Sobre glicósidos cardiotónicos, saber:

GLICOSIDOS CARDIOTONICOS DEFINICIÓN:

Los glicósidos cardiotónicos son sustancias amargas constituidas de una porción esteroide, una
porción glicosídica y un anillo de gama-lactona, alfa,ß-insaturada o delta-lactona-alfa,ß-
insaturada, que actúan sobre el músculo cardiaco y por tanto se utilizan como medicamentos
contra la insuficiencia cardiaca. Se conocen entonces según el anillo lactónico dos grandes
clases de cardiotónicos: Los CARDENOLIDOS, con anillo de gama-lactona, y los BUFANOLIDOS O
ESCILANOLIDOS, con anillo de delta-lactona.

a) Representar la estructura de las dos clases de glicósidos. Diferenciar sus partes.

Cuando el anillo lactónico es pentagonal (una g-butirolactona insaturada) se trata de

un Cardenólido.

Cuando el anillo es de tipo hexagonal (una alfa-pirona) se tienen los Bufadienólidos.

ESTEROIDE FORMADO
POR:
4 ANILLOS:
3 CICLOHEXANOS
1 CICLOPENTANO
TODAS LAS
HORMONAS DE LOS
HUMANOS TIENEN ESA
ESTRUCTURA BASE

LOS BUFADIENÓLIDOS:
PRINCIPALMENTE EN
ANFIBIOS (LOS SAPOS)

b) Indicar los reactivos químicos específicos que se usan para detectarlas.

 Lugar de reacción Reactivo Composición Coloración

Lactona α, β-insaturada Baljet Acido pícrico Anaranjada

2,4,6trinitrofenol) y álcali.

Kedde Ác. 3,5-dinitrobenzoico Violeta púrpura

Legal Nitroprusiato de sodio y Rojo

álcali.

Raymond m-dinitribenceno y álcali Azul

Núcleo esteroidal Liebermann- Anhídrido acético y Rojizo-violeta-azul
Bourchard H2SO4Conc. Castaño-rojizo
Salkowski H2SO4Conc.
SbCL3 y anhídrido acético.
Carr Price Azul o violeta
Ácido tricloroacético
Desoxiazúcar Kéller- Killiani ÁC. Acético glacial Rojo
FeCl3 y H2SO4Conc.
Pesez
Xantidrol Rojo

c) Fuentes botánicas de Costa Rica (nombre popular y botánico) y principios activos

presentes en cada una de estas especies.

 Narciso
Nombre botánico: Nerium oleander
PA cardiotónico: Oleandrina

 Chirca
Nombre botánico: Thevetia peruviana
PA cardiotónico: thevetina B

 Viborana
Nombre botánico: Asclepias curassavica
PA cardiotónico: Calotropina

d) Sobre el impacto medicinal de Digitalis purpúrea. Incluir principios activos principales,

usos populares e historia.

El mecanismo de acción actúa inhibiendo la enzima sodio-potasio ATPasa, por lo cual se

incrementa el calcio intracelular. El incremento del calcio intracelular produce un efecto
inotrópico positivo. También se produce un efecto vagal en el sistema nervioso
parasimpático y por esta razón se utiliza en la regulación de las arritmias cardiacas y
para disminuir las pulsaciones del ventrículo en la fibrilación ventricular. El nombre de la
molécula cardiotónica es la Digitoxina
 e) Reconocer los usos populares asociados a la viborana, el narciso y la chirca en nuestro
país y el nombre botánico de cada una.

 Narciso
Nombre botánico: Nerium oleander.
FAMILIA Apocynaceae
Nombres populares: Narciso, Adelfa, Laurel de flor, Rosa laurel
Usos: Se usa como cardiotónico y como tratamiento para diferentes tipos de cáncer.

 Chirca
Nombre botánico: Thevetia peruviana
FAMILIA Apocynaceae
Nombres populares: RES Chirca, Adelfa amarilla, Azuceno, Tevetia
Usos: ALES Utilizado para el sobre peso, se cree que con el tiempo rompe las cadenas de triglicéridos y
colesterol, NO UTILIZAR PARA EL SOBREPESO ES MORTAL.

