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Gérmenes
del tracto
respiratorio
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24
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Técnicos Especialistas en Laboratorio del Servicio Andaluz de Salud
ÍNDICE
1. Introducción
2. Infecciones del tracto respiratorio superior (faringe y nasofaringe)

2.1. Faringitis
2.2. Laringitis
2.3. Epiglotis
2.4. Sinusitis
2.5. Angina fusoespiralar de vincent:
2.6. Traqueobronquitis:
2.7. Recolección y transporte de muestras trs
2.8. Otitis media
2.9. Otitis externa
3. Gérmenes del tracto respiratorio inferior (tri).

3.1. Introducción
3.2. Etiología de las infecciones del tri
3.3. Obtención de muestras del tri
4. Transporte
5. Conservación
6. Análisis macroscópico
7. Análisis microscópico
Gérmenes del tracto respiratorio
1. Introducción
El tracto respiratorio comienza en la nariz y boca, extendiéndose a través de la
nasofaringe hasta la traquea y pulmones. La traquea se divide en bronquios y éstos
en bronquiolos finalizando en los alvéolos pulmonares. Nuestro organismo está do-
tado de mecanismos de protección frente a infecciones, como mucus, pelo, pasajes
tortuosos, IgA secretora para impedir que posibles microorganismos alcancen los
pulmones (que en condiciones normales son estériles).
Los huéspedes sanos presentan una flora continua en el tracto respiratorio supe-
rior que previene la colonización de posibles microorganismos patógenos, aunque
en determinadas circunstancias pueden provocar la enfermedad. En cambio, existen
otros microorganismos que, en caso de aislarse en tracto respiratorio se consideran
causantes de enfermedad.
2. Infecciones del tracto respiratorio superior

(faringe y nasofaringe)
En multitud de ocasiones los microorganismos causantes de infecciones en el tracto
respiratorio superior (TRS) son transportados por aerosoles a partir de las secreciones
del individuo infectado que llegan al huésped por contacto íntimo, hacinamiento o ma-
las condiciones higiénicas. Al entrar en contacto con la mucosa se adhieren a ella y se
multiplican. El número de microorganismo que se aíslan en los cultivos de TRS es muy
elevado, aunque las patologías son ocasionadas por un pequeño porcentaje de ellos.
Las infecciones del tracto respiratorio superior más frecuentes son: laringitis, fa-
ringitis, epiglotitis, sinusitis, otitis externa y media, difteria, tos ferina, angina de Vin-
cent y candidiasis oral.
La flora normal de las vías respiratorias altas se deben conocer para la interpretación
de los resultados de laboratorio. Son comensales de las vías respiratoria superiores:
– Streptococcus sp (alfa, beta, no hemolítico).
– Neisseria spp.
– Haemophilus sp.
– Corynebacterium sp.
– Staphylococcus sp.
– Micrococus sp.
– Veillonella sp.
– Peptostreptococcus sp.
– Actynomyces sp.
– Mycoplasma sp.
– Bacteroides sp.
– Fusobacterium sp.
– Candida sp.
Un estudio microscópico de un frotis faríngeo es una prueba bastante solicitada

sobre todo para la población infantil, siendo de utilidad para:
– Diagnosticar angina estreptocócica (estreptococo  hemolítico del grupo A-
SBHA-), difteria, muguet, angina de Vincent e infecciones por Haemophilus.
– Establecer focos de infección en casos de fiebre reumática, glomerulonefritis
hemorrágica aguda, escarlatina (causada por SBHA), endocarditis o tos ferina.
– Detectar portadores de SBHA, S. Aureus, N. meningitidis, C. diphteriae.
Entre las patologías del TRS destacan:
2.1. Faringitis
La principal causa de faringitis es por Streptococcus pyogenes (grupo A). Otras
bacterias que pueden ocasionar esta patología son: Streptococcus grupo C, G y
Corynebacterium haemolyticum.
El estudio de laboratorio incluye los métodos para el diagnóstico de Streptococ-
cus grupo A que sean sensibles ya que un número bajo de estas bacterias pueden
indicar infección, también se debe considerar la importancia de su detección por la
reemergencia de la fiebre reumática aguda y la posibilidad de shock tóxico like.
El estudio de Neisseria meningitidis se realiza generalmente para estudios epide-
miológicos.
El estudio de faringitis gonocócica debe ser solicitado en forma específica por el
médico.
Corynebacterium diphtheriae se debe buscar sólo cuando se solicita expresamente.
2.1.1. Tipo de faringitis

