UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS y FARMACIA

PROGRAMA DE EXPERIENCIAS DOCENTES CON LA COMUNIDAD - EDC-
SUBPROGRAMA DE EJERCICIO PROFESIONAL SUPERVISADO -EPS-

INFORME FINAL DE EJERCICIO

PROFESIONAL SUPERVISADO -EPS-
REALIZADO EN
LABORATORIO REGIONAL DE ASEGURAMIENTO DE
CALIDADNESTLEPARACENTROAMERICAy EL CARIBE

DURANTE EL PERIODO COMPRENDIDO

DEL 10 DE JULIO/2000 AL 12 DE ENERO/2001

PRESENTADO POR
CARIÑO ALEJANDRA MORALES DE LA PEÑA

ESTUDIANTE DE
QUIMICA

SERIE DE INFORMES DE EPS

REF. EPS.Q. LRAC. 2/2000 GUATEMALA, 15-FEBRERO-2001.
 INDICE

1. INTRODUCCIÓN 1

n. ANTECEDENTES 2

Itt. ACTIVIDADES DESARROLLADAS

A. ACTIVIDADES DE DOCENCIA 3

8. ACTIVIDADES DE SERVICIO 7

C. ACTNIOADES DE INVESTIGACiÓN 12

IV. ANEXOS 31
 1. INTRODUC«IÓN

El Ejercicio Profesional Supervisado realízado en el período comprendido del

10 de JuJio 2000 al12 de enero 2001, se llevo a cabo en el Laboratorio Regional
de Aseguramiento de Calidad (LRAC) NesUé, ubicado en la Antigua Guatemala
departamento de Sacatepequez.
Las prácticas realizadas dentro del laboratorio fueron divididas en tres
actividades: 1) Servicio, 2) Docencia e 3) Investigación. Las actividades de
servicio realizadas fueron determinaciones analíticas en el área de vitaminas,
con análisis específicos para vitaminas A, E, 03, B1,B2, s" para productos Nestlé.
Las determinaciones se hicieron utilizando cromatografía de alta resolución
(HPLC), por fase reversa y normal; los resultados eran calculados y analizados
contra las cantidades declaradas en los productos, reportando al final de cada
serie de análisis, las cantidades y porcentajes de vitaminas según las normas
establecidas como contenido permisible en las muestras. Asimismo, durante el
tratamiento de las muestras para la extracción de las vitaminas A, E Y 03, se
llevó a cabo un Procedimiento Estándar de Operación (OPS) para el Método:
Determinación de Vitamina A, E Y 03 por HPLC fase normal. El OPS consiste en
un pían de auto control que permite comprobar la ejecución práctica del método,
el auditaje sirvió para confirmar que no hay problema en la interpretación de la
instrucción, cálculos de los resultados y manipulación de reactivos yestándares.
Las actividades de Docencia fueron dos conferencias dirigidas a estudiantes
de la carrera de Química del octavo semestre sobre Cromatografía:
Generalidades, HPLC y Cromatografía Gaseosa; finalizando con una visita por
parte de los estudiantes al LRAC.
Se validó el método Determinación de Niacina por HPLC para cereales y
lácteos, como actividad de Investigación. Se llevo a cabo bajo los parámetros
que Nestlé establece como necesarios para implementar nuevas metodologías.
La validación se desarrolló estableciendo la especíñcldad del método, rango y
linealidad, límite de detección, límite de cuantificación y repetibilidad. Bajo estos
requerimientos el método proporciona resultados confiables para el control de
calidad de las adiciones de Niacina en productos NesUé. La actividad finalizó con
una presentación con diaposltivas del desarrollo y vaüdación del método.
 11. ANTECEDENTES

A través de los años, Nestlé ha evolucionado como compañía líder en

alimentos a nivel mundial. Desde su fundación su principal objetivo fue la buena
alimentación para niños, por lo que para Nestlé lo más importante en sus
productos es la calidad, de ahí que cada fábrica posee su propio laboratorio para
el control de calidad de los alimentos en sus diferentes etapas de su producción,
así como la liberación de materia prima o producto terminado. la mayoría de
productos Nestlé necesitan de técnicas y un equipo para análisis bastante
sofisticado que garantice el 100% de seguridad en los resultados analizados.
Para dicho propósito se establecieron laboratorios por regiones geográficas de
producción, capaces de realizar todos aquellos análisis especiales y necesarios
que en los laboratorios de fábrica no se pueden llevar a cabo. En 1997 se
inauguró el laboratorio Regional de Aseguramiento de Calidad (lRAC), ubicado
en la Antigua Guatemala. para dar asistencia a las Fábricas del Grupo de Centro
América y El Caribe, Fábricas de la República Dominicana, Trinidad. & Tobago y
Jamaica, con la finalidad de dar servicios analíticos en el área de monitoreo
nutricional y seguridad alimentaria.
La organización por áreas administrativas está dividida de la siguiente
manera:

I Jefe lRAC I
I I
I Jefe f/Q I l Jefe Micro ~íoloQÍa 1
1 • • 1 l .
Analista Analista Analista Analista Analista
Absorción CG. HPLC Salmonella Microb.
Atómica
I SP'(",Tf':t~ri~ I
I
Estudiante EPS I I Rstndiante EPS I

El lRAC, cuenta con dos áreas de trabajo, el área de Fisicoquimica yel

área de Microbiología. El área de Fisicoquímica está dividida en las siguientes
tres secciones: 1) Absorción Atómica, 2) Cromatografía de Gases y 3)
Cromatografía de aíta resolución. En dichas secciones se analizan metales
pesados y minerales, contaminantes y vitaminas, respectivamente.
En la sección de Anexos se describen las características de los equipos
principales con que cuenta la sección de Fisicoquímica del lRAC.

2
 111. ACTIVIDADES DESARROLLADAS

A. ACTIVIDADES DE DOCENCIA
1. OBJETIVOS

1.1 Proyectar por medio de seminarios los conocimientos en metodología

analítica adquiridos durante la realización del EPS.

1.2 Que los seminarios sean dirigidos a estudiantes de la carrera de

Química de la Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia yal personal
del Área de Fisicoquímica del Laboratorio Regional Nestlé.

1.3 Impartir una exposición sobre los resultados obtenidos en la validación

sobre "Determinación de Niacina por HPLC', al personal del Área de
Fisicoquímica del Laboratorio Regional Nestlé.

1.4 Impartir una serie de exposiciones sobre generalidades en

Cromatografía, HPLC y Cromatografía de gases, a los estudiantes de
Química del octavo semestre de la Facultad de Ciencias Químicas y
Farmacia.

1.5 Evaluar a los asistentes sobre el tema impartido en los seminarios por
medio de preguntas y discusión de resultados en análisis de muestras
problema.

3
 2. ACTIVIDADES

2.1 Especiales

• Conferencia " Introducción a la Cromatoqraña" dirigida a estudiantes

del 8° ciclo de la carrera de Química, para el curso de Análisis
Orgánico 1.

• Conferencia "Cromatografía Liquida y de Gases" dirigida a estudiantes

del 8° ciclo de la carrera de Química, para el curso Análisis Orgánico 1.

• Visita de los estudiantes del 8° ciclo de la carrera de Química a las

instalaciones del LRAC, en las áreas de HPLC, Crornatografía de
Gases, y Absorción Atómica con explicación del funcionamiento y tipo
de trabajo de las áreas y aparatos.

• Curso impartido al personal del área de fisicoquimica de laboratorios

privados y nacional, sobre la determinación de vitaminas hidrosolubles y
liposolubles por HPLC.

• Presentación de la validación del método" Determinación de Niacina

por HPLC en fase reversa", dirigido al personal del LRAC área
fisicoquímica y al personal det laboratono Nacional de Salud, área de
Alimentos y Medicamentos.

• Curso práctico sobre la Determinación de Niacina por HPLC, dirigido al

personal del lRAC área fisicoquímica y al personal del laboratono
Nacional de Salud, área de Alimentos y Medicamentos.

4
 3. RESULTADOS y DISCUSIÓN

Las actividades desarrolladas como docencia durante la realización del EPS,

fueron actividades especiales, ya que sí se tenían contempladas dentro del
programa pero no calendarizadas. Las conferencias dirigidas a los estudiantes
de Química fueron orientadas para el curso de Análisis Orgánico 1,ya que en
dicho curso se hace una introducción a los principios de métodos instrumental es
y técnicas de separación para la caracterización de sustancias orgánicas,
resaltando que siempre queda limitado el aspecto practico de los fundamentos
impartidos durante dicho curso, el objetivo de las conferencias fue el de dar las
generalidades sobre cromatografía y la aplicación de ésta como una herramienta
indispensable para el análisis de alimentos en control de calidad. La parte teórica
impartida fue evaluada como parte del contenido del curso de Análisis Orgánico
1. La visita a las instalaciones del LRAC por parte de los estudiantes propicie
interrogantes sobre el tratamiento y tipo de muestras que pueden analizarse en
Absorción Atómica, Cromatografía de gases y Cromatografía Liquida de Alta
Resolución.
Los cursos teónco-práctícos dirigidos fueron los siguientes:
Determinación de Vitamina A, E Y 03 por HPLC fase normal, Determinación de
Vitamina 81,82 Y 86 por HPLC fase reversa y Determinación de Vitamina PP o
Macina por HPLC fase reversa. Los métodos expuestos se impartieron en
fechas no programadas, dando un buen resultado en cuanto a la manera de
evaluar el dominio de la técnica y manejo del HPLC para evaluación interna del
estudiante como analista de HPLC. Estos cursos fueron dirigidos a personal de
otras instituciones con el fin de dar asesoría analítica en control de calidad de
alimentos y medicamentos. De esta manera también se evaluó y determino la
metodología, con el objeto de hacer un "audü." de métodos y un auto control de
los mismos para verificar y confirmar que no hay problema de interpretación,
atajos o errores de manipulación.

