PROTOCOLO PREPARACIÓN Código:

COLORANTES

Versión:00

No. DE REVISIÓN: 00 FECHA DE REVISION: FECHA DE EMISIÓN: 28/03/2019

ELABORO: IBT. ALONDRA GUISELL REVISO: AUTORIZO: HOJA: 1 DE 7

CATIEL NÚÑEZ

PROTOCOLO PREPARACIÓN COLORANTES

ELABORÓ: REVISÓ: AUTORIZÓ:

NOMBRE/ PUESTO/FIRMA NOMBRE/ PUESTO/FIRMA

IBT. ALONDRA GUISELL
CATIEL NÚÑEZ

PR-PD-01-00 Protocolo Preparación Colorantes

NOTIFICACIÓN DE PROPIEDAD: La información contenida en este documento es propiedad de Procobi. Productos de
Control Biológico y Nutrición Vegetal S. A. de C. V., y no debe ser mostrada, reproducida o publicada fuera de la
misma, sin previa autorización.
 PROTOCOLO PREPARACIÓN Código:

COLORANTES

Versión:00

No. DE REVISIÓN: 00 FECHA DE REVISION: FECHA DE EMISIÓN: 28/03/2019

ELABORO: IBT. ALONDRA GUISELL REVISO: AUTORIZO: HOJA: 2 DE 7

CATIEL NÚÑEZ

NOMBRE/ PUESTO/FIRMA
FECHA DE EMISIÓN:

I. TINCION SIMPLE.
a) Safranina.
Safranina...................................... 0.5 g
Agua destilada.............................. 100 mL
Preparación:
Disolver el colorante en el agua.
b) Cristal violeta.
Cristal violeta.................................... 1 g
Agua destilada.............................. 100 mL
Preparación:
Disolver el colorante en el agua.
c) Azul de metileno.
Azul de metileno............................ 3 mL
Etanol de 96%............................. 20 mL
Agua destilada............................ 100 mL
Preparación:
PR-PD-01-00 Protocolo Preparación Colorantes
NOTIFICACIÓN DE PROPIEDAD: La información contenida en este documento es propiedad de Procobi. Productos de
Control Biológico y Nutrición Vegetal S. A. de C. V., y no debe ser mostrada, reproducida o publicada fuera de la
misma, sin previa autorización.
 PROTOCOLO PREPARACIÓN Código:

COLORANTES

Versión:00

No. DE REVISIÓN: 00 FECHA DE REVISION: FECHA DE EMISIÓN: 28/03/2019

ELABORO: IBT. ALONDRA GUISELL REVISO: AUTORIZO: HOJA: 3 DE 7

CATIEL NÚÑEZ

Disolver el colorante en alcohol.

Agregar el agua y filtrar.
II. TINCION DE GRAM.
a) Cristal violeta y oxalato de amonio. (Reactivo de Hucker)
Solución A:
Cristal violeta (pureza del colorante de por lo menos, el 90%)........ 2 g
Etanol (95%)................................................................................... 20 mL

Solución B:
Oxalato de amonio.............................................. 0.8 g
Agua destilada..................................................... 80 mL
Mezclar cada uno de los solutos en su disolvente respectivo.
Dejar la solución de oxalato de amonio en reposo durante una noche o calentar
ligeramente hasta que se solubilice.
Mezclar las dos soluciones y filtrar.
b) Solución de yodo yodurado. (Lugol)
Yodo (químicamente puro).............. 1 g
Yoduro de potasio........................... 2 g
Agua destilada............................ 300 mL
Preparación:
Combinar el yodo y el yoduro de potasio con la ayuda de un mortero.
Lavar el contenido de éste con pequeñas alícuotas de agua destilada.
Agregar agua suficiente para obtener un total de 300 mL.
Agitar fuertemente.
PR-PD-01-00 Protocolo Preparación Colorantes
NOTIFICACIÓN DE PROPIEDAD: La información contenida en este documento es propiedad de Procobi. Productos de
Control Biológico y Nutrición Vegetal S. A. de C. V., y no debe ser mostrada, reproducida o publicada fuera de la
misma, sin previa autorización.
 PROTOCOLO PREPARACIÓN Código:

COLORANTES

Versión:00

No. DE REVISIÓN: 00 FECHA DE REVISION: FECHA DE EMISIÓN: 28/03/2019

ELABORO: IBT. ALONDRA GUISELL REVISO: AUTORIZO: HOJA: 4 DE 7

CATIEL NÚÑEZ

Almacenar la solución en una botella oscura y con tapón de vidrio.

c) Alcohol acetona.
Alcohol etílico (95%)................................ 500 mL
Acetona.................................................... 300 mL
Preparación:
Mezclar los ingredientes respectivos de cada combinación para su uso.
d) Safranina.
Safranina (pureza del colorante, 90%)....... 0.25 g
Alcohol etílico (95%)...................................... 10 mL
Agua destilada............................................ 1000 mL

Preparación:
Disolver el colorante en el alcohol.
Agregar el agua destilada.
Filtrar.

Almacenar en frasco con tapón de vidrio.