Faringitis exudativa: 15-30% causados por SBHA, virus, estreptococos del grupo
C, N. Gonorroheae...
Faringitis membranosa: causados por C. diphteriae, virus Epstein-Barr
H. influenzae, S. aureus y S. Pneumoniae se aíslan frecuentemente de este tipo
de cultivos aunque no se ha demostrado que causen faringitis, excepto el S. aureus
en pacientes inmunosuprimidos.
2.1.2. Toma de muestra

De forma general se introduce en la garganta un hisopo en un tubo estéril con o
sin medio de transporte. Este tipo de cultivo se realiza para SBHA, aunque también
puede detectarse por medio de test rápidos como aglutinación en látex, ELISA...
La faringitis estreptocócica habitualmente se trata para prevenir tanto las secuelas
supurativas como las no supurativas, así como para disminuir la morbilidad.
Presencia de Neisseria: se cultiva en agar chocolate o Thayer-Martin
Presencia de C. diphteriae: se cultiva en agar sangre.
Otros Corynebacterium pueden provocar faringitis con o sin formación de mem-
brana o exantema asociado. También N. gonorrhoeae puede provocar faringitis exu-
dativa., Sobretodo en varones homosexuales, aunque esta faringitis no siempre es
sintomática.
2.1.2.1. Toma de muestra de secreción faríngea

A) Cultivo corriente
– Deprimir la lengua con bajalengua.
– Frotar con hisopo la pared posterior de la faringe y las amígdalas tocando cual-
quier exudado.
– Evitar tocar la lengua, úvula y pared de la boca.
B) Cultivo para Carynebacterium diphtheriae
– Deprimir la lengua con bajalengua, si se advierte la presencia de pseudomem-
brana, tomar dos muestras con hisopo del borde de la misma presionándola
sin romper.
– Si el transporte de las muestras al laboratorio es superior a cuatro horas, se reco-
mienda que las muestras se envíen en un tubo con silica gel. Una de las muestras
se usará para la tinción de gram. en caso de sospecha de difteria cutánea, se toma
muestra de la zona de piel afectada además de una muestra faríngea.
– Realizar la tinción de gram. en el caso de observar bacilos gram positivos de
morfología característica, el laboratorio debe entregar un informe preliminar
que diga “bacilos gram+ difteromorfos”.
C) Cultivo para Neisseria meningitidis
Tomar la muestra con hisopo por detrás de la úvula en la porción nasal de la faringe.
FARIGITIS
(S. GRUPO A)
Hisotopo
Amies Stuar o Silica Gel
PAS
Incubación 35-37 ºC
18-24 h
Observación - hemólisis
T. Gram
Inc. 18=24 h - Catalasa -
Dig. Presuntivo: Diag. Definitivo:

Suscep, bacitracina serología
DIFTERIA
2 Hisopos
Silica gel
PAS
Agar sangre telurito
Incubar 35 ºC 18-24 h
Observación colonias
T. Gram
Pruebas bioquímicas Diagnóstico definitivo
FARINGITIS GONOCÓCICA
Hisopo
Amies Stuart
Transporte nutritivo
Thayer-Martin
35 ºC CO2 72 h
Observ. Colonias
Dig. Presuntivo: gram, oxidasa. Dig. Definitivo: utilización CH, b-lactamasa.
ANGINA VINCENT
Hisopo
Gram
2.1.2.2. Toma de muestra de aspirado Nasofaríngeo

a) Lavarse cuidadosamente las manos y luego colocarse guantes estériles.
b) Romper el sobre que contiene el kit de aspiración y conectar el final del tubo
con diámetro menor a una sonda de aspiración.
c) Conectar el otro extremo de diámetro mayor a la bomba de vacío.
d) Introducir la sonda, sin aspirar, por una fosa nasal hasta la nasofaringe y reti-
rarla aspirando.
e) Repetir el procedimiento en la otra fosa nasal.
f) Aspirar el suero fisiológico a través del tubo colector para arrastrar toda la
secreción.
g) Homogeneizar la muestras agitando el tubo con la mano.
h) Colocar la tapa al tubo que contiene la muestra.
i) Procesar.
BORDETELLA
PERTUSSIS
Aspirado nasofaríngeo
Aspiración
Cultivo
Sembrar inmediatamente
Regan-Lowe 35º
Humedad
Hasta 7 días
T. gram
Diagnóstico definitivo
Inmunofluorescencia
Serología
Envío al laboratorio de referencia para confirmación

