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DETERMINACION DE CALCIO V FOSFORO

EN GANADO BOVINO DE LA SABANA DE BOGOTA

Por los doctores G erm án D ía z G aray

y Pa blo H e n a o SÁ e n z *

IN T R O D U C C IO N

E l calcio y el fósforo, constituyentes contracción muscular, 4 °) la transmisión


inorgánicos de la sangre, generalmente se normal de los impulsos nerviosos y 5°) la
consideran al tiempo ya que las alteracio­ coagulación sanguínea. Los iones de cal­
nes de uno, se reflejan com únm ente en cio tam bién activan algunas enzimas ( 2 ) .
disturbios del otro. Existe una relación E l calcio del plasma sanguíneo se pre­
recíproca entre estos elementos, pues la senta en dos formas: 1? D ifusible, prin­
elevación de uno corresponde a la dismi­ cipalm ente ionizado, que probablem ente
nución del otro, y el suministro excesivo es la forma que tiene actividad fisiológica
de cualquiera de los dos se refleja en el (5 0 a 60 por 100 de la cantidad to ta l),
aumento de excreción del otro; sin em­ y 2^) N o difusible por estar ligado o com ­
bargo, esto no es una norma fija ( 7 ) . E l binado con proteínas del plasma (4 0 a
m antenimiento de la concentración de 50 por 1 0 0 ). La primera forma es capaz
C a+ + del plasma dentro de lím ites estre­ de atravesar una membrana semipermeable
chos es im portantísimo para el funciona­ artificial (celofán) y la pared capilar del
miento normal dcl_ organismo, pues este organismo vivo. N orm alm ente ambas for­
ion posee efecto notable en algunos fe­ mas se hallan en un estado de equilibrio
nómenos fundamentales, aparte de los bastante inestable. Las proporciones de
relacionados con la estructura del esque­ las diferentes fracciones presentes son una
leto y de los dientes. Así, los iones de resultante de un equilibrio entre la pro­
calcio tienen entre otros los siguientes teína total y el calcio total; por tanto,
efectos: 1°) disminuyen la permeabilidad cambios en la proteína plasmática debe
de los capilares y de la membrana celu­ esperarse que tengan influencia sobre la
lar; 2?) disminuyen la excitabilidad neu- concentración del calcio difusible presen­
romuscular, y son necesarios para, 3P) la te ( 7 ) . Los eritrocitos no poseen calcio.
La concentración normal del calcio en
* Profesores asociados de las Secciones de F i­
el plasma está asegurada por los siguien­
siología y Anatomía de la Facultad de Medicina
Veterinaria y de Zootecnia, de la Universidad
tes factores: 1°) La horm ona paratiroidea
Nacional de Colombia. moviliza calcio de los huesos a la sangre
8 FA CU LTA D DE M E D IC IN A V E T E R IN A R IA Y DE Z O O T E C N IA

en ausencia de absorción intestinal. 2?) cas otras; los animales se encontraban en


