Bajo presión: las interacciones entre las células madre y el nicho coordinan la adaptación del

tejido a la inflamación

Resumen

Las células madre y progenitoras (SC) están emergiendo como impulsores clave de la
adaptación del tejido a la inflamación causada por microbios, lesiones, agentes nocivos y otros
ataques. Estas presiones se experimentan de manera más aguda en los tejidos epiteliales como
la piel y el intestino que interactúan con el entorno externo. Por lo tanto, aquí revisamos cómo
los CS epiteliales de la piel y el intestino, junto con sus nichos de apoyo, detectan y responden
a la inflamación con el fin de preservar la integridad del tejido. Destacamos la plasticidad
inducida por la inflamación en los SC y su progenie y la memoria duradera que se forma a
partir de entonces. El área floreciente de las respuestas SC a los factores de estrés
inflamatorios puede ampliar las perspectivas terapéuticas en las afecciones inflamatorias
epiteliales, la reparación de heridas, los cánceres y el envejecimiento.

Introducción

Los tejidos han desarrollado redes sensoriales, de señalización y reguladoras complejas que
permiten una rápida adaptación a los factores de estrés ambientales que inducen la
inflamación. Las barreras epiteliales, como la piel y el intestino, que interactúan con el medio
ambiente son particularmente vulnerables a las presiones inflamatorias. Las células madre y
progenitoras (CS) adultas, que mantienen la piel y el epitelio intestinal en condiciones
saludables y de estrés, están emergiendo como mediadores críticos de la adaptación de los
tejidos a los traumas [1 *]. Esta capacidad de respuesta se basa en un diálogo vital entre los CS
y su microambiente o "nicho" [2]. Históricamente, los SC y sus nichos fueron vistos como sitios
"inmunes privilegiados" [3], en gran parte desprovistos de contacto inmunológico y protegidos
de la inflamación. Sin embargo, descubrimientos recientes han cambiado radicalmente la
noción de los SC como criaturas preciosas que requieren un santuario inmunológico y han
subrayado un papel vital para el diálogo del nicho de SCe en la capacidad de respuesta y
adaptación de los tejidos epiteliales a la inflamación [1]. Aquí, discutimos cómo los SC de la piel
y el epitelio intestinal, y sus nichos de apoyo, detectan y responden a factores de estrés
inflamatorios como microbios, daño tisular y estrés nutricional que modulan los SC a través de
la inmunidad del huésped. Las respuestas inflamatorias son muy variables; pueden ser focales
o sistémicas e implican medios complejos de desechos de matriz celular y extracelular (MEC),
ligandos microbianos, citocinas, lípidos de quimiocinas y muchas otras señales cuya
composición exacta está determinada por el tipo y la magnitud de la inflamación. Por lo tanto,
profundizamos en las respuestas específicas del contexto que exigen una réplica de nicho-SCe
altamente adaptada y exploramos la memoria perdurable que se forma a partir de entonces
[4]. Comprender cómo reaccionan los CS de la piel y el epitelio intestinal y aprender de las
respuestas inflamatorias revelará los impulsores de la disfunción tisular que pueden ser
terapéuticamente dirigidos.

CS del epitelio cutáneo e intestinal y sus nichos

Epidermis

La epidermis está compuesta por la epidermis interfolicular (EFI) con folículos pilosos
invaginantes (Figura 1A) [5,6]. Los SC en proliferación del IFE están atados a una membrana
basal y pierden su potencial mitótico a medida que se diferencian hacia arriba para
desprenderse de la piel. Contiguo al IFE, el folículo piloso superior es mantenido por distintos
progenitores de Lrig1þ [6]. Las células madre del folículo piloso CD34þ (HFSC) están alojadas en
el bulge (promontorio) y experimentan episodios cíclicos de descanso y regeneración para
estimular el crecimiento del cabello [1, 2]. Por tanto, en la homeostasis, distintos grupos de SC
mantienen de forma autónoma cada región de la epidermis [5,6].

Intestino

El epitelio intestinal está organizado en unidades autónomas, compuestas por proyecciones

luminales (vellosidades) e invaginaciones profundas (criptas) (Figura 1B). Cada unidad de
criptovellosidad es mantenida por células columnares de cryptebase altamente proliferativas
(CBC) [7 *]. Los CBC, también llamados células madre intestinales (ISC), se identifican por la
expresión de la repetición rica en leucina que contiene el receptor 5 acoplado a la proteína G
(LGR5) y diferencian las vellosidades para generar progenitores, que a su vez dan lugar a los
seis linajes de absorbentes (enterocitos, Células M) y secretoras (células caliciformes, células
de Paneth, células enteroendocrinas, células en penacho) células intestinales (Figura 1B) [7,8].
Además de los CBC, las células þ4 se han descrito como progenitores candidatos en
condiciones de estrés. (Figura 1B).

