UNIVERSIDAD POLITECNICA SALESIANA

INGENIERIA EN BIOTECNOLOGIA
BIOTECNOLOGIA VEGETAL

NOMBRE: CRISTIAN RECALDE.

GRUPO: 1.
NIVEL: 5TO.
CONSULTA DE MEDIOS DE CULTIVO

1. Selección de explantes

Escogí las semillas de Limón (Citrus × limón) ya que esta especie es de las más
fáciles de adaptar a cualquier medio de cultivo.

2. Composición de medio de cultivo casero con su respectiva función

INGREDIENTES DOSIS FUNCIÓN

Gelatina sin sabor 35 gr/L Sirve como agente
gelificante en el medio de
cultivo
Agua destilada 1 Litro Mezclar, aforar y formar
medio de cultivo
Tomate de árbol 15 gr Fuentes de hidratos de
carbono
Gentacimina 0.5-1ppm Antibiótico para inhibir el
crecimiento de bacterias
Azúcar 3 gr Fuentes de hidratos de
carbono

3. Protocolo de desinfección del explante

1) Es necesario que las manos y, eventualmente, los antebrazos del cultivador sean
desinfectados con etanol al 70%. El uso de máscaras y gorros no es imprescindible,
pero reduce la contaminación.

2) Antes de comenzar a trabajar, desinfectar la mesa y con etanol al 90%. Igualmente

es conveniente desinfectar la parte externa de los recipientes que contienen los
medios de cultivo o el agua esteril, y la parte instrumental que se van a utilizar
 como son: Cuchillo, bisturí, corta uñas, pinzas. Esto se realizara a través de una olla
de presión para tratar de esterilizar o reducir al mínimo la cantidad de
microorganismos.

3) Es primordial lavar con abundante agua y jabón los explantes antes de sumergir las
semillas en alcohol al 70% por 5 minutos, luego realizar un lavado con agua
destilada y volver a sumergir en hipoclorito de sodio al 3% por 3 minutos. Repetir
este proceso dos veces.

4) Los instrumentos metálicos se deben flamear previamente con etanol al 90%. El

material de vidrio utilizado como soporte para las disecciones. Realizar las
operaciones de transferencia y disección lo más cerca dela llama de un mechero.
Evitar exposiciones prolongadas de los explantes o de medios de cultivo en
recipientes abiertos.

Bibliografía
Negroni, M. (2009). Microbiología Estomatológica. Buenos Aires: Ed. Médica
Panamericana.
W. M. Roca, L. A. (1991). Cultivo de tejidos en la agricultura: fundamentos y
aplicaciones. Buenos Aires: CIAT.