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Es una hemoglobina unida de manera covalente a la glucosa se une a la valina por la cual se une a
una cadena alfa 1 es por eso el A1C el exceso de glucosa se une a los residuos amino proteínas
formando el llamado producto de amadori en la que se destaca por exelencia ya que a mayor
cantidad de glucosa mayor hemoglobina glicosidica.
FASE PRE-ANALITICA
Orden medica
- En la orden medica se observa la firma y sello del médico que ordena la prueba de
laboratorio
- Dentro de la orden se encuentran los puntos: Nombre, edad y genero del paciente
- Y también lleva el diagnóstico y pruebas de laboratorios, las cuales son y deben
ser escritas claramente.
Registro:
Para el registro es importante tomar en cuenta los datos personales del paciente.
Instrucciones al paciente:
Las indicaciones al paciente deben ser claras.
En la mayoría de los análisis de sangre, se extrae una muestra de sangre a partir de una
vena. A tal efecto por un profesional de la salud realizado por un método intravenosa:
limpia la piel
coloca una goma (torniquete) alrededor del área para que las venas se hinchen
de sangre.
inserta una aguja en una vena (generalmente en el brazo, sea en la cara
interna del codo, o bien en dorso de la mano)
introduce la muestra de sangre en un frasco o una jeringa.
extrae la goma y retira la aguja de la vena
Trazabilidad:
Se deberá realizar los siguientes puntos:
Conservación de la muestra:
FASE ANALITICA
La sangre total recogida mediante procedimientos estándar. Puede usarse EDTA como
anticoagulante. La Hemoglobina -glicosilada es estable 1 semana a 2-8°C. Evitar el uso de muestras
lipémicas. Se recomienda que la recogida de muestras se realice de acuerdo con el NCCLS
Documento H11-A37.
APLICACIÓN DEL METODO ANALITICO
PREPARADO DE LA HbA1c
REACCION: La línea comercial de la marca (Chemicals) no presenta una reacción
PROCEDIMIENTO
100 µl
0.5 ml
37°C
70 µl Verter el
Rvo A sobrenadante
M1 37 C M 37°C
control M 415 nm
B B C M1 5´ C
St M1
HEMOGLOBINA TOTAL 5´´
0.5 ml H2O d 20 µl hemolizado
C M
M St St C M1 415 nm
24 µl
600 ml
M1 6 – 8.6%
4.0 – 20 % 5´´min
MUESTRA REACTIVO
Sangre 1.Todos estos reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada
en la etiqueta del vial, cuando se mantienen bien cerrados a 2-8ºC y se evita
No se precisa una preparación especial del
la contaminación durante su uso. No usar los reactivos una vez caducados.
paciente, ni muestra en ayunas
Evitar el uso de muestras lipémicas 2. Estándar HbA1c reconstituido es estable 30 días a -20ºC. Agitar
suavemente antes de usar.
LECTURA
Para la lectura primero se debe ajustar el cero del instrumento a 415 nm con agua destilada. Y
Leer y registrar los valores de las absorbancias Los resultados obtenidos corresponden a la
hemoglobina glicosilada.
Lectura de la hemoglobina total:
1. Dispensar 5.0 mL de agua destilada en los tubos de ensayo: Estándar, Control y muestras.
2. Pipetear 20 µL del hemolizado en los tubos. Mezclar.
3. Ajustar el cero del instrumento a 415 nm con agua destilada.
4. Leer y registrar los valores de las absorbancias. Los resultados obtenidos corresponden a la
hemoglobina total
CALCULOS
R ( Problema )
R ( Problema )= ∗Estandar conc .
R ( Estandar )
|de| HbA 1c ( Problema )
R ( Problema )=Radio ( Problema )=
|de| Hbtotal ( Problema )
|de| HbA 1 c ( Estandar)
R ( Estandar )=R (Estandar)=
|de| Hbtotal (Estandar)
Ejemplo: Un Estándar de conc. de hemoglobina glicosilada de 8,0%tiene una Abs HbA1c = 0,480 y
una Abs Hb Tot = 0,575.Una muestra Problema tiene Abs HbA1c = 0,962 y Abs Hb Tot =0,746. La
concentración de hemoglobina glicosilada de la muestra Problema se calcula como
0.962
R ( Problema )= =1.289
0.746
0.480
R ( Estandar )= =0.835
0.575
1.289
% Glyco ( Problema )= ∗8.0=12.4
0.835
CONTROL DE CALIDAD. -
El control de la calidad en la fase analítica se realizará con el principal objetivo de mantener una
vigilancia constante para detectar a tiempo los errores que pueden afectar la excelencia de los
resultados.
Se recomienda el uso de los Controles de Hemoglobina A1c, Normal (cod. 18001) y Elevado (cod.
18002), para verificar la funcionalidad del procedimiento de medida. Cada laboratorio debe
establecer su propio programa de Control de Calidad interno, así como procedimientos de
corrección en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias aceptables.
CONTROL DE CONTROL DE
PRESICION EXACTITUD
CONTROL DE CALIDAD
FASE POST-ANALITICA
CONCORDANCIA
CONCORDANCIA: relación directa entre el código, nombre del paciente y su resultado preliminar
RESULTADOS
HEMOGLOBINA GLICOSILADA
Magnitud: 415 nm
Unidades: %
El mecanismo de solicitud
Como se extrajo la muestra
El muestreo (incluido el transporte de la muestra )
Método analítico empleado
Procesamiento de los datos por el laboratorio
Mecanismo de entrega de los resultados
Resultados
PRUEBA RESULTADOS
HbA1c 5,0%