Justificación

Antes de ahondar en todo lo que se tratará más adelante, se debe conocer lo que es la
Microscopía; esta, es la que permite observar lo que anatomofisiológicamente no se puede
observar a simple vista, Ya que el ser humano puede ver hasta solo 0,2 mm, este es su límite
de resolución. Y cualquier objeto o cosa que este a una distancia menor de 0,2 mm no se
puede observar a simple vista.

Hay múltiples microorganismos y células que no se pueden observar a simple vista,

por lo que se recurre a la microscopia y por consiguiente., al microscopio. Este es el caso de
las células vegetales, las cuales rondan los 100 µm, y la célula animal, que tiene alrededor de
10 µm. Los átomos, bacterias, parásitos, virus, son microorganismos por lo general no vistos
a simple vista, para los cuales se necesita la microscopia, tal es el caso también de ciertas
células presentes en los tejidos. Para observar tejidos en el microscopio se necesita de manera
directa conocer el microscopio, instrumento esencial para la observación del mismo. Así
pues, conocer las diferentes técnicas que se utilizan para una correcta observación.
Microscopía y Técnicas Histológicas
A simple vista, el ojo humano no puede observar a una distancia menor de 0,2 mm.
Por ejemplo, una bacteria, que tiene un tamaño de 1 µm, virus, el cual tiene un tamaño de 100
y 10 nm siendo estos estructuras más pequeñas. De esta manera hay células como Glóbulos
Rojos que miden 7  µm, para todo esto, es necesaria la microscopia. La medida estándar en
histología son micrómetros, y un punto a tener en cuenta en cuanto a esto es que el glóbulo
rojo se encuentra casi en todos los tejidos.

Ahora bien, paso a definir lo Que es el microscopio óptico de campo claro (de
iluminación interna) el cual está clasificado en monoculares y binoculares, está compuesto
por diversas partes como por ejemplo ocular, platina, revolver, objetivos, tornillo macro y
micrométrico, A estas partes se le debe mayor atención. La luz del microscopio pasa a través
de un condensador que puede enfocar la luz de la siguiente manera: muestra-objetivos-ocular.

El microscopio óptico de iluminación externa: este, como su nombre lo indica, es de

iluminación externa, que, aunque teniendo la misma función que el anterior, su mecanismo
no es el mismo ya que, usa la luz externa que viene de una luz artificial que se encuentre al
lado del microscopio o de una luz de la ventana. Tiene un espejo encorvado el cual tiene dos
caras: Plana (que se utiliza si la luz es natural) y cóncava (si la luz es artificial). El preparado
histológico a observar se intercala en el portaobjetos y el cubre objetos, la pinza lo sostiene,
esta platina se puede mover con dos tornillos que por lo general de encuentran debajo de los
objetivos hacia delante y al costado. Estos objetivos ya mencionados pueden ser:

o 4X: Rojo
o 10X: Amarillo
o 40X: Azul
o 100 X: Blanco

Vista en el microscopio

Es de suma importancia conocer para que sirve cada objetivo porque es importante a
la hora de enfocar y visualizar. El objetivo de 4X se denomina panorámico de campo; en este
se utiliza el tornillo macrométrico, siempre para tener una visión general y para saber qué tipo
de tejido se va a observar, Este objetivo es el de primera opción y se utiliza para ver el
preparado. Mientras el objetivo de 10X es el débil, si se ha enfocado bien en el de 4X, al
pasar a este objetivo solo se hacen leves toques al micrométrico de ahí se pasa al de 40 X el
cual es el fuerte; algo muy importante es no utilizar el tornillo macrométrico cuando se está
en este objetivo si se usa el macrométrico y no el micrométrico, habrá una distancia muy leve
entre el vidrio y el objetivo y no se podrá ver con exactitud el preparado, aparte de que esto
puede romper el cubreobjetos.

Formación de la imagen en el microscopio

 Puede ser numero 1: aumentada, porque los lentes del microscopio generan un
aumento. Puede ser invertida: porque el objeto pasa por un sistema de lentes convexa y
desvía la imagen, se entrecruzan y son convergentes, por esto, la tercera forma en la que se
puede formar la imagen en el microscopio es virtual; esto ya que se observa a través de un
lente ocular, no es una imagen en vivo. El microscopio tiene características intrínsecas a las
que se le llama poder de resolución. Este se define, de manera sencilla, como la capacidad de
producir imágenes separadas. Su fórmula es la siguiente:

d= A.N Donde d= a poder de resolución, A.N apertura numérica, 0,61

0,61* λ es una constante y λ lambda.

¿Cómo se hace variar el poder de resolución?

Si se logra reducir lambda va a aumentar el poder de resolución ya que esta se define

como longitud de onda, una onda que es la velocidad de oscilación de luz en el espacio y eso
va a variar de diferentes tipos de longitud de onda. La luz más común es luz amarillenta y la
que más se manejan a nivel de espacio. Hay una longitud de onda que es menor, que es la luz
azul (0,5) y la ultravioleta (0,4) pero para leer la ultravioleta hay equipos específicos. Para la
luz azul se puede mejorar con un filtro azul, colocado antes que la luz penetre en el
condensador del microscopio. Si se logra reducir lambda aumentará el poder de resolución.
También se puede mejorar el poder de resolución aumentando la apertura numérica. Cada
objetivo tiene una en especifico, y estos están diseñados para que entre en ellos más o menos
luz, de esto depende la apertura numérica del mismo, ya que mientras mayor es su apertura
numérica mas luz entra por lo que es más fácil observar la muestra en cuestión. El numero
que indica la apertura numérica de un objetivo está en la parte de abajo del mismo.

El objetivo de 40X Es el mejor en la práctica y el que mayor apertura numérica tiene

es el de 100X; sin embargo este ultimo hay que modificar, con una inmersión que mejore la
refracción del medio, como es el aceite.

¿Cómo se aumenta entonces el poder de resolución?

1. Aumentando la apertura numérica.

Con un objetivo de mayor aumento o uso de aceite de inmersión.

2. Disminución de longitud de onda.

Con un filtro azul.
Por último se define el límite de resolución, un término usado al principio, el cual se
refiere a la distancia que debe existir entre dos puntos para que sean distinguidos por
separado. Los microscopios tienen la característica de poder hacer que se observen objetos
que no se observan a simple vista porque su límite de resolución es diferente al ojo humano
tal es el caso de:
Microscopio óptico (0,2 µm)
Microscopio electrónico de barrido: 2,5 nm
Microscopio electrónico de transmisión: 0,05nm