La vitamina D aumenta la absorción de condiciones normales de salud.
calcio en el intestino aunque también E ntre 8 y 9 de la mañana se extrajo
participa en la movilización del calcio de sangre de la vena yugular externa de las
los huesos. 3°) Proteínas del plasma: su vacas y se recogió, sin ningún anticoagu­
disminución puede acompañarse de baja lante, en tubos de ensayo de 50 c.c. Se
en la concentración plasmática del calcio. empleó este tipo de tubo con el objeto de
4 °) E l increm ento notable del H P 0 4 = permitir que el suero se separara más fá­
puede disminuir la concentración sérica cilm ente del coágulo, lo mismo que para
de C a + + . facilitar la extracción de aquél sin hemo­
E l fósforo tam bién se presenta en dos lisis. A la temperatura del laboratorio los
fracciones, una orgánica y otra inorgánica. tubos se dejaron inclinados por 4 horas
Sin embargo, el fósforo orgánico está en al cabo de las cuales se llevaron a la ne­
sustancias tales com o los fosfolípidos que vera donde permanecieron hasta el día
no tienen relación tan estrecha con el fós­ siguiente para facilitar la total retracción
foro inorgánico com o aquella que tiene del coágulo. V einticuatro horas después
el calcio orgánico con el inorgánico o di­ de tomada la sangre se centrifugó cuida­
fusible. La utilización fisiológica de car­ dosamente y así pudo extraerse con toda
bohidratos causa un ligero descenso en el facilidad una suficiente cantidad de sue­
fósforo sanguíneo a causa de su mayor ro de buena calidad que se guardó en la
utilización para la fosforilización necesa­ nevera para su posterior utilización.
ria en este proceso. Hay tam bién descenso Listo ya el suero, se procedió, para la
temporal del fósforo sanguíneo luego.de determinación de fósforo, a emplear el
una inyección de insulina.
método de Fiske y SubbaRow (6 ) basa­
La hormona paratiroidea disminuye la do en lo siguiente: las proteínas de la
concentración de fósforo del suero y la sangre se precipitan con ácido tricloro-
acumulación de calcio en el intestino dis­ acético; el filtrado, libre de esas sustan­
minuye la absorción intestinal de fósforo. cias, se trata con una solución ácida de
La proporción óptima para la absorción m olibdato que forma ácido fosfomolíb-
de calcio y fósforo, cuando el suministro dico con cualquier fosfato presente. El
de vitamina D es adecuado, es de 1:1 ácido fosfom olíbdico se reduce por la adi­
( 1 : 2 - 2 : 1 ) ( 2 ) , o en el joven 1:1 y 1:2; ción del reactivo del ácido 1, 2, 4, amino-
en el adulto 1:1.5 ( 7 ) . naftolsulfónico para producir un color
azul cuya intensidad es proporcional a la
cantidad de fosfato presente. E l método
M A T E R IA L E S Y M E T O D O S
empleado tiene la ventaja sobre el de
Para el trabajo se emplearon veintinue­ Shinowara, Jones y Reinhart, de la esta­
ve vacas del hato de la Facultad de M e­ bilidad en el color de la reacción final,
dicina Veterinaria y de Zootecnia de la pues la intensidad del color cam bia con­
Universidad Nacional, de las razas Hols- tinuam ente con el tiem po en este último
tein, Pardo Suiza, Normanda, Blanco-ore- método ( 6 ) ; en cam bio, el método se­
jinegra y Criolla, de edades que fluctua­ guido perm ite una lectura normal dentro
ban entre 3 y 14 años, de diferentes pe­ de los 5 a los 20 minutos después de ter­
ríodos y tiempos de lactancia unas, y se­ minada la reacción. ;
FA C U LTA D DE M E D IC IN A V E T E R IN A R IA Y DE Z O O T E C N IA 9

Para obtener resultados más precisos, para ello fototubo de medida y filtro in­
la muestra de cada animal tanto en la de­ frarrojos; se calibró el aparato a ciento
terminación de fósforo como en la de por ciento de transmitancia (densidad óp­
calcio, se trató por duplicado. Así mismo,
tica cero) por medio de un “blanco” pre­
para cada 5 muestras (10 tubos) se pre­
parado de conformidad con las indicacio­
paró un “standard”, y finalm ente, cada
nes del método.
muestra, lo mismo que el “standard”, se
leyó dos veces. Practicadas las lecturas, se procedió a
Para la lectura se empleó un espectro- determinar las cantidades de fósforo inor­
fotómetro Bausch & Lom b con longitud gánico del suero. Se encontraron los va­
de onda de 660 milimicrones utilizando lores consignados en la T abla número 1.