5
 4. CONCLUSIONES

• Las actividades programadas como Docencia fueron conferencias

teóricas y practicas de laboratorio dirigidas a estudiantes de Química y
analistas en el ramo de control de calidad.

• Las conferencias teóricas impartidas se basaron en el principio básico

de la cromatografía y los parámetros que deben cumplirse para la
validación de un método por HPLC.

• Se evaluó el contenido de las conferencias por medio de exámenes

escritos a 10s estudiantes de Química ya los analistas por medio de la
cuantificación de vitaminas en muestras de referencia NESTEC o de
rutina.

• El estudiante de EPS llevó a cabo el "audit. de métodos y controles

n

cruzados para los métodos por HPLC en el área de vitaminas.

5. RECOMENDACION

• Programar conjuntamente las actividades de docencia del EPS con las

actividades extra aula o temas apticados en cursos tales como Química
de Alimentos, Análisis Orgánico I y 11'1,10 Análisis Espectrofotometrico,
de la carrera de Química.

6
B. ACTIVIDADESDE SERIVICIO

1. OBJETIVOS

1.1 Realizar determinaciones cuantitativas de vitaminas, pesticidas,

minerales y metales pesados en muestras Nestlé.

1.2 Realizar determinaciones cuantitativas repetibles y reproducibles.

1.3 Determinarla precisión de cada método analítico a desarrollar.

1.4 Revisar los puntos críticos de cada técnica analítica.

1.5 Conocer el funcionamiento de cada aparato analítico espectrométrico y

fotométrico.

1.6 Dominar las funciones de operación y/o manejo de los aparatos

analíticos disponibles.

1.7 Aprender el manejo de HPLC, EM/CG y Absorción atómica por medio

de software.

1.8 Analizar vitaminas, pesticidas, minerales y metales pesados por HPLC,

EM/CGy absorción atómica respectivamente.

7
 2. ACTIVIDADES

2.1 Rutinarias:

2.1.1 Diarias:

• Cuantificación de vitaminas A, E Y ~ por HPLC fase normal.

• Cuantificación de vitaminas 81, 82, 86 por HPlC fase inversa.
• Planes de Auto Control para estándares vitamínicos liposolubles.
• Plan de Auto Control para uso de espectrofotómetro UV-visible.
• Plan de Auto Control para uso de oolumnas HPLC, regeneración y
lavado.

2.1.2 Semanales

• Calibración de balanza analítica, cambio sílica gel, revisión de baños

maría, revisión de temperaturas en rota vapores y su plan de auto
control.

2.1.3 Especiales:

• Realización del OPS (Procedimiento Estándar de Operación), para el

método de "Determinación de Vitaminas A, E Y 03 ".
• Determinación del pH óptimo a partir de la Actividad del Agua y su
ajuste con hidróxido de sodio para procesos de enfriamiento.
• Implementación de un método externo según la AOAC para la
Separación e identificación de colorantes comestibles en una muestra
de culinarios, por Cromatografía en columnas Sep-pac C-B.
• ActuaJízación del Inventario de Reactivos del área de fisicoquímica.
• Realización OPS (Procedimiento Estándar de Operación) para el
método de "Determinación de Niacina por HPLC".

8
 3. RESULTADOS y DISCUSIÓN

El periodo de 27 semanas del Ejercicio Profesional Supervisado, fue llevado

a cabo en el Laboratorio Regional de Aseguramiento de Calidad Nestlé;
durante las cuales, 14 semanas fueron dedicadas a análisis de rutina en el
Área de HPLC, determinando el contenido de vitaminas liposolubles e
hidrosolubles en muestras de productos Nestlé. En esta misma sección se
realizó el trabajo de investigación que tuvo como duración diez semanas.que
fue el tiempo para validar el método y analizar las muestras pendientes para
el análisis en cuestión. La investigación consistió en la validación del Método
" Determinación de Niacina por HPLC Fase Reversa", en muestras de
cereales y lácteos.
El trabajo de rutina consistió en revisar el numero de muestras a
analizar por fábrica y el tipo de análisis requerido por la misma, seguido a
esto darle tratamiento a la muestra, llevando a cabo la extracción de las
vitaminas, acondicionamiento del HPLC, análisis y cálculo de resultados,
finalizando con el reporte de las cantidades analizadas. Los análisis por
HPLC, se llevaron a cabo por sistema en fase reversa y fase normal,
utilizando detectores de fluorescencia y UV según el tipo de vitamina a
determinar. Conjuntamente, en cada sesión de análisis se llevaron registros
del funcionamiento de cada equipo utilizado, concentración de estándares,
lavado y regeneraciones de columnas crornatoqráñcas, o lo que se conoce
como Planes de Autocontrol, que le permite al laboratorio reportar con datos
confiables las cantidades analizadas.
La práctica flnaíizó haciendo un recorrido por las otras dos áreas del
laboratorio, Cromatografía de Gases y Absorción Atómica. En cromatografía
de gases a manera de inducción por espacio de dos semanas se realizaron
extracciones de pesticidas organoclorados, fostorados y carbamatos.
Llevando a cabo blancos, recuperaciones yestándares. Los pesticidas se
purificaron por cromatografía en gel y después se inyectaron a los
cromatógrafos de gases utilizando detectores del típo FID y NPD Y para la
detección de carbamatos el análisis se hizo por cromatografía Uquida de alta
resolución con post-columna de derivatización y detección por fluorescencia.
La inducción en el área de Absorción Atómica se hizo por espacio de
una semana, en la cual se analizaron los siguientes metales: Calcio,
Magnesio, Cinc, Hierro, Sodio y Potasio, paralelamente al análisis de una
muestra blanco y preparación de los estándares respectivos. La detección

9
de estos metales se hizo por absorción de llama. Para la determinación de
metales pesados se trabajó una muestra y paralela a ésta una muestra
blanco y de referencia llevando a cabo la detección por absorción atómica en
horno de grafito.

4. CONCLUSIONES

• En el área de vitaminas se lIev6 a cabo el Auto Control de métodos y

equipo para la determinación de vitamina A, E, 03, 81, 82 Y ~.

• Por HPLC fase reversa se analizaron 30 muestras de vitamina 81, 33

muestras de vitamina 82 y 14 muestras de vitamina 86.

• Por HPLC fase normal se analizó un total de 82 muestras de vitaminas

liposolubtes.

• Por el método Determinación de Niacina por HPLC fase reversa, se

analizó un total de 67 muestras.

• Las áreas de Cromatografía de gases y Absorción Atómica fueron parte

de una inducción del tipo de metodología empleada, extracción del
analito y aspectos generales del manejo de equipo.

5. RECOMENOACION

• Llevar a cabo planes de auto control para la determinación de vitaminas

hidrosolubles.

10
 UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUíMICAS Y FARMACIA

Valldación del Método:

Determinación de Vitamina PP o Niacina por HPLC fase

reversa, para Cereales y lácteos.

Informe Final de Investigación

Presentado por:

Cariño Alejandra Morales De La Peña

Estudiante de la Carrera de

QUíMICA

Guatemala, enero 2001

1]
 C. ACTIVIDADES DE INVESTIGACiÓN

INDICE

1. Resumen 13

2. Introducción 14

3. Antecedentes 17

4. Objetivos 18

5. Justificación 18

6. Aspectos Metodológicos 19

6.1 Universo del Trabajo 19

6.2 Recursos Humanos 19

6.3 Recursos Físicos 19

6.4 Recursos Materiales 19

6.5 Procedimiento 20

6.6 Diseño de la Investigación. 23

7. Resultados 25

8. Discusión de Resultados 27

9. Conclusiones 29

10. Recomendaciones 29

11. Bibliografía 30

12
1. RESUMEN

En el Laboratorio Regional de Aseguramiento de Calidad Nestlé, se

implemento el método "Determinación de Niacina por HPLC" como área de
investigación de la práctica de EPS. El método consiste en la cuantificación del
Ácido Nicotínico y Nicotinamida en muestras de lácteos y cereales. La
validación del método se desarrolló sobre la base de los parámetros con que
Nestec cuenta para montar una técnica analítica, sirviendo de referencia como
parte del diseño para la investigación lo siguiente: Número de platos teóricos
para la columna cromatográfica, Calidad del pico, Repetibilidad entre
duplicados, Porcentajes de recuperación, y Precisión del método al cabo de 20
muestras o más llevadas por duplicado.
La cuantificación de Niacina se lleva a cabo haciendo la extracción por
solubHídad de la muestra en agua a 60°C, procediendo a agitarla, acidificarla,
centrifugarla y filtrarla para ser analizada después en un HPLC Merck·
HITACHI con detector UV a 262 nm y empleando una fase móvil a pH 2.5 con
ácido octansulfónico como ión pareador. La columna cromatográfica utilizada
fue del tipo RP-18 Purospher, con 4090 platos teóricos para el Ácido Nicotínico
(AN) y 7590 platos teóricos para la Nicotinamida (NM). Bajo estas condiciones
se estableció que el limite de cuantificación es de 0.1 mg/1 OOgde muestra para
Ácido Nicotínico y 0.25 mg/100 9 de muestra para Nicotinamida. Se analizaron
43 muestras por duplicado y se estimó que la desviación estándar para el
método es de 0.27 y su repetibilidad o aceptabilidad de resultados es de 0.76%
considerando una repetibitidad promedio entre duplicados del 4.8%.

