FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS

Y BIOQUÍMICA

FITOQUÍMICA

MÉTODOS GENERALES DE EXTRACCIÓN DE

METABOLITOS SECUNDARIOS

Mg. Nora Herrera

 AISLAMIENTO DE METABOLITOS SECUNDARIOS
A partir de la materia prima vegetal comprende las operaciones de molienda,
extracción, concentración, purificación y secado.

SELECCIÓN DE MUESTRA
Separar manualmente materiales extraños (madera, metal o de otra naturaleza),
la arena, tierra y polvo muy fino se separa con tamices.

MOLIENDA
Disminuye el tamaño de partículas de la droga vegetal para adecuarla a la etapa
siguiente del proceso, la extracción. A menor tamaño de partículas mayor
penetración del solvente en tejido vegetal; en drogas enteras hay pobre
penetración del solvente, las membranas celulares actúan como barreras que
dificultan el proceso de extracción.
Una excesiva división de partículas (polvos muy finos) genera que en procesos de
percolación la muestra se compacte, dificultando el paso del solvente y dando
extracciones incompletas; en maceraciones puede dar exactos turbios.
La reducción del tamaño de partículas puede utilizar dos mecanismos: corte (
con molinos de cuchillas) se usan con hojas, tallos y raíces y la trituración con
molinos para drogas desmenuzables y con resinas.

Según Farmacopea Brasileña los polvos pueden ser:

• Polvo grueso, pasa por tamiz 10 y un 40% por el tamiz Nº 44

• Polvo moderadamente grueso, pasa por tamiza 22 y un 40% por tamiz Nº 60
• Polvo semi-fino, pasa por tamiza 44 y un 40% por tamiz Nº 85
• Polvo fino, pasa en su totalidad por el tamiz Nº 85
• Polvo finísimo, pasa en su totalidad por el tamiz Nº 120

TAMIZAJE DE MUESTRA
Separa las partículas muy finas del resto del material o las muy grandes asan a
ser molidas nuevamente.
EXTRACCIÓN
Disolventes de naturaleza general y de alta polaridad (EtOH y MeOH)
Disolventes selectivos de menor polaridad (hexano, EP, RX, RCOOR, RCOR)

La penetración del solvente en la célula, induce un momento dipolar en las

moléculas de los compuestos a extraer, se adhieren a las moléculas del
solvente. La capacidad de asociación se mide en términos de la constante
dieléctrica. A mayor polaridad del disolvente mayor constante dieléctrica.

“semejante disuelve semejante”

Compuestos ionizables y/o altamente polares se disuelven en solventes de

elevada constante dieléctrica; compuestos apolares se disolverán en
solventes de baja constante dieléctrica.
Proceso de extracción:
• LIXIVIACIÓN de sustancias solubles de células rotas
(rápido)
• Disolución y DIFUSIÓN de sustancias solubles de células
intactas (lento) a través de membrana de células intactas,
necesita humedecimiento y ablandamiento (aumenta
permeabilidad de membrana).

Etapas:

• Penetración del solvente en célula

• Disolución de analitos extraíbles
• Difusión de la solución fuera de célula vegetal
Tipos de procesos de extracción:

• Procesos que dan como resultado un

equilibrio de la concentración (maceración y
maceración dinámica).

• Procesos que agotan completamente la droga:

percolación, re percolación y extracción en
contra corriente.
 VARIABLES DEL PROCESO EXTRACTIVO

1. Estado de división de droga: a  tamaño de partículas 

área de contacto con solvente.
Excepciones: percolación y maceración.
Usar polvos moderadamente gruesos.

2. Agitación: eficiencia de extracción depende del equilibrio

de saturación del solvente; permite alcanzar un nuevo punto
de equilibrio de saturación (bombas, agitadores mecánicos).

3. Temperatura: el aumento de la tº permite alcanzar un

nuevo punto de equilibrio de saturación. Excepción,
sustancias volátiles y termolábiles.
4º pH: su variación permite formar sales, alcaloides en medio alcalino
se extraen con solventes de baja polaridad, se liberan los alcaloides de
sus sales y se disuelven en solvente orgánico. Su extracción con
soluciones acuosas requiere un pH ácido para convertirlos en sales
solubles en agua.

5º Naturaleza del solvente:

Solventes generales (MeOH, EtOH, PrOH, agua) permiten agotar la
droga vegetal y extraen alcaloides, flavonoides, glicósidos
cardiotónicos, terpenos.
EtOH – H2O (7:3 , 8:2) partes leñosas de plantas, raíces y semillas
EtOH – H2O (1:1) partes aéreas verdes, hojas, se evita extraer clorofila y
resinas.