N. MENINGITIDIS
PORTADORES
Nasofaríngea
Sembrar en Thayer-Martin
35º Co2
24-48 h
T. de Gram
oxidasa
Diagnóstico definitivo
Envío al laboratorio
HAEMOPHILLUS INFLUENZAE
Sembrar
Amies Stuart
Agar chocolate
Incubar 35 ºC CO2
18-24 h
Gram
Factores X y V
Oxidasa
b-lactamasa
Identificación definitiva:
serología
2.2. Laringitis
En un 90% es de origen vírico, siendo el 10% restante debida a SBHA. En adultos
también puede ser causado por Moraxella catarrhalis. El diagnóstico suele hacerse
por la clínica.
a) Laringitis aguda de etiología viral.
b) Los cultivos bacterianos raramente son orientados excepto para descartar dif-
teria o infección estreptocócica (según clínica).
2.3. Epiglotis
En niños ocasionada por H. influenzae tipoB y en adultos por SBHA y H. Influen-
zae. Es una infección peligrosa ya que puede ocasionar una obstrucción de vías
aéreas. En periodos de inmunosupresión puede verse favorecida la aparición de
candidiasis oral (muguet), que podría extenderse y llegar a producir esofagitis.
2.4. Sinusitis
a) Sinusitis bacteriana causa por organismos comensales del tracto respiratorio
superior. Ej.: S. pneumoniae. H. influenzae, Neisseria, B. catarrhalis. S. aureus.
b) La muestra apropiada es el aspirado mediante jeringa de la cavidad sinusal. Se
realiza cultivo aerobio y anaerobio.
c) Rechazar líquidos de lavado o tórulas de fosas nasales o nasofaringe, ya que
éstas contienen mucha flora normal.
2.5. Angina fusoespiralar de vincent

Es una infección pseudomembranosa y ulcerativa de boca, encías o faringe. Esta
asociada por la acción conjunta de cierta flora anaerobia. Uno de los patógenos mas
relacionados con éste estado es el Fusobacterium necrophorum.
2.6. Traqueobronquitis
En niños es de etiología vírica exclusiva, mientras que en adolescentes aparecen
tanto virus como M. pneumoniae, Chlamydia pneumoniae, B. pertussi.
2.7. Recolección y transporte de muestras TRS

La toma de muestra se realizara con un hisopo de algodón, Dacrón o alginato de
calcio. Se emplea un depresor de lengua para evitar rozaduras con la lengua o los
labios. Se toca el fondo de la garganta, amígdalas y cualquier lugar donde exista
inflamación, exudado o secreción. Si el hisopo se siembra antes de 4 horas no es
necesaria ninguna precaución adicional, en cambio si transcurre mas tiempo hasta
el cultivo hay que añadir algún medio de transporte. Los SBHA son bastantes resis-
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tentes pudiendo mantenerse viables en un hisopo hasta 48 horas. Los materiales

para el cultivo de B. Pertussi deben inocularse directamente en los medios de cultivo
frescos en el momento de la toma.
Haemophilus, Bordetella o N. Meningitidis pueden predominar mas en nasofarin-
ge por lo que la toma en estos casos se realiza con un escobillón flexible introducién-
dolo por la nariz hasta la faringe posterior. También puede hacerse por vía oral.
2.7.1. Examen microscópico directo

Mediante la tinción de Gram puede observarse la flora existente, levaduras (mu-
guet) o formas fusiformes (angina de Vincet).
También debe estudiarse la presencia de leucocitos.
Los hongos pueden visualizarse mediante tratamiento con KOH al 10% o tinción
fluorescente Blanco de calcoflúor.
Por medio de tinciones con Anticuerpos fluorescentes puede detectarse Bordete-
lla p. E incluso SBHA.
2.7.2. Cultivo de muestras de TRS

