ESTABLECE GUlA TECNICA PARA LA REALIZACION

DE LA VAUDACION DE METODOS DE ENSAYO.

RESOLUCION EXENTA w 20.ENF 2015 ,.~

201

SANTIAGO,

VISTOS: Providencia lnterna W 2325 de Ia Jefa de

Ia Asesoria Juridica; y TENIENDO PRESENTE: lo dispuesto en Ia l ey Organica Constitucional W
18.575 de "Bases Generales de Ia Administraci6n del Estado"; en Ia Ley N o 19.880 de " Base de los
Proced imientos Adm inistrativos que rigen los Act os de los 6rganos de Ia Administraci6n del
Estado"; C6digo Sanitario; Decreto Supremo No 3 de 2010, del Ministerio de Salud, que aprueba el
"Reglamento del Sistema Nacional de Control de Productos Farmaceuticos de Uso Humano"; en
los articulos 59 letra a) y b), 60 y 611etra b) del Decreto con Fuerza de Ley W 1 de 2005, que fija el
texto refundido, coordinado y sistematizado del Decreto Ley W 2763 de 1979 y de las Leyes W
18.933 y W 18.469"; Resoluci6n Exenta W 607 del 2014 de l Ministerio de Salud; asi como lo
establecido en Ia Resoluci6n W 1.600 de 2008, de Ia Contraloria General de Ia Republica; Decreto
Exento N2 27 de 2012 del Ministerio de Salud " Norma Tecnica W 131 que define los criterios
destinados a establecer Ia equivalencia terapeutica en productos farmaceuticos en Chile", Decreto
Exento N!:! 28 de 2012 Ministerio de Sa lud " Norma Tecnica W 127 sobre Buenas Prckticas de
Manufactura (BPM)" y Decreto Exento N!:! 543 de 2013 Ministerio de Salud, "Norma Tecnica W
139 so bre Buenas Practicas de Laboratorio (BPL)" ; dicto Ia siguiente:

CONSIDERANDO:

1.- La importancia de Ia validaci6n de los metodos

de ensayo, es que a traves de esta, es posible establecer el procedimiento y las condiciones en las
que deben realizarse, confiando asi, que los dat os obtenidos cumplen con Ia calidad deseada,
brindando seguridad y respaldo.
2.- De acuerdo a las Buenas Practicas de
Manufactura (BPM) y de Laboratorio (BPL), Ia validaci6n debe aplicarse en todas las etapas de
fabricaci6n y control de un producto farmaceutico, esto es: manufactura, control de procesos
control y aseguramiento de Ia calidad.

RE S OLU CION

1.- APRUEBESE como "G U[A TECNICA PARA

REALIZACION DE LA VALIDACION DE METODOS DE ENSAYO" el siguiente documento que se
reproduce fntegramente.

" GUIA TECNICA PARA REAUZACION DE LA VALIDACION DE METODOS DE ENSAYO"

1) INTRODUCCION:
La validaci6n de los metodos de ensayo se entiende como una acci6n o un procedimiento
destinado a establecer pruebas documentales que demuestren cient fficamente que un metoda
analltico tiene las caracteristicas de desempefio adecuadas para cumplir los requerimientos de las
aplicaciones analfticas prete ndidas, esencia lmente en terminos de su exactitud y precision.
 2} REQUISITOS
Validaci6n de Ia Metodologia Analitica de los ensayos rea lizados a los medicamentos
(materias primas y productos terminados) se encuentra exigido segun lo establecido en:

1. Reglamento del Sistema Nacional de Control de Productos Farmaceuticos, Decreta Supremo

M INSAL NQ03 del af\o 2010:

Titulo II del Registro Sanitaria de las Especialidades Fa rmaceuticas y otros productos

farmaceuticos:
Art. 32° y 40° Parrafo segundo: De los requisites del Registro Sanitaria,

Titulo VI Laboratories Farmaceuticos:

Art. 145° Parrafo quinto: los procedimientos y registros;
Art. lSSQ Parrafo sexto: del personal y las responsabilidades;
Art. 1872 Parrafo cuarto: de Ia exenci6n de control de calidad y del control de serie

2. Norma Tecnica W 131, nominada " Norma que define los criterios destinados a establecer Ia
equivalencia terapeutica en productos farmaceuticos en Chile (EQT)"- Decreto Exento MINSAL
NQ27 de 2012.

3. Norma Tecnica W 127 de Buenas Practicas de Manufactura (BPM)- Decreto Exento MINSAL N2
28 de 2012.

4. Norma Tecnica W 139 de Buenas Pn!cticas de Laboratorio (BPL) - Decreta Exento MINSAL NQ
543 de 2013 .
3) ALCANCE
Los conceptos y terminos utilizados en esta guia son de aplicaci6n general y estan dirigidos
principalmente para ser aplicados sobre los metodos analiticos para el adecuado control de
ca lidad en:
Materias primas
Materiales de envase
Productos en estadios de producci6n intermedios o terminados
Estudios de estabilidad
Estudios de investigaci6n y desarrollo galenico.
Estudios de Equivalencia Terapeutica In Vitro.