TABLA N UM ERO 1
CA N TID A D ES DE FO SF O R O EN VACAS D E L HATO D E LA FA C U L TA D D E M ED IC IN A
V E T E R IN A R IA

ing. % de
NP Nombre Raza Edad F ósforo Preñez U ltim o parto
1. Florida Pardo Suiza 8 años 9 .8 0 6 meses
2. Condesa Holstein 5 años 6 m . 6 .4 2 1 mes 10 d.
3. Florecita Pardo Suiza 9 años 6 m . 6 .8 6 6 meses
4. Galleta Normanda 5 años 5.92 4 meses
5. Esperanza Holstein 11 años 4 .6 8 2 meses 3 meses 20 d.
6. Nigeria Normanda 4 años 9 .0 2 3 días
7. Argentina Normanda 3 años 6 .8 8 1 día
8. Prodigiosa Holstein 5 años 5 .4 8 7 mests 1 año 10 d.
9. Coqueta Holstein 6 años 5 .2 8 8 meses 1 año
!0. Acuarela Holstein 4 años 6 .8 8 9 meses
11. Caperuza Holstein 6 años 4 .0 0 9 meses
12. Orejinegra B.O .N . 7 años 6 .3 6 3 meses 4 meses
13. Dulcinea Holstein 3 años 6 .0 0 7 meses 1 año
H. Adelaida Holstein 14 años 6 .0 0 7 meses 1 año
15. Zulia Holstein 6 años 5 .2 0 7 meses
16. Cananga Holstein 5 años 6 m. 4 .8 0 8 meses 1 año
17. Nizarda Normanda 5 años 6 m. 6 .5 6 1 mes 4 meses
18- Esterlina ' Holstein 6 años 6 .6 0 2 meses
¡9 . Martica Holstein 10 años 7 .0 8 1 mes 3 meses
-0 . Monísima Pardo Suiza 5 años 6 .2 4 1 mes 10 d.
21. Primogénita Pardo Suiza 8 años 4 .7 6 1 mes 8 d.
22. Sombra Holstein 10 años 6 .5 2 3 meses 9 meses
- 3. Mandarina Criolla 3 años 6 .1 2 1 mes 4 meses
-4 . Dorisa Holstein 6 años 4 .5 2 1 mes 2 meses
2"■ M énica Pardo Suiza 13 años 8 .4 0 6 meses 1 año 8 ni.
-6- Patriota Holstein 12 años 1 0 .7 6 3 meses
’ 7. Arenal Pardo Suiza 9 años 4 .9 6 2 meses
-8 . Máscara Pardo Suiza 4 años 6 .1 7 2 meses
-9 . Glamour Holstein 9 años 6 m. 7 .0 0 15 días 9 meses

Distancia en los valores h a lla d o s...................................................................................... 4 .0 0 1 0 .7 6


Prom edio............ ..................................................................................................................... 6 .4 0
Desviación “standard” .......................................................................................................... 1 .5 4
9 5 % de confianza.................................................................................... Promedio . . . 3 .0 8
10 FA CU LTA D DE M E D IC IN A V E T E R IN A R IA Y DE Z O O T E C N IA

Para la determinación de calcio se usó dard” de reserva contiene 0.517 mg. de


el método de R oe y Kahn ( 6 ) . Se prefirió fósforo por c. c. equivalente a 1 mg. de
éste al de Clark - Collip, por cuanto en el calcio como fosfato cálcico ( 6 ) .
segundo la dificultad de titular cada vez Para la lectura se em pleó un espectro-
la solución de permanganato de potasio fotóm etro Bausch & Lom b, con longitud
de onda 660 m ilim icrones, utilizando pa­
y la interpretación visual de los colores
ra ello fototubo de medida y filtro infra-
pueden dar lugar a datos errados. E l mé­
rojos; se calibró el aparato a ciento por
todo usado se basa en la precipitación
ciento de transmitancia (densidad óptica
del calcio, como fosfato tricálcico, en un
cero) por medio de un “blanco” prepa
filtrado de suero libre de proteínas y lue­ rado de conformidad con las indicaciones
go la cantidad de calcio se determina fo- del método.
tom étricam ente por un procedimiento si­ Practicadas las lecturas, se procedió a
milar al empleado para la determinación determinar las cantidades de calcio in­
del fósforo inorgánico en la sangre, te­ orgánico del suero. Se encontraron los
niendo en cuenta que la solución “stan­ valores consignados en la Tabla N ° 2.