Se frota el hisopo en un extremo de la placa y se extiende con un asa de platino
previamente esterilizado. El agar sangre es un medio que proporciona los nutrientes
requeridos por la mayoría de los patógenos usuales, aunque no permite el creci-
miento de H. Influenzae (cuando quiere detectarse se siembra en agar chocolate).
El género Streptococcus está siempre presente en nasofaringe por lo que es de
gran importancia saber diferenciar las especies patógenas de las que no lo son. La
investigación de hemólisis es de gran importancia, ya que los estreptococos β he-
molíticos son los más patógenos de todos, sobre todo los del grupo A (S. pyogenes)
que es el agente causante de la escarlatina, erisipela, fiebre reumática...
Si se aísla S. pyogenes (SBHA) se observa en el agar sangre un crecimiento de co-
lonias β hemolíticas (cocos gram positivos y catalasa negativos). Si se realiza la prueba
de la bacitracina será positiva. También puede hacerse pruebas de detección de antí-
geno. El S. pneumoniae (α hemolítico) se encuentra en gran proporción en gargantas
normales y sólo cuando existe un gran predominio se considera preocupante.
2.8. Otitis media

Se denomina media a la inflamación del revestimiento mucoso del oído medio.
En niños los agentes causantes de manifestaciones agudas más frecuentes son el
neumococo y el H. Influenzae, y luego el SβHA. También pueden encontrarse B.
catarrhalis, S. aureus, bacilos gram negativos y anaerobios.
La otitis media es una enfermedad propia de la inflamación relacionada con in-
fecciones rinofaríngeas. Generalmente el comienzo de una otitis media es debido a
una infección de origen viral y que se sobreagrega con una infección bacteriana. La
bacteria produce inflamación de la mucosa, se llena el espacio de líquido purulento
taponándose entonces el orificio de entrada. Esto produce un aumento de presión
y hace que el líquido tienda a romper la membrana del tímpano, a través de donde
saldrá un líquido mucoso purulento.
Gérmenes del tracto respiratorio 11
2.8.1. Recolección y transporte de muestras

Si ha existido rotura de membrana se toma muestra mediante un hisopo. Si no existe
rotura, la muestra se toma mediante jeringa y aguja, aspirando el líquido mucoso.
En primer lugar debe realizarse una observación microscópica para investigar
tanto la presencia de leucocitos como el tipo de flora existente.
Se realiza la siembra en los medios más adecuados:
– Agar sangre (permite aislamiento de S. aureus, S. pneumoniae, SβHA, Pseu-
domonas, enterobacterias).
– Agar chocolate (Haemophilus).
– Sabouraud (hongos y levaduras).
Los microorganismos sospechosos (por el tipo de colonias, oxidasa y catalasa) ais-
lados deben identificarse mediante el uso de técnicas apropiadas de identificación.
Si se sospecha la presencia de anaerobios deben realizarse pruebas para su ais-
lamiento e identificación preliminar.
2.9. Otitis externa

El canal auditivo es estrecho y tortuoso lo que representa un problema en cuanto
a la toma de este tipo de muestra. Existen varios tipos de otitis externa:
– Infección aguda localizada, ocasionada por S. aureus y que se presenta en
forma de pústula o forúnculo.
– Erisipela que afecta al oído, SβHa.
– Otitis externa difusa, también denominada oído del nadador, originada por ba-
cilos gram negativos, entre los que destaca Pseudomonas aeruginosa y ente-
robacterias y también por hongos. Es frecuente en verano asilar Pseudomonas
y Proteus en otitis de niños que practican la natación.
– Otitis externa hemorrágica. También ocasionada por P. aeruginosa, por baños
con inmersión.
– Otitis externa crónica: en pacientes con otitis media purulenta crónica y perfo-
ración del tímpano se puede producir una irritación por el drenaje que provie-
ne del oído medio, causando este tipo de otitis.
– Otitis externa maligna: es frecuente su aparición en individuos con diabetes.
Es una infección necrosante que se extiende hacia áreas adyacentes y que
puede diseminarse a SNC o canales vasculares. Está originada por P. aerugi-
nosa y bacterias anaerobias.
Por tanto, y resumiendo, las infecciones externas del oído generalmente están
producidas por S. aureus, P. Aeruginosa y S. pyogenes. Suelen ser infecciones se-
cundarias a pequeñas heridas o a alguna infección de tipo vírico.
2.9.1. Recolección transporte de muestras