Los Metodos Analiticos (MA) o Metodo de Ensayo (ME) para estudios de metabolismo,
farmacocinetica, biodisponibilidad, valoraciones microbiol6gicas y biol6gicas pueden requerir
otras exigencias no contem pladas en esta Gufa.

4) CONCEPTOS GENERALES:
Anal ito Principia activo o componente medido por el M E.
Blanco Matriz en Ia cual se mide el analito sin este.
Buenas Pr<kticas de Conjunto de reglas, procedimientos operatives y practicas que
Laboratorio (BPL) garantizan que los datos generados por un sistema de control de
calidad son reproducibles y representativos, asegurando Ia
validez y confiabilidad de los resultados.
' .
Buenas Pr<kticas de Norm as tecnicas mm1mas establecidas para todos los
Manufactura (BPM) procedimientos destinados a garantizar Ia calidad uniforme y
satisfactoria de los productos farmaceuticos, dentro de los limites
aceptados y vigentes para cada uno de ellos.
Ca li ficaci6n del disef\o (DQ, Colecci6n documentada de actividades que definen las
por sus siglas en ingles) especificaciones operacionales y funcionales del instrumento y
criterios para Ia selecci6n del vendedor, basandose en el uso
previsto del instrumento.
Calificaci6n de instalaci6n {IQ, La ejecuci6n de pruebas para asegura r que los equipos analiticos
por sus siglas en ingles) usados en un laboratorio estan instalados correctamente y
operan de acuerdo con las especificaciones establecidas.
Cantidad declarada o nominal Concentracion teorica declarada.
Material de referencia Material de referencia, caracterizado por un procedimiento
certificado valido desde el punto de vista metrologico para una 0 mas de las
propiedades especificadas, acompanado por un certificado que
propordona el valor de Ia propiedad especificada, su
incertidumbre asodada y una declaracion de Ia trazabilidad
metrologica.
Sustanda 0 estandar de Una sustancia que es ampliamente reconodda por poseer las
referenda prima ria (patron cualidades apropiadas dentro de un contexto especificado y cuyo
primario) contenido asignado es aceptado sin requerir comparaci6n con
otra sustancia qufmica; es decir corresponde a un producto
homogeneo co n propiedades especificas (identidad, pureza y
riqueza) que ha sido analizado y certificado por un organismo
calificado y homologado (reconocido oficialmente).
Nota: Las sustancias quimicas de referencia farmacopeica son
consideradas como sustandas de referenda primaria. En ausencia
de una sustanda de referenda farmacopeica, un fabricante debe
establecer una sustanda de referenda primaria.
Estandar o patron de trabajo Sustanda cuyas ca racteristicas son asignadas y/o calibradas por
(patron secundario) comparacion con una sustancia de referencia primaria. £1 grado
de caracterizad6n y analisis de una sustancia de referenda
secunda ria puede ser me nor que para una sustancia de
referenda primaria.
Estandar interno Sust ancia no presente en Ia muestra a analizar y de composicion
diferente a Ia del analito Ia cual se anade en cantidad conocida a
Ia muestra o al patron, con Ia finalidad de corregir Ia inexactitud
de los resultados.
lncertidumbre de Ia medicion Parametro no negativo que caracteriza Ia dispersion de valores
cuantitativos que se atribuyen a un mensurando (ana lito),
basandose en Ia informacion usada.
Trazabilidad metrol6gica Propiedad de l resultado de una medid6n en que el resultado
puede estar reladonado con una referenda a traves de una
cadena continua y documentada de calibraciones, contribuyendo
cada una a Ia incertidumbre de Ia medici6n.
Metodo Ensayo (ME) Oocumento que explica detalladamente el conjunto de
operadones necesa rias para efectuar un analisis determinado.
ME Normalizado ME publicados por organismos de normalizaci6n u organizaciones
(Fa rmacopeico y/o internadonales reconoddas en Ia normativa. Se considera un ME
Compendiado) robusto.
ME Normalizado- Modificado ME que ha sido adaptado en ellaboratorio a partir de un metodo
normalizado.
