Guía para la protección de columnas Indice

INDICE

INTRODUCCION AL CUIDADO Y USO DE COLUMNAS 1-4

Selección del tubo y conectores correctos
Instalación de columnas.

PARTE I – COLUMNAS A BASE DE SILICAS 4-6

Parámetros de las corridas
Consideraciones sobre la fase móvil
Consideraciones sobre la fase estacionaria
Presión de regreso y flujo
Aumento/disminución del flujo
Guardado de la columna
Procedimiento de limpieza de la columna

PARTE II – COLUMNAS REZEX A BASE DE POLIMEROS 7-11

Parámetros de las corridas
Consideraciones sobre la fase móvil
Procedimiento de limpieza
Tabla de especificaciones y parámetros de operación

TABLA DE MISCIBILIDAD DE SOLVENTES 14-15

PARTE III – COLUMNAS QUIRALES CHIREX (cairex) 12

Parámetros de las corridas
Consideraciones sobre la fase móvil

PARTE IV – COLUMNAS BIOSEP-SEC-S 12

Parámetros de las corridas
Consideraciones sobre la fase móvil
Procedimiento de limpieza
Guardado de las columnas

PARTE V - COLUMNAS BIOSEP –DEAE-P 12

Parámetros de las corridas
Consideraciones sobre la fase móvil
Procedimiento de limpieza
Guardado de las columnas

PARTE VI – COLUMNAS POLYSEP-GFC-P 13

Parámetros de las corridas
Consideraciones sobre la fase móvil
Procedimiento de limpieza
Guardado de las columnas

PARTE VII – COLUMNAS PHENOGEL GPC 13, 16-1

Consideraciones sobre las muestras
Guardado de las columnas
Consideraciones sobre el cambio de solventes
Carta de compatibilidad de solventes

PARTE VIII -COLUMNAS POLYMERX RP 18

Especificaciones
Parámetros de las corridas
Consideraciones sobre la fase móvil
Procedimiento de limpieza
Guardado de las columnas

PARTE IX – PROTECCION DE COLUMNAS PARA HPLC Y PRUEBAS 18

DE FUNCIONAMIENTO
Filtros para jeringas Phenex 18
Guía de selección de filtros de memnbrana 19
Sistema de protección con cartuchos “SecurityGuard” 20
Equipo de prueba para sistemas de HPLC 23
Estándares para verificación del funcionamiento de columnas 23-25

PARTE X- EXTRACCION POR FASE SOLIDA EFS (SPE) 26

PARTE XI- ACCESORIOS PARA HPLC 27

GARANTIA PHENOMENEX 28

TABLA PARA REGISTRO DEL FUNCIONAMIENTO DE LA COLUMNA 29

INTRODUCCION
Todas las columnas Phenomenex son productos de precision
que siendo delicados presentan un funcionamiento,
reproducibilidad, y tiempo de vida excelente si se
les da el cuidado apropiado. La información y las
recomendaciones
contenidas en este manual están diseñadas para guiarle
en el cuidado y uso de sus columnas., aunque esas
recomendaciones no deben considerarse absolutas. Siga
por favor las instrucciones para maximizar las propiedades
y el tiempo de vida de la columna. En caso de tener alguna
duda contacte a su Representante de Phenomenex o a su
distribuidor

AL RECIBIR LA COLUMNA
• Verifique que es la columna que usted ordeno
• Chequée que la columna no presenta algun daño
físico que pudiera haber ocurrido durante el envío.
• Pruebe la columna inmediatamente para
verificar su funcionamiento y calidad.
• Todas las columnas se envían en el solvente
de prueba a menos que se especifique lo contrario.
Cada columna de HPLC fabricada por Phenomenex se
empaca y se prueba en forma individual para asegurar
la mas alta calidad. Todas las columnas se envían con su
cromatograma y su hoja de especificaciones que indica
el número de serie, la identidad , las condiciones y los
parametros de operación en que se probó.

El tiempo de garantía comienza al recibir la columna. Por

eso la verificación es muy importante cuando la columna
va a almacenarse. Pruebe la columna usando la mismas
condiciones que se indicant en el cromatograma de
prueba. Utilice las fórmulas indicadas en la figura 1 para
determiner la asimetría de picos y la eficiencia.

El buen funcionamiento cromatográfico depende

del sistema completo y no solo de la columna. Las
columnas son probadas por Control de calidad usando
condiciones óptimas para minimizar los efectos extra-
columna, Muchas de las variaciones en sus resultados
conmparados a los datos de las pruebas de Phenomenex,
se deben a esos efectos extra-columna que vienen
del diseño de su sistema , por ejemplo, el inyector,
la celda de flujo, el tubo y las conexiones etc. Si tiene
alguna duda sobre sus resultados o sobre la calidad
de su columna o si hay signos de que su columna está
dañada, POR FAVOR CONTACTE DE INMEDIATO A SU
DISTRIBUIDOR LOCAL O A PHENOMENEX
Figure 1

Formulae for calculating efficiency and peak asymmetry

1
 SELECCIONANDO EL TUBO Y LOS
CONECTORES CORRECTOS.

El tubo y los conectores en un sistema de HPLC contribuyen

al volumen muerto (Dead Volume). Si no es minimizado el
volumen muerto puede dar lugar a un engrosamiento de la
banda y una degradación del pico. Siga por favor las siguientes
sugerencias para mantener el volumen muerto alm mínimo y
asegurar el funcionamiento óptimo de su columna.

TUBING
La selección del material del tubo debe basarse en su
restividad química, aplicación y consideraciones del sistema
de HPLC (flujo, presión, etc.) Ver tablas 1-3

TUBING DIAMETER
Tabla 1
High Pressure Tubing:

/16” OD x 0.010” ID
1

Inlet/Outlet Low Pressure Tubing:

1
/16” OD x 0.030” ID 1
/8” OD x 0.062” ID

TUBING COMPATIBILITY
Tabla 2
Stainless Steel AVOID high concentrations
(Type 316) of acids or halogenated salts

PEEK AVOID 100 % THF,

(biocompatible) chlorinated solvents, high
concentrations of acids

Titanium Compatible with nearly

(biocompatible) all chemicals

TUBING APPLICATIONS
Tabla 3
Tubing ID Column IDs Typical Flow Rates
(Inch) (mm) (mL/min)
0.002 0.30 (Fused Silica) 0.001 - 0.02
0.005 1.0 (Stainless Steel) 0.02 - 0.1
0.007 2.0 - 4.6 0.2 - 2.0
0.010 3.2 - 7.8 0.5 - 5.0
0.020 10.0 - 21.2 2.0 - 50.0
0.040 21.2 - 100.0 10.0 - 200.0

2
CONECTORES
Todas las columnas Phenomenex tienen conectores
hembra invertidos (de tipo interno) con tipo de rosca
10- 32
• El tipo de conector puede quedarie a cualquier tubo
de 1/16 in. Pulg. de diametro interno
(Ver la página 2 para consideraciones del tubo).
• Se usa una tuerca macho de tipo de rosca 10-32 y
una ferula ó una tuerca de polímero * de apretar con
los dedos para ensamblar el tubo con el conector. (Ver
figura 2)

Figura 2

Polymeric
Fingertight
Male Nut
32 threads per inch
No. 10 or 0.190” diameter
Ferrule

1
/16” OD
Tubing Male Nut
(0.010” ID) /4” OD Standard Analytical
1
Seating depth of the nib
is the critical dimension (250 x 4.6mm ID)

10-32 Threaded Male Nut Female / Inverted (internal)

and Ferrule Column End-fitting

Consideraciones de Figura 3
Instalación
• La forma de la ferula
puede variar entre
fabricantes.Para las
columnas Phenomenex
puede usar ferulas
Phenomenex o Valco

• MUY IMPORTANTE
El largo del tubo después
de la ferula es crítico
paralas columnas
Phenomenex (Fig. 2) es
de 0.080 Pulg. (2 mm)
el tubo tiene que asentarse
completamente dentro del
conector de la columna.
El no hacer lo anterior
dará comoresultado
tener una pequeña
cámara de mezclado al
principio ó al final de la
columna según sea el
caso. Y esto llevará a
una degradación de la
cromatografía.