TABLA N UM ERO 2

CA N TID A D E S D E C A L C IO EN VACAS D E L H ATO D E LA FA C U L TA D D E M EDICIN /


V E T E R IN A R IA

mg. % de
N? N om b re Raza Edad C alcio Preñez U ltim o paito

1. Florida Pardo Suiza 8 años 1 1 .9 7 6 meses


2. Condesa Ilolstein 4 años 1 2 .1 0 1 mes 10 d.
3. Florecita Pardo Suiza 3 años 1 2 .7 0 6 meses
4. Galleta Normanda 5 años 1 4 .3 0 4 meses
5. Esperanza Holstein 6 años 1 3 .3 0 2 meses 3 meses 20 d.
6. Nigeria Normanda 5 años 6 m. 10.3 0 3 días
7. Argentina Normanda 9 años 6 m. 1 1 .3 0 1 día
8. Prodigiosa Holstein 5 años 1 2 .5 0 7 meses 1 año 10 d.
9. Coqueta Holstein 11 años 12.7 0 8 meses 1 año
10. Acuarela Holstein 4 años 13.7 0 9 meses
11. Caperuza Holstein 6 años 9 .7 0 9 meses
12. Orejinegra B. O N. 7 años 8 .7 0 3 meses 4 meses
13. Dulcinea Holstein 3 años 9 .8 0 7 meses 1 año
14. Adelaida Holstein 14 años 8 .9 0 7 meses 1 año
15. Zulia Holstein 6 años 9 .8 0 7 meses
16. Cananga Holstein 5 años 6 m. 9 .6 0 8 meses 1 año
17. Nizarda Normanda 5 años 6 m. 1 0 .1 0 1 mes 4 meses
18. Esterlina Holstein 6 años 9 .7 0 2 meses
19. Martica Holstein 10 años 9 .9 0 1 mes 3 meses
20. Monísima Pardo Suiza 5 años 9 .6 0 1 mes 10 d.
21. Primogénita Pardo Suiza 8 años 7 .8 0 1 mes 8 d.
22. Sombra Holstein 10 años 9 .4 0 3 meses 9 mese<
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mg. % de
NP Nombre Raza Edad C alcio Preñez Ultimo parto

23. Mandarina Criolla 3 años 1 1 .5 0 1 mes 4 meses


24r Dorisa Holstein 6 años 9 .0 0 1 mes 2 meses
25. Mónica Pardo Suiza 13 años 1 0 .0 0 6 meses 1 año 8 m.
26. Patriota Holstein 12 años 1 0 .2 0 3 meses
27. Arenal Pardo Suiza 9 años 1 0 .4 0 2 meses
28. Máscara Pardo Suiza 4 años 1 0 .3 0 2 meses
29. Glamour Holstein 9 años 6 m. 1 0 .1 0 15 días 9 meses

Distancia en los valores h allad o s...................................................................................... 7 .8 0 — 1 4 .3 0


Prom edio.............................................................. ..: .............................................................. 1 0 .7 0
Desviación “standard” ......................................................................................................... ± 1 .6 0
95 % de confianza....................................................................................Promedio . . . ± 3 . 2 0

R E SU L T A D O S

Según se puede apreciar en las Tablas tenecientes al hato de la Facultad de


números 1 y 2, fueron halladas las si­ M edicina Veterinaria y de Zootecnia de
guientes cifras para el calcio y el fósforo la Universidad Nacional:
en vacas en buen estado de salud per­