 Viborana
Nombre botánico: Asclepias curassavica
FAMILIA Asclepiadeace
Nombres populares: S Viborana, Algodoncillo, Venenillo, Flor de sangre
Usos: ES Provoca el fraccionamiento de piezas dentales por lo que facilita la extracción.
Para el tratamiento de infecciones en la piel, que se manifiestan como granos o forúnculos.
Para matar ratones
Es un cardiotónico, mucho cuidado.

f) Interacciones ecológicas discutidas para algunas de estas plantas.

1- LA MARIPOSA MONARCA (Danaus pleixippus): se alimenta vorazmente de las hojas de

especies de Asclepias, acumulando principalmente el cardenólidos calotropina en su tubo
digestivo.
 Esto, le sirve como mecanismo de defensa contra sus depredadores más comunes: aves,
insectos y roedores. Este fenómeno es un claro ejemplo de entomofilia en la naturaleza.

2- PULGONES DE COLOR AMARILLO: parasitan los tallos tiernos del narciso, concentrando sus
cardenólidos como mecanismo de defensa, contra depredadores comunes del bosque.
 Sin embargo, se ha observado, que son alimento favorito de las mariquitas que
parasitan esta planta.

 Curiosamente, esta interacción insecto planta, no ha sido verificada en Thevetia

peruviana (Chirca).

3- LECHE DE SAPO: Los principales cardenólidos aislados de estas plantas y el encontrado en la

leche del sapo.
 g) Diferencias en cuanto a propiedades físicas, químicas y estructurales entre un
heterósido cardiotónico (cardenólido) y su correspondiente aglicona.

DIFERENCIAS QUÍMICAS:
Los heterósidos cardiotónicos presentan tres unidades moleculares bien diferenciadas

a) Un anillo esteroidal con función oxigenada en los carbonos C-3 y C-14.:

b) Una lactona α, β-insaturada de 5 miembros en el carbono-17, común en

cardenólidos aislados de plantas. Sin embargo, los encontrados en exudados
lechosos de animales como sapos, ranas y salamandras, se caracterizan por poseer
una lactona de 6 miembros y se les denomina Bufadienólidos.

c) Un tetra, tri, di o monosacárido, como sustituyente en el f3-hídroxilo del C-3, el

cual puede contener desoxiazúcares, como es el caso de la Oleandrina, principal
cardiotónico aislado del narciso (Nerium oleander)

DIFERENCIAS FÍSICAS:
Estos compuestos debido a la presencia del carbohidrato, principalmente en el carbono C-3 son
solubles en agua y alcohol.

DIFERENCIAS ESTRUCTURALES:
Características estructurales que favorecen más la actividad cardiotónica:

a) Los forma heterosida es más activa que la genina, aunque ambas formas conservan el
mismo efecto tóxico. Esto se atribuye a la mayor solubilidad de los heterósidos en agua,
dándose una mayor absorción y distribución de estas moléculas en sistemas biológicos.

b) La conformación y estereoquímica de los azúcares aumentan la afinidad por el sitio de

enlace con la proteína receptora.

c) Los ciclohexanos del anillo esteroidal A/B/C/D deben estar unidos cis/trans/cis.

d) La configuración  del sustituyente oxigenado en el carbono-3 y 14.

e) Ciclo lactónico , - insaturado es fundamental y debe estar orientado en . La forma 

es inactiva.

h) Explicar como funciona el reactivo de Kedde y por qué se ha utilizado para cuantificar
esta clase de compuestos utilizando ultravioleta/visible. Indique longitud de onda,
 concepto teórico aplicado (Ley de Beer Lamber), explicando como se obtiene y utiliza
una curva patrón.

 Cómo funciona:

Se mezclan cantidades iguales de las soluciones A y B del reactivo y se añade una punta de espátula de
la muestra a ensayar. Los cardenólidos y sus agliconas dan color azulado, rosa hasta violeta.

 Porqué se ha utilizado:
Para determinar las concentraciones de los cardenólidos presentes en los extractos crudos, se
emplea un espectrofotómetro de luz ultravioleta y visible.