Debe limpiarse y desinfectarse bien la zona para evitar la contaminación de la
muestra con la flora cutánea contaminante (S. epidermidis, Micrococcus o coryne-
bacterium). Si existe supuración la muestra se toma con un hisopo, y si se trata de
un forúnculo se realiza un drenaje con aguja y jeringa.
3. Gérmenes del tracto respiratorio inferior (TRI)
3.1. Introducción
Las infecciones del TRI, es decir las que comprometen: tráquea, bronquios, bron-
quiolos, alvéolos y/o parénquima pulmonar, constituyen una de las primeras causas
de mortalidad infantil tardía y una de las primeras causas de muerte por enfermedad
nosocomial.
El diagnóstico etiológico de estas infecciones no es fácil debido a que la muestra
clínica necesariamente pasa a través de la orofaringe, lugar donde se contamina con
numerosas especies bacterianas, salvo aquellas muestra obtenidas directamente de
la lesión.
3.2. Etiología de las infecciones del TRI

– Neumonía: inflamación del espacio y del parénquima pulmonar (ej.: S. pneu-
moniae y S. aureus).
– Bronquitis: inflamación de las vías aéreas medias (ej.: S. pneumoniae, H. in-
fluenzae, M. catarrhalis, enterobacterias).
– Bronquiestasia: dilatación excesiva y daño en los bronquios (ej. Fibrosis quística).
– Bronquiolitis: proceso infeccioso que provoca infección de los bronquios.
Los agentes etiológicos según los procesos infecciosos son:
Neumonía aguda:
– S. pneumoniae.
– H. influenzae.
– S. aureus.
– M. catarrhalis.
– Legionella pneumophila.
– Micobacterium pneumoniae.
– Pseudomona sp.
– H. capsulatum.
– Criptococcus neoformans.
– Ch. pneumoniae.
Bronquitis:
– H. influenzae.
– H. parainfluenzae.
– S. pneumoniae.
– M. catarrhalis.
– Klebsiella sp.
– C. pneumoniae.
– Bordetella pertusis.
– Micobacterium pneumoniae.
Neumonía por aspiración:
– Peptoestreptococos sp.
– Fusobacterium sp.
– Enterobacterias.
– Pseudomonas sp.
– Bacterias relacionadas a neumonía por aspiración intrahospitalaria.
– Acinetobacter sp.
Neumonía nosocomial:
– S. aureus.
– S. pneumoniae.
– Pseudomona aeruginosa.
– Serratia marcescens.
– Acinetobacter sp.
Infecciones de TRI niños:
Virus:
– Virus de la influenza A v.
– Virus Syncytial respiratorioi.
– Human Metapneumovirus.
– Varicella zoster.
Bacterias:
– S. pneumoniae.
– H. influenzae.
– S. aureus.
– K. pneumoniae.
– Enterobacterias.
– Anaerobios.
– Microorganismos atípicos; micoplasmas, Legionella, Chlamydia, Coxiella Burnetti.
La patogénesis de las infecciones del TRI se caracterizan por los diversos meca-
nismos del agente invasor para burlar las defensas del huésped entre ellas:
Mecanismos para evitar la fagocitosis:
– Producción de cápsula (S. pneumoniae, H. capsulatum, Neumoniae, N. menin-
gitidis).
– Producción de toxinas (leucocidinas y citotoxinas por S. aureus).
– Parásitos y hongos son más grandes que los fagocitos.

– Replicación dentro de la célula (virus y clamidias son intracelulares obligados).
Mecanismos para sobrevivir dentro del fagocito:
– Inhibición de la fusión del Lisosoma con el Fagosoma (ej.: toxoplasma gondii,
Aspergillus sp).
– Escape del fagosoma (M. leprae. Tripanosoma cruzi).
– Resistencia a la muerte en el fagolisosoma (ej.: M. tuberculosis, Nocardias).
– Crecimiento en la célula fagocítica (M. tuberculosis, Legionella, Citomegalovirus).
Mecanismos de defensa del huésped:
Al inicio del proceso infeccioso, el huésped inicia su defensa, son mecanismos
que utiliza:
– Filtración: vello nasal, barreras anatómicas.
– Saliva.
– Complemento.
– Tos.
– Reflejo epiglótico.
– Interferencia bacteriana-flora normal.
– Sistema mucociliar.
– Macrófagos alveolares.
– Complementos.
– Fluidos alveolares: defensinas, lisozimas.
– Inmunidad celular: células B y T.
Fisiología de la secreción.
Las secreciones traquio-bronquiales son una mezcla inconstante de agua, electro-
litos y mucina (moco que segrega las células calciformes). A medida que dichas se-
creciones atraviesan las vías respiratorias inferiores o superiores se le unen células
de descamación de la mucosa del aparato respiratorio, secreciones nasales, de las
glándulas salivales y la flora bacteriana normal de la cavidad bucal.
La secreción de las glándulas mucosas y las células del epitelio de la mucosa son
el componente más abundante en las secreciones traquio-bronquiales.
A pesar de que se inhalan elevadas cantidades de microorganismos, las vías respi-
ratorias inferiores se mantienen virtualmente estériles, gracias a dos mecanismos:
– El sistema macrófago-alveolar.
– El sistema mucociliar.
Esputo.
Cualquier alteración en el aparato respiratorio puede dar lugar a un aumento de
estas secreciones (traqueo-bronquiales), que se eliminan al exterior (fuera de las vías
aéreas inferiores) mediante un golpe de tos o con la expectoración; a estas secrecio-
nes se les denominan esputos.
Composición química del esputo.

