UNIVERSIDAD NACIONAL

“PEDRO RUIZ GALLO”

FACULTAD CIENCIAS BIOLOGICAS
 •Holdgate (1979)
•CONTAMINACIÓN : “Introducción en el ambiente de
sustancias o energía responsables de causar riesgo para
la salud humana, daños a los recursos vivos y daño
DEFINICIÓN ecológico, o interferir con los usos legítimos del
ambiente”

•Inorgánicos
• Orgánicos
GRUPOS DE
• Biológicos
CONTAMINANTES DEL • Gaseosos
MEDIOAMBIENTALES
•METALES: •BIODEGRADABLES: • PATÓGENOS: •GASES
•Cadmio, mercurio, • Aguas residuales, • Virus, •SO2 , CO2, metano
plata, etc. residuos domésticos, bacterias, •VOLÁTILES
•NITRATOS, agrícolas e industriales. hongos, •Compuestos
NITRITOS,FOSFATOS •PETROQUIMICOS parásitos. orgánicos volátiles,
•ISOTOPOS • Petróleo, gasóleo cloroflurocarbonados
RADIOACTIVOS •SINTÉTICOS
•CIANUROS, ASBESTO • Pesticidas
•Organohalogenados
SUELOS • El número de muestras tomadas dependerá del
tamaño del área que cubra la contaminación

• Las muestras deberán ser tomada durante un

AGUAS periodo de tiempo, en diferentes secciones de la

vía fluvial y a diferentes profundidades.

• Sistemas de bombeo: Muestra bombeada

directamente del aire de un analizador.

AIRE • Pre – concentración: Para muestras en bajas

concentraciones
• Toma directa: Capturar la muestra de aire en
botellas, jeringuillas, bolsas para su análisis posterior.
• Sólidos suspendidos, • Condiciones muy ácidas o • Tubos de comparación,
totales y volátiles. muy alcalinas serán discos de color,
• Niveles de sulfato corrosivas y limitarán la colorímetros,
actividad biológica. espectrofotómetros.

• Los niveles de oxigeno son

• Determinan: Niveles de amonio,
importantes en la calidad de las nitrato, nitrito, calcio, sodio, entre
otros.
aguas para los organismos aerobios.
• Los niveles de nitrito y nitrato
deben ser mínimos para la
calidad del agua.
Los metales pueden ser determinados mediante métodos químicos o por
absorción atómica. La detección del amplio rango de compuestos orgánicos
requiere técnicas tales como la HPLC (cromatografía líquida de alta
resolución) y GC (cromatografía de gases), que pueden conectarse a
espectrómetros de masas para identificar los compuestos separados.
 TECNOLOGIA DEL
MONITORIZACIÓN
MICROBIOLÓGICOS DNA
FISIOLÓGICA
RECOMBINANTE

Extracción directa
Demanda biológica del DNA utilizando
Contaje de viables
de oxigeno (BOD) productos químicos
como álcalis.

Extracción del DNA

a los
Inmunología
microorganismos
previamente lisados

Citometría de flujo
MONITORIZACION MEDIOAMBIENTAL

La monitorización de la contaminación utiliza dos grupos de técnicas :

- Aquellas que describen las condiciones in situ mediante medidas de
los cambios en las especies en el medioambiente (biomarcadores) tras
exposición a la contaminación .
- Aquellas que utilizan material biológico para valorar la toxicidad de un
contaminante aislado.
 TEST DE TOXICIDAD
BIOMARCADORES UTILIZANDO
MATERIAL
Ventajas:
BIOLÓGICO
•La determinación puede hacerse
durante un periodo de tiempo y no con
una muestra única.
•Proporciona información sobre la Se basa en la medida de los efectos
toxicidad de los compuestos aislados o
letales de un compuesto sobre un
mezclas en el medioambiente real y
complejos a niveles no letales. sistema biológico específico, se lleva
a cabo con un contaminante único.

TIPOS
•Ecológicos + Daphnia
•Cambios en el comportamiento + Test de algas
•Indicadores fisiológicos
•Indicadores bioquímicos + Test de Ames
•Inmunoquímicas + Test de germinación de semillas
•Indicadores genéticos
 Ecológicos : cambios en la densidad de población,
especies claves y diversidad de las especies son
determinados después de la exposición.
 Cambios en el comportamiento:hábitos alimentarios,
movilidad bacteriana.
 Indicadores fisiológicos:acumulación de metales
pesados, producción de dióxido de carbono,
cambios en la actividad microbiana.
 Indicadoresbioquímicos:citocromo450 (contaminante
orgánico),metalotioneínas (metales)
 Inmunoquímica, ELISA, RIA (ensayo
inmunorradiactivo).
 Indicadores genéticos, sondas de DNA para
determinadas especies, construcciones con el gen de
la luciferasa bacteriana (lux).
 DEFINICIÓN
• Dispositivos que incorporan
“un elemento sensor
biológico” integrado a un
transductor de la señal.
• El elemento sensor utiliza la
especificidad única de las
moléculas biológicas que
pueden proporcionar la
sensibilidad y especificidad
necesaria para detectar
compuestos aislados en
mezclas complejas (Hall,
1990).
VENTAJAS
• Detección on-line,
monitorización en tiempo
real.
• Respuesta rápida.
• Funcionan en mezclas
complejas.
• Requieren menor gasto y
menos tiempo.
• Muy específicos en su
respuesta.
• Alta sensibilidad
 ENZIMAS
ANTICUERPOS
Entes
ORGÁNULOS biológicos
CÉLULAS ENTERAS