Células madre de la piel y el epitelio intestinal, y factores de estrés inflamatorios en estas

interfaces. (a) Esquema de una unidad pilo sebácea. El epitelio de la piel está sostenido por los
siguientes conjuntos de SC: SC epidérmicos interfoliculares, SC del folículo superior Lrig1 +, SC
del folículo piloso que residen en el abultamiento del folículo. (b) Esquema de una cripta
intestinal. Las células columnares de la base de la cripta (CBC) o las células madre intestinales
(ISC) residen en la base de la cripta y se diferencian a medida que ascienden por las
vellosidades. SC, células madre y progenitoras.

Componentes de nicho

Propuesto por primera vez por Schofield [9], ahora apreciamos la importancia del nicho en la
modulación del comportamiento de SC. Los nichos de SC están compuestos por componentes
mesenquimales, endoteliales, neuronales, inmunes, ECM y la propia progenie del SC que
suministran mitógenos, metabolitos, señales y citocinas [2]. Estas señales instructivas dirigen la
quiescencia, proliferación, autorrenovación y diferenciación de las CE de acuerdo con las
demandas del tejido.

Las células de nicho detectan y transmiten el estrés inflamatorio

Una gran cantidad de investigaciones apuntan a que las células de nicho son integradores
esenciales de señales inflamatorias. En particular, las células inmunes han surgido como células
de nicho altamente sensibles al estrés [1] (Figura 2). La propia progenie de los SC también
detecta cambios ambientales y transmite esta información a sus predecesores [7]. Además, las
células mesenquimales y otras células del nicho SC monitorean el entorno SC y comunican
rápidamente la angustia.

Células inmunes

Bajo presión, los factores derivados de las células inmunes actúan como mitógenos, enviando
señales directamente a los SC para promover las funciones regenerativas. De manera más
prominente, la interleucina (IL) -6 ha surgido como un mediador clave de las respuestas
inflamatorias del SC. Muchas células diferentes, incluidas las células inmunitarias, las células
estromales y las propias células madre, pueden producir IL-6. A su vez, la señalización de IL-6, a
través de su receptor gp130 en SC, induce de manera robusta la proliferación (Figura 2A). La
expresión ectópica de gp130 constitutivamente activa da como resultado la expansión de ISC a
expensas de linajes más diferenciados [10]. De manera similar, en la piel, la IL-6 activa a los
progenitores del borde de la herida a través del factor de transcripción Stat3 para promover la
reparación [11]. Los progenitores envejecidos del epitelio del borde de la herida no logran
acoplar el eje IL-6-Stat3, lo que da lugar a una reepitelización retrasada [11], y resaltan la
protección de este eje fundamental para revertir la disminución de la reparación relacionada
con la edad.

IL-6 también promueve la producción de IL-17A e IL 22 a partir de células inmunes, otras dos
citocinas que impulsan la proliferación de SC (Figura 2A) [12]. En la piel, la señalización del
receptor A de IL-17 (IL-17RA) en las células madre Lrig1 promotes promueve su expansión en
las heridas y la tumorigénesis [13 **]. Si la señalización de IL-17RA es operativa en otros SC
epiteliales de la piel o ejerce efectos únicos en los progenitores de Lrig1þ, se requiere una
aclaración adicional. Las citocinas inflamatorias no solo actúan como mitógenos, sino que lo
hacen independientemente de otros factores de nicho. Por ejemplo, la activación de Stat3
dependiente de IL-22 impulsa la expansión de ISC y puede sustituir las señales Wnt canónicas
derivadas de nichos [14] (Figura 2A). La IL-22 también aumenta la respuesta al daño del ADN
del ISC a través de Stat3, lo que subraya las funciones pleotrópicas de este factor de
transcripción en la reanimación de las células madre dañadas [15 **]. Los macrófagos son
células inmunes heterogéneas residentes en tejidos que contribuyen a las respuestas SC tanto
homeostáticas como inflamatorias. La depilación del cabello produce un estado de activación
similar a una herida de las HFSC, que es impulsado por TNFa derivado de macrófagos [16].
Curiosamente, el TNFa no solo activa las HFSC de los folículos dañados, sino que también
transmite señales de angustia a los SC de los folículos vecinos no dañados, lo que da como
resultado el crecimiento del cabello alrededor del daño [17]. Por lo tanto, las células inmunes
altamente móviles pueden transmitir señales de daño localizado para sincronizar las
respuestas de los tejidos. Además de las citocinas, las propias células inmunitarias producen
factores de crecimiento para impulsar la regeneración. El factor de crecimiento de fibroblastos
(Fgf) 9 liberado de las células T gd dérmicas induce un bucle de retroalimentación positiva
Fgf9-Wnt en cooperación con los fibroblastos dérmicos para impulsar la neogénesis del folículo
después de una lesión [18]. De manera similar, las células T reguladoras (Tregs) expresan
ligandos Notch para promover el ciclo del cabello después del daño inducido por la depilación
[19]. Por lo tanto, las células inmunes amplifican los programas de regeneración a través de
citocinas y factores de crecimiento para restaurar rápidamente la integridad del tejido
comprometida que resulta de ataques inflamatorios.