La composición química del esputo muestra que está compuesto aproximada-
mente de un 95% de agua y de un 5% de sólidos. Los sólidos son principalmente
hidratos de carbono, proteínas, lípidos, y ADN.
3.3. Obtención de muestras del TRI

– Expectoración o esputo.
– Aspirado traqueal.
– Lavado bronquial.
– Broncoscopia (cepillado bronquial, lavado broncoalveolar).
– Biopsia bronquial.
– Biopsia pulmonar.
3.3.1. Esputo
Precauciones
Las muestras designadas como esputos, pocas veces contienen sólo las secrecio-
nes de las vías respiratorias bajas, sino que con frecuencia se hayan contaminadas
por la saliva, secreciones naso-faríngeas, bacterias o restos de alimentos.
El enjuague de la boca y limpieza de los dientes antes de la toma de muestra eli-
minará la mayoría de estos contaminantes sin afectar el resultado analítico.
Para la mayoría de los análisis, las muestras de las primeras horas de la mañana
son las mejores puesto que representan las secreciones pulmonares acumuladas
durante la noche.
Material
La muestra debe recogerse en un recipiente estéril, desechable, de boca ancha
y con tapón. Si el paciente está hospitalizado se puede recoger en una placa Petri;
aunque ésta cada vez se utiliza menos, es muy aconsejable para algunos análisis,
como por ejemplo en la búsqueda de cuerpos extraños.
Si se recoge las secreciones de 24 horas se utiliza una copa graduada. No se debe
tomar muestra para análisis microbiológico de estas secreciones (24 horas).
La obtención de la muestra no resulta muy complicada en adultos pero sí en los
niños. Para su obtención en niños pequeños o que no colaboran se utiliza varios
métodos diferentes:
1. Se realiza un frotis nasofaríngeo en los niños que sufren enfermedad bron-
quial, el cual se considerará representativo de los microorganismos patológi-
cos bronquiales.
2. Mantener delante de la boca del niño una placa de petri y pedirle que tosa.
3.3.2. Aspirado bronquial

La técnica se denomina broncoscopia. La realiza el neumólogo con anestesia ge-
neral. Es imprescindible para el diagnóstico de los tumores.
4. Transporte
La muestra debe remitirse inmediatamente al laboratorio ya que no es aconseja-
ble guardarla ni refrigerarla, puesto que la citólisis es rápida.
5. Conservación
Cuando la muestra se ha de enviar, se utiliza el bromuro de cetil- piridinium, que
permite la descontaminación y la fluidez.
6. Análisis macroscópico
Preparación de la muestra para el análisis macroscópico.

