FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

“Dr. DANIEL ALCIDES CARRIÓN”

UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA DE ICA

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA “Dr. DANIEL ALCIDES CARRIÓN”

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

MICROBIOLOGIA
PRACTICA N. º 13

- GARAYAR TAMBRA, BRYAN DAVID

- GARCIA VARGAS, AMMY NICOLL AMPARO

- GAVILAN GAMBOA, JEYMI JHOAN

- GOMEZ AROTOMA, JEAN PIERRE

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AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
NEISSERIA GONORRHOEAE

La familia Neisseriaceae incluye varios géneros entre ellos el género

Neisseria y Branhamella. La Neisseria son cocos gramnegativos. Algunas
Neisserias son comensales y otras como N. gonorrhoeae y N.
meningitidis son patógenos. En un frotis de muestra clínica coloriado con
Gram., estos microorganismos se presentan como diplococos de forma
arriñonada (o granos de café) y se pueden observar dentro de los
neutrófilos polimorfonucleares, esta presentación se conoce como
diplococos intracelulares gramnegativos y contribuyen a la identificación de
una verdadera infección .
Aunque estos cocos son aerobios estrictos desarrollan mejor en un medio
enriquecido con atmósfera de 2-10% de co2. Las Neisseria patógenas son
muy sensibles a las variaciones de temperatura, p or la que las muestras
clínicas deben ser inoculadas lo más pronto posible. Luego de 24 -48 hrs.
de incubación la N. gonorrhoeae forma colonias pequeñas (0.5.- 2 mm),
traslucidas, grisáceas, convexas, brillantes, con bordes lisos, con
frecuencia se despegaran completamente de la superficie del Agar y
pueden ser mucoides o gomosas. Son autolítico

Material
- Placas con agar chocolate y Thayer Martín modificado
- Láminas
- Set. De Gram.
- Reactivo para Oxidasa
- Muestra: Uretral, cérvix y canal anal y de otros locali zaciones LCR.

Procedimiento
 Examen directo de la muestra clínica.- Hacer un frotis de la muestra
y teñir con Gram.
 Cultivo
a. Sembrar la muestra en agar chocolate y/o Thayer Martín
modificado por estría y agotamiento para obtener colonias aisladas,
incubar 24-48 hrs. a 37°C y con CO2 2-10%.
b. Identificación:
1. Identificar las morfologías típicas de las colonias
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2. Realizar un Gram. de estas colonias.

3. Realizar las siguientes pruebas bioquímicas o enzimáticas.
- Test de oxidasa
- Fermentación de glucosa, maltosa, fructuosa, Sacarosa,
Lactosa.

Resultados
- Anotar los resultados obtenidos en el examen directo.
- Describir las colonias típicas aisladas, morfología microscópica y
reacciones bioquímicas.

Infección de transmisión sexual

Infección de transmisión sexual (ITS) resistente a varios antibióticos. Causante de
la gonorrea, infecta a 10 millones de personas al año tan solo en el continente
americano. Aumenta el riesgo de contraer VIH. Actúa como endotoxina,
responsable del choque séptico que aparece en meningococcemia.
- Jerarquía Taxonómica
o Reino: bacteria
o Subreino: negibacteria
o Filo: Proteobacteria
o Clase: Betaproteobacteria
o Orden: neisseriales
o Familia: Neisseriaceae
o Género: Neisseria
o Especie: N. Gonorrhoeae
- Características microbiológicas
o Diplococos Gram(-)
o Inmóviles
o No esporulados
o Diámetro: 0.6 – 1 um
o Aerobias
o Catalasa y oxidasa Positiva
o Fermenta glucosa y maltosa para produce energía por medio de la ruta de
Entner-Doudoroff, la cual requiere una gran cantidad de oxígeno.
o Requiere Agar chocolate y VPN para ser cultivada en el laboratorio (35 –
37º).
o Posee lipooligosacaridos en su superficie por lo que no es fácil de destruir
para el sistema inmune, ya que no la reconoce.
- Epidemiología
o Solo infecta seres humanos
o 25 – 50 % son asintomáticos
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- Transmisión:
o Contacto sexual con persona infectada
o Transmisión respiratoria
o A través del embarazo: madre-hijo
o Las mujeres tienen mayor riesgo de trasmisión sexual (asintomática)
o Más del 80% de los hombres sufren los síntomas
- Estructura Antigénica
o Fimbria (Pili): compuesta por pilina Tipo IV.
o Proteínas porina: proteína más abundante en su superficie. Existen en
forma de trímeros, los cuales van a formar canales que permiten en paso
de nutrientes y salía de desechos. Esta bacteria posee dos genes de
porinas.
o Proteínas Opa: proteínas de membrana que intervienen en la unión de las
células epiteliales y la fagocíticas polimorfonucleares. Las bacterias que
las poseen van a tener un aspecto opaco si crecen en cultivo.
 Colonias opacas: Enfermedades localizadas.
 Colonas transparentes: Infecciones diseminadas.
o Otras proteínas:
 Receptores de membrana externa: transferrina y lactoferrina. El
hierro es fundamental para el desarrollo del metabolismo de
esta bacteria, las que compiten con el hospedador por este
elemento.
 Proteasa de IgA
 Lipoologosarido Gonicosico: Lípido A y núcleo de
oligosacárido. Protege a la bacteria del sistema inmunitario del
huésped.
- Patogenia e inmunidad
La bacteria se adhiere a las células epiteliales no ciliadas gracias a la pilina
tipo 4. La adhesión libera citoquina, quimioquinas y óxido nítrico causando
una inflamación local. Las bacterias que atraviesas a la célula llegan al
subepitelio, donde los macrófagos, células dendríticas y neutrófilos se
encargaran de controlar la infección. Esta bacteria puede causar:
o Gonorrea: secreción purulenta de la infección bacteriana pasadas 2 a
5 días de la infección.
o Gonococcemia: caracterizada por poliartritis migratoria, tenosinovitis y
lesiones en la piel con erupciones llenas de pus.
o Uretritis Gonocócica
o Epidimitis
o Proctitis gonocócica
o Cervisitis gonocócica
o Vaginitis gonocócica
o Salpingitis
o Enfermedad Inflamatoria Pélvica
o Faringitis gonocócica
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o Gonorrea ocular (adultos)

