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ISSN: 1853 - 4422

ISSN ON LINE: 1853 - 4430

Scientia
Interfluvius

Peer review, bilingual and multidisciplinary academic journal


Revista académica, bilingüe, arbitrada y multidisciplinaria

Paraná - Entre Ríos - República Argentina


Junio de2019
Julio de 2017//Volumen
Volumen10 8 (1)
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ÍNDICE
03 EDITORIAL

TRABAJOS CIENTÍFICOS

06 Massive DNA sequencing in Forensic Genetics


El secuenciamiento masivo de ADN en Genética Forense
Gustavo G. Martínez

12 Importance of the computer experts in the judicial area of the province of entre ríos
Importancia del perito informático en el ámbito judicial de la provincia de entre ríos
Cabrera Julio Ignacio, Silvia Mónica Aranguren & Juan Francisco Gómez

Electron microscopy contributions to forensic investigations. A case study.


23 Aportes de la microscopía electrónica a las investigaciones forenses. Presentación de un caso testigo.
José Félix Vilá & Guillermina A. Fagúndez

Study of entomological samples of medical-legal interest deposited in the collection of the entomology labo-
40 ratory (fcyt-uader / cicyttp-conicet)
Revisión de muestras entomológicas de interés forense depositadas en la colección del laboratorio de entomo-
logía (fcyt-uader / cicyttp-conicet)
Carlos Fernando Sosa
54. Apéndices/Appendix

Palynology as a forensic tool: studies on sedimentological samples


56 La palinología como herramienta forense: estudios en muestras sedimentológicas
Mario Bordi, Mariana Bertos, Marcia Gallo & Guillermina Fagúndez

Pollen assemblage recovered from the clothes of a hypotetic suspect by adhesive tape
80 Espectro polínico recuperado de la ropa de un hipotetico sospechoso mediante cinta adhesiva
Cecilia Trujillo, Mariana Bertos, Lilian Albornoz, Sol Overtello, Marcia Gallo, Mario Bordi1 & Guillermina
Fagúndez
98. Apéndices/Appendix

Impact of domestic wastewater discharge on the water quality of el cura stream (gualeguaychú, entre ríos)
100 Impacto de la descarga de efluentes cloacales domiciliarios sobre la calidad de agua del arroyo el cura (guale-
guaychú, entre ríos)
Elizabeth Valentina Avila-Hernández, Diamela gianello, Eduardo Chaves, Irene Aguer, Ricardo Ariel
Juárez & Melina Celeste Crettaz-Minaglia
122. Apéndices/Appendix

Monitoring of Aedes aegypti Linneaus (Diptera: Culicidae) in the urban radius of the city of Diamante– Entre
Ríos
132 Monitoreo de Aedes aegypti Linneaus (Diptera: Culicidae) en el radio urbano de la ciudad de Diamante – Entre
Ríos
María Paula Campos-Soldini, Melania Edith Safenraiter, Leandro Sebastián Wagner & Estrella Natalín
Fernández
143. Apéndices/Appendix

INSTRUCTIONS FOR AUTHORS


144 NORMAS PARA LA PRESENTACIÓN DE ARTÍCULOS

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MASSIVE DNA SEQUENCING IN FORENSIC GENETICS

EL SECUENCIAMIENTO MASIVO DE ADN EN GENÉTICA FORENSE


Gustavo G. Martínez

Bioquímico, Doctor en Medicina, Especialista en Genética Forense


Profesor de la Catedra de Química Legal, F. C y T, UADER
Director del Servicio de Genética Forense y Registro Provincial de Datos Genéticos del Superior tribunal de Justicia de la Provincia
de Entre Ríos

Recibido: 24 de Mayo de 2019


Aceptado: 29 de Junio de 2019

La genética forense es la especialidad que apli- Forensic genetics is the field that applies genetic
ca estudios genéticos para la resolución de causas studies to solve legal causes (Jobling & Gill, 2004)
judiciales (Jobling & Gill, 2004) en las que se en- involving biological identification of a person or
cuentre involucrada la identificación biológica de research into the type of filial biological relation
la persona o la investigación del tipo de relación between persons.
biológica filial entre estas. The evolution of forensic genetics has been
La evolución de la genética forense ha sido im- stimulated by progress in knowledge on human
pulsada por el avance en el conocimiento de la va- genetic variation which began over a century ago with
riación genética del ser humano, el cual comienza the discovery of polymorphisms in the ABO blood
hace más de un siglo con el descubrimiento de los group (Landsteiner,1900) and, furthermore, with the
polimorfismos en el grupo sanguíneo ABO (Lands- immediate understanding that these variations can
teiner,1900) y por añadidura, con el inmediato be applied to shedding light on unresolved cases of
entendimiento de que estas variaciones podían crime. It must be highlighted that even a simple genetic
aplicarse a la resolución de crímenes. Es de desta- system such as ABO can be used to conclusively show
car que incluso un sistema genético simple como that a sample does not come from a specific person
el ABO se puede utilizar para mostrar de manera as proof of an “exclusion”. However, showing that
concluyente que una muestra no proviene de una a sample can come from a specific person presents
persona específica para probar una “exclusión”. Sin a serious difficulty and would depend largely on the
embargo, demostrar que una muestra pueda pro- grade of population variation of the biological system
venir de una persona específica presenta mayor used for identification.
dificultad y dependerá en gran medida del grado The DNA (deoxyribonucleic acid) revolution
de variación poblacional del sistema biológico em- began in 1984 with its discovery by Alec Jeffreys in
pleado para la identificación. Leicester in the United Kingdom, of the hyper-variable
La revolución del ADN (ácido desoxirribonuclei- loci known as “mini satellites” (Jeffreys et al., 1985a),
co) se inició en 1984 con el descubrimiento realiza- that led to the development of a technique that paved
do por Alec Jeffreys en Leicester, Reino Unido, de the way to discovering the “DNA fingerprint” (Jeffreys
los loci hipervariables conocidos como “minisatéli- et al., 1985b), which was used for the first time in a
tes” (Jeffreys et al., 1985a), lo que llevó al desarrollo legal case, thus opening the doors for the authorisation
de la técnica que permitía obtener lo que se de- of this type of study as an element of proof.
nominó como huella de ADN o “DNA fingerprint” Around the same time these discoveries were made,
(Jeffreys et al., 1985b), y a que fuera utilizada por technical designs that “amplify” the DNA were begun;
primera vez en una causa judicial abriéndose así las this enabled the obtaining of a large quantity of DNA
puertas a que este tipo de estudios fuera autoriza- based on virtually one DNA copy as a mould; imitating,
do como elemento probatorio in vitro, what occurs naturally in life. The strategy

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A la par de estos hallazgos se comenzaron a di- would allow the amplification of DNA through the
señar técnicas que permitían “amplificar” el ADN, es use of polymerase (Saiki et al., 1998) and the reaction,
decir, poder obtener una gran cantidad de copias which went on to being called PCR (Polymerase Chain
de ADN partiendo virtualmente de una sola co- Reaction), began to be used as proof of polymorphisms
pia de ADN como molde imitando in vitro lo que in the DQ-α system and it was used for the first time in
ocurre naturalmente in vivo, La estrategia permitía a legal case in 1986 (Pennsylvania v. Pestinikas, USA).
la amplificación del ADN mediante el uso de poli- The discovery of STR´s (Short Tandem Repeats of
merasas (Saiki et al., 1998) y la reacción, que pasó DNA segments) or “micro satellites” (Edwards et al.,
a denominarse PCR (reacción en Cadena de la Po- 1991) together with the arrival of automatic sequencing
limerasa), comenzó a utilizarse para evidenciar po- equipment for treatment of DNA and the separation
limorfismos en el sistema DQ-α y fue utilizada por of fragments, led to the powerful current technology
primera vez en una causa judicial en 1986 (Pennsyl- of identifying individuals.
vania v. Pestinikas, USA). The use of STR’s gradually replaced the previous
Fue el descubrimiento de los STR´s (repeticio- systems of identification and this was installed
nes de segmentos de ADN cortos en tándem, por worldwide as the methodology of preference, given its
sus siglas en inglés) o “microsatelites” (Edwards et characteristic advantages: high discrimination potency,
al., 1991) junto al advenimiento de equipos de se- high sensitivity and improved capacity in resolving
cuenciación automática de ADN y separación de simple mixes of genetic profiles. Furthermore, the
fragmentos, los que llevaron a la poderosa tecnolo- time needed to complete the analyses was reduced
gía actual de identificación de individuos. considerably and this also lowered the derived costs
El uso de STR´s reemplazó paulatinamente los of partial automatization, thus paving the way for the
sistemas anteriores de identificación y se instaló a creation of data bases of national DNA’s.
nivel mundial como la metodología de preferencia Currently, forensic research worldwide, with aims
dada sus ventajas características, alta potencia de aligned to the biological identification of persons, is
discriminación, alta sensibilidad y mejor capacidad carried out using a range of polymorphic markers
para resolver mezclas simples de perfiles genéticos. present in the DNA of the STR type, which are
Además, el tiempo necesario para llevar a cabo los available commercially in different analysis kits. These
análisis se redujo considerablemente y también se can be placed in autosomal chromosomes or sexual
redujeron los costes derivados de la automatiza- chromosomes and their choice varies depending
ción parcial, allanado el camino para la creación de on the type of legal case being investigated. In this
bases de datos nacionales de ADN. sense, the STR placed in sexual chromosomes can be
Actualmente, la identificación biológica de per- of great use in the investigation of cases of sexual
sonas con fines de investigación forense en casi abuse (Y chromosome), and/or of investigating the
todo el mundo se lleva a cabo utilizando una gran relationship in the absence of the alleged father (Y
batería de marcadores polimórficos presentes en chromosome and X chromosome). As needed, studies
el ADN del tipo de STR, los cuales se encuentran on polymorphisms of hyper-variable sequences of the
comercialmente disponibles en diferentes kits de DNA mitochondrial (DNAmt), were added, above all
análisis. Estos pueden estar ubicados en cromoso- in cases involving the remains of old bones or forensic
mas autosómicos o en cromosomas sexuales, y su samples where the nuclear DNA is found in a high
elección varía en relación al tipo de causa judicial state of degradation and/or is too scarce in quantity to
que se investiga. En tal sentido, los STR ubicados en complete the study with STR systems.
cromosomas sexuales pueden ser de gran utilidad Given that the current research platforms in
en la investigación de casos de abuso sexual (cro- forensic DNA have been standardised for the use of
mosoma Y), y/o de investigación de parentesco en STR´s, and even that all of the national data bases
ausencia de padre alegado (cromosoma Y, y cromo- of genetic profiles with forensic aims have been
soma X). De ser necesario, se adicionan estudios de assembled with this type of system, it will be unlikely
polimorfismos en las secuencias hipervariables del that conventional DNA studies can move to newer
ADN mitocondrial (ADNmt), sobre todo en casos de analysis methodologies in a near future. However, this
restos óseos antiguos o muestras forenses donde el does not mean that investigation in the field of genetic
ADN nuclear se encuentre en alto estado de degra- human polymorphisms has not continued to evolve
dación y/o en escasa cantidad para llevar a cabo el and that the technical capacity for the analysis of new

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estudio con sistemas de STR. polymorphic markers of entities other than those
Dado que las plataformas actuales de investiga- known as STR´s does not exist today. An example
ción en ADN forense se han estandarizado para el of this type is found in the polymorphisms of Single
uso de STR´s, e incluso todas las bases de datos na- Nucleotide Polymorphisms (SNP´s), or insertion/
cionales de perfiles genéticos con fines forenses se deletion fragments (Indels) (Sobrino et al., 2005,
han ensamblado con este tipo de sistemas, resulta Pereira et al., 2009).
poco probable que los estudios convencionales de Historically the techniques of DNA sequencing
ADN puedan migrar hacia nuevas metodologías de have been based on the original technique described by
análisis en un futuro cercano. Sin embargo, esto no Sanger (Sanger et al., 1977), where the incorporation
quita que la investigación en el campo de los poli- of dideoxynucleotides (ddNTP) to a growing DNA
morfismos genéticos humanos haya seguido evo- chain impedes the extension of the chain through
lucionando y hoy no se posea la capacidad técnica DNA polymerase. Following this, the fragments of
para el análisis de nuevos marcadores polimórficos synthetized DNA are separated in a polyacrylamide
de diferente entidad a los conocidos como STR´s. gel and it was seen that the ddNTP incorporated in
Ejemplo de este tipo lo constituyen los polimorfis- the fragments of DNA were emitted because of
mos de nucleótido único (SNP´s), o los fragmentos their being marked with fluorescence or because of
de Inserción/Deleción (Indels) (Sobrino et al., 2005, radioactivity. The introduction of ddNTP marked
Pereira et al., 2009). with fluorescence and the platforms of capillary
Históricamente las técnicas de secuenciación electrophoresis (Mitchelson, 2003), increase sensitivity
del ADN se han basado en la técnica original des- and supply and lower costs to a level where sequencing
cripta por Sanger (Sanger et al., 1977), donde la of complete genomes was made possible.
incorporación de un dideoxinucleótido (ddNTP) a Improvements in technology of capillary
una cadena creciente de ADN impide la extensión electrophoresis platforms and the development of
de la cadena por la ADN polimerasa. Posteriormen- trials based on STRs that are highly sensitive gradually
te, los fragmentos de ADN sintetizados se separa- reduced the need for sequencing DNAmt in the
ban en un gel de poliacrilamida y se evidenciaban decade of the 1990’s. However, Sanger sequencing was
ya sea por la radiactividad o por la fluorescencia used continually for the verification and identification
que emitían los dNTP incorporados en los fragmen- of STR alleles, and even for new strategies of SNP
tos de ADN. typifications such as what is called mini-sequencing
La introducción de ddNTP marcados con fluo- or sequencing of the extension of a base (SBE, single
rescencia y las plataformas de electroforesis capilar base extension) for the typification of SNPs (Børsting,
(Mitchelson, 2003), incrementaron la sensibilidad y 2009, Podini & Vallone, 2009).
el rendimiento, y bajaron los costos a un nivel en el The pyro-sequencing methods were presented as an
que el secuenciamiento de genomas completos se alternative to Sanger’s sequencing in real time (Ronaghi
hizo posible. et al., 1996). With this technique, the nucleotides are
Las mejoras en la tecnología de las plataformas sequentially added in the DNA synthesis reaction and
de electroforesis capilar y el desarrollo de ensayos the liberation of pyrophosphate is used to generate
basados en STRs altamente sensibles gradualmen- light through a cascade of enzymatic reactions that
te redujo la necesidad de secuenciar el ADNmt involve ATP -Sulfurylase, Luciferase, and Apyrase. The
durante la década de 1990, sin embargo el secuen- light is detected in real time by a CCD camera and thus
ciamiento de Sanger se siguió utilizando continua- an electrophoretic separation is necessary making this
mente para la verificación e identificación de alelos methodology more economical than those based on
de STRs, incluso también para nuevas estrategias the Sanger technique. However, given the possibility of
de tipificación de SNPs, como el denominado mini- sequencing short segments of DNA and considering
secuenciamiento o secuenciamiento de extensión that the original instruments were especially limited in
de una base (SBE, single base extensión) para tipi- their capacity for analysing multiple systems together,
ficación de SNPs (Børsting, 2009, Podini & Vallone, and with the usually small quantities of DNA recovered
2009). as forensic evidence, this type of technology is difficult
Los métodos de pirosecuenciación fueron pre- to apply in forensic routine (Børsting & Morling, 2015).
sentados como una alternativa el secuenciamiento The term Next Generation Sequencing (NGS)
de Sanger en tiempo real (Ronaghi et al., 1996). En is generally used for describing a series of different
esta técnica, los nucleótidos se adicionan secuen- technologies of high-performance modern sequencing.

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cialmente en la reacción de síntesis de ADN, y la These recent technologies allow the sequencing of
liberación de pirofosfato es utilizada para generar DNA in a far faster and more economical manner
luz via una cascada de reacciones enzimáticas que that sequencing according to Sanger and have thus
involucra la ATP-Sulfurilasa, la Luciferasa, y la Apira- revolutionised the study of genomics and molecular
sa. La luz se detecta en tiempo real por una cáma- biology. There are a series of commercially available
ra CCD y por tanto no es necesaria una separación platforms with different technical strategies and among
electroforética haciendo que esta metodología these the following can be mentioned: Illumina®
sea más económica que las basadas en la técnica (Solexa), Roche® 454, Ion Torrent®: Proton/PGM
de Sanger. Sin embargo, dado que otorga la posi- and SOLiD®.
bilidad de secuenciar segmentos cortos de ADN y In the majority of NGS strategies, a large number
que los instrumentos originales eran especialmen- of small DNA fragments is sequenced at the same time
te limitados en su capacidad de analizar múltiples and thus the term massive sequencing has been given
sistemas a la vez, con las usualmente pequeñas alongside that of massive DNA sequencing.
cantidades de ADN que se recuperan de evidencias Currently there are at least three commercial firms
forenses, hizo que este tipo de tecnología fuera de that have developed products for the analysis of
difícil aplicación en la rutina forense (Børsting & polymorphic DNA systems with forensic goals using
Morling, 2015). the massive sequencing technique and the results are
El término secuenciamiento de siguiente ge- surprising, implying a positive change in the paradigms
neración (NGS, next generation sequencing) es of penal investigation.
generalmente utilizado para describir una serie de A conventional DNA analysis implies obtaining
diferentes tecnologías de secuenciación modernas simultaneous results of between 20 and 25 STR
de alto rendimiento. Estas tecnologías recientes systems for sample analysis. Additional analyses on
permiten secuenciar ADN de manera mucho más other systems located in other chromosomal regions
rápida y económica que la secuenciación según aimed at obtaining more information imply higher
Sanger, y como tales han revolucionado el estudio costs and study times However, an analysis for
de la genómica y la biología molecular. Existen una massive sequencing allows the obtaining of hundreds
serie de plataformas comercialmente disponibles of polymorphic systems at a time, which increases
que presentan diferentes estrategias técnicas, en- the power of identification of a DNA proof in the
tre ellas se pueden mencionar: Illumina® (Solexa), forensic routine tenfold. Massive sequencing not only
Roche® 454, Ion Torrent®: Proton/PGM y SOLiD®. opens up the possibility of studying DNA regions
En la mayoría de las estrategias de NGS, un that have information regarding the identification of
gran número de fragmentos pequeños de ADN es a person and her/ his filial links but also allows the
secuenciado a la vez y por tanto se les ha dado el analysis of regions that inform of the phenotypical
nombre de secuenciamiento masivo en paralelo o characteristics such as eye and hair colour of the
secuenciación masiva de ADN. provider of a biological sample from the scene of a
Actualmente existen al menos tres firmas co- crime. Information can also be obtained on a person’s
merciales que han desarrollado reactivos para el ancestral lines and even the variations in complex
análisis de sistemas polimórficos del ADN con fines polygenic tracts that can infer the likely shape of a
forenses utilizando la técnica de secuenciación ma- human face (Fagertun et al., 2015).
siva y los resultados son sorprendentes e implican In conclusion, we are facing a series of scientific
un nuevo cambio de paradigmas en la investiga- advancements in forensic genetics that, in the near
ción penal. future, will bring about a leap in the quality of
Un análisis convencional de ADN implica obte- research once the validation of these afore mentioned
ner resultados en paralelo de entre 20 y 25 sistemas techniques are mastered. In this sense, recently, the
de STRs por muestra por análisis. Análisis adiciona- Forensic Genetics Service of the High Court of Justice
les sobre otros sistemas ubicados en otras regio- of the Province of Entre Ríos signed an agreement
nes cromosómicas con el fin de obtener mayor with the National Council of Scientific Research and
cantidad de información implican mayores costos Technology (Consejo Nacional de Investigaciones
y tiempos de estudio. Sin embargo, un análisis por Científicas y Tecnológicas, CONICET), establishing
secuenciación masiva permite obtener informa- a line of research together that involves the building
ción de cientos de sistemas polimórficos por vez, of a data base of population- related frequencies of
lo que incrementa en diez veces el poder de identi- new genetic DNA polymorphisms in Argentina and

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ficación que posee una prueba de ADN convencio- the validation of massive DNA sequencing in forensic
nal en la rutina forense. El secuenciamiento masivo genetics. Thus this area of research in the University is
no solo otorga la posibilidad de estudiar regiones being transformed, so as to make our laboratory one
del ADN que poseen información en cuanto a la of the first in Latin America to adopt the technology
identificación de la persona o a sus vínculos filiales, for massive sequencing of DNA for forensic use, at a
sino también, permite el análisis de regiones que level with the most important laboratories that research
informan de las características fenotípicas de las on the subject at a global level.
mismas tales como el color de los ojos y del cabello
del aportante de una muestra biológica en la esce-
na de un crimen, o sus rasgos de ancestralidad, o
incluso, las variaciones en tractos poligénicos com-
plejos que permiten inferir la conformación proba-
ble del rostro humano (Fagertun et al., 2015).
En conclusión, estamos asistiendo a una serie
de avances científicos en genética forense que en
un futuro cercano permitirán un salto de calidad
en la investigación una vez que se alcance la vali-
dación de dichas técnicas. En tal sentido, reciente-
mente el Servicio de Genética Forense del Superior
Tribunal de Justicia de la Provincia de Entre Ríos
suscribió un convenio con el Consejo Nacional de
Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONI-
CET), estableciendo una línea de investigación
conjunta que involucra el establecimiento de bases
de datos de frecuencias poblacionales de nuevos
polimorfismos genéticos del ADN en la Argentina y
la validación del secuenciamiento masivo de ADN
en genética forense, convirtiéndose de esta mane-
ra en uno de los primeros laboratorios forenses de
Latinoamérica en adoptar la tecnología de secuen-
ciamiento masivo de ADN para el uso forense, al
mismo nivel que los laboratorios de este tipo más
importantes a nivel mundial.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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Interfluvius 10 (1): 12-22, 2019 - Paraná ISSN 1853-4422 (printed) ISSN 1853-4430 (on line)

IMPORTANCE OF THE COMPUTER EXPERTS IN THE JUDICIAL AREA


OF THE PROVINCE OF ENTRE RÍOS

IMPORTANCIA DEL PERITO INFORMÁTICO EN EL ÁMBITO JUDICIAL


DE LA PROVINCIA DE ENTRE RÍOS
Cabrera Julio Ignacio1, Silvia Mónica Aranguren2 & Juan Francisco Gómez3

1Lic. en Sistemas de Información egresado de FCyT UADER. MP 578 - Perito Informático


2Lic. en Sistemas de Información UTN M.P. 092 - Docente – Perito Informática
3Estudiante de la Lic. en Sistemas de Información FCyT UADER. Referente Técnico del Consejo General de Educación

cabrera_ignacio@outlook.com, sarangur@gmail.com, juanfgomez12@gmail.com

ABSTRACT. In the search to find a profession within the area of ​​systems, which attracted
our interest is forensic computing and what role we take within it. We will see how the
computer professional is incorporated in the field of justice, what is his responsibility and
how he is represented in the province of Entre Ríos.

KEY WORDS. Crime. Cybercrime Evidence. Computer forensics. Expert of trade. Expert
of part. College of professionals.

RESUMEN. En la búsqueda de lograr encontrar una profesión dentro del área de siste-
mas, la que atrajo nuestro interés es la informática forense y que rol tomamos dentro
de ésta. Veremos cómo está incorporado en el ámbito de la justicia el profesional de la
informática, cuál es su incumbencia y cómo se encuentra representado en la provincia
de Entre Ríos.

PALABRAS CLAVES. Delito. Ciberdelito. Evidencia. Informática forense. Perito de ofi-


cio. Perito de parte. Colegio de profesionales.

Recibido: 10 de enero de 2019


Aceptado: 29 de marzo 2019

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Scientia
Cabrera et al, Importancia del profesional informático ... Interfluvius 10(1):12-22, 2019 Paraná

INTRODUCCIÓN INTRODUCTION
It is a fact that in recent years, security related
Es un hecho que en los últimos años los inci- incidents such as crimes and aggressions centre on
dentes de seguridad como delitos y agravios, in- technology in all its formats; in their occurrence as well
volucran tecnología en todos sus formatos, tanto as their being brought to light. It is public knowledge
para llevarlos a cabo como para esclarecer lo. Es de that our lives depend on the technological devices that
público conocimiento que nuestra vida depende simplify our lives; this is so to such an extent that our
de dispositivos tecnológicos que nos hacen la vida reliance on them is absolute. For example, Smart TV,
más sencilla, al punto de lograr una dependencia Smartphone etc., keep us continually connected below
absoluta en ellos. A modo de ejemplo, Smart TV, an enormous network bound together by internet.
Smartphone, etc. son los mismos que nos mantie- The great majority of technological gadgets have
nen conectado, bajo una enorme red como lo es their functioning based on connectivity, allowing
internet. the breaking up of the barrier imposed by physical
La gran mayoría de los dispositivos tecnológi- space, supplying us with improved services, and
cos basan su funcionamiento en la conectividad, thus improving our quality of life. According to the
permitiéndoles romper la barrera del espacio físico, Company Deloitte, (published in the newspaper
prestando mejores servicios, mejorando así la cali- La Nación of 18th January, 2018)1, one of the first
dad de vida del usuario. Según un estudio realizado activities carried out by a person upon rising in the
por la empresa Deloitte, (publicado en el diario La morning and one of the last before going to bed at
Nación el 18 de enero de 2018)1, una de las prime- night is looking at his mobile phone. This gives us an
ras actividades que hace el hombre al levantarse, idea of the level in which we are involved with this type
y una de las últimas actividades que realiza antes of technology and the dependence generated to such a
de irse dormir es mirar su celular. Lo cual nos da la point that a person can be informed on how we think,
pauta de lo involucrado que estamos con este tipo live and even know who we are by merely analysing our
de tecnología y la dependencia que generan a tal mobile phones.
punto que una persona puede conocernos, saber Crimes, frauds, robberies, extortions etc., involving
cómo pensamos, como vivimos y quienes somos technological gadgets have been on the rise in a revealing
con el solo hecho de analizar nuestros dispositivos manner, to such a point that it is worrisome at a global
móviles. level given that in many countries there are no specific
Los delitos, fraudes, estafas, extorsión, etc. que laws that sanction this practice. Delinquencies have
involucran dispositivos tecnológicos ha ido cre- undergone mutations leaving behind their traditional
ciendo de manera exponencial, a tal punto que forms, modifying the means while maintaining the aim
es una preocupación a nivel mundial dado que and profiting by the grey areas in the law of countries
en muchos países no existen leyes específicas que with little regulation which allows for the carrying out
sancionen su práctica. La delincuencia ha ido mu- illicit activity from any place in the world.
tando de sus formas tradicionales, modificando los It is for this reason that, through an agreement
medios y manteniendo el objetivo y, aprovechando in Budapest or the convention on Cyber delinquency
las lagunas judiciales de los países con pocas regla- in 20012, the only international treaty on computer
mentaciones permitiéndoles llevarlos a cabo desde delinquency and the obtaining of digital evidence was
cualquier parte del mundo. signed. Here, close upon 60 countries proposed the
Es por ello que, mediante el convenio de Buda- homogenisation of Cyber delinquency, providing
pest o convención sobre la ciberdelincuencia en them with legal tools to persecute those who commit
20012 único tratado internacional sobre delitos crimes on computer systems or through their use.
informáticos y obtención de evidencia digital, en In November, 2017, Argentina signed the adhesion
el cual cerca de 60 países propusieron homogenei- treaty and included herself definitely in the group
zar la Ciberdelincuencia, otorgándoles a los países concerned, thus implying the modification of norms
herramientas legales para perseguir a aquellos que of procedure considering that the current system does
cometan delitos a sistemas informáticos o median- not contemplate the extraction of digital evidence
te el uso de los mismos. En noviembre de 2017, Ar- among other points that exceed or differ from those
gentina firma el tratado de adhesión, sumándose presented.
definitivamente, lo cual implicará la modificación So, with the legal framework working towards

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Cabrera et al, Importancia del profesional informático ... Interfluvius 10(1):12-22, 2019 Paraná

de normas procesales dado que el sistema actual, allowing the judicial consideration of computer
no contempla la extracción de evidencia digital, related crimes and the extraction of digital evidence,
entre otros puntos que excedería el presente. all that remains to be done is focus on the techniques
Ahora bien, con el marco legal en carrera per- and methods of extraction. It is for this reason
mitiendo encuadrar jurídicamente delitos informá- that Computer Forensics is now of the utmost
ticos y extracción de evidencia digital, solo resta importance , for it is considered a branch of forensic
enfocarse en las técnicas y métodos de extracción. sciences and capable of acquiring, preserving, analysing
Es por ello que ha tomado tanta trascendencia ac- and presenting any trait, print or digital evidence that
tualmente en nuestra región la Informática Foren- shows that a criminal act has taken place.
se, considerada una rama de las ciencias forenses This implies that a professional must be involved in
capaz de adquirir, preservar, analizar y presentar the task and the procedure and it is for this reason that
cualquier rastro, huella o evidencia digital que deja the principal focus of this text would be the forensic
un hecho delictivo de haber acontecido. expert in addition to the state of this particular field in
Esto implica que debe existir un profesional in- the province of Entre RíosDigital evidence as a focus
volucrado en la tarea y en los procesos, es por esto of study in the previously mentioned discipline can be
que el enfoque principal de este texto será el peri- defined as “a type of physical evidence built upon magnetic
to forense. Además del estado de los mismos en la fields and electronic pulses which, for their characteristics, ought to
provincia de Entre Ríos. be accumulated and analysed with special tools and technique” 2.
La evidencia digital como objeto de estudio de For example:
la disciplina anteriormente mencionada y se puede - An archive stored in a DVD, CD, Pen drive, hard
definir como “un tipo de evidencia física construida disk, memory, etc.
de campos magnéticos y pulsos electrónicos, que por - Log of Access to web pages.
sus características deben ser recolectados y analiza- - Image Metadata
dos con herramientas y técnicas especiales”. The principal function of forensic investigation via
A modo de ejemplo: computers is the correct recuperation of all the relevant
- Un archivo almacenado en un DVD, CD, Pen- information for the case that needs to be clarified, and
drive, disco rígido, memoria, etc. the determining factor would be the extraction of this
- Log de acceso a páginas web. information so that the legal investigator can link up
- Metadatos de imágenes. the scene of the crime, the victim and the offender.
La principal función del informático forense At the moment of meting out justice, the reliability
será la correcta recuperación de toda información of the proof strengthens its evidential value before
relevante para el caso que se pretende esclarecer, the authorities charged with carrying out the legal
siendo determinante la extracción de las mismas, procedure. This reliability is based on basic questions:
con el fin de que el investigador judicial pueda vin- how was this information obtained? Who obtained it?
cular escena, víctima y victimario. How was the information conserved? Who carried
Al momento de impartir justicia, la confiabili- out the search for this information? All of this leads
dad de la prueba fortalece su valor probatorio an- to knowledge and analysis of the cause, conservation
tes las autoridades encargadas de llevar adelante of proofs and information that is inherent to what
el proceso judicial. Dicha confiabilidad, se basa en is investigated in the storing of data that impedes
tres preguntas básicas, ¿cómo la obtuvo? ¿cómo adulteration and, principally, the assurance that
se conservó? ¿quién lo realizó?, lo cual conlleva the extraction of these details be carried out by
un proceso de conocimiento y análisis de la causa, professionals capable of advancing the process without
conservación de pruebas e información inherente “sullying” the scene.
a lo investigado en almacenes de datos que impi- In the province of Entre Ríos, the experts in these
dan su adulteración y, principalmente, que la ex- functions must be enrolled in colleges so that a level
tracción de los mismo este dado por profesionales of previous knowledge in the field is assured. Thus,
capaces de llevar adelante el proceso sin “ensuciar” a computer expert must have a diploma in this field
la escena. which would qualify her/him to carry out the task.
En la provincia de Entre Ríos, los peritos de par- However, the profession is new to the province and
tes deben inscribirse a través de los colegios, con el there are no courses, nor education that is exclusive
fin de asegurar un nivel de conocimiento previo en to this type of activity. And so the professionals who

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Cabrera et al, Importancia del profesional informático ... Interfluvius 10(1):12-22, 2019 Paraná

la materia. Por lo tanto, un perito informático, debe are currently in the position of experts have been
tener título habilitante para poder ejercer. No obs- instructed through courses, videos, manuals, seminars
tante, la profesión del Perito informático en la pro- and talks that have brought them up to date with the
vincia es nueva y no existen cursos, ni educación relevant techniques and tools.
exclusiva para este tipo de actividad, por lo cual los The police are guided by another protocol to carry
profesionales que actualmente actúan como peri- out the process of collecting evidence, in fact they are
tos, se han ido instruyendo a través de cursos, vi- guided by the “Unified protocol of the public ministries of the
deos, manuales, seminarios y charlas que permiten Republic of Argentina” 3, which is a guide for the search
mantener actualizado de técnicas y herramientas. and conservation of facts. It must be clarified that
La policía se basa en otros protocolos para rea- the actions of the Police are supportive of the legal
lizar el proceso de recolección de evidencia, de he- process in the penal process and depends on the judge
cho, se rigen por el “Protocolo Unificado de los minis- who is in charge of the case.
terios públicos de la República Argentina”, el cual es WORK OF THE EXPERTS OR AIDS IN
una guía para el levantamiento y conservación de JUSTICE
la evidencia. Se aclara, que el accionar de la Policía Definitions and concepts considered for the
va en apoyo a la justicia en el proceso penal, de- development of this article.
pende del fiscal en donde recae la causa. The participation of a computer expert within a
legal case can have diverse roles.
ACTUACIÓN DE LOS PERITOS O AUXILIARES Work of the Expert. The judges are not trained
DE LA JUSTICIA in all disciplines and thus, they require the aid of
Definiciones y conceptos a tener en considera- specialists when required. A designation is made
ción para el desarrollo de este artículo. through the drawing of lots of the enrolled specialists
La participación de un informático dentro de to participate in the tasks corresponding with the
una causa judicial puede tener diversos roles. case. It is the specialist who will provide information
Perito de Oficio. Los jueces no conocen sobre or opinions, who can be accountable to the judge.
todas las disciplinas y es por ello que suelen soli- This means that the official expert is unbiased and
citar a los especialistas su participación cuando la uninvolved with all of the involved parties and is only
requieren. Se realiza una designación por sorteo de concerned with presenting her/his findings with clarity
los especialistas inscriptos para actuar en el fuero to the judge (Fig. 1).
que corresponda la causa. Es el especialista quien Party expert or Technical Consultant The party
brindará información u opiniones, que podrán ser expert and the technical consultant are on the side of
tenidas en cuenta por un juez. Esto quiere decir one of the parties of the case. And so all of her/his
que el perito de oficio no vela por ninguna de las findings are used to affirm or deny what is expressed in
partes involucradas, sino para llevarle claridad al the official expert’s report.
juez sobre su experiencia (Fig. 1). In the year 2018 ORALITY4 was established in
Perito de parte o Consulto técnico. Tanto el Civil and Commercial cases in the first instance. Then
perito de parte como el consultor técnico abogan it was applied as a work mechanism in all labour cases
en favor de unas de las partes del litigio. En donde, of Entre Ríos beginning in February of 2019.
poniendo en juego sus conocimientos podrán afir- Due to the audiences seen in the cause where the
mar o rebatir lo expresado en el informe pericial del experts provide declarations and answered questions
perito de oficio. regarding points of expertise, the Alberdi Institute of
A partir del año 2018 se instauró la ORALIDAD the Supreme Court of Justice provided capacitation
en los Procesos Civiles y Comerciales en primer lu- directed at Criminal Investigation Officers.
gar. Luego se aplicó como mecánica de trabajo en “This modality provides us many benefits and transparency
todo el fuero laboral de Entre Ríos a partir del 1 de in the legal process giving the possibility of a reciprocal control,
febrero de 2019. because each of the parties has access to the same document or
Justamente debido al cambio en las audiencias certificate of authenticity. It is a facilitating tool for citizens
de vista de causa donde los peritos van a dar aclara- because it is language based and will be used as a rule while
ciones y responder preguntas respecto a los puntos the writing from here on would be the exception. Thus a more
de pericia es que en el año 2018 el Instituto Alberdi inclusive system which aims at improving the Justice system
del Superior Tribunal de Justicia dio varias capacita- and achieving judicially valid cases that are brief and efficient.