La muestra debe transferirse a una placa de petri esterilizada. Se utilizan asas o
varillas de madera desechables para extender la muestra en una capa muy delgada,
posteriormente se podrá examinar a simple vista, con lupa o llevar al microscopio.
En el análisis macroscópico se incluye:
a) Consistencia y aspecto:
– Normal
En condiciones normales la mayoría de las muestras de esputos presentan
un aspecto acuoso y claro; la pequeña opacidad que pueden presentar
procede del material celular en suspensión.
– Anormal
En condiciones patológicas el esputo presenta diferentes aspectos.
Seroso-----------------líquido.
Mucoso---------------predomina el moco.
Purulento-------------contiene pus.
Sanguinolento--------contiene sangre en pequeña cantidad.
Existe también la combinación de cada uno de ellos; por ejemplo sangui-
nolento y purulento (tuberculosis), seroso purulento, mucoso purulento,
etc. En general, las enfermedades específicas presentan esputos con con-
sistencia y aspectos característicos; ejemplo, en el edema agudo de pul-
món, el esputo es con frecuencia seroso y sanguinolento.
b) Color
– Normal
El color del esputo está determinado por las sustancias que contiene y con
qué frecuencia indica el proceso patológico. La secreción normal es trans-
parente e incolora.
– Anormal
En condiciones patológicas el esputo puede ser:
* Amarillo: nos indica que contiene una gran cantidad de células epitelia-
les y con frecuencia pus. Se observa en las bronquitis crónicas y en el
fumador.
* Marrón: el esputo herrumbroso de debe a la hemoglobina descompues-
ta. Se observa en la neumonía producida por el neumococo o en la
gangrena pulmonar (o gaseosa).
* Rosado: aparece en el edema agudo de pulmón, un constipado común
(debido a un golpe de tos fuerte se produce la rotura de algún vaso o
capilar sanguíneo.).
* Rojo brillante: se denomina también hemoptisis; y se detecta en hemo-
rragia reciente, secundaria a diversas enfermedades como la tubercu-
losis o el cáncer de pulmón. Siempre que en un paciente aparezca este
tipo de esputo es necesario averiguar la causa.
* Gris negruzco: aparece en cualquier tipo de neumoconiosis (silicosis,
siderosis, etc.)
c) Olor
Generalmente en los esputos normales y patológicos no se detecta ningún
olor; pero si se ha producido una descomposición bacteriana tanto dentro del
cuerpo como después de la expectoración pueden presentar diferentes olo-
res. La gangrena pulmonar y los abscesos pulmonares pueden presentan un
olor putrefacto.
d) Masas gaseosas
Están constituidas por fragmentos de tejido pulmonar necrótico, observado
principalmente en enfermedades como el cáncer de pulmón, la gangrena pul-
monar y, a veces, en la tuberculosis.
e) Broncolitos.
Generalmente se forman por calcificación del tejido infectado o necrótico en
el interior de un bronquio. Son más frecuentes en el cáncer de pulmón y en la
tuberculosis.
f) Tapones Dittrich.
Se observan a menudo en las bronquiectasias. A veces se expulsan por sí so-
los al toser. Aparecen en forma de cuerpos amarillentos o grisáceos que varían
de tamaño desde la cabeza de un alfiler a un haba. Al aplastarlos y examinarlos
al microscopio se ve que están compuestos de restos celulares, cristales de
ácido y bacterias.
g) Cuerpos extraños.
En algunos casos se pueden expulsar cuerpos extraños durante un ataque vio-
lentos de tos. En los niños pude ser cualquier objeto (botones, frutos secos...)
que se hayan llevado a la boca o inhalado. En adultos los cuerpos extraños
más frecuentes son partículas de alimentos y contenido gástrico aspirados
durante convulsiones o anestesia quirúrgica.
7. Análisis microscópico
Los análisis microscópicos más frecuentes que se realizan en el esputo son: aná-
lisis citológico, y microbiológico.
Preparación de la muestra para el análisis citológico y microscopia