13
2. INTRODUCCiÓN

La niacina es conocida también como vitamina PP (preventing pellagra

factor), ácido nicotínico, nicotinamida o niacinamída. Es un derivado de la
piridina substituida, ya sea como ácido carboxílico o como su amida.
En 1937 se reconoció que esta sustancia formaba parte del grupo vitamínico 8,
y que era un factor que protegía de la pelagra.
Pelagra, uno de los estados de salud resultante por la falta o deficiencia
en consumo de niacina, es una condición dermatológica de agrietamiento,
cambio de pigmentación y algunas veces lesiones que ocurren en la exposición
a la luz solar. Adiciona/mente a la pelagra algunos individuos manifiestan mal
funcionamiento en el tubo gastrointestinal y sistema nervioso, también se
presentan síntomas como la anemia, ansiedad depresión y fatiga
La niacina constituye la parte activa de las coenzimas NAO y NADP,
estas dos coenzimas, son esenciales para la utilización de energía metabólica
de los alimentos, llevando a cabo el transporte de hidrógeno, por lo que
promueve las oxidaciones hísticas. Se encuentra en todos los tejidos,
particularmente en el hígado, los riñones, el corazón, el cerebro y los músculos.
La niacina está envuelta en reacciones que generan energía en los tejidos por
conversión bioquímica de los carbohidratos, grasas y proteínas.
La niacina es fundamental para el crecimiento, ya que propicia la síntesis de
hormonas y debido a estas funciones los alimentos que deben fortificarse son
cereales de maíz y cereales integrales para desayuno, harinas de trigo, pan,
harina, pastas, sémola y arroz. La ración diaria recomendada es de 13 a 18
mg de Niacina en una dieta para adultos.
Nestlé fabrica alimentos para niños tales como Cereales para papilla, Cereales
para bebidas, leches en polvo y bebidas lácteas. Estos productos son
enriquecidos con vitaminas y debe verificarse que los valores que se declaran
en las etiquetas sean los valores efectivos que se encuentran en el contenido.
El Laboratorio Regional de Aseguramiento de Calidad Nestlé para Centro
América y El Caribe, cuenta con una serie de metodologías para el análisis de
contenidos vitamínicos y con el objeto de optimizarlas se implementó la
Determinación de Niacina por HPLC fase reversa, ya que oficialmente se
contaba con un método microbiológico, que como es sabido requiere de varios
días para analizar unas pocas muestras y su repetibilidad es muy variable, a
diferencia de la cuantificación por HPLC.

14
3. ANTECEDENTES
3.1 Metodología de Análisis para Niacina.

El desarrollo de métodos microbiológicos para la determinación de

Niacina está basado en el crecimiento de bacterias en presencia de Niacina.
Usualmente, estos métodos son un poco sensibles y cuantifican compuestos
activos de la Níacina más específicamente que los métodos químicos. Por otro
lado, el método microbiológico puede estar sujeto a error por sustancias que
estimulan el crecimiento bacteriano o loinhiben. Este método tiende a dar
resultados ambiguos por /a presencia de estas sustancias o materiales.
Se ha observado generalmente que el método microbiológico es aplicable a
una variedad mayor de muestras sin modificación que los métodos químicos. El
método microbiológico está particularmente bien adaptado para
determinaciones simultáneas de muchas muestras y por esta razón se emplea
como método de rutina para el control de productos. No es un método bueno
para análisis ocasionales debido a que los organismos de prueba requieren
frecuentemente de atención especial y las soluciones stock utilizadas para el
análisis no pueden guardarse indefinidamente.
Los métodos químicos requieren de menor número de reactivos, son
más simples en cuanto a su preparación. Los procedimientos químicos son
considerablemente menos sensibles que el microbiológico lo que los hace más
difíciles de aplicar como métodos de análisis para materiales con pequeñas
cantidades de Niacina. El método químico es también menos especifico que el
microbiológico siendo influenciado por materiales biológica mente inactivos que
se presentan en las muestras naturalmente o durante la extracción. Con dichos
materia/es algunas veces es necesario usar procedimientos de extracción,
purificación y determinaciones en blanco. Por otro lado, cuando es aplicable,
tos métodos químicos son relativamente rápidos y proveen de valores o datos
para comparación con los obtenidos microbiológicamente. Sin embargo,
algunas veces el método químico da resultados más altos que los
proporcionados microbiológicamente. Algunos investigadores han encontrado
discrepancias entre los dos métodos, especialmente para aquellos extractos
altamente pigmentados.

15
 3.2 Clasificación de Métodos
A. Métodos Analíticos AOAC
B. Métodos Analíticos Nestlé

A.1 Métodos Químicos AOAC

• 961.14 Método Colorimétrico: Niacina y Niacinamida en Medicamentos,

Alimentos y Alimento para animales.

• 968.32 Método Espectrofotométrico: Niacinamida en Preparaciones

Multivítaminadas.

• 975.41 Método Automatizado: Niacina y Niacinamida en Cereales.

• 981.16 Método Automatizado: Niacina y Niacinamida en Alimentos,

Medicamentos y Alimento para animales.

A.2 Métodos Microbiológico AOAC:

• 685.34 Método Turbidimétrico: Niacina y niacinamida en fórmulas lácteas

infantiles.

• No. 944.13 Niacina y Niacinamida en preparaciones vitamínicas.

8.1 Métodos Químicos Nestlé

• HPLC fase reversa, detección por UV.

• HPLC fase reversa, reactor fotoquímico detección por fluorescencia.

8.2 Método Microbiológico Nestlé

• Método microbiológico: Lactobacillus plantarum.

16
 3.3 Principio general para la metodología de Análisis
3.3.1 Tratamiento de muestras
A. Tratamiento y principio para el Método Químico
B. Tratamiento y principio para el Método Microbiológico

A.1 Principio del Método Químico AOAC

El ácido Nicotínico y Nicotinamida son extraídos de cereales con Ca(OHh .
Los grupos piridina son acoplados con 8rCN que reaccionan después con
ácido sulfanítico para formar un complejo amarillo detectada a 470 nm
El mismo principio se aplica en los métodos No. 961.14, 975.41,981.16

A.2 Principio y Tratamiento para el Método HPLC Nestlé

Extracción por hidrólisis de la vitamina a 50°C por sonificación durante 10
minoAcidificación a pH 4.5, filtración y lectura del extracto.

8.1 Principio y Tratamiento para Método Microbiológico AOAC

El desarrollo del método microbiológico se basa en el crecimiento de

microorganismos tal como el Lactobacillus plantarum, a base de niacina o
compuesto similar. La extracción de la vitamina se lleva a cabo en
condiciones ácidas por hidrólisis a 1200 e. El extracto es filtrado después del
ajuste a pH 4.6 Se adiciona el extracto al medio sin vitamina para ser medido,
se esteriliza, inocula con L plantarum, se incuba posteriormente a 37 °e y se
mide el crecimiento por turbidimetrfa.

17
4. OBJETIVOS

• Validar un método para la cuantiñcación de Niacina en cereales y

lácteos por HPLC fase reversa

• Determinar la aceptabilidad o precisión del método

• Optimizar la técnica de extracción de ruacína en las muestras.

• Estimar el numero de muestras promedio que pueden ser analizadas

por sesión de laboratorio.

5. JUSTIFICACiÓN

En la fábrica NesUé de Antigua Guatemala. se cuenta con la

producción de cereales infantiles, por lo que su fortificación con micro
nutrientes y/o vitaminas debe ser controlada como parte del
aseguramiento de calidad. Para ello es indispensable que dentro de tos
laboratorios de análisis de fábrica y sobre todo el Laboratorio Regional
de Aseguramiento de Calidad (LRAC) , se cuente con la metodoíoqía
adecuada para la determinación de vitaminas. Portal motivo se validará
el método para la determinación de Niacina en cereales y lácteos por
HPLC en fase reversa, ya que el LRAC no cuenta con un método de
rutina para el monitoreo del contenido de Niacina en dichos productos.

18
6. ASPECTOS METODOLOGJCQS:
6.1 Universo del Trabajo:

• Niacina.

6.2 Recursos Humanos:

• Investigador: Estudiante de EPS

• Asesor: Ing. Ruth oreüana.

6.3Recursos Físicos:

• laboratorio Regional Aseguramiento Calidad NesUé, área

de Fisicoquímica, sección de HPlC.