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Figure 1. Process of the computer experts


Figura 1. Proceso del perito de oficio

ciones dirigidas a los Auxiliares de la Justicia. “, explained Dr Susana Medina who is Judge of the
“Esta modalidad nos permite más beneficios y Supreme Tribunal and Vice President of the High
transparencia en el proceso como la posibilidad de Court of Justice.
un control recíproco, porque cada una de las partes This oral process seeks to provide greater speed and
accede a un mismo documento probatorio. Es una transparency with the format that permits videotaping,
herramienta facilitadora para los ciudadanos porque a better quality for proofs and the progressive
está basada en el lenguaje, que será la regla, mien- elimination of the paper format.
tras que la escritura será en adelante la excepción. Así PROTOCOL FOR THE DECLARATION OF
alcanzamos un sistema más inclusivo, que apunta a WITNESSES AND EXPERTS WHO ARE AT A
mejorar el servicio de Justicia y a lograr procesos judi- DISTANCE
cialmente válidos, breves y eficaces”, explicó la jueza Work is in progress to implement this new protocol
del máximo tribunal, Dra. Susana Medina, Vicepre- for experts and witnesses who are beyond a radius of
sidente del Superior Tribunal de Justicia. 70 km from the seat of the legal tribunal so that they
Este proceso oral busca dar más celeridad y can make their declaration with a video call before the
transparencia, con el formato de la videograbación, judge dealing with the case. Furthermore, it generates
una mejor calidad de la prueba y la eliminación an incentive for the experts who are residents of
progresiva del formato papel. another locality than that of the legal case in question
(even though the distance be less than that referred
PROTOCOLO PARA LA DECLARACIÓN DE to) accept their duties and fulfil their commitments,
TESTIGOS Y PERITOS A DISTANCIA helping them so that, in case explanations are required,
Se está trabajando para implementar este nue- they can be provided through the system that is thus
vo protocolo, los peritos y testigos que se encuen- regulated.
tren fuera del radio de 70 km. del asiento del tribu-
nal del juicio puedan declarar a distancia mediante CONTRIBUTIONS OF COPROCIER
videollamada, ante el juez de la causa. Asimismo, (COLEGIO DE PROFESIONALES DE
procura generar un incentivo para que peritos que CS. INFORMÁTICAS DE ENTRE RÍOS)
tienen su domicilio en otra localidad a la del juzga- (COLLEGE OF PROFESSIONALS IN
do de la causa (aunque la distancia sea menor a la COMPUTER SCIENCES OF ENTRE RÍOS)
referida) acepten los cargos y cumplan su cometi- The ‘Colegio de Profesionales de Ciencias
do, facilitándoles que, en caso de requerirse expli- Informáticas de Entre Ríos’ – COPROCIER5 is
caciones, puedan brindarles mediante el sistema one of the institutions that represent professionals
aquí regulado. in computer sciences of the province through
matriculation. The entity is a nucleus of professionals
APORTES DEL COPROCIER (COLEGIO DE who possess diplomas in Computer Sciences obtained

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PROFESIONALES DE CS. INFORMÁTICAS DE from national universities.


ENTRE RÍOS) The College was created by way of the Provincial Law
El Colegio de Profesionales de Ciencias Infor- Nº 94986, sanctioned in the year 2003, which regulates
máticas de Entre Ríos – COPROCIER es una de las the conditions for the exercising of the profession
instituciones que representa a los profesionales de in Entre Ríos, and assumes the representation and
la informática de la provincia, a través de su matri- protection of the matriculated as its principal function
culación. La entidad nuclea a los profesionales que among its diverse areas of involvement, and promotes
poseen título de grado en carreras de Ciencias In- the legal functioning of the profession.
formáticas que se dictan en las universidades de With the sanction of the law and the creation of
nuestro país. the College the regulation and institutionalisation of
El Colegio fue creado por Ley Provincial Nº the profession of Computer Analyst, thus responding
94986, sancionada en el año 2003, que regula las to the demands of the field which is marked by the
condiciones para el ejercicio de la profesión en demand for work that is increasingly specialised, and
Entre Ríos, y asume como función principal la de that has reached a high academic level in the related
representar y proteger los derechos de los matri- university study programmes.
culados en sus diversos ámbitos de actuación, pro- Since its creation, COPROCIER has grown
moviendo el ejercicio legal de la profesión. remarkably with regard to the matriculated, insertion
Con la sanción de la ley y la creación del Colegio in the field and institutional development. Currently
se logró regular e institucionalizar el ejercicio de la our entity has over 500 matriculated members from all
profesión informática, dando respuesta a las exi- over the province and sustains cooperation links with
gencias del medio, marcado por la demanda de un different institutions within the field.
trabajo cada vez más especializado, así como por el The objectives7 of the College, among its other
alto nivel académico alcanzado en las carreras uni- functions are thus defined:
versitarias de la disciplina. -Stimulate professionalism and protect the
Desde su creación, COPROCIER ha tenido un profession while promoting good professional
notorio crecimiento en cuanto a cantidad de matri- practices
culados, inserción en el medio y desarrollo institu- -Motivate and capacitate its members through
cional. Actualmente, nuestra entidad nuclea a más formation proposals within the institution and through
de 500 matriculados en toda la provincia y sostiene agreements with institutions of the academic field
vínculos de cooperación con distintas instituciones -Assessment of State organisations, Councils and
del medio. Business Chambers, intermediate entities and with
Entre otras funciones, el Colegio define como similarities in areas of incumbency.
sus objetivos: -Oversee professional ethics by following the
- Estimular el profesionalismo y prestigio de la Ethics Code.
profesión, así como promover las buenas prácticas -Fight illegal exercising of the profession.
profesionales. -Motivate cooperation and solidarity between
- Incentivar la capacitación de los colegiados, colleagues.
a través de propuestas de formación propias o en -Promote the common desire to contribute to
convenio con instituciones del ámbito académico. the improvement of the quality of life of society as a
- Asesorar a los organismos del Estado, Conse- whole among its members.
jos o Cámaras Empresarias, entidades intermedias This College together with the College of
e instituciones afines en áreas de su incumbencia. Specialised Engineers of Entre Ríos (‘Colegio de
- Velar por la ética profesional a través del cum- Ingenieros Especialistas de Entre Ríos’) (CIEER)
plimiento del Código de Ética. are the only entities in the province that can control
- Combatir el ejercicio ilegal de la profesión. capacitation and recognition of the professional
- Incentivar relaciones solidarias y de coopera- matriculations in Computer Sciences, supporting the
ción entre colegas. professional who carries out her/his duties as well as
- Promover entre sus matriculados el compro- the user or entrepreneur who contracts her/him.
miso de contribuir a mejorar la calidad de vida de la COPROCIER is a democratic and federal
sociedad en su conjunto. institution. This is so due to it being an intermediary
- Este Colegio junto al Colegio de Ingenieros entity of the province that looks to participate,
intervene and collaborate in the development of our

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Cabrera et al, Importancia del profesional informático ... Interfluvius 10(1):12-22, 2019 Paraná

Especialistas de Entre Ríos (CIEER) son las únicas region. With this objective, the establishment of links
entidades en la provincia que pueden controlar la that are both warm and cooperative in the academic
habilitación y vigencia de las matrículas profesio- field, political forces and economic and productive
nales en Ciencias Informáticas, respaldando tanto sectors is ensured.
al profesional que realiza su tarea, como al usuario In the province, professionals with the title of
o empresa que lo contrata. Engineer in Computer Systems can opt to be
El COPROCIER es una institución democrática y matriculated in the College of Specialised Engineers
federal. En tanto entidad intermedia de la provin- of (‘Colegio de Ingenieros Especialistas de Entre
cia, busca participar, intervenir y colaborar en el Ríos’) (CIEER). CIEER was created in the year 1994
desarrollo de nuestra región. Con ese objetivo, se by way of the Law 8.8158 that indicates that Specialised
propone establecer vínculos de calidad y coopera- Engineers (and this includes Engineers in Computer
ción con instituciones del ámbito académico, fuer- Systems) must be matriculated in the institution.
zas vivas y sectores económicos y productivos. Article 18 of Law 8.815 mentions the objectives
En la provincia los profesionales con el título de and attributes of the College which are, among others:
Ingeniero en Sistemas de Información pueden op- -The administration of the matriculation of all the
tar y matricularse en el Colegio de Ingenieros Espe- engineers who work within this profession in Entre
cialistas de Entre Ríos (CIEER). Se creó el CIEER (Co- Ríos, who by dint of this law must be members of this
legio de Ingenieros Especialistas de Entre Ríos) en college.
el año 1994 mediante la Ley 8.815 que indica que -Carry out controls of professional activity in the
los Ingenieros Especialistas (donde están incluidos field.
los Ingenieros en Sistemas) se deben matricular en -Oversee the fulfilling of this law, regulatory
la institución. dispositions, statutes and complimentary norms.
El artículo 18 de la Ley 8.815 que menciona los -Exercise a policing faculty over the matriculated
objetivos y atribuciones. El Colegio tiene, entre and non-matriculated in relation to professional
otros, los siguientes objetivos y atribuciones: activity and over the individuals who work in related
- El gobierno de la matrícula de todos los Inge- fields of whom professional knowledge and the title of
nieros que ejerzan la profesión en la provincia de Engineer is demanded.
Entre Ríos, que por expresa disposición de esta ley -Protect the prestige, independence and respect
deben colegiarse. within the profession and defend the improvement of
- Realizar el control de la actividad profesional. work conditions and retributions.
- Velar por el cumplimiento de esta ley, disposi- -Assess and inform the college members in matters
ciones reglamentarias, Estatuto y normas comple- related to their protection and rights that correspond
mentarias. and relate the profession to the judiciary, whether
- Ejercer la facultad de policía sobre los matricu- legally or economically.
lados o no matriculados en relación al ejercicio pro- -Enrolment for the designation of Criminal
fesional o sobre los individuos que realicen tareas Investigation Officers
que exigen el conocimiento profesional y el título In Art. 11 of the regulation of the Expert Body of
de Ingeniero. the Supreme Court of Justice of Entre Ríos, enrolment
- Velar por el prestigio, independencia y respeto is mentioned9 .The enrolment of experts and other
del trabajo profesional, así como defender y mejo- legal aids is carried out in November of each year for
rar sus condiciones y retribuciones. the following entities:
- Asesorar e informar a los colegiados en la de- COPROCIER and CIEER (‘Colegio de Ingenieros
fensa de sus intereses y derechos ante quien co- Especialistas de Entre Ríos’), College of Specialised
rresponda y en relación a toda la problemática de Engineers of Entre Ríos10 , in the case of Computer
carácter jurídico, legal o económico contable. specialists.
- Inscripción para designación de Peritos auxi- The required qualifications are mentioned in
liares de Justicia Annexe II:
En su Art. 11 del Reglamento del Cuerpo Peri- -Analysis of Information Systems
cial del Superior Tribunal de Justicia de Entre Ríos -Systems Engineer
habla de la inscripción.9 La inscripción de peritos -Systems analysis Engineer
y demás auxiliares de justicia se recibirá durante el -Bachelor of Computer Science

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mes de noviembre de cada año por las siguientes -Bachelor of Information Systems
entidades: COPROCIER y Colegio de Ingenieros Es- -Bachelor of Information Systems
pecialistas de Entre Ríos (CIEER) en el caso de Infor- -Computer analyst
mática. Each year, generally in October/November the
Los títulos requeridos se mencionan en el ANE- enrolment of matriculated professionals such as legal
XO II: experts is announced. In order to facilitate this task,
- Análisis de Sistemas de Información an application form is made available along with the
- Ing. en sistemas GENERAL RULES GUIDE for enrolment and
- Ing. en análisis de sistemas a description of the function of Legal Aid. Once
- Lic. en informática completed, this form has to be handed in to the
- Lic. en sistemas Secretary of the College.
- Lic. en sistemas de información Pertinent part of the general agreement nº 35/18
- Analista de computación of regulation project 13-11-18 of the expert body of
Todos los años, generalmente en el mes de the High Court of Justice of Entre Ríos.
octubre/noviembre se solicita convocar la inscrip- In this document, Art. 4 mentions that: Experts
ción de profesionales matriculados como peritos and other legal aids must analyse and provide dictums
auxiliares de justicia. A tal fin y con el objetivo de on technical and/or scientific aspects relative to the aim
agilizar dicho trámite se pone a disposición un for- of the procedure that escape the demands made on the
mulario y el REGLAMENTO GENERAL de inscripción Prosecutor/Judge, bearing in mind the diversity of the
y función como perito auxiliar de justicia. Una vez claims deduced before the judges. These professionals,
completado deberá ser remitido a la secretaría del while carrying out their duties through the relevant
colegio. dictum must not unjustifiably paralyse or delay the oral
Parte pertinente del acuerdo general nº 35/18 process or sessions when an audience is required.
del 13-11-18. proyecto de reglamento del cuerpo Regarding the Legal Aids or the Registered Legal
pericial del Superior Tribunal de Justicia de Entre Experts; vacancies for these posts currently exist in
Ríos. Concordia and Gualeguay. (Fig. 2)
En su Art. 4 dice: Los Peritos y demás auxiliares Due to the need to motivate and provide incentives
de justicia deberán analizar y dictaminar sobre as- for the matriculated in departments where there are
pectos técnicos y/o científicos relativos al objeto none, the College proposes workshops and training
del proceso que escapan a los conocimientos exi- sessions.
gibles al Juzgador teniendo en cuenta la diversidad The CIEER has 4 experts in the speciality that is
de las pretensiones que se deducen ante los jueces. Information Systems registered in Paraná (4), and, in
Dichos profesionales en el ejercicio de su función Diamante (1) and Victoria (1).
deben a través del dictamen pertinente la no pa- According to the latest statistics we could say that
ralización o demora injustificada del proceso oral y there is a lack of information and/or capacitation of
por audiencias. Diploma holders in Systems so that they can work as
Respecto a los Auxiliares de la Justicia o Peritos Legal Aids upon graduation
Judiciales registrados; actualmente se está inscri- With respect to the academy, the Faculty of Science
biendo para Concordia y Gualeguay. (Fig. 2) and Technology, (Facultad de Ciencia y Tecnología)
Debido a la necesidad de motivar e incentivar depends upon the Universidad Autónoma de Entre
a aquellos matriculados en los departamentos que Ríos and offers a subject called “Internal Auditing
no hay auxiliares registrados, el Colegio propone Systems” which is compulsory within the programme
talleres y capacitaciones. that is “Degree in Information Systems”. Here there is
El CIEER cuenta con 4 peritos en la especialidad an introductory course on computer related evidence
en Sistemas de Información registrados en Paraná and recently, in the fourth year of the programme there
(4), Diamante (1) y Victoria (1). is a new subject entitled “Information Technology
De acuerdo con los números vigentes podemos Security in applied information” every quarter, which
decir que falta formación y/o capacitación a los instructs on tools and the principal concepts in
graduados en Sistemas para que una vez recibidos computer-related security within organisations.
puedan trabajar como Auxiliares de la Justicia. Furthermore, another optional subject has been
Respecto a esto la academia, en este caso, la Fa- proposed in the fifth year which is entitled “Computer

19
Scientia
Cabrera et al, Importancia del profesional informático ... Interfluvius 10(1):12-22, 2019 Paraná

cultad de Ciencia y Tecnología dependiente de la


Universidad Autónoma de Entre Ríos ofrece a sus
estudiantes dentro de la carrera “Licenciatura en
sistemas de información” una materia obligatoria
“Auditoria de Sistemas” donde se dicta contenido
introductorio a la evidencia informática y reciente-
mente se ha incorporado al plan de estudios una
nueva materia optativa de 4° año denominada “Se-
guridad de la Información aplicada” cuatrimestral
la cual brindará herramientas y los principales con-
ceptos de la seguridad de la información. También
los aspectos más relevantes en cuanto a la incor-
poración de la seguridad informática en las orga-
nizaciones.
Además, se ha impulsado otra materia más
como optativa de 5° año la cual se llama “Pericias
informáticas” donde se pretende a partir de los
contenidos y objetivos estipulados que los estu-
diantes puedan conocer el rol del perito, métodos
y técnicas para realizar los procedimientos legales
asociados al momento de optar como graduados
matriculados a realizar pericias en la justicia provin- Figure 2. Computer professionals distribution in Entre Ríos
cial y/o federal. province. Enrolled professional (M) and Computer experts (P)
Por último, a modo de ejemplo usaremos una Figura 2. Es el mapa donde se puede ver NRO de MATRICULADOS
(M) y NRO de PERITOS (P).
serie simples preguntas que les hicimos a un perito
matriculado en el COPROCIER, donde veremos el Investigation”. The content and objectives of this
punto de vista del matriculado. course is that the students understand and know of
Lic. Monjes Pablo Marcelo MP 527 the expert’s role, methods and techniques in legal
¿Cuáles son los procedimientos que, según su ex- procedure and bear this in mind when opting for
periencia, se debe cumplir en una pericia informática? work as experts in the provincial and/or federal justice
Procedimiento utilizando como guía el proto- system once they graduate.
colo PURI: Lastly, as an example we will use a series of simple
1- Relevamiento questions that were answered by a qualified expert
-Buscar, reconocer y documentar potencial evi- from COPROCIER, where we will see the point of
dencia documental. view of the matriculated expert.
Identificación de la documental. (Peritos de par- Bachelor Monjes Pablo Marcelo MP 527
te). What is the procedure that, according to your experience,
Ejemplo: Pen Drive, equipo, correos, etc. must be carried out in an information-related investigation?
2- Recolección y Adquisición. Procedure that uses PURI11 as a guide:
Tener presente principios básicos de lo que sig- 1- Research
nifica una cadena de custodia Search for, recognise and document potential
Recolección y clasificación de evidencias según documental evidence.
los elementos sometidos en los puntos de peritaje Identification of the documentation. (Party expert).
solicitados en los autos. Example: Pendrive, computer, emails etc.,
La fase de adquisición es una tarea especiali- 2- Collection and acquisition.
zada con conocimientos, habilidades y aptitudes Bear in mind the basic principles of the significance
que permitan un manejo responsable de la docu- of chain of custody.
mental, pudiendo distinguir tres grandes grupos Collection and classification of proofs according to
PC, Móviles y las nubes. Ejemplo. en PC y Móviles, submitted elements in the points of expertise solicited
Bloqueo del medio de almacenamiento, Captura in the vehicles.
de memoria volátil y de memoria extraíble. Captura The acquisition phase is a specialised task with

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Scientia
Cabrera et al, Importancia del profesional informático ... Interfluvius 10(1):12-22, 2019 Paraná

y resguardo de la imagen binaria y por último vali- knowledge, abilities and aptitudes that allow the
dación del original vs copia binaria. responsible management of the documented, and
3- Preparación y Análisis. three large groups can be distinguished, PC, Mobiles
Preparación del análisis, restauración de la ima- and cloud computing. For example in PC´s and
gen y validación. Mobiles, the means of storage are blocked, memory
Selección de la herramienta forense más apro- capture is volatile and memory is extractable. Also
piada de acuerdo a los sistemas operativos, pro- to be considered are the capture and storage of the
gramas, tipos de archivos y situaciones particulares binary image and, lastly, the validation of the original
presentes. vs. binary copy.
Análisis e interpretación de los resultados obte- 3- Preparation and Analysis
nidos. Preparation of the analysis, restoration of the
4- Presentación. image and validation.
Armado del informe pericial con todos los pa- Selection of the most appropriate forensic tools
sos anteriormente documentados y en caso de ser according to the operative systems, programmes, types
necesario una presentación oral explicativa. of archives and particular situations that are presented
Proyecto PAIF-PURI (Protocolo de Actuación en Analysis and interpretation of obtained results
Informática Forense a partir del Proceso Unificado 4- Presentation
de Recuperación de Información o Proceso Unifica- Armed with the expert’s report with all of the
do de Recuperación de Información) es el protoco- previous procedure documented and in case of need,
lo oportunamente desarrollado y establecido por an explicative oral presentation is made
el Grupo de Investigación en Informática Forense y PAIF-PURI (Acting protocol in forensic
Sistemas Operativos de la Facultad de Ingeniería de computerisation based on the Unified Process of
la Universidad FASTA. Recuperation of Information or Unified Process of
¿Cuándo debe intervenir el perito informático? Recuperation of Information) (Protocolo de Actuación
Un perito informático “colegiado” es un auxiliar en Informática Forense a partir del Proceso Unificado
de la Justicia que está capacitado para de Recuperación de Información o Proceso Unificado
intervenir en todo tipo de procedimientos judi- de Recuperación de Información) This Protocol: has
ciales, en los ámbitos penal, laboral, civil, been developed and established in good time by the
familiar, etc. El perito informático es un profe- Research Group in Forensic Computerisation and
sional transversal a todas las ramas del Derecho. Operative Systems of the Faculty of Engineering
Pudiendo intervenir como perito Judicial, es de- of the FASTA University (Grupo de Investigación
cir designado por el Poder Judicial por medio de la en Informática Forense y Sistemas Operativos de la
mesa única informatizada (MUI) o pudiendo ser lla- Facultad de Ingeniería de la Universidad FASTA).
mado por los letrados de las partes actuantes como When must a computer expert intervene?
perito de parte. A computer expert belonging to the ‘college’
¿Dónde debe intervenir el perito informático? is an aid to Justice and is trained to intervene in any
La participación del perito informático es im- type of legal process, in penal, occupational, civil,
prescindible siempre que se aporte cualquier do- family-related disputes etc. The computer expert is
cumental informático que se quiera utilizar como a transversal professional in all branches of the Law.
evidencia en un procedimiento judicial (conversa- She/he can intervene as a legal expert, which adds up
ciones de WhatsApp, Facebook o Twitter, mensajes to being designated by the Legislative Authority by
SMS, correos electrónicos, etc.). means of a unique computerised table (MUI) or called
upon by those qualified to do so and representing the
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS parties concerned as a consultant expert
El 11% de los argentinos mira su celular más de 200 veces al Where must a computer expert intervene?
día, incluso en la madrugada. La Nación el 18 de enero de The participation of the computer expert is of
2018. https://www.lanacion.com.ar/tecnologia/el-11-de- crucial importance when any documental information
los-argentinos-mira-su-celular-mas-de-200-veces-al-dia- is presented for use as evidence in a legal case
incluso-en-la-madrugada-nid2101717 Vista 18 enero de
(conversations on WhatsApp, Facebook or Twitter,
2018.
El rastro digital del delito - Facultad de Ingeniería - Univer-
messages via SMS, emails etc.,).
sidad FASTA - Versión online del convenio de Budapest

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Scientia
Cabrera et al, Importancia del profesional informático ... Interfluvius 10(1):12-22, 2019 Paraná

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Buenos Aires: Ediciones SAIJ, 2017. ISBN 978-987-46508-
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Colegio de Profesionales de Ciencias Informáticas de En-
tre Ríos - http://coprocier.org.ar/web/ - Visto 20 de marzo
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¿Quiénes Somos? - http://coprocier.org.ar/web/?page_
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Nuevo reglamento del cuerpo pericial aprobado por el Su-
perior Tribunal de Justicia, mediante el acuerdo General
N.º 35/18 del 13 de noviembre de 2018 - http://www.
jusentrerios.gov.ar/21/03/2019/nuevo-reglamento-del-
cuerpo-pericial/ - Visto 28 de Marzo de 2019
Colegio de Ingenieros Especialistas de Entre Ríos - http://
www.cieer.org.ar/release/index.php – Vista 10 de Marzo
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ceso Penal. zhttp://redi.ufasta.edu.ar:8080/xmlui/hand-
le/123456789/1592 - Visto 10 de junio de 2017

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Scientia
Interfluvius 10 (1): 23-39, 2019 - Paraná ISSN 1853-4422 (printed) ISSN 1853-4430 (on line)

ELECTRON MICROSCOPY CONTRIBUTIONS TO FORENSIC


INVESTIGATIONS.
A CASE STUDY.

APORTES DE LA MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA A LAS


INVESTIGACIONES FORENSES. PRESENTACIÓN DE UN CASO
TESTIGO.
José Félix Vilá1 & Guillermina A. Fagúndez2

1 Laboratorio de Microscopía Electrónica “Dr. Domingo S. Liotta” – CICYTTP (CONICET/Prov. ER/UADER)


2 Laboratorio de Actuopalinología - CICYTTP
Materi 149, (E3105BWA) Diamante, Entre Ríos, República Argentina

jfvila@cicyttp.org.ar; guillermina_fagundez@yahoo.com.ar

ABSTRACT. Electron microscopy can make important contributions for the clarification
of cases in forensic practice. In this article a brief introduction to some general aspects of
the discipline is made. The use of microscopy as a work tool for the forensic investigator
is discussed and the most important characteristics of the scanning electron microscope
are mentioned, making a comparison with the optical microscope. Some of the possible
applications of this technique are pointed out, highlighting the possibilities it offers. Finally,
the case of an oil pipeline that underwent an act of vandalism is presented, showing how
the use of an electron microscope helped to obtain enough information to clarify the fact.

KEY WORDS. Electron Microscope. SEM. TEM. X-Ray Microanalysis.

RESUMEN. La microscopía electrónica puede realizar importantes aportes para el es-


clarecimiento de casos en la práctica forense. En este artículo se hace una breve intro-
ducción a algunos aspectos generales de la disciplina. Se comenta el uso de la micros-
copía como herramienta de trabajo para el investigador forense y se mencionan las
características más importantes del microscopio electrónico de barrido, haciendo una
comparación con el microscopio óptico. Se señalan algunas de las posibles aplicacio-
nes de esta técnica, destacando las posibilidades que brinda. Finalmente se presenta
el caso de una tubería conductora de petróleo que sufrió un acto de vandalismo, don-
de el uso de un microscopio electrónico permitió obtener información suficiente para
aclarar el hecho.

PALABRAS CLAVES. Microscopios electrónicos. MEB. MET. Microanálisis de Rayos X.

Recibido: 10 de marzo de 2019 Datos de Contacto


Aceptado: 29 de mayo de 2019 Responsable del Laboratorio: Ing. José Félix Vilá
microscopia@cicyttp.org.ar - jfvila@cicyttp.org.ar
http://www.cicyttp.santafe-conicet.gov.ar/microscopia/

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Scientia
Vilá & Fagúndez, Aportes de la Microscopía Electrónica… Interfluvius 10(1):23-39, 2019 Paraná

INTRODUCCIÓN INTRODUCTION
“En toda investigación criminal el tiempo que “In all criminal investigation, the passing of time is the
pasa es la verdad que huye”. fleeing of truth”.
Edmond Locard, 1935. Edmond Locard, 1935.

La evidencia científica Scientific evidence


Según el Diccionario de la Real Academia Espa- According to the Royal Spanish Academy
ñola, evidencia es “una certeza clara y manifiesta de Dictionary, evidence is “a clear and manifest certainty
la que no se puede dudar”, y desde el punto de vista what cannot be doubted”, and from a moral standpoint
moral es la “certidumbre de algo, de modo que el it is the “certitude of something (having occurred), and
sentir o juzgar lo contrario sea tenido por temeri- the sensing or judging of the contrary being taken for
dad” (RAE, 2019). fear” (RAE, 2019).
En el campo de la ciencia se ha puesto un espe- In the field of science, a special emphasis has been
cial énfasis en el trabajo basado en evidencias, lo placed on work based on evidence, which assures
cual asegura mayor solidez en las consideraciones greater solidity in the considerations and higher quality
y mayor calidad en la labor del científico. En algu- in the work of the scientist. In some disciplines,
nas disciplinas, como la medicina basada en la evi- such as evidence-based medicine, care is taken in the
dencia, se ha puesto cuidado en la clasificación de classification of the same at different levels and this
la misma en diferentes niveles, lo cual genera a su in turn generates different grades of recommendations
vez diferentes grados de recomendaciones (Cerdá, (Cerdá, 2009).
2009). In the field of justice it is desirable that the proof
En el ámbito de la justicia es deseable que las available for the parties can count on the highest
pruebas aportadas por las partes cuenten con el amount of evidence in such a way that the magistrates
mayor grado de evidencia, de modo que los ma- have the highest certainty or certitude. This means that
gistrados tengan la máxima certeza o certidumbre. the facts must be so clear and manifest that the resulting
Es decir, que los hechos sean tan claros y mani- judgement leaves no place for doubt. This places us
fiestos que el juicio resultante sea indudable. Esto on the path of “demonstration” or the execution of a
nos pone en la senda de la “demostración”, o sea piece of investigation that, by the requirement of the
la ejecución de un trabajo investigativo que, a re- lawyers and through the work of experts sheds light on
querimiento de los letrados, y a través de prácticas the facts in the most evident manner possible. (Cerdá,
periciales, arroje luz sobre los hechos de la manera 2009).
más evidente posible (Cerdá, 2009).
Forensic expertise or the work of forensic
La pericia y el trabajo de los peritos experts
“La pericia o experticia (como también se la suele lla- “The work of forensic experts or forensic expertise (as it
mar en términos jurídicos), es la elaboración de un dic- is also called in judicial terms), is the elaboration of a report
tamen por parte de expertos en temas relacionados con on the part of experts in themes related to facts that imply a
hechos que implican una litis, mediante una explicación litis through an explanation, in terms comprehensible by laymen
en términos entendibles por legos en esa/s incumbencias, (legos) in that/s incumbencies, that allows the clarification
que permitan clarificar y objetivar los mismos, para que el and objectification of the same, so that the judge resolve (or
juzgador resuelva (sentencie) con la mayor equidad sentence) with the utmost equity towards all the parties (sentence
posible para las partes (sentencia sustancialmente substantially just based on true facts)” (Verbic, 2008).
justa basada en hechos verdaderos)” (Verbic, 2008). The work of forensic experts progresses within
Los peritajes se impulsan dentro del proceso de an investigation process that is opened by a judge as
investigación en razón de que tanto el juez como well as other professionals of the law who intervene
los demás profesionales del derecho intervinientes without knowledge of other disciplines that, to them,
no cuentan con los conocimientos de otras discipli- are alien. Judicial and forensic experts are professionals
nas que les resultan ajenas. Los peritos judiciales o with specialised knowledge and recognized in an art or
peritos forenses son profesionales con conocimien- science that offers information or opinions based to
tos especializados y reconocidos en un arte o cien- the tribunals of justice on litigated points that happen
cia que suministran información u opinión fundada to be material or part of a discipline in which they are