* Los conectores de ajustar

con los dedos a basede
polímeros Son muy
fáciles de usar, vienen
en una sola pieza y no
requieren herramientas
para ensamblarlos ,
además facilmente
pueden acomodarse a la
forma del conector de la
columna. 3
 INSTALACION DE LA COLUMNA
ES ALTAMENTE RECOMENDABLE LEER ESTA GUIA DE
CONSIDERACIONES ESPECIFICAS PARA COLUMNAS
ANTES DE PROCEDER A SU INSTALACION (PARTE I a VII).
• Purgue varias veces la bomba y la linea del HPLC con
fase móvil filtrada y desgasificada (sin búfer). Asegurese
Que no hay burbujas de aire en el sistema.
• Conecte la columna al inyector siguiendo la dirección de
flujo indicada en la etiqueta de la columna, deje la salida
de la columna sin conectar
• Ponga la bomba a un flujo de 0.1 ml/min. (ó a un flujo
menor) é incremente el flujo hasta alcanzar el normal de
operación a los 5 minutos.
• Pare el flujo cuando observe un flujo libre de solvente a
la salida de la columna, seque la terminal y conécte al
detector.
• Acondicione la columna pasando de 10 a 30 volúmenes
de columna de fase móvil a flujo normal. .
• Para las columnas que pueden ser usadas bajo condi-
ciones de fase normal ó reversa (-CN ó -NH2) purgue la
columna con 30-40 volúmenes de THF como solvente
intermedio cuando se cambia de fase reversa a fase
normal ó viceversa
PARTE I COLUMNAS A BASE DE SILICA

PARAMETROS DE CORRIDA
• Mantenga las presión abajo de 3500 PSI (245 Bar) a
menos que se especifique otra cosa en la parte II a VIII.
• Evite cambios drásticos en la presión
• Si la presión observada es demasiado alta monte la
columna al revés y haga pasar solvente (NO haga esto
con columnas de otros fabricantes)
• Use un regulador de presión en caso de haber problema
con gases en la celda del detector.
• Recuerde que la temperatura maxima de operación es
de 60 ºC para todas las columnas Phenomenex a base
de sílica

CONSIDERACIONES SOBRE LA FASE MOVIL

• Mantenga el pH entre 2.0 y 8.0
• Use columnas de pre-saturación y guarda columnas
• Degas and filter all mobile phases prior to use
• Asegurese que los solventes son miscibles.
Las trazas y las impurezas pueden dañar dramáticamente
las columnas para HPLC. Cuando cambie a una fase móvil
diferente asegúrese que los solventes ó búferes son miscibles
(Ver tabla 10). Usando solventes que no sean miscibles con
el solvente de la columna puede dañar permanentemente
la columna. Verifique siempre la solubilidad de la muestra
y de ser posible use la fase móvil como diluyente (solvente
de la muestra).

Stationary Phase Considerations

• Mantenga el pH entre 2.0 y 8.0
• Use columnas de pre-saturación y guarda columnas
• Degas and filter all mobile phases prior to use
• Evite las cetonas y aldehidos cuando use columnas
amino.
Las columnas a base de silica son muy sensibles al pH.
Cuando el pH está por debajo de 2.0 los grupos funcionales
modificando la silica se hidrolizan y a pH mayors a 8.0 la silica
puede disolverse. Si el pH de la fase móvil esta cerca de 2.0
ó de 8.0 use una columna de pre-saturación.
Pregunte a Phenomenex sobre columnas que trabajan con rangos de pH más amplios.
4
PRESION Y FLUJO
Para optimizar la vida de la columna, el flujo deberá
ajustarse para mantener la presión por debajo de 3500 PSI
(254 Bar).
Tabla 4
Tamaño de Díametro Flujo Típico Presión típica (psi)
partícula µm Interno(mm) (mL/min) 150mm* 250mm*
3 | 4.6 | 0.5 | 985 | 1640
5 1.0 0.1 1500 2500
5 2.0 0.2 750 1250
5 3.2 0.5 732 1226
5 4.6 1.0 710 1180
5 10.0 5.0 750 1250
10 4.6 2.0 355 590
10 21.2 20.0 170 280
*longitud de la columna

Las columnas pueden ser operadas a cualquier flujo que

sea consistente con las limitaciones de presión que se
describen en la tabla anterior. El flujo debe optimizarse
para obtener la major eficiencia con su muestra

ESCALANDO ARRIBA/ESCALANDO ABAJO

Ajustando el flujo para columnas con diferentes díametros
internos es muy sencillo. Para mantener los tiempos de
retención constantes, el flujo y la capacidad de carga
tiene que ajustarse de acuerdo al díametro interno de la
columna. Si asumimos que la longitud de la columna es
la misma, tenemos: (radio de la columnaB) 2
X = factor de escala =
(radio de la columna A)2
Para una columna con un díametro interno de 4.6, los
factores de escalamiento son aproximadamente:
Tabla 5
Díametro Interno Factor de escalamiento
1.0 mm | 0.05 x
2.0 mm 0.2 x
3.2 mm 0.5 x
10.0 mm 5x
21.2 mm 21 x
Los solventes orgánicos libres de agua para columnas para
columnas para HPLC (por ejemplo: fase normal, quirales,
GPC) pueden Generar electricidad estática y deben ser
aterradas apropiadamente para evitar una descarga eléctrica
potencialmente peligrosa.

GUARDANDO LA COLUMNA
• Column storage conditions affect column lifetime
• Never store columns with buffers
• Lave la columna con 5 volúmenes de fase móvil
SIN búfer para remover las sales y/o búfers
Stoage Conditions for Silica-Based HPLC Columns:
Tabla 6
Tipo de columna Solvente para guardarla
Fase reversa: 65 % Acetronitrilo/
C18, C12, C8, C4, C2, C1, 35 % Agua
Phenyl
Fase Normal: Isopropanol ó hexano
Silica, CN, NH2, PAC,
Diol Alumina
Intercambio iónico: Metanol *
DEAE, CM, SAX, SCX
Exclusión por 0.05 % NaN3 en agua
tamaño: Diol ó en 10% de methanol
*Lave la columna con 50 ml. de agua grado HPLC antes de usar el
solvente para guardarla
5
 PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA DE LAS COLUMNAS
Las condiciones siguientes son para columnas
Phenomenex a base de sílica, con la excepción de las
columnas quirales.
(Ver Parte III):
• Antes de iniciar el proceso de limpieza asegúrese que
el solvente en su columna es miscible con el solvente
recomendado para dicha limpieza.
• El flujo debe ser del 20 al 50 % del flujo típico.
• Para estimar el volumen de la columna utilice la
ecuación siguiente: V= r 2L
V = volúmen de la ml
r = radio de la columna en cm
L =longitud de la columna en cm
SILICA SIN MODIFICAR
Lave con 10 volúmenes de cada uno de:
• Hexano • Cloruro de metileno
• Cloruro de metileno • Fase móvil
• Isopropanol
Procedimiento para remover el agua:
Lave la columna con 30 ml de 2,2 dimetoxi-propano al
2.5 % y ácido acético glacial al 2.5 % en hexano.
FASE NORMAL (CN, NH2, Diol, PAC)
Lave con 10 volúmenes de columna de cada uno de:
• Cloroformo • Cloruro de metileno
• Isopropanol • Fase móvil
Excepción: Luna amino en fase reversa.

FASE REVERSA
(C18, C12, C8, C4, C5, C2, C1, Phenyl, CN, NH2)
Lave con 10 volúmenes de columna de cada uno de:
• 95 % de agua/5 % de • 95 % acetonitrilo/5 % agua
acetonitrilo (para remover • Fase móvil
los búfers)
• THF
FASE REVERSA PROTEINAS/PEPTIDOS
(C18, C12, C8, C5, C4, Phenyl)
Rinse with 20 column volumes of mobile phase with buffer
removed. Run gradient (2x):
A) 0.1 % TFA en agua
B) 0.1 % TFA en acetonitrilo/isopropanol (1:2)
B de 25 a 100 % por 30 min.
Equilibrar con 10 volúmenes de columna de fase móvil.
No guarde la columna en TFA (ácido trifluoracético)
INTERCAMBIO IONICO (SAX, SCX, NH2, DEAE, CM)
Lave con 10 volúmenes de columna de cada uno de:
• 500 mM de Búfer de fosfato a pH 7
• 10 % Acido acético (acuoso)
• 5 volúmenes de columna de agua
• 10 volúmenes de columna de Búfer de fosfato a pH 7
• 5 volúmenes de agua
• 10 volúmenes de metanol
• 10 volúmenes de agua
Para remover Proteínas.
Siga el procedimiento anterior con esta excepción:
Substituya 10 volúmenes de columna de metanol con 10
volúmenes de Urea 5 M ó Tiocianato de guanidina.
GFC/SEC (BioSep SEC*) *Ver parte IV para más detalles
Lave con 5 volúmenes de Búfer de fosfato 0.1 M a pH3.0.
Para proteínas retenidas fuertemente use el siguiente
gradiente:
De 100 % de agua a 100 % de acetontrilo a 100 % de agua
por 60 minutos, ó lave con 5 volúmenes de columna de
SDS (Dodecil sulfato de sodio ó Lauril sulfato de sodio) ó
Isocianato de guanadina 6M ó 10 % de DMSO (Sulfóxido de
metilo).

6
PART II - REZEX
COLUMNAS A BASE DE POLIMEROS

PARAMETROS DE LA CORRIDA
• Las columnas deben utilizarse a temperatures el-
evadas (60 a 85 ºC) excepto Rezex ROA en la mayoría
de las aplicaciones.
• La presión de la columna para 8 % de material ligado
no debe exceeder 600 PSI y para 4 % de material
ligado 300 PSI.
• Limpie y corra la columna al revés con agua grado
HPLC.
Importante: Nunca exceda la presión maxima, esto causará daño
irreversible a la columna..

CONSIDERACIONES SOBRE LA FASE MOVIL.