Conductimétrico
Fibra óptica
Transductor
Selectivo de iones
Electrodo de oxígeno,etc

Procesamiento
de datos
Utilizan la especificidad de los procesos biológicos:
Enzimas Sustratos
Anticuerpos Antígenos
Lectinas Carbohidratos
Complementariedad de ácidos nucleicos.
Las ventajas de los biosensores para la monitorización
medioambiental son :
Reutilización
Menor manipulación
Menor tiempo de ensayo
Repetitividad

Detección on-Iine, monitorización en tiempo real.

Respuesta rápida.
Portátiles en muchos casos.
Funcionan en mezclas
complejas.
Requieren menor gasto y menos
tiempo que los métodos
convencionales.

Muy específicos en su respuesta.

Alta sensibilidad
Aplicaciones Industriales, militares y medio
ambientales:

– Alimentación
– Cosmética
– Control de fermentaciones
– Controles de calidad
– Detección de explosivos
– Detección de gases nerviosos y/o
toxinas biológicas
– Control de polución
 TIPOS DE BIOSENSORES
1. BIOSENSORES ELECTROQUÍMICOS
 Amperométricos: Determinan corrientes eléctricas asociadas con
los electrones involucrados en procesos redox.
 Potenciométricos: Usan electrodos selectivos para ciertos iones
 Conductimétricos: Determinan cambios en la conductancia
asociados con cambios en el ambiente iónico de las soluciones.

2. BIOSENSORES TERMOMÉTRICOS
3. BIOSENSORES PIEZOELÉCTRICOS
4. BIOSENSORES ÓPTICOS
5. BIOSENSORES CELULARES
6. INMUNOSENSORES
BIOSENSORES
ELECTROQUÍMICOS
AMPEROMÉTRICOS:
“EL ELECTRODO DE OXÍGENO”
BIOSENSORES ELECTROQUÍMICOS
POTENCIOMÉTRICOS
Determinan cambios en la concentración de iones concretos
BIOSENSORES
PIEZOELÉCTRICOS:
“NARICES BIOELECTRÓNICAS”
Aprovechan las propiedades eléctricas de los cristales:
- En transmisores y emisores de radio
- En transitores
- En chips
EFECTO PIEZOELÉCTRICO

“Producción de un campo eléctrico por

separación de las cargas positivas y
negativas en algunos tipos de cristales al
someterlos a ciertas tensiones”
1) Si un cristal piezoeléctrico se somete a un campo eléctrico se
deformará.
2) Si un cristal piezoeléctrico se somete a un campo eléctrico que
oscila a una frecuencia determinada vibrará con una
frecuencia característica.
EFECTO PIEZOELÉCTRICO

1) La frecuencia de resonancia se encuentra en el rango de los

10 MHz (radiofrecuencia).
2) La frecuencia de resonancia depende de:
• La composición del cristal
• El Grosor
• La forma en que fue cortado
3) Un cristal piezoeléctrico varía su frecuencia de resonancia
cuando se adhieren moléculas a su superficie.
BIOSENSORES PIEZOELÉCTRICOS

1) Se detectan variaciones muy pequeñas en la frecuencia de

resonancia: cantidades de hasta un ngr/cm2
2) La medida se compra con un electrodo de referencia con
cristal sin material biológico.
3) Ejemplos:
1) Detectores gaseosos: SO2, CO, HCl, NH3, CO2
2) Detector de Cocaina
3) Detector de Formaldehido
4) Detector de Pesticidas (Organofosforados)
BIOSENSORES PIEZOELÉCTRICOS

1)Detector de Cocaína:
• Anticuerpos contra cocaína fijados
sobre un cristal piezoeléctrico.
• Detecta una parte por billón
• 50 MHz de cambio en la frecuencia
de resonancia.
• Se limpia en segundos por
aireación.
BIOSENSORES PIEZOELÉCTRICOS

3) Detector de Pesticidas
Organofosforados:

• Colinesterasa inmovilizada en un
cristal de cuarzo mediante
glutaraldehido.
BIOSENSORES PIEZOELÉCTRICOS

Inconvenientes:
• Muy influidos por la humedad.
Baja = poco sensibles
Alta = desaparece el efecto
piezoelectrico
• Inutilizables en líquidos.
Introducir y secar
BIOSENSORES ÓPTICOS:

 Permiten el uso de materiales detectores

no eléctricos, seguros en ambientes
peligrosos o sensibles (in vivo)
 No precisan sensores de referencia