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Scientia
Vilá & Fagúndez, Aportes de la Microscopía Electrónica… Interfluvius 10(1):23-39, 2019 Paraná

a los tribunales de justicia sobre puntos litigiosos capacitated. These experts have to be able to apply
que son materia o parte de la disciplina en la que techniques and resources belonging to a discipline
se encuentran capacitados. Estos peritos deben of their incumbency in a scientific way to administer
ser capaces de aplicar técnicas y recursos propios requirements pertaining to a judicial investigation as
de la disciplina de su incumbencia, en forma cien- recollection, assurance and preservation of the proofs,
tífica, para administrar requerimientos propios de management of the chain of custody, etc. (Carreras
una investigación judicial como recolección, ase- Espallardo, 2013). The conclusions of these reports
guramiento y preservación de las pruebas, manejo are expressed in an expert opinion that is incorporated
de la cadena de custodia, etc. (Carreras Espallardo, into the process. Its aim is to inform the judge, by
2013). La conclusión de esos trabajos se expresa en contributing the highest possible level of evidence
un dictamen pericial que se incorpora al proceso. regarding all the relevant proof so that there might be
Su propósito es informar al juez, aportando el ma- objectivity in justice and avoidance of judicial failure.
yor grado posible de evidencia a las pruebas, para The greater the grade or level of evidence of what is
darle seguridad a éste acerca de la justicia objetiva assessed by the expert in his report, the less there will be
de su fallo. Cuanto mayor sea el grado o nivel de of demands for the amplifying or further explanations
evidencia de lo asesorado por el perito en su infor- that can be called for a posteriori (Cerdá, 2009).
me pericial, menores serán las posibilidades de pe- When going deeper into the investigative process
didos de ampliaciones, explicaciones y/o impugna- with the participation of experts in diverse areas of
ciones que se produzcan a posteriori (Cerdá, 2009). knowledge it becomes increasingly important to
Al irse incorporando cada vez más a los proce- establish norms and procedures with clarity for the
sos investigativos la participación de peritos en di- reception and preservation of the samples and the
versas áreas del conocimiento, se hace tanto más administrative and technical management of the same.
importante establecer con claridad normas y pro- The elaboration of guidelines and/or protocols is
cedimientos para la recepción y preservación de las desirable in all of the stages of the investigative work
muestras, y los manejos administrativos y técnicos in such a way that the samples that can be converted
de las mismas. Es deseable la elaboración de Guías in evidence are given to the expert with the highest
y/o Protocolos en todos los tramos del trabajo in- guarantee of inalterability and in the best conditions to
vestigativo, de modo que las muestras que puedan be studied. This provides seriousness and responsibility
convertirse en evidencia lleguen al perito con las to the work of the expert (Cerdá, 2009).
mayores garantías de inalterabilidad y en las me-
jores condiciones para ser estudiadas. Esto aporta THE ELECTRON MICROSCOPE IN
seriedad y responsabilidad al trabajo pericial (Cer- FORENSIC SCIENCES
dá, 2009). “The microscopic leftovers that cover our clothing and our
bodies are silent witnesses, sure and faithful, of our movements
LA MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA EN LAS CIEN- and our meetings” 
CIAS FORENSES Edmond Locard (en Noriega, 2013)
“Los restos microscópicos que cubren nuestra
ropa y nuestros cuerpos son testigos mudos, segu- An essential principle, applicable to the work of
ros y fieles, de nuestros movimientos y de nuestros forensic microscopists all over the world, is called the
encuentros”  Locard’s Exchange Principle: “Whenever two objects
Edmond Locard (en Noriega, 2013) enter into contact a part of the material that is on one
of them is transferred to incorporate the other object
Un principio esencial aplicable al trabajo de los “. In reality, Locard observed that it “is impossible
microscopistas forenses de todo el mundo es el that a criminal to act, especially with the tension of
llamado Principio de Intercambio de Locard: “Siem- the criminal action, without leaving signs of his
pre que dos objetos entran en contacto transfieren presence”(Noriega, 2013). This principal has allowed
parte del material que incorporan al otro objeto”. the obtaining of relevant indications in numerous
En realidad Locard hizo la observación de que “es places, from footprints in the mud or its rest in tires
imposible que un criminal actúe, especialmente and footware to fingerprints or remains on finger nails
en la tensión de la acción criminal, sin dejar rastros (Forensic Science, 2019).
de su presencia” (Noriega, 2013). Este principio ha The eagerness to extract the greatest quantity of

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Scientia
Vilá & Fagúndez, Aportes de la Microscopía Electrónica… Interfluvius 10(1):23-39, 2019 Paraná

data from a sample so that this data can be used as


proof, whether it be to clarify the circumstances of an
event or to establish the origins or the history behind
an object, makes for the importance of observing
the sample with greater clarity and more details.
This interest to observe with greater details, in such
an instance as well as in other more diverse areas of
knowledge, led to the development of magnifying
glasses and microscopes that allow the observation and
taking of photographs with ever greater detail.
This same interest has converted the microscope in
a very powerful and useful tool in the hands of experts
Figure 1. Scanning electron microscope (SEM) Phenom Pro of the who are capable of observing details that would have
Electron Microscopy Laboratory of the CICYTTP, Diamante, E.R. otherwise passed unseen in the samples.
(Photo: J.F.Vilá) From the beginning of forensic studies, the most
Figura 1. Microscopio electrónico de barrido (MEB) marca
Phenom Pro del Laboratorio de Microscopía Electrónica del
used optical instrument after the magnifying glass has
CICYTTP, Diamante, E.R. (Foto: J.F.Vilá). been the optical microscope. The ease of operation of
this instrument as well as the notable development in
permitido obtener indicios relevantes en numero- diverse techniques of preparation of the samples has
sos lugares, desde huellas en el barro o sus restos converted optical microscopy in an invaluable tool for
en neumáticos y calzado, hasta huellas dactilares o the forensic investigator.
restos en las uñas (Forensic Science, 2019). We could signal some aspects that characterise this
El afán por extraer de una muestra la mayor technique:
cantidad de datos que ésta pueda aportar como Magnification: is the possibility of virtually enlarging
prueba, ya sea para esclarecer las circunstancias the size of the observed object.
de un evento o establecer los orígenes o el devenir Resolution: is the capacity of appreciating details
histórico de un objeto, ha hecho querer observarla when they are magnified; it is not only useful to enlarge
con más claridad y mayores detalles. Este interés the size of an object virtually, it is also necessary to be
por observar con más detalle, tanto en ésta como able to observe more details in the magnified object.
en otras muy diversas áreas del conocimiento, Field depth: is the capacity of an optic system to
condujo al desarrollo de lupas y microscopios que focus not only on the desired plane of the object but
permitieran la observación y la toma de fotografías also on planes from upfront and behind this same area.
con aumentos cada vez mayores.
Ese mismo interés ha convertido a la microsco- The electron microscope
pía en una herramienta muy poderosa y útil en ma- In the beginning of the 20th Century Ernst Ruska,
nos de peritos que son capaces de observar en las under the tutelage of Max Knoll, carried out theoretical
muestras cosas que de otro modo hubieran pasado and experimental studies that led to the construction of
inadvertidas. the first electron microscope (Fresquet Febrer, 2014).
Desde el comienzo de los estudios forenses, el The development of these instruments continues
instrumento óptico más usado después de la lupa to date and leads to the making of equipment with
misma ha sido el microscopio óptico. La facilidad greater potential and permits the study of material
de operación de este instrumento así como el gran with an amazing range of details. There are basically
desarrollo de diversas técnicas de preparación de two types of electron microscopes: the transmission
las muestras han convertido a la microscopía ópti- electron microscope (TEM) and the scanning electron
ca en una herramienta invaluable para el investiga- microscope (SEM). In turn, there are variants of these
dor forense. instruments that make them specialised for different
Podemos señalar algunos aspectos que carac- areas of work (Vilá, 2017). For the ease with which
terizan a esta técnica: samples are prepared for observation, the scanning
Magnificación: es la posibilidad de aumentar en electron microscope is most useful in forensic studies
forma virtual el tamaño del objeto observado. (obs. pers.). Compared with the optic microscope, the
Resolución: es la capacidad de apreciar detalles SEM presents a greater capacity for enlargement or

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Scientia
Vilá & Fagúndez, Aportes de la Microscopía Electrónica… Interfluvius 10(1):23-39, 2019 Paraná

cuando se magnifica; no resulta útil la sola posibi- magnification, and also better resolution and greater
lidad de aumentar virtualmente el tamaño de un field depth (Vilá, 2017).
objeto, es también necesario poder observar más The Electron Microscopy Laboratory of the
detalles en el objeto magnificado. CICYTTP has a SEM Phenom Pro, which is a desktop
Profundidad de campo: es la capacidad de un type of scanning electron microscope (Fig. 1). Some
sistema óptico de mostrar en foco no sólo el plano advantages offered by this sort of instrument are:
deseado del objeto sino también planos por delan- a much more accessible cost than a traditional floor
te y por detrás del mismo. model; smaller size which makes it relatively portable
and allows one to use it in reduced work spaces; less
El microscopio electrónico installation time and maintenance than a conventional
A principios del siglo XX Ernst Ruska, bajo la tu- model; simplified interface, makes operation simple
tela de Max Knoll, realizó los estudios teóricos y ex- even for personnel with basic laboratory skills; faster
perimentales que condujeron a la construcción del operation, reduction of time in charging the sample of
primer microscopio electrónico (Fresquet Febrer, up to 80%. It is important to highlight the possibility
2014). El desarrollo de estos instrumentos continúa of studying the sample without the need of sputtering
hasta el presente dando origen a equipos con cre- which avoids contamination with the material
cientes capacidades que permiten el estudio de la contributed, and thus avoids alteration and damage;
materia con un nivel de detalle asombroso. Hay bá- this is possible thanks to some characteristics of the
sicamente dos tipos de microscopios electrónicos: equipment that permit images of high quality in non
el microscopio electrónico de transmisión (MET) y conductive samples; lower acceleration voltages are
el microscopio electrónico de barrido (MEB). A su used, lower beam currents and small work distances;
vez hay variantes en estos instrumentos que los ha- furthermore it is possible to work with low vacuum
cen especializados para diferentes áreas de trabajo levels using special specimen holders (Vilá & di Pasquo,
(Vilá, 2017). Por la facilidad con que se preparan las 2018). This possibility is important in forensic sciences
muestras para su observación resulta muy útil en given that on many occasions the sample is unique and
los estudios forenses el microscopio electrónico de this demands its perfect conservation as an element of
barrido (obs. pers.). Comparado con el microscopio proof and for use in eventual future studies (obs. pers.).
óptico, el MEB presenta mayor capacidad de au- There are also, however, some disadvantages: reduced
mento o magnificación, mejor resolución y mayor volume of the sample chamber, fewer possibilities of
profundidad de campo (Vilá, 2017). selection of the conditions of observation and lower
El Laboratorio de Microscopía Electrónica del resolution in relation with other electron microscopes;
CICYTTP cuenta con un microscopio electrónico but these potential difficulties are not significant
de barrido Phenom Pro, un tipo de microscopio drawbacks in practice (Vilá & di Pasquo, 2018).
llamado MEB de escritorio (Fig. 1). Algunas venta- Associated with the scanning electron microscope
jas que ofrece este tipo de instrumento son: costo and also applicable to that of transmission, there
mucho más accesible que un modelo tradicional is a very useful technique to determine the chemical
de piso; menor tamaño, lo cual lo hace relativamen- composition of a sample, the Electron Probe X-Ray
te portátil y permite usarlo en espacios de trabajo Microanalysis (Hren et al., 1979). With this technique,
reducidos; menores tiempos de instalación y man- you can study the composition of a sample of size as
tenimiento que un modelo convencional; interfaz small as a few microns, differentiate small regions of
simplificada, hace sencilla la operación incluso para different composition within a greater sample area,
personal con habilidades básicas de laboratorio; or obtain distribution maps of particular chemical
operación más rápida, reduce los tiempos de carga elements in the sample (Vilá, 2017; Arroyo, 2018).
de la muestra hasta un 80%. Es importante destacar
la posibilidad de estudiar la muestra sin necesidad Applications of the scanning electron
de metalizarla (sputtering), lo cual evita su contami- microscope
nación con el material aportado por el metalizado, Palynology: Is the science that studies pollen and the
evitando alterarla o dañarla; esto es posible gracias spores of plants and vegetal and animal microfossils.
a algunas características del equipo que permiten Its content is circumscribed by its techniques more
realizar imágenes de alta calidad en muestras no than by the unity of the materials studied (Jansonius
conductoras: se usan voltajes de aceleración bajos, & McGregor, 1996). In the decade of the 1940’s

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Scientia
Vilá & Fagúndez, Aportes de la Microscopía Electrónica… Interfluvius 10(1):23-39, 2019 Paraná

Figure 2. Pollen grains extracted from a honey sample produced Figure 3. Polygonum pollen grain. (SEM Phenom Pro, 10 KV, 4500x).
in the Paraná River Delta (Argentina). (SEM Phenom Pro, 5 KV, (Photo: Paola Soñez – CICYTTP)
1600x). (Photo: Paola Soñez – CICYTTP) Figura 3. Grano de polen de Polygonum. (MEB Phenom Pro, 10
Figura 2. Granos de polen  extraídos de una muestra de miel KV, 4500x). (Foto: Paola Soñez – CICYTTP)
producida en el Delta del Paraná (Argentina). (MEB Phenom Pro,
5 KV, 1600x) (Foto: Paola Soñez – CICYTTP). palynology simply referred to the study of pollen
and spores but then, other microscopic acid resistant
corrientes de haz menores y distancias de trabajo
specimens that were referred to as “non pollinic
pequeñas; además es posible trabajar con bajos
palynomorphs” (NPP) began to be studied, thus
niveles de vacío usando portamuestras especiales
including fungal spores and small fructifications,
(Vilá & di Pasquo, 2018). Esta posibilidad es impor-
polychaete jaws , the extinct chitinozoans, animal and
tante en las ciencias forenses, dado que en muchas
vegetable tissue fragments and algal cysts (van Geel,
ocasiones la muestra es única y esto exige su per-
2002; Cugny et al., 2010).
fecta conservación como elemento probatorio y
Until approximately 1960 this science used optical
para eventuales futuros estudios (obs. pers.). Apa-
microscopy as its principal tool but the arrival of
recen, sin embargo, algunas posibles desventajas:
electron microscopes facilitated a great advancement:
reducido volumen de la cámara de muestra, menos
the enormous resolution power of the TEM was
posibilidades de elección de las condiciones de ob-
the basis for obtaining new information close to the
servación y menor resolución en relación a otros
ultrastructure and development in the pollen grain, and
microscopios electrónicos; pero estas potenciales
the introduction of the SEM in the second half of the
dificultades en la práctica no suelen ser significati-
70’s was a key innovation for the study of fine outlines
vas (Vilá & di Pasquo, 2018).
of the surface of pollen. The advances in SEM include
Asociada al microscopio electrónico de barrido,
methods of preparation that are relatively simple and
y también aplicable al de transmisión, aparece una
reveal an intensity and overwhelming power (Hesse et
técnica muy útil para determinar la composición
al., 2009). In figures 2 and 3 the possibility offered by
química de una muestra, el Microanálisis de Rayos
this equipment to observation can be appreciated when
X por Sonda de Electrones (Hren et al., 1979). Con
viewing the amount of details of the pollen grains in
esta técnica se puede estudiar la composición de
addition to allowing a rigorous determination of the
una muestra de tamaño tan pequeño como algu-
same. According to Blackmore (1992) the scanning
nos micrones, diferenciar regiones pequeñas de
electron microscope has given a greater impulse to
diferente composición en una muestra mayor, u
palynology than any other technique developed in the
obtener mapas de la distribución de elementos
history of the matter has done.
químicos particulares en la muestra (Vilá, 2017;
Forensic palynology deals with the examination
Arroyo, 2018).

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Vilá & Fagúndez, Aportes de la Microscopía Electrónica… Interfluvius 10(1):23-39, 2019 Paraná

of palynomorphs that have been found on persons,


Aplicaciones del microscopio electrónico de objects and in places associated with crime. The
barrido special combination of these elements (recovered
Palinología: Es la ciencia que estudia el polen y palynomorphs) is called a “pollinic trail” and can
las esporas de las plantas y microfósiles vegetales y be used to identify and reconstruct a history. As the
animales. Su contenido está circunscripto por sus palynomorphs can remain trapped in the fibre of
técnicas más que por la unidad de los materiales clothes or other materials, their recuperation can link
estudiados (Jansonius & McGregor, 1996). En la dé- persons with the place relating to the facts. Thus forensic
cada de 1940 la palinología se refería simplemente palynology can be applied, for example, to discover
al estudio de polen y esporas, pero después empe- the place where a crime has been committed and
zaron a ser estudiados otros especímenes micros- determine if there have been post mortum movement
cópicos ácido resistentes que pueden ser referidos and prove or refute alibis, reduce the list of suspects,
como “palinomorfos no polínicos” (NPP, por su sigla determine the history of movements of objects and
en inglés) como esporas y pequeñas fructificacio- products, contribute information on the geographical
nes de hongos, mandíbulas de poliquetos, quiti- origin of an object or product, facilitate the localisation
nozoos extintos, fragmentos de tejidos vegetales y of clandestine tombs and human remains and reveal
animales, y quistes algales (van Geel, 2002; Cugny and clarify the peri mortem circumstances of a victim
et al., 2010). (Breglia, 2015).
Hasta aproximadamente 1960 esta ciencia usó Gunshot residues from firearms: When firing with a
como su principal herramienta el microscopio ópti- firearm, some residues composed of gunpowder,
co, pero el advenimiento de los microscopios elec- remains of projectile material, sheath or fulminant can
trónicos facilitó el gran avance: el enorme poder de be deposited on the body of the firearm user and its
resolución del MET fue la base para obtener nueva surrounding environment. The type of residue varies as
información acerca de la ultraestructura y desarro- much as the characteristics of the deposits depending,
llo en el grano de polen, y la introducción del MEB among other things, on the type of firearm and the
en la segunda mitad de los años 70 fue una inno- ammunition used (Guía de Procedimientos del Instituto
vación clave para el estudio del relieve fino de la de Investigación Criminal..., 2019). The analysis of the
superficie del polen. Los avances en MEB incluyen gunshot residues (GSR) tries to determine, on the body
métodos de preparación relativamente simples y or the clothing of a person suspected of having fired
rápidos, y una insuperable profundidad de campo a gun, the presence of particles of lead, barium and
que revela una intensidad y poder abrumadores antimony that are the component materials used in
(Hesse et al., 2009). En las Figuras 2 y 3 se puede projectiles (Bolmaro, R. en Franco, 2019). Sometimes
apreciar la posibilidad que brindan estos equipos it is also useful to take samples from other surfaces
de observar con gran detalle la morfología de gra-
Figure 4. SEM image of residue produced by a firearm shot. (Photo:
nos de polen y permitir una rigurosa determinación adapted from Soria Hernando, 2012)
de los mismos. Según Blackmore (1992) el micros- Figura 4. Imagen en el MEB de un residuo producido por
copio electrónico de barrido ha provisto a la palino- el disparo de un arma de fuego. (Foto: adaptada de Soria
logía un impulso mayor que ninguna otra técnica Hernando, 2012)
desarrollada durante la historia de la materia.
La palinología forense abarca el examen de
palinomorfos recuperados de personas, objetos y
lugares asociados con un delito. La combinación
especial de estos elementos (palinomorfos recu-
perados) se denomina “huella polínica” y puede ser
utilizada para identificar y reconstruir una historia.
Como los palinomorfos pueden quedar atrapados
en las fibras de la ropa u otros materiales, su recu-
peración puede vincular a las personas con el lu-
gar de un hecho. Por lo tanto la palinología forense
puede ser aplicada por ejemplo para descubrir el
lugar donde ha sido cometido un delito, relacio-

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Scientia
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linked to the fact to clarify the circumstances in which


the gun was fired (Forensic Science, 2019).
To determine the chemical composition of the
samples found, different techniques can be used: the
X-Ray fluorescense spectrometry (FXR), the neutron
activation analysis (NAA), the inductively coupled
plasma mass spectrometry (ICPMS) and the atomic
absorption spectrometry (AAS) (Giorgeri, S. en
Amaya, 2015; Guía de Procedimientos del Instituto
de Investigación Criminal…, 2019; Soria Hernando,
2012). However, in the majority of cases the preferred
instrument is the scanning electron microscope
Figure 5. X Ray Microanalysis of residue produced by firearm shot.
It can be observed that it contains lead, barium, antimony and copper
because, in addition, it offers a high definition image
(Pb, Ba, Sb and Cu). (Photo: adapted from Soria Hernando, 2012) to study the form and the size of the grains found.
Figura 5. Microanálisis de Rayos X de un residuo producido por To take samples, adhesive elements are used, in general
el disparo de un arma de fuego. Se puede observar que contiene made of carbon, which are applied on the surface to
plomo, bario, antimonio y cobre (Pb, Ba, Sb y Cu).
(Foto: adaptada de Soria Hernando, 2012)
examine; if there are residues, they will remain stuck
to these adhesive supports. This leads to the SEM
nar a un sospechoso o un objeto con la escena de where the presence of grains or particles that are
un crimen, determinar si ha habido traslados post morphologically compatible with GSR is studied. Then
mortem, probar o refutar coartadas, reducir la lista their chemical composition is determined with X-Ray
de sospechosos, determinar la historia de viaje de microanalysis (Giorgeri, S. en Amaya, 2015). In Figure
objetos y productos, aportar información sobre el 4 a particle of GSR photographed with a SEM can be
origen geográfico de un objeto o producto, facili- seen with the corresponding microanalysis in Figure 5
tar la localización de tumbas clandestinas y restos (adapted by Soria Hernando, 2012).
humanos, conocer y aclarar las circunstancias peri Phycology: Is the science that studies algae. It can
mortem de una víctima (Breglia, 2015). contribute data for the resolution of certain cases of
Residuos de disparo con armas de fuego: Al efec- death by drowning and determine the presence of a
tuar un disparo con arma de fuego, algunos resi- suspicious in the scene of the happening (Maidana,
duos compuestos por pólvora, restos de material 2018). Submersion is a type of drowning that can
del proyectil, de la vaina o del fulminante pueden result in death because of the violent entry of water
depositarse sobre el cuerpo del tirador y su entor- in the airways. In cases of death by submersion,
no cercano. Tanto el tipo de residuo como las carac- death could have been caused by an accident – such
terísticas de la deposición varían, entre otras cosas, as a thermic shock, a beating before falling into the
con el tipo de arma y la munición utilizada (Guía water, a heart attack, etc. – or the fall might have
de Procedimientos del Instituto de Investigación been intentional. Diatoms are a group of unicellular
Criminal..., 2019). El análisis de Residuos de Disparo microscopic algae that present immense diversity,
(GSR por sus siglas en inglés, Gunshot Residue) in- around twenty thousand species, and that adapt to very
tenta determinar, en el cuerpo o las prendas de una diverse environments either fresh or hypersaline water;
persona sospechosa de haber disparado un arma they function as perfect allies for investigating judicial
de fuego, la presencia de partículas de plomo, ba- causes and doubtful deaths by drowning. Based on the
rio y antimonio, que son componentes del material exam of the diatoms that remain impregnated in the
utilizado en los proyectiles (Bolmaro, R. en Franco, bone medulla, large bones or the heart, it is possible to
2019). A veces es útil también hacer levantamiento distinguish whether the body was in a river, a lake or
de muestras de otras superficies vinculadas al he- stream; if there was little or much water; the velocity
cho para poder esclarecer las circunstancias en que at which it flowed; if the corpse was close to the shore
se efectuó el disparo (Forensic Science, 2019). or in the centre; and also the acidity or salinity in the
Para determinar la composición química de las water, among other aspects (Maidana, en Esteban,
muestras encontradas se pueden usar diferentes 2018). Given the microscopic size of the diatoms, the
técnicas: la espectrometría de fluorescencia de Ra- way of studying them is with the electron microscope
yos X (XRF), el análisis de activación de neutrones where morphology can be studied and classified

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Figure 6. Valvar view of the internal face of Cocconeis placentula, Figure 7. Valvar view of Navicula peregrina, diatom from the
Diatom from the Holocene in Entre Ríos with extant representatives. Holocene in Entre Ríos with extant representatives. (SEM Phenom
(SEM Phenom Pro, 10 KV, 12000x). (Photo: Pérez Pincheira et al., Pro, 5 KV, 4500x). (Photo: Pérez Pincheira et al., 2018)
2018) Figura 7. Vista valvar de Navicula peregrina, diatomea del
Figura 6. Vista valvar de la cara interna de Cocconeis placentula, Holoceno de Entre Ríos con representantes en la actualidad.
diatomea del Holoceno de Entre Ríos con representantes (MEB Phenom Pro, 5 KV, 4500x). (Foto: Pérez Pincheira et al.,
en la actualidad. (MEB Phenom Pro, 10 KV, 12000x) 2018)
(Foto: Pérez Pincheira et al., 2018)
(NAA), la espectrometría de masa con plasma aco- appropriately. In figures 6 and 7 diatoms from fluvial
plado inductivamente (ICPMS) y la espectrometría terraces in the province of Entre Ríos seen with a
de absorción atómica (AAS) (Giorgeri, S. en Amaya, SEM can be observed and size and structure of these
2015; Guía de Procedimientos del Instituto de In- organisms can be viewed.
vestigación Criminal, 2019; Soria Hernando, 2012). Soil: It is known that particles of ground cover
Sin embargo, en la mayoría de los casos el instru- can provide useful information about the connecting
mento preferido es el microscopio electrónico de link of a person with the scene of a crime by the
barrido porque permite además tener una imagen characteristics of the surface of the earth and by its
de muy buena definición para estudiar la forma y diversity of properties (Dávila Villegas, 2009). In a great
el tamaño de los granos que se encuentran. Para quantity of cases the identification of earth particles in
tomar las muestras se utilizan elementos adhesi- the form of dust or mud on the shoes of a suspect
vos, en general de carbono, que se colocan sobre is extremely useful. These analyses can establish the
la superficie a examinar; si hay residuos, quedarán passing of this person in determined places allowing
adheridos a esos soportes. Estos se llevan al MEB the incrimination of a suspect or confirming an alibi.
donde se estudia la presencia de granos o partícu- Soil particles can be analysed from different points of
las morfológicamente compatibles con GSR. Luego view considering their origin, the different sorts of
se determina su composición química por medio ground cover, their physical characteristics or chemical
del microanálisis de Rayos X (Giorgeri, S. en Ama- characteristics (Dávila Villegas, 2009). But moreover,
ya, 2015). En la Figura 4 se aprecia una partícula the observation of this material under an electron
de GSR fotografiada con el MEB y en la Figura 5 el microscope can reveal the presence of crystals, mineral
microanálisis correspondiente (adaptadas de Soria remains, organic material or micro-organisms, elements
Hernando, 2012). that are characteristic of the locations with different
Ficología: Es la ciencia que estudia las algas. sorts of soil; in this sense the SEM is an indispensable
Puede aportar datos para la resolución de ciertos tool to characterise so much from the morphological
casos de muerte por ahogamiento y para deter- as well as chemical point of view in considering the

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minar la presencia de un sospechoso en el lugar encountered elements, owing to its magnifying power,
del hecho (Maidana, 2018). La sumersión es un its high resolution and potential use of the X-Rays
tipo de ahogamiento que ocasiona la muerte por microanalysis.
el ingreso violento de agua en las vías aéreas.  En Dust: Dust samples carried by a person can indicate
casos de muertes por sumersión, el deceso puede the places where he/she has passed or what she/he has
haber sido causado por un accidente – como sufrir been doing. Samples of dust can be obtained in general
un shock térmico, un golpe antes de caer al agua, from clothes, pockets, shoes, skin, hair and the objects
un infarto, etc. – o intencional. Las diatomeas son that are on a person (such as accessories, work utensils,
un grupo de algas unicelulares microscópicas que firearms, etc.). Dust can be of different origins and
presentan una inmensa diversidad, alrededor de this fact gives rise to different study techniques. It can
veinte mil especies, y se adaptan a muy diversos be said that there is dust related to the profession of
ambientes, ya sea aguas dulces como hipersalinas; a person, metallic dusts, organic waste, etc. (Forensic
funcionan como aliadas perfectas para investigar Science, 2019). On occasion this material can be
causas judiciales y decesos dudosos por ahoga- studied and characterised morphologically with an
miento. A partir del examen de las diatomeas que optic microscope. But there are some particles that
quedaron impregnadas en la médula ósea, huesos escape the characterization with this instrument for
largos o el corazón es posible distinguir si el cuer- their reduced size; in this case the most appropriate
po estuvo en un río, un lago o un arroyo; si había equipment happens to be the scanning electron
mucha o poca agua; la velocidad a la que corría; si microscope. Furthermore, if it is necessary to specify
el cadáver se encontraba cerca de la orilla o en el the chemical composition of a particle, the X-Ray
centro; así como también la acidez y la salinidad, microanalysis technique can be resorted to.
entre otros aspectos (Maidana, en Esteban, 2018). Tool marks: The study of the marks made by the tools
Dado el tamaño microscópico de las diatomeas, la used to commit a crime can be of special interest. Tools,
forma de estudiarlas es por medio del microscopio when used, leave marks that make up a characteristic
electrónico, donde se puede analizar su morfología footprint that lead to the individualization of the
y clasificarlas apropiadamente. En las Figuras 6 y 7 object in particular. For example cutting instruments,
se pueden observar diatomeas provenientes de te- even those that are new, have grooves caused by the
rrazas fluviales de la provincia de Entre Ríos vistas al production or sharpening process; these grooves
Figure 8. Cotton tissue at 2000x. In the right hand corner is a view Figure 9. Synthetic tissue at 2000x. At the right hand corner is a
of the same at 20x. (SEM Phenom Pro, 5 KV) (Foto: J. F. Vilá) view of the same at 20x. (SEM Phenom Pro, 5 KV) (Photo: J. F. Vilá)
Figura 8. Tejido de algodón a 2000x. En el ángulo superior Figura 9. Tejido sintético a 2000x. En el ángulo superior derecho
derecho una vista a 20x. (MEB Phenom Pro, 5 KV) (Foto: J. F. Vilá) una vista a 20x. (MEB Phenom Pro, 5 KV) (Foto: J. F. Vilá)

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MEB en las que se aprecia el tamaño y la estructura


de esos organismos.
Suelos: Se sabe que el suelo puede proveer in-
formación útil acerca del vínculo de una persona
con la escena de un crimen por las características
de la superficie de la tierra y por su diversidad de
propiedades (Dávila Villegas, 2009). En una gran
cantidad de casos la identificación de restos de
suelo, en forma de polvo o barro en los zapatos de
un sospechoso, es de extrema utilidad. Estos aná-
lisis pueden establecer el paso de la persona por
determinados lugares, permitiendo incriminar a un
sospechoso o confirmar una coartada. Los restos
de suelo pueden ser analizados desde diferentes
puntos de vista, considerando su origen, los dife-
rentes tipos de suelo, sus características físicas o
sus características químicas (Dávila Villegas, 2009).
Pero además, la observación al microscopio elec-
trónico de este material puede revelar la presencia Figure 10. Carbonised Wood. Xylem of scotch pine. (SEM Hitachi
de cristales, restos minerales, materia orgánica o S-1400, 150x). (Photo: adapted from Badal, 2005)
microorganismos, elementos que resultan caracte- Figura 10. Madera carbonizada. Xilema de pino tipo albar. (MEB
rísticos de la ubicación de los diferentes suelos; en Hitachi S-1400, 150x). (Foto: adaptada de Badal, 2005)
este sentido el MEB es una herramienta indispensa- become deeper with use and leave their mark on the
ble para caracterizar tanto desde el punto de vista scene of a crime and this can be invaluable in the search
morfológico como químico los elementos encon- for proof (Forensic Science, 2019). For the analysis of
trados, debido a su poder de magnificación, su alta these indentations or marks in situ a magnifying glass
resolución, y el potencial uso del microanálisis de can be a very useful element; but when the object in
Rayos X. question can be taken to a microscope, the conclusions
Polvo: Las muestras de polvo que porta una per- can be very much more ample. The scanning electron
sona pueden indicar el lugar por donde pasó o lo microscope is a valuable tool in this type of study;
que estaba haciendo. Se puede obtener muestras some SEM allow for the placing of large samples that
de la ropa en general, de los bolsillos, de los zapa- even weigh various kilos so that they can be studied.
tos, de la piel, del pelo, de los objetos que la perso- Hair: Is one of the most important forensic
na porta (como adornos, útiles de trabajo, armas, resources and often provides valuable clues on
etc.). El polvo puede ser de diferentes orígenes lo the identity of one or more aggressor/s. (Álvarez
cual da lugar a diferentes técnicas de estudio. Se Menéndez & Mateos Martín, 2010). It is very useful
puede citar polvo relacionado con la profesión de la to study hairs found both in the scene of a crime as
persona, polvos metálicos, desechos orgánicos, etc. on the body of a victim or a supposed aggressor. The
(Forensic Science, 2019). En ocasiones este material morphological characteristics of hair have been amply
puede ser estudiado y caracterizado morfológica- studied in such a way that today it can pave the way
mente por medio de un microscopio óptico. Pero to many conclusions, from knowing if the hair is of
hay algunas partículas que por su reducido tamaño human or animal origin and even to deduce from which
escapan a la caracterización con este instrumento; bodily zone it comes from; it is usually differentiated
en este caso el equipo más apropiado resulta ser el the condition in which it is found, the aspect from the
microscopio electrónico de barrido. Además, si re- root to the extremity, type, diameter, pigmentation,
sulta necesario precisar la composición química de scale pattern, distance between layers, etc. (Forensic
una partícula, se puede usar la técnica de microa- Science, 2019; Álvarez Menéndez & Mateos Martín,
nálisis de Rayos X. 2010). The analysis of the samples is made with a
Marcas de herramientas: El estudio de las mar- microscope, comparing the hair studied with hair of
cas de herramientas usadas para cometer un delito known origin. “Its proof value is related to the variability
suele ser de especial interés. Estas herramientas, of the characteristics of hair between different individuals in a

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al emplearlas, dejan marcas que conforman una population. There are many factors that influence the certainty
huella característica que puede llevar a la indivi- of an association including the experience and formation of
dualización del objeto en particular. Por ejemplo the expert, the limitation of the known norms of hair and the
las herramientas de corte, incluso nuevas, tienen quality of the equipment. The basic morphology of human hair
muescas debidas al proceso de fabricación o de is shared by all of the individuals of a population but the order,
afilado, muescas que se acentúan con el uso; éstas distribution, and microscopic aspect of the different regions of
dejan marcas en la escena de un delito que pueden hair have different characteristics which usually allows qualified
resultar de gran valor probatorio (Forensic Science, personnel to be able to differentiate the hair of different persons”
2019). Para el análisis de estas marcas in situ una (Álvarez Menéndez & Mateos Martín, 2010: 201-202).
lupa puede ser un elemento muy útil; pero cuan- The electron microscope with its extraordinary depth
do el objeto en cuestión puede ser llevado a un of field and high resolution power allows the carrying
microscopio, las conclusiones pueden ser mucho out of these studies with much reliability.
más amplias. El microscopio electrónico de barrido Paint: Is a coloured substance or liquid that is
es una herramienta valiosa para este tipo de estu- applied in thin layers on a surface and that, when
dios; algunos MEB permiten colocar muestras de dry, leaves a solid film that protects and embellishes
gran tamaño y hasta varios kilos de peso para ser the covered area. The forensic study of paint helps in
estudiadas. many cases, for example: the falsification of works of
Pelos: Son uno de los más importantes recursos art can be discovered by studying the paintings that
forenses y con frecuencia proporcionan valiosas were done; in the act of committing a crime, the guilty
pistas sobre la identidad de un agresor o agresores party can brush past painted walls or furniture and his/
(Álvarez Menéndez & Mateos Martín, 2010). Resulta her clothes would conserve traces of painting in the
muy útil el estudio de pelos encontrados tanto en form of patches or powder; in the case of automobile
la escena misma de un delito, como en el cuerpo accidents the vehicles leave traces of painting, one
de una víctima o de un supuesto agresor. Las ca- against the other. Studies can be made by comparing
racterísticas morfológicas del pelo han sido am- painted elements and the patches, powder or traces
pliamente estudiadas, de modo que hoy se puede encountered, or by trying to identify the characteristics
extraer muchas conclusiones de su observación, and composition of the base of the paint as well as the
desde saber si es de origen humano o animal, hasta pigments (Forensic Science, 2019). Various methods
deducir de qué región del cuerpo procede; se sue- are used to carry out analyses: optic microscopy,
le diferenciar la condición en que se encuentra, el specific chemical reactions, UV spectroscopy, FTIR
aspecto desde la raíz hasta el extremo, tipo, diáme- spectroscopy, chromatography and others (Arias
tro, pigmentación, patrón de las escamas, distancia Londoño, 2009). When it is necessary to carry out
entre capas, etc. (Forensic Science, 2019; Álvarez comparisons between samples, the SEM helps the
Menéndez & Mateos Martín, 2010). El análisis de las expert with its characteristics of high magnification
muestras se hace por microscopía, comparando el and high resolution which permit comparative
pelo en estudio con pelos de origen conocido. “El morphological studies in great detail. X-Ray
valor probatorio se relaciona con la variabilidad de microanalysis helps analyse the elemental composition
las características del pelo entre distintos individuos of the different mixtures of pigment used.
de una población. Hay muchos factores que influyen Cloth: The majority of cloth types transfers some
en la fiabilidad de una asociación, incluida la expe- fibres in contact situations. These fibres can represent
riencia y formación del perito, las limitaciones de the proof of the presence of a person in a certain
las normas conocidas de pelo y la adecuación de los place and thus their analysis has great forensic value.
equipos. La morfología básica de pelos humanos se Despite the ample spectre of fibres produced by the
comparte en todos los individuos de una población, textile industry, the regularity of its production and
pero el orden, la distribución y el aspecto microscópi- dependable quality confer characteristics to products
co de las diferentes regiones del pelo tienen distintas that facilitate identification. These can be analysed to
características, lo que habitualmente permite que identify the material as well as the dyes that were used
personal cualificado pueda diferenciar entre pelos on it. On the other hand, it is important to distinguish
de distintas personas” (Álvarez Menéndez & Mateos if the material dealt with is of textile origin and to
Martín, 2010: 201-202). El microscopio electrónico, differentiate these from natural fibres which are of
con su extraordinaria profundidad de campo y su animal or vegetal origin (Forensic Science, 2019).