6.4 Recursos Materiales:

6.4.1Material y Equipo de laboratorio:

• Balanza Analítica 0.001 g, Mettler Toledo PR 503

• Bomba GE Motors & Industrial Motors SKH33DN16HX
• Horno Heraeus, T6 Serie No. 96107296
• Plancha agitador magnético, Variomag electronicrührer
Multipoint HP.
• Sistema de filtración para membrana
• Ultrasonic Bath, Branson 2210
• Filtro de membrana celulosa 0.45 um, 15mm,
Whatman
• Filtro de membrana inorgánica, Anotop 10, 0.20 um,
Whatman
• Filtro de membrana poliamida 0.45 um, 47 mrn,
Sartorius 11806-47-N
• Septum 8 mrn, PTEF, 0.25 mm, Merck 18086

6.4.2 Cristalería:

• Balón volumétrico ámbar, con tapón NS 14/23, clase

A, 100 ml
• Balón volumétrico vidrio claro, con tapón NS 24/29,
clase A, 1000 ml
• Beaker de vidrio 1000 ml
• 8ealeer de vidrio 50 ml
• Frascos ámbar de 4 L.
• Pipeta Volumétrica, clase B, 5 ml
• Pípeta Volumétrica, una marca, clase AS, 1 ml
• Pipeta Volumétrica, una marca, clase AS, 10 ml
• Pipeta Volumétrica, una marca, clase AS, 5 ml
• Probeta de vidrio 100 ml

19
 • Probeta plástica 50 ml,
• Viales ámbar 1.5 ml con tapón rosca

6.4.3 Reactivos:

• Ácido Clorhídrico 37% GR, Merck HX0603.3

• Ácido Nicotínico, Merck 1.06817
• Hidróxido de Sodio en lentejas GR, Merck 1.06498
• Isopropanol, Merck Lichrosolv 1.01040
• Metanol, Merck EM OmnlSoiv MX0488-1
• Nicotinamida, Merck 1.06818
• Sal sódica del Ácido 1-0ctansulfónico, Merck
LiChropur 1.18307
• Taka-Diastasa (Aspergillus oryzae), SERVA 35740

6.5 Procedimiento:

6.5.1 Preparación de Reactivos:

• Ácido Clorhídrico, solución 1 N HCI:

En un balón volumétrico de 1000 ml conteniendo 500 ml de
agua, agregar lentamente 82ml de HCI al 37%. Enfriar a
temperatura ambiente y aforar.

• Hidróxido de Sodio, solución 1N NaOH:

En un balón voJumétrico de 1000 ml introducir 40 g de hidróxido
de sodio en escamas. Disolver en 400 ml de agua. Enfriary llevar
al aforo con agua.

• Solución 0.1% Ácido octansulfónico:

Filtrar 2.0 litros de agua ultra pura por membrana de 0.45 um,
Pesar 1.00 g de sal sódica de ácido octansulfónico, disolver en un
balón volumétrico de 1000 ml y llevar al aforo con el agua ultra
pura filtrada.
Transferir la solución anterior a un beaker de 1000 ml y ajustar
el pH de la solución a 2.5 con HCI 1 N. (Aproximadamente 1.5 ml)
El agua restante, degasificarla por 15 minoen ultrasonido y vacío,
quardarla para el lavado de la columna.

• Solventes para lavado de columna:

Filtrar 500 ml de Metanol por membrana de 0.45 um y degasificar

20
por 15 mino en ultrasonido y vacío. Agua ultra pura filtrada y
degasificada.

• Fase Móvil:
En un balón volumétrtco de 1000 mL mezclar 70 mL de Metanol y
20 mL de Isopropanol; llevar al aforo con la solución de ácido
octansulfónico 0.1%, pH= 2.5.
Mezclar bien y degasificar por 15 mino en ultrasonido con baño de
agua y conección de vacío.

6.5.2 Soluciones Estándar de Vitamina PP: 1000 j.1g/mL:

• Solución Stock de Ácido Nicotínico (NA) y Nicotinamida (NM)

En un pesa muestras pesar a la vez, 100.0 mg de Ácido Nicotínico y
100.0 mg de Nicotinamida, disolver en un balón volumétrico de 100 mL
con agua ultra pura. Sonificar por 3 rmn, y llevar al aforo.

• Solución Intermedia NAlNM 100 ¡.¡,g/m/:

En un balón de 100 mL, pipetear 10.0 mL de la solución Stock y
llevar al aforo con agua ultra pura.

• Solución Analítica NA/NM 5 f-Lg/mL

En un balón volumétrico de 100 mL, pipetear 5.0 mL de solución
intermedia y llevar al aforo con agua ultra pura.

6.5.3 Tratamiento de la muestra:

• Productos sin almidón o maltodextrina:

a) En un balón volumétrico de 100 mL, conteniendo un agitador

magnético, pesar por medio de un embudo, 10 9 de muestra
sólida ó 20 g de muestra líquida.
b) Adicionar 50 mL de agua ultra pura a 60 +1- 2 o c.

21
e) Mezcl~r bien, y colocar los balones en una plancha magnética
1-2 mino
d} llevar los balones al baño de ultrasonido por 10 mino

• Productos con almidón o maltodextrina:

a) En un balón volumétrico de 100 ml, por medio de un embudo,

cercanos a 0.001 g pesar directamente 10 g de muestra.
b} Adicionar 1.0 g de Taka- diastasa a la porción de muestra.
e) Adicionar 50 ml de agua a 60 +1- 2O(J
C.
d) Tapar el balón y dejar por 30 min en horno a 42° C.
e) Agitar bien por un minuto manualmente o en mesa agitadora.
f} Colocar en baño de ultrasonido por 10 minutos.

6.5.4 Acidificación:

Dejar enfriar las muestras a temperatura ambiente.

Ajustar el pH a 4.5 con HCI 1N.
Normalmente el pH se encuentra alrededor de 6.5-7.5 en
muestras de cereales o lácteos.

6.5.5 Filtración:

llevar al aforo de 100.0 ml la muestra con agua ultra pura.

Se recomienda, centrifugar por 20 minoa 4000RPM.
Mezclar y filtrar la solución por papel filtro 2V Whatman.
Pasar el filtrado por membrana 0.45 um a un vial de 1. 5 ml
ámbar, ésta solución puede ser inyectada en el HPlC.

6.5.6 Condiciones Cromatográficas:

Columna: Purospher RP-18, 5 um, 250 x 4.6

Volumen de Inyección: 20 ~l
Flujo: 0.8 ml/min.
Detector: UV 262 nm

22
Tiempo de Retención: Ácido Nicotínico 6-8 minoventana 5%
Nicotinamida 18-20 minoventana 5%
Tiempo de Corrida: 25 mino para estándar
45 mín. para muestras.

6.5.6 Programa Lavado de columna:

TIEMPO FASE MOVll AGUA METANOl

0.0 100 O O
5.0 100 O O
10.0 O 100 O
70.0 O 100 O
75.0 O O 100
145.0 O O 100

6.6 Diseño de la Investigación

Los siguientes parámetros fueron tomados como referencia para

establecer las condiciones reales para poder validar el método de
cuantificación por HPLC, dando una guía para la implementación del
mismo.

6.6.1 Parámetros Estadísticos

• Repetibilidad: Las determinaciones por duplicado pueden tener

una diferencia o variabilidad igualo menor al 10 %.

• Repetibilidad del Método: El número de muestras a analizar

como mínimo serán 20 por duplicado para poder establecer la
desviación estándar.

• Sensibilidad del Método: se realizaron recuperaciones de

Niacina en tres clases de matrices; muestras lácteas
descremadas, base para bebidas y cereal de trigo sin adición de
vitaminas.

•• Recuperaciones: Las adiciones de Ácido Nicotínico y

Nicotinamida a matrices fueron de 0.5, 1.0 Y 2.0 veces la

23
 concentración de Niacina declarada en el producto a analizar,
llevadas a cabo por duplicado.

6.6.2 Parámetros Cromatográficos

• Precisión:

Antes de la secuencia, inyectar continuamente 5 veces la

solución estándar.
El porcentaje relativo de desviación están dar debe calcularse como
sigue:

(% RSD) = De~wiación Estancar x 100

Promedio

Criterio de aceptación: debe ser menor al 1 % para tiempo de retención

y áreas o altura de picos.

• Platos Teóricos:

Criterio de aceptación
Ácido Nicotínico: debe ser mayor de 5000
Nicofinamida : debe ser mayor de 2000

• Resolución:

Criterio de aceptación: debe ser mayor a 1.5

• Simetría del pico:

Criterio de aoeptación: debe ser menor a 1.5

24
7. RESULTADOS

7.1 Platos Teóricos de la Columna Cromatográfica.

Estandar No. Platos Teóricos

USP
Acido Nícotíníco 4090
Nicotinamida 7599

7.2 Tiempo de Retención para el Ácido Nicotinico y

Nicotinamida.

Estándar Tiempo ce
Retención min.
Acido Nicotínico 6.25
Nicotinamida 17.91

7.3 Rango y linealidad

Rango Coeficiente de Correlación

R2
NA 0.5~¡,¡,g/mL-10.30 ¡,¡,g/mL 0.9978
NM 0.5.1¡,¡,g/mL-10.50 ¡,¡,g/mL 0.9971

7.4 Límite de Detección y Límite de Cuantificación

7.5 Recuperaciones

Recuperación en muestras de tipo % de Recuperación

Acido Nicotínico Nicotinamida Acido Nicotinamida
Nicotínico
Leche en Polvo Leche en Polvo
95 94
Descremada Descremada
Cereal para Cereal para
95 97
Papilla Papilla
Cereal para Cereal para
99 88
Bebida Bebida

25
7.6 Determinación de Niacina en Muestras de Referencia

Valor de Valor %
Muestra Referencia Analizado Desviado
rngf100g rngf100 9
DDP# 1-1999 6.51 Rango 0.90 6.81 4.6
DDP # 1-1999 6.51 Rango 0.90 6.89 5.8
DDP# 1-1999 6.51 Rango 0.90 6.60 1.4
DOP # 2-1999 15.05 Rango 1.30 15.20 1.0

7.7 Promedio de la Desviación Estándar del Método en

muestras por duplicado.