Respuestas de las células madre epiteliales a distintos estímulos de estrés. Las células
responden (a) proliferando, (b) diferenciando, (c) muriendo, (d) alterando la diafonía con su
nicho, (e) exhibiendo plasticidad y / o, (f) reteniendo un recuerdo de la inflamación en un
contexto dependiente conducta. SC, células madre y progenitoras.

Las células hijas son células de nicho críticas que responden al estrés

Las células hijas pueden influir en el comportamiento de sus predecesoras directa o

indirectamente enviando señales a otras células de nicho. El intestino es una importante
puerta de entrada para los agentes infecciosos. Sentado en la punta de las vellosidades (Figura
1), las células del penacho detectan rápidamente los parásitos intestinales infectantes y
secretan IL-25 para activar las células inmunitarias, que a su vez modulan las opciones de
destino del SC [20e22]. Quizás involucrar a múltiples tipos de células y mensajeros solubles es
la forma más eficiente de transmitir señales de angustia entre las células hijas ubicadas
distalmente y las células madre del tejido.
Los ISC se reducen en la inflamación y las lesiones [23,24]. Sin embargo, la regeneración de
tejidos todavía se produce en ausencia de Lgr5þ ISC, lo que apunta a progenitores alternativos
que responden al estrés [25]. Los estudios de rastreo de linajes han revelado la
desdiferenciación de los enterocitos y los progenitores de células secretoras para reemplazar
las ISC agotadas [26-28]. Además de las células hijas, las células þ4 quiescentes (Figura 1),
también llamadas CE de reactivación o CE regenerativas asociadas a colitis que se identifican
por su expresión de Hopx y Clu, pueden adoptar funciones de ISC para impulsar la
regeneración [24], [29 ** ]. La contribución relativa de cada una de estas células más
diferenciadas y células de reserva a la reposición de ISC puede depender del tipo, magnitud y
duración de la inflamación merece una aclaración.

Células mesenquimales

La dermis de la piel y la lámina propia intestinal albergan progenitores mesenquimales y

subconjuntos de fibroblastos funcionalmente diversos que suministran a los CS factores de
crecimiento clave (Figura 1) [30,31]. Los telocitos, un tipo de células estromales descubierto
recientemente, residen en aposición cercana al epitelio intestinal y se definen por la expresión
de Foxl1 y Gli1. Se descubrió que estas células de nicho recién identificadas eran una fuente
celular clave de Wnt para ISC [32e 34] (Figura 1). Después del daño epitelial, las células Gli1þ
se expanden rápidamente, lo que sugiere que los telocitos son reservorios de Wnt ajustables y
sensibles a la inflamación. De hecho, la secuenciación de ARN unicelular (scRNA-seq) de
poblaciones mesenquimales de intestinos sanos e inflamatorios del intestino reveló un
enriquecimiento de células WNTþ similares a los telocitos y también células estromales con
firmas inflamatorias y reguladoras de linfocitos [35]. Por lo tanto, los grupos heterogéneos de
células mesenquimales no solo dialogan con los SC, sino que también involucran a las células
inmunes en la inflamación, actuando potencialmente como enlaces entre los dos.

Detección directa microbiana, mecánica y metabólica por SC

Los SC expresan una serie de receptores y, por lo tanto, son capaces de detectar y responder
directamente al estrés microbiano, mecánico y metabólico. Los modelos organoides cultivados
en presencia de estímulos de estrés (por ejemplo, ligandos microbianos, metabolitos,
citocinas) han sido fundamentales para descubrir sensores de estrés funcionalmente
relevantes y respuestas SC autónomas.