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gran poder de resolución, permite realizar todos The optic microscope is limiting in many cases to
estos estudios con mayor confiabilidad. resolve these situations, making the contribution of
Pinturas: Son sustancias o líquidos con color que the scanning electron microscope indispensable. As
se aplican en capas delgadas sobre una superficie y an example, it is observed samples of cotton and
que al secar dejan una película sólida que protege y synthetic fabric seen at the SEM; details of the different
embellece el área cubierta. El estudio forense de las morphologies of the fibres can be seen, thanks to its
pinturas ayuda en numerosos casos, por ejemplo: excellent resolution (Fig. 8 - 9).
la falsificación de obras de arte puede descubrirse Analysis of wood and carbons: Antracology is a branch
estudiando las pinturas con que fue realizada; en el of archaeobotany that emerged in the beginning
acto de cometer un delito el culpable puede rozar of the 20th Century for the botanic identification
con paredes o muebles pintados y su ropa conser- of prehistoric carbons. In recent years, this type
vará rastros de la pintura en forma de manchas o of analysis is being applied to materials that are not
polvo; en casos de accidentes automovilísticos los only archaeological, such as historic documentation,
vehículos dejan rastros de pintura de uno en el otro. expert proofs and use in the restoration of patrimonial
Los estudios se pueden efectuar por comparación objects. Botanic identification is based on the anatomic
entre los elementos pintados y las manchas, polvo structure of the wood; the range of identification can
o rastros encontrados, o tratar de identificar las ca- be from the group leading to the species, depending
racterísticas y composición tanto de la base de las on its own anatomic characteristics, of the state of
pinturas como de los pigmentos (Forensic Science, conservation of the remains and size (Badal, 2005).
2019). Se utilizan varios métodos para realizar estos It is also possible to associate determined vegetal
análisis: microscopía óptica, reacciones químicas species with particular places where these grow and
específicas, espectroscopía UV, espectrofotometría are reproduced. Wood remains can be found on
FTIR, cromatografía y otros (Arias Londoño, 2009). the scene of a crime, and in the elements used to
Cuando es necesario realizar comparaciones entre commit the crime and also on the clothing of persons.
muestras, el MEB ayuda al perito con sus caracte- Therefore the botanic identification of these types of
rísticas de gran aumento y alta resolución, lo cual wood remains can be of great importance within the
permite estudios morfológicos comparativos con framework of the investigation. The protocol followed
gran detalle. Se puede usar microanálisis de Rayos for the analysis is the observation of the vegetal tissue
X para analizar la composición elemental de las di- under a microscope with reflected light and with a
ferentes mezclas de pigmentos usadas. scanning electron microscope (Badal, 2005). As an
Telas: La mayoría de las telas transfieren algunas example, the observation at SEM of the cut of a piece
fibras cuando hay situaciones de contacto. Estas of wood (Fig. 10) extracted from the keelson of a
fibras pueden representar la prueba de la presen- sunken ship is presented; this is a Catalan llagut built in
cia de una persona en un cierto lugar por lo que su 1897 and there was interest in knowing the wood used
análisis tiene gran valor forense. A pesar del amplio in its construction; this sample was contaminated with
espectro de fibras que produce la industria textil, paints, but it was possible to differentiate the specie
la regularidad de su producción y la constancia en of pine, mountain pine evidently, and because of the
la calidad le confieren a los productos característi- logging tradition it can be deduced that it is the scots
cas que facilitan su identificación. Éstas se pueden pine (Badal, 2005).
analizar para identificar tanto el material como las
tinturas a las que fue sometido. Por otro lado, es A CASE STUDY: DETECTION OF AN ACT
importante diferenciar si se trata de fibras de ori- OF VANDALISM IN AN OLEODUCT
gen textil y diferenciarlas de fibras naturales, de Pipelines are the preferred mode of long distance
origen animal o vegetal (Forensic Science, 2019). transportation of liquids and gas. This is so, in
El microscopio óptico resulta limitado en muchos counter position to the lorry or the train, for various
casos para resolver estas situaciones, haciéndose reasons: they are less harmful for the environment,
imprescindible el aporte dado por la microscopía less susceptible to be stolen and more economical,
electrónica de barrido. Como ejemplo se observan sure, convenient and dependable. For over hundreds
muestras de tejido de algodón y sintético vistas of years pipelines have been constructed in different
al MEB; gracias a la excelente resolución se puede parts of the world to transport water, be it for drinking
apreciar con detalle las diferencias morfológicas de or for agricultural watering. Around the year 400 BC,

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Vilá & Fagúndez, Aportes de la Microscopía Electrónica… Interfluvius 10(1):23-39, 2019 Paraná

las fibras (Fig. 8 - 9). the Chinese used pipes of bamboo to transport natural
Análisis de maderas y carbones: La antracología gas to Peking; in the 18th Century pipes of melted
es una rama de la arqueobotánica que surgió a iron began to be used and in the 19th Century the
principios del siglo XX para hacer la identificación development of high resistance steel pipes enabled the
botánica de los carbones prehistóricos. En los últi- long distance transport of natural gas and petroleum
mos años, este tipo de análisis está siendo aplicado (Encyclopaedia Britannica, 2019).
a materiales que no son arqueológicos, como do- Oleoducts are pipelines used in the transport of
cumentación histórica, pruebas periciales y apli- crude oil or its derivatives. Some transport crude oil
caciones en restauración de bienes patrimoniales. to the refineries, others transport refined by-products
La identificación botánica se basa en la estructura such as petrol, kerosene or combustible for heating
anatómica de la madera; el rango de identificación for consumers. For this purpose, almost exclusively
puede ser desde el grupo hasta la especie, depen- steel pipelines are used, without internal coating but
diendo de las propias características anatómicas, with an external coating and cathodic protection
del estado de conservación de los restos y de su to minimise corrosion. The majority of countries
tamaño (Badal, 2005). También es posible asociar have an extensive network of pipelines; however the
determinadas especies vegetales a lugares parti- contribution to transport and importance for the
culares donde las mismas crecen y se reproducen. economy of these pipelines are often not recognised
Restos de maderas pueden ser encontrados en el by the public in general because they are usually out of
lugar donde se cometió un delito, en los elemen- sight (Encyclopaedia Britannica, 2019).
tos utilizados para cometerlo, y también en la ropa In different places around the world, reports have
de las personas. Por lo tanto la identificación botá- been made of serious damage to oleoducts, sometimes
nica de esos restos de maderas puede ser de gran produced by acts of vandalism with large oil spills
importancia en el marco de una investigación. El and always resulting in disastrous consequences, both
protocolo seguido para el análisis es la observación economic and environmental, and even causing the
de los tejidos vegetales en el microscopio de luz re- loss of lives. Some examples that can be mentioned
flejada y en el microscopio electrónico de barrido are the damage to a pipeline provoked in Costa Rica
(Badal, 2005). Como ejemplo se presenta la obser- in September 2018 by striking workers who caused
vación al MEB del corte de un trozo de madera (Fig. a spill of approximately 1000 gallons of diesel on a
10) extraído de la sobrequilla de una embarcación highway (Arrieta, 2018), and also perforations to an
hundida; se trata de un llagut catalán construido en oleoduct carried out in the capital of Nigeria in order
1897 del cual se quería conocer las maderas utiliza- to rob petroleum in December 2006 that provoked
das en su construcción; esta muestra estaba con- an explosion causing the deaths of over two hundred
taminada con pinturas, pero se pudo diferenciar la persons (El País, 2006).
especie de pino, evidentemente pino de montaña, A study made by the principal author of this article
y por la tradición maderera se puede deducir que as Head of a Laboratory and operator of the electron
se trata del pino albar (Badal, 2005). microscope in the Electron Microscopy Laboratory of
the Universidad Nacional de Mar del Plata provides a
CASO TESTIGO: DETECCIÓN DE UN ACTO DE good example of the use of the SEM in these cases.
VANDALISMO EN UN OLEODUCTO A petroleum conduit in the north of our country
Las tuberías son el modo preferido para el trans- suffered grave damage and the administration of the
porte a grandes distancias de líquidos y gas. Esto company responsible for the transport of the fluid
es así, en contraposición al camión o el ferrocarril, and the maintenance of the oleoduct suspected that
por varias razones: son menos dañinas para el am- the flaw had been deliberately provoked. To clarify this
biente, menos susceptibles de robo y más econó- case, a special consultant in the transport of flammable
micas, seguras, convenientes y confiables. Durante fluids was taken which in turn required the services of
cientos de años se han construido tuberías en di- the Electron Microscopy Laboratory.
ferentes partes del mundo para transportar agua The petroleum company was asked to send the
ya sea para beber o para riego. Alrededor del año damaged pipe sector and this in turn was cut the fault
400 a. C. los chinos utilizaban tubos de bambú para area to allow observation with the electron microscope.
transportar gas natural hacia Pekín; en el siglo XVIII The analysed sample in the Laboratory consisted of a
se comenzaron a usar comercialmente tubos de piece of pipe of approximately 10 cm in length and

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hierro fundido y en el siglo XIX el desarrollo de tu- around 0,5 kg in weight, in which you could see with
berías de acero de alta resistencia hizo posible el the naked eye a sector where the damage to the duct
transporte de gas natural y petróleo a largas distan- had occurred.
cias (Encyclopaedia Britannica, 2019). With the electron microscope it was possible
Los oleoductos son tuberías destinadas al trans- to clearly observe the imprint of cutting tools with
porte de petróleo crudo o sus derivados. Algunos characteristic marks produced by the rotating element
transportan crudo hacia las refinerías, otros trans- in the form of well defined lines of circular pattern,
portan productos refinados como naftas, querose- with evident signs of a process of advancing from
no o combustible para calefacción hacia los consu- outside towards inside the pipe, denoted by the aspect
midores. Para esto se utilizan casi exclusivamente of successive “waves” attacking the material (obs.
tuberías de acero sin revestimiento interno pero pers.). The resulting photographs were also studied
con un revestimiento externo y protección cató- by a materials engineer with extensive experience in
dica para minimizar la corrosión. La mayoría de los degradation processes of pipes subjected to corrosion,
países tienen una extensa red de tuberías; sin em- who confirmed that it was not a process of this type.
bargo su contribución al transporte y su importan- The conclusions arrived at were made possible
cia para la economía a menudo no son reconocidas thanks to the high magnification and high resolution,
por el público en general debido a que usualmente typical of an electron microscope, that allowed for the
están fuera de la vista (Encyclopaedia Britannica, obtaining of photographs of a high quality and high
2019). level of detail (obs. pers.).
En diversos lugares del mundo se registran For the managing directors of the petroleum
reportes de daños importantes en oleoductos, a company who commissioned this study, the report and
veces producidos por actos de vandalismo, con the photographs were sufficient proof of a deliberate
grandes derrames de líquidos, siempre con desas- act of pipeline destruction and this led to the adoption
trosas consecuencias tanto económicas como para of new oleoduct protection policies.
el medioambiente, inclusive con pérdidas de vidas
humanas. Como ejemplos se pueden citar el daño a LABORATORY OF ELECTRON
una cañería provocado en Costa Rica en setiembre MICROSCOPY OF THE CICYTTP
de 2018 por trabajadores en huelga que provocó This laboratory provides services and technical
el derrame de aproximadamente 1000 galones de assistance to the scientific and academic community,
combustible diesel sobre una carretera (Arrieta, to provincial and national institutions and to private
2018), y perforaciones realizadas con el fin de robar companies.
combustible a un oleoducto cerca de la capital de Develops activities linked to organisation-public
Nigeria en diciembre de 2006 que provocaron una relationship management, through High Level
explosión en la que murieron más de doscientas Technological Services (Servicios Tecnológicos de Alto
personas (El País, 2006). Nivel - STAN). These activities are normalised in the
Un trabajo realizado por el primer autor cuando Resolution No.1873/11 of CONICET.
se desempeñaba como director del laboratorio y Adheres to the National Microscopy System
operador del microscopio electrónico en el Labora- (Sistema Nacional de Microscopía - SNM), in the
torio de Microscopía Electrónica de la Universidad area of the Science, Technology and Productive
Nacional de Mar del Plata resulta un buen ejemplo Innovation Secretary of Argentina (Secretaría de
del uso del MEB en estos casos. Ciencia, Tecnología e Innovación Productiva de la
Una cañería conductora de petróleo en el norte Nación) together with the Inter-institutional Council
de nuestro país sufrió un daño importante y los di- of Science and Technology (Consejo Interinstitucional
rectivos de la empresa responsable del transporte de Ciencia y Tecnología - CICyT), within the Important
del fluido y del mantenimiento del oleoducto sos- Instruments and Data Bases Programme (Programa de
pecharon que la falla había sido provocada delibe- Grandes Instrumentos y Bases de Datos).
radamente. Para esclarecer este hecho recurrieron
a la asistencia de una Consultora especializada en
el transporte de fluidos, la cual a su vez requirió los
servicios del Laboratorio de Microscopía Electróni-
ca.

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Vilá & Fagúndez, Aportes de la Microscopía Electrónica… Interfluvius 10(1):23-39, 2019 Paraná

Se solicitó a la empresa petrolera el envío del Álvarez Menéndez, M.D. & Mateos Martín, J. 2010. Estudio
sector de cañería dañado, del cual a su vez se forense de pelos. En: Manual de criminalística y ciencias
efectuó un recorte del área de falla para permitir forenses. Técnicas forenses aplicadas a la investigación
su observación en el microscopio electrónico. La criminal. Editorial Tébar, Madrid. 196-216 pp.
Amaya, S. 2015. Cómo es la técnica para determinar si hay
muestra analizada en el Laboratorio consistió en
residuos de un disparo en la mano de una persona. Diario
un trozo de cañería de aproximadamente 10 cm de La Nación. Buenos Aires, Argentina, 20 de enero de 2015.
largo y alrededor de 0,5 kg de peso, en el cual se https://www.lanacion.com.ar/seguridad/alberto-nis-
podía ver a simple vista un sector donde se había man-pericia-polvora-arma-nid1761620
producido el daño al conducto. Arias Londoño, J.F. 2009. Análisis forense de pinturas
Con el microscopio electrónico se pudo obser- como evidencia traza. Curso para el Diplomado en Cien-
var con claridad la huella de herramientas de corte, cias Forenses. Universidad de Antioquía.
con marcas características producidas por el ele- https://es.slideshare.net/ipforenses/qcq-forense-pintu-
mento rotante en forma de líneas muy definidas ras
Arrieta, E. 2018. Saboteadores usaron taladro para dañar
de dibujo circular, con evidentes muestras de un
oleoducto de Recope. Diario La República. San José, Cos-
proceso de avance de afuera hacia dentro del tubo, ta Rica, 17 de setiembre de 2018.
denotadas por el aspecto de “ondas” sucesivas de https://www.larepublica.net/noticia/saboteadores-usa-
ataque al material (obs. pers.). Las fotografías resul- ron-taladro-para-danar-oleoducto-de-recope
tantes fueron también estudiadas por un ingeniero Arroyo, M.C. 2018. Ciencia aplicada a la conservación del
en materiales de amplia experiencia en procesos patrimonio cultural. Libro de Resúmenes Extendidos. VII
de degradación de conductos sometidos a corro- Congreso Nacional de Arqueometría. Materialidad, Ar-
sión que confirmó que no se trataba de un proceso queología y Patrimonio. Tucumán, Argentina. 276-279
de este tipo. pp.
Badal, E. 2005. Nuevas aplicaciones de la Antracología
Las conclusiones a las que se arribó fueron po-
o de la identificación botánica del carbón y la madera.
sibles gracias a la gran magnificación y alta resolu- Avances en Arqueometría 2005. Actas del VI Congreso
ción - propias de un microscopio electrónico - que Ibérico de Arqueometría. Girona, España. 37-44 pp.
permiten obtener fotografías de alta calidad y ele- Blackmore, S. 1992. Scanning electron microscopy in
vado nivel de detalle (obs. pers.). palynology. En: Nilsson, S. & Praglowski, J. (eds). Erdtman’s
Para los directivos de la empresa petrolera que Handbook of Palynology. 2nd ed. Munksgaard, Copenha-
encargó el estudio, el informe y las fotografías resul- gen. 403-431 pp.
taron suficientes pruebas de un acto deliberado de Breglia, G. 2015. Palinología Forense. Curso de Capaci-
destrucción de la cañería, lo cual condujo a adoptar tación en Ciencias Forenses. Cátedra de Medicina Legal,
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Interfluvius 10 (1): 40-55, 2019 - Paraná ISSN 1853-4422 (printed) ISSN 1853-4430 (on line)

STUDY OF ENTOMOLOGICAL SAMPLES OF MEDICAL-LEGAL


INTEREST DEPOSITED IN THE COLLECTION OF THE ENTOMOLOGY
LABORATORY (FCYT-UADER / CICYTTP-CONICET)

REVISIÓN DE MUESTRAS ENTOMOLÓGICAS DE INTERÉS FORENSE


DEPOSITADAS EN LA COLECCIÓN DEL LABORATORIO DE
ENTOMOLOGÍA (FCYT-UADER / CICYTTP-CONICET)
Carlos Fernando Sosa

1
Laboratorio de Entomología, Facultad de Ciencia y Tecnología (FCyT-UADER) y Centro de Investigaciones Científicas y Transferen-
cia de Tecnología a la Producción (CICyTTP-CONICET); Dr. Materi y España, E3105BWA, Diamante, Entre Ríos, Argentina.

sosa.carlos@docentes.uader.edu.ar

ABSTRACT. The samples of entomofauna of forensic interest deposited in the reference


collection of the Entomology Laboratory (FCyT-UADER / CICyTTP-CONICET) in the
city of Diamante were revised. Subsequently, specimens collected in systematic studies
carried out in the towns of Betbeder and Oro Verde, in the Province of Entre Ríos, were
classified. In addition, forensic case records and unpublished field samples corresponding
to the towns of Concepción del Uruguay and Diamante are included in the study. At the
moment twenty species of arthropods, (distributed in seven families of Diptera, six families
of Coleoptera, two of Hymenoptera and two of Lepidoptera) have been determined. A
preliminary list of arthropods of forensic interest is presented in the province of Entre
Ríos, included here are the name of the species, original name and synonymic list. The state
of conservation of some samples has been a drawback to identification at species level in a
categorical way; thus, work on the classification of material is an ongoing process.

KEY WORDS. Cadaveric entomofauna. Forensic Entomology. Entre Ríos.

RESUMEN. Se han revisado las muestras de entomofauna de interés forense depo-


sitadas en la colección de referencia del Laboratorio de Entomología (FCyT-UADER /
CICyTTP-CONICET) en la ciudad de Diamante. Se han clasificado especímenes reco-
lectados en estudios sistemáticos desarrollados en las localidades de Betbeder y Oro
Verde, en la Provincia de Entre Ríos. Se incorporan, además, registros de un caso y
muestreos a campo aún no publicados correspondientes a la ciudades de Concepción
del Uruguay y Diamante. Al momento se han logrado determinar veinte especies de
artrópodos, distribuidos en siete familias de dípteros, seis de coleópteros, dos de hi-
menópteros y dos de lepidópteros. Se presenta un listado preliminar de artrópodos
de interés forense para la provincia de Entre Ríos, incluyendo nombre de la especie,
nombre original y lista sinonímica. El estado de conservación de algunas muestras no
ha permitido realizar la identificación a nivel de especie de manera categórica, por lo
que se sigue trabajando en la clasificación del material.

PALABRAS CLAVES. Entomofauna cadavérica. Entomología Forense. Entre Ríos.

40
Scientia
Sosa, Revisión de muestras forenses... Interfluvius 10(1):40-55, 2019 Paraná

Recibido: 18 de febrero de 2019


Aceptado: 13 de mayo de 2019

INTRODUCCIÓN INTRODUCTION
Se entiende por Entomología Forense al uso y Forensic Entomology involves the use and
desarrollo de los conocimientos de la Entomología development of entomological knowledge for the
para la resolución de investigaciones de hechos an- resolution of court investigations in any area of
tijurídicos, en cualquier ámbito de la Justicia, ya sea facts pertaining to Justice whether it is penal, civil,
penal, civil, administrativo o de familia (Keh, 1985; administrative or family related (Keh, 1985; Gennard,
Gennard, 2012). En estas instancias, el estudio de 2012). In these instances, the study of insects and other
insectos y otros artrópodos colabora en puntos arthropods collaborate in points of judicial interest
de interés judicial, tales como la estimación del in- which include estimation of the post-mortem interval,
tervalo post mortem (Smith, 1986; Byrd & Castner, (Smith, 1986; Byrd & Castner, 2001); transport of bodies
2001); traslado de cuerpos y sustancias controladas and controlled substances (Campobasso & Introna,
(Campobasso & Introna, 2001; Campobasso et al., 2001; Campobasso et al., 2001; Carvalho, et al., 2004,
2001; Carvalho, et al., 2004, Carvalho, 2009; Mace- Carvalho, 2009; Macedo, et al., 2013); consumption
do, et al., 2013); consumo de estupefacientes (Gos- of narcotics (Gosselin et al., 2011; Oliveira et al.,
selin et al., 2011; Oliveira et al., 2009); abandono de 2009); neglect of children and the elderly (Benecke &
personas (Benecke & Lessig, 2001; Benecke et al., Lessig, 2001; Benecke et al., 2004); poisoning (Sadler
2004); envenenamiento (Sadler et al., 1995; Pompo- et al., 1995; Pomponio, 2017); ill treatment of animals
nio, 2017); malos tratos a los animales (Anderson & (Anderson & Huitson, 2004; Anderson, 2012; Proctor
Huitson, 2004; Anderson, 2012; Proctor et al., 2016); et al., 2016); and infraction of appropriate practices in
infracción a las buenas prácticas en el manejo de the management of food (Hagstrum & Subramanyam,
alimentos (Hagstrum & Subramanyam, 2006), entre 2006), among others.
otros. The presence, diversity and order of colonisation
La presencia, diversidad y orden de colonización of different species of insects are influenced by the
de las diferentes especies de insectos están influen- ecological and climatic characteristics of each place.
ciadas por características ecológicas y climáticas de From here arises the importance of determining
cada lugar. De allí se desprende la importancia de the presence and behaviour of these arthropods in
determinar la presencia y comportamiento de es- each region and in different conditions of exposure
tos artrópodos en cada región, en distintas condi- for knowledge of its relationship with putrefactive
ciones de exposición, para conocer así su relación processes. (Smith, 1986).
con los procesos putrefactivos (Smith, 1986). There are relatively few registers published in
Existen relativamente pocos registros publica- the province of Entre Ríos on insects in forensic
dos para la provincia de Entre Ríos sobre insectos situations. Among those found are: pupae of Chrysomya
en situaciones forenses. Dentro de las relevadas se albiceps in Chajarí (Oliva, 1997); larvae III of Chrysomya
han constatado: puparios de Chrysomya albiceps albiceps, larvae and adults of Dermestes maculatus, larvae
en Chajarí (Oliva, 1997); larvas III de Chrysomya of Oxelytrum erythrurum, adults of Lasioderma sp. and
albiceps, larvas y adultos de Dermestes maculatus, specimens of the genera Trogidae and Histeridae
larvas de Oxelytrum erythrurum, adultos de Lasio- (Oliva, 2007); adults of Oxelytrum erythrurum in Colón
derma sp. y especímenes de los géneros Trogidae (Oliva, 2012) and Euspilotus (Hesperosaprinus) pavidus in
e Histeridae (Oliva, 2007); adultos de Oxelytrum Pueblo Liebig (Aballay et al., 2013). Similarly, the work
erythrurum en Colón (Oliva, 2012) y Euspilotus (Hes- of Engelman & Jacobi (2009) and of Ferreras (2017)
perosaprinus) pavidus en Pueblo Liebig (Aballay et have carried out systematic surveys in Betbeder and
al., 2013). Asimismo, los trabajos de Engelman & Oro Verde, identifying taxons at family level and, in
Jacobi (2009) y Ferreras (2017) han realizado rele- some cases, at species level.
vamientos sistemáticos, en Betbeder y Oro Verde, In addition to these, various species and families of
identificando taxones a nivel de familia y, en algu- potential forensic interest that fall in line with available
nos casos, a nivel de especie. references have been mentioned. In particular, the
Además de estas, se han mencionado varias es- following presences have been indicated: Calliphora
pecies y familias con potencial interés forense den- vicina, Phaenicia cluvia, Phaenicia cuprina, Phaenicia sericata,
tro de la bibliografía disponible. En particular se ha Cochliomyia macellaria, Compsomyiops fulvicrura, Chrysomya

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indicado la presencia de Calliphora vicina, Phae- Table 1. Diptera of forensic interest identified and location of
substrata sampled in the province of Entre Ríos
nicia cluvia, Phaenicia cuprina, Phaenicia sericata, Tabla 1. Dípteros de interés forense identificados y ubicación de
Cochliomyia macellaria, Compsomyiops fulvicrura, los sustratos muestreados en la provincia de Entre Ríos
Chrysomya chloropyga, Paralucilia pseudolyrcea y
Sarconesia chlorogaster (Mariluis & Mulieri, 2003);
Creophilus maxillosus (Aballay et al., 2008); Lucilia

Recolector
Localidad
Cebo
cuprina, L. eximia, L. ochricornis, Oxysarcodexia cul- Familia / Especie
miforceps, Oxysarcodexia paulistanensis, Ravinia au-
reopyga y Tricharaea (Sarcophagula) occidua (Dufek
et al., 2015). Calliphoridae
El objetivo del presente artículo es el de revisar Calliphora vicina
e incorporar, a los registros publicados, las familias, (Robineau-Desvoidy,
géneros y especies recolectadas en estudios siste- 1830) C, P B, D 1,3
Chrysomya albiceps
máticos desarrollados en la localidades de Betbe- (Wiedemann, 1819) C B, O 1,2
der y Oro Verde en la provincia de Entre Ríos. Se Cochliomyia macellaria
incluyen, además, los especímenes provenientes (Fabricius, 1775) C B 1
de un caso forense y salidas de campo aún no pu- Phormia regina (Meigen,
blicadas. 1826) C B 1
Lucilia cuprina (Wiedemann,
MATERIALES Y MÉTODOS 1830) C B 1
Se han revisado las muestras recolectadas por Lucilia illustris (Meigen, 1826) C B 1
Engelman & Jacobi (2009) en la ciudad de Oro Ver- Lucilia sericata (Meigen, B, O,
de (31°49′S 60°31′O) y por Ferreras (2017) en la lo- 1826) C, P, V D 1,2,3,4
calidad de Betbeder (32°23′S 59°55′O), depositadas Sarconesia chlorogaster
en la colección de referencia del Laboratorio de (Wiedemann, 1830) C O 2
Entomología (FCyT-UADER / CICyTTP-CONICET) de Drosophilidae
la ciudad de Diamante. Ambas investigaciones se Drosophila (Drosophila)
realizaron utilizando cerdos domésticos expues- funebris (Fabricius, 1787) C B 1
tos a la intemperie con jaula de exclusión y tram- Fanniidae
pas de caída, procediendo al muestreo de dípteros Fannia canicularis (Linnaeus,
con manga entomológica y a la de coleópteros por 1761) C B 1
colecta manual. En dichos trabajos se recolectaron Muscidae
estados preimaginales y adultos, procediendo al Muscina levida (Harris, 1782) C B 1
sacrificado en acetato de etilo y conservación de Muscina stabulans (Fallén,
las muestras en alcohol al 70%, según lo estable- 1817) C B, O 1,2
cido en la bibliografía (Mariluis et al., 1994; Mulieri Musca domestica (Linnaeus,
et al., 2015; Martínez et al., 2016; Thompson & Pont, 1758) C B, O 1,2
1993). Del mismo modo, se encontraban conserva- Sarcophagidae
das algunas muestras de adultos, resultado de la
Microcerella spp. C B, O 1,2
captura de estados preimaginales, criados en con-
diciones de laboratorio. Stratiomyidae
Otros insectos de la colección provenían de Hermetia illucens (Linnaeus,
salidas de campo, con muestreos en la ciudad de 1758). C O 2
Diamante (32°04′S 60°39′O), utilizando trampas bo- Ulidiidae
tella (Hwang & Turner, 2005) cebadas con vísceras Ulidiidae sp. C B, O 1,2
de pollo y carne vacuna. Los resultados de estos
muestreos aún no han sido publicados. Cebo: C- Cerdo; P- Vísceras de pollo; V- Hígado de vaca.
Finalmente, se incorporan las muestras de un Localidad: B- Bertdeber; O- Oro Verde; D- Diamante. Recolector:
caso forense, remitidas por el Cuerpo Médico Fo- 1- Ferreras, 2017; 2- Engelman y Jacobi, 2009; 3- Sosa y
rense de la Provincia de Entre Ríos, provenientes Gallo, 2017 (No publicado); 4- Sosa, 2018 (No publicado).
de la ciudad de Concepción del Uruguay (32°29′S

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58°14′O). En tal hecho, un cráneo humano fue en- chloropyga, Paralucilia pseudolyrcea and Sarconesia chlorogaster
contrado en la vía pública, durante el año 2008. (Mariluis & Mulieri, 2003); Creophilus maxillosus (Aballay
Permaneció almacenado en la morgue hasta el año et al., 2008); Lucilia cuprina, L. eximia, L. ochricornis,
2015. Cuando se revisó, se encontraron insectos y Oxysarcodexia culmiforceps, Oxysarcodexia paulistanensis,
un pequeño hueso perteneciente al oído interno Ravinia aureopyga and Tricharaea (Sarcophagula) occidua
(martillo). Las muestras entomológicas fueron re- (Dufek et al., 2015).
mitidas en dos momentos distintos aunque se ana- The aim of the present article is to revise and
lizaron en conjunto. incorporate the families, genera and species collected
Las muestras revisadas se encontraban conser- in systematically developed studies in the localities of
vadas en etanol al 70%, sin identificación o división Betbeder and Oro Verde in the province of Entre Ríos
por especie, agrupadas según la fecha de colecta. within the published registers. Also, specimens from a
Para la identificación se procedió a la observa- forensic case and field work, yet unpublished, is also
ción directa mediante lupa binocular estereoscópi- included.
ca, utilizando las claves existentes para insectos de
interés forense en Argentina, Sudamérica y algunas MATERIALS AND MÉTHODS
extranjeras (Aballay et al., 2013; Aballay et al., 2014; Samples collected by Engelman & Jacobi
Almeida & Mise, 2009; Corrêa & Grossi, 2015; Car- (2009) in the town of Oro Verde (31°49′S 60°31′O)
valho & Mello-Patiu, 2008; Couri et al., 2008; Domín- and by Ferreras (2017) in the locality of Betbeder
guez, 2007; Hava & Kalik, 2005; Mulieri et al., 2010; (32°23′S  59°55′O) were revised and deposited in the
Mulieri et al., 2015; Patitucci et al., 2010; Vairo et al., reference collection of the Entomology Laboratory,
2011; Wachkoo et al., 2017; Whitworth, 2006, 2014; (FCyT-UADER / CICyTTP-CONICET) in the town
Whitworth et al., 2009). Las especies se ordenaron of Diamante. Both studies were carried out using
alfabéticamente dentro de la familia, subfamilia, domestic pigs exposed to weather conditions with an
tribu, género y subgénero. Tras la identificación, los exclusion pen and pitfall traps from the diptera sample
especímenes adultos representativos de los resul- with an entomologic hose and another of coleoptera
tados fueron montados en cajas entomológicas y for manual collection. In the mentioned studies
conservados en seco (Márquez Luna, 2005; Pérez et samples were taken in a pre-imaginal and adult state,
al., 2004). then immersed in ethyl acetate and finally preserved in
alcohol 70% (Mariluis et al., 1994; Mulieri et al., 2015;
RESULTADOS Martínez et al., 2016; Thompson & Pont, 1993). In the
Material examinado same way, some adult samples resulting from capture
Del total de muestras examinadas (1.214), 321 were found at pre-imaginal states, followed by rearing
(26%) correspondió a dípteros adultos, 108 (9%) a in laboratory conditions.
coleópteros adultos y 60 (5%) a adultos de otros Other insects of the collection were obtained
órdenes. Los estados preimaginales (725; 60%) no in field work and with samples from the town of
se clasificaron, por lo que los resultados expuestos Diamante (32°04′S 60°39′O), using bottle traps (Hwang
corresponden a los adultos, ya sea por captura di- & Turner, 2005) baited with chicken and cow innards.
recta o por recolección de estados preimaginales y These results have not been published.
posterior cría en laboratorio. Finally, samples from a forensic case remitted by the
Los estados de conservación y almacenamien- Medical Forensic Team of the Province of Entre Ríos,
to eran diversos, desde frascos de vidrio de 10 ml were incorporated; these samples were from the city of
con un espécimen hasta tubos Khan de 8 ml con 25 Concepción del Uruguay (32°29′S} 58°14′O). In this
especímenes. No es posible cuantificar el número case, a human skull was found on the public road in
de muestras perdidas debido a preservación de- the year 2008. It was stored in the morgue until the year
fectuosa, principalmente asociada a la pérdida del 2015. When it was revised, insects and a small bone
líquido conservante, aunque también se encontra- belonging to the internal ear (drum) were found. The
ron ejemplares con líquido conservante cuya inte- entomological samples were remitted at two different
gridad se había visto comprometida, incluyendo moments even though they were analysed together.
casos de deshidratación. The samples revised were found conserved in 70%
ethanol, without identification or division by species,
Géneros, familias y especies identificadas grouped according to the collection date.