Valores máximos encontrados para el c a l c i o ............................................................. 1 4 .3 0 mg. %


Valores mínim os encontrados para el c a l c i o ............................................................. 7 .8 0 mg. %

Valores promedio encontrados para el c a l c i o .................................................. 1 0 .7 0 mg. %

Valores máximos encontrados para el f ó s f o r o ........................................................... 1 0 .7 6 mg. %


Valores mínim os encontrados para el f ó s f o r o ........................................................... 4 .0 0 mg. %

Valores promedio encontrados para el fó sfo r o ................................................. 6 .4 0 mg. %

Desviación “ standard” .para:

miligramos de calcio por cada 100 c.c. de s a n g r e ........................................ ± 1 .6 0


miligramos de fósforo por cada 100 c.c. de s a n g r e ........................................ ± 1 .5 4

D ISC U SIO N DE LOS RESU L T A D O S

En la investigación practicada a través la de 10.70 mg. % en promedio (T abla


de este trabajo, se encontró para el fós­ N ? 2) utilizando los métodos fotom étri-
foro presente en el suero sanguíneo de cos de Fiske y SubbaRow (6 ) para el fós­
las vacas de la Facultad de M edicina V e ­ foro, cuyos valores se deducen a partir de
terinaria y de Zootecnia, de la Universi­ una solución “standard” de fosfato mono-
dad Nacional, la cifra de 6.40 mg. % en potásico y de R oe y Kahn (6 ) para el cal­
promedio (T abla N ? 1) y para el calcio, cio, el cual se deduce a partir de una so­
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lución “standard” de reserva de fosfato D ebe hacerse notar que para evitar erro­
monopotásico equivalente a 1 mg. de res en cuanto a la obtención de datos pa­
calcio, com o fosfato cálcico ( 6) . ra la determinación de fósforo, las mues­
Estas experiencias se realizaron duran­ tras de suero sanguíneo deben estar libres
te el mes de febrero de 1966 en vacas en de hemolisis, puesto que los ésteres fos­
buen estado de salud, habiéndose encon­ fóricos presentes en las células rojas que­
trado que los valores de fósforo en las va­ darían en libertad, lo cual naturalmente
cas secas fueron algo más bajos que los modificaría los resultados ( 3) .
de las que estaban en lactancia. La dife­ Com o fácilm ente se podrá apreciar, los
rencia se podría explicar si se tiene en valores hallados se encuentran entre las
cuenta que a las vacas que están en pro­ cifras aceptadas universalmente como nor­
ducción se les suministra residuos de cer­ males, de acuerdo con los datos que se
vecería muy ricos en fósforo, en cambio transcriben:
a las secas no.

Cantidades norm ales C antidades normales


Autor en mg. % para fósforo en mg. % para caldo

Boddie (1 ) .................................................. 10 ± 2
Cornelius (3 ) ........................................................ 4 — 7 9 — 12
Dukes (4 ) ....................................................... 3 — ■8 9 — 12
Ontario (8 ) ........................................................ 2 —- 9 9 — 12
Smith, Jones ( 9) ....................................................... 4 — 8
Merck (1 0 ) ........................................................ 4 - 6
Villamil ( 11) ........................................................ 5 - 16 7.20 - 11.80

RESUMEN

E n vacas del hato de la Facultad de lores promedios para el fósforo de 6.40


M edicina Veterinaria y de Zootecnia de mg. por 100 cc. de suero sanguíneo y de
la Universidad Nacional de Colom bia, si­ 10.70 mg. de calcio por 100 cc. de suero
tuada en la sabana de Bogotá (2.640 m e­ sanguíneo, con los métodos fotométricos
tros sobre el nivel del mar, temperatura de Fiske y SubbaRow y R oe y Kahn, res­
promedio de 15° C. ) se encontraron va­ pectivamente.

BIBLIOGRAFIA:

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