directa del análisis microbiológico
1. Para el examen en fresco:
– Poner la muestra (pequeña cantidad de esputo) en el centro de un portaob-
jeto con un asa de platino o siembra.
– El porta debe estar limpio y seco.
– Añadir una gota de ácido acético diluido.
– Poner suavemente sobre el porta un cubreobjeto, procurando evitar las bur-
bujas de aire. En algunos casos, las muestras se pueden colorear con azul de
metileno, añadiendo una gota del mismo antes de colocar el cubre.
2. Para el examen con tinción:
– Diluir la muestra (esputo) si es muy espesa con una gota de agua destilada
estéril, colocada en el porta.
– Llevar la muestra con el asa de platino extendiéndolo sobre la superficie del
porta, consiguiendo una capa fina (frotis por estiramiento).
– Dejar secar a temperatura ambiente o con la estufa a 37º.
– Fijar con calor en el mechero Bunsen (lámpara de alcohol).
– Colorear o teñir con el reactivo más adecuado.
a) Análisis citológico
La muestra debe ser reciente para evitar la citólisis; a ser posible la obtención de
la misma debe hacerse mediante broncoscopia, en especial para la determinación
de células neoplásicas.
Las células que se analizan son:
– Células neoplásicas.
Para la determinación de tumores. El hallazgo de estas células es positivo en el
75% de los casos y permiten un diagnóstico precoz del cáncer. Teñir la mues-
tra con el método de Papanicolau.
Un aumento de células epiteliales nos indica infecciones del aparato respirato-
rio. Teñir la muestra con Panóptico rápido o Papanicolau.
– Células hemáticas.
La determinación de eritrocitos tiene importancia en las hemóptisis; la de leu-
cocitos en todas las enfermedades infecciosas y la de eosinófilos en el asma
bronquial (alergias).
Como método de tinción se utilizan: el método Panóptico, Giemsa, etc.
b) Análisis Microbiológico
– Microscopia directa:
Para la determinación de neumococos, estreptococos y estafilococos, teñir la
muestra con la tinción diferencial de Gram. Su determinación tiene importan-
cia para hallar el microorganismo patógeno específico causante de las infec-
ciones del aparato respiratorio, en especial de la neumonía.
El bacilo de Koch (B.K) tiene importancia para el diagnóstico de la tuberculosis
pulmonar; el B.K presente en el esputo indica tuberculosis abierta. La tinción
utilizada es la de Ziehl.
Para determinar las micosis pulmonares, se puede analizar con tinción Gram
o preparar la muestra en fresco. Es necesario que el paciente además de cepi-
llarse los dientes y enjuagarse la boca, realice gargarismos con Lugol (antimi-
cótico), para evitar la contaminación con los hongos de la boca.
Para la determinación del equinococo causante del quiste hidatídico, se hace
un examen en fresco. La presencia de los mismos en la muestra es un valor
importante para el diagnóstico.
– Cultivo:
El más usual es el de Lowenstein para determinar el B.K.
Preparación de la muestra
– Homogeneizar: es necesario homogeneizar el esputo antes de la siembra.
Existen diferentes técnicas. Una de las más utilizadas es la fluidificación del es-
puto con Fluimicil (expectorante) u otro mucolítico, agitación y centrifugación
de la muestra a poca velocidad y poco tiempo.
– Descontaminar: es necesario mezclar igual volumen de reactivo de descon-
taminación (contiene citrato sódico al 2,94 % e hidróxido sódico al 4%) que
esputo (a partes iguales). Agitar durante 20 segundos en Mixer y centrifugar
15 minutos a 4000 rpm (las revoluciones pueden variar en función del radio de
la centrífuga).
– Sembrar dos tubos Lowenstein con tres gotas de la muestra (se puede recoger
en una jeringa). También se siembra en agar sangre y agar chocolate. De la
muestra homogeneizada se puede utilizar para hacer un examen en fresco y
tinción para la microscopia directa del B.K.
– Incubar: se incuba durante 8 semanas a 37 ºC.

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Gérmenes

2. Infecciones del tracto respiratorio superior (faringe y nasofaringe)

3. Gérmenes del tracto respiratorio inferior (tri).

2. Infecciones del tracto respiratorio superior

Un estudio microscópico de un frotis faríngeo es una prueba bastante solicitada

2.1.1. Tipo de faringitis

2.1.2. Toma de muestra

2.1.2.1. Toma de muestra de secreción faríngea

Amies Stuar o Silica Gel

Inc. 18=24 h - Catalasa -

Dig. Presuntivo: Diag. Definitivo:

Pruebas bioquímicas Diagnóstico definitivo

Dig. Presuntivo: gram, oxidasa. Dig. Definitivo: utilización CH, b-lactamasa.

2.1.2.2. Toma de muestra de aspirado Nasofaríngeo

Envío al laboratorio de referencia para confirmación

2.5. Angina fusoespiralar de vincent

2.7. Recolección y transporte de muestras TRS

tentes pudiendo mantenerse viables en un hisopo hasta 48 horas. Los materiales

2.7.1. Examen microscópico directo

2.7.2. Cultivo de muestras de TRS

2.8. Otitis media

2.8.1. Recolección y transporte de muestras

2.9. Otitis externa

2.9.1. Recolección transporte de muestras

3. Gérmenes del tracto respiratorio inferior (TRI)

3.2. Etiología de las infecciones del TRI

– Parásitos y hongos son más grandes que los fagocitos.

Composición química del esputo.

3.3. Obtención de muestras del TRI

3.3.2. Aspirado bronquial

Preparación de la muestra para el análisis macroscópico.

Preparación de la muestra para el análisis citológico y microscopia

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