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Se identificaron un total de siete familias de díp- For identification, the procedure was direct
teros: ocho especies Calliphoridae; una especie de observation through a stereo microscope, using the
Drosophilidae; una de Fanniidae; tres especies de identification keys for insects of forensic interest from
Muscidae; una especie de Stratiomyidae, y varios Argentina, South America and some other countries
especímenes de las familias Sarcophagidae y Uli- (Aballay et al., 2013; Aballay et al., 2014; Almeida &
diidae; (Tabla 1). Las familias con mayor cantidad Mise, 2009; Corrêa & Grossi, 2015; Carvalho & Mello-
de especímenes conservados fueron Calliphoridae Patiu, 2008; Couri et al., 2008; Domínguez, 2007; Hava
(120), seguida de Muscidae (75) y Faniidae (18). & Kalik, 2005; Mulieri et al., 2010; Mulieri et al., 2015;
A su vez, se identificaron seis familias de coleóp- Patitucci et al., 2010; Vairo et al., 2011; Wachkoo et al.,
teros: una especie de Cleridae; dos de Dermestidae; 2017; Whitworth, 2006, 2014; Whitworth et al., 2009).
una especie de Histeridae; una especie de Silfidae, The species were arranged alphabetically within the
y varios especímenes correspondientes a las fami- family, subfamily, tribe, genus and sub-genus. After
lias Scarabeidae y Trogidae (Tabla 2). El mayor nú- the identification, the adult specimens were kept in
mero de ejemplares conservados correspondió a la entomological boxes and preserved dried (Márquez
familia Dermestidae (35), seguido de Silfidae (27), Luna, 2005; Pérez et al., 2004).
Trogidae (26) y Scarabeidae (20).
Finalmente, se identificaron dos familias de hi- RESULTS
menópteros (17 ejemplares de Vespidae, 40 de For- Examined material
micidae) y dos de lepidópteros (tres especímenes) From the total of examined samples (1.214), 321
(Tabla 3). (26%) corresponded to adults, 108 (9%) to adult
Orden: Diptera coleoptera and 60 (5%) to adults from other orders.
Familia: Calliphoridae The pre-imaginal states (725; 60%) were not classified
Subfamilia: Calliphorinae because the results shown correspond with adults who
Tribu: Calliphorini were captured directly or collected in pre-imaginal
Género: Calliphora Robineau-Desvoidy, 1830 states and later raised in a laboratory.
Calliphora vicina (Robineau-Desvoidy, 1830) The conservation and storing states were diverse,
Sinonimia: Musca vomitoria minimus Harris, varying from glass containers of 10 ml with one
1776:435; Musca erythrocephala Meigen, 1826:62; specimen to Khan tubes of 8 ml with 25 specimens. It
Calliphora littoralis Robineau-Desvoidy, 1830:435; is not possible to quantify the number of lost samples
Calliphora monspeliaca Robineau-Desvoidy, owing to defective preservation principally associated
1830:436; Calliphora musca Robineau-Desvoidy, with the loss of conserving liquid, even though
1830:436; Calliphora nana Robineau-Desvoidy, examples with conserving liquid whose integrity had
1830:436; Calliphora spitzbergensis Robineau- been compromised as well as cases of dehydration
Desvoidy, 1830:435; Calliphora algira Macquart, were found.
1834:161; Calliphora scutellata Macquart, 1834:161;
Pollenia caerulescens Macquart, 1834:161; Musca Families, genera and identified species
thuscia Walker, 1849:897; Calliphora rufifacies Ma- A total of seven dipteran families were identified:
cquart, 1851:216; Musca aucta Walker, 1853:334; eight species of Calliphoridae; one species of
Calliphora insidiosa Robineau-Desvoidy, 1863:695. Drosophilidae; one species of Fanniidae; three species
of Muscidae; one species of Stratiomyidae, and various
Subfamilia: Chrysomyinae species of the families belonging to Sarcophagidae
Tribu: Chrysomyini and Ulidiidae; (Table 1). The families with a greater
Género: Chrysomya Robineau-Desvoidy, 1830 quantity of conserved specimens were Calliphoridae
Chrysomya albiceps (Wiedemann, 1819) (120), followed by Muscidae (75) and Faniidae (18).
Sinonimia: Musca bibula Wiedemann, 1830:672; In turn, six coleopteran families were identified:
Musca elara Walker, 1849:870; Musca emoda Walker, one species of Cleridae; two of Dermestidae; one
1849:872; Musca himella Walker, 1849:876; Lucilia species of Histeridae; one species of Silfidae, and
arcuata Macquart, 1851:220; Lucilia testaceifacies various specimens corresponding to the Scarabeidae
Macquart, 1851:220; Compsmyia albiceps var. fla- and Trogidae families (Table 2). The highest number
viceps Rondani, 1862:189; Somomyia nubiana Bi- of examples conserved corresponded with the
got, 1877:38; Somomyia arussica Corti, 1895:141; Dermestidae family (35), followed by Silfidae (27),

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Table 2. Coleoptera of forensic interest identified and location of the sustrata sampled in the province of Entre Ríos
Tabla 2. Coleópteros de interés forense identificados y ubicación de los sustratos muestreados en la provincia de Entre Ríos

Familia / Especie Cebo Localidad Recolector


Cleridae
Necrobia rufipes (De Geer, 1775) C, H O, C 2,3
Dermestidae
Dermestes (Dermestes) peruvianus (Castelnau, 1840) C O 2
Dermestes (Dermestinus) maculatus (DeGeer, 1774) C O 2
Histeridae
Euspilotus (Hesperosaprinus) azureus (Sahlberg, 1823) C O 2
Scarabaeidae
Scarabaeidae spp. C B, O 1,2
Silphidae
Oxelytrum discicolle (Brullé, 1840) C B, O 1,2
Trogidae
Polynoncus sp.* C B 1

Cebo: C- Cerdo; H- Restos humanos. Localidad: B- Bertdeber; O- Oro Verde; C- Concepción del Uruguay. Recolector: 1- Ferreras, 2017;
2- Engelman y Jacobi, 2009; 3- Caso Forense (No publicado). *Posiblemente, P. aricensis (Gutiérrez, 1950)

Somomyia annulata Brauer, 1899:523; Comp- Trogidae (26) and Scarabeidae (20).
somyia albiceps var. mascarenhasi Seguy, 1927:11; Finally, two hymenopteran families of (17
Chrysomyia albiceps Patton & Cushing, 1934:221. examples of Vespidae, 40 of Formicidae) and two of
lepidopterans (three specimens) were identified (Table
Género: Cochliomyia Townsend, 1915 3).
Cochliomyia macellaria (Fabricius, 1775) Order: Diptera
Sinonimia: Musca macellaria Fabricius, 1775:776; Family: Calliphoridae
Musca taniaria Wiedemann, 1830:406 lapsus; Musca Subfamily: Calliphorinae
laniaria Wiedemann, 1830:683; Chrysomya affinis Tribe: Calliphorini
Robineau-Desvoidy, 1830:445; Chrysomya viridula Genus: Calliphora Robineau-Desvoidy, 1830
Robineau-Desvoidy, 1830:445; Chrysomya lher- Calliphora vicina (Robineau-Desvoidy, 1830)
minieri Robineau-Desvoidy, 1830:446; Chrysomya Synonymy: Musca vomitoria minimus Harris,
tibialis Robineau-Desvoidy, 1830:446; Chrysomya 1776:435; Musca erythrocephala Meigen, 1826:62;
alia Robineau-Desvoidy, 1830:447; Chrysomya Calliphora littoralis Robineau-Desvoidy, 1830:435;
socia Robineau-Desvoidy, 1830:447; Chrysomya Calliphora monspeliaca Robineau-Desvoidy, 1830:436;
decora Robineau-Desvoidy, 1830:448; Chrysomya Calliphora musca Robineau-Desvoidy, 1830:436;
lepida Robineau-Desvoidy, 1830:448; Chrysomya Calliphora nana Robineau-Desvoidy, 1830:436; Calliphora
plaei Robineau-Desvoidy, 1830:448; Calliphora vio- spitzbergensis Robineau-Desvoidy, 1830:435; Calliphora
lacea Macquart, 1843:128; Lucilia vittata Macquart, algira Macquart, 1834:161; Calliphora scutellata Macquart,
1843:141; Lucilia durvillei Macquart, 1843:142; Mus- 1834:161; Pollenia caerulescens Macquart, 1834:161; Musca
ca certima Walker, 1849:873; Musca phauda Walker, thuscia Walker, 1849:897; Calliphora rufifacies Macquart,
1849:896; Lucilia cyanicolor Rondani, 1850:178; 1851:216; Musca aucta Walker, 1853:334; Calliphora
Calliphora tristriata Verhuell, 1850:273; Calliphora insidiosa Robineau-Desvoidy, 1863:695.
tibialis Macquart, 1851:215; Lucilia rubrifrons Ma-
cquart, 1851:223; Musca turbida Walker, 1853:336; Subfamily: Chrysomyinae
Musca fasciata Walker, 1853:337; Lucilia picicrus Tribe: Chrysomyini
Thomson, 1869:543; Lucilia curvipes Thomson, Genus: Chrysomya Robineau-Desvoidy, 1830
1869:544; Lucilia porticola Thomson, 1869:544; Lu- Chrysomya albiceps (Wiedemann, 1819)
cilia quadrisignata Thomson, 1869:544; Somomya Synonymy: Musca bibula Wiedemann, 1830:672;

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Table 3. Hymenoptera, aracnida and lepidoptera identified and Musca elara Walker, 1849:870; Musca emoda Walker,
location of the substrata sampled in the province of Entre Ríos. 1849:872; Musca himella Walker, 1849:876; Lucilia
Tabla 3. Himenópteros, arácnidos y lepidópteros identificados y
ubicación de los sustratos muestreados en la provincia de Entre arcuata Macquart, 1851:220; Lucilia testaceifacies
Ríos. Macquart, 1851:220; Compsmyia albiceps var. flaviceps
Rondani, 1862:189; Somomyia nubiana Bigot, 1877:38;
Somomyia arussica Corti, 1895:141; Somomyia annulata

Recolector
Brauer, 1899:523; Compsomyia albiceps var. mascarenhasi

Localidad
GENERO /Familia / Especie Seguy, 1927:11; Chrysomyia albiceps Patton & Cushing,
Cebo
1934:221.
HYMENOPTERA
Genus: Cochliomyia Townsend, 1915
Vespidae Cochliomyia macellaria (Fabricius, 1775)
Vespidae spp. C B, O 1,2 Synonymy: Musca macellaria Fabricius, 1775:776;
Formicidae Musca taniaria Wiedemann, 1830:406 lapsus; Musca
Formicidae spp. C B, O 1,2 laniaria Wiedemann, 1830:683; Chrysomya affinis
LEPIDOPTERA Robineau-Desvoidy, 1830:445; Chrysomya viridula
Saturniidae Robineau-Desvoidy, 1830:445; Chrysomya lherminieri
Hylesia nigricans H C 3 Robineau-Desvoidy, 1830:446; Chrysomya tibialis
Tineidae Robineau-Desvoidy, 1830:446; Chrysomya alia Robineau-
Tineola sp. C O 2 Desvoidy, 1830:447; Chrysomya socia Robineau-Desvoidy,
Cebo: C- Cerdo; H- Restos humanos. Localidad: B- Bertdeber; 1830:447; Chrysomya decora Robineau-Desvoidy,
O - Oro Verde; C- Concepción del Uruguay. Recolector: 1- 1830:448; Chrysomya lepida Robineau-Desvoidy,
Ferreras, 2017; 2- Engelman y Jacobi, 2009; 3- Caso Forense (No 1830:448; Chrysomya plaei Robineau-Desvoidy,
publicado).
1830:448; Calliphora violacea Macquart, 1843:128; Lucilia
vittata Macquart, 1843:141; Lucilia durvillei Macquart,
llavigena Bigot, 1877:249; Somomya aztequina Bi- 1843:142; Musca certima Walker, 1849:873; Musca phauda
got, 1877: 252; Somomyia iridicolor Bigot, 1887:599; Walker, 1849:896; Lucilia cyanicolor Rondani, 1850:178;
Chrysomya lynchi Lahille, 1915:12; Cochliomyia fon- Calliphora tristriata Verhuell, 1850:273; Calliphora
tana García, 1952:71. tibialis Macquart, 1851:215; Lucilia rubrifrons Macquart,
1851:223; Musca turbida Walker, 1853:336; Musca fasciata
Tribu: Phormiini Walker, 1853:337; Lucilia picicrus Thomson, 1869:543;
Género: Phormia Robineau-Desvoidy, 1830 Lucilia curvipes Thomson, 1869:544; Lucilia porticola
Phormia regina (Meigen, 1826) Thomson, 1869:544; Lucilia quadrisignata Thomson,
Sinonimia: Musca regina Meigen, 1826:58; Mus- 1869:544; Somomya llavigena Bigot, 1877:249; Somomya
ca thalassina Meigen, 1826:54; Phormia aurisquama aztequina Bigot, 1877: 252; Somomyia iridicolor Bigot,
Villeneuve, 1928:151; Musca accincta Wiedemann, 1887:599; Chrysomya lynchi Lahille, 1915:12; Cochliomyia
1830:407; Phormia cuprea Robineau-Desvoidy, fontana García, 1952:71.
1830:467; Phormia fulvifacies Robineau-Desvoidy,
1830:467; Phormia philadelphica Robineau-Desvoi- Tribe: Phormiini
dy, 1830:466; Phormia squalens Robineau-Desvoi- Genus: Phormia Robineau-Desvoidy, 1830
dy, 1830:468; Phormia vittata Robineau-Desvoidy, Phormia regina (Meigen, 1826)
1830:467; Phormia mollis Walker, 1849:892; Musca Synonymy: Musca regina Meigen, 1826:58;
proxima Walker, 1853:241; Somomyia lucens Ronda- Musca thalassina Meigen, 1826:54; Phormia aurisquama
ni, 1862:189; Lucilia rufipalpis Jaennicke, 1867:340; Villeneuve, 1928:151; Musca accincta Wiedemann,
Lucilia stigmaticalis Thomson, 1869:544; Somomyia 1830:407; Phormia cuprea Robineau-Desvoidy, 1830:467;
rufigena Bigot, 1888:598; Somomyia rupicola Bigot, Phormia fulvifacies Robineau-Desvoidy, 1830:467; Phormia
1888:603. philadelphica Robineau-Desvoidy, 1830:466; Phormia
squalens Robineau-Desvoidy, 1830:468; Phormia vittata
Subfamilia: Luciliinae Robineau-Desvoidy, 1830:467; Phormia mollis Walker,
Tribu: Luciliini 1849:892; Musca proxima Walker, 1853:241; Somomyia
Género: Lucilia Robineau-Desvoidy, 1830 lucens Rondani, 1862:189; Lucilia rufipalpis Jaennicke,
Lucilia cuprina (Wiedemann, 1830)

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Scientia
Sosa, Revisión de muestras forenses... Interfluvius 10(1):40-55, 2019 Paraná

Sinonimia: Lucilia amica Robineau-Desvoi- 1867:340; Lucilia stigmaticalis Thomson, 1869:544;


dy, 1830:453; Lucilia dorsali Robineau-Desvoi- Somomyia rufigena Bigot, 1888:598; Somomyia rupicola
dy, 1830:453; Lucilia usta Robineau-Desvoidy, Bigot, 1888:603.
1830:456; Lucilia elegans Robineau-Desvoidy,
1830:458; Musca varians Wiedemann, 1830:654; Subfamily: Luciliinae
Lucilia pubens Macquart, 1843:137; Lucilia argiri- Tribe: Luciliini
cephala Macquart, 1846:198; Musca fucina Walker, Genus: Lucilia Robineau-Desvoidy, 1830
1849:883; Musca serenissima Walker, 1852:340; Lucilia cuprina (Wiedemann, 1830)
Musca temperata Walker, 1852:340; Lucilia leucodes Synonymy: Lucilia amica Robineau-Desvoidy,
Frauenfeld, 1867:453; Strongyloneura nigricornis 1830:453; Lucilia dorsali Robineau-Desvoidy, 1830:453;
Senior-White, 1924:115; Lucilia pallescens Shannon, Lucilia usta Robineau-Desvoidy, 1830:456; Lucilia
1924:78; Lucilia cuprina Shannon, 1926:131; Lucilia elegans Robineau-Desvoidy, 1830:458; Musca varians
pseudosericata Gaminara, 1930:1267; Phaenicia pa- Wiedemann, 1830:654; Lucilia pubens Macquart,
llescens Hall, 1948:247; Lucilia cuprina Whitworth, 1843:137; Lucilia argiricephala Macquart, 1846:198;
2006:720 Musca fucina Walker, 1849:883; Musca serenissima Walker,
1852:340; Musca temperata Walker, 1852:340; Lucilia
Lucilia illustris (Meigen, 1826) leucodes Frauenfeld, 1867:453; Strongyloneura nigricornis
Sinonimia: Musca illustris Meigen, 1826:54; Senior-White, 1924:115; Lucilia pallescens Shannon,
Musca parvula Meigen, 1826:55; Lucilia equestris 1924:78; Lucilia cuprina Shannon, 1926:131; Lucilia
Meigen, 1826:57; Musca muralis Walker, 1849:888; pseudosericata Gaminara, 1930:1267; Phaenicia pallescens
Musca mollis Walker, 1849:892; Phaenicia azurea Hall, 1948:247; Lucilia cuprina Whitworth, 2006:720
Robineau-Desvoidy, 1863:788; Lucilia caesar Town-
send, 1893:468; Calliphora simulatrix Pandelle, Lucilia illustris (Meigen, 1826)
1896:218; Lucilia purpurea Townsend, 1908:123; Synonymy: Musca illustris Meigen, 1826:54; Musca
Lucilia infuscata Townsend, 1908:123; Lucilia illustris parvula Meigen, 1826:55; Lucilia equestris Meigen,
Whitworth, 2006:721 1826:57; Musca muralis Walker, 1849:888; Musca mollis
Walker, 1849:892; Phaenicia azurea Robineau-Desvoidy,
Lucilia sericata (Meigen, 1826) 1863:788; Lucilia caesar Townsend, 1893:468; Calliphora
Sinonimia: Musca coerulescens Meigen, simulatrix Pandelle, 1896:218; Lucilia purpurea Townsend,
1826:55; Musca nobilis Meigen, 1826:56; Musca te- 1908:123; Lucilia infuscata Townsend, 1908:123; Lucilia
gularia Wiedemann, 1830:655; Chrysomyia capen- illustris Whitworth, 2006:721
sis Robineau-Desvoidy, 1830:451; Lucilia modesta
Robineau-Desvoidy, 1830:454; Lucilia pubescens Lucilia sericata (Meigen, 1826)
Robinau-Desvoidy, 1830:454; Lucilia calida Robi- Synonymy: Musca coerulescens Meigen, 1826:55;
neau-Desvoidy, 1830:464; Lucilia chloris Halliday, Musca nobilis Meigen, 1826:56; Musca tegularia
1833:165; Lucilia pruinosa Meigen, 1830:294; Luci- Wiedemann, 1830:655; Chrysomyia capensis Robineau-
lia basalis Macquart, 1842:305; Lucilia flavipennis Desvoidy, 1830:451; Lucilia modesta Robineau-Desvoidy,
Macquart, 1842:296; Lucilia brunnicornis Macquart, 1830:454; Lucilia pubescens Robinau-Desvoidy, 1830:454;
1843:299; Lucilia latrifons Schiner, 1862:590; Phae- Lucilia calida Robineau-Desvoidy, 1830:464; Lucilia
nicia concinna Robineau-Desvoidy, 1863:50; Lucilia chloris Halliday, 1833:165; Lucilia pruinosa Meigen,
sayi Jaennicke, 1867:375; Lucilia frontalis Brauer & 1830:294; Lucilia basalis Macquart, 1842:305; Lucilia
Bergenstamm, 1891:420; Lucilia barberi Townsend, flavipennis Macquart, 1842:296; Lucilia brunnicornis
1908:121; Lucilia giraulti Townsend, 1908:121; Luci- Macquart, 1843:299; Lucilia latrifons Schiner, 1862:590;
lia enterophaga Seguy, 1928:158; Phaenicia sericata: Phaenicia concinna Robineau-Desvoidy, 1863:50; Lucilia
Hall 1948:259; Lucilia sericata Whitworth, 2006:721. sayi Jaennicke, 1867:375; Lucilia frontalis Brauer &
Bergenstamm, 1891:420; Lucilia barberi Townsend,
Subfamilia: Toxotarsinae 1908:121; Lucilia giraulti Townsend, 1908:121; Lucilia
Género: Sarconesia Bigot, 1857 enterophaga Seguy, 1928:158; Phaenicia sericata: Hall
Sarconesia chlorogaster (Wiedemann, 1831) 1948:259; Lucilia sericata Whitworth, 2006:721.
Sinonimia: Calliphora rufipalpis Macquart,
1843:289; Sarcophaga proerna Walker, 1849:835; Subfamily: Toxotarsinae

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Scientia
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Sarconesia chlorogaster var. minor Enderlein, Genus: Sarconesia Bigot, 1857


1940:646. Sarconesia chlorogaster (Wiedemann, 1831)
Synonymy: Calliphora rufipalpis Macquart, 1843:289;
Familia: Drosophilidae Sarcophaga proerna Walker, 1849:835; Sarconesia chlorogaster
Subfamilia: Drosophilinae var. minor Enderlein, 1940:646.
Tribu: Drosophilini
Subtribu: Drosophilina Family: Drosophilidae
Infratribu: Drosophiliti Subfamily: Drosophilinae
Género: Drosophila Fallén, 1823 Tribe: Drosophilini
Subgénero: Drosophila Sturtevant, 1939 Subtribe: Drosophilina
Drosophila (Drosophila) funebris (Fabricius, Infratribe: Drosophiliti
1787) Genus: Drosophila Fallén, 1823
Sinonimia: Musca funebris Fabricius, 1787:345; Subgenus: Drosophila Sturtevant, 1939
Musca erythrophthalma Panzer, 1794:24; Cordylura Drosophila (Drosophila) funebris (Fabricius, 1787)
placida Harris, 1835:600; Drosophila dudai Malloch, Synonymy: Musca funebris Fabricius, 1787:345;
1934:444; Drosophila clarkii Hutton, 1901:91; Musca Musca erythrophthalma Panzer, 1794:24; Cordylura placida
erythrocephala Neuhaus, 1886:318; Leucophenga Harris, 1835:600; Drosophila dudai Malloch, 1934:444;
atkinsoni Miller, 1921:302. Drosophila clarkii Hutton, 1901:91; Musca erythrocephala
Neuhaus, 1886:318; Leucophenga atkinsoni Miller,
Familia: Fanniidae 1921:302.
Género: Fannia Robineau-Desvoidy, 1830
Fannia canicularis (Linnaeus, 1761) Family: Fanniidae
Sinonimia: Musca lateralis Linnaeus, 1758:597; Genus: Fannia Robineau-Desvoidy, 1830
Musca canicularis Linnaeus, 1761:454; Anthomyia Fannia canicularis (Linnaeus, 1761)
chilensis Macquart, 1843:328; Anthomyia introduc- Synonymy: Musca lateralis Linnaeus, 1758:597;
ta Walker, 1853:362; Myantha canicularis Rondani, Musca canicularis Linnaeus, 1761:454; Anthomyia chilensis
1863:34; Homalomyia mexicana Bigot, 1885:284; Macquart, 1843:328; Anthomyia introducta Walker,
Fannia canicularis Stein, 1911:108. 1853:362; Myantha canicularis Rondani, 1863:34;
Homalomyia mexicana Bigot, 1885:284; Fannia canicularis
Familia: Muscidae Stein, 1911:108.
Subfamilia: Azeliinae
Tribus: Reinwardtiini Family: Muscidae
Género: Muscina Robineau-Desvoidy, 1830 Subfamily: Azeliinae
Muscina levida (Harris, 1782) Tribes: Reinwardtiini
Sinonimia: Musca levidus Harris, 1782:124; Mus- Genus: Muscina Robineau-Desvoidy, 1830
ca assimilis Fallén, 1823:56; Muscina fungivora Ro- Muscina levida (Harris, 1782)
bineau-Desvoidy, 1830:408; Curtonevra aperta Ma- Synonymy: Musca levidus Harris, 1782:124; Musca
cquart, 1834:278; Curtonevra nigripalpis Macquart, assimilis Fallén, 1823:56; Muscina fungivora Robineau-
1834:278; Musca borealis Zetterstedt, 1837:42; Desvoidy, 1830:408; Curtonevra aperta Macquart,
Anthomyia nigra Walker, 1849:931; Anthomyia 1834:278; Curtonevra nigripalpis Macquart, 1834:278;
omole Walker, 1849:930; Anthomyia similis Walker, Musca borealis Zetterstedt, 1837:42; Anthomyia nigra
1849:930; Blissonia caesia Robineau-Desvoidy, Walker, 1849:931; Anthomyia omole Walker, 1849:930;
1863:648; Blissonia rustica Robineau-Desvoidy, Anthomyia similis Walker, 1849:930; Blissonia caesia
1863:649. Robineau-Desvoidy, 1863:648; Blissonia rustica
Robineau-Desvoidy, 1863:649.
Muscina stabulans (Fallén, 1817)
Sinonimia: Musca prodeo Harris, 1782:141; Mus- Muscina stabulans (Fallén, 1817)
ca stabulans Fallen, 1817:252; Musca cinerascens Synonymy: Musca prodeo Harris, 1782:141; Musca
Wiedemann, 1817:79 Muscina grisea Robineau- stabulans Fallen, 1817:252; Musca cinerascens Wiedemann,
Desvoidy, 1830:408; Muscina picaena Robineau- 1817:79 Muscina grisea Robineau-Desvoidy, 1830:408;
Desvoidy, 1830:408; Musca tibialis Walker, 1836:355; Muscina picaena Robineau-Desvoidy, 1830:408; Musca

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Sosa, Revisión de muestras forenses... Interfluvius 10(1):40-55, 2019 Paraná

Cyrtonevra australis Macquart, 1847:85; Mydaea vo- tibialis Walker, 1836:355; Cyrtonevra australis Macquart,
miturianis Robineau-Desvoidy, 1849:XXVII. 1847:85; Mydaea vomiturianis Robineau-Desvoidy,
1849:XXVII.
Subfamilia: Muscinae
Tribu: Muscini Subfamily: Muscinae
Género: Musca Linnaeus, 1758 Tribe: Muscini
Musca domestica (Linnaeus, 1758) Genus: Musca Linnaeus, 1758
Sinonimia: Musca domestica Linnaeus, Musca domestica (Linnaeus, 1758)
1758:596; Musca contigua Walker, 1853:344; Musca Synonymy: Musca domestica Linnaeus, 1758:596;
harpyia Harris, 1869:335; Musca vicina Macquart, Musca contigua Walker, 1853:344; Musca harpyia Harris,
1851:226; Musca nebulo Fabricius, 1794:321; Asca- 1869:335; Musca vicina Macquart, 1851:226; Musca
ris conosoma Jordens, 1802:30; Musca umbraculata nebulo Fabricius, 1794:321; Ascaris conosoma Jordens,
Fabricius, 1805:294; Sphora australis Robineau- 1802:30; Musca umbraculata Fabricius, 1805:294; Sphora
Desvoidy, 1830:394; Musca nigricans Macquart, australis Robineau-Desvoidy, 1830:394; Musca nigricans
1835:268; Musca pellucens Meigen, 1835:71; Musca Macquart, 1835:268; Musca pellucens Meigen, 1835:71;
frontalis Macquart, 1843:308; Musca consangui- Musca frontalis Macquart, 1843:308; Musca consanguinea
nea Rondani, 1848:78; Musca antiquissima Walker, Rondani, 1848:78; Musca antiquissima Walker, 1849:901;
1849:901; Musca flavinervis Thomson, 1868:547; Musca flavinervis Thomson, 1868:547; Musca pampasiana
Musca pampasiana Bigot, 1888:607; Degeeria daw- Bigot, 1888:607; Degeeria dawsoni Rainbow, 1897:97;
soni Rainbow, 1897:97; Degeeria obscura Pont, Degeeria obscura Pont, 1968:89
1968:89
Family: Sarcophagidae
Familia: Sarcophagidae Subfamily: Sarcophaginae
Subfamilia: Sarcophaginae Genus: Microcerella (Macquart, 1861)
Género: Microcerella (Macquart, 1861) Microcerella spp.
Microcerella spp.
Family: Stratiomyidae
Familia: Stratiomyidae Subfamily: Hermetiinae
Subfamilia: Hermetiinae Genus: Hermetia Latreille, 1804
Género: Hermetia Latreille, 1804 Hermetia illucens (Linnaeus, 1758)
Hermetia illucens (Linnaeus, 1758) Synonymy: Musca illucens Linnaeus, 1758:589; Musca
Sinonimia: Musca illucens Linnaeus, 1758:589; leucopa Linnaeus, 1767:983; Hermetia rufiventris Fabricius,
Musca leucopa Linnaeus, 1767:983; Hermetia rufi- 1805:63; Hermetia pellucens Macquart, 1834: explication
ventris Fabricius, 1805:63; Hermetia pellucens Mac- des planches 4: Planche V, Figure 11; Hermetia nigrifacies
quart, 1834: explication des planches 4: Planche V, Bigot, 1879:200; Hermetia mucens Riley & Howard,
Figure 11; Hermetia nigrifacies Bigot, 1879:200; Her- 1889:353; Hermetia illucens var. Nigritibia Enderlein,
metia mucens Riley & Howard, 1889:353; Hermetia 1914:9; Hermetia illucens Copello, 1926:23.
illucens var. Nigritibia Enderlein, 1914:9; Hermetia
illucens Copello, 1926:23. Family: Ulidiidae
Ulidiidae sp.
Familia: Ulidiidae
Ulidiidae sp. Order: Coleoptera
Family: Cleridae
Orden: Coleoptera Genus: Necrobia Olivier 1795
Familia: Cleridae Necrobia rufipes (De Geer, 1775)
Género: Necrobia Olivier 1795 Synonymy: Clerus rufipes De Geer, 1775:165;
Necrobia rufipes (De Geer, 1775) Tenebrio dermestoides Piller & Mitterpacher, 1783:68;
Sinonimia: Clerus rufipes De Geer, 1775:165; Te- Corynetes glabra Jurin apud Champollion, 1814:44;
nebrio dermestoides Piller & Mitterpacher, 1783:68; Necrobia mumiarum Hope, 1834:54; Necrobia amethystina
Corynetes glabra Jurin apud Champollion, 1814:44; Stephens, 1835:417; Corynetes pallipes Klug, 1842:353;
Necrobia mumiarum Hope, 1834:54; Necrobia Necrobia aspera Walker, 1858:238; Necrobia pilifera Reitter,