• Filtre y desgasifique toda fase móvil.
• No exceda 10 % de methanol, isopropanol, etanol.
• Guarde las columnas en agua grado HPLC
Rezex utilize una resina de poliestireno sulfonado la cual es
fuertemente resistente al ataque químico. De cualquier forma
este material es muy sensible a la presión por lo que debe
ser tratado con mucho cuidado.
AL INICIO
Encienda el calentador de columnas de 60 a 85 ºC y
comience a pasar la fase móvil a un flujo de 0.1 ml/min.
Asegúrese que la presión se mantiene abajo de 350 PSI
para 8 % de material ligado y abajo de 200 PSI para
4 % de material ligado. Cuando la temperature alcance
las condiciones de trabajo, aumente el flujo al nivel
especificado. (Ver parámetros de operación para Rezex).
APAGADO
Durante la noche: Disminuya el flujo a 0.1 ml/min. Deje
el sistema encendido y continúe calentando
A largo plazo: Guarde las columnas en 100 % de agua.
Apague la bomba y permita que se enfríe el sistema.
Coloque los tapones de protección bien apretados en la
columna
PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA
Antes de utilizar cualquier procedimiento de limpieza
que se describe en las tables de las páginas 9 y 11, trate
primero de limpiar su columna Rezex como se indica a
continuación.
Remueva el guarda columna y monte la columna al revés
de la dirección de flujo indicado en la columna. Haga pasar
100 % de agua grado HPLC a traves de la columna según
la siguiente tabla>
TABLA 7
Columna Rezex Flujo (mL/min) Temp. (°C)

RPM, RCM, RHM 0.6 85

RCU 0.2 85
RSO and RNO 0.2 75
RNM and RAM 0.4 75
ROA 0.6 Ambient
Corra la columna bajo esas condiciones por un mínimo de
12 horas. Cuando complete el procedimiento de limpieza,
regrese la columna a la dirección de flujo original y
acondiciónela para análisis
Si este procedimiento no es efectivo para limpiar la
columna, proceda al que se indica en las páginas 8 a 11.
7
8
Table 8 RCM Monosaccharide RSO Oligosaccharide RNO Oligosaccharide RNM Carbohydrate RAM Carbohydrate
Part Number 00H-0130-K0 00P-0133-N0 00P-0137-N0 00H-0136-K0 00H-0131-K0
Ionic Form Calcium Silver Sodium Sodium Silver
Standard Dimensions 300 x 7.8 mm 200 x 10 mm 200 x 10 mm 300 x 7.8 mm 300 x 7.8 mm
Matrix Sulfonated Styrene Divinyl Benzene
Cross Linking 8% 4% 4% 8% 8%
Particle Size (µm) 8 12 12 8 8
PART II - REZEX

Min. Efficiency (p/m) based on last peak 35,000 N/A N/A 30,000 35,000
Typical Pressure (psi @ Max Flow Rate) 350 200 200 350 350
Max. Pressure (psi @ Max Flow Rate) 600 300 300 600 600
Max. Flow Rate (mL/min)* 0.6 0.3 0.3 0.6 0.6
Max. Temperature (°C) 85 85 85 85 85
Typical Mobile Phase Water Water Water Water Water
pH Range Neutral Neutral Neutral Neutral Neutral
POLYMER-BASED COLUMNS

Guard Column Part No. 03B-0130-K0 03R-0133-N0 03R-0137-N0 03B-0136-K0 03B-0131-K0

SPECIFICATIONS AND OPERATING PARAMETERS

See p. 7 for general care and usage of Rezex columns.

* Make sure the maximum pressure is not exceeded
 Table 8 (continued) RCM Monosaccharide RSO Oligosaccharide RNO Oligosaccharide RNM Carbohydrate RAM Carbohydrate
Cleaning, Regeneration and Storage
Organic Modifiers (Max) 10 % Methanol, IPA, EtOH, Acetonitrile
Inorganic Modifiers (Max) 5 % CaS04, Ca(N03)2 5 % Silver Nitrate 5 % Sodium Salts 5 % Sodium Salts 2 % Silver Nitrate
, CaCl2
Avoid >10 % Methanol, Acids, >5 % Methanol, Acids, >10 % Methanol, Acids, >10 % Methanol, Acids, >5 % Methanol, Acids,
Bases, Non-Calcium Salts Bases, Non-Silver Bases, Non-Sodium Bases, Non-Sodium Bases, Non-Silver
or Metal Ions Salts/Metal Ions Salts/Metal Ions Salts/Metal Ions Salts/Metal Ions
Cleaning Solvent 100 % Water 100 % Water 100 % Water 100 % Water 100 % Water
Flow Rate(mL/min) 0.6 0.2 0.2 0.4 0.4
Temperature (°C) 85 75 75 75 75
Duration (hrs) 12 12 12 12 12
Regeneration Solvent 0.1 M Ca(N03)2 0.1 M Ag N03 0.1 M NaN03 0.1 M NaN03 0.1 M Ag N03

See p. 7 for general care and usage of Rezex columns.

Flow Rate (mL/min) 0.2 0.1 0.2 0.2 0.2
Temperature (°C) 85 – 85 85 85
and organic acid analysis

Duration (hrs) 4-16 – 4-16 4-16 4-16

COLUMNS FOR carbohdrate

Ship/Storage Solvent Water Water Water Water Water

9
10
Table 9 RPM Monosacárido RHM Monosacárido ROA Acido orgánico RFQ Acido rápido RCU Alcoholes del azúcar
Número de catálogo 00H-0135-K0 00H-0132-K0 00H-0138-K0 00D-0223-K0 00G-0130-D0
Forma iónica Plomo Hidrógeno Hidrógeno Hidrógeno Calcio
Dimensiones 300 x 7.8 mm 300 x 7.8 mm 300 x 7.8 mm 100 x 7.8 mm 250 x 4.0 mm
Matrix Divinil estiren benceno sulfonado
Cadenas de enlace 8% 8% 8% 8% 8%
Tamaño de partícula (µm) 8 8 8 8 8
Eficiencia mín. p/m basado en el último pico 35,000 35,000 50,000 (ácido acético) 30,000 12,000
PART II - REZEX

Presión típica (psi @ flujo máximo) 350 350 350 350 350
Presión máxima (psi @ máx flujo) 600 600 600 600 600
Flujo máximo (ml/min.)* 0.6 0.6 0.6 1.0 0.4
Temperatura máxima ºC 85 85 85 85 85
Fase móvil típica Agua Agua 0.005N H2S04 0.005N H2S04 Agua
pH Neutro Neutro 1-3 1-3 Neutro
POLYMER-BASEd COLUMNS

Número de catálogo del guarda columna 03B-0135-K0 03B-0132-K0 03B-0138-K0 03B-0223-K0 03A-0130-D0
SPECIFICATIONS AND OPERATING PARAMETERS

* Make sure the maximum pressure is not exceeded

See p. 7 for general care and usage of Rezex columns.

 Tabla 9 (continúa) RPM Monosacárido RHM Monosacárido ROA Acido orgánico FQ Acido rápido RCU Alcoholes del azúcar
Cleaning, Regeneration and Storage
Modificadores orgánicos (máx) Hasta 10 % de Metanol, alcohol isoprópilico, etanol, aceto nitrilo
Modificadores inorgánicos (máx) Nitrato de plomo al 5 % HN03, H3P04 al 5 % HN03, H3P04 al 5 % HN03, H3P04 al 5 % CaS04, Ca(N03)2, CaCl2
al 5 %
Evitar metanol >10 %, ácidos metanol >10 %, ácidos metanol >10 %, ácidos metanol >10 %, ácidos metanol >10 %, ácidos
Bases, sales sin plomo Bases, sales, iones Bases, sales, iones Bases, sales, iones Bases, sales, iones
iones metálicos metálicos metálicos, pH > 3. metálicos, pH > 3. metálicos
Solvente para limpieza 100 % agua 100 % agua 100 % agua 100 % agua 100 % agua
Flujo (ml/min.) 0.6 0.6 0.5 0.6 0.2
Temperatura ºC 85 85 Ambiente Ambiente 85
Duración (hrs.) 12 12 12 12 12

See p. 7 for general care and usage of Rezex columns.

Solvente de regeneración 0.1 M Pb(N03)2 0.025 M H2S04 0.025 M H2S04 0.025 M H2S04 0.1 M Ca (N03)2
Flujo ml/min 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
Temperatura ºC 85 85 Ambiente Ambiente 85
and organic acid analysis

Duración (hrs.) 4-16 4-16 4-16 4-16 4-16

COLUMNS FOR carbohydrate

Solvente para guardar/enviar Agua Agua 0.005N H2S04 0.005N H2S04 Agua

11
 PARTE III - COLUMNAS QUIRALES CHIREX
PARAMETROS DE LA CORRIDA
• La temperatura no debe exceder 50 ºC
• La presión de la columna no debe exceder 3000 PSI
• Mantenga el flujo entre 0.5 y 2.0 ml/min para columnas
con diámetro interno de 4.6 m
CONSIDERACIONES DE LA FASE MOVIL
• Tenga una columna para trabajar solo en fase normal ó
reversa
• Mantenga el pH en un rango de 2.5 a 7.5
• Use solo solventes grado HPLC
• Use solamente reactivos y químicos de la más alta pureza.
• Siempre desgasifique y filtre la fase móvil antes de usarla
• Asegúrese que los solventes son miscibles
La mayoría de las columnas quirales CHIREX usan la fase estacionaria Tipo I
ó tipo cepillo (CSPI). Los sistemas de fase normal normalmente proporcionan
major selectividad que los sistemas de fase reversa. VEA LA INFORMACION
ACERCA DE COLUMNAS ESPECIFICAS CHIREX
(esta información se incluye con cada columna)

PARTE IV – COLUMNAS BIOSEP-SEC-S

PARAMETROS DE LA CORRIDA
• El flujo máximo es una función de la presión
• La presión de la columna NO debe exceder 1000 PSI
• La temperatura maxima es 50 ºC para Acero Inoxidable
(SS) y temperatura ambiente para PEEK

CONSIDERACIONES SOBRE LA FASE MOVIL

• Rango de pH 2.5 a 7.5
• Modificador orgánico máximo: hasta un 100 % aceto-
nitrilo Comience con 100 % acetonitrilo por 50 minutos
ó hasta 90 % de methanol ó 10 % DMSO (Sulfóxido de
metilo) ó 500 mM de B-mercaptoetanol
• Concentración maxima de sal: 0.5 M
PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA
• Remoción general de proteínas: lave con 30 ml de
NaH2PO4 0.1 M a un pH 3.0
• Remoción de proteínas hidrofóbicas: use gradiente de
acetonitrilo
• Proteínas fuertemente adsorbidas: lave con 30 ml. de
SDS al 0.5 % ó Tiocianato de guanidina ó 10 % DMSO.