 Longitud de onda: 520-540nm

 Ley de Beer Lamber (cómo se obtiene y utiliza una curva de patrón):

Primero se prepara una curva patrón, midiendo la absorbancia versus la concentración de por
lo menos cinco soluciones de concentración conocida, preparadas usando un glicósido
cardiotónico puro como la digoxina.

Como la intensidad del color desarrollado con el reactivo de Kedde cambia con el tiempo, se
recomienda hacer las lecturas siempre a los dos minutos de agregar el reactivo de kedde.

i) Represente el complejo formado, señalando el mecanismo de reacción

correspondiente.

Reacción de Kedde: Coloque 1mL del reactivo de Kedde. Si la solución después de 5

minutos, se colorea de castaño rojizo a rojizo violeta la reacción se considera positiva.

Reactivo de Kedde: mezcle 4 mL de solución etanólica de ácido 3,5-dinitrobenzoico al 2%

con 6mL de una solución metanólica de KOH 1N.
 j) Qué es Anvirzel, cuales propiedades farmacológicas se le atribuyen y qué factor de
crecimiento tumoral inhibe.

QUÉ ES: es un extracto del Nerium Oleander

PRPOPIEDADES FARMACOLÓGICAS:
Tiene efecto coadyuvante en algunos tipos de cáncer como leucemia, cáncer en el páncreas o
en la próstata.

FACTOR DE CRECIMIENTO TUMORAL QUE INHIBE: inhibe determinados marcadores tumorales

y así inducir la destrucción de células cancerígenas.
Lo que se tiene que inhibir es la enzima (proteínas): topo isomerasa, sí
inhibo esta
enzima no se va a dar la replicación del cáncer y no se va a dar
metástasis.
PORQUÉ SE PRODUCE EL CÁNCER: hay una mutación de las células (alteración del ADN en el
núcleo, a nivel de cromosomas).

k) Representar la hidrólisis de un glicósido cardiotónico, citando los tres agentes de

hidrólisis que se pueden utilizar para lograr esta transformación química.

Mediante procesos de hidrólisis ácida o enzimática, se obtienen estructuras libres de azúcares

conocidas como geninas o aglicona, las cuales por ser poco polares se extraen fácilmente con:
éter etílico, diclorometano o cloroformo.

Explicación con
azúcares
El agua ataca la unión
y toda la azúcar se va
y queda la aglicona y
este se vuelve
insoluble en agua.

Azúcar: mono. di, tri sacárido

Aglicón: mono, di, tri sacárido
 l) Propiedades farmacológicas y mecanismo de acción.

MECANISMO DE ACCIÓN: El mecanismo de acción más aceptado propone, que estos digitálicos
son muy afines y se enlazan de manera muy específica con los biorreceptores de las
membranas de las células del miocardio, siendo el sitio de enlace una subunidad  de una
ATPasa Na+/K+, el cual una vez ocupado provoca la paralización de la bomba Na+/K+. La
inhibición de esta enzima causa un aumento de los niveles intracelulares de Na+ y como estos
iones modulan el intercambio de iones Ca +2 por iones Na+, se aumenta el aporte de Ca +2 y se
incremente la contracción cardíaca.
INHIBE LA BOMBA ATPasa

PROPIEDADES FARMACOLÓGICAS: Los heterósidos cardiotónicos son indicados, en asocio con

diuréticos, para tratar problemas de insuficiencia cardíaca congestiva, fibrilación ventricular y
taquicardias supraventriculares.

Estos compuestos ejercen su actividad sobre la contractibilidad, conductibilidad y

automaticidad en el músculo cardíaco. En relación a la contractibilidad inducen una acción
inotrópica positiva, propiedad que tiene el corazón de contraerse.

m) Distinguir farmacológicamente entre un cardiotónico, un antiarrítmico y un β

bloqueador.

CARDIOTÓNICO: Los cardiotónicos son fármacos que aumentan la fuerza del corazón sin
aumentar sus necesidades de oxígeno. Son muy útiles en el tratamiento de determinadas
cardiopatías.