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Scientia
Sosa, Revisión de muestras forenses... Interfluvius 10(1):40-55, 2019 Paraná

amethystina Stephens, 1835:417; Corynetes pallipes 1894:85; Necrobia foveicollis Schenkling, 1900:20; Necrobia
Klug, 1842:353; Necrobia aspera Walker, 1858:238; aeneipennis, Csiki, 1900:124; Necrobia cupreonitens Lauffer,
Necrobia pilifera Reitter, 1894:85; Necrobia foveico- 1905:406.
llis Schenkling, 1900:20; Necrobia aeneipennis, Csiki,
1900:124; Necrobia cupreonitens Lauffer, 1905:406. Family: Dermestidae
Subfamily: Dermestinae
Familia: Dermestidae Tribe: Dermestini
Subfamilia: Dermestinae Genus: Dermestes Linnaeus, 1758
Tribu: Dermestini Subgenus: Dermestes Linnaeus, 1758
Género: Dermestes Linnaeus, 1758 Dermestes (Dermestes) peruvianus (Castelnau, 1840)
Subgénero: Dermestes Linnaeus, 1758 Synonymy: Dermestes peruvianus Laporte de
Dermestes (Dermestes) peruvianus (Castelnau, Castelnau, 1840:34; Dermestes peruanus Erichson,
1840) 1847:95; Dermestes angustus Casey, 1900:143; Dermestes
Sinonimia: Dermestes peruvianus Laporte de angustatus Schaeffer, 1931:174; Dermestes (Dermestes)
Castelnau, 1840:34; Dermestes peruanus Erichson, peruvianus Háva & Kalík, 2005:96
1847:95; Dermestes angustus Casey, 1900:143; Der-
mestes angustatus Schaeffer, 1931:174; Dermestes Subgenus: Dermestinus Zhantiev, 1967
(Dermestes) peruvianus Háva & Kalík, 2005:96 Dermestes (Dermestinus) maculatus (De Geer, 1774)
Synonymy: Dermestes maculatus De Geer, 1774:223;
Subgénero: Dermestinus Zhantiev, 1967 Dermestes marginatus Thunberg, 1781:17; Dermestes
Dermestes (Dermestinus) maculatus (De Geer, vulpinus Fabricius, 1781:64; Dermestes australis Dejean,
1774) 1833:124; Dermestes senex Germar, 1824:84; Dermestes
Sinonimia: Dermestes maculatus De Geer, lateralis Sturm, 1826:130; Dermestes lupinus Christofori
1774:223; Dermestes marginatus Thunberg, & Jan; 1832:89; Dermestes senegalensis Dejean, 1833:124;
1781:17; Dermestes vulpinus Fabricius, 1781:64; Dermestes elongatus Hope, 1834:55; Dermestes roei Hope,
Dermestes australis Dejean, 1833:124; Dermestes 1834:55; Dermestes semistriatus Boheman, 1851:583;
senex Germar, 1824:84; Dermestes lateralis Sturm, Dermestes rattulus Mulsant and Rey, 1868:30; Dermestes
1826:130; Dermestes lupinus Christofori & Jan; vulpinus var. sudanicus Gredler, 1877:506; Dermestes
1832:89; Dermestes senegalensis Dejean, 1833:124; truncatus Casey, 1916:180
Dermestes elongatus Hope, 1834:55; Dermestes roei
Hope, 1834:55; Dermestes semistriatus Boheman, Family: Histeridae
1851:583; Dermestes rattulus Mulsant and Rey, Subfamily: Saprininae
1868:30; Dermestes vulpinus var. sudanicus Gredler, Genus: Euspilotus Lewis, 1907
1877:506; Dermestes truncatus Casey, 1916:180 Subgenus: Hesperosaprinus Wenzel in Arnett,
1962
Familia: Histeridae Euspilotus (Hesperosaprinus) azureus (Sahlberg, 1823)
Subfamilia: Saprininae Synonymy: Hister azureus Sahlberg, 1823:4; Saprinus
Género: Euspilotus Lewis, 1907 azureus Erichson, 1834:184; Euspilotus (Hesperosaprinus)
Subgénero: Hesperosaprinus Wenzel in Arnett, azureus Dégallier, 1981:59
1962
Euspilotus (Hesperosaprinus) azureus (Sahlberg, Family: Scarabaeidae
1823) Subfamily: Scarabaeinae
Sinonimia: Hister azureus Sahlberg, 1823:4; Sa- Scarabaeinae spp.
prinus azureus Erichson, 1834:184; Euspilotus (Hes-
perosaprinus) azureus Dégallier, 1981:59 Family: Silphidae
Subfamily: Silphinae
Familia: Scarabaeidae Genus: Oxelytrum Gistel, 1848
Subfamilia: Scarabaeinae Oxelytrum discicolle (Brullé, 1840)
Scarabaeinae spp. Synonymy: Silpha discicolle Brullé (& Blanchard),
1840:75; Necrodes analis Chevrolat, 1843:26; Hyponecrodes
Familia: Silphidae analis (Chevrolat) Kraatz, 1876:376; Hyponecrodes

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Scientia
Sosa, Revisión de muestras forenses... Interfluvius 10(1):40-55, 2019 Paraná

Subfamilia: Silphinae discicollis (Brullé), Portevin, 1905:50; Hyponecrodes


Género: Oxelytrum Gistel, 1848 (Hyponecrodes) discicollis var. elongatus Portevin, 1921:84;
Oxelytrum discicolle (Brullé, 1840) Hyponecrodes discicollis var. discretus Portevin,
Sinonimia: Silpha discicolle Brullé (& Blanchard), 1921:84; Hyponecrodes (Hyponecrodes) discicollis (Brullé)
1840:75; Necrodes analis Chevrolat, 1843:26; Hy- Portevin, 1921:85; Silpha (Oxelytrum) discicolle (Brullé)
ponecrodes analis (Chevrolat) Kraatz, 1876:376; Hatch, 1928:115; Oxelytrum discicolle (Brullé) Peck &
Hyponecrodes discicollis (Brullé), Portevin, 1905:50; Anderson, 1985:263
Hyponecrodes (Hyponecrodes) discicollis var. elonga-
tus Portevin, 1921:84; Hyponecrodes discicollis var. Family: Trogidae
discretus Portevin, 1921:84; Hyponecrodes (Hypone- Genus: Polynoncus Burmeister, 1847
crodes) discicollis (Brullé) Portevin, 1921:85; Silpha Polynoncus spp.
(Oxelytrum) discicolle (Brullé) Hatch, 1928:115;
Oxelytrum discicolle (Brullé) Peck & Anderson, Order: Himenoptera
1985:263 Family: Vespidae
Vespidae spp.
Familia: Trogidae
Género: Polynoncus Burmeister, 1847 Family: Formicidae
Polynoncus spp. Formicidae spp.

Orden: Himenoptera Order: Lepidoptera


Familia: Vespidae Family: Saturniidae
Vespidae spp. Genus: Hylesia Hübner, 1820
Hylesia nigricans (Berg, 1875)
Familia: Formicidae Synonymy: Hylesia nigricans Berg, 1875:158;
Formicidae spp. Micrattacus nigricans Burmesiter, 1878:485; Hylesia
fulviventris Berg, 1883:157; Hylesia nigricans Dyar,
Orden: Lepidoptera 1898:150.
Familia: Saturniidae
Género: Hylesia Hübner, 1820 Family: Tineidae
Hylesia nigricans (Berg, 1875) Genus: Tineola
Sinonimia: Hylesia nigricans Berg, 1875:158; Tineola sp.
Micrattacus nigricans Burmesiter, 1878:485; Hylesia
fulviventris Berg, 1883:157; Hylesia nigricans Dyar, CONCLUSIONS
1898:150. A preliminary list of arthropods of forensic
interest that are conserved in the reference collection
Familia: Tineidae of the Laboratory of Entomology Laboratorio de
Género: Tineola Entomología (FCyT-UADER / CICyTTP-CONICET)
Tineola sp. in the town of Diamante has been presented here.
These specimens include those registered in the
CONCLUSIONES localities of Diamante, Oro Verde, Concepción del
Se ha presenta un listado preliminar de artró- Uruguay and Betbeder. Until now twenty species of
podos de interés forense conservados en la colec- arthropods distributed in seven families of diptera,
ción de referencia del Laboratorio de Entomología six of coleoptera, two of himenoptera and two
(FCyT-UADER / CICyTTP-CONICET) en la ciudad de of lepidoptera have been identified. The state of
Diamante. Estos especímenes incluyen registros de conservation of some of the samples has precluded
las localidades de Diamante, Oro Verde, Concep- identification at species level in a categorical manner,
ción del Uruguay y Betbeder. Al momento se han and thus work on the classification of material
logrado determinar veinte especies de artrópodos, continues.
distribuidos en siete familias de dípteros, seis de
coleópteros, dos de himenópteros y dos de lepi-
dópteros. El estado de conservación de algunas

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Scientia
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muestras no ha permitido realizar la identificación X. (2004). Observations on the succession patterns of


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se sigue trabajando en la clasificación del material. of Southeastern Brazil. Forensic Medicine and Toxicology,
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Scientia
Sosa, Revisión de muestras forenses... Interfluvius 10(1):40-55, 2019 Paraná

APÉNDICES

1. Fuentes de la colección. Revisión de muestras recolectadas y criadas en condiciones de laboratorio (Ferreras,


2017)
1. Sample source. Revision of samples collected and raised in laboratory conditions (Ferreras, 2017)

2. Fuentes de la colección. Fragmento de coleóptero


presente en la muestra remitida por el Cuerpo Médico
Forense (Caso Forense, No publicado).
2. Sample source. Fragment of beatle found in the
sample given in by the Forensic Medical Team (Forensic
Case, Unpublished)

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Scientia
Sosa, Revisión de muestras forenses... Interfluvius 10(1):40-55, 2019 Paraná

APPENDIX

3. Fuentes de la colección. Estado de conservación de muestra remitida por el Cuerpo Médico Forense (Caso
Forense, No publicado). La imagen ilustra el estado en que fue recepcionada la muestra, posterior a la separación
del material útil para identificación (Fecha ingreso 02/06/2015).
3. Sample source. State of conservation of the sample sent by the Forensic Medical Team (Forensic Case, Unpublished).
The image shows the state in which the sample was received prior to the separation of material that was useful for
identification (Date of reception 02/06/2015).

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Interfluvius 10 (1): 46-79, 2019 - Paraná ISSN 1853-4422 (printed) ISSN 1853-4430 (on line)

PALYNOLOGY AS A FORENSIC TOOL: STUDIES ON


SEDIMENTOLOGICAL SAMPLES

LA PALINOLOGÍA COMO HERRAMIENTA FORENSE: ESTUDIOS EN


MUESTRAS SEDIMENTOLÓGICAS
Mario Bordi1,2, Mariana Bertos1, Marcia Gallo1 & Guillermina Fagúndez1

1
Laboratorio de Actuopalinología - CICYTTP (CONICET-Prov. ER.-UADER). Materi y España, E3105BWA Diamante, Entre Ríos, Argen-
tina.
2 Dirección de Criminalística, Policía de la Provincia de Entre Ríos. Paraná, Entre Ríos, Argentina.

mariobordi@hotmail.com

ABSTRACT. This study focuses on verifying the potential of pollen analysis in sediment
as associative evidence of the forensic scenario through the use of two types of samples
(superficial sediment and accumulated sediment in the sole of footwear), in two sites with
different botanical compositions from the west of Entre Ríos. The pollinic analysis reveals
two very different environments, and this in turn validates the method and selection of
the sampling points, and also favours the determination of the geographical origin of the
samples. On the other hand, there was evidence of a close relationship between the pollen
spectra of both types of samples from each study site, suggesting that such sediment lodged
in the sole of the footwear represents a useful approximation for the definition of the
forensic scenario. These results indicate that the pollen analysis of soil samples is a valuable
tool for associating people or objects with the scene of the crime, thus being another valuable
tool to the analysis of forensic cases.

KEY WORDS. Pollen. Sediment. Associative evidence. Criminalistics.

*work presented by Mario Bordi to obtain the title of Licenciado (B Sc) in Biology of the FCyT-UADER.

RESUMEN. En el presente trabajo se propuso verificar el potencial del análisis polínico


en sedimentos como evidencia asociativa del escenario forense, a través del uso com-
parativo de dos tipos de muestras (sedimento superficial y sedimento acumulado en
la suela del calzado), en dos sitios con diferente composición botánica del oeste entre-
rriano. Del análisis polínico resultan dos ambientes bien diferenciados, lo que valida el
método y la selección de los puntos de muestreo, y asimismo favorece la determina-
ción del origen geográfico de las muestras. Por otro lado, se evidenció una estrecha
relación entre los espectros polínicos de ambos tipos de muestras de cada sitio de
estudio, lo cual sugiere que el sedimento alojado en la suela del calzado representa
una aproximación útil para la definición del escenario forense. Estos resultados señalan
que el análisis del polen de muestras de suelo es una valiosa herramienta para asociar
personas u objetos con la escena del crimen, constituyéndose en un elemento más de
valoración en el análisis de casos forenses.

PALABRAS CLAVES. Polen. Sedimentos. Evidencia asociativa. Criminalística.

*trabajo para optar al título de Licenciado en Biología de la FCyT-UADER, de Mario Bordi.

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Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

Recibido: 24 abril de 2019


Aceptado: 15 de junio de 2019

INTRODUCCIÓN INTRODUCTION
La Palinología es el estudio de los granos de po- Palynology is the study of pollen grains and plant
len y esporas de las plantas en un sentido estricto, spores in a strict sense, and, in a more ample sense it
considerándose en un sentido más amplio también refers also to other remains of plants and acid-resistant
a otros restos de plantas y microorganismos ácido- micro-organisms that are referred to as palynomorphs
resistentes comprendidos bajo el término pali- (Erdtman, 1969; Mildenhall, 2003). This discipline has
nomorfos (Erdtman, 1969; Mildenhall, 2003). Esta developed thanks to technological advances, and it is
disciplina se ha desarrollado gracias a los avances especially so of microscopy (Jansonius & Mc. Gregor,
de la tecnología, especialmente de la microscopía 1996; Bryant & Mildenhall, 1998). The great diversity
(Jansonius & Mc. Gregor, 1996; Bryant & Mildenhall, of pollen types seen in the vegetal kingdom and the
1998). La gran diversidad de tipos polínicos halla- determining of the morphological traits within the
dos en el reino vegetal y la determinación de los same taxon soon converted Palynology into a source
rasgos morfológicos dentro de un mismo taxón, of findings usable in Taxonomy (Sáenz, 1978). These
convirtió pronto a la Palinología en una fuente de particularities are those that connect the Palynology
caracteres utilizables en Taxonomía (Sáenz, 1978). with others science and one of them is Criminalistics
Estas particularidades son las que unen a la Palino- (Mildenhall et al., 2006; Hesse et al., 2009).
logía con otras ciencias, una de ellas es la Crimina- In criminal investigation the sediment samples
lística (Mildenhall et al., 2006; Hesse et al., 2009). constitute important evidence at the time of solving
En la investigación criminal las muestras de se- diverse criminal cases. For example, soil samples that
dimentos constituyen una evidencia importante a adhere to a homicide victim can be compared with
la hora de resolver diversos casos criminales. Por those found at the place of the happening with the
ejemplo, comparar las muestras de suelo adherido aim of establishing if death took place in this location
en una víctima de homicidio con el lugar del hecho, or if the corpse was taken to this location post mortem,
con motivo de establecer si se produjo la muerte perhaps passing through another place; to confront
en ese lugar o fue llevado post mortem, pasando sediment that adheres to a homicide victim, bearing in
quizás por otro lugar; confrontar sedimento adhe- mind the objects that lead to a possible attack; having
rido a una víctima de homicidio, con la presente en taken into account the sediment found on the shoes of
objetos que vinculen a un posible victimario; cote- the suspects considering the soil of the scene of the
jar sedimentos encontrados en calzados de sospe- crime; among other factors (Bryant et al., 1990).
chosos con el suelo del lugar del hecho; entre otros In a forensic scenario pollen grains can be
(Bryant et al., 1990). recuperated from dust, clothes, hair, shoes and
En un escenario forense los granos de polen practically any object found on the victim, thus
pueden ser recuperados del polvo, de prendas, del allowing soil analysis and also establishing a level of
pelo, de zapatillas y prácticamente cualquier obje- correspondence between the palynological material and
to encontrado, permitiendo de esta manera no solo the original location where the crime was committed
realizar el análisis de suelo, sino también establecer (Bryant et al., 1996; Martínez-Sánchez et al., 2008).
el grado de correspondencia entre el material pa- The analysis of pollinic sediment is based on seven
linológico y la localización original de la comisión basic interwoven components: (1) biological production
del delito (Bryant et al., 1996; Martínez-Sánchez et of pollen and spores, (2) biotic dispersion (insects
al., 2008). and other pollination vectors) or abiotic dispersion
El análisis polínico de sedimentos se funda- (water, atmospheric currents), (3) deposition on the
menta en siete componentes básicos encadena- continental or underwater surface, (4) preservation
dos: (1) producción biológica de polen y esporas, and/or fossilisation, (5) inclusion in the taphocoenose,
(2) dispersión biótica (insectos y otros vectores de (6) possibilities of taxonomic discrimination at the
polinización) o abiótica (agua, corrientes atmosfé- microscope and (7) representation of the pollen
ricas), (3) deposición en la superficie continental spectrum respect to the vegetation producing it (Birks,
o subacuática, (4) preservación y/o fosilización, 1986).

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Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

(5) inclusión en la tafocenosis, (6) posibilidades de In the qualification of any sedimentary material
discriminación taxonómica al microscopio y (7) re- of palynological interest, experimental studies that are
presentatividad del espectro polínico respecto a la capable of establishing the grade of correspondence
vegetación productora (Birks, 1986). between the said material and the floristic content that
En la cualificación de cualquier tipo de material generate the pollen assemblage are required. Forensic
sedimentario de interés palinológico se requieren Palynology emerges precisely before the possibilities
estudios experimentales que sean capaces de es- of reconstructing environmental contexts within the
tablecer el grado de correspondencia entre dicho legal framework (Martínez-Sánchez et al., 2008).
material y el contexto florístico que generan los In recent years, Forensic Palynology has succeeded
espectros polínicos. La Palinología Forense surge in reuniting an abundant casuistry, but its origins are
precisamente ante las posibilidades de reconstruir found in work carried out in the 60´s, with some
contextos ambientales utilizables en el marco legal cases that awoke public interest by its novelty and
(Martínez-Sánchez et al., 2008). criminalistics implications (Martínez-Sánchez et al.,
Durante los últimos años, la Palinología Foren- 2008). Paradigmatic cases have been seen in Switzerland,
se ha conseguido reunir una casuística abundan- Austria (Erdtman, 1969), Ex-Yugoslavia (Brown, 2006)
te, pero sus orígenes se encuentran en trabajos and New Zealand (Mildenhall, 2006), among others. In
realizados en los años 60, con algunos casos que the present work, the study proposal comprised the
despertaron el interés público por su novedad e verification of the potential of the pollen analysis of
implicancias criminalísticas (Martínez-Sánchez et the sediments in the definition of the forensic scenario
al., 2008). Se conocen casos paradigmáticos en Sui- and, as associative evidence, through the comparative
za, Austria (Erdtman, 1969), la antigua Yugoslavia use of two types of samples (superficial sediment and
(Brown, 2006) y, Nueva Zelanda (Mildenhall, 2006), sediment accumulated on shoe sole), in two locations
entre otros. En el presente trabajo se propuso veri- with different botanic composition to the west of
ficar el potencial del análisis polínico en sedimen- Entre Ríos.
tos en la definición del escenario forense y como
evidencia asociativa a través del uso comparativo MATERIALS AND METHODS
de dos tipos de muestras (sedimento superficial y Botanical characterisation of the study site
sedimento acumulado en la suela del calzado), en From the point of view of Phytogeography, both
dos sitios con diferente composición botánica del study sites are found within the ecoregion of the
oeste entrerriano. Espinal subregion of Ñandubay (Burkart et al., 1999).
The vegetation of this subregion is characterised
MATERIALES Y MÉTODOS by its deciduous xerophilous forests, generally open,
Caracterización botánica de las zonas de es- composed of a strata of low trees (6 to 12 m), with
tudio some isolated species that exceptionally surpass 12
Desde el punto de vista de la Fitogeografía, m. The principally dominant species are “ñandubay”
ambos sitios de estudio se encuentran dentro de (Prosopis affinis Spreng.), “black carob tree” which is
la ecoregión del Espinal subregión del Ñandubay a South American relative of the Mesquite (Prosopis
(Burkart et al., 1999). nigra (Griseb.) Hieron.) and “thorn trees” (Acacia
La vegetación de esta subregión se caracte- caven (Molina) Seigler & Ebinger) accompanied by
riza por sus bosques xerófilos caducifolios, ge- other ligneous species such as “white quebracho”
neralmente abiertos, compuestos por un estrato (Aspidosperma quebracho-blanco Schltdl.), “white carob”
arbóreo bajo (6 a 12 m), con algunos ejemplares (Prosopis alba Griseb.), chañar” (Geoffroea decorticans
aislados que excepcionalmente sobrepasan los 12 (Gillies ex Hook. & Arn.) Burkart), “desert hackberry”
m. Las especies dominantes principalmente son (Celtis ehrenbergiana (Klotzsch) Liebm.), “frankinciense”
“ñandubay” (Prosopis affinis Spreng.), “algarrobo or “molle” (Schinus longifolius (Lindl.) Speg.), “molle”
negro” (Prosopis nigra (Griseb.) Hieron.) y “espinillo” or “california pepper trees” (Schinus molle L.), “jungle
(Acacia caven (Molina) Seigler & Ebinger) acompa- plum” (Sideroxylon obtusifolium (Roem. & Schult.) T.D.
ñadas por otras especies leñosas como “quebracho Penn.), “sombra de toro” or “loose quebracho” (Jodina
blanco” (Aspidosperma quebracho-blanco Schltdl.), rhombifolia (Hook. & Arn.) Reissek), “brea” (Acacia
“algarrobo blanco” (Prosopis alba Griseb.), chañar” atramentaria Benth.) and “coronillo” (Scutia buxifolia
(Geoffroea decorticans (Gillies ex Hook. & Arn.) Bur- Reissek), among others. The presence of “caranday

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Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

kart), “tala” (Celtis ehrenbergiana (Klotzsch) Liebm.), palms” is characteristic (Trithrinax campestris (Burmeist.)
“incienso” (Schinus longifolius (Lindl.) Speg.), “molle” Drude & Griseb); this is a palm of slight height that
(Schinus molle L.), “guaraniná” (Sideroxylon obtusifo- can be pure or mixed with other species that are typical
lium (Roem. & Schult.) T.D. Penn.), “sombra de toro” of the wood. The shrub stratum is poor or null, from
(Jodina rhombifolia (Hook. & Arn.) Reissek), “brea” 2 to 4 m in height with a cover of up to 50%. There
(Acacia atramentaria Benth.) y “coronillo” (Scutia is an abundance of leaning Ephedra shrubs (Jozami &
buxifolia Reissek), entre otras. Es característica la Muñoz, 1984). The herbaceous stratum reaches 1 m,
presencia de “palma caranday” (Trithrinax campes- with a high cover and is rich in gramineae, dominated
tris (Burmeist.) Drude & Griseb.), una palmera de by species of the genus Paspalum, Axonopus and
poca altura que puede formar asociaciones puras Andropogon. The woody plants serve as supports for
o mezclarse con las especies típicas del bosque. El creepers, lianas and many epiphytes between which
estrato arbustivo es pobre o nulo, de 2 a 4 m de al- can be found mosses, lichens, ferns and superior plants
tura con una cobertura de hasta 50%. Se destacan (Menéndez & La Rocca, 2006).
abundantes arbustos apoyantes de Ephedra (Joza- In the waterways, a narrow stretch of vegetation,
mi & Muñoz, 1984). El estrato herbáceo es de hasta called Hydrophilous Woods or Gallery Forests can be
1 m, con una alta cobertura y rico en gramíneas, found (Menéndez & La Rocca, 2006), these are a true
dominado por especies de los géneros Paspalum, relic of the ecoregion that is the Parana Jungle (Burkart
Axonopus y Andropogon. Las plantas leñosas sir- et al., 1999). The area has a diversity of tree, shrub,
ven de soporte a enredaderas, lianas y a numer- creeper and epiphyte species. Among the tree species
osas plantas epífitas entre las que se encuentran there generally does not exist one that dominates and
musgos, líquenes, helechos y plantas superiores some of the species that stand out, among others are:
(Menéndez & La Rocca, 2006). “laurel” (Nectandra angustifolia (Schrad.) Nees & Mart.),
Sobre los cursos de agua, se encuentra una “guayabo” (Myrcianthes cisplatensis (Cambess.) O. Berg),
franja de vegetación estrecha, denominada Bos- “arrayán” (Blepharocalyx salicifolius (Kunth) O. Berg),
ques hidrófilos o en galería (Menéndez & La Rocca, “marmelero” (Ruprechtia laxiflora Meisn.), “ñangapirí”
2006), los que constituyen verdaderos relictos de la (Eugenia uniflora L.), “canelón” (Myrsine laetevirens (Mez)
ecoregión Selva Paranaense (Burkart et al., 1999). Arechav.), “laurel negro” (Ocotea acutifolia (Nees) Mez),
Son muy diversos en especies arbóreas, arbustivas, “pacara ear pod tree” (Enterolobium contortisiliquum (Vell.)
trepadoras y epífitas. Entre las especies arbóreas Morong), “maloxo” (Albizia inundata (Mart.) Barneby
generalmente no existe dominancia y entre otras se & J.W. Grimes), “molle” (Schinus fasciculatus (Griseb.)
destacan “laurel” (Nectandra angustifolia (Schrad.) I.M. Johnst.), “curupí” (Sapium haematospermun Müll.
Nees & Mart.), “guayabo” (Myrcianthes cisplatensis Arg.), “aliso de río” (Tessaria integrifolia Ruiz & Pav.),
(Cambess.) O. Berg), “arrayán” (Blepharocalyx sali- “roble” (Tabebuia nodosa (Griseb.) Griseb.), “camboatá”
cifolius (Kunth) O. Berg), “marmelero” (Ruprechtia (Cupania vernalis Cambess.), “Humboldt’s willow” (Salix
laxiflora Meisn.), “ñangapirí” (Eugenia uniflora L.), humboldtiana Willd.) and species of Prosopis and Acacia,
“canelón” (Myrsine laetevirens (Mez) Arechav.), which are characteristic of the district.
“laurel negro” (Ocotea acutifolia (Nees) Mez), “tim- 1- Parque (Park) General San Martín (PSM)
bó colorado” (Enterolobium contortisiliquum (Vell.) Is located within the protected natural area known
Morong), “timbó blanco” (Albizia inundata (Mart.) as “Parque Escolar Berduc” (31º 43´ S; 60º 33´ W).
Barneby & J.W. Grimes), “molle” (Schinus fasciculatus It was created in the year 1950 and used as a Multi-
(Griseb.) I.M. Johnst.), “curupí” (Sapium haematos- Purpose Reserve in the year 1995. The surface area
permun Müll. Arg.), “aliso de río” (Tessaria integrifolia measures 594 hectares and is situated 23 km to the east
Ruiz & Pav.), “toto-ratay” (Tabebuia nodosa (Griseb.) of the city of Paraná, in La Picada, Department of
Griseb.), “camboatá” (Cupania vernalis Cambess.), Paraná, Province of Entre Ríos (Fig. 1).
“sauce criollo” (Salix humboldtiana Willd.) y las espe- Other than the vegetation that is typical of the
cies de Prosopis y Acacia características del distrito. ecoregion where it is located, numerous exotic, woody
1- Parque General San Martín (PSM) plants are found here, such as the “honey locust”
Se halla comprendido dentro del área natural (Gleditsia triacanthos L.), “china berry” (Melia azedarach
protegida “Parque Escolar Berduc” (31º 43´ S; 60º L.), “mulberry” (Morus alba L.), “glossy privet”
33´ O). Fue creado en el año 1950 y constituido (Ligustrum lucidum W. T. Aiton) and “Chinese privet”
como Reserva de Uso Múltiple en el año 1995. Tie- (Ligustrum sinense Lour.), which are among the most

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Scientia
Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

ne una superficie de 594 ha y está situado a 23 km abundant (Muzzachiodi et al., 1998).


al este de la ciudad de Paraná, en La Picada, Depar- The park has, in general, three types of
tamento Paraná, provincia de Entre Ríos (Fig. 1). environments: the Native, which is characterised by
Además de la vegetación típica de la ecoregión the presence of autochthonous vegetation and by
en donde se encuentra, pueden observarse nume- different vegetal strata: 1) Castor beans: dominated
rosas plantas leñosas exóticas como “acacia negra” by shrubs of the genus Baccharis, 2) Grasslands:
(Gleditsia triacanthos L.), “paraíso” (Melia azedarach constituted principally by “paja brava” (Scirpus giganteus
L.), “morera” (Morus alba L.), “ligustro” (Ligustrum Kunth), 3) Willow laden areas: represented by “sauce
lucidum W. T. Aiton) y “ligustrina” (Ligustrum sinense criollo” or “native willow”, 4) Xerophytic woodlands:
Lour.), entre las más abundantes (Muzzachiodi et dominated by species of the genus Prosopis and 5)
al., 1998). Woodlands dominated by “molle” and “quebrachillo”
El Parque posee en general tres tipos de am- (Acanthosyris spinescens (Mart. & Eichler) Griseb.);
bientes: el Nativo, que se caracteriza por la presen- the Exotic, which is characterised by the presence
cia de vegetación autóctona y por diferentes estra- of species with different levels of representation:
tos vegetales: 1) Chilcales: dominado por arbustos 1) “Mulberry” woodlands, 2) Woodlands of “black
del género Baccharis, 2) Pajonales: constituidos wattle” and 3) Woodlands of “privet”; and the Mixed,
principalmente por “paja brava” (Scirpus giganteus that possesses different proportions of native and
Kunth), 3) Sauzales: representado por “sauce crio- exotic species: 1) “Chilcales” with “Humboldt’s
llo”, 4) Bosque xerofíticos: dominados por especies willow” and “mulberry”, 2) Woodlands of “guayabo”
del género Prosopis y 5) Bosque dominado por “mo- and “glossy privet”, 3) Woodlands of “honey locust”,
lle” y “quebrachillo” (Acanthosyris spinescens (Mart. “molle” and “quebrachillo”, 4) Woodlands of “honey
& Eichler) Griseb.); el Exótico, que se caracteriza por locust”, “molle” and “glossy privet”, 5) Woodlands of
la presencia de especies con diferentes grados de “molle”, “quebrachillo” and “honey locust” (Berduc et
representatividad: 1) Bosque de “mora”, 2) Bosque al., 2010).
de “acacia negra” y 3) Bosque de “ligustro”; y el Mix- 2- Tapera Alberdi (TA)
to, que posee diferentes proporciones de especies This location belongs to the peri-urban zone of the
nativas como exóticas: 1) “Chilcales” con “sauces” locality of Oro Verde, that is located 3.100 m towards
y “moras”, 2) Bosque de “guayabo” y “ligustro”, 3) the South of this city (31º 51’ S; 60º 31’ W), next to
Bosque de “acacia negra”, “molle” y “quebrachillo”, the (Rural Agro Technical School) Escuela Normal
4) Bosque de “acacia negra”, “molle” y “ligustro”, 5) Rural Nº1 Juan Bautista Alberdi. This institution has
Bosque de “molle”, “quebrachillo” y “acacia negra” 270 hectares within its boundaries and a sector of
(Berduc et al., 2010). native forest of approximately 17 hectares which has
2- Tapera Alberdi (TA) been declared a Protected Natural Area. In addition
Este sitio se halla en la zona periurbana de la lo- to the flora that is typical of the ecoregion there can
calidad de Oro Verde, ubicado a 3.100 m hacia el also be found an artificial lake with an abundance
sur de dicha ciudad (31º 51’ S; 60º 31’ O), lindante of hydrophilous species; and a profusion of planted
a la Escuela Normal Rural Nº1 Juan Bautista Alber- species used as fodder (Fabaceae-Papilionoideae),
di. Esta institución posee dentro de su predio de various fruit trees and numerous cultivated species and
270 ha, un sector de monte nativo de aproximada- also cultivated arbores in the pathways that serve for
mente 17 ha, el cual ha sido declarado Área Natural internal communication.
Protegida. Además de la flora típica de la ecoregión, The sampling site is an abandoned house that is
también se halla en su predio un tajamar con abun- situated 300 m to the south of the Natural Protected
dantes especies hidrófilas; y se encuentran profu- Area which has adventitious or cultivated species such
sas plantaciones de especies forrajeras (Fabace- as “China berry” (Melia azedarach), “glossy privet”
ae-Papilionoideae), frutales variados, y numerosas (Ligustrum lucidum), “mulberry” (Morus alba), “bitter
especies cultivadas principalmente arbóreas en los orange” (Citrus aurantium L.), “castor bean plants”
accesos y vías de comunicación interna. (Ricinus communis L.), “cyprus” (Cupressus sp.) and native
El sitio puntual de muestreo es una tapera que trees such as “ombú” (Phytolacca dioica L.), “jacarandá”
se ubica a 300 m al sur del Área Natural Protegida, (Jacaranda mimosifolia D. Don), “yellow elders” (Tecoma
en la que se encuentran especies adventicias o cul- stans (L.) Juss. ex Kunth), and “spiderwort” (Tradescantia
tivadas como “paraíso” (Melia azedarach), “ligustro” spp.), among others. Next to this site is the INTA

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Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

(Ligustrum lucidum), “morera” (Morus alba), “naran- Experimental Agricultural Station (EEA), Paraná. The
jo amargo” (Citrus aurantium L.), “tártago” (Ricinus surroundings of the sampling area are characterised
communis L.), “ciprés” (Cupressus sp.) y nativas como by agricultural zones where the predominant crop is
“ombú” (Phytolacca dioica L.), “jacarandá” (Jacaran- “wheat” (Triticum aestivum L.), “soy” (Glycine max (L.)
da mimosifolia D. Don), “guarán” (Tecoma stans (L.) Merr.) and “corn” (Zea mays L.) and on the borders
Juss. ex Kunth), y “santa Lucía” (Tradescantia spp.), there are wild plants such as Fumaria officinalis L.
entre otras. Lindante a este sitio se encuentra la and “hemlock” (Conium maculatum L.). There is an
EEA INTA Paraná. Los alrededores de la tapera se abundance of “ponytail grass” (Nasella spp.), “Paddy’s
caracterizan por ser zonas agrícolas con predomi- lucerne” (Sida rhombifolia L.) and creepers such as
nancia de cultivos de “trigo” (Triticum aestivum L.), “mburucuyá or passion flowers” (Passiflora sp.) and
“soja” (Glycine max (L.) Merr.) y “maíz” (Zea mays L.) “asparagus” (Asparagus officinalis L.) which has spread
y en banquinas, malezas adventicias como Fumaria from the school vegetable garden and become amply
officinalis L. y “cicuta” (Conium maculatum L.). Son diffused (Fig. 1).
abundantes, especies de “flechillas” (Nasella spp.), Climatic characterisation
“escoba dura” (Sida rhombifolia L.) y enredaderas The region’s climate is humid temperate, with an
como “mburucuyá” (Passiflora sp.) y “espárrago” (As- annual average temperature of 18 °C and total rainfall
paragus officinalis L.) escapada de cultivo en la es- that does not surpass 1250 mm and is registered
cuela y ampliamente difundida (Fig. 1). principally in the time period from October to April.
Caracterización Climática The annual average relative humidity (RH) is 73%
El clima de la región es templado húmedo, con (SMN, Rep. Arg., 2016). The North-eastern wind is
una temperatura promedio anual de 18 °C y un predominant in the province all year round while in
total de precipitaciones que no supera los 1250 summer, and spring, the predominant winds take a
mm y se registran principalmente en el periodo Northern, North-eastern, Eastern and South-eastern
de octubre a abril. La humedad relativa promedio direction. In autumn and winter, the frequency of
anual es del 73% (SMN, Rep. Arg., 2016). En la pro- Southern and South-western winds rises though they
vincia predomina durante todo el año el viento NE, are not predominant. Westerly winds are low. The
mientras que en verano y primavera los vientos speed of wind is of a higher intensity in the months of
predominantes tienen la dirección N, NE, E, SE. En September and October, and they are less so in April.
otoño e invierno, sin ser predominantes, aumen- The monthly averages oscillate between 10 and 12
tan la frecuencia los vientos S y SO. Se observa baja km/h. For the period of study, differences with regard
incidencia de los vientos del oeste. La velocidad to temperature and wind were not observed, except
del viento es de mayor intensidad en los meses de with regard to rainfall, October being the month in
septiembre y octubre, siendo menor en abril. Los which an increase in rainfall was registered, surpassing
promedios mensuales oscilan entre 10 y 12 km/h. the historic mean registered. These data were collected
Para el periodo de estudio, no se observaron difer- by the Meteorological Station of the EEA INTA
encias en cuanto a la temperatura y vientos. Pero si Paraná (located in Oro Verde) and the Meteorological
en cuanto a las precipitaciones, siendo octubre el Station of Villa Urquiza.
mes donde se registró un aumento en las precipita- Collection, processing and analysis of the
ciones, superando el registro a la media histórica. samples
Estos datos fueron proporcionados por la Estación Collection of samples
Meteorológica de la EEA INTA Paraná (localizada en Collection was carried out on the 2nd and 3rd of
Oro Verde) y Estación Meteorológica Villa Urquiza. November in 2012 at site 1 and 2 respectively.
Recolección, Procesamiento y Análisis de las In each zone 2 samplings were collected:
muestras a) superficial sediment (SS)
Recolección de muestras b) sediment deposited on the shoe sole (SC)
Se realizaron el 2 y 3 de noviembre de 2012 para a) the technique of the multiple sub-samples
el sitio 1 y 2 respectivamente. “pinch or very small sample method” was used (Adams
En cada zona se llevaron a cabo 2 recolecciones & Mehringer, 1975): 12 sub samples of approximately
de muestras: 1 cm3 of sediment were taken in an area of around
a) sedimento superficial (SS) 1000 m2, this was then mixed, in order to avoid over-
b) sedimento depositado en la suela del calzado representation of a pollen type.