PARA GUARDAR LA COLUMNA

• Durante la noche: pase la fase móvil a 0.2 ml/min
• Guardado prolongado: use 0.05 % de Azido de sodio
(Na3N) en agua ó 10 % methanol en agua.

PARTE V – COLUMNAS BIOSEP –DEAE- P

PARAMETROS DE LA CORRIDA
• La presión de la columna no debe exceeder 285 PSI
• No exceda de 50 ºC

CONSIDERACIONES SOBRE LA FASE MOVIL

• Rango de pH 2 y 12
• Concentración máxima de sal 1 M
• Capacidad del modificador orgánico: <15 % soluble en
agua.

PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA
• NaOH 0.1 M a 0.2 ml/min durante 1 hora. Re-equilibrar
y probar de nuevo. Repita de ser necesario.
PARA GUARDAR LA COLUMNA
• Para guardarla por la noche, corra con búfer a un flujo
de 0.2 ml/min ó menos. Para un tiempo prolongado
12
guarde la columna en 10 % de metanol.
PARTE VI - COLUMNAS
PolySep-GFC-p
PARAMETROS DE LA CORRIDA
• La presión de la columna no debe exceeder 650 PSI
• No exceda los 60 ºC

CONSIDERACIONES SOBRE LA FASE MOVIL

• Rango de pH entre 3 y 12
• Máxima concentración de sal 0.5 M
• Capacidad del modificador orgánico:

FASE POLYSEP
1000 2000 3000 4000 5000 6000 Linear
Metanol 20 % 95 % 70 % 70 % 70 % 70 % 70 %
Acetronitrilo 20 % 70 % 70 % 70 % 70 % 70 % 70 %

PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA
SDS (Lauril sulfato de sodio) al 0.5 % ó Tiocianato de
guanidina 6 M. Todas las columnas Polysep excepto las
Polysep 1000 deben ser limpiadas tambien con 50 % de
acetonitrilo. Asegúrese que la presión máxima no exceda
650 PSI durante la limpieza

PARA GUARDAR LAS COLUMNAS

Para guardarlas durante la noche, corra con búfer a un
flujo bajo (0.2 ml/min ó menos). Para guardarlas durante
mucho tiempo. Use 0.5 % de NaN3 (Azido de sodio) ó
methanol al 10 %.

PARTE VII - COLUMNAS

PHENOGEL GPC
ESPECIFICACIONES
Matrix: Copolímero de estireno-di-vinilbenceno
Tamaño de partícula: 5, 10, 20 µm
Porosidades: 50 a 1000000 A, y base mezclada
Presión típica: 5 um: 300 psi, 10 um: 200 psi
Presión máxima: 650 psi
Temperatura máxima: 140 ºC (205 ºC límite máximo)
Eficiencia minima* 5 µm: 45,000 platos/metro**
10 µm: 35,000 platos/metro**
Flujos Típicos 4.6 mm ID: 0.35 mL/min
7.8 mm ID: 1.0 mL/min
21.2 mm ID: 7.0 mL/min
Conectores Compatibles con Valco
*probados con THF ** para columnas de 300 mm x 7.8 mm de DI
(diámetro interno)

CONSIDERACIONES SOBRE LAS MUESTRAS

Filtre las muestras siempre, para evitar que los particulados
contaminantes tapen (bloqueen) la columna de GPC. Es
altamente recommendable el uso de un guarda columna
para prolongar la vida de su columna analítica ó preparative.
Para resultados óptimos use la tabla de abajo para
determinar la concentración y los volúmenes de inyección
de las muestras.
Tabla 11
Peso Molecular Concentración (p/v) Volúmen máximo de
<50 K 0.5 % 100 µL
50-600 K 0.25 % 100 µL
600-3000 K 0.05 % 100 µL
>3000 K 0.01% 20 µL
continue on p.16
13
14
Polarity Refractive UV (nm) Boiling Viscosity Solubility in
SOLVENT MISCIBILITY TABLE Solvent Index Index @ 20 °C Cutoff @ 1 AU Point (°C) (cPoise) Water (% w/w)
Acetic Acid 6.2 1.372 230 118 1.26 100
Table 10. Solvent Polarity Chart
Acetone 5.1 1.359 330 56 0.32 100
Relative Compound Representative
Acetonitrile 5.8 1.344 190 82 0.37 100
Polarity Formula Group Solvent Compounds Benzene 2.7 1.501 280 80 0.65 0.18
NONPOLAR R-H | Alkanes | Petroleum ethers, ligroin, hexanes Butyl Acetate 4.0 1.394 254 125 0.73 0.43
Ar - H Aromatics Toluene, benzene n-Butanol 3.9 1.399 215 118 2.98 7.81
R-O-R Ethers Diethyl ether Carbon tetrachloride 1.6 1.466 263 77 0.97 0.08
R-X Alkyl halides Tetrachloromethane, chloroform Chloroform 4.1 1.446 245 61 0.57 0.815
R - COOR Esters Ethyl acetate Cyclohexane 0.2 1.426 200 81 1.00 0.01
R - CO - R Aldehydes Acetone, methyl ethyl ketone 1,2-Dichloroethane1 3.5 1.444 225 84 0.79 0.81
and ketones (MEK) Dichloromethane2 3.1 1.424 235 41 0.44 1.6
R - NH2 Amines Pyridine, triethylamine Dimethylformamide 6.4 1.431 268 155 0.92 100
R - OH Alcohols Methanol, ethanol, Dimethyl sulfoxide3 7.2 1.478 268 189 2,00 100
isopropanol, butanol

Increasing Polarity
Dioxane 4.8 1.422 215 101 1.54 100
R - COHN2 Amides Dimethylformamide Ethyl Acetate 4.4 1.372 260 77 0.45 8.7
R - COOH Carboxylic Ethanoic acid Ethanol 5.2 1.360 210 78 1.20 100
acids di-Ethyl Ether 2.8 1.353 220 35 0.32 6.89
POLAR H - OH Water Water Heptane 0.0 1.387 200 98 0.39 0.0003
 Hexane 0.0 1.375 200 69 0.33 0.001
Methanol 5.1 1.329 205 65 0.60 100
Methyl-t-Butyl Ether4 2.5 1.369 210 55 0.27 4.8
Methyl Ethyl Ketone5 4.7 1.379 329 80 0.45 24
Pentane 0.0 1.358 200 36 0.23 0.004
n-Propanol 4.0 1.384 210 97 2.27 100
iso-Propanol6 3.9 1.377 210 82 2.30 100
di-iso-Propyl Ether 2.2 1.368 220 68 0.37
Tetrahydrofuran 4.0 1.407 215 65 0.55 100
Toluene 2.4 1.496 285 111 0.59 0.051
Trichloroethylene 1.0 1.477 273 87 0.57 0.11
Water 9.0 1.333 200 100 1.00 100
Xylene 2.5 1.500 290 139 0.61 0.018

& Miscible
Immiscible* SYNONYM TABLE
1 4
Ethylene Chloride tert-Butyl Methyl Ether
2 5
Methylene Chloride 2-Butanone
3 6
*Immiscible means that in some proportions two phases will be produced. Methyl Sulfoxide 2-Propanol

Xylene
Water
Trichloroethylene
Toluene
Tetrahydrofuran
di-iso-Propyl Ether
iso-Propanol6
n-Propanol
Pentane
Methyl Ethyl Ketone5
Methyl-t-Butyl Ether4
Methanol
Hexane
Heptane
di-Ethyl Ether
Ethyl Acetate
Ethanol
Dioxane
Dimethyl Sulfoxide3
Dimethylformamide
Dichloromethane2
1,2-Dichloroethane1
Cyclohexane
Chloroform
Carbon tetrachloride
n-Butanol
Butyl Acetate
Benzene
Acetonitrile
Acetone
Acetic Acid

