mol de
ácido o base para aumentar o disminuir una unidad de pH que se
traduce en una mayor capacidad amortiguadora
2. ¿Cómo afecta la adición de agua al pH de los tres amortiguadores
preparadas en el paso 1 de la capacidad amortiguadora? Explique
brevemente 1ptos.
 La adición no afecta ya que las soluciones tampones se pueden diluir
sin que se cambie la concentración ya que esta depende solamente del
Ka y del cociente de las concentraciones del ácido y del anión. Cuando
se diluyo la solución tampón cambio la concentración del ácido y del
anión pero el cociente permanece constante y no cambia, razón por la
cual el agregar agua destilada no cambia significativamente de pH
3. ¿Por qué la disolución de NaCI no resiste la adición del mismo volumen
de una solución de NaOH como lo hace una solución amortiguadora de
acetato? 1ptos.
Porque el NaCl no posee propiedades amortiguadoras, es decir, no se
resiste a cambios de pH como ocurre en una solución amort. Que
tenga esta propiedad.
4. Mencione dos usos específicos de las disoluciones amortiguadoras en
un campo de interés de su carrera. Explique brevemente
2 ptos.
 El agua de mar: su pH es de 8,2 aproximadamente siendo un pH
básico debido a la acción en conjunto del CO 2 atmosférico y de los
seres vivos que se encuentran en el mar; desempeña un rol
importante en la evolución de numerosas especies y que varios de
ellos lograron desarrollar un caparazón calcáreo. La formación de
este tipo de caparazón se basa en segregar iones calcio que
conjunto al carbonato presente en el agua genera carbonato de
calcio, un sólido bastante insoluble cuya función es la de recubrir
las parte blandas de un organismo
 Amortiguador carbónico/bicarbonato: está compuesto por ácido
carbónico (H2CO3) y bicarbonato (HCO3-), su valor pKa es de 6,1 y es
el tampón más importante de la sangre (pH = 7,4), representa el
75% de la capacidad amort. De la sangre y también está presente
en el líquido intersticial pero es poco potente desde el punto de
vista químico, (pK=6,1) pero es la más importante en la
homeostadid del pH porque está presente en los medios intra y
extracelulares (en el medio extracelular la concentración de
bicarbonato es elevada (24 mEq)) y es un sistema abierto ya que la
 concentración de los dos elementos que lo componen son
regulables (CO2 a nivel pulmonar y bicarbonato a nivel renal)
5. Prepare un diagrama con reacciones, basándose en el equilibrio
químico y explique cómo se comporta un amortiguador cuando se le
adiciona un ácido y una base.
6 ptos.

A partir del ácido débil

ácido acético (HC2H3O2)
y su sal, acetato de
sodio
(NaC2H3O2).
Cuando se agrega una
pequeña cantidad de
ácido, se combina con el
ión acetato,
C2H3O2. En este caso el
equilibrio se desplaza en la
dirección de los reactivos:
ácido
acético y agua. Habrá
una pequeña reducción de
la cantidad del [C2H3O2]
y un
pequeño aumento del
[HC2H3O2].
HC2H3O2(ac) + H2O(l) —
H3O+(ac) + C2H3O2-(ac)
El equilibrio se desplaza a la
izquierda
Si se agrega una pequeña
cantidad de base a esta
disolución tampón, se
neutraliza por el
ácido acético, HC2H3O2, que
desplaza el equilibrio en la
dirección de los productos:
ión acetato y agua. La
concentración del ácido
[HC2H3O2] disminuye un
poco, y la del
[C2H3O2-] aumenta un poco.
HC2H3O2(ac) + OH-(ac) —
H2O(l) + C2H3O2-(ac)
El equilibrio se desplaza a la
de
A partir del ácido débil ácido acético (HC2H3O2) y su sal,
acetato de sodio (NaC2H3O2).
 Cuando se agrega una pequeña cantidad de ácido, se combina
con el ión acetato. En este caso el equilibrio se desplaza en la
dirección de los reactivos: ácido acético y agua. Habrá una
pequeña reducción de la cantidad del [C2H3O2] y un pequeño
aumento del [HC2H3O2].
HC2H3O2(ac) + H2O(l) — H3O+(ac) + C2H3O2-(ac)
El equilibrio se desplaza a la izquierda

Si se agrega una pequeña cantidad de base, la solución se neutraliza por el

ácido acético, que desplaza el equilibrio en la dirección de los productos:
ión acetato y agua. La concentración del ácido [HC2H3O2] disminuye un
poco, y la del [C2H3O2-] aumenta un poco.
HC2H3O2(ac) + OH-(ac) — H2O(l) + C2H3O2-(ac)
El equilibrio se desplaza a la derecha

Actividad 7. Conclusiones: Ptos.

5
Las soluciones amortiguadoras tienen como principal característica el
mantener estable el pH de una disolución cuando se adiciones cierta
cantidad de ácido o base fuerte, esto hace que permita que, en experiencias
de laboratorio, impida o amortigüe las variaciones en el pH manteniendo
estable o constante el pH de una disolución. Cuando se usa una solución
amortiguadora esta debe contener una concentración de ácido relativamente
grande para que reaccione con los OH- que se le añadan y también esta debe
tener una concentración semejante de base para que reaccione con la
cantidad de iones H+ que se le añada.
Fisiológicamente, las soluciones amortiguadoras son la primera línea de
defensa cuando el cuerpo se enfrenta un cambio de pH en los líquidos
corporales. El pH en los medios biológicos es una constante fundamental
para el mantenimiento de los procesos vitales. La acción enzimática y las
transformaciones químicas de las células se realizan dentro de unos estrictos
márgenes de pH que se mantienen así gracias a la presencia de las soluciones
amortiguadores.

BIBLIOGRAFÍA

LABORATORIOS%20DE%20BIOQUIMICAS/ARTICULOS%20SOBRE
%20SOLUCIONES%20AMORTIGUADORAS/S
http://www.ehu.eus/biomoleculas/buffers/buffer.htm
LABORATORIOS%20DE%20BIOQUIMICAS/ARTICULOS%20SOBRE
%20SOLUCIONES%20AMORTIGUADORAS/P
https://steemit.com/stem-espanol/@joseleogon/soluciones-amortiguadoras-
de-ph-buffer-calculos-y-sugerencias-para-su-preparacion

Videos de soluciones amortiguadoras

https://www.youtube.com/watch?v=ZXEqKA9v8ws
https://www.youtube.com/watch?v=pIBebeFVmO8
https://www.youtube.com/watch?v=qMZMwTkd48o
https://www.youtube.com/watch?v=DKaasc4dMAE

Criterios de evaluación
Lab. “Soluciones Amortiguadoras”

Criterios Puntos Puntos Obtenidos

 Presentación 1
Actividad 1 9
Actividad 2 y 3 12
Actividad 4 4
Actividad 5 5
Actividad 6 11
Actividad 7 5
Fecha y hora de entrega 3
Total 50