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Entre Ríos Sitio 1


S2
S1 Sitio 1
Departamento
Paraná
Parque
San Martín

A B

Eco-región Espinal
Eco-región Pampa
La Picada
Eco-región Delta e Islas del Paraná

Oro Verde
va
ser
Re
Tajamar
Tapera

Sitio 2
INTA

C D E
Figure 1. Study Sites. S1: Site 1; S2: Site 2. A: General San Martin Park and Study Site 1 satellite images. B: Sampling site walking trail
“Tapembyaza”. C-D: Study site 2 satellite image with references. E; Sample Site (tapera).
Figura 1. Ubicación de los sitios de estudio. S1: Sitio 1; S2: Sitio 2. A: Imagen satelital con ubicación y límites del Parque General
San Martín y del sitio de muestreo 1. B: Sendero de muestreo “Tapembyaza”. C-D: Imágenes satelitales con ubicación del sitio de
muestreo 2 y referencias de su entorno. E: Lugar de muestreo (tapera).

(SC) In b) the sampling was in accordance with the


En a) se utilizó la técnica de las sub-muestras methodology proposed by Horrocks et al. (1999): using
múltiples “método de la pizca” (Adams & Mehrin- a pair of clean shoes, the same path of approximately
ger, 1975): se tomaron 12 sub-muestras de 1 cm3 3,5 m was traversed to and fro. Material was taken from
aproximadamente de sedimento, en un área de the shoe sole with a spatula to remove the soil between
unos 1000 m2, que luego se mezclaron, a fin de evi- the markings of the sole. The quantity of sediment
tar la sobre-representación de un tipo polínico. collected for the sampling was 1-2 cm3 (Fig. 2).
En b) el muestreo se realizó de acuerdo a la me- The samples were collected with spatulas and
todología propuesta por Horrocks et al. (1999): uti- tweezers which were washed with distilled water
lizando un par de calzado limpio se recorrió ida y after the taking of each sample. The environmental
vuelta una misma transecta de aproximadamente conditions under which these samples were taken
3.5 m. Se levantó material desde el fondo de la sue- were registered. Subsequently each sampling was
la, usando espátula para remover el suelo entre la deposited in a sterile plastic bag (Ziploc® type) that was
pisada. La cantidad de sedimento recolectado por hermetically sealed and then taken to the laboratory for
muestra fue de 1-2 cm3 (Fig. 2). processing.
Las muestras fueron recolectadas con espátulas Processing of the samples
y pinzas, las cuales fueron lavadas con agua desti- The processing of samples took place in the
lada tras la toma de cada muestreo. Se registraron Laboratory of Actuopalinología of the CICYTTP.
las condiciones ambientales en las que fueron re- Prior to the treatment of the sediment, a mortar
colectadas dichas muestras. Luego cada muestra was used to break up the particles that were big and to
fue depositada en una bolsa estéril, de plástico separate the vegetal remains with tweezers. The material
(tipo ziploc®) que se selló herméticamente y de esta was then sifted with sieves of 500 µm and 250 µm, and
manera fueron remitidas al laboratorio para su pro- the remains that were retained in the sieves were washed

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cesamiento. with distilled water using pressure. This operation was


Procesamiento de las muestras carried out in a glass recipient of the same diameter as
El procesamiento de las muestras se realizó en the sieves to avoid loss of material. The material that
el Laboratorio de Actuopalinología del CICYTTP. was broken up was placed in centrifugal tubes of 50
Previamente al tratamiento del sedimento, se ml to proceed with the treatment of the same (Fig. 2).
utilizó mortero para romper las partículas de gran The pollen analysis was completed according
tamaño, y separar los restos vegetales con una pin- to the methodology of Horrocks (2004), with the
za. El material luego se tamizó con mallas de 500 modifications which are mentioned below:
µm y 250 µm, lavando con agua destilada a presión Digestion with potassium hydroxide (rupture of
los restos retenidos en los mismos. Esta operación the matrix – deflocculation- to dissolve the humic
se realizó sobre un recipiente de vidrio de igual diá- materials): Potassium hydroxide (10%) was added and
metro que los tamices para evitar pérdida de mate- placed in a Bain Marie (approx. 70%) for 10 – 15 min.,
rial. El material disgregado fue colocado en tubos and this was mixed with a glass dipstick. Next, this was
de centrifuga de 50 ml para proceder luego al tra- poured into a sieve of 125 µm, with a container placed
tamiento del mismo (Fig. 2). below it and the contents of the sieve were washed
El análisis polínico del sedimento se llevó a cabo with distilled water. The material was then put into
según la metodología de Horrocks (2004), con las centrifugal tubes, and centrifuged at 1500 g (3000 rpm),
modificaciones que se mencionan a continuación: in a Rolco CM 2036, with a radius at the centre of the
Digestión con Hidróxido de potasio (ruptura de la rotor of the sample during the centrifugation of 15,4

A B

C D
Figure 2. A: Shoe sediment sample. B: Sieving and washing preassure with water of the sediment sampled. C-D: Sediment concentration
before chemical treatement.
Figura 2. A: Toma de muestra de sedimento del calzado. B: tamizado y lavado a presión con agua del sedimento superficial; C-D:
Concentración del sedimento previo al tratamiento químico.

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matriz –defloculación- para disolver los materiales cm (Pendleton, 2006), for 15 minutes and decanted.
húmicos): Se agregó hidróxido de potasio al 10% y This operation was repeated until the supernatant was
se llevó a baño María (70ºC aprox.) durante 10 – 15 more or less clear.
min., agitando con varilla de vidrio. A continuación, Treatment with sodium pyrophosphate (for the removal
se vertió en un tamiz de 125 µm, colocando un vaso of clays): A solution of 0,1 of sodium pyrophosphate
de precipitado debajo y lavando el tamiz con agua was added to the solution and left in a Bain Marie for
destilada. El material fue trasvasado a tubos de cen- 10 to 20 minutes. This was then centrifuged at 1500
trifuga, centrifugado a 1500 g (3000 rpm), en una g for 15 min and decanted. Then, it was washed with
centrífuga Rolco CM 2036, con un radio desde el distilled water and mixed after which the centrifugation
centro del rotor a la muestra durante la centrifuga- and decanting actions were repeated.
ción de 15,4 cm (Pendleton, 2006), durante 15 min. Oxidation of organic material (for the removal of
y decantado. Esta operación se repitió hasta que el organic matter): A mixture of 75,5 g of potassium
sobrenadante estuvo más o menos claro. chlorate, 280 ml of glacial acetic acid 157 ml of
Tratamiento con pirofosfato de sodio (para re- distilled water, and 35 ml of sulphuric acid was used.
moción de arcillas): Se adicionó a la muestra una This solution was left to act on the sample for 1,5 –
solución 0,1 M de pirofosfato sódico y se dejó en 2 hours, within which time it was occasionally mixed.
baño María entre 10 – 20 min. Luego se centrifugó Then it was centrifuged at 1500 g and decanted. The
a 1500 g durante 15 min. y se decantó. Se lavó con material was washed with distilled water, and then the
agua destilada, agitó, y se repitió el centrifugado y centrifugation and decanting were repeated. Glacial
decantado. acetic acid was added to dry the sample which was then
Oxidación de la materia orgánica (para la remo- made homogeneous by mixing it with a glass dipstick
ción de la materia orgánica): Se utilizó una mezcla and lastly this was followed by centrifugation and
de 75,5 g de clorato de potasio, 280 ml de ácido decanting.
acético glacial, 157 ml de agua destilada y 35 ml de Acetolysis (Erdtman, 1960) (for the removal of
ácido sulfúrico. Esta solución se dejó actuar con la cellulose).
muestra 1,5 – 2 h agitando de vez en cuando. Se Analysis of samples
centrifugó a 1500 g y decantó. Se lavó el material Four microscopic preparations of each sample
con agua destilada, y se repitió el centrifugado y of sediment were carried out to have a higher residue
decantado. Se agregó ácido acético glacial para content, thus facilitating the observation of greater
deshidratar la muestra, se homogenizó con varilla diversity of pollen types present.
de vidrio, centrifugó y decantó. Identification of pollinic types
Acetólisis (Erdtman, 1960) (para remoción de ce- These were determined under a Leica DM 5000B
lulosa). optical microscope and illustrated with photographs
Análisis de muestras taken by a digital Leica DMC 2900 camera, both
Se realizaron cuatro preparados microscópicos instruments are located in the Laboratory of
de cada muestra de sedimento para disponer de Actuopalinología of the CICYTTP, with the help of
mayor contenido de residuo, facilitando de esta the reference collection of the same laboratory, pollen
manera la observación de mayor diversidad de ti- atlas sensu lato (Heusser, 1971; Markgraf & D’Antoni,
pos polínicos presentes. 1978; Morbelli, 1980; Pire et al., 1998; 2002; 2006;
Identificación de los tipos polínicos 2013; Roubik & Moreno Patiño, 1991; Wingenroth
Fueron determinados bajo microscopio óptico & Heusser, 1984) and specific references (Sáenz,
Leica DM 5000B e ilustrados con fotografías to- 1978; Grant Smith, 2000; Nitiu et al., 2010; Guarín et
madas con cámara digital Leica DMC 2900 ambos al., 2015; di Pasquo et al., 2016; Wilshire, 2016). The
equipos ubicados en el Laboratorio de Actuopali- classification of the taxa follows Zuloaga et al. (2008).
nología del CICYTTP, con la ayuda de la colección The flowering periods indicated in the Tables 1 and 2
de referencia de dicho laboratorio, atlas polínicos were taken from Lahitte et al. (1997); Valla et al. (2001);
sensu lato (Heusser, 1971; Markgraf & D’Antoni, Páez (2008); Hurrel et al. (2009) and Fagúndez et al.
1978; Morbelli, 1980; Pire et al., 1998; 2002; 2006; (2016). The classification of pollen types is according
2013; Roubik & Moreno Patiño, 1991; Wingenroth to De Klerk & Joosten (2007). The fungal spores were
& Heusser, 1984) y bibliografía específica (Sáenz, identified but not counted.
1978; Grant Smith, 2000; Nitiu et al., 2010; Guarín Statistical analysis

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Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

et al., 2015; di Pasquo et al., 2016; Wilshire, 2016). A cluster analysis was made of the samples,
La nomenclatura de los taxones sigue a Zuloaga et considering the represented taxa as being variable in
al. (2008). Los periodos de floración que se indican the pollen spectrum and their abundance (expressed in
en las Tablas 1 y 2, fueron tomados de Lahitte et al. %). The programme used was PC Ord®. The distance
(1997); Valla et al. (2001); Páez (2008); Hurrel et al. used was Euclidean and for the classification, the
(2009) y Fagúndez et al. (2016). Para la nomenclatu- method of the closest neighbour.
ra de los tipos polínicos se siguió lo propuesto por
De Klerk & Joosten (2007). Las esporas fúngicas fue- RESULTS
ron identificadas pero no contabilizadas. Parque General San Martín
Análisis estadístico Sampling of superficial sediment
Se realizó un análisis de agrupamiento (Cluster) 418 palynomorphs were observed and they were
de las muestras, considerando como variables los identified in 23 pollen and sporal types (without
taxones representados en el espectro polínico y su counting the fungal spores), corresponding to 18
abundancia (expresada en %). El Programa utiliza- botanical families (Table 1). The best represented
do fue PC Ord®. Se utilizó la distancia euclídea y para families in richness of pollen types were
la clasificación, el método del vecino más cercano. Amaranthaceae and Fabaceae, with 3 representatives
each and 2 representatives of Asteraceae. The other
RESULTADOS families presented only one pollen or sporal type.
Parque General San Martín As for abundance, the pollen types with the highest
Muestra de sedimento superficial values were Ephedra sp., Ligustrum sp., Poaceae and type
Se observaron 418 palinomorfos, los cuales Gomphrena perennis L., in decreasing order. The presence
fueron identificados en 23 tipos polínicos y espo- of Pteridophyta spores of the Blechnum and Polypodium
rales (sin contabilizar las esporas fúngicas), corres- types is significant. The fungal spores richness is also
pondientes a 18 familias botánicas (Tabla 1). Las noteworthy.
familias mejores representadas en riqueza de tipos Sampling of the sediment on shoe sole.
polínicos fueron Amaranthaceae y Fabaceae, con 192 palynomorphs were observed and 15 pollen
3 representantes cada una y Asteraceae con 2 re- and sporal types were identified (without counting the
presentantes. Las demás familias presentaron solo fungal spores) corresponding to 12 botanic families
un tipo polínico o esporal. En cuanto a la abundan- (Table 1). The families that were best represented in
cia, los tipos polínicos con mayores valores fueron pollen types were Amaranthaceae and Asteraceae, with
Ephedra sp., Ligustrum sp., Poaceae y Tipo Gomphre- 3 and 2 representatives respectively. The remaining
na perennis L., en orden decreciente. Resulta signifi- families presented only one pollen or sporal type. As
cativa la presencia de esporas de Pteridophyta del for abundance, the pollen types with highest values
Tipo Blechnum y Tipo Polypodium. Se destaca tam- were Ephedra sp., Ligustrum sp., Type Gomphrena perennis
bién la riqueza de esporas fúngicas. and Poaceae, in decreasing order. The presence of
Muestra de sedimento del calzado Pteridophyta spores of the Blechnum type and fungal
Se observaron 192 palinomorfos, los cuales spores of the Sordaria type were noteworthy.
fueron identificados en 15 tipos polínicos y espo- Tapera Alberdi
rales (sin contabilizar las esporas fúngicas), corres- Sampling of superficial sediment
pondientes a 12 familias botánicas (Tabla 1). Las 304 palynomorphs were observed, and herein were
familias mejores representadas en riqueza de tipos identified 22 pollen and sporal types (without counting
polínicos fueron Amaranthaceae y Asteraceae, con the fungal spores), corresponding with 20 botanical
3 y 2 representantes respectivamente. Las demás families (Table 2). The best represented families of
familias presentaron solo un tipo polínico o espo- pollen types were Amaranthaceae and Asteraceae with 2
ral. En cuanto a la abundancia, los tipos polínicos representatives. The remaining families presented only
con mayores valores fueron Ephedra sp., Ligustrum one pollen or sporal type. With regard to abundance,
sp.,Tipo Gomphrena perennis y Poaceae, en orden the pollen types with highest values were Phytolacca
decreciente. Se destaca la presencia de esporas de dioica, Poaceae and Amaranthus type, in decreasing
Pteridophyta del Tipo Blechnum, y esporas fúngicas order. The presence of two types of Pteridophyta
del Tipo Sordaria. spores stood out: Lycopodium sp. and Polypodium sp. and
Tapera Alberdi fungal spores of the Sordaria Type.

65
Familia botánica Tipo polínico o esporal Hábito Tipo de Status Periodo de floración SS SC

66
(*) polinización1 (**) A S O N (%) ( %)
Tipo Alternanthera aquatica (D.
Amaranthaceae h A n v2,9 3,1
Parodi) Chodat
Tipo Amaranthus (+) h A n 1,9 1
Tipo Gomphrena perennis L. (+) h A n 6 8,3
Anacardiaceae Schinus sp. aA Am n 1 -
Asteraceae Centaurea sp. h E N 3,6 4,7
Senecio sp. h E n 3,8 2,1
(+): período de floración estimado.

Calyceraceae Acicarpha tribuloides Juss. h E n 1,9 1


Sapium haemastospermun Müll.
Euphorbiaceae A E n 1 -
Arg.
Bordi, La palinología como herramienta forense...

Fabaceae Gleditsia triacanthos L. A E N 2,2 2,1


Prosopis sp. A E n 1,9 -
Trifolium repens L. h E N 1,2 -
Meliaceae Melia azedarach L. A E I 1 -
Moraceae Morus sp. A A N 2,4 -
Myrtaceae Eucalyptus sp. A Am l 3,6 5,2
Nothofagaceae Nothofagus sp. A A n 0,2 -
Oleaceae Ligustrum sp. aA Am N 9,6 15,6
Poaceae Poaceae h A n 6,7 7,8
Salicaceae Salix sp. A Am n 2,2 1,6
Typhaceae Typha latifolia L. h A n 2,9 2,6
Ephedraceae Ephedra sp. a A n 32,3 36,5
Pinaceae Pinus sp. A A l 1,2 0,5
Blechnaceae Blechnum sp. h n 2,4 1
Polypodiaceae Polypodium sp. h n 1,4 -
Ascomycota Delitschia sp. x -
Tetraploa sp. x -
Scientia

Tipo grupo Bipolaris x -


Tipo Sordaria x x
Tipo Trichodelitschia x -
Indeterminados 7,2 6,8
cada en la muestra, no detectada en el recuento. 1 Tipo de polinización: (A) Anemófila; (E) Entomófila; (Am) Ambófila.
(*)Hábito: (h) hierba; (a) arbusto; (A) árbol. (**) Status (n): nativa; (N) naturalizada; (I) introducida. (x): presente -identifi-
Tabla 1. Tipos polínicos y esporales registrados en muestras provenientes del Sitio 1 (Parque General San Martín).

Table 1. Pollen and sporal types registered in samples from Site 1 (Parque General San Martín). (*)
Habitat: (h) herb; (a) shrub; (A) tree; (e) creeper. (**) Status: (n) native; (N) naturalised; (I) introduced. (x): present –identified in the sample, not detected in the recount. 1Type of
pollination: (A) Anemophilous ; (E) Entomophilous ; (Am) Ambophilous . (+): period of flowering estimated (dark grey: flowering plenitude). SS: soil sediment. SC: sediment
from shoe sole.
Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná
Scientia
Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

Muestra de sedimento superficial Sampling of the sediment on shoe sole


Se observaron 304 palinomorfos, los cuales One hundred and forty (140) palynomorphs
fueron identificados en 22 tipos polínicos y espo- were observed and they were identified in 14 pollen
rales (sin contabilizar las esporas fúngicas), corres- and sporal types (without counting the fungal spores),
pondientes a 20 familias botánicas (Tabla 2). Las corresponding to 13 botanical families (Table 2). The
familias mejores representadas en riqueza de tipos best represented family in richness of pollen types
polínicos fueron Amaranthaceae y Asteraceae con was Apiaceae with 2 representatives. The remaining
2 representantes. Las demás familias presentaron families presented only one pollen type. With regard
solo un tipo polínico o esporal. En cuanto a la abun- to abundance the pollen types with the highest values
dancia, los tipos polínicos con mayores valores fue- were Phytolacca dioica, Poaceae and Ammi majus L., in
ron Phytolacca dioica, Poaceae y Tipo Amaranthus, decreasing order. The presence of fungal spores of
en orden decreciente. Se destaca la presencia de Alternaria and the Sordaria Type stands out.
dos tipos de esporas de Pteridophyta: Lycopodium
sp. y Polypodium sp. y esporas fúngicas del Tipo Sor-
daria. Nothofagus sp.
Muestra de sedimento del calzado Melia azedarach
Schinus sp.
Se observaron 140 palinomorfos, los cuales fue- Sapium haemastospermun TA SS TA SC
ron identificados en 14 tipos polínicos y esporales Trifolium repens PSM SS PSM SC
Prosopis sp.
(sin contabilizar las esporas fúngicas), correspon- Morus sp.
dientes a 13 familias botánicas (Tabla 2). La familia Acicarpha tribuloides
mejor representada en riqueza de tipos polínicos Blechnum sp.
Salix sp.
fue Apiaceae con 2 representantes. Las demás fa- Gleditsia triacanthos
milias presentaron solo un tipo polínico. En cuanto Senecio sp.
T. Alternanthera aquatica
a la abundancia, los tipos polínicos con mayores va- Centaurea sp.
lores fueron Phytolacca dioica, Poaceae y Ammi ma- Ephedra sp.
Ligustrum sp.
jus L., en orden decreciente. Se destaca la presencia Eucalyptus sp.
de esporas fúngicas de Alternaria y Tipo Sordaria.
Tipos polínicos

Typha latifolia
Pinus sp.
Polypodium sp.
DISCUSIÓN T. Amaranthus
Los resultados obtenidos del análisis del con- T. G. perennis
Poaceae
tenido palinológico (espectros polínicos) de las Phytolacca dioica
muestras estudiadas muestran relación con los Cupressus sp.
Ammi majus
taxones de la vegetación, constituyéndose en evi- Araucaria sp.
dencia asociativa con el origen geográfico del cual T. Apium
T. Ambrosia
provienen.
Ipomoea sp.
Parque San Martín Lonicera japonica
Relación polen-vegetación T. Cypella
Jacaranda mimosifolia
Como representantes del bosque xerófilo apa- Cirsium vulgare
recen Ephedra sp., Prosopis sp. y Schinus sp. Se en- Lycopodium sp.
T. Sida
cuentran también presentes elementos del bosque Geraniaceae
en galería como Salix sp. y Sapium haematosper- Alnus sp.
mum, y especies palustres como Typha latifolia L. 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70
Las hierbas se hallan representadas por la Familia %
Amaranthaceae destacándose el Tipo Gomphrena Figure 3. Percentage frequencies of the main palynomorphs
perennis, la Familia Asteraceae, y elementos de pas- recorded in the sampless. (PSM SS) Superficial sediment from
tizal pampeano (Tipo polínico Poaceae). San Martín Park; (PSM SC) shoe’s sediment from San Martin Park;
(TA SS) Tapera Alberdi soil sample; (TA SC) Tapera Alberdi’s shoe
Las especies exóticas naturalizadas presentes sediment.
en el parque aportan al espectro polínico resul- Figura 3. Frecuencias porcentuales de los principales
tando más abundantes Ligustrum spp., y en me- palinomorfos registrados en las muestras. (PSM SS) Parque
nor medida Gleditsia triacanthos y Morus sp. Otros San Martín sedimento superficial; (PSM SC) Parque San Martín
sedimento de calzado; (TA SS) Tapera Alberdi sedimento suelo;
taxones que se registraron en menor proporción, (TA SC) Tapera Alberdi sedimento de calzado.

67
Scientia
Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

corresponden a tipos polínicos cuyas fuentes no se DISCUSSION


encuentran en la zona de muestreo, es decir que The results obtained from the analysis of the
el polen proviene de cortas o largas distancias. palynological content (pollen assemblage) of the
Dentro de las fuentes de corta distancia –extra- samples show a relationship with the taxa of the
locales- (de 200 m a 2 km) (Latorre et al., 2001) se vegetation, becoming associative evidence with the
registró polen de Eucalyptus sp. y Pinus sp.; y como geographical origin from which they come.
provenientes de fuentes de larga distancia -extra Parque (Park) San Martín
regionales- (más de 200 km) (Latorre et al., 2001) se Pollen- vegetation relationship
registró polen de Nothofagus sp. Representatives of the xerophylic woodland such
La representación dentro del espectro polínico as Ephedra sp., Prosopis sp. and Schinus sp. appear.
de esporas de Pteridophyta del Tipo Polypodium y Elements of a gallery forest such as Salix sp. and Sapium
Blechnum, se relaciona a ambientes húmedos. Den- haematospermum, and marsh species such as Typha latifolia
tro de los tipos esporales fúngicos dominantes se L. are also encountered. The herbs are represented by
destacaron los correspondientes al Tipo Sordaria the Amaranthaceae family, and the Gomphrena perennis
descriptos como hongos coprófilos (Carrión & Na- Type, the Asteraceae family, and pastureland elements
varro, 2002) asociados a la presencia de herbívoros. from the Pampas stand out (Poaceae pollen type).
Relación sedimento superficial-sedimento The exotic naturalised species present in the park
del calzado contribute a pollen assemblage in which the most
En la zona de muestreo se identificaron 23 tipos abundant is Ligustrum spp., and in a lesser measure
polínicos, coincidiendo la muestra del sedimento Gleditsia triacanthos and Morus sp. Other taxa that are
superficial con la del calzado en 15 taxones halla- registered in minor proportion correspond with pollen
dos (Fig. 3), siendo los más abundantes Ephedra sp., types whose sources are not found in the sampling
Ligustrum sp., Tipo Gomphrena perennis y Poaceae zone, which means the pollen comes from short or
en ambos. Si bien el espectro polínico del sedimen- long distances. Within the short distance sources –
to superficial presenta ocho tipos polínicos que no extra-local- (of 200 m to 2 km) (Latorre et al., 2001)
fueron hallados en el sedimento del calzado; éstos pollen from Eucalyptus sp. and Pinus sp. was registered;
contribuyen con valores bajos (Tabla 1; Fig. 3). El and long distance –extra regional- sources were (over
análisis de agrupamiento mostró que el sitio 1 que- 200 km) (Latorre et al., 2001) registered pollen from
dó conformado por un grupo homogéneo, indican- Nothofagus sp.
do la gran similitud entre los dos tipos de muestras Representation within the pollen assemblage of
recolectadas (PSMSS y PSMSC) (Fig. 4). Pteridophyta of the Polypodium and Blechnum Type,
Diversidad y abundancia en el registro polínico are linked with humid environments. Within the
En cuanto al hábito de las especies, en las dos dominant sporal fungal types those corresponding
muestras analizadas, 12 son arbóreas-arbustivas with the Sordaria Type and described as coprophilous
y 11 hierbas (Tabla 1). Siendo los mayores valores fungi (Carrión & Navarro, 2002) associated with the
registrados en el espectro polínico aportados por presence of herbivores stood out.
especies arbóreas-arbustivas. Relationship between superficial sediment and sediment on
En el caso de los dos tipos polínicos dominan- shoe sole
tes en el espectro (Ephedra y Ligustrum), ambas In the sampling zone, 23 pollen types were
fueron muy abundantes en la zona de estudio, y en identified, and the sample of the superficial sediment
cuanto a sus periodos de floración fueron previos coincided with the sediment of the shoe sole in 15
o coincidentes al momento de muestreo (Tabla 1) taxa that were found (Fig. 3), the most abundant being
lo que contribuyó a su abundancia en las muestras Ephedra sp., Ligustrum sp., Gomphrena perennis Type and
de sedimento. El polen de Ephedra fue registrado Poaceae in both. Even though the pollen assemblage
en la atmósfera para Diamante (Entre Ríos) des- of the superficial sediment presents eight pollen types
de julio hasta fin de octubre, con picos en agosto that were not found in the sediment of the shoe sole;
(Páez, 2008); en el caso de Ligustrum su floración these contributed with low values (Table 1; Fig. 3).
es coincidente al momento de muestreo (Tabla 1). The analysis of the grouping showed that site 1 was
Por otro lado, también es importante el tipo de po- constituted by a homogeneous group, indicating an
linización que presentan las especies; siendo muy important similitude between the two types of samples
abundante la producción de polen en las especies collected (PSMSS and PSMSC) (Fig. 4).
Diversity and abundance on the pollinic

68
Scientia
Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

anemófilas (Ephedra) o mixtas, es decir entomófila register


y anemófila (Faegri & van der Pijl, 1979). Este tipo With regard to the habit of the species, in the two
de polinización mixta también es conocida como samples analysed, 12 are shrub like trees and 11 are
ambófila (Bullock, 1994), dentro del cual se ubica herbs (Table 1). The highest values registered in the
Ligustrum. Los representantes de este último taxón pollen assemblage were contributed by the shrub like
para este sitio de estudio comprenden a la especie trees.
arbórea Ligustrum lucidum “ligustro”, y también a la In the case of the two dominant pollen types in
arbustiva L. sinense “ligustrina”. the spectrum (Ephedra and Ligustrum), both were very
Eucalyptus sp. y Pinus sp., no fueron censados abundant in the study zone and as for the periods of
en el área de estudio. Posiblemente el tipo de po- flowering they were prior to or coincidental at the
linización que presentan las especies (ambófila y moment of sampling (Table 1) and this contributed
anemófila respectivamente) contribuyó a que se to their abundant presence in the samplings of
encontraran en las muestras. sediment. The pollen from Ephedra was registered
El polen netamente alóctono, extra regional, in the atmosphere in Diamante (Entre Ríos) from
está representado por Nothofagus sp. Este taxón July till the end of October with highs in August
se halla ampliamente distribuido en los bosques (Páez, 2008); in the case of Ligustrum its flowering is
andinos patagónicos del suroeste de la Argentina coincidental to the time of sampling (Table 1). On the
(Latorre et al., 2001), y aparece prácticamente en other hand, the type of pollination presented by the
todos los muestreadores aerobiológicos de Argen- species is also important; the production of pollen
tina (Muñoz et al., 2017). Su transporte está asocia- being very abundant in the anemophilous species
do con el desplazamiento hacia el este por la cir- (Ephedra) or mixed which is to say entomophilous and
culación de vientos del oeste y la presencia de un anemophilous (Faegri & van der Pijl, 1979). This type
sistema anticiclónico que lo traería hacia el norte. of mixed pollination is also known as ambophilous
Fue registrado en las ciudades de Uruguay (Monte- (Bullock, 1994), within which Ligustrum is found. The
video) (Tejera & Beri, 2005) y Argentina (Bahía Blan- representatives of this last taxon in this study site
ca, Mar del Plata, Santa Rosa) (Murray et al., 2010; include the tree species Ligustrum lucidum “ligustro”,
Latorre et al., 2001; Caramuti et al., 2014). En la pro- and also the shrub L. sinense “ligustrina”.
vincia de Entre Ríos fue mencionado en Diamante Eucalyptus sp. and Pinus sp., were not taken into
(Latorre & Caccavari, 2010) y en el Parque Nacional account in the study area. Possibly the type of
El Palmar (Muñoz et al., 2017). pollination presented by the species (ambophilous
Los tipos polínicos Schinus sp., Gleditsia tria- and anemophilous respectively) contributed to these
canthos, Prosopis sp., Melia azedarach y Sapium species being found in the samples.
haematospermum se encuentran presentes en baja The pollen that was clearly allochthonous extra
concentración y sólo en las muestras de sedimento regional, is represented by Nothofagus sp. This taxon
superficial. Todos ellos cuentan con representan- is found amply distributed in the Patagonic Andes
tes en la vegetación del área de muestreo y sus and forests of the south east of Argentina (Latorre
periodos de floración fueron coincidentes con el et al., 2001), and appears in practically all of the
momento de muestreo. Su baja representatividad aerobiological samplings of Argentina (Muñoz et al.,
podría asociarse al tipo de polinización que presen- 2017). Its transport is associated with displacement
tan (entomófila), cuya presencia en las muestras es towards the east by western winds and the presence of
indicativo que las especies se encuentran muy cer- an anticyclone system that carries it to the North. It was
canas al sitio de muestreo (Milhne et al., 2005), ya registered in cities in Uruguay (Montevideo) (Tejera &
que su producción polínica es considerablemente Beri, 2005) and Argentina (Bahía Blanca, Mar del Plata,
inferior a las anemófilas (Faegri et al., 1989). Santa Rosa) (Murray et al., 2010; Latorre et al., 2001;
La alta riqueza de árboles en el muestreo res- Caramuti et al., 2014). In the province of Entre Ríos
ponde a que los representantes nativos y adventi- it was found in Diamante (Latorre & Caccavari, 2010)
cios presentes en el sitio de estudio presentan casi and in the National Park (Parque Nacional) El Palmar
exclusivamente floración primaveral (Tabla 1). Este (Muñoz et al., 2017).
comportamiento es observado en varias regiones The pollen types Schinus sp., Gleditsia triacanthos,
en las cuales existe una formación “boscosa” domi- Prosopis sp., Melia azedarach and Sapium haematospermum
nante (Naab et al., 2001; Forcone, 2003; Salgado et are found in low concentrations and only in the
samples of superficial sediment. All of these have

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Scientia
Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

Tabla 2. Tipo polínico y sus porcentajes determinados en muestras provenientes de Tapera Alberdi. (*)Habito: (h) hierba; (a)
arbusto; (A) árbol; (e) enredadera. (**) Status: (n) nativa; (N) naturalizada; (I) introducida. (x): presente -identificada en la muestra, no
detectada en el recuento. 1 Tipo de polinización: (A) Anemófila; (E) Entomófila; (Am) Ambófila. (+): periodo de floración estimado.
Table 2. Pollen type and its percentages determined in samples from the Tapera Alberdi. (*) Habitat: (h) herb; (a) shrub;
(A) tree; (e) creeper. (**) Status: (n) native; (N) naturalised; (I) introduced. (x): present –identified in the sample, not detected
in the recount. 1Type of pollination: (A) Anemophilous; (E) Entomophilous; (Am) Ambophilous. (+): period of flowering
estimated (dark grey: flowering plenitude). SS: soil sediment. SC: sediment from shoe sole.
( %)

35,7
10,7
6,4
3,6

1,4
1,4

0,7

2,1
2,9

5,7
3,6
5,7
SC

10
5
0

x
x
-
-
-
-

-
-
(%)

6,4
3,2
3,2

2,9
1,9
0.6

1,3
1,3
0,6
1,9
1,3
3,3
3,2

8,3
2,9
5,4
4,8
5,8
1,3
2,5
SS

29

X
2

8
-

-
N
Periodo de floración
O
S
A
Status
(**)

N
N

N
n
n

n
n
n
n

n
n
n

n
n
I

I
l

l
polinización1
Tipo de

Amb
Am

Am
A
A

A
A
A
A
A
E
E

E
E
E
E
E
E
Hábito

aA
(*)

A
A

A
A
A
h
h
h
h
h
h

h
h
h

h
h

h
h
e
e
Tipo polínico o esporal

Tipo Gomphrena perennis (+)

Jacaranda mimosifolia
Tipo Amaranthus (+)

Tipo Ambrosia (+)

Lonicera japonica

Phytolacca dioica

Indeterminados
Cirsium vulgare

Lycopodium sp.
Polypodium sp.
Tipo Alternaria
Ligustrum spp.