15
 GUARDANDO LA COLUMNA
Solventes como THF (unicamente elTHF estabilizado), cloroformo,
cloruro de metileno y tolueno se usan comunmente para guarder
las columnas. Asegúresere de seguir las instrucciones para
cambiar de solventes si usa otro que no sea THF.(ver páginas 16
y17). Deben usarse aquellos solventes que se mantienen líquidos
a temperatura ambiente y que no son oxidantes.
TENGA EL CUIDADO DE MANTENER LOS TAPONES PLASTICOS
REMOVIBLES DE LOS CONECTORES BIEN APRETADOS CUANDO
NO ESTE USANDO LA COLUMNA, ASI EVITARA EVAPORACION DE
LOS SOLVENTES, ESTA ES LA FUENTE MAS COMUN DE FALLA
EN LAS COLUMNAS.
CONSIDERACIONES AL CAMBIAR SOLVEN-
TES PARA COLUMNAS DE GPC (CROMATO-
GRAFIA DE GEL PERMEABLE) NO ACUOSA.
Las columnas Phenogel son resistentes y compatibles con
muchos solventes. De cualquier forma diferentes solventes
producen diferentes características de absorción (Tabla12). El
Cambio a un solvente inapropiado puede dar como resultado
que la columna quede inservible. Por esto recomendamos
que tenga columnas especificas para los diferentes tipos
de solventes.
Si necesita cambiar los solventes, es MUY IMPORTANTE
considerer lo siguiente:
1. Reducir el flujho a 0.2 ml/min
2. La presión NUNCA debe exceeder 650 psi
3. Comprobar en un matraz que el solvente es miscible ó
buscar la miscibilidad en la tabla de las paginas 14-15
antes de hacer cualquier cambio.
4. Comparar las características de absorción de los
solventes: el anterior comparado con el Nuevo y use la
guía siguiente
• Si el solvente anterior (1) y el solvente Nuevo (2) están en
la misma categoría de absorción (Tabla12) comprobar la
miscibilidad del solvente y proceda al cambio.
• Si el solvente (1) y el solvente (2) pertenecen a categories
sucesivas (Tabla 12) de acuerdo a las flechas en la Tabla
12, verifique la miscibilidad y despues proceda a cambiar
el solvente.
• Si los solventes (1) y (2) no pertenecen a la misma categoría,
primero cambie a un solvente intermedio como se indica
en las flechas de la Tabla 12.
Tabla 12
A – 70-80 % de Absorción
Tolueno TCB
THF p-Xileno
Chloroformo Ciclopentano
Benceno Piridina
o-diclorobenceno
B- 60 % de Absorción
Eter etílico Ciclopentano
Cloruro de metileno Acetato de etilo
Metil, etil cetona
C – 50 % de Absorción
Acetona Dimetil acetamida
m-Cresol N-Methyl Pyrrolidone
o-Clorofenol DMSO
Dimetil formamida Dioxano

D- 30 % de Absorción
Acetonitrilo Freon 113  Alcohol n-butílico
Ciclohexano HFIP Metanol
n-Hexano Isopropanol
16
 PHENOGEL PORE SIZE Suggested PHENOGEL PORE SIZE Suggested
Linear Operating Linear Operating
Mobile Phase Solvent 50 Å 100 Å 500 Å 103 Å 104 Å 105 Å 106 Å & Mixed Temperature 3 4 5 6 Temperature
Mobile Phase Solvent 50Å 100Å 500Å 10 Å 10 Å 10 Å 10 Å & Mixed
Acetone Y Y Y Y Y Y Y Y Hexane Y Y Y Y Y Y Y Y
Benzene Y Y Y Y Y Y Y Y m-Cresol Y* Y Y Y Y Y Y Y 100 °C
Carbon Tetrachloride Y Y Y Y Y Y Y Y Methyl Ethyl Ketone Y Y Y Y Y Y Y Y
Chloroform Y Y Y Y Y Y Y Y Methylene Chloride Y Y Y Y Y Y Y Y
30 % HFIP/chloroform Y Y Y Y Y Y Y Y o-Chlorophenol Y* Y Y Y Y Y Y Y 100 °C
Diethyl Ether Y Y Y Y Y Y Y Y o-Dichlorobenzene Y* Y Y Y Y Y Y Y 135 °C
Tabla 13

Dimethylacetamide (DMAC) Y* Y Y Y Y Y Y Y 60 °C Quinolin Y* Y Y Y Y Y Y Y 60 °C

Dimethylformamide (DMF) Y* Y Y Y Y Y Y Y 60 °C Tetrahydrofuran Y Y Y Y Y Y Y Y
Dioxane Y Y Y Y Y Y Y Y Toluene Y Y Y Y Y Y Y Y
DMSO Y* Y Y Y Y Y Y Y 60 °C
Trichlorobenzene Y* Y Y Y Y Y Y Y 135 °C
Ethyl Acetate Y Y Y Y Y Y Y Y
Water N N N N N N N N
Hexafluoroisopropanol (HFIP) Y Y Y Y Y Y Y Y
FOR PHENOGEL GPC COLUMNS

Xylene Y Y Y Y Y Y Y Y
SOLVENT COMPATIBILITY CHART

*Not recommended on 5 µm 50 Å columns. N = Not Compatible Y = Compatible

17
 PARTE VIII - COLUMNAS
POLIMERX RP
ESPECIFICACIONES
• Matrix: Poliestiren-divinilbenceno (PSDVB)
• Tamaño de particular: 3, 5, 7, 10 µm
• Tamaño de poro 100 Å
PARAMETROS DE LA CORRIDA
• Temperatura maxima: 60 ºC
• Presión maxima: 5000 psi
CONSIDERACIONES SOBRE LA FASE MOVIL
• Rango del pH 0-14
• Evitar búfer de >0.5N

PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA
• 100 % de agua a 100 % de Acetonitrilo. Repita 3 veces
PARA GUARDAR LA COLUMNA
• 75:25 Acetontrilo/agua

PARTE IX - PRUEBA DE PROTECCION Y

COMPORTAMIENTO DE LA
COLUMNA PARA HPLC.
• Prolongue la vida de su columna
• Reduzca el desgaste del sistema
• Ahorre tiempo y dinero
FILTROS PHENEX PARA
JERINGAS
• Aumentan el tiempo de vida de la columna (ahorre
dinero)
• Aseguran resultados mas precisos
• Eliminan micropartículas dañinas
Los particulados pueden dañar el costoso equipo, válvulas,
columnas y bombas. Pueden también conducir a resultados
analíticos erroneos. Es muy importante hacer un prefiltrado de
las muestras antes del analísis para prevenir que los frits y la
columna se bloqueen y se tapen, que se desgasten los sellos
(juntas), y que la presión resulte anormalmente alta.
TABLA 14
Volúmen de la Volúmen
muestra ó Membrana retenido (µL)
de la fase del filtro despues de
móvil.(ml) (díametro, mm Formato purga con aire
<1 4 Filtro para jeringa < 20
1 to 10 17 Filtro para jeringa < 40
10 to 100 30 Filtro para jeringa < 140
> 100 47 Disco de membrana –
> 1000 90 Disco de membrana –
Información para ordenar
Número de Tamaño de
Membrana Phenex Housing*
catálogo Cubierta poro (µm)
30 mm de díametro (Caja de 100)
AF0-7524 | 0.45 | Acetato de celulosa | MA
AF0-7526 0.45 Nylon PP
AF0-7525 0.20 Nylon PP
AF0-7529 0.20 PTFE PP
AF0-7530 0.45 PTFE PP
AF0-8143 0.45 PES PP
AF0-7531 0.45 PVDF PP
30 mm de díametro (Caja de 500)
AF0-7532 0.45 Nylon PP
AF0-7534 0.45 PTFE PP
Ordering information continued on next page
18
Número de Tamaño de
Membrana Phenex Housing*
catálogo Cubierta poro (µm)
30 mm de díametro (Caja de 100))
AF0-7535 0.22 Nylon PP
AF0-7536 0.45 Nylon PP
AF0-7538 0.22 PTFE PP
AF0-7539 0.45 PTFE PP
17 mm de díametro (Caja de 500)
AF0-7540 | 0.45 | Nylon | PP
4 mm de díametro (Caja de 100)
AF0-3368 | 0.45 | Polypropileno | PP
AF0-0419 0.20 Nylon PP
AF0-0420 0.45 Nylon PP
AF0-0421 0.20 PTFE PP
AF0-0422 0.45 PTFE PP
*MA = Acrílico modificado, PP = Polipropileno, PVDF = Difluoruro de
Polivinildeno, PTFE = Tetrafluoroetileno PES = Polietersulfona
(1) Los filtros para jeringas (jeringuillas) no están esterilizadas. Los filtros con
cubierta u membranas de nylon ó de teflón pueden ponerse en el autoclave. Los
filtros con cubierta acrílica ó aquellos de 4 mm con cubierta de polipropileno NO
deben ponerse en el autoclave.
(2) Si desea adquirir grandes cantidades con ahorros importantes contacte a su
representante ó a su distribuidor Phenomenex.