III. TINCION DE ESPORAS. (Método de Schaeffer y Fulton)
a) Verde de malaquita al 5%.
Verde de malaquita................. 5 g
Agua destilada..................... 100 mL
Preparación:
Disolver el colorante en el agua y dejar en reposo durante una hora y media.
Filtrar.
Guardar en frasco oscuro.
PR-PD-01-00 Protocolo Preparación Colorantes
NOTIFICACIÓN DE PROPIEDAD: La información contenida en este documento es propiedad de Procobi. Productos de
Control Biológico y Nutrición Vegetal S. A. de C. V., y no debe ser mostrada, reproducida o publicada fuera de la
misma, sin previa autorización.
 PROTOCOLO PREPARACIÓN Código:

COLORANTES

Versión:00

No. DE REVISIÓN: 00 FECHA DE REVISION: FECHA DE EMISIÓN: 28/03/2019

ELABORO: IBT. ALONDRA GUISELL REVISO: AUTORIZO: HOJA: 5 DE 7

CATIEL NÚÑEZ

b) Safranina al 0.5%.
Safranina..................................... 0.5 g
Agua destilada............................ 100 mL
Preparación:
Disolver el colorante y filtrar.
IV. TINCION PARA FLAGELOS. (Método de Leifson)
Colorante de Leifson*.
Disolución acuosa saturada de AlK (SO4)2· 12H20 ó
AlNH4 (SO4)2· 12H2O.................................................. 20 mL
Disolución acuosa al 20% de Acido tánico................. 10 mL
Agua destilada........................................................... 40 mL
Alcohol etílico al 95%................................................. 15 mL
Disolución saturada en alcohol etílico al 95%

de fucsina básica....................................................... 3 mL
Preparación:
Mezclar los ingredientes en el orden citado.
Guardar en un frasco bien tapado.
* Se encuentra en el comercio en forma de polvo.
V. TINCION DE FLAGELOS. (Alternativa)
Solución A:
Fucsina básica............................ 1.2 g
Etanol (95%)............................... 100 mL
Disolver el colorante.

PR-PD-01-00 Protocolo Preparación Colorantes

NOTIFICACIÓN DE PROPIEDAD: La información contenida en este documento es propiedad de Procobi. Productos de
Control Biológico y Nutrición Vegetal S. A. de C. V., y no debe ser mostrada, reproducida o publicada fuera de la
misma, sin previa autorización.
 PROTOCOLO PREPARACIÓN Código:

COLORANTES

Versión:00

No. DE REVISIÓN: 00 FECHA DE REVISION: FECHA DE EMISIÓN: 28/03/2019

ELABORO: IBT. ALONDRA GUISELL REVISO: AUTORIZO: HOJA: 6 DE 7

CATIEL NÚÑEZ

Filtrar y tapar perfectamente para evitar la evaporación.

Solución B:
Acido tánico......................................... 3 g
Agua destilada................................. 100 mL
Disolver el reactivo.
Si la mezcal no se usa pronto adicionar fenol al 0.2% para prevenir el desarrollo de
hongos.
Solución C:
Cloruro de sodio......................... 1.5 g
Agua destilada............................ 100 mL
Disolver el reactivo.
Esta solución es estable a temperatura ambiente.

Preparación:
Mezclar cantidades iguales de las soluciones A, B y C.
Guardar en frasco de vidrio y mantener bien tapado.

NOTA:
La solución es estable por 5 semanas a temperatura ambiente y en
refrigeración dura varios meses.
Colorante de contraste.
p-rosa anilina o azul de metileno................... 1 g
Agua destilada........................................... 100 mL
Preparación:
PR-PD-01-00 Protocolo Preparación Colorantes
NOTIFICACIÓN DE PROPIEDAD: La información contenida en este documento es propiedad de Procobi. Productos de
Control Biológico y Nutrición Vegetal S. A. de C. V., y no debe ser mostrada, reproducida o publicada fuera de la
misma, sin previa autorización.
 PROTOCOLO PREPARACIÓN Código:

COLORANTES

Versión:00

No. DE REVISIÓN: 00 FECHA DE REVISION: FECHA DE EMISIÓN: 28/03/2019

ELABORO: IBT. ALONDRA GUISELL REVISO: AUTORIZO: HOJA: 7 DE 7

CATIEL NÚÑEZ

Disolver el colorante en el agua.

VI. LACTOFENOL AZUL DE ALGODON.
Agua destilada.......................................... 20.0 mL
Cristales de fenol Q. P...............................20.0 g
Acido láctico...............................................20.0 mL
Glicerina.................................................... 20.0 mL
Azul de algodón........................................ 0.05 g
Preparación:
Disolver el fenol en el agua.
Agregar el ácido y la glicerina.
Calentar a 70 °C.
Adicionar el colorante.
Guardar en frasco de vidrio.

PR-PD-01-00 Protocolo Preparación Colorantes

NOTIFICACIÓN DE PROPIEDAD: La información contenida en este documento es propiedad de Procobi. Productos de
Control Biológico y Nutrición Vegetal S. A. de C. V., y no debe ser mostrada, reproducida o publicada fuera de la
misma, sin previa autorización.