Número de
muestras Desviación % de Repetibilidad
analizadas por Estandar promedio por duplicados
duplicado Sr r
n
43 0.27 0.76

n: numero de muestras
Sr: desviación estandar
r: repetibilidad

26
8. DISCUSiÓNDE RESULTADOS

Los resultados expuestos anteriormente, demuestran que la

validación del método "Determinación de Niacina por HPLC" cumplió los
parámetros estadísticos y requerimientos analíticos, planteados en la
sección de diseño para esta investigación.
La columna cromatográfica empleada, del tipo RP-18, utilizada
con anterioridad al inicio de la investigación , cumplió con el número de platos
teóricos requeridos para la cuantificación de Ácido Nicotínico y Nicotinamida,
aunque hay que señalar que, debido al tipo de extracción del vitámero en
las muestras, que es bastante sencilla, no es lo suficientemente efectiva en
cuanto al grado de impurezas que quedan retenidas en la columna,
(detectándose presiones arriba de lo normal en la bomba del HPLC). En la
tabla No. 6 de Anexos puede observarse que los tiempos de retención de las
muestras de "cereal para bebidas" variaron un minuto respecto de los valores
de referencia expuestos en la tabla 7.2 de Resultados debiéndose a las
impurezas retenidas en la columna y al inadecuado lavado de la columna.
los tiempos de retención a los que son detectados tanto el Ácido Nicotínico
como la Nicotinamida , son analíticamente aceptables, ya que entre sí hay un
espacio de 10 mino aproximadamente, pudiendo de esta manera establecer
como dato cromatográfico las áreas de los picos y no sus alturas, pues
ambos picos están bien separados.
la disponibilidad de muestras de referencia (DDP) hizo posible
la optimización del método, estableciéndose los porcentajes de desviación ó
posibles errores en la determinación , ya que por norma los análísis son
llevados a cabo por duplicado y puede establecerse la precisión del analista,
la buena práctica de laboratorio y el control del aparato, en este caso del
inyector, columna o desperfectos en la bomba del HPlC.
la precisión del método se estableció a partir de las
determinaciones por duplicado de 43 muestras, y aunque los parámetros
señalan que la repetibilidad o desviación entre duplicados debe ser igual ó
menor del 10 % ,los resultados expuestos en la tabla NO.9 (Anexos)
demuestran que el promedio de las muestras analizadas por duplicado está
en un 4.8% como repetibilidad entre duplicados, demostrando que el método
es bastante preciso, en cuanto a la extracción de la Niacina en las muestras
de diferente matriz así como en relación a las condiciones de manejo del
HPLC.

27
 Los ensayos de recuperación se realizaron en tres diferentes
matrices, siendo éstas, cereal de trigo sin adición de vitaminas, cereal de
maíz para be,bidas con adición de vitaminas y leche descremada sin adición

de vitaminas. lo ideal hubiese sido contar con las matrices sin adición de
vitaminas para poder establecer el comportamiento del Ácido Nicotínico y la
nicotinamida durante el tratamiento o extracción de la vitamina en las

muestras. A pesar de ello, se llevaron a cabo simultáneamente

determinaciones en "blanco" para detectar la presencia y cantidad de Niacina

en los reactivos, crtstatería o en sí en la materia prima. El porcentaje de
recuperación más bajo se detectó en la materia prima con adición de
vitaminas (Cereal para bebidas) , ya que se emplea para la fortificación

Nicotinamida. la recuperación de ácido nicotínico dio mejores resultados

(96..101%) que la recuperación de nicotina mida (82.94%) , esto pudo deberse
a una mala homogenización de esta última sustancia en la muestra, a una
posible hidrólisis de nicotinamida a ácido nicotínico, o a las proporciones en

sí adicionadas no ideales para el tipo de recuperación realizada.

El limite de detección se estableció sabiendo que es la

concentración a la que una sustancia produce una relación señal ruido de 3
ya que el limite de detección considera ambas, la señal de amplitud yel ruido
de la línea base, siendo entonces la concentración más baja que pueda
detectarse claramente diferente de cero, que resultó ser de 0.01 mg/100 9
para el Ácido Nicotínico y de 0.10 mg/100 9 para la Nicotinamida. Para el
limite de cuantificación se empleó una relación señal ruido mayor de 10,
siendo esta señal de detección más sensíbíe, obteniéndose para el Ácido

Nicotínico 0.10 mg/100 9 y para la Nicotinamida 0.25 mg/100 g. Tanto los

límites de detección como las de cuantificación son bastante sensibles y

adecuados para el tipo de muestras a analizar ya que éstas están por arriba

de las establecidas por el método, en un rango de 2.5-15 mg/100 g.

28
9. CONCLUSIONES

• El método" Determinación de Niacina por HPlC" quedó validado según

los parámetros que NESTEC declara como de referencia.

• El método puede emplearse para la cuantificación de Niacina en

muestras de cereales y lácteos.

• El límite de cuantificación del método es de 0.10 mg/100 9 para Ácido

Nicotínico y 0.25 mg/100g para Nicotinamida.

• La cantidad de Niacina es reportada como la suma de Ácido Nicotínico

y Nicotinamida presentes en la muestra.

• Se estableció que el método tiene una precisión o repetibilidad del

0.76%

• los porcentajes de recuperación de Niacina tanto en muestras de

lácteos como de cereales es de un 95%.

29
10. RECOMENDACIONES

• Uevar a cabo un método de limpieza mas eficiente para la columna

cromatográfica.

• Comprobar si la calidad del filtrado se mejora utilizando un poro más

pequeño de papel filtro y establecer si se retiene mayor cantidad de
impurezas de la muestra, para no cargar demasiado la columna
cromatográfica.

• En la medida de lo posible, correr un Blanco de la muestra de cereal

para papilla y cereal para bebidas sin adición de vitaminas como ensayo
de recuperación y cuantificación de Niacina, ya que por ser cereales
pueden contener aproximadamente 1mg/100g de muestra.

11. REFERENCIAS

1. Carpentener D., Sullivan D., Methods of Análisis for Nutrition Labelling.,

AOAC IntemationaI1993., pags. 131-132.

2. Freed., Methods of Vitamin Assay., 3th Edition., Interscience., John

Wi1tey & Sons., NY 1966 Pags. 171-187.

3. LR-99.211, Determination of Niacin by HPLC-UV, Singapore 1996.

4. U-OO.930, Aseguramiento de la Calidad del trabajo Analítico y plan de

Auto Control., LRAC Nestlé Antigua Guatemala.

5. U-OO.925, Calculo y Empleo de Valores Analíticos de Precisión

Analítica., LRAC Nestlé Antigua Guatemala

6. Official Methods of Analysis,., Vitamins and Other Nutrients, AOAC

1995., Chapter 45, pags. 12-16.

30
 IV. ANEXOS

Tabla No. 1 Curva de calibración para estándares de Ácido

Nicotínico y Nicotinamida.

Concentración Concentración
Estandar
Ácido Nicotínico Nicotinamida
No.
¡J.g/mL ¡J.g/mL
1 0.52 0.51
2 1.04 1.02
3 2.08 2.04
4 4.16 4.08
5 5.15 5.25
6 6.24 6.12
7 8.32 8.16
8 10.30 10.50

R2 0.9978 R2 0.9971

Tabla No. 2 Concentración de Estándares para el Límite de

Cuantificación y límite de Detección.

Estandar Concentración Concentración

No. Ácido Señal Nicotinamida Señal
Nicotfníco fRuido J.l.Q/mL IRuido
J-Lg/mL
1 0.01 3.21* 0.05 2.22*
2 0.02 3.74* 0.10 4.58*
3 0.05 9.15* 0.25 12.53
4 0.10 46.58 0.50 25.47
5 0.50 134.19 2.50 126.47
6 1.00 338.89 5.00 250.91

• Concentración que no puede ser cuantificada

señalada con * .
• La Señal/Ruido debe ser por lo menos igualo
mayor a 10 para poder ser cuantificada.

31
 Tabla NO.3 Recuperación de Niacina en muestras de "cereal
papilla"stn vitaminas.

ACIDO NICOTlNICO NICOTINAMIDA

% de %de
(NA) (NM)
MUESTRA Recuperació Recuperaci6
j-Lg/m j-Lg/m
tR AREA tR AREA nNA nNM
L L
Estandar 1 6.17 80497 2.06 17.32 66775 2.10
Estandar 2 6.23 214307 5.15 17.44 186258 5.25
Estandar 3 17.44 386149 10.5
6.21 439335 10.30
O
Es1andar4 21.0
6.22 867370 20.60 17.49 771863
O
Recuperación 1 A 6.18 66154 1.44 17.29 61448 1.54
Recuperación 1 B 6.19 66315 1.46 17.33 65452 1.66
PROMEDIOR1 6.18 66234 1.45 17.31 63450 1.60 94 101
Recuperación 2 A 6.23 128345 2.80 17.34 116805 2.92
Recuperación 2 8 6.19 127910 2.98 17.30 112061 3.00
PROMEDIOR2 6.21 128128 2.89 17.32 114433 2.96 94 94
Recuperación 3 A 6.18 213518 4.82 17.23 186365 4.84
Recuperación 3 B 6.18 212311 4.80 17.19 188043 4.89
PROMEDIOR3 6.18 212915 4.81 17.21 187204 4.86 93 93
Recuperacíón 4 A 10.0
6.17 427143 9.62 17.12 389218
8
Recuperación 4 B 10.0
6.15 426554 9.66 17.06 387330
9
PROMEDIOR4 10.0
6.16 426849 ~.64 17.09 388274 94 96
9
Recuperación 5 A 21.1
6.16 873130 20.16 17.08 795251
1
Recuperación 5 B 21.0
6.18 943130 21.44 17.06 803606
5
PROMEDIO R5 21.0
6.17 912849 20.68 17.04 797423 100 100
8

Tabla No.4 Valores Teóricos de Niacina en Recuperaciones de

"Cereal Papilla"