ANTIARRÍTMICO: Los fármacos antiarrítmicos se utilizan para tratar las arritmias

cardiacas. Su principal función es suprimir o prevenir las alteraciones del ritmo cardíaco.
Este grupo de fármacos se usan para tratar:
 Arritmias
 Fibrilación auricular o ventricular
 Taquicardias
 Flutter o aleteo auricular
 Extrasístoles

β BLOQUEADOR:
La recomendación principal de los beta-bloqueadores es para la cardiopatía isquémica,
debido al beneficio en estos (as) pacientes, puesto que reduce el consumo de oxígeno
miocárdico, disminuye la frecuencia cardiaca y la contractilidad, además decrece la
conductividad y el trabajo cardiaco, así como la secreción de renina y la actividad simpática.
También están indicados como antihipertensivos, sobre todo en aquellos (as) pacientes que
sufren crisis de ansiedad y taquicardia o arritmias predominantes supraventriculares.
 n) Explique el método de extracción y detección usado en el laboratorio (químico y
cromatográfico). ¿Que otro compuesto observó cuando uso luz ultravioleta?

MÉTODO QUÍMICO
MÉTODO (1)

Se agrega acetato de plomo II para precipitar macromoléculas y compuestos polifenólicos.

Luego, el filtrado se extraer tres veces consecutivas con cloroformo.

La presencia de estos cardenólidos se detecta mediante cromatografía de capa fina en sílica gel,
usando como fase móvil CHCl3:CH3OH (97:3) y revelando con los reactivos de Kedde o Baljet
Manchas de colores rojizo-púrpura y anaranjadas evidencian la presencia de esta clase de
moléculas.

Ambos reactivos son muy útiles para identificar esta clase de compuestos porque reacciona
específicamente con la función lactónica.

Dado que algunos de estos heterósidos son muy solubles en agua, conviene aplicar
también este mismo ensayo al extracto alcohólico acuoso remanente. Si el resultado. es
positivo, debe procederse 3 hidrolizar estos extractos en medio ácido, utilizando
H2S04 1M y calentando hasta ebullición por lo menos durante una hora con H2S04
1M. Luego, una vez fría la mezcla de reacción, se extraen las agliconas con CH2Cl2 o CHCl3.

MÉTODO (2)

En lugar de adicionar acetato de plomo, el extracto crudo hidroalcohólico se purifica mediante

particiones sucesivas con los siguientes solventes de polaridad creciente:
a) hexano o éter de petróleo, para eliminar lípidos, clorofilas y pigmentos carotenoides.
b) cloroformo (CHCl3) o diclorornetano CH2Cl2), los cuales extraen los glicósidos cardiotónicos,
junto con posibles flavonoides y cumarinas simples.
c) Acetato de elijo, donde se concentran principalmente flavonoides más polares. En el
remanente alcohólico acuoso, denominado
d) permanecen carbohidratos, ácidos y algunas veces heterósidos cardiotónicos muy polares.

Posteriormente, todos estos extractos, incluyendo el extracto alcohólico acuoso

remanente d), se analizan por cromatografía de capa fina usando corno fase
estacionaria sílica gel y revelando con el reactivo de Kedde, para verificar en cual
extracto se concentran los cardenólidos. También, para reconocer la posible presencia de
cumarinas y flavonoides, conviene observar las placas primero con luz ultravioleta. En este
caso, manchas de color azul plateado son reveladoras de posibles cumarinas. Luego, las placas
se rocían con el reactivo de vainillina ácida. Manchas de colores fucsia, azules y rojizos, son
indicativas de flavonoides.