GUIA DE SELECCION DE FILTROS DE MEMBRANA

Tipo de membrana Acetato de Celulosa
Aplicacion: Muy baja retención de protieínas. Con
prefiltros de cristal, es una membrana excelente para
filtración de medios de cultivo de tejidos,filtración y
clarificación de muestras biológicas en general. No es
resistente a la mayoría de los solventes
Tipo de membrana Polipropileno (PP)
Aplicacion: Las membranas de polipropileno
hidrofóbicos son buenas para filtrar prácticamente todas las
muestras de HPLC y de GC. La membrana es muy resistente
a los solventes y puede resistir los productos químicos más
agresivos. Es altamente recondable para filtrar muestras
acuosas. La fijación baja en proteínas da recuperaciones
muy altas (92 %) comparando con las membranes de nylon
(69 %). Los HPLC con detectores de UV demuestran que
estas membranas han sido optimizadas para asegurar un
mínimo de extraibles y picos falsos.
Tipo de membrana: Nylon
Aplicacion: Para filtración de muestras y solventes en
general, el nylon tiene caracteríticas hidrofílicas intrínsicas
por lo que trabaja bien con todas las muesttras acuosas
al igual que con aquellas a base de solventes. El nylon es
excelente en la preparación de solventes y muestras para
HPLC ó GC.
Tipo de membrana Poliéter sulfonas y
Difluoruro de polivinideno (PVDF)
Aplicacion:: Both membranes exhibit very low protein
binding. Both can be used for general biological sample
filtration and sterilization. Polyvinylidene Difluoride (PVDF) is
especially useful in HPLC sample preparation and is highly
resistant to most solvents. Polysulfone has very limited
resistance to solvents and is generally used for aqueous-
based biological samples. Both membranes exhibit good
flow rate characteristics.
Tipo de membrana Polytetrafluoroetileno PTFE (Teflón).
Aplicacion: Una membrana intrínsicamente hidrofóbica
que resulta muy apropiada para la filtración de muestras y
solventes de base orgánica tanto acídicos como básicos.
Ampliamente usado para cromatografía y para clarificación
de muestras no acuosas aunque esta membrana es
hidrofóbica puede hacerse hidrofílica humedeciendo
la membrana con alcohol y lavando después con agua
deionizada.
19
 SISTEMA DE
GUARDA CARTUCHO
SecurityGuard proporciona un magnifico balance entre
la conveniencia de protejer la columna y el costo de la
protección. Si usted ha usado otro sistema de protección
ó los guarda columnas convencionales, quedará muy
agradablemente sorprendido cuando vea lo práctico y efectivo
que resulta SecurityGuard. Este avanzado sistema con diseño
patentado ofrece algunas carateristicas únicas no disponibles
hasta hace poco tiempo
Limpio Sucio
CONVENIENCIA
Saber cuando remplazar su guarda no es más una
incognita, la caracteristicas de SecurityGuard le permite
inspeccionar visualmente el cartucho para decidir cuando
debe cambiarlo.

PROTECCION ADICIONAL
SecurityGuard offers the option of stacking two cartridges
in the same holder, using the simple stacking ring provided.
Extra length provides extra protection. When the first cartridge
becomes exhausted, contaminants are retained by the second
cartridge.

VERSATILIDAD
La conexión del guarda cartucho se ajusta convenientemente
con los dedos para conectarse prácticamente a cualquier
marca columna. ¿Como puede un guarda cartucho conectarse
directamente y al mismo tiempo su conexión ser universal
cuando las conexiones tienes diferentes caracteristicas? La
respuesta es que el largo de la punta de acero inoxidable del
guarda cartucho se ajusta automáticamente a la profundidad
del conector de la columna. La conexión de ajuste con los
dedos de SecurityGuard puede soportar presiones de hasta
5000 psi y es completamente inerte y biocompatible.

PRECISION
Los cartuchos pueden usarse practicamente en cualquier
columna con fase similar sin afectar: la eficiencia, tiempos
retención, ó presión. Hay una selección de 26 fases diferentes
incluyendo cartuchos para cualquier aplicación, para
aplicaciones farmaceúticas, para proteínas y polipeptidos, para
exclusión acuosa de tamaño, carbohidratos y aplicaciones con
ácidos orgánicos. Las fases de Security Guard pueden usarse
con columnas conteniendo empaques con tamaño de partícula
de 3, 3.5, 4, 5,10 um ó de un tamaño de partícula mayor.
INFORMACION PARA ORDENAR
Juego de ensamble analítico
Nº de Catálogo. Descripción Unidad
KJ0-4282 | Juego de Guarda Cartucho | ea

El juego incluye: 1 guarda cartucho, 3 férulas de PEEK, 2 anillos de

ensamble, 2 terminales macho de PEEK de ajustar con los

Funda para cartuchos semi preparativos

y preparativos de 10.0 y 21.0 mm
Nº de Catálogo Descripción Unidad
AJ0-7220 | Funda para cartuchos de 10.0 mm de DI | ea
AJ0-7838 Funda para cartuchos de 21.0 mm de DI ea

Semi-Preparative Preparative

20
Sí el diámetro interno (DI) de su columna para HPLC es de:
2.0-3.0 3.1-8.0 9-16 18-30

Use cartuchos de (mm):

4.0 x 2.0 4.0 x 3.0 10 x 10 15 x 21.2

Cartuchos- Uso general / farmaceútico

Descripción Estabilidad Dimensiones
Nº de catálogo del material a pH L x ID(mm) Unidad
AJ0-4286 | C18 (ODS, octadeci) | 1.5-10 | 4x2.0 | 10/pq
AJ0-4287 C18 (ODS, octadeci) 1.5-10 4x3.0 10/pq
AJ0-7221 C18 (ODS, octadeci) 1.5-10 10x10 3/pq
AJ0-7839 C18 (ODS, octadeci) 1.5-10 15x 21 cada uno
AJ0-6073 C12 (dodecil) 1.5-10 4x2.0 10/pq
AJ0-6074 C12 (dodecil) 1.5-10 4x3.0 10/pq
AJ0-7275 C12 (dodecil) 1.5-10 10x10 3/pq
AJ0-7842 C12 (dodecil) 1.5-10 15x 21 cada uno
AJ0-4289 C8 (octal, MOS) 1.5-10 4x2.0 10/pq
AJ0-4290 C8 (octal, MOS) 1.5-10 4x3.0 10/pq
AJ0-7222 C8 (octal, MOS) 1.5-10 10x10 3/pq
AJ0-7840 C8 (octal, MOS) 1.5-10 15x 21 cada uno
AJ0-4292 C5 (pentil) 1.5-10 4x2.0 10/pq
AJ0-4293 C5 (pentil) 1.5-10 4x3.0 10/pq
AJ0-7372 C5 (pentil) 1.5-10 10x10 3/pq
AJ0-4298 C1 (TMS) 2-9 4x2.0 10/pq
AJ0-4299 C1 (TMS) 2-9 4x3.0 10/pq
AJ0-7373 C1 (TMS) 2-9 10x10 3/pq
AJ0-4347 Silica — 4x2.0 10/pq
AJ0-4348 Silica — 4x3.0 10/pq
AJ0-7223 Silica — 10x10 3/pq
AJ0-7229 Silica — 15x 21 cada uno
AJ0-4301 NH2 (amino, aminopropil) 4x2.0 10/pq
AJ0-4302 NH2 (amino, aminopropil) 4x3.0 10/pq
AJ0-7364 NH2 (amino, aminopropil) 10x10 3/pq
AJ0-8162 NH2 (amino, aminopropil) 15x 21 cada uno
AJ0-4304 CN (ciano, cianopropil) 4x2.0 10/pq
AJ0-4305 CN (ciano, cianopropil) 4x3.0 10/pq
AJ0-7313 CN (ciano, cianopropil) 10x10 3/pq
AJ0-4350 Phenyl (fenil, fenil –hexil) 4x2.0 10/pq
AJ0-4351 Phenyl (fenil, fenil –hexil) 4x3.0 10/pq
AJ0-7314 Phenyl (fenil, fenil –hexil) 10x10 3/pq
AJ0-7841 Phenyl (fenil, fenil –hexil) 15x 21 cada uno
AJ0-4307 SCX (SA, Intercambio catiónico fuerte) 4x2.0 10/pq
AJ0-4308 SCX (SA, Intercambio catiónico fuerte) 4x3.0 10/pq
AJ0-7369 SCX (SA, Intercambio catiónico fuerte) 10x10 3/pq
AJ0-4310 SAX (SA, Intercambio catiónico fuerte) 4x2.0 10/pq
AJ0-4311 SAX (SA, Intercambio catiónico fuerte) 4x3.0 10/pq
AJ0-7370 SAX (SA, Intercambio catiónico fuerte) 10x10 3/pq
AJ0-5808 RP-1(polímero de fase reversa) 4x2.0 10/pq
AJ0-5809 RP-1(polímero de fase reversa) 4x3.0 10/pq
AJ0-7368 RP-1(polímero de fase reversa) 10x10 3/pq
AJ0-6075 Polar-RP (fenil éter enlazados) 4x2.0 10/pq
AJ0-6076 Polar-RP (fenil éter enlazados) 4x3.0 10/pq
AJ0-7276 Polar-RP (fenil éter enlazados) 10x10 3/pq
AJ0-7845 Polar-RP (fenil éter enlazados) 15x 21 cada uno
AJ0-7556 Fusion-RP (Inserto polar de C18) 4x 2.0 10/pq
AJ0-7557 Fusion-RP (Inserto polar de C18) 4x3.0 10/pq
AJ0-7558 Fusion-RP (Inserto polar de C18) 10x10 3/pq
AJ0-7844 Fusion-RP (Inserto polar de C18) 15x 21 cada uno
AJ0-7510 AQ C18 (C 18 Polar endcapped) 4x2.0 10/pq
AJ0-7511 AQ C18 (C 18 Polar endcapped) 4x3.0 10/pq
AJ0-7512 AQ C18 (C 18 Polar endcapped) 10x10 3/pq
AJ0-7843 AQ C18 (C 18 Polar endcapped) 15x 21 cada uno
AJ0-7596 Gemini C18 (tecnología gemela C18) 4x2.0 10/pq
AJ0-7597 Gemini C18 (tecnología gemela C18) 4x3.0 10/pq
AJ0-7598 Gemini C18 (tecnología gemela C18) 10x10 3/pq
AJ0-7846 Gemini C18 (tecnología gemela C18) 15x 21 cada uno
21
 Cartuchos de fase reversa para proteínas y polipéptidos.