Recuperación Acido Nicotínico Nicotinamida

No. (AN) uq/rnl, (NM) j-LQ/mL
1 1.54 1.58
2 3.09 3.15
3 5.15 5.20
4 10.30 10.50
5 20.60 21.00

32
Tabla No. 5 Recuperación de Niacina en muestras de "Cereal para bebidas" .

MUESTRA ACIOO N1COTIN1CO NICOTINAMIDA %de %de

(AC) (NM) Recuperación Recuperación
iR Area j..tQ/mL iR Are a flg/mL NA NM
Estandar 1 7.91 186129 4.24 20.51 177369 4.48
Estandar 2 7.92 280011 6.36 20.48 348184 6.72
Estandar 3 7.90 361883 8.48 20.45 359940 8.96
8lanco A 7.92 10705 0.217 20.64 137237 3.83
Blanco 8 7.90 10570 0.209 20.60 146277 3.98
Promedio {.le
7.93 10638 0.213 20.62 141775 3.91
Blancos
Recuperación
7.91 57392 1.28 20.59 181767 4.51
1A
Recuperación 4.47
7.95 57011 1.26 20.61 182435
18
Promedio R 1 7.93 57201 1.27 20.60 182101 4.49 100 89
Recuperación
7.92 150234 3.28 20.57 320367 5.95
2A
Recuperación
7.93 150733 3.26 20.59 321958 5.92
28
Promedío R2 7.93 150487 3.27 20.58 321163 5.94 96 82
Recuperación
7.91 244885 5.60 20.55 367974 8.94
3A
Recuperación
7.92 243393 5.58 20.55 371411 9.04
38
Promedio R3 7.92 244139 5.59 20.55 369693 8.99 101 94

Tabla No. 6 Valores Teóricos de Niacina en Recuperaciones de Cereal para

bebidas.

Acido Nicotínico Nicotinamida

Recuperación + +
No. blanco (AN) blanco (NM)
flg/mL flg/mL
1 1.27 5.03
2 3.39 7.27
3 5.51 9.51

33
 Tabla No. 7 Recuperación de Niacina en muestras de "leche en
polvo Descremada" sin vitaminas.

ACIDO NICOTINICO NICOTINAMIDA

%de %de
(NA) (NM)
MUESTRA Recuperación Recuperación
}-Lg/m }-Lg/m
tR AREA tR AREA NA NM
L L
Estandar 1 8.19 44896 1.00 21.61 43440 1.02
Estandar2 8.22 219163 5.01 21.53 214795 5.10
Estandar 3 102
8.13 441253 10.03 21.37 432595
O
Estandar4 20.4
8.15 877641 20.06 21.45 857956
O
Recuperación 1A 8.15 34778 0.78 21.35 80900 1.86
Recuperación 1B 8.17 34523 0.76 21.33 81646 1.84
PROMEDIOR1 8.16 34651 0.77 21.34 81273 1.85 77 I 99
Recuperación 2 A 8.10 139680 3.02 21.16 162491 3.63
Recuperación 2 B 8.08 138750 3.14 21.10 158943 3.72
PROMEDIOR2 8.09 139215 3.08 21.13 160717 3.68 102 I 94
Recuperación 3A 7.99 221061 4.92 20.79 233830 5.40
Recuperación 3 B 7.96 214469 4.57 20.67 229113 5.06
PROMEDIOR3 7.98 217765 4.75 20.73 231471 5.23 95 I 88
Recuperación 4 A 10.6
7.93 451698 10.06 20.55 459882
4
Recuperación 4 B 10.0
7.89 427996 9.56 20.43 433478
6
PROMEDIOR4 10.3

Recuperación 5A
7.91 439847 9.81 20.49 446680
5
19.4
98
I 94

8.02 763437 18.36 20.65 742305

3
Recuperación 5 B 20.5
8.02 892543 19.72 20.63 858261
7
PROMEDIOR5 20.0
8.02 I 827990
i
19.04 20.64 800283
O
103
I 94

Tabla NO.8 Valores Teóricos de Niacina en Recuperaciones de "Leche

en Polvo Descremada"

Nicotinamida
Recuperación Ácido Nicotínico +
No. (AN) ¡.tg/mL blanco (NM)
i-LQ/mL
1 1.00 1.87
2 3.01 3.91
3 5.01 5.95
4 10.03 11.05
5 20.06 2125

34
 GRAFICA No. 1

TIEMPOS DE RETENCION

ACIOO N1COTíN1CO 6.99 mín.

NICOTINAMIDA 17.91 min.

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35
GRAFICA No. 2

Cromatograma Limites de Detección

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36
 GRAFICA No. 3

CURVAS DE CALIBRACIÓN

1. CUNa Ácido Nicotinico

2. CUNa Nicotinamida

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.,.'~" 5 "'~~;,;ZJ.~~~.
:* ..~.' ~.
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..•.. ;.
, .~
"

37
 Tabla No. 9
Determinaciones de Niacina por Duplicado

DUPLICADO A mg DUPLICADO B
Desviación Estandar
Niacina/100 9 mg Níacína/100g
Sr
Muestra Muestra
5.46 5.76 0.21
11.21 11.92 0.50
5.60 4.98 0.44
5.32 4.54 0.55
14.32 13.44 0.62
14.73 14.70 0.02
4,38 4.38 0.00
13.07 13.83 0.54
4.26 4.08 0.13
5.00 4.84 0.11
12.74 14.98 1.58
13.61 12.93 0.48
4.23 4.18 0.04
4.24 4.10 0.10
13.13 14.77 1.16
12.77 13.42 0.46
13.55 13.24 0.22
4.85 5.17 0.23
3.14 3,13 0.01
2.89 3.08 0.13
3.14 3.19 0.04
2.81 2.91 0.07
3.00 3.18 0.13
7.55 7.26 0.21
9.92 9.95 0.02
6.56 6.63 0.05
17.54 16.96 0.41
2.58 2.22 0.25
2.85 2.80 0.04
4.59 4.79 0.14
4.96 5.28 0.23
5.50 5.54 0.03
5.58 5.93 0.25
9.36 9.12 0.17
8.84 8.94 0.07
1.99 1.88 0.08
2.43 2.39 0.03
6.73 6.89 0.11
15.35 15.06 0.21
6.89 6.90 0.01
6.76 6.55 0.15
7.41 6.60 0.57
Promedio Desviación
Estandar = 0.26
RepetibiJidad = 0.73
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REGION AMERICA CENTRAL

NESTLE GUATEMALA, SA LABORA TORY BOOK - 1998
EQUIPOS PRINCIPALES Y CARACTERISTICAS

• AREA FISICOQUIMICO:

Absorción Atómica:

_____________
~9~!~_º. . ~~~~_T~~'_~l~~~~_~_~I~~~~~!_:~~; LJI~~!~ºº_~_~ :
Espectrofotómetro de Posee un monocromador de alta dispersión y: Sodio, Potasio,:
Absorción Atómica, Aanalyst d~le grating, doble haz, torreta para 6: Hierro, Calcio,:
300 de Perkin Elmer tarnparas, automuestreador con dilutor y control Magnesio
automático de longitudes de onda, ancho de slit
y alineación de lámparas por medio del software
AAWinLab. Puede realizar las siguientes
: técnicas de muestreo: ñarna, generación de
___________________________________
L!1_i~~~g~'i _~g~_~_~~R~~f~~· > :

Generación de Hidruros : Contiene una bomba peristáltica y una válvula : Arsénico, :

FIAS 100 de Perkin Elmer : de 4 puertos para transportar y mezclar los: Mercurio, Plomo, :
: reactivos y muestra. Tiene conectado un: Cadmio,
: automuestreador ASgO y puede ser programado : Aluminio .
____________________________________
:_P..~~
_~ ~i_I!!:-~~~ .: :
Microondas para : Multiwave, para análisis elemental a nivel trazas: Digestión de :
preparación de muestras : donde se requieren efectos de rnatriz/rninimos. : muestras para:
Paar Physica I PE : Posee un rotor de 6 posiciones, sensor infrarrojo : análisis de trazas :
-: de temperatura y un control interno de presión. :
: Con computadora integrada, programas de:
: descomposición establecidos y almacena hasta :
: 20 programas diferentes. Fuente de poder de :
: 230V, 50 Hz, 2900 VA. Microondas de 1000 W, :
: 2450 Hz. Velocidad de rotor de 5 rpm y rango :
:
-----------------------------------j-~
Campanas de extracción; :
-~º-~-~~-~_~_~¿.
de temperaura de O- 300°C. Dimensiones 64.5 :
(I-~- ----__-__---------- --__--- 1------
Dimensiones: 180x90x252 cm (1 x a x h). Tiene: Extracciones,
-__- ):
Burdinola ST 1800 : los siguientes servicios: 2 grifos de agua, 4: evaporaciones e:
: bases eléctricas, iluminación interior, soportes y : hidrólisis
: palomillas de polietileno para montaje de:
: columnas de destilación. :

Cromatografia de Gases:

_____________
~9~!~_º ~~~~J~~I_~I'_~_~~
_~_I3J~~~~~!_:~~ ~I'_~!~ºº _~_~ :
Cromatógrafo de Gases, Sistema formado por un cromatógrafo de gases Principios activos :
Hewlett Packard 6890 con doble puerto de inyección, automuestreador de pesticidas
con doble torreta, y dos detectores de captura de organoclorados
electrones (ECD). Utiliza una Chemstation para
su control, programación, almacenamiento y
____________________________________ ~_~!g~:
!l:l_é!I}~j~5~~_ _
Cromatógrafo de Gases, Sistema formado por un cromatógrafo de gases Principios activos
Hewlett Packard 6890 con doble puerto de inyección, automuestreador de pesticidas
con doble torreta, un detector de nitrógeno y organofosforados
fósforo (NPD) , un detector de ionización de
______________________________________J~_Iºt__
!1_é!~~ __ ~~!f~I_
~!~1!~9 ~_~':'l ~~~_~?!':'l!~<?!l P_~~':'l ~_~
_~_~i~<?? :

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~Nestle
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: control, programación, almacenamiento y: grasos libres

Whatman 76-94-220
-r : manejo de datos.