ME No No rmalizado ME que no se encuentra en normas u otras colecdones de
metodos, corresponderia a un nuevo metodo desarrollado por el
propio laboratorio o adaptado de Ia bibliografia.
Validadon de un Proceso documentado por el cual un procedimiento analitico (o
procedimiento 0 metodo metodo) demuestra ser adecuado para el uso al que est a
analitico destinado.
Validacion Acci6n documentada, efectuada en concordanda con los
prindpios de las Buenas Practicas de Manufactura y de
Laboratorio, que demuestran que los procedimientos, procesos,
actividades o sistemas empleados en Ia produccion yen el control
de calidad, son conducentes a los resultados dispuestos, dentro
de los limites establecidos.
 5) PARAMETROS DE DESEMPENO ANALfTICO:
Especificidad; Selectividad Capacidad de evaluar, medir e identificar simultanea o
separadamente, de manera inequivoca el o los analitos de
interes sin interferencias de impurezas, productos de
degradacion, compuestos relacionados, excipientes u otras
sustancias previsibles presentes en Ia matriz de Ia muestra o
insumos.
Exactitud; veracidad Corresponde al grado de concordancia de los resultados del
ensayo con el valor real o Ia proximidad al valor real de los
resultados obtenidos por el procedimiento, es decir evalua Ia
diferencia entre el valor experimental y el valor verdadero.
Matematicamente se expresa en forma de error determinado,
sistematico o sesgo, mientras menor es el sesgo mayor es Ia
exactitud de un resultado.
La exactitud de un metodo de ensayo debe establecerse en todo
su intervalo. No confundir exactitud con precision.
Limite de Detecci6n Es Ia menor concentraci6n de analito en una muestra que puede
ser detectada por una unica medicion, bajo las condiciones
experimentales establecidas.
Limite de Cuantificacion Corresponde a Ia menor concentracion o cantidad de analito de
una muestra que puede ser determinada con aceptable precision
y exactitud bajo las condiciones experimentales establecidas.
Parametro que solo sera incluido en Ia determinacion de
impurezas y/ o productos de degradacion.
Linealidad La linealidad de un metodo de ensayo es su capacidad para
obtener resultados de prueba que sean proporcionales ya sea
directamente, o por medio de una transformacion matematica
bien definida, a Ia concentracion de analit o en muestras en un
intervalo dado.
Se deben considerar los siguientes rangos especificos minimos
para Ia linealidad segun su aplicaci6n:
I. Para Ia valoracion de un Producto Farmaceutico: de 80% a
120% de Ia concentracion de trabajo (si se declara entre 90
a 110 %);
II. Para impureza declarada: desde el nivel declarado 20%;
Ill. Para impurezas declaradas pero que no establecen limites:
desde 0,1 - 2,5 %;
Precision Es el grado de concordancia entre los valores de una serie
repetida de ensayos efectuados sobre una muestra homogenea
o, expresado en otra forma, Ia distribucion de los valores
analiticos alrededor de Ia med ia.
Dentro del termino precision del metodo se pueden distinguir
tres t ipos de estudios:
I. Repetibilidad:
La repetibilidad expresa Ia precision bajo las mismas
condiciones de operacion en un periodo corto de tiempo
(misma muestra, mismo analista, mismo laboratorio, mismo
equipo, mismo dia, etc.).
II. Reproducibilidad:
Se entiende Ia reproducibilidad como el desarrollo del
procedimiento 0 metodo analitico en diferentes laboratorios,
como por ejemplo en un estudio en cola boracion. Se expresa
con los mismos parametros matematicos que Ia repetibilidad.
Ill. Precision lntermedia:
La precision intermedia expresa Ia variacion dentro de un
 laboratorio por ejemplo en diferentes dias, con diferentes
analistas 0 con equipo diferente dentro del mismo
laboratorio, con Ia misma muestra homogenea.
Robustez La robustez de un metoda de ensayo esta definida como Ia
medida de su capacidad para permanecer inalterado ante
pequenas pero deliberadas variaciones en ciertos parametros,
proporcionando una idea de su fiabilidad durante su empleo en
rutin a.