Los receptores de reconocimiento de patrones en los SC permiten la detección de diversos

ligandos microbianos. La ligadura del receptor 4 tipo toll, un receptor de reconocimiento de
patrones, en ISC por lipopolisacárido bacteriano da como resultado la apoptosis de ISC (Figura
2C). [36], lo que sugiere que el daño tisular en las infecciones bacterianas puede resultar del
agotamiento directo del SC por parte de los microbios. Por el contrario, la estimulación de
Nod2 por el dipéptido de muramil, un componente de la pared celular bacteriana, ejerce
efectos citoprotectores sobre el ISC durante el daño intestinal [37]. Los ratones que carecen de
un sensor de ADN citoplasmático AIM2 tienen una expansión de los ISC y son más propensos a
la formación de tumores [38]. Si bien estos estudios plantean la tentadora posibilidad de que
los microbios puedan modular directamente las SC, evaluar la contribución de las interacciones
microbianas directas de las SC a las respuestas del hospedador requerirá el agotamiento de los
sensores microbianos específicos de SC in vivo.

Los microbios invasores, la inflamación de los tejidos y las lesiones causan alteraciones físicas y
alteran drásticamente la integridad de los tejidos. Los SC epiteliales son sumamente sensibles a
estas alteraciones mecánicas, que son inducidas por la pérdida de interacciones cellecell y
celleECM [39]. E-cadherin, un componente central de la unión adherente, une los SC entre sí y
a su nicho. La deleción de E-cadherina o su componente intracelular estabilizador, p120-
catenina, de los SC activa una cascada inflamatoria dependiente de NFkBe [40,41]. Las
proteínas de adhesión celular y de unión están implicadas en los trastornos inflamatorios [42],
lo que sugiere que la detección de la mecánica tisular alterada por los CS puede contribuir a la
patología en la enfermedad inflamatoria. Los cambios inducidos por el estrés en la ECM se
detectan en las uniones focales SC mediante la quinasa de adhesión focal. La inflamación
intestinal da como resultado un aumento de la deposición de colágeno en la lámina propia. Las
fuerzas de ECM más densas son detectadas por la quinasa de adhesión focal / Src y conducen a
la activación de los factores de transcripción YAP / TAZ y respuestas de SC en la regeneración
epitelial [43]. El complejo transcripcional YAP / TAZ también orquesta las decisiones de destino
epidérmico SC en homeostasis, reparación de heridas y cáncer [44-46]. La fuerza de
compresión generada por la proliferación de SC altera las fuerzas de adhesión intercelular en
las células adyacentes, lo que finalmente conduce a la estratificación epidérmica [47]. Por lo
tanto, un área que requiere conocimientos es el impacto de la presión mecánica ejercida sobre
los CS en las enfermedades inflamatorias hiperproliferativas.

Integración de señales SC intrínsecas y de nicho durante la inflamación

Al integrar señales de su microambiente, los SC proliferan para crear tejido nuevo y guiar las
elecciones de destino que permiten la adaptación del tejido al estrés. Lo hacen alterando la
diafonía con su nicho y exhibiendo una plasticidad notable.

Diafonía de nicho SC alterada

Los SC sensibilizados al estrés hacen una llamada al 911 para reclutar células inmunes y hacer
frente al estrés (Figura 2D). Por ejemplo, la ruptura de la barrera hace que las HFSC liberen
quimiocinas que reclutan macrófagos y Tregs para ayudar en la reparación [17, 41]. Los
receptores de citocinas y otras moléculas inmunomoduladoras, incluidas las células T que
activan los MHC I y II, se expresan dinámicamente por los SC cutáneos e intestinales en función
de su estado de activación (Figura 2D). Augodo y col. encontraron que los SC cíclicos, pero no
quiescentes, regulan positivamente el MHC I para permitir la monitorización inmunitaria [48].
De manera similar, la expresión de ISC de MHCII facilita la diafonía con las células T auxiliares
(Th). La interrupción de la diafonía de células ISKeTch por deleción de MHC II altera las
trayectorias de diferenciación de SC después del ataque infeccioso [49 **]. En algunos casos,
los ISC se retiran por completo de su nicho y comienzan a autorregularse. Los ISC expuestos a
HFD exhiben independencia de nicho y aumentan de manera autónoma los programas de
autorrenovación y proliferación [50].

