UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA

DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES
“ZARAGOZA”

Carrera de Química Farmacéutica

Biológica

“METODOS PARA EVALUAR MASA CELULAR”

MICROBIOLOGIA FARMACEUTICA
Equipo: 5
Cristóbal Ortiz Manuel
López Sánchez Elizabeth
Méndez Ontiveros Nabor
Robles Sánchez Aida
Romero Mora Brenda Monserrat
Valencia Umaña Rafael
Vázquez González Christian Ignacio

Grupo 2901
Ciclo Escolar 2016-2
CARACTERISTICA DEL CRECIMIENTO
BACTERIANO

El crecimiento bacteriano es el aumento del numero de microorganismos a lo largo del

tiempo, en la mayoría se reproducen por fisión binaria regulando la división celular y la
replicación de los cromosomas coordinadamente.
FASES DEL CRECIMIENTO MICROBIANO
 VACIADO EN PLACA
EXTENDIDO EN PLACA
ASA CALIBRADA
CONTEO DE M.O
VIABLES MILES Y MISRA
FILTRACIÓN
METODOS PARA NMP
CONTEO DE M.O

CÁMARA DE BREED
CONTEO DE M.O
CÁMARA DE NEUBAUER
TOTALES
TURBIDIMETRIA
CONTEO DE M .O Mc Farlan

PESO SECO
DIRECTOS PESO HÚMEDO
DETERMINACIÓN DE NITROGENO
DETERMINACIÓN COMPONENETE CARACTERISTICO
BIOMASA

CONSUMO DE NUTRIENTES
TURBIDIMETRIA
INDIRECTOS
ESPECTOFOTOMETRO
NEFELOMETRO
VERTIDO EN PLACA • En solución salina isotónica
Suspender MO

(CONTEO DE
M.O.VIABLES) Tomar volumen
• Verter en placa sin medio de cultivo
específico

• Adecuado para el desarrollo del MO

Adicionar medio de
cultivo • A temperatura de 45 °C
EXTENDIDO EN
PLACA (CONTEO PREPRARA • Adecuado para el MO
MEDIO

DE M.O.VIABLES)
Suspender MO
• Solución salina isotónica

• Agregar al medio solidificado y

Tomar volumen
específico expandir homogéneamente
ASA CALIBRADA (CONTEO DE M.O.VIABLES)
MILES Y MISRA (CONTEO DE M.O.VIABLES)
FILTRACIÓN (CONTEO DE M.O.VIABLES)
NÚMERO MAS PROBABLE (CONTEO DE M.O.VIABLES)
CÁMARA DE BREED(CONTEO DE M.O.TOTALES)
CÁMARA DE NEUBAUER (CONTEO DE
M.O.TOTALES)
TURBIDIMETRIA (CONTEO DE M.O.TOTALES)
◦ La turbidez producida por el crecimiento
microbiano de microorganismos
unicelulares puede ser medida de acuerdo
a la capacidad de absorber la luz. La
muestras a determinar son generalmente
translúcidas cuando no presentan
crecimiento microbiano.

Longitud de onda (l)

•Bacterias 540nm
•Protozoarios 580nm
•Levaduras 600nm
ESCALA DE MC FARLAND (CONTEO DE M.O.TOTALES)

• Método indirecto

• Se trata de una serie de patrones de turbidez

previamente calibrados.
MÉTODOS DIRECTOS BIOMASA.

Se requieren preparaciones limpias sin

partículas extrañas.
1) Determinación del peso húmedo
(Biomasa método directo):
 Se tara un tubo de centrífuga.
 Se centrifuga el cultivo y se
elimina el sobrenadante.
 Se determina el peso del
sedimento.
 2) Determinación del peso seco(Biomasa método directo):
como el anterior, pero el sedimento se seca antes de ser pesado (105ºC, toda la noche), hasta peso
constante. Las medidas de peso seco suelen representar el 10-15% de los valores de peso húmedo.
 3) Determinación del nitrógeno total (Biomasa método directo): técnica de
micro-Kjeldahl.
 4) Determinación de un componente característico (Biomasa método directo): peptidoglucano,
ADN, ARN, proteínas, ATP, clorofilas en organismos fotosintéticos, etc.
 MÉTODOS INDIRECTOS.
 1) Medida de consumo de nutrientes o de producción de algún metabolito por unidad de tiempo
(Biomasa Indirecto) . Ej: consumo de oxígeno (O2) y consumo de carbónico (CO2).
 2) Métodos turbidimétricos (Biomasa Indirecto) (ópticos). Son muy usados en la práctica cotidiana
del laboratorio. La base común de estos métodos consiste en la medición de la cantidad de luz
dispersada o transmitida a través de un cultivo bacteriano.
 2.1) Espectrofotómetro (Biomasa Indirecto) : Este aparato es de uso habitual en cualquier
laboratorio de Microbiología o Bioquímica. Mide la densidad óptica (D.O.), es decir la absorbancia
(una medida de la luz transmitida a través de la supensión).
 2.2) Nefelómetro (Biomasa Indirecto) : Es un aparato similar al anterior, pero el dispositivo sensor está
situado en ángulo recto respecto de la dirección de la luz incidente, y lo que se mide es pues, la luz
dispersada directamente por la preparación. Posee mayor sensibilidad que el espectrofotómetro.
MÉTODO APLICACIONES

Conteo microscópico. Recuento de bacterias en leche y vacunas.

Conteo en placa. Recuento de bacterias en leche, agua, suelos,

cultivos, etc.

Filtros de membrana o moleculares. Igual que para conteos en placa.

Medición por turbidimetría. Ensayos microbiologicos, estimación de la cosecha

bacteriana en caldo o suspensiones acuosas.

Determinación de nitrógeno. Investigaciones sobre metabolismo.