o Oftalmia gonorrea (R.N): por madre infectada
o Artritis gonocócica
- Diagnóstico: Cultivo: Tinción de gran
- TRATAMIENTO: Dependerá de la enfermedad generada
o Uretritis: Ceftriaxona
o Infección gonocócica anogenital: Ceftriaxona (intramuscular)
o Infección gonocócica diseminada: Ceftriaxona (intramuscular o
intravenosa)
o Enfermedad inflamatoria pélvica: Ceftriaxona
o Oftalmia neonatal gonocócica: Penicilina G 100 000
unidades/kg/corporal/día.
También se puede prevenir con la vacuna de polisacáridos de la
capsula.

Clostridium tetania
- Agente mundial del tétanos
- Se encuentra en tierras y heces fecales de equinos y otros.
- Se destiñes distintos tipos por medio de antígenos flagelares específicos.
(Antígeno O)
- Toxina: Tétanos parmina, fragmentada por proteasa bacteriana hasta formar
dos péptidos unidos por un puente desulfuro. Puede causar hiperreflexia,
espasmos musculares y parálisis espástica, ya que una cantidad mínima de
toxina es mortal para el ser humano.
- Patogenia
o No es un microorganismo invasor
o Se encuentra en área de tejido desvitalizado (heridas, quemaduras,
lesiones, etc.).

MANIFESTACIONES CLÍNICAS

TÉTANO
Los signos y síntomas del tétanos aparecen en cualquier momento, desde unos
pocos días hasta varias semanas después de que las bacterias del tétanos ingresen
al cuerpo a través de una herida. El período promedio de incubación es de siete a
diez días.

Algunos signos y síntomas frecuentes del tétanos son:

 Espasmos y rigidez de los músculos de la mandíbula (trismo)

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 Rigidez de los músculos del cuello

 Dificultad al tragar

 Rigidez de los músculos abdominales

 Dolorosos espasmos en el cuerpo que duran varios minutos, generalmente

provocados por acontecimientos menores, como corrientes de aire, ruidos
fuertes, contacto físico o la luz.

Prevención

Puedes prevenir el tétanos fácilmente aplicándote una vacuna.

Serie de vacunas principales

En general, la vacuna contra el tétanos se da a niños como parte de la vacuna

antidiftérica, antitetánica y contra la tos ferina acelular (DTaP). Esta vacuna
proporciona protección contra tres enfermedades: infección respiratoria y de la
garganta (difteria), tos ferina (pertussis) y tétanos.