6) PARAMETROS ESTADJSTICOS:
Analisis de Varianza Varianzas entre datos del grupo, varianzas entre grupos y
(AN OVA) varianza total.

Coeficiente de variacion 0
Es Ia relacion entre Ia desviacion estandar (s) y Ia media (x).
desviacion estandar relativa
Normalmente se expresa en porcentaje.
(CV; RSD)
Desviacion estandar {cr; s) Estadistico basico, indicativa de Ia dispersion o variabilidad de
los resultados.
Error sistematico 0 Desviacion entre Ia media de una se rie de observa ciones y su
determinado (systematic error valor verdadero (error determinado, sistematico o sesgo). Se
of results) cuantifica determinando Ia exactitud del metoda (porcentaje de
recuperacion).
Error aleatorio 0 Desviacion entre cada una de las observaciones y su valor medio,
indeterminado {random error error indeterminado o aleatoric {debido al azar). La dispersion
of results) de estos datos se mide a traves de Ia Desviacion Estandar.
Grados de libertad (gl) Numero de categorlas independientes que definen una muestra
o una poblacion de datos. En el calculo de Ia Desviacion Estandar
representa el numero de desviaciones independientes respecto
a Ia media y se representa como " n - 1" (numero de datos
menos 1). En el calcu lo de Ia desviacion estandar de una recta de
regresion, con dos variables, el numero de grados de libertad es
"n- 2" (numero de datos menos 2).
lncertidumbre de medida Parametro asociado al resultado de una medicion, que
caracteriza Ia dispersion de los valores que podrian ser
razonablemente atribuidos al mensurando.
lntervalo de trabajo, rango, El intervalo comprendido entre las concentraciones superior e
amplitud inferior (am bas incluidas), en el cual el ana lito puede
cuantificarse con un nivel satisfactorio de precision, exactitud y
linealidad segun el metoda de ensayo documentado.
Desde un punto de vista estadistico, el rango es una medida de
dispersion, menos utilizada que Ia desviacion estandar. En una
serie de resultados el intervalo es Ia diferencia entre el mayor y
el menor de ellos.
Intervale de confianza 0 lntervalo en torno al valor estimado que contiene el valor real
limites de confianza con una probabilidad determinada.
Media (X) Media aritmetica o promedio, es Ia cantidad total de Ia variable
(muestra o medida) distribuida a partes iguales entre cada
observacion. En terminos matematicos, es igual a Ia suma de
todos sus valores dividida entre el numero de sumandos.
Muestra aleatoria Una muestra es aleatoria o randomizada si todos los miembros
de Ia poblacion tienen igual probabilidad de estar incluidos en Ia
misma.
Nivel de significancia (Aifa, u) Es el nivel de significacion utilizado para calcular el nivel de
confianza. El nivel de confianza es igual a 100% (1 - u), es decir,
un alfa (u) de 0,05 indica un nivel de confianza de 95%.
Pruebas de Significancia: Durante el proceso de validacion de los metodos de ensayo es
 frecuente utilizar pruebas de significancia estadisticas, las mas
comunes son:
1. Prueba t-Student para identificar errores sistematicos (sesgo).
2. Prueba F-Fisher para identificar errores aleatorios
(precisiones).
AI hacer una prueba de significancia se comprueba Ia veracidad
de una hip6tesis experimental, llamada "hip6tesis alternativa"
(H1, si hay diferencia,) con respecto a Ia hip6tesis nula (H 0 , no
hay diferencia) .
Es Ia H1 Ia que determina el numero de colas. Si Ia H1 contiene Ia
frase "mayor que" o " menor que", Ia prueba es de una-cola. Si Ia
H1 contiene Ia frase "noes igual que", Ia prueba es de dos-co las.
Resultado Aberrante: Corresponde a cualquier valor extremo que ocurra durante Ia
ejecuci6n de una prueba. En situaciones normales estos
resultados t iene n una frecuencia aleatoria menor al 1 %.
Varianza (S) Se define como el cuadrado de Ia desviaci6n estandar y su
utilidad es que facilita el calculo de Ia propagaci6n de errores.

7) DESARROLLO DE LOS METODOS ENSAYO:

Un metodo analitico se desarrolla para probar o ensayar una caracteristica definida de un
principia activo o Ia de un producto farmaceutico frente a los criterios de aceptaci6n est ablecidos
para esa caracte ristica . lnicia lmente en el desarrollo de un nuevo metodo analitico, Ia elecci6n de
Ia instrumentaci6n y metodologia analitica debera seleccionarse con base a Ia finalidad prevista y
el alcance del metodo analitico. Los parametros que pueden ser evaluados durante el desarrollo
del metodo de analisis son: Especificidad, Linealidad, Lim ite de detecci6n (LD) y Limite de
cuantificaci6n (LC), Exactitud y Precision.
Durante las eta pas iniciales del desarrollo de el o los metodos de analisis, se recomienda Ia
eva luaci6n de Ia robustez o solidez de estos porque esta caracteristica puede ayudar a decidir que
metodo va a se leccionar de manera definitiva.

8) DOCUMENTAR METODOS DE ENSAYO:

Los metodos de ensayos deben estar documentados y deben incluir Ia descripci6n de los
metodos analiticos con el su ficiente detalle como para permitir que un ana lista competente pueda
reproducir las condiciones necesarias y obtener resultados dentro de los criterios de aceptaci6n
establecidos. Tambien debe incluir en Ia descripci6n los aspectos de los metodos analiticos que
requieren una atenci6n especial.
Un Metodo de Ensayo o Metodologfa Analitica, puede ser referenciado a Metodos
Normalizados o compendiados de fuentes reconocidas por el OS N2 03/10, en su articulo 33°
(Farmacopeas oficiales), solo si el metodo de ensayo que se hace referenda no se modifica mas
alia de lo permitido en el metodo publicado.
Cuando el metodo de ensayo utilizado sea un metodo " Normalizado-Modificado" o uno
"No Normalizado" debe proporcionar en detalle el o los procedimientos para lleva rlo a cabo.
La siguiente tabla contiene info rmacion esencial que debe incluir un Metodo de Ensayo
Documentado·
A. Principia I Alcance Una descripci6n de los pnncipios basicos del
ensayo analitico/ tecnologia (separaci6n,
detecci6n, etc.); analito objetivo (s) y tipo de
muestra (s) ej., materia prima, producto
terminado, impurezas o compuestos
relacionados).
B. Aparatos I Equipos Todos los equipos y componentes necesarios y
ca lificados (ej., tipo de instrumento, detector,
tipo de columna, dimensiones, columna
alternativa, tipo de filtro, etc.).
C. Parametros de funcionamiento Ajustes 6ptimos ca lificados y rangos (ajustes

