Hoja de Datos – Laboratorio 1 – Enzima Amilasa

Nombre: Álvaro Núñez Arteaga

Materia: Bioquímica
Materiales
- Un gotero con una solución de saliva
- 1 vaso de precipitado de un litro
- 1 termómetro
- Dos gradillas, una para sostener los goteros y la otra para sostener los tubos
- 8 tubos de ensayo
Reactivos
- Muestra de saliva
- Almidón
- Iodo / Complejo de Benedict
- Hielo
- Agua
Explicación
Prueba de la temperatura

Para empezar, debemos Esta prueba se puede realizar a

seleccionar la prueba de distintas temperaturas, es decir a
temperatura, al inicio tenemos una 5ºC, 37ºC y 70ºC respectivamente.
muestra de saliva y debemos
colocarla en almidón.

Con la ayuda de un gotero,

Primero seleccionamos la
diferencia de temperatura a 5ºC,
con el cursor levantamos la
pipeta con la saliva y colocamos
el contenido en el tubo de ensayo
dentro del baño María (esto solo
se aplica en el caso de la
temperatura de 5ºC, ya que
posteriormente en las pruebas de
37ºC y 70ºC no se necesitará el
baño María).
obtenemos nuestra mezcla y vamos
colocándola a los tubos de ensayo
con una diferencia aproximada de 5
minutos (el tiempo puede variar en
base a la elección del estudiante).
Seleccionamos el gotero con
almidón y lo colocamos en el tubo
A.
Esperamos 5 minutos y tomamos la
siguiente muestra para colocarla en
el tubo B.
 Podemos observar que los tubos A,
Repetimos el procedimiento para B y C cambian de color a una
el tubo C, D, E, F y G. tonalidad azul mientras que los tubos
Anotamos los resultados D, E, F y G se mantienen de color
obtenidos de los 7 tubos dentro de naranja es decir que no sufren
la gradilla. ningún cambio.

Imagen Nº1: Prueba de temperatura a 5ºC con intervalos de tiempo de 5 minutos.

Como conclusión podemos decir que los tubos A, B, y C dieron positivo en la prueba de
Lugol debido a su coloración azul, mientras que los tubos D, E, F y G dieron negativo, por lo
tanto, el tiempo es un factor muy importante en el desarrollo de la reacción de Benedict.
 Imagen Nº2: Prueba de temperatura a 37ºC con intervalos de tiempo de 5 minutos.
Repetimos la prueba, pero cambiando la temperatura a 37ºC, para finalizar con las
observaciones de cada uno de los experimentos.
En este caso podemos observar que únicamente el tubo A cambia de color, dando un
resultado positivo en la prueba de Lugol, mientras que los demás tubos mantienen su color
naranja.

Imagen Nº3: Prueba de temperatura a 70ºC con intervalos de tiempo de 5 minutos.

Repetimos la prueba, pero cambiando la temperatura a 70ºC, para finalizar con las
observaciones de cada uno de los experimentos.
En esta última variación de la temperatura podemos observar que los tubos A y B cambian de
color azul y cumplen con la prueba de Lugol, mientras que los demás tubos C, D, E, F, G,
mantienen su tonalidad anaranjada.
Prueba de pH
El procedimiento es el mismo
para la prueba de pH, debemos
seleccionar la prueba de pH, al
inicio tenemos una muestra de
saliva y debemos colocarla en
almidón.
Esta prueba tiene como valor
constante la temperatura de 37ºC.
Seleccionamos el gotero con
almidón y lo colocamos en el tubo
A.
Esperamos 5 minutos y tomamos
la siguiente muestra para
colocarla en el tubo B
Con la ayuda de un gotero,
obtenemos nuestra mezcla y
vamos colocándola a los tubos de
ensayo con una diferencia
aproximada de 5 minutos (el
tiempo puede variar en base a la
elección del estudiante).
Utilizamos el cursor y levantamos
la pipeta con la saliva para
colocar el contenido en el tubo de
ensayo dentro del baño María.
Repetimos el procedimiento para el
tubo C, D, E, F y G.
Anotamos los resultados obtenidos
de los 7 tubos dentro de la gradilla.
Imagen Nº4: Prueba de temperatura a 37ºC con intervalos de tiempo de 5 minutos y un pH
igual a 5.
Podemos observar que los tubos A, B y C cambian de color a una tonalidad azul mientras que
los tubos D, E, F y G se mantienen de color naranja es decir que no sufren ningún cambio.
Como conclusión podemos decir que los tubos A, B, y C dieron positivo en la prueba de
Lugol debido a su coloración azul, mientras que los tubos D, E, F y G dieron negativo, por lo
tanto, el pH también es un factor muy importante en el desarrollo de la reacción de Benedict.

Imagen Nº5: Prueba de temperatura a 37ºC con intervalos de tiempo de 5 minutos y un pH

igual a 6.8.
Repetimos la prueba, pero el pH a un valor de 6.8, para finalizar con las observaciones de
cada uno de los experimentos.
En este caso podemos observar que únicamente el tubo A cambia de color, dando un
resultado positivo en la prueba de Lugol, mientras que los demás tubos mantienen su color
naranja.

Imagen Nº6: Prueba de temperatura a 37ºC con intervalos de tiempo de 5 minutos y un pH

igual a 8.
Repetimos la prueba, pero en este caso el valor del pH aumenta a 8, y finalizamos todos los
experimentos con las observaciones.
Como conclusión de esta ultima prueba, podemos ver que los primeros 3 tubos de ensayo, es
decir los tubos A, B y C cambian de color a azul por lo tanto son positivos en la prueba de
Lugol mientras que los tubos D, E, F y G se mantienen con el color naranja.