Para usarse con todas las columnas a base de sílica

para la separación de proteínas y péptidos como Jupiter
(Phenomenex); Vydac 218TP, 214TP (Grace Vydac);
Synchropack 300A C18, C4 (Eprogen, Inc.); Nucleosil 300A
C18, C4; Hypersil 300A, y todas las otras columnas de poros
grandes (widepore) ó marcas con poros de 300 A.
Descripción Estabilidad Dimensiones
Nº de catálogo del material a pH L x ID(mm) Unidad
AJ0-4320 | Widepore C18 (ODS) | 1.5-10 | 4x2.0 | 10/pq
AJ0-4321 Widepore C18 (ODS) 1.5-10 4x3.0 10/pq
AJ0-7224 Widepore C18 (ODS) 1.5-10 10x10 3/pq
AJ0-7230 Widepore C18 (ODS) 1.5-10 15x 21 cada uno
AJ0-4326 Widepore C5 (pentil) 1.5-10 4x2.0 10/pq
AJ0-4327 Widepore C5 (pentil) 1.5-10 4x3.0 10/pq
AJ0-7371 Widepore C5 (pentil) 1.5-10 10x10 cada uno
AJ0-4329 Widepore C4 (butil) 1.5-10 4x2.0 10/pq
AJ0-4330 Widepore C4 (butil) 1.5-10 4x3.0 10/pq
AJ0-7225 Widepore C4 (butil) 1.5-10 10x10 3/pq
AJ0-7231 Widepore C4 (butil) 1.5-10 15x 21 cada uno

Cartuchos para Cromatografía de Filtración de Gel (GFC)

base de sílica.

Para usarse con todas las columnas a base de sílica para

columnas GFC como columnas BioSep (Phenomenex);
TSK SW, SWXL (Tosoh); Zorbax GF-series; Bio-Sil (Bio-Rad).
Descripción Estabilidad Dimensiones
Nº de catálogo del material a pH L x ID(mm) Unidad
AJ0-4487 | GFC-2000 | 2-7.5 | 4x3.0 | 10/pq
AJ0-7365 GFC-2000 2-7.5 10x10 3/pq
AJ0-4488 GFC-3000 2-7.5 4x3.0 10/pq
AJ0-7366 GFC-3000 2-7.5 10x10 3/pq
AJ0-4489 GFC-4000 2-7.5 4x3.0 10/pq
AJ0-7367 GFC-4000 2-7.5 10x10 3/pq

Cartuchos para carbohidratos y ácidos orgánicos

Para análisis de ácidos orgánicos como Rezex ™ (Phe-
nomenex); Aminex® (Bio-Rad); Interaction,
Sugar-Pak (Waters).
Descripción Estabilidad Dimensiones
Nº de catálogo del material a pH L x ID(mm) Unidad
AJ0-4490 | Carbo-H+ | 1.0 -7.5 | 4x3.0 | 8/pq
AJ0-4491 Carbo-Ag+* Neutral 4x3.0 8/pq
AJ0-4492 Carbo-Pb+2 Neutral 4x3.0 8/pq
AJ0-4493 Carbo-Ca+2 Neutral 4x3.0 8/pq
*Para uso con columnas para sacáridos y oligosacáridos en forma de
Ag+ form

Repuestos
Nº de catálogo Descripción Unidad
AJ0-4283 | Férulas de PEEK | 3/pq
AJ0-4285 Anillos de ensamble 2/pq
AQ0-1389 Tuerca macho de PEEK (biocompatible) 10/pq
AJ0-4284 Llaves para el Security Guard 2/pq
AQ0-7876 Acoplador Prep.de acero inoxidable
(SS) con conectores /16” Pulg. DE x 0.020
1

Pulg. DI x 50 mm L cada uno

AQ0-7877 O-Rings PREP (de fluorocarbono)
1 Pulg. DE x 7/8” Pulg.
DI x 1/16” Pulg. CS 2/pq

22
Equipo de prueba para el
sistema de HPLC
• Diagnostica problemas de hardware rápida y fácil-
mente.
• Evita reparaciones costosas e inecesarias.
• Verificación sencilla de los sistemas de HPLC usando
una columna estándar C18.
• Verifica el correcto funcionamiento de las conexiones y
de la instalación del sistema.
• Aisla rápidamente los problemas de desarrollo de
métodos.
• Reduce los tiempos de paro del instrument
Cada equipo de prueba
contiene lo siguiente:
1. Columna Phenomenex de
5 um C18 50 X 4.6 mm
2. Cinco viales con mezcla para prueba isocrática.
3. Cinco viales con mezcla de prueba de gradiente.

Información para ordenar

Nº de catálogo Descripción Unidad
CH0-1684 | Equipo de prueba para sistema de cada uno
HPLC de fase reversa, que
incluye columna C18 y mezclas para
prueba isocrática y de gradiente.
CH0-1685 Mezcla de prueba isocrática 5/pq
CH0-1686 Mezcla de prueba de gradiente 5/pq

Estándares de referencia
para el comportamiento
de la columna
• Una forma muy conveniente de comprobar el compor-
tamiento de la columna
• Facil de usar y a precio asequible.
Phenomenex ofrece una linea completa de estándares
que pueden ser de gran utilidad en la evaluación del
comportamiento de las columnas. Recomendamos usar
estos estándares de verificación al recibir sus columnas y
y periódicamente durante la vida de ellas. Las condiciones de
chequeo están localizadas en la caja de la columna.

FASE NORMAL Nº de Catálogo AL0-3033

(Para Si, NH2, NO2, alumina, y PAC)
Unidades: 2 mL
Contiene: Meta-xyleno, nitrobenceno

FASE REVERSA 1 Nº de Catálogo AL0-3034

(Para C1, C18, CN y fenil)
Unidades: 2 mL
Contiene: Uracil, benzamida, benzofenona,
benceno Bifenilo

FASE REVERSA 2 Nº de Catálogo AL0-3045

Para Prodigy (C8), ODS (2), ODS (3); Luna C5, C8, C18,
CN, Fenil-Hexil; Jupiter, C4, C5, C18, Proteo; Columbus
C8, C18; Aqua, Synergy, PhenoSphere NEXT C8, C18;
Unidades: 2 mL
Contiene: Uracil, acetofenona, benceno,
toluene, naftaleno
(Favor de referirse a los datos de pruebas específicas de Control de
Calidad para Jupiter y Luna).

23
 Estándares de referencia
para el comportamiento
de la columna (continúa)
MEZCLA 1 DE CARBOHIDRATOS Nº de Catálogo AL0-3035
(Para Rezex RNM, RAM y otras columnas para el análisis
de carbohidratos)
Unidades: 2 mL
Contiene: Hidrato de maltotriosa, maltosa y ribitol.

MEZCLA 2 DE CARBOHIDRATOS Nº de Catálogo AL0-3036

(Para Rezex RPM y otras columnas para el análisis de
carbohidratos)
Unidades: 2 mL
Contiene: Melicitosa, glucosa, fructosa, ribitol

MEZCLA 3 DE CARBOHIDRATOS Nº de Catálogo AL0-3037

(Para Rezex RCM y otras columnas para el análisis de
carbohidratos)
Unidades: 2 mL
Contiene: Melicitosa, manosa, maltosa, fructose,
glucose, ribitol.