D. Reactivos I Estandares de referenda
E. Preparacion de Ia muestra
F. Preparacion Solucion de referencia
G. Procedimiento
H. ldoneidad del Sistema/ Adecua bilidad
I. Formulas de Calculo
permitidos) crlticos para el analisis ej ., el
velocidad de flujo, temperatura de los
componentes, tiempo de corrida, Ia
configuraci6n del detector, gradie nte,
muestreador "Head space"). Se puede utilizar un
esquema o gratico con Ia configuraci6n
experimental y parametros de integracion.
• Grado quimico ej.: analisis, HPLC, GC, etc.).
• Fuente (ej. el estandar de referenda USP o
material de referenda secundario).
• Estado (ej. seco, sin secar, etc.) y Ia
concentracion.
• Potencia estandar (factores de correccion de Ia
pureza).
• Condiciones de almacenamiento.
• Vida util utilizable.
Debe incluir en detalle Ia forma de prepa racion
de muestras por ensayos individua les por
ejemplo: metodo de extraccion, diluci6n 0 de
concentraci6n, los procedimientos de mezcla
mediante ultrasonidos, agitadon o sonicaci6n de
tiempo, etc. para una preparacion (mica para
ensayos cuantitativos describiendo las unidad es
apropiadas de concentraciones de soluciones
trabajo (por ejemplo: g/ mL o mg/ mL) y Ia
informacion de Ia estabilidad de las soluciones y
sus condiciones de almacenamiento.
lncluir el o los procedimientos para Ia
preparaci6n y el uso de las soluciones de
estandar de referenda, con las unidades de
concentracion y Ia informacion sobre Ia
estabilidad y las condiciones de almacenamiento.
Una descripcion paso a paso del metodo (ej .
tiempos de equilibria, inyecci6n de secue ncia con
espacios en blanco, blancos, las muestras, los
controles, las normas de solucion de sensibilidad
(para el metodo de impurezas) y para mantener
Ia validez de Ia idoneidad del sistema durante el
lapso de analisis) y rangos admisibles de
funcionamiento y ajustes en cada caso.
Procedimientos y parametros de confirmacion de
prueba para asegurar que el sistema (eq uipo, Ia
electronica y las operaciones analiticas y
controles para ser analizados) funcionara
correctamente como un sistema integrado en el
momento de su uso. lncluir los criterios de
aceptaci6n de idoneidad del sistema aplicado a
las normas y controles, como los criterios de
pico, precision y resoluci6n de aceptacion,
pueden ser necesarios segun el caso.
El metodo de integraci6n y formulas de calculo
representativos para el analisis de datos (normas,
controles, muestras) para pruebas basadas en
demanda del rotulo y las especificaciones (ej.
ensayo, impurezas especificadas y no
especificadas y factores de respuesta relativos).
 Esto incluye una descripcion de las
transformaciones o las formulas matematicas
utilizadas en el amWsis de datos
(transformaciones o analisis estadlstico), junto
con una justificacion cientffica para cualquier
factor de correccion utilizado.
J. Reporte de datos Una presentacion de datos numericos que sean
consistentes con las capacidades instrumentales
y criterios de aceptaci6n.
Debe indicar que formato utilizar para informar
de los resultados por ejemplo: % de lo rotulado,
peso I peso, y peso/ volumen, etc. con el numero
especffico de cifras significativas necesarias.
Para los metodos cromatograticos, debe incluir
los tiempos de retenci6n (RT) para Ia
identificacion con base de comparacion estandar
de referencia, tiempos relativos de retenci6n
(RRT) (conocidos y desconocidos impurezas)
rangos aceptables y resultados de Ia muestra de
informes criterios.
Debe incluir siempre los valores para los criterios
de aceptacion, tolerancia, exclusion y rechazo.

9) MATERIAL Y ESTANDARES DE REFERENCIA:

Para efectos de aplicar las indicaciones contenidas en esta gufa, se entendera que los
Estandares de Referenda corresponden a un material altamente caracterizado que se utiliza para
garantizar Ia identidad, Ia potencia, Ia calidad y Ia pureza de los analitos que se mediran, tales
como: principios activos, impurezas relacionadas, disolventes residuales, excipientes, entre otros.
Para asegurar el mantenimiento de las caracterfsticas y homogeneidad de este material se
debe procurar mantener de manera estricta las condiciones de almacenam iento, cond iciones de
uso, y las instrucciones de manejo para evitar generacion de impurezas o analisis incorrectos. Se
debe mantener un control estricto con los respectivos registros de este material para asf
garantizar Ia exactitud y ajustarse a un sistema valido de medidas.
10) ENSAYOS DE APTITUD, VERIFICACION Y VALIDACION DE METODOS ENSAYO:
A. Ensayos de Aptitud de ME:
El ensayo de aptitud del sistema es una parte integral de muchos metodos analfticos
instrumentales. Los ensayos estan basados en el hecho que el equipo, Ia parte electronica, las
operaciones analiticas y las muestras a ser analizadas contribuyen al sistema. El ensayo de aptitud
del sistema que va a ser aplicado depende del tipo de procedimiento a usar.
Los ensayos de aptitud se emplean para Ia verificaci6n de metodos normalizados o
procedimientos analfticos validados y deben ser realizados antes de cada uno de los analisis.
Siempre que los criterios de aptitud del sistema se cumplan, el metodo o procedimiento se
considera adecuado para el proposito previsto.
Para los metodos cromatograficos instrumentales ningun analisis de muest ras es
considerado aceptable a menos que se haya demostrado Ia aptitud del sistema.

