Técnicas Cromatograficas

Mom. Cien. 2017. 9

TECNICAS CROMATOGRAFICAS
Ángela María La cromatografía es un método de separación actualmente muy utilizado dado su gran
Cuellar Felantana, María Alejandra Plazas eficiencia. Este término se le otorga a varios procesos, en otras palabras, se encuentran
diferentes técnicas de trabajo cuyo producto difieren unos de otros. Pero, poseen un principio
el cual cumplen, tratándose de la distribución de un compuesto entre dos fases, una móvil y
Laboratorio de orgánica I otra estacionaria. En el laboratorio se llevaron a cabo dos diferentes técnicas Cromatograficas
(cromatografía en capa fina y cromatografía en columna)

Palabras clave:

Abstract:

Chromatography is a separation method currently widely used because of its high

Recibido 22 de septiembre de 2017. efficiency. This term is given to several processes, in other words, different work techniques
whose product differ from each other. But, they have a principle which they fulfill, in the
Aceptado 22 de septiembre de 2017. case of the distribution of a compound between two phases, a mobile and a stationary one.

keywords: solubility, purification, separation.

Resumen:

Introducción: posee similitudes con la cromatografía en paca fina (TLC)aunque

su factor de elución sea contrario y la CC utilice en gran medida
La cromatografía es uno de los métodos más modernos y en componentes de gran tamaño, el principio de su
sofisticados que existen para separar mezclas de productos tanto funcionamiento es el mismo.
orgánicos como organometálicos, su principio se basa en la
distribución de un compuesto entre dos fases, una estacionaria y El proceso de cromatografía en
otra móvil con el objetivo de identificar y determinar las columna puede ser variado (en
cantidades de componentes presentes en una muestra. especial la velocidad de elución)
por algunos factores como lo son
Entre los tipos de cromatografía se encuentra la empleada en la el eluyente (en su mayoría es
práctica conocida como cromatografía de capa fina. Al igual que debido a su polaridad) que es la
otras cromatografías, consiste de una fase estacionaria y una fase fase estacionaria, el tamaño de la
móvil y el principio es el mismo (Bolaños et al); esta técnica es muy columna, la presión y el
aplicada para separar moléculas relativamente pequeñas y permite empaquetamiento (están Imagen 2
además de determinar el grado de pureza de un compuesto, presente todos las partes del
comparar muestras utilizando el Rf (rate factor) que consiste en proceso). Además de encontrarse
una división entre la distancia recorrida por el compuesto y la afectada, según se dice en la teoría clásica, por la constante de
distancia recorrida por el disolvente, esta distancia se debe a que equilibrio (imagen 2).
las moléculas de soluto se encuentran adsorbidas en la fase
estacionaria y a medida que se produce la elución van siendo En este experimento se utilizó como muestra una mezcla de
desplazadas por la fase móvil (Galagovsky et al). Este factor violeta cristal (C24H28N3Cl) y naranja de metilo (C14H14N3NaO3S).
dependerá de la polaridad del disolvente utilizado ya que cuanto Ambas soluciones se utilizan generalmente como indicadores en
más polar sea el compuesto más retenido estará en el absorbente y reacciones.
por tanto irá más lento y el Rf será también menor.

Uno de las técnicas cromatografías frecuentemente

utilizadas en el laboratorio de química orgánica es la
cromatografía en columna (CC), el proceso es capaz
de separar tanto grandes cantidades como pequeñas
de líquidos (imagen 1).El gel de sílice es fase
estacionaria que usualmente es implementada,
provocando un orden de elución en donde las
muestras polares sean retenidas en la columna por
un mayor tiempo de elución que los componentes menos polares,
realizando la separación de esto líquidos (partición).Esta técnica

Cristal violeta Naranja de Metilo


El objetivo de la práctica es aplicar las diferentes técnicas
Cromatograficas.
 En cromatografía de capa fina el objetivo es calcular el
factor de retención (RF) de las soluciones y compararlos
además de determinar el papel de la polaridad en la
determinación de RF.
 En cromatografía en columna el objetivo es separar los
compuestos colorantes de una mezcla con componentes
visibles por diferencia de polaridad.
Materiales y métodos:
Resultados y discusión:
El Rf como se mencionó en un comienzo depende de la polaridad:
los compuestos más polares son los que menos avanzan y los
menos polares son los que más avanzan. El grado de elución de las
sustancias dependerá tanto de su propia polaridad como de la
polaridad del eluyente utilizado, así también La polaridad del
disolvente influye así mismo en la velocidad de ascensión del
soluto a lo largo de la capa de adsorbente, a mayor polaridad del
disolvente, mayor grado de ascensión del soluto por la placa.
BIBLIOGRAFIA
1. Ácido benzoico, https://www.ecured.cu,
https://www.ecured.cu/%C3%81cido_benzoico
2. Galagovsky, L.; Químicaorgánica, fundamentos teóricos-
prácticos para el laboratorio. Editorial universitaria de
Buenos Aires. Argentina. 5ta Edición. 225 pag.
3. Lamarque. Alicia, Zygadlo. Julio, Labuckas. Diana, López.
Liza, Torres. Mariela, Maestri. Damián. Fundamentos
teorico-practicos de química orgánica.
Distancia recorrida por el compuesto
Rf =
Distancia recorrida por el disolvente
 Acetato de etilo
Técnicas Cromatograficas
La cromatografía en columna presenta algunos factores muy
importantes para su eficiencia por ejemplo, la elección correcta de
los solventes de elución es vital para el proceso separativo, en este
caso se utilizó el etanol al 96% ya que es una sustancia polar y esta
permitirá desplazar las moléculas incluyendo las más polares
rápidamente a través de la columna, además es importante tener
en cuenta que si el disolvente es muy polar la elución será muy
rápida y generalmente habrá poca separación de los componentes
de la mezcla y si es muy apolar, no eludirán los compuestos de la
columna. Otro factor importante es ser muy cuidadosos al
momento de llevar a cabo el empaquetamiento de la columna,
pues esta debe ser empacada lo más uniformemente posible para
evitar posibles grietas, burbujas de aire e incluso canales, que
podrían ser las causas de una separación pobre y para evitarlo es
recomendable golpear suavemente la columna con una goma
mientras se está empacando.
En el proceso de separación, al agregar el disolvente (etanol 96%)
se pudo observar que la muestra compuesta por naranja de metilo
y cristal violeta empezó a separarse en dos diversas bandas
coloridas, una naranja y la otra violeta; se pudo observar que el
naranja de metilo descendió primero a través de la columna y esto
se debe a que es menos polar, seguido por el compuesto con el fin
de polaridad creciente que fue el cristal violeta, en la práctica solo
se recogió la muestra de naranja de metilo y una parte del cristal
violeta porque el cristal violeta por su gran polaridad no
descendía rápido además de que fue necesario aplicar presión
para agilizar el proceso dado que este tipo de cromatografía es
muy lenta.
4. James Porter. ¿Por qué el ácido benzoico es apenas soluble en
agua fría? http://www.ehowenespanol.com/acido-benzoico-
apenas-soluble-agua-fria-hechos_122052/
ANEXOS
 Técnicas Cromatograficas

2.5 cm
RfA= =0.5
5 cm

3.5 cm
RfM= =0.7
5 cm

3.0 cm
RfT = =0.6
5 cm

 Hexano

3.4 cm
RfA= =0.68
5 cm

3.2 cm
RfM= =0.64
5 cm

2.6 cm
RfT = =0.52
5 cm

 Hexano + Acetato de etilo

2:8

 Hexano + Acetato de etilo

8:2