ESTANDAR DE OLIGOSACARIDOS Nº de Catálogo AL0-3038

(Para Rezex RSO y otras columnas para el análisis de
oligosacáridos)
Unidades: 2 mL
Contiene: Sirope ligero de maíz

ESTANDAR PARA ACIDOS ORGANICOS Nº de Catálogo AL0-3039

(Para Rezex ROA y otras columnas para el análisis de
ácidos orgánicos)
Unidades: 2 mL
Contiene: Acido oxálico, ácido sucínico, ácido cítrico,
ácido fórmico, Ácido tartárico

INTERCAMBIO CATIONICO Nº de Catálogo AL0-3040

(Para SCX*, SA*, CM*)
Unidades: 2 mL
Contiene: Uracil, cistosina
• SCX intercambio catiónico fuerte
• SA ácido fuerte
• CM carboximetil

INTERCAMBIO ANIONICO Nº de Catálogo AL0-3041

(Para SAX*, SB*, DEAE*PEI*)
Unidades: 2 mL
Contiene: Uridine, UMP
• SB base fuerte
• DEAE etil dietilamina
• PEI Uridina, UMP

*SEC 1 ACUOSA Nº de Catálogo AL0-3042

(Para Biosep SEC-S y otras columnas SEC para proteínas)
Unidades: en seco, reconstituida a 2 ml
Contiene: gamma-globulina bovina
triglobulina humana
ovalbumina
mioglobina
uridina
24 (reconstitute with 1 mL of 100 mM Phosphate buffer pH=6.8)

• SEC = cromatografía de exclusión por tamaño

Estándares de referencia
para el comportamiento
de la columna (continúa
*SEC 1 ACUOSA NSEC 2 ACUOSA
Nº de Catálogo AL0-3043
(Para Polysep *GFC-P y otras columnas para análisis
acuo-soluble)
Unidades: 2 mL
Contiene: etilenglicol
• GFC-P = cromatografía de filtración de gel
• GFC-P = cromatografía de filtración de gel.
STAR ION A300 Nº de Catálogo AL0-3420
Unidades: 2 mL
Contiene: Conc. (mg/mL)
Fluoruros 5
Nitratos 20
Cloruros 10
Fosfatos 30
Nitritos 20
Sulfatos 20
Bromuros

POLYMERX RP-1 Nº de Catálogo AL0-7260

Unidades: 2 mL
Contiene: Conc. (mg/mL)
Cistosina 40
Uracil 40
Uridina 1000

MEZCLA Nº 1 PARA QUIRALES Nº de Catálogo AL0-3046

Aplicable a las columnas Chirex siguientes: 3001, 3005
Unidades: 2 mL
Contiene: 1. S-(+)-2,2,2-trifluoro-1-(9-antril)
etanol CAS [60646-30-2]
2. R-(-)-2,2,2-trifluoro-1-(9-antril)
etanol CAS [53531-34-3]

MEZCLA Nº 2 PARA QUIRALES Nº de Catálogo AL0-3047

Aplicable a las columnas Chirex siguientes:
3010,3011,3012
Unidades: 2 mL
Contiene: N-dansil-DL-valina
(sal de ciclohexilamonio)
CAS[84540-67-0]

MEZCLA Nº 3 PARA QUIRALES Nº de Catálogo AL0-3048

Aplicable a las columnas Chirex siguientes: 3014, 3017,
3018, 3019, 3020, 3022
Unidades: 2 mL
Contiene: 1. (R)-(-)-N-(3,5-dinitrobenzoil)- -
metilbencilamina CAS [69632-32-2]
2. (S)-(-)-N-(3,5-dinitrobenzoil)-
metilbencilamina CAS[69632-31-1]

MEZCLA Nº 4 PARA QUIRALES Nº de Catálogo AL0-3049

Aplicable a las columnas Chirex de fase 3126
Unidades: 2 mL
Contiene: DL-ácido aspártico CAS [617-45-8]

25
 PARTE X – EXTRACCION POR
FASE SOLIDA (SPE ó EFS)

Aumente el tiempo de vida de la columna y del

instrumento, inyectando muestras que han sido purificadas
con Strata.

STRATA™ - sorbentes tradicionales.

Tubos y platos de 96.

• Flujo óptimo
• Reproducibilidad de lote a lote
• Amplio rango de selección
• Fases disponibles: C18-E, C18-U, C18-M, C18-T, C8,
fenil, SDB-L, CN, Si-1, WCX, FI-PR, NH2, SAX, SCX.

STRATA – sorbentes poliméricos.

Tubos y platos de 96.

• Resistentes al deacondicionamiento
• Bajos volúmenes de elución
• Alta capacidad de analitos
Strata X Para limpieza simplificada de compuestos polares
y no polares.
Strata X-C Para extracción selective de compuestos
básicos.

STRATA Sorbentes rapidos

• Fases polares ó no polares
• Distribución de particulas limitada
• Puede usarse en escala directa
Los tubos Strata Giga™ están disponibles en formatos de
12,20,60 y 150 ml.
Sepra™ Bulk disponible desde gramos hasta kilogramos

STRATA Cartuchos en linea

• Extracción y concentración rápida
• Análisis de inyección directa FLOW
• Puede ser automatizada fácilmente
Strata -X para compuestos polares
Strata C18 para compuestos no polares
Strata C8 para compuestos de polaridad intermedia

26
PARTE Xi – ACCESORIOS
PARA HPLC

CALENTADOR THERMASPHERE TS-130 PARA UNA

SOLA COLUMNA
• Compacto, de bajo costo controla con mucha preci-
sion temperatures de 25 a 90 ºC
• Mejora la repoducibilidad y los resultados de cromato-
grafía
• Reduce los errors de identificación de los analitos
• Mejora la linea base y el comportamiento del detector
• Mejora la eficiencia del pico y la cuantificación
del analito
• Mejora el cumplimiento de los
límites de aceptación de
la separación dentro
del laboratorio
Y entre un
laboratorio
y otro

INFORMACION PARA ORDENAR

ThermaSphere™ TS-130
Nº de catálogo Descripción
EH0-7057 | Calentador de columnas ThermaSphere TS-130
25-90 ºC, 95 a 265 VAC, 50/60 Hz
EH0-7058 Soporte para calentador de columnas de HPLC
ThermaSphere TS-130.
Para más accesorios disponibles, vea el catálogo de Phenomenex.

ACCESORIOS
• Regulador de presión
• Productos biocompatibles no metálicos
• Conectores y difusores
• Productos para filtración
• Férulas, septas, liners, sellos dorados para CG
• Inyectores y espirales para inyector
• Artículos para el manejo de fase móvil
• Juegos y estandares de polímeros para calibración
• Sellos para rotores, y estatores
• Recipiente para solventes y botellas para reactivos
• Consumibles para SPE, tubos y platos multiples
• Válvulas de cambio
• Jeringas
• Herramientas
• Tubo, conectores, frits y unions
• Válvulas
• Viales, tapas y septas
EQUIPO
• Enfriador-Calentador de columnas
• Calentador de columnas
• Selector de columnas
• Desgasificadores
• Procesadores de fluidos
• Medidores de flujo para CG
• Recicladores
• Controladores de temperature

Para ordenar y para información adicional, contacte a su Consultor Técnico

27
 GARANTIA PHENOMENEX
Se garantiza que los productos Phenomenex cumplen con los
parámetros de comportamiento y calidad establecidos
y que están libres de defectos de fabricación. La garantía deja
de tener efecto y Phenomenex no asume ninguna
responsabilidad cuando existe un mal uso del producto. No
existe ningun otro tipo de garantía expresa de Phenomenex
para sus productos con respecto a mercancias, ajuste
para un propósito en particular, ó de cualquier otra forma.
Phenomenex no será responsible bajo ninguna circunstancia
por daños incindentales, consecuentales ó compensatorios
que vengan del uso ó en conjunción con sus productos.
La responsabilidad máxima que puede ser asumida por
Phenomenex con respecto a la garantía es el precio de
facturación del producto.

GARANTIA ESPECIFICA DE LAS

COLUMNAS PARA HPLC
Phenomenex garantiza la calidad de sus columnas de acuerdo
a los siguientes términos y condiciones. Phenomenex
re-empacará, remplazará sin costo ó devolverá la cantidad
cargada en la compra de una columna (a nuestra discreción)
si la columna falla en comportarse satisfactoriamente. Las
columnas que sean devueltas tienen que tener una
autorización de devolución (Return Authorization ó R.A.)
emitida por Phenomenex. Los productos defectuosos deben
acompañarse por una explicación por escrito describiendo la
falla. La aprobación está sujeta a la exclusions siguientes:
• Toda columna debe ser probada al recibirla y calquier
deficiencia debe reportarse a Phenomenex a más
Tardar 15 días después de recibirla.
• El tiempo máximo de garantía es de 90 días para colum-
nas de HPLC a menos que exista una acuerdo previo que
establezca alguna condición diferente. LAS COLUMNAS NO
PUEDEN DEVOLVERSE DESPUES DE 45 SIN AUTORIZACION
PREVIA.
• Remover los conectores (end fittings) de la columna
AUTOMATICAMENTE nulifica la garantia.
• La garantía del comportamiento de la columna está lim-
itada a las condiciones del cromatograma original de
prueba de calidad de la columna.

• El daño físico de la columna a mal uso, abuso ó percance

incluyendo golpe mecánico

• Daño químico del material de empaque debido a la oper-

ación bajo condiciones químicas de temperatura ó presión
incorrectas

• Fallas debido a a presión de regreso muy alta causado por

solvente ó por práctica de filtrado inapropiados que causen
aumento en el particulado o precipitación en el conector ó
en la columna.

• Selección incorrecta por parte del cliente del material de

empaque, para un uso en particular ó incompatibilidad
con el equipo etc.

• Para productos suplidos pero no fabricados por Phe-

nomenex, la garantía se limita a los terminos ofrecidos
por el fabricante original.

28
column protection guide
COLUMN PERFORMANCE RECORD

Column: ____________________________________

Dimensions: _________________________________

Serial No.: __________________________________

Dates Sample/ No. Back- Storage

User
Used Method Injections Pressure Solvent