B. Verificaci6n de ME Normalizados:
Se considera que los ME Normalizados estan validados para el uso previsto como se
establece en la(s) monograffa(s). Sin embargo, en el laboratorio donde se utilicen se debe
confirmar, por ejemplo, que para un prod ucto farmaceutico terminado que se analiza por primera
vez, no surgen interferencias a partir de los excipientes presentes, o que para un principia activo,
las impurezas que aparecen a partir de una nueva ruta de sfntesis esten diferenciadas
adecuadamente. Si el metodo normalizado se adapta para otro uso, debe validarse para tal uso y
asf demostrar que es apto para el mismo.
En Ia verificaci6n se deben evaluar diversos elementos, tales como el efecto de Ia matriz
sobre Ia recuperaci6n de impurezas y farmacos desde Ia matriz de producto farmaceutico, Ia
aptitud de las columnas y condiciones cromatograficas, y Ia adecuada respuesta de Ia senal del
detector, entre otros.
Para el proceso de verificacion se pueden usar algunas de las caracteristicas de
desempeno analitico que se enumeran en el punta C. La Verificacion puede requerir o no Ia
ejecucion, en condiciones rea les, del metoda para cada una de los parametros de desempeno,
siendo Ia evaluacion de especificidad un parametro clave en Ia verificacion de que un metoda
farmacopeico es apto para usar en Ia valoracion de principia activo. El grado y extension del
proceso de verificaci6n puede depender del tipo de metoda (pasos especificos y matrices) y los
eq uipos o instrumentos asociadas.
No se requiere verificaciones ni va lidacion para metodos normalizados basicos tales como
(pero no limitados a): apariencia, cenizas sulfatadas, densidad, dureza, friabilidad, indice
refraccion, masa, metodos de quimica humeda, perdida por secado, pH, tiempo de desintegracion,
viscosidad y volumen.

C. Va lidaci6n de metodos de ensayo " Normalizados-Modificados" y "No Normalizados"

Validacion del metoda analitico es el proceso para demostrar que un procedimiento

analitico es adecuado para los fines previstos. La metodologia y el objetivo de los procedimientos
analiticos deben estar claramente definidos y entendidos antes de iniciar los estud ios de
va lidacion. La validacion de datos deben generarse en virtud de un protocolo aprobado se debe
contar co n Ia descripci6n del metoda de ensayo de cada prueba caracteristica incluyendo los
criterios de aceptaci6n debidamente justificados, todo esto se debe operar siguiendo las BPL y/o
BPM.

o. Parametros de desempeno analitico (Validaci6n M etoda de Ensayo) :