: por medio de un sistema de filtración, oxidación:

:
-Generador- de -Ñitr6g-eñ-ü: --- - Prodüce --ñftr6ge-ño- -de - -a~a-j)üreza --(99.9995%Y ~---Prodü-ctor ----del
gas acarreador
: catalítica y cambios de presión. Capaz de: para los GC
: producir 0.9 Itlmin de N2 Trabaja a:
: 120VAC/230VAC, 50/60 Hz, 700 watts.:
___________________________________
i.º~'!!~_f!~~C?~_t:?~
_~~_~~_1 ~t
~~~_~!"!1J~~ _~_~_ i . _
Cromatografia'Líquida de Alta Resolución:

[~~~~~~~~~~~~~~9~[~º~~~~~~~~~~~~L~~~~~~f~~~i~~($i[~~~~~~)N
: SJstema de Cromatografia : Sistema compuesto por: 1 bomba L-700, 1: Vitaminas
: ~iqLida de Alta Resolución, : detector UV L-7400, 1 auto-muestrador L-7200, 1 : "A":E", "B6",
: LaChrom de Merck-Hitachi : detector de fluorescencia L-7480, conectado por: Niacina,
: 1interfase 0-700 al software Multi-HSM Manager: Aflatoxinas
~- - - - - - - __- __- - - ,,3,--- LR~@_~~!~~~cJ~~99.~~~~~~~~_y. ~~!9~·
!"!1_~~_t:t~_~~_ ~ o:
: Si§tema de Cromatoqraña- : Sistema compuesto por: 1 bomba L-700, 1: Vitaminas "Bl" y :
:6gJida de Alta Resolución, : detector UV L-7400, 1 auto-muestrador L-7200, 1 : "B2" y la .
: 'táChrom de Merck-Hitachi : detector de fluorescencia L-7480, 1 colector de : cuantificación de
: fracciones L-7650, conectado por 1 interfase 0- : vitamina "03"
: 700 al software Multi-HSM Manager para control, :
:. ~ '0, .:_R~~g!~,!!~~i~1)_y_ ~~I)~j~_ ~~_ ~_~~C??~ .: :
: Si.stema de Cromatoqrafia : Sistema compuesto por: 1 bomba L-700, 1: Extracción de la :
: tlqhida de Alta Resolución, : detector UV-Vis L-7420, 1 auto-muestrador L- : Vitamina "03' :
: ÜIChrom de Merck-Hitachi : 7200, 1 detector de fluorescencia L-7480, 1 : :
: colector de fracciones L-7650, está conectado: Perfil de
: por una interfase 0-700 al software Multi-HSM : azúcares
: Manager para control, programación y manejo:
: de datos. Además se cuenta con un horno para :
: columna L-7350, un detector de índice de:
, : refracción L-7490 y un desgasificador L-7612. :
L----------------------------------U~?!~-?l?!~~~-~?-R~~?_~I)~-I!~~~
-~~.!?_~~- -- --l-- --------_.-
~~y':~~_<!._ )
: Sistema de Cromatografía : Sistema compuesto de: 1 bomba binaria y 1 : Principios activos :
: Líquida de Alta Resolución, : automuestreador Series 200, 1 detector de: de carbamatos :
: Perkin Elmer Series 200 : fluorescencia LC240 y 1 módulo de reacción : :
: post-columna Pickering PCX 5100. Todos los:
: módulos son manejados por el software:
: TurboChrom Workstation. ,
:-Espectro¡otÓrriet¡:o~-I=iewlett- -:- Posee- detector -de-a-ñ-eglo-de -ciiocfos-de -32"8-- --- --: -F6sforo~ ------ ------:
: Packard 8453 : elementos, con rango de longitud de ondas 190- : absorbancias de
: : 820 nm, ancho de slit 2nm, precisión de longitud : estándares para
: ! de onda <± 2nm, reproducibilidad de longitud de : vitaminas
: onda <± 0.05nm, tiempo de barrida 0.5 s. Es
: manejado por una HP ChemStation y tiene
: procedimientos de autochequeo para evaluar el
: sistema electrónico y la intensidad de la
: lámpara. Trabaja a 90-264 VAC, 47-63 Hz,
: consume 70 VA. Dimensiones: 18.5x34.4x56.0 ,
:
l : cm r¡ x a x h).
~ ~ ~ ~ :: ,

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Otros Equipos:

------------EQUIPO------------:--------CARACTERisTICAS-PRIÑ-CIPALES-------:---UTiijZAO-o--EN---:
\¡iscosimet-ro,- Ha-ake -0 -so-ó-.:-Posee; ü-ñ -sensorde -temperatura ·Pi:lóo: i;üede-· -.:-Viscosidad- de --. ----:
: ser controlado por un PC Trabaja a 230 V, : productos
: 50/60 Hz, rango de velocidad H : 5-500 rnín', y : semisólidos y
------- --. -------------------------1-9-~
Viscosímetro, Metller RM
_?:?_q9_~~~~~:_
_~~I~~~~9_(L~~ ------_----_,:~__--- ---l-p-~~~~<?:>--__.
: Viscosímetro rotacional con sistema.cilindricos : Viscosidad de
¡
:
180 : de medida. Rango de velocidad rota~ional 5 - : productos :
: 1000 mín' ± 0.5% del valor programado; rango: semisólidos y
: de torque 0.25 - 7.5 mN.m; sensor de: pastosos
¡ temperatura Pt100 con rango de 0-99 ° C y ¡
: resolución de 0.1 °C. Dimenstonesc :
: 10.5x13.5x35.0 cm (1 x a x h). Trabaja a 220- :
: 240 V, 50/60 Hz, 160 mA. : ,
-Liñidild-pa-ra-desco-ñtamiñar --;- Permite- decoñtamiñil-r- -criStaier{éi- por -medio- de-:- DecoñtamiñiiciÓñ---:
por vapor, Gerber : vapores de ácido nítrico, posee un interruptor: de cristalería para :
Instruments. : de doble canal con memoria externa que: análisis de trazas :
r -- - ----- -. --- --- - - - -- -- ---- - ---- - __ l_~~~i~~_~~_~~C?g!~rn~~i~f]~-- ---- ------ ------ ---- -- - --1---- ----- ----- -- __---- y:-)
: Baño de maría; Lauda MA 6 : Rango de operación 25-100°C, control por: Calentamientos
, ¡
termómetro digital con resolución de 0.1 °C. evaporaciones ¡ '
: Dimensiones: 15x44x31 cm (1 x a x h) , con:
: capacidad de 5-7 lts. Trabaja a 230 V, 50/60 :
~ . . .. L ~?_ y_ ~~~~~~ _~:*ª_~~: . i . :
: Baño circulante; Lauda WK : Rango de operación 0-40 -c, medio de: Atoros y :
: 500 : condensación: aire. Control digital con LEO: enfriamientos :
: display y con precisión de temperatura de 0.5 : '
: °C. Dimensiones: 35x48x59.5 cm (1 x a x h ). : ,
: : Capacidad máxima: 12 Its. : :
r-~iomo-Heraeüs~-modeio-T6P-1-Posee--üñ-a-proiecc-iÓñ-cfe-sobre-calentamiento-;i1-Hü-mecfades---------'
: control digital de temperatura. Dimensiones:
, : externas 55.2x70.0x68.5 cm e internas:
: 35.2x42.4x38.6 cm (1 x a x h). Trabaja a 120 V, :
~ 1. ?º{f?P. !j?L~:~~_YY.: . 1
: Horno Heraeus, modelo T6 : Posee una protección de sobrecalentamiento, :
: control digital de temperatura y tiempo por lo :
: que se puede programar hasta con 9:
: parámetros diferentes. Almaéena un programa. :
: Dimensiones externas 55.2x70.0x68.5 cm e:
, : internas 35.2x42.4x38.6 cm (1 x a x h). Trabaja: ,
~. . i_ 9__~?P.-'!!_~9!~º_t!~_yJ :~_~_'!'L i __. :
: Balanza Metller PR503 : Precisión de indicación 0.001, capacidad: Pesaje
: Delta Range : máxima de pesaje 510 g, zona de tarado:
: 0... 510 g, tiempo de estabilización típico 1...2 :
: s, pesa interna de 200 g. Funciones::
: autocalibración interna, puesta a cero y tarado, :
: indicador analógico de pesada, entrada:
: alfanumérica, diferentes modos de pesaje- !
, : recuento, totalización. Dimensiones: :
: .:_
?q:º~~~
.:~~_~:~
__ (1_~_ ?_~N·
~~__ : i :
: Sistema de purificación de : Produce agua con las siguientes caracteristlcasj Agua para :
~_~9_~~_~!?:'(p.~:~_ ~~ ~~ ~~_"!"~_!~I??_!}_"!"5?~_::_~~~~_p.1?~,_§l__~~_
j _~~_~i~t~,-,~~_~~_ L__
~~~I~:>~~_
~~ trazas:
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: Bamstead, modelo 07031 : flujo de 0.5 IUmin. Tiene un reservorio de 6.5 It. :