La vacuna DTaP es una serie de cinco inyecciones que, por lo general, se

administran en el brazo o el muslo, a niños de las siguientes edades:

 2 meses

 4 meses

 6 meses

 15 a 18 meses

 4 a 6 años

CLOSTRIDIUM BOTULINUM
El bacilo anaerobio gram-positivo y esporulado C. botulinum elabora siete tipos de
toxinas antigénicamente distintas. La intoxicación en el ser humano se debe por lo
común a la toxinas de los tipos A, B, E, O, F. Las toxinas del tipo A y B son proteínas
altamente tóxicas resistentes a la digestión por las enzimas, GI(x). En el botulismo
transmitido por los alimentos, la toxina producida por el C. botulinum que
contaminan éstos, son ingeridos, pero en el botulinum producido por heridas y en el
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infantil la neurotóxica es elaborada in vivo por el crecimiento de C. botulinum en el

tejido infectado y en el aparato digestivo del lactante. Tras su absorción, las toxinas
interfieren en la liberación de acetilcolina en las terminaciones nerviosas periféricas.

TIEMPO D ENCUBACIÓN:
El periodo de incubación en la forma alimentaria es de 6 a 8 horas hasta 36 horas,
y en el botulismo por heridas de hasta 10 días.

DIAGNÓSTICO Y TRATAMIENTO

Por lo general, el diagnóstico se basa en la historia clínica y el examen clínico,

seguidos de la confirmación de laboratorio, especialmente para demostrar la
presencia de la toxina botulínica en el suero, las heces o los alimentos, o un cultivo
de C. botulinum de heces, heridas o alimentos.

CLOSTRIDIUM PERFRINGENS

Métodos de cultivo e incubación

Para la recuperación de bacterias del género Clostridium a partir de muestras

clínicas, se pueden utilizar los siguientes medios: agar sangre para anaerobios,
como agar Brucella, agar sangre PEA, agar Schaedler, agar sangre para anaerobios
CDC, etc. Es conveniente incluir un medio con yema de huevo para investigar la
producción de lipasa y lecitinasa y un medio líquido de enriquecimiento, como el
tioglicolato. La incubación se hará a 35-37ºC en anaerobiosis (cámaras, jarras o
bolsas con generadores de atmósfera anaerobia).

IDENTIFICACIÓN DE ESPECIES DE CLOSTRIDIUM

El examen de la típica morfología tanto microscópica como de la colonia permite
una identificación presuntiva y rápida de algunas especies de Clostridium
frecuentemente aisladas. Además, junto con la utilización de pruebas bioquímicas
sencillas como el estudio de la producción de lecitinasa y lipasa en agar yema de
huevo, la hidrólisis de la gelatina y de la urea y la producción de indol por el método
rápido (p-dimetil-aminocinnamaldehído), constituyen un método fácil y poco costoso
para la identificación, incluso definitiva, de algunas de ellas.

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¿Neisserias patógenas desarrolladas 22°?

Son aerobios, y las especies patógenas son exigentes desde el punto de vista de
sus requerimientos nutricionales (agar sangre o agar chocolate), de temperatura
(crecen a 37º pero no a 22º) y atmosféricos (atmósfera con 5 a 7 % de CO2). Son
oxidasa positivos.
Estos requerimientos de cultivo, así como el patrón de fermentación de distintos
azúcares (en especial glucosa, maltosa, sacarosa, lactosa y fructosa) se utilizan
para diferenciar las distintas especies de Neisserias
La familia Neisseriaceae. Su crecimiento en medios simples a temperatura de 22ºC,
su incapacidad de fermentar hidratos de Carbono y la producción de una
desoxirribonucleasa permiten su identificación. Un gran porcentaje de cepas
producen ß-lactamasas. Este germen que sido implicado en los últimos años como
agente de diversas enfermedades infecciosas, entre ellas otitis media en niños,
exacerbación de bronquitis crónica y neumonía, sobre todo en pacientes con
enfermedad respiratoria subyacente.

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¿Localización de gonococos en los PMN en un proceso agudo y crónico?

Son patógenos y comúnmente se
encuentran dentro de las células PMN.
La meningitis es la complicación más
grave y más frecuente como
consecuencia de una diseminación
sanguínea.
Las meninges presentan inflamación
aguda con trombosis de vasos
sanguíneos y exudado de leucocitos
PMN (exudado purulento espeso en
cerebro) Neisseria meningitis Coloniza
a través de la nasofaringe.
Esta bacteria tiene la capacidad de adherirse a las células de la faringe y, de ahí,
pueden pasar a la sangre y producir desde fiebre transitoria y bacteriemia hasta
meningitis.
El Meningococo puede afectar diversos órganos Cuando la bacteria ataca las
meninges (membranas que envuelven el cerebro), produciendo inflamación del
líquido cerebro espinal, hablamos de Meningitis meningocócica. Si la infección se
disemina por vía sanguínea, produce un cuadro llamado Meningococcemia, que
consiste en una septicemia que puede presentarse con o sin meningitis y cuya
evolución puede ser aguda o fulminante. Se caracteriza por un rápido colapso
circulatorio con rash hemorrágico.

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