Los parametros de validacion son·
cQue·hacer? cC6mo se evalua?
Especificidad/ Analisis simultaneo de:
Se debe garantiza r el buen
Selectividad • Un blanco de reactivos;
funcionamient o del metoda, y
• Una matriz natural o sintetica libre de analito;
que este distingue los efectos
• Analito en un solvente adecuado;
de las impurezas o
• La misma matriz con el agregado de una interferentes, las sustancias
cantidad conocida de analito o una muestra que reaccionan entre si, etc.,
rea l; y que podrian estar prese ntes
• Pot enciales interferencias en presencia de en Ia matriz
analito.
Linea lid ad Eva luacion visual para definir
t ipo curva (lineal, exponencial,
logaritmo etc.)
Cantidad de puntas: ~ 5 concentraciones,
Evaluacion estadistica de Ia
lgualmente espaciadas.
curva (ej. cuad rados minimos)
Cantidad de replicados por concentraci6n : de 3
Gratico de los residuos
a 5 replicas independientes
Coeficiente de correlacion (R 2)
Usa ndo analito puro o analito en matriz
>0,99
Medidos aleatoriamente
Pendiente y ordenada al
origen (dependiente de Ia
concentracion de trabajo)
Precision 1) Repetibilidad: Repetibilidad: La precision de
Preparar 3 niveles de concentraciones un metoda se expresa
independientes (alto-medio-bajo) analizar en cuantitativamente como
sextuplicado. "imprecision" a traves del
2) Precision intermedia calculo de Ia desviacion
Preparar 3 niveles de concentraciones estandar (s) o coeficiente de
independientes {alto-medio-bajo) analizar en variacion (%) de una serie de
sextuplicado. resultados.
Modificando: dia o instrumento o analista o Precision inte rmed ia: Calcular
 una combinaci6n de ellos, seleccionado lo coeficiente de variaci6n de c/u
mas critico para el resultado. de los niveles y comparar los
3) Reproducibilidad (para transferencia de resultados de los resultados de
Metoda) Ia PI con los de Ia Repetibilidad
Si el rango del metodo es amplio debera a traves de un metodo
evaluarse Ia precision para distintos valores estad lstico adecuado
dentro del rango. (Comparaci6n de medias,
ANOVA, etc.)
Exactitud Tres maneras de determinar:
1) Preparacion de matriz con adicion de A traves de Ia medicion del
estandar (Dispone de los excipientes) sesgo (bias), el cual se puede
2) Preparaci6n de muestra enriquecida con expresar como:
estandar (Nose dispone excipientes) Diferencia: 6 = Xobs- Xref
3) Curva de Calibracion con muestra
compa rada con curva de calibracion de Recuperacion: % R =XobJXref x
estandar 100
Se debe realizar en 3 niveles de concentracion Xref = valor de referenda
(bajo - media -alto) respecto a Ia Xobs = valor medio observado
concentracion de trabajo, yen triplicado.
lntervalo - Establecer el rango de concentraciones del El rango mas estrecho donde
Rango analito en Ia muestra para el cual el metodo el intervalo cumple con los
esta validado. criterios de linealidad,
precision y exactitud.
Umite de Se determina en el caso de impurezas y cuando LD = 3 x S 6 LC= 3 X
detecci6n Ia respuesta de Ia concentracion del principia Yb/m
activo es cercana a Ia sensibilidad del
instrumento. s = desviacion estandar de un
1) Realizar una curva con 3 puntas de blanco o de una muestra
principio activo en concentraciones cercanas fortificada a baja
al limite de cuantificacion del equipo. concentraci6n.
2) Calcular Ia sefial ruido del equipo. Yb= intercepto de Ia ecuaci6n
de Ia curva
m= pendiente de Ia curva.
Umite de Se determ ina en el caso de impurezas y cuando LD = 10 x s 6 LC= 10 x
cua ntificacion Ia respuesta de Ia concentracion del principia Yb/m
activo es cercana a Ia sensibilidad del
instrumento . s = desviaci6n estandar de un
1) Realizar una curva con 3 puntos de blanco o de una muestra
principia activo en concentraciones cercanas fortificada a baja
al limite de cuantificacion del equipo. concentraci6n.
2) Calcular Ia sefial ruido del equipo. Yb= intercepto de Ia ecuaci6n
de Ia curva
m= pendiente de Ia curva.
Robustez Se desafla al metodo rea lizando variaciones Con los datos se realiza un
tanto en Ia preparacion de Ia muestra como en analisis de cuadrado Iatino.
Ia determinacion anaHtica.
Se estudia el efecto de tales variaciones sobre Se establecen los rangos
los parametros previamente validados, en permitidos de modificaciones
particular sobre Ia precision y exactitud del del metodo sin que se afecte
metodo. el desempeno de este.
Gran parte de esta informacion proviene del
desarrollo del metodo

Se debe tener en consideraci6n que no todos los parametros de validacion son aplicables
para todos los tipos de ensayos y que los datos generados en el proceso de validaci6n deben
mantenerse disponibles durante todo el perfodo de uso y validez del metodo de ensayo.
Tipo Analisis de impurezas Valoracion
de
procedimiento ldentificacion disolucion (solo
Ensayos Ensayos de
analftico cuantitativos If mite medicion)
contenido/potencia
Exactitud - + y +
Precision:
1. Repetibilidad - + - +
2. Precision
lntermedia a
- + - +

Especificidad + + + +
Umite de deteccion - -b + -
Limite de
cuantificacion
- + - -

Linealidad - + - +
Intervale - Rango - + -b +
+ La ca racterist1ca debe ser evaluada normalmente.
- La caracteristica no se evalua normalmente;
a La precision intermedia no es necesaria en casos donde se ha realizado un estudio de
reproducibilidad.
b Puede necesitarse en algunos casos.

E. CICLO DE VIDA DE LOS METODOS DE ENSAYO:

Una vez que un metodo de ensayo (incluyendo los metodos normalizados) es validado e
implementado con exito, el metodo se mantendra durante el ciclo de vida del producto.
A lo largo del ciclo de vida se recomienda rea lizar un analisis de tendencias (graficas
control) en forma periodica para evaluar el rendimiento del ME o una revision cada 5 af\os y de
esta manera definir Ia necesidad de optimizarlo o revalidar Ia totalidad o una parte de este. Si un
ME para cumplir con los requisites de idoneidad o adecuabilidad del sistema necesita ajustes
repetidos a las condiciones de funcionamiento, este debe ser: reevaluado, revalidado o
modificado, segun proceda.
A lo largo del ciclo de vida del producto, los avances tecnologicos y los nuevos
conocimientos cientificos podrian justificar el desarrollo y validacion de un ME nuevo o
alternative.

F. REVALIDACION
Cuando se realizan cambios en un ME o sustitucion por uno nuevo o cambios en el
proceso de fabricacion (ej.: cambio en una pieza de equipo, cambio en el proceso de fabricacion o
formulacion, cambios de reactivos o instrumento) se debe considerar Ia revalidacion de todo o
parte del metodo de ensayo.
Es necesario revalidar para garantizar que el metodo de ensayo mantiene sus
caracteristicas crfticas de rendimiento (por ejemplo: especificidad, precision, exactitud, etc.) . El
grado de revalidaci6n depende de Ia naturaleza del cambio.