: Temperatura operacional 4.4 - 48.9 °C:
· : Dimensiones: 30.5x48.3x46.0 cm (1 x a x h). : .
~ iJ~~~~~1~_~_1~º_~~~_
Y_i?:~_~_Ij_~· .: :
: Reacti- Therm, Pierce No. : Rango de operación 10 -c arriba de tempera- : Evaporador de :
: 18870 : tura ambiente hasta 150 a C, uniformidad en : pequeños :
: : temperatura ± 5 -c, estabilidad ± 5 -c. : volúmenes :
r-Rotav-apoi:-fj6c!iiR:1-24------1-Eq-üi-pado--coñ---üñ-a--ü-ñidad--de--Cüñirol--para-1-ConceñtraciÓ-ñ-de--'
: velocidad de rotación, rango de rotación 5-240 : muestras y
: rpm; un indicador digital de la temperatura del : evaporación de
: baño y la velocidad de rotación. Trabaja a 230 : solventes :
L i_~ ~_~º!~g-'i~~ '!:1:
Y._~!l_~~!!l_~_~! L :
: Sistema de vacío, Büchi B- : Diseñado para la evacuación de un aparato de : Optimización del :
: 178 : laboratorio a un vacío s 15 mbar. Posee un : vacío para :
: diafragma de PTFE regulado por una bomba : extracción de :
: 100% libre de aceite. Tiene control digital del : solventes .
: vacío y un display LEO de 4 figuras.:
: Dimensiones: 24x51x40 cm (1 x a x h). Trabaja:
· : a 120 V, 50/60 Hz; consume 190 W.: .
:-Ágitador,-IKA-HSSO-1-----------;-AgitaciÓñ-vaivéii,-,iñgodeveiocid-ad-Ü:30-Ó-rprñ-;-Agitad-or-pa-ra-------:
· : (1/min), timer O-56 min, soporta hasta 15 kg de : extracción :
, : carga. Dimensiones: 50.5x58.5x12.0 cm (1 x a :
~ L~ hL_T!~~?j~
_~_?~_q_'!L ?_C!~~º_
~~~_?s:!
_~~~~. j ~
: Plancha agitadora Variomag : 15 plazas de agitación. Rango de velocidad 100 : Saponificación en :
: Multipoint HP, Cole-Parmer : - 850 rprn. Trabaja a 110 VAC, 50/60 Hz, 7 : frío
:
~ 4650-series :
~ watts. Dimensiones: 41.9x24.1x3.8 cm (Ixaxh). :
~ :
------ 1

: Vortex, IKA MS2 Minishaker : Rango de velocidad 200-2500 rpm (1/min), mo- : Asentamiento de
: vimiento excéntrico 2.25 mm y movimiento: fase sólida para
: orbital 4.5 mm; capacidad máxima de carga 0.1 : extracción
: kg. Dimensiones: 11.5x22.5x6 cm (1 x a x h). :
: : Trabaja a 115 V, 50/60 Hz, 31 VA : :
r-Ágitador,-IKA-RCT-fjasic-----~-Ra-ñgo-de-ie-mperatüra:-am-6ieñtea-3iÓ-o¿-.-------1-Agitacfor-mü¡üusos-¡
: Posee circuito de seguridad ajustado fijo a
: 370°C, test de seguridad de los termoelemen-
· : tos. Trabaja a 220 V, 50/60 Hz. :
:-Titülador-MettleiY)L53--------·:-iñdicaciÓ-ñ-del-p-üñio-fiña-I-por-pote-ñciom-etría,-----·:-Vttamfña-;c;;,-p¡:r-
· : fotometría o voltametría. Compensación de : acidez, ácidos
: temperatura para mediciones de pH, pM Y pX. : grasos libres por
: Rango de pH ±27.6, rango de voltaje ±2050 mV : titulación
: resolución de 0.002 pH (PM, pX) Y 0.1 mV. :
· : Trabaja a 100/240 VAC, 50/60 Hz y consume :
L -__- -------------L ~q9_!!l~:-J?~~~r:t?~9_f!~~:_?~~~~_·~~r~!!lJ!~??S~):
-L _
: Mufla, Heraeus M104 : Volumen de la cámara de trabajo 4.7 It, rango : Cenizas por
: ~ de temperatura de 300 ... 1000 -c, soporta una ¡ calcinación
: carga de hasta 5 kg. Con interruptor de :
: seguridad de la puerta, dispositivo de protección:
: contra temperaturas excesivas, ventilador de
· : evacuación, y un regulador de temperatura
~ i_ I~~J!!·!i5~<?!1..!: i
_g~~_P~I!!!~t~_~':I_P!9_9~?_f!1_~~~9_f!~ _
: Karl Fisher, Metrohm 701 : Determinación del punto final por voltametría o : Humedades
: KF Titrino : amperometría. Modos de titulación: Karl Fisher :
~ _13~?}?:_JF?J??j? :
i_ y_~I~I)~<?:_~~~~~_~~_é!_i!1.~e:~~~~ _

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NESTLE GUATEMALA, SA LABORA TORY BOOK - 1998
: a 220 VAC, 50/60 Hz; consume 15 VA.
, : Dimensiones: 15.0x45.0x27.5 cm. ' ,
f -Hürñillade-i3- plazas,- 1i<A- - - - - - rfi-eñe -6 --hornillas- -(8~5--ciñ-- (fe --~)- -co-ñ--control- ~-Carbonizacio-ñ -- ---~
: HPM6 Basic : individual de temperatura. Rango de: '
: temperatura: 20-650 °C, precisión de indicación:
: ±10 -c. Dimensiones: 73x19x17 (1 x a x h). :
~ L I~~~_~l~_~_?_~º_Y:'__~º!?~_,=,~,_?~_~?~_~_é!!t?. 1- j
: Balanza Mettler AT261 Delta: Precisión de indicación 0.01 mg a 60g Delta: Pesaje :
: Range : Range y 0.1 mg a 250 g. Zona de tarado:
substractiva 0 ... 250 g. Reproducibilidad de:
0 ... 50 9 = 0.015 mg y de 50 ... 200 9 = 0.03 mg. :
Linealidad ± 0.08 mg. Tiempo de estabilización:
típico 8 ... 12 s. Pesas de calibración:
incorporadas 2 x 100g. Funciones: auto-:
calibración interna, puesta a cero y tarado, :
: indicador ana lógico de pesada, diferentes:
: modos de pesaje. Dimensiones: 43.3 x 24.1 x :
: 28.9 cm (1 x a x h) Trabaja a 115 V, 50/60 Hz, :
: : 15.5 W máximo. '
r-i3afio-ci-rcülante,-Lauda-RM6-1-Rá-ñgOdé-ié-mpé-ratüra-=20~.-.-1-50-';C~-iñ-ciicaciÓñ--~--C-áleñtamieñto-----¡
: de temperatura digital con resolución de 0.1 °C :
: termómetro digital incorporado. Dimensiones:
: 20x35x60 cm (1 x a x h). Trabaja a 230 V,
: 50/60 Hz, consume 1.8 kw.
f -i3-áfiode-u-lirasüñi(fü~ -- -- - -- -- -roesgasifica-yiü-so-ñifica -cié-O~.-.99-iñiñ-,- ra-ñgo -cié-r-Oesgasífi-car-y-- ----:
: Branson 2210 : calentamiento 10 ... 75 °C, tiene control diqital. : sonificar
: : Tamaño del tanque 14.0 x 15.2 x 10.2 cm (1 x a :
: : x h) con capacidad de 2.81 It. Trabaja a 120 V, :
: : 60 Hz, consume 125 W. : ,
x- -
:.-C-ámpañ-ás-{j-e-eXtrá-ccióñ-,-- ---.:-Oimensiüñ-es: --1S0x90-X252--e-m- -(1- - x --á-- h).- -:-EXtra-cc¡oñ-es~
- ---- --:
: Burdinola ST 1500 : Equipados con: 1 grifo de agua y con 1 pileta de : evaporaciones e:
: gres de15x15 cm, 1 grifo de gas, 2 bases: hidrólisis
: eléctricas e iluminación interior, soporte y:
~ LR~~<?~jU~~_q~R<?!i_~~i!~!!<?:_--- -- -- J
: Campanas de extracción, : Dimensiones: 180 x 90 x 252 cm (1 x a x h). :
: Burdinola M 1500 : Contiene los siguientes servicios: 1 grifo para :
: agua con mando a distancia, 1 grifo para gas :
: con mando a distancia, pileta de gres de 15x15 :
: cm, dos bases tipo SHUKO de 10/16 A, lámpara :
: de 18 W con protección IP 55. :
: -Á-rTñ-ár¡ü
-pá-ra-solveñies ----- ---:- AITñá-rio----cié-- --cio-ble---p-cired;----capacicfacf -- -cié--:-Almaceñ-cim¡enú;- -,
: inflamables, Burdinola S.61 : almacenamiento máxima de 40 galones de: de inflamables
: : líquidos inflamables en botellas de vidrio. Tiene :
: : un cierre automático de protección al registrar :
: : una temperatura de aprox. 50°C. : :
~-----------------------------------~----------------------------------------------------------~---------------------~.~
: Armario para ácido, : Armario con extractor para el almacenamiento: Almacenamiento :
: Burdinola : de ácidos concentrados, y soluciones ácidas, : de ácidos :
~ i _~_é!P~<:!~?5:! _g~_~9_~l~~<?~_~?
_'!l?_~i_l!!~ ~ i

42