MÉTODO CROMATOGRÁFICO
Para cardenólidos muy polares:
Primer sistema: Emplear cromato placas de sílica gel y desarrollar usando como fase móvil:
acetato de etilo/metanol/agua (75:10:7,5 V/V/V). Asperjar la placa con ácido tricloroacético y

solución de cloramina T. Calentar hasta 100 oC por 5 minutos y observar sobre luz ultravioleta
(365nm). Bandas alrededor de las manchas azules o amarillas se consideran como pruebas
positivas.
Segundo sistema: Usar cromato placas de gel de sílice 60F254 y como fase móvil: acetato de
etilo/metanol/agua (81:11:8 V/V/V). Revele con el reactivo de Kedde, rociando primero con
una solución alcohólica de KOH IN y luego con la solución del
ácido 3,5-dinitrobenzoico al 2% en metano. Si aparecen de inmediato bandas azules y
violetas (púrpura), el ensayo es positivo. Con Baljet los colores son naranja.
E
Para cardenólidos poco polares como los de Nerium oleander (Narciso)

Tercer sistema: Utilizar como fase ase móvil CHCl3/ CH3OH o CH2Cl2/CH3OH (97:3). Repita el
procedimiento de elución dos veces consecutivas. Cuando la placa está seca, revele con el
reactivo de Kedde y el de Baljet. Colores violeta y naranja, confirman la presencia de estos
compuestos.

o) Bandas de absorción en el infrarrojo (λ en cm -1) que caracterizan funciones alcohólicas

y carbonilos de lactonas y ésteres (caso de Oleandrina).

Alcoholes, éteres, ésteres ácidos carboxílicos, anhídridos 1300-1000

p) Explicar cual es el fundamento de la prueba del sapo. Para qué sirve y descubridor.

 Tes de la rana en 1940 para saber si una mujer estaba embarazada o no, consistía
inyectarle una pequeña cantidad de la primera orina a la rana, de especie rana africana,
era positivo cuando desovaba en un periodo de 24-48 horas.

Por la presencia de la hormona gonadotropina coriónica que está presente en la orina y

sangre de las mujeres embarazadas.

La gonadotropina coriónica humana (hCG) es una hormona producida durante las

primeras semanas de embarazo por el embrión. Además, también es producida por las
células de algunos tipos de tumor. De cara al embarazo, la concentración de esta
hormona, bien en orina, bien en sangre, es la que se mide con los test de embarazo.

Científicos:
Los investigadores Hogben, Zwarestein y Shapiro fueron los descubridores de la prueba de la
rana en los años 30, usando la especie africana ‘xenopus laevis’ como conejillo de Indias.
En 1947, Galli Mainini descubrió la prueba del sapo, con la que se obtenían los resultados
mucho antes.

El Método de Galli Mainini de diagnóstico precoz del embarazo' —en Argentina popularmente
llamado test de la rana— fue desarrollado por el médico argentino Carlos Galli Mainini en el
Hospital Rivadavia de la ciudad de Buenos Aires, entre los años 1942 y 1947. Su uso fue
generalizado en el país hasta la década de 1970-1980 en que fue reemplazado por métodos
inmunológicos.
Estos tests no habrían podido desarrollarse sin la gran comprensión de los fenómenos
biológicos y bioquímicos que han alcanzado las Ciencias Médicas. La Reacción de Galli Mainini
es sólo un ejemplo entre muchos que pone claramente en evidencia el imprescindible
basamento científico de la Medicina, que con la Electrónica son prototipos de tecno-ciencias,
tecnologías basadas en saberes científicos.

El fundamento científico es increíble, las interpretaciones, mecanismos de acción.

 Tes de los sapos: el sapo se estimula y el eyacula.

El test del sapo consistía en inyectar, en el saco linfático dorsal del sapo, la orina de la mujer. Si,
a las tres horas de la inyección, el animal eyaculaba, se confirmaba el embarazo.

q) Cuál es la diferencia y semejanza con la prueba de laboratorio que actualmente se

realiza para comprobar embarazo.

Diferencia:
El embarazo también se puede confirmar mediante un análisis de sangre. Además de
confirmarlo, esta prueba permite calcular la edad del feto o la existencia de complicaciones en
el inicio de la gestación como la amenaza de aborto espontáneo.

Semejanza:
Detecta cantidades más pequeñas de GCH y puede confirmar o descartar el embarazo antes
que una prueba de orina.

Diferencia:
La prueba de sangre puede detectar un embarazo incluso antes de la falta del período
menstrual.

Las pruebas de embarazo en la sangre tienen una precisión de aproximadamente el 99%.

La prueba de sangre se suele usar para confirmar los resultados de una prueba de embarazo en
el hogar.