G. TRANSFERENCIA DE METODOS DE ENSAYO:

Co rresponde a un proceso documentado que califica a un laboratorio (el que recibe el
metodo) para utilizar el ME que se origino en otro laboratorio (laboratorio origen).
La transferencia de metodos analfticos se puede realizar de las siguientes formas:
1) Analisis comparative utilizando totes homogeneos,
2) Co-validaci6n entre laboratories,
3) Re-validaci6n
Debe existir un protocolo bien disenado antes de implementar una transferencia, debe
incluir: consenso entre ambas partes, estrategia de ejecuci6n, requisites y responsabilidades de
cada una de las partes. Este protocolo debe contener los siguientes puntos: Objetivos, Alcance,
Responsabilidades, Materiales y equipos, Metodo analftico, Diseno experimental (Analisis
comparative, Co-validaci6n, Re-validacion); Criterios de aceptaci6n, Evaluacion de resultados.
 H. REPORTE DE VERIFICACION o VALIDACION o RE-VALIDACION o TRANSFERENCIA:

Finalmente para documentar todos los resultados obtenidos se debe emitir un Reporte o
lnforme de Verificaci6n o Validaci6n o Re-Validaci6n o Transferencia segun sea el caso, este
documento se considera Ia finalizaci6n del proceso y debe estar en concordancia con el protocolo
respectivo asi como firmado por el personal ttknico responsable. Este documento debe contener
claramente Ia conclusion final si el metoda esta calificado para el prop6sito propuesto.

La siguiente tabla contiene informacion esencial que debe incluir un Reporte o lnforme de
Verificacion o Validacion o Re-Validaci6n o Transferencia Documentado:

A. Objetivo Declarar el objetivo de Ia validacion

B. Alcance Declaraci6n del alcance del metoda de ensayo
c. Principia activo I matriz ldentificar analito y matriz
D. Metoda ensayo ldentificar M E con nombre y c6digo
E. Equipos y Especificaciones Nombre, marca, mode to, numero de
identificacion, tipo de columnas, tipo de
detectores, etc.
F. Estandares de Referenda Nombre, marca, procedencia, codigo de
identificacion, valores asignadas, unidades, etc.
G. Resultados (de cad a uno de los lncluir una t abla con los resultados, tolerancias
..
parametros) y analisis estadisticos. y calificaci6n.
H. Registros derivados de Ia validaci6n Citar los registros o reportes entregados por el
(trazabilidad a datos crudos) equipo y copia de las planillas de calculos
generadas en el proceso analftico.
I. Conclusiones Declaracion del campo de aplicacion del
metoda: analito, rango de trabajo, unidades,
matrices y advertencias ace rca de Ia
interferencia conocida en las cuales se ha
demostrado Ia validaci6n.
J. Responsables ldentificar personal que realiz6 Ia validaci6n.
K. Revision y V!!B!! Superior ldentificar superior jerarquico que valid a y
califica los resultados informados.
L. Fecha lnicio I Fecha de Termino Registrar las fechas de inicio y fin del proceso.
validaci6n

11) REFERENCIAS:
Farm acopea de Estados Unidos I Formulario Nacional
Capitulo General <621> Cromatografia;
Capitulo General <1010> Datos analfticos- Interpretacion y Tratamiento;
Capitulo General <1224> Transferencia de los procedimientos analfticos;
Capitulo General <1225> Validacion de los procedimientos compendiados;
Capitulo General <1226> Verificaci6n de Procedimientos compendiados;
Advertencias y requisitos generales; y
7. Resultados de ensayo

Guia para Ia industria: Conferencia lnternacional sobre Armonizaci6n (ICH)

Q2 (R1) Validacion de los procedimientos analfticos: Texto y Metodologia (marzo de 1995, mayo
de 1997)
Q3A (R2) lmpurezas en nuevas sustancias de drogas (junio de 2008)
Q3B (R2) Las impurezas en Nuevos Productos Farmaceuticos (agosto de 2006)
Q3C (R5) lmpurezas: Solventes Residuales (Febrero de 2011)

Guidance for Industry (FDA)

Analytical Procedures and Methods Validation for Drugs and Biologics (Draft February 2014)
Serie de lnformes Tecnicos de Ia OMS, No. 957, 2010
Anexo 1 Buenas practicas de Ia OMS para laboratories de control de calidad de productos
farmaceuticos

Serie de lnformes Tecnicos de Ia OMS, No. 823, 1992

Comite de Expertos de Ia OMS en Especificaciones para las Preparaciones Farmaceuticas 32°
In forme

ANOTESE, COMUNIQUESE Y PUBLIQUESE

Resol. Al/N"86
22/ 01/15
Distribuci6n:
Oi reccion
Asesoria Juridica
Departamento ANAMED
Subdepto . Registro y Autorizaciones Sanitarias
Subdept o Laborat orio Nacional de Cont rol
Subd epto. lnspecci6n
Subdepto Biofarmacla
Gest i6n de Tramit es
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Avda. Marat hon Nl! 1000, Nuiioa - Casilla 48 - Fono 5755100- Fax 56-2-5755684- Santiago, Chile.