6º Tiempo de extracción: está en función del solvente y equipo

empleado, debe ser suficiente para el proceso de extracción, no
excesivo ya que aumenta costos.
PERCOLACIÓN
MACERACIÓN DINÁMICA
NECESIDAD DE NUEVAS TÉCNICAS DE EXTRACCIÓN
Métodos tradicionales de extracción sólido-líquido :
líquido en ebullición en contacto con muestra sólida

 difusividad del disolvente lenta

intercambio de energía poco eficaz
procesos estáticos o semi-estáticos

Extracción lenta y poco eficaz

 disolventes convencionales
calor como única energía

Extracción lenta y poco selectiva
 EXTRACCIÓN POR MÉTODOS NO
TRADICIONALES

EXTRACCIÓN ASISTIDA POR ULTRASONIDO

EXTRACCIÓN ASISTIDA POR MICROONDAS (MAE)

EXTRACCIÓN EN FASE SÓLIDA (SPE)

Principios comunes a las nuevas
técnicas de extracción:

Extracción asistida por microondas (MAE).

Extracción acelerada con disolventes (ASE).
Extracción supercrítica analítica (SFE).

Se emplean disolventes de alta difusividad elevando la

temperatura y controlando la presión.
Debido a los mayores coeficientes de difusión, las extracciones
se aceleran considerablemente.
EXTRACCIÓN ASISTIDA POR MICROONDAS (MAE)
PRINCIPIOS

Se extrae la muestra aplicando energía de

microondas en un disolvente adecuado.
Energía de microondas:
• calienta selectivamente unas especies
químicas frente a otras
• produce extracciones rápidas y con cierta
selectividad.

El calentamiento producido depende de la

naturaleza química de la matriz y del
disolvente.

Cuanto mayor es la constante dieléctrica,

mayor es la absorción de energía.
 EXTRACCIÓN ASISTIDA POR MICROONDAS
VENTAJAS
Es más rápida (30 seg.-10 min) y emplea
menos disolvente (1-15 mL) que la extracción
líquida tradicional
• La energía esta localizada y se aprovecha
mejor (menor consumo)
• El tamaño de muestra puede ser muy
variado
• Es una técnica robusta y fácil de usar
• Se pueden extraer varias muestras a la vez
• No hace falta deshidratar o procesar la
muestra
DESVENTAJAS
• Depende de la matriz y limita los disolventes que se pueden utilizar
• Plantea problemas de seguridad
• El extracto queda en contacto con la muestra al acabar la extracción y necesita una
posterior filtración o separación
• Es difícil de automatizar o acoplar a técnicas de análisis
• Degradación de compuestos térmicamente lábiles
• Poca selectividad en la extracción
 APLICACIONES

• Extracción de grasa de carne, huevos y sólidos

lácteos
• Extracción de oleorresina de pimentón
• Extracción de monoterpenoles de mostos
para análisis por GC
• Extracción de contaminantes(residuos de
pesticidas, PAHs, PCBs, etc.)
• Extracción de esencias de vainilla, menta,
ginseng, cítricos, etc.

EXTRACTOR ASISTIDO POR MICROONDAS

EXTRACCIÓN EN FASE SÓLIDA (SPE)
PRINCIPIOS

Es una técnica de extracción que se basa en la

retención sobre un adsorbente sólido de los
compuestos deseados disueltos en una muestra
líquida.
La adición de un eluyente permite eliminar los
componentes de la matriz que interfieren, para
después eluir y concentrar los analitos de
interés.
La extracción en fase sólida sustituye a la
extracción líquido-líquido clásica.
PROCESO DE SPE
APLICACIONES DE SPE

• Eliminación de pigmentos de vegetales y

hortalizas
• Retención de antocianinas y otras
interferencias en análisis de pesticidas en vinos
• Vitaminas en zumos
• Residuos de antibióticos en leches
EXTRACCIÓN POR ULTRASONIDO (EUS)
El ultrasonido se transmite como ondas a través de cualquier medio físico, las
ondas comprimen y estiran el espacio molecular a través de su paso por el
medio.

Cuando una onda del ultrasonido cause una presión negativa suficiente a
través de un líquido, las fuerzas de cohesión del líquido se rompen y se crea un
vacío (burbujas de cavitación).

Las colisiones entre las burbujas de cavitación constituyen la primera fuente de

los efectos químicos y mecánicos de la energía de ultrasonido. Cada choque
puede ser considerado como un micro reactor en donde se crean
instantáneamente temperaturas de varios miles de grados centígrados y
presiones mayores a mil atmosferas.
FENÓMENO DE CAVITACIÓN, COLAPSO Y LIBERACIÓN DEL MATERIAL VEGETAL
EQUIPO DE ULTRASONIDO ACOPLADO A UNA SONDA
El contacto directo con la muestra le permite desarrollar una potencia de hasta 100
veces más que la proporcionada por el baño de ultrasonido
COMPARACIÓN ENTRE TÉCNICAS DE EXTRACCIÓN ASISTIDAS Y CLÁSICAS
A EAUUS MAE AGIT MAGN SOXHLET