Elección del destino y plasticidad

Hacer frente a distintas clases de factores estresantes requiere respuestas tisulares muy
personalizadas. Durante la infección por parásitos, la IL13 secretada por las células
inmunitarias promueve la generación de células en penacho y células caliciformes para
aumentar la producción de moco e impulsar la expulsión del parásito (Figura 2B) [20e22]. Por
el contrario, los organoides de ISC cultivados en presencia de células productoras de interferón
aumentaron la diferenciación específica de Paneth celle, mientras que el cocultivo con Tregse
indujo la expansión de SC (Figura 2B). La IL-17A derivada de células inmunes impulsa la
expansión de las células amplificadoras transitorias [49]. Por tanto, distintas citocinas inducen
programas de diferenciación únicos en los ISC. Queda por explorar si cada uno de estos
programas distintos beneficia al tejido en el contexto de la inflamación y cómo lo hace.
Los SC también exhiben plasticidad durante la inflamación inducida por infección y vuelven a
un estado similar al fetal que recuerda a la morfogénesis (Figura 2E). Durante la infección
parasitaria, los ISC regulan positivamente los programas de transcripción fetal para reparar el
daño inducido por patógenos [51 **]. De manera similar, la neogénesis del folículo piloso
después de la herida activa redes y programas de señalización que están activos durante el
desarrollo [52], lo que ilustra la reutilización funcional de programas de desarrollo en la
reparación de tejidos. En la lesión, cuando se agotan las CE del IFE y el folículo superior, las
HFSC migran hacia arriba por el folículo adoptando el destino IFE para reparar la piel herida
[53]. En respuesta a la citocina inflamatoria IL-17A, las Lrig1þ SC del folículo superior pueden
migrar hacia arriba y reponer el IFE en las heridas [13]. Por lo tanto, los límites altamente
compartimentados de los SC epiteliales se disipan en respuesta a señales inflamatorias para
permitir una reparación rápida (Figura 2).

Memoria tisular del estrés

Los SC no solo soportan el estrés, sino que pueden recordarlo mucho después (Figura 2F). La
inflamación aguda altera la accesibilidad de los genes clave de respuesta al estrés en IFE SC.
Estas regiones genómicas "equilibradas" permiten una respuesta SC más rápida al daño
posterior (Figura 2F) [4]. Sorprendentemente, se observó una accesibilidad a la cromatina
alterada de las regiones de memoria inflamatoria incluso 180 días después de la resolución. Sin
embargo, se sabe poco sobre cómo se codifica dicha memoria inflamatoria. Curiosamente, la
memoria SC se mantuvo en regiones genómicas que están enriquecidos por motivos de unión
del factor de transcripción (TF) inflamatorio y homeostático, lo que sugiere que durante la
inflamación los TF inflamatorios pueden permitir la accesibilidad y la transcripción de dominios
de memoria; sin embargo, después de la resolución, los TF homeostáticos ocupan estas
regiones y retienen la memoria. De manera similar, los SC también pueden conservar un
recuerdo de sus encuentros metabólicos. El colesterol alto en la dieta promueve la
diferenciación de las células enteroendocrinas al aumentar la señalización de Notch intrínseca
de ISC. Incluso después de la eliminación de la dieta alta en colesterol, los ISC mantienen una
mayor generación de células enteroendocrinas [54] (Figura 2F). Quedan muchas preguntas.
¿Cómo se retiene la memoria inflamatoria y se transmite de una generación celular a la
siguiente? ¿El nicho SC también conserva un recuerdo de inflamación? Comprender estos
factores de la respuesta SC a largo plazo al estrés inflamatorio agudo puede abrir la puerta a la
manipulación de la memoria SC para mejorar la función y la aptitud epitelial.

Conclusiones y perspectivas

El estrés inflamatorio es perenne. Se experimenta habitualmente en los tejidos epiteliales que

recubren nuestro cuerpo en forma de infección, lesión, agentes nocivos, daño por rayos UV y
otros factores estresantes agudos. Por lo tanto, la noción de homeostasis, como se modela en
organismos de laboratorio, puede no reflejar el estado de los SC o su comportamiento en la
naturaleza. Además, aunque discutimos las respuestas de los CE a los factores estresantes
individuales, es importante considerar que a menudo se experimentan de manera
concomitante. Por ejemplo, cuando un microbio rompe una barrera, el tejido experimenta
señales microbianas, así como señales de daño por muerte celular y ECM desquiciada. La
forma en que los SC integran simultáneamente múltiples señales de estrés y su nicho requiere
una mayor exploración. Trazar sistemáticamente cómo los CS y su nicho responden a los
factores de estrés inflamatorios de diferentes magnitudes y duración y el impacto duradero
mucho después de la resolución será esencial para comprender la salud de los tejidos y
abordar las enfermedades inflamatorias.