Typha latifolia
Eucalyptus sp.

Tipo Sordaria
Cupressus sp.
Araucaria sp.
Geraniaceae
Ammi majus

Tipo Cypella
Ipomoea sp.
Tipo Apium

Tipo Betula

Tipo Sida

Pinus sp.
Poaceae
Familia botánica

Indeterminados
Convolvulaceae
Amaranthaceae

Phytolaccaceae

Lycopodiaceae
Polypodiaceae
Caprifoliaceae

Araucariaceae
Bignoniaceae

Cupresaceae
Geraniaceae

Ascomycota
Betulaceae
Asteraceae

Typhaceae
Malvaceae
Myrtaceae
Oleaceae
Apiaceae

Iridaceae

Pinaceae
Poaceae

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Scientia
Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

al., 2014; Fagúndez et al., 2016). representatives in the vegetation of the sampling area
Las hierbas se hallan representadas por espe- and its periods of flowering coincided with the time
cies de Asteraceae (Senecio y Centaurea), si bien se of sampling. Its low representation could be associated
han relevado individuos en el sitio de estudio, y la with the type of pollination it presents (entomophilous),
floración es coincidente con la fecha de muestreo, whose presence in the samples is indicative that the
presentan polinización entomófila, lo cual explica species is found very close to the sampling site (Milhne
su baja concentración. et al., 2005), as its pollen production is considerably
Acicarpha tribuloides Juss., también presente en less than that of anemophilous (Faegri et al., 1989).
la vegetación del área de muestreo, contribuye con The high richness of trees in the sampling is linked
valores bajos en las muestras. Es una hierba ento- to the fact that the native and adventic species present
mófila, de escaso porte, que ha sido registrada de on the study site almost exclusively spring flowering
manera local sobre el sendero “Tapémbyaza”. (Table 1). This behaviour is observed in various regions
Se destacan las Amaranthaceae con tres tipos where a dominant “forestal” formation exists (Naab et
polínicos, uno de ellos con valores considerables al., 2001; Forcone, 2003; Salgado et al., 2014; Fagúndez
(T. Gomphrena perennis). Presentan polinización et al., 2016).
anemófila lo cual favorece su abundancia en las The herbs are seen represented by Asteraceae
muestras. species (Senecio and Centaurea), even though individuals
La familia Poaceae, cuyo tipo polínico es mul- have been found on the sampling site, and the flowering
tiespecífico, de modo que el aporte al espectro po- is coincidental with the sampling dates presenting
línico lo podrían realizar varias especies, con dife- entomophilous pollination which explains its low
rentes periodos de floración. Esta familia botánica concentration.
presenta entre noviembre y diciembre el máximo Acicarpha tribuloides Juss., also present in the
número de granos de polen en la atmósfera en la- vegetation of the sampling area, contributes with low
titudes cercanas, como Montevideo (Tejera & Beri, values in the samples. It is an entomophilous herb, of
2005). small size, which has been registered locally on the
Typha latifolia, es una especie que aparece en pathway known as “Tapémbyaza”.
bajas proporciones, pero es un componente sig- The Amaranthaceae stand out with three pollen
nificativo, indicando que en cercanías del lugar de types, one of them with considerable values (T.
muestreo se hallan cursos de agua, lagunas o ane- Gomphrena perennis). They are anemophilous and this
gadizos. Su polen se dispersa en tétradas, por lo favours its abundance in the samples.
que se estima una débil capacidad de dispersión, The Poaceae family, whose pollen type is
necesitando fuertes vientos para la misma (Pla Dal- multispecific in such a way that its contribution to the
mau, 1961). pollen assemblage could be contributed by various
La presencia de esporas de helechos, aunque species, has different periods of flowering. This
halladas en baja proporción es un dato significa- botanical family has the maximum number of pollen
tivo, por ser indicadores locales (Naab, 1999). Se grains in the atmosphere between November and
encuentran en terrenos húmedos y con humedad December in nearby latitudes such as Montevideo
ambiental alta, circunscritos a la parte baja de los (Tejera & Beri, 2005).
bosquecillos de la zona. Typha latifolia, is one of the species that appears
Tapera Alberdi in low proportions but it is a significant component
Relación polen-vegetación indicating that there were water courses, lagoons and
Al analizar el espectro polínico de las muestras waterlogging close to the sampling site. Its pollen gets
con la vegetación del sitio de estudio, se observa dispersed in a tetrad manner, and a weak capacity for
que los taxones dominantes se corresponden con dispersion is esteemed for this reason; strong winds are
el sitio de estudio, el cual se caracteriza por ser una also needed for its dispersion (Pla Dalmau, 1961).
zona agrícola (representado por el Tipo polínico The presence of spores of ferns, even though
Poaceae y especies herbáceas adventicias o nati- found in low proportion is a significant data for
vas: Cirsium vulgare (Sari) Tenore, Ammi majus, Tipo being local indicators (Naab, 1999). These are found
Sida, Geraniaceae), y en la tapera dominaban árbo- on humid land areas and with high environmental
les de Phytolacca dioica. Asimismo, fueron abun- humidity limited to the lower part of the forestal area
dantes otras especies cultivadas en el área como of the zone.
Tapera Alberdi

71
Scientia
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Figure 4. Dendogram resulting from the grouping analysis of the 4 samples studied. (PSM SS) Superficial sediment from San Martín Park;
(PSM SC) shoe’s sediment from San Martin Park; (TA SS) Tapera Alberdi soil sample; (TA SC) Tapera Alberdi’s shoe sediment.
Figura 4. Dendrograma resultante del análisis de agrupamiento de las 4 muestras estudiadas. PSM SS: Parque San Martín sedimento
suelo; (PSM SC) Parque San Martín sedimento de calzado; (TA SS) Tapera Alberdi sedimento de suelo; (TA SC) Tapera Alberdi sedi-
mento de calzado.

Gymnospermae (Cupressus, Araucaria y Pinus), y Pollen-vegetation relationship


Typha latifolia. Como especie extra-regional se ha- When analysing the pollen assemblage of the
lló a Alnus sp. samples with the vegetation of the study site, dominant
Relación sedimento superficial - sedimento taxa corresponded with the study site which is
del calzado characterised as being an agricultural zone (represented
En la zona de muestreo se identificaron 23 tipos by the Poaceae pollen type and herbaceous- adventitious
polínicos, coincidiendo la muestra del sedimento or native species: Cirsium vulgare (Sari) Tenore, Ammi
superficial con la del calzado en 13 taxones halla- majus, Sida Type, Geraniaceae), and in the Alberdi
dos (Fig.3), siendo los más abundantes Phytolacca area trees of the Phytolacca dioica were dominant. Other
dioica y Poaceae. Si bien el espectro polínico del cultivated species were also abundant in the area such
sedimento superficial revela nueve tipos polínicos as Gymnospermae (Cupressus, Araucaria and Pinus), and
que no fueron hallados en el sedimento del calza- Typha latifolia. An extra-regional species that was seen
do; éstos contribuyen con valores bajos al espectro is Alnus sp.
polínico (Tabla 2; Fig. 3). El análisis de agrupamiento Relationship between superficial sediment and
asoció muy estrechamente los dos tipos de mues- shoe sole sediment
tras recolectadas en el sitio 2 (TASS y TASC) (Fig. 4). In the sampling zone, 23 pollen types were
Riqueza y abundancia en el registro polínico identified, and the sample of superficial sediment
De acuerdo al hábito de las especies, a diferen- coincided with what was on the shoe sole in 13 taxa
cia de las muestras del sitio 1 (Parque San Martín), found (Fig.3), the more abundant being Phytolacca dioica
predominaron (en cuanto a riqueza de especies) las and Poaceae. Even though the pollen assemblage of the
hierbas sobre las arbóreas-arbustivas (13/8) (Tabla superficial sediment reveals nine pollen types that were
2). Sin embargo, dominó en ambas muestras una not seen in the sediment of the shoe sole, it contributes
especie arbórea: Phytolacca dioica, localizada en el low values to the pollen assemblage (Table 2; Fig. 3).
sitio de muestreo (tapera) como puede observarse The analysis of the grouping is closely associated with
en la foto del lugar (Fig. 1), habiéndose identificado the two types of samples collected in site 2 (TASS and
tres ejemplares de gran porte. Esta especie presen- TASC) (Fig. 4).
ta polinización ambófila, por lo cual su producción Richness and abundance in the pollinic register
de polen es alta, encontrándose en el momento de In keeping with the habit of the species, and unlike
muestreo en floración, lo cual contribuyó a su alta the samplings of site 1 (Parque San Martín), herbs
concentración en las muestras. species were predominant over tree-shrub species
Dentro del polen de herbáceas se destaca la (13/8) (with regard to the richness of the species)
familia Poaceae, (tipo polínico multiespecífico) ha- (Table 2). However, in both samples one tree specie
llándose en los dos tipos de muestras. Si bien el sitio dominated: Phytolacca dioica, located in the sampling site
de muestreo se localiza en una región agrícola con (Tapera Alberdi) as can be seen in the photo of the

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Scientia
Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

cultivo de cereales, el polen hallado posiblemente place (Fig. 1), as three important sized specimens have
corresponda a especies nativas o adventicias, ya been identified. This species presents ambophilous
que los primeros son reconocidos por su tamaño pollination for which reason its production of pollen
polínico. is high, having been found in flowering at the time of
Se destacan en este sitio la riqueza de Gym- sampling which contributed to its high concentration
nospermae, representada por Cupressus, Araucaria in the samples.
y Pinus. Los tres géneros se hallan cultivados en In the herbaceous pollen category the Poaceae
parques de la Escuela Alberdi como de la EEA INTA family stands out, (a multispecific pollinic type) and
Paraná. Numerosos ejemplares de Cupressus, se en- found in the two types of samples. Even though the
cuentran lindantes al sitio de muestreo, formando sampling site is located in an agricultural region with
una cortina forestal en el predio del INTA como se cereal crops, the pollen found possibly corresponded
visualiza en la Fig.1. Estas especies presentan po- with native or adventitious species, as the first were
linización anemófila, lo cual explica su concentra- recognised for its pollinic size.
ción en las muestras. In this site the richness of Gymnospermae stands
También se registró la presencia de Jacaranda out, represented by Cupressus, Araucaria and Pinus. The
mimosifolia, especie arbórea entomófila, con dos three genera are seen cultivated at the Tapera Alberdi
ejemplares en el sitio de muestreo. Asimismo, se and in the EEA INTA Paraná. Many Cupressus are found
hallaron en las muestras, enredaderas como Loni- here at the sampling site, forming a forestal curtain in
cera japonica Thunb (cultivada en Escuela Alberdi) the INTA area as visualised in Fig.1. These species
e Ipomoea sp., que se halla en todo el borde este, present anemophilous pollination, which explains their
adyacente al camino que lleva al lugar. concentration in the samples.
Como especie extra local presente en las mues- The presence of Jacaranda mimosifolia, was also
tras, se halló polen de Eucalyptus (género ambófilo, registered, as an entomophilous tree species, with
con ejemplares ubicados al sur del sitio de mues- two specimens on the sampling site. Also seen in the
treo, a una distancia de 200 metros) y como polen samples were creepers such as Lonicera japonica Thunb
extra regional, a Alnus sp. Posiblemente por la baja (cultivated at the school, ‘Escuela Alberdi’) and Ipomoea
frecuencia con que se halló, se trate de la especie sp., which was seen in the Eastern border adjacent to
arbórea anemófila A. acuminata, que forma bos- the path that leads to the school.
ques en la ecoregión Selva de las Yungas (García An extra local species present in the samples was
& Nitiu, 2012). Este tipo polínico ha sido registra- the pollen of Eucalyptus (ambophilous genus, located
do en la provincia de Entre Ríos en la localidad de to the south of the sampling site, at a distance of 200
Diamante (Latorre & Caccavari, 2010) y en el Parque metres) and as extra regional pollen, Alnus sp. Possibly
Nacional Pre-Delta (Latorre & Caccavari, 2006). for the low frequency with which it was seen, it is a
Se hallaron además en este sitio esporas de he- anemophilous tree, A. acuminata, found in forests in the
lechos en baja concentración y esporas fúngicas de ecoregion called Selva (Jungle) de las Yungas (García
Alternaria y del Tipo Sordaria. & Nitiu, 2012). This pollen type has been registered in
Discriminación entre sitios de estudio the province of Entre Ríos in the locality of Diamante
En el análisis de agrupamiento (Fig. 4) se ob- (Latorre & Caccavari, 2010) and in the National Pre
servan claramente dos grupos de muestras muy Delta Park (Parque Nacional Pre-Delta) (Latorre &
disímiles entre sí, correspondiendo a los dos sitios Caccavari, 2006).
de muestreo. Las características botánicas de las Furthermore spores of ferns in low concentrations
zonas de estudio son marcadamente diferentes and fungal spores of Alternaria and of the Sordaria
permitiendo la clara separación de las muestras de Type were found on this site.
distinta procedencia, lo cual remarca a su vez la es- Distinguishing between the study sites
trecha vinculación o asociación de las muestras con In the analysis of the grouping (Fig. 4) two
la vegetación de origen. sampling groups that are very dissimilar to each other
Consideraciones generales sobre los espec- can be clearly observed from the two sampling sites.
tros polínicos The botanical characteristics of the study zones are
Es un rasgo característico que la representación markedly different and allow a clear separation of the
polínica puede estar asociada principalmente a la samples from the two different sources, which in turn
cercanía de la fuente emisora (Latorre et al., 2001). underlines the close link or association of the samples
with the vegetation of its original location.

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Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

El polen contenido en un determinado espectro General considerations on pollen assemblage


proviene principalmente de fuentes locales, y en It is a characteristic trait that the pollen
menor medida de fuentes extralocales, regionales representation can be associated principally with the
o extraregionales, explicando de alguna manera closeness to the originating source (Latorre et al.,
que los espectros polínicos, reflejan en general, la 2001). The pollen contained in a determined spectrum
composición florística de la vegetación de la zona originates principally from local sources and to a lesser
(Naab, 1999). Sin embargo, existen diversos facto- measure, from extra local, regional or extra regional
res que pueden incidir en la relación cuantitativa sources thus explaining in some way that the pollen
polen-vegetación; se pueden mencionar entre assemblage, in general, reflect the floristic composition
ellos: los procesos asociados a la floración, los me- of the zone’s vegetation (Naab, 1999). However, there
canismos de dispersión, la distancia a las fuentes are diverse factors that can influence the quantitative
emisoras, la abundancia y distribución de las fuen- relationship pollen-vegetation; and among these, the
tes emisoras, las estrategias reproductivas, los ca- following can be mentioned: the processes associated
racteres específicos del polen que inciden en los with flowering, the mechanisms of dispersion, the
procesos de transporte y los factores meteorológi- distances of the originating sources, the abundance
cos que afectan a las diferentes etapas fenológicas and distribution of the originating sources, the
de la vegetación (Naab, 1999). reproductive strategies, the specific characteristics of
La estrategia de polinización afecta el área de the pollen that influence the processes of transport
aporte polínico. Para especies de polinización en- and the meteorological factors that affect the different
tomófilas, las áreas de donde proviene el polen no phenological stages of the vegetation (Naab, 1999).
exceden los 20 m de diámetro respecto del sitio The pollination strategy affects the area of pollen
de muestreo (Yazvenko, 1991). Las especies ento- reach. For entomophilous pollination, the areas from
mófilas presentan pólenes por lo general grandes, where the pollen comes does not exceed 20 m diameter
pegajosos, muy ornamentados y fácilmente con- with respect to the site of sampling (Yazvenko, 1991).
servables. Estas características dificultan la emisión Entomophilous species present pollen that is generally
y transporte en las masas de aire. Además, estas large, sticky, very ornamented and easily conserved.
especies producen menos polen comparadas con These characteristics encumber emission and transport
las especies de polinización anemófila, que para in air masses. Furthermore, these species produce
asegurar la fecundación producen cantidades con- less pollen compared to anemophilous pollination
siderables (Faegri et al., 1989). Por el contrario, los species, that, to assure fecundity produce considerable
pólenes anemófilos presentan características que quantities (Faegri et al., 1989). On the other hand,
facilitan el transporte eólico, como son su diáme- anemophilous pollen presents characteristics that
tro pequeño, livianos, con pared delgada y lisa o facilitate eolic transport, such as its small diameter,
con ornamentaciones tenues (Aljaro & Hoffmann, lightness with thin, smooth walls and well tenuous
1979). ornamentation (Aljaro & Hoffmann, 1979).
Los pólenes entomófilos son útiles en la investi- Entomophilous pollen is useful in forensic
gación forense ya que generalmente se encuentran investigation as it is generally found close to zones
muy cercanos a las zonas de origen de la disper- where dispersion commences. They are rarely found
sión. Rara vez se encuentran en las muestras foren- in forensic samples but when they are present they
ses, pero si son hallados indican un alto grado de indicate a high level of closeness to the mother plant
proximidad de la planta madre (Bryant et al., 1990). (Bryant et al., 1990).
La relación polen entomófilo vs polen anemófi- The entomophilous pollen vs. anemophilous pollen
lo, presenta una marcada paridad en las muestras presents a marked parity in the samples that were
analizadas (PSM: 8/9; TA: 9/9), diferenciándose de analysed (PSM: 8/9; TA: 9/9), while differentiating
los estudios aeropalinológicos. Asimismo, la rela- themselves in the aereopalynological studies. Also, the
ción polen arbóreo-arbustivo (PA) y polen herbá- relationship pollen-tree-shrub (PA) and herbaceous
ceo (PNA) hallada en los dos sitios de estudio (PSM: pollen (PNA) found in the two study sites (PSM:
12/11; TA: 8/13), refleja una marcada paridad entre 12/11; TA: 8/13), reflect a marked parity between
ambos en el primer sitio, y un poco menos equitati- the two in the first site, and are a little less similar
va en el segundo. Estos valores se diferencian tam- in the second. These values are also different in the
bién de los estudios aeropalinológicos, revelando aereopalynological studies, revealing the deposit and

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A B C D

20 µm 20 µm 20 µm 20 µm

E F G H

20 µm 20 µm 20 µm 20 µm

I J K L

20 µm 20 µm 20 µm 20 µm

M N O P

20 µm 20 µm 20 µm 20 µm

Figure 5. Pollen and Fungal spores in the samples. A: Pinus sp. B: T. Poaceae. C: Ammi majus. D: T. Sida. E: T. Ambrosia. F: Ephedra sp. G:
Phytolacca dioica. H: Cirsium vulgare. I: Alnus sp. J: T. Gomphrena perennis. K: T. Cypella. L: Ligustrum sp. M: T. Trichodelitschia. N: Alternaria sp. O:
Delitschia sp. P: Tetraploa sp.
Figura 5: Tipos polínicos y esporales registrados en las muestras. A: Pinus sp. B: T. Poaceae. C: Ammi majus. D: T. Sida. E: T. Ambrosia. F:
Ephedra sp. G: Phytolacca dioica. H: Cirsium vulgare. I: Alnus sp. J: T. Gomphrena perennis. K: T. Cypella. L: Ligustrum sp. M: T. Trichodelits-
chia. N: Alternaria sp. O: Delitschia sp. P: Tetraploa sp.

el depósito y persistencia del polen arbóreo en el persistence of tree pollen in the sediment.
sedimento. The pollen found in the sediment is the result of
El polen hallado en el sedimento es el resultado the deposition of what in previous periods was found
del depósito de aquél que en periodos anteriores in suspension in the atmosphere. Possibly the intense
se encontraba en suspensión en la atmósfera. Posi- rainfall seen during October (235,5 mm: 120% higher
blemente las intensas precipitaciones acontecidas than the historic mean) contributed to this phenomenon,
depositing not only abundant tree pollen characteristic

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durante octubre (235,5 mm: 120% superiores a la of the end of Winter but also the herbaceous pollen
media histórica) hayan contribuido a este fenóme- which began to dominate from Spring. This would
no, depositando no sólo el abundante polen arbó- explain the high values of pollen from tree species with
reo característico de fines de invierno, sino también flowering that is coincidental with the time of sampling
el herbáceo que empezó a dominar a partir de pri- (such as Ligustrum), which in another way would have
mavera. Esto explicaría los altos valores de pólenes remained with its pollen suspended for longer, delaying
de especies arbóreas con floraciones coincidentes the pollen rain and decreasing its concentration in the
con el momento de muestreo (como Ligustrum), sediment at the time of sampling. According to Peternel
que de otra manera hubiesen permanecido con sus et al. (2004) abundant rainfall produces a diluting effect
pólenes suspendidos por más tiempo, retrasando on the atmosphere in proportion to its duration and
la lluvia polínica y disminuyendo su concentración intensity, and is responsible for the lack of coincidence
en el sedimento al momento del muestreo. Según between the quantity of pollen in the air and the floral
Peternel et al. (2004) las precipitaciones abundan- phenophase (Latorre et al., 2001).
tes producen un efecto de lavado de la atmósfera
en proporción a su duración e intensidad, y son res- CONCLUSIONS
ponsables de la falta de coincidencia entre la canti- The pollen assemblage of the sample of sediment
dad de polen en el aire y la fenofase floral (Latorre from the shoe sole corresponded acceptably with the
et al., 2001). superficial sediment (control sample from a forensic
scenario) in both study sites.
CONCLUSIONES The study sites remained perfectly distinctive on
El espectro polínico de la muestra de sedimento the basis of its pollen assemblage, and this favours
del calzado se corresponde aceptablemente con el the determination of the geographical origin of the
de sedimento superficial (muestra control de un es- samples.
cenario forense) para los dos sitios de estudio. These results show that the analysis of pollen from
Los sitios de estudio quedan perfectamente soil samples is a valuable tool for associating persons
discriminados sobre la base de sus espectros polí- or objects with the scene of a crime, thus becoming
nicos, lo cual favorece la determinación del origen an additional element of assessment in the analysis of
geográfico de las muestras. forensic cases.
Estos resultados señalan que el análisis del po- Future research contemplating different
len de muestras de suelo es una valiosa herramien- meteorological conditions, and in other seasons of the
ta para asociar personas u objetos con la escena del year, will contribute to amplifying knowledge on the
crimen, constituyéndose en un elemento más de pollen type richness, abundance and persistence of
valoración en el análisis de casos forenses. palynomorphs in sediment.
Futuras investigaciones que contemplen dife- Going deeper into the analysis of the abundance
rentes condiciones meteorológicas y en en otras of fungal spores would supply relevant information
estaciones del año, contribuirán a ampliar el cono- to provide a closer link of the samples with the
cimiento sobre la riqueza, abundancia y persisten- environment from which it originates.
cia de los palinomorfos en el sedimento.
Ahondar en el análisis de la abundancia de las ACKNOWLEDGEMENTS
esporas fúngicas proporcionará información rele- The first author wishes to give very special thank
vante para vincular más estrechamente las mues- the Technician Guillermo Martínez, for his valuable
tras con el ambiente de procedencia. collaboration with the processing of samples.
AGRADECIMIENTOS Thanks also to Sol Overtello and Lilian Albornoz for
El primer autor desea agradecer muy espe- collaborating in field work, and to Néstor Garciarena,
cialmente al técnico Guillermo Martínez, por su for help with meteorological data from the INTA
valiosa colaboración en los procesamientos de las Paraná. The authors also thank Dr. Noelia Nuñez
muestras. A Sol Overtello y Lilian Albornoz, por su Otaño for taxonomical assignations of fungal spores
colaboración en las tareas a campo. A Néstor Gar- and the anonymous reviewers for their observations
ciarena, por facilitar los datos meteorológicos de and suggestions that helped improve the final version
INTA Paraná. Los autores agradecen a la Dra. Noelia of this article.
Nuñez Otaño por las asignaciones taxonómicas de

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Bordi, La palinología como herramienta forense... Interfluvius 10(1):46-79, 2019 Paraná

esporas fúngicas y a los revisores anónimos por sus presentes en el Parque Nacional El Palmar, Provincia de
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Interfluvius 10 (1): 80-99, 2019 - Paraná ISSN 1853-4422 (printed) ISSN 1853-4430 (on line)

POLLEN ASSEMBLAGE RECOVERED FROM THE CLOTHES OF A


HYPOTETIC SUSPECT BY ADHESIVE TAPE

ESPECTRO POLÍNICO RECUPERADO DE LA ROPA DE UN HIPOTETICO


SOSPECHOSO MEDIANTE CINTA ADHESIVA
Cecilia Trujillo1, Mariana Bertos1, Lilian Albornoz2, Sol Overtello2, Marcia Gallo1, Mario Bordi1,3 & Guillermina Fagúndez1

1
Laboratorio de Actuopalinología - CICYTTP (CONICET-Prov. ER.-UADER). Materi y España, E3105BWA Diamante, Entre Ríos.
2
Licenciatura en Criminalística y Accidentología Vial, FCyT-UADER.
3
Dirección Criminalística, Policía de la Provincia de Entre Ríos. Paraná, Entre Ríos, Argentina.

ctrujillo@cicyttp.org.ar

ABSTRACT. The objective of this work was to know the pollen assemblage that can be
recovered from the clothes of a hypothetical suspect, by the adhesive tape method, and to
check if it allows to be linked with the forensic scenario. The research was carried out in
Parque General San Martín (Entre Ríos, Argentina); the samples were taken in three regions
of the hypothetical suspect body (shoulders, thighs and ankles) who walked for an hour
on a inner vegetated  trail of the park. Forty palinomorphs were identified, of which 25
corresponded to pollen types and 15 to non-pollen types. The pollen types were assigned
to 18 different botanical families and the non-pollen types were assigned to: Pteridophyta
(1) and to Fungi (14). The use of adhesive tape for sampling in clothing proved effective,
allowing abundant palinomorphic material to be collected, which remained attached during
chemical treatment of acetolysis. The sampled areas of the body that allowed lifting more
amount and richness of palinomorphic material were ankles and shoulders. The pollen and
sporal spectra found in the samples proved a useful and valuable approach to its linkage to
the study site.

KEY WORDS. Criminalistics. Forensic palynology. Pollen. Fungal spores.

RESUMEN. El objetivo del presente trabajo fue conocer el espectro polínico que puede
ser recuperado de la ropa de un hipotético sospechoso, a través del levantamiento con
cinta adhesiva, y comprobar si el mismo permite vincularlo con el escenario forense.
El estudio fue desarrollado en el Parque General San Martín (Entre Ríos, Argentina);
las muestras fueron tomadas en tres regiones del cuerpo (hombros, muslos y tobillos)
de una persona que caminó durante una hora por un sendero vegetado interno del
parque. Fueron identificados 40 palinomorfos, de los cuales 25 correspondieron a tipos
polínicos y 15 a tipos no polínicos. Los tipos polínicos fueron asignados a 18 diferentes
familias botánicas y los no polínicos se asignaron a: Pteridophyta (1) y hongos (14). El
uso de cinta adhesiva para el muestreo en ropa demostró ser eficaz, permitiendo re-
coger abundante material palinomórfico, el cual permaneció adherido durante el tra-
tamiento químico de acetólisis. Las zonas del cuerpo muestreadas que permitieron le-
vantar mayor cantidad y riqueza de material palinomórfico fueron tobillos y hombros.
Los espectros polínico y esporal hallados en las muestras resultaron una aproximación
útil y valiosa para su vinculación con el sitio de estudio.

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Trujillo et al, Espectro polínico recuperado de la ropa... Interfluvius 10(1):80-99, 2019 Paraná

PALABRAS CLAVES. Criminalística. Palinología Forense. Polen. Esporas fúngicas.

Recibido: 25 de marzo de 2019


Aceptado: 29 junio de 2019

INTRODUCCIÓN INTRODUCTION
Forensic Palynology focuses on legal evidence
La palinología forense se enfoca en la eviden- derived from the study of pollen and spores -in a strict
cia legal derivada del estudio del polen y las espo- sense- to help solve legal problems (Bryant Jr. et al.,
ras -en un sentido estricto- para ayudar a resolver 1990). This discipline could be used to link persons and
problemas legales (Bryant Jr. et al., 1990). Esta dis- objects associated to a crime with the scene of the crime
ciplina puede ser usada para vincular personas y (Mildenhall, 2006). In a broad sense, the structures
objetos asociados a un crimen con la escena del analysed by Palynology, known as palynomorphs,
mismo (Mildenhall, 2006). En un sentido amplio, las have diverse origins, as they can be vegetal, fungal or
estructuras analizadas por la palinología, denomi- even animal (Jansonius & Mc. Gregor, 1996; Hesse
nadas palinomorfos, son diversas en cuanto a sus et al., 2009). Palynomorphs are important indicators
orígenes, pudiendo ser éste vegetal, fúngico, o aún regarding the environment of origin and a group of
animal (Jansonius & Mc. Gregor, 1996; Hesse et al., palynomorphs observed during an analysis constitutes
2009). Los palinomorfos son poderosos indicado- the palynological assemblage of a specific sample
res del ambiente de origen, y el conjunto de ellos (Wiltshire et al., 2014).
observado durante un análisis constituye el perfil o Many factors are involved in the representation
espectro polínico de una muestra específica (Wilts- of a plant’s total pollen load found in the air at a
hire et al., 2014). determined time (Tauber, 1967); an important factor
En relación a los vegetales, muchos factores is the pollination type of the plant; if pollination is
están involucrados en la representación de una carried out by air or insects, given that in the first case
planta en el total (carga) de pólenes presentes en el copious quantities of pollen that is easily dispersed is
aire en un determinado momento (Tauber, 1967); produced, while in the second case, small quantities of
uno importante es el tipo de polinización que pre- pollen is produced which may never be found in the
senta la planta: por el aire o por insectos, ya que en “air spora” (Wiltshire et al., 2014). A high variability
el primer caso produce copiosas cantidades de un exists in the distribution of the vegetation, and this
polen que se dispersa con facilidad, en cambio en is reflected in the spatial pattern of the pollen on the
el segundo, produce pequeñas cantidades las cua- ground; therefore, there are no two places that show
les puede que nunca sean encontradas en la “carga the same palynological spectrum, and this makes the
aérea” (Wiltshire et al., 2014). Existe una alta variabi- discipline a powerful technique to differentiate one
lidad en la distribución de la vegetación, y esto se place from another (Wiltshire, 2010).
ve reflejado en el patrón de la deposición del polen Palynomorphs can be recovered from any material
en el suelo; por lo tanto, no existen dos lugares que that have been exposed or in contact with air. Some
presenten el mismo espectro palinológico, y esto types of materials examined for pollen in forensic cases
hace de la disciplina una poderosa técnica para di- are: air filters, antique furniture, parts of the body, dry
ferenciar un lugar de otro (Wiltshire, 2010). foodstuffs, drugs, carpets, cars, clothes, feathers, skins
Los palinomorfos pueden recuperarse de casi leather, leaves, soil, etc. (Milne et al., 2005). In some
cualquier cosa que haya estado expuesta o en forensic cases that try to link persons with places,
contacto con el aire. Algunos tipos de materiales palynomorphs are searched for on clothes (Mildenhall,

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examinados para el polen en casos forenses son 2006), shoes and clothing accessories (Wiltshire et al.,
filtros de aire, muebles antiguos, partes del cuerpo, 2014), nasal cavities (Szibor et al., 1998) and mud on
alimentos secos, drogas, alfombras, coches, ropa, footwear (Walsh & Horrocks, 2008). However, clothing
plumas, pieles, pelo, cuero, hojas, suelos, etc. (Mil- continues to be one of the best sources of pollen that
ne et al., 2005). En algunos casos forenses en los can potentially be taken from a suspect at the scene of
que se intentó vincular personas con lugares, se a crime (Mildenhall, 2003). Pollen taken from clothing
buscaron palinomorfos en ropa (Mildenhall, 2006), can suggest the presence of species of determined
calzado y ropa (Wiltshire et al., 2014), cavidades na- plants or habitats, and can associate the sample with a
sales (Szibor et al., 1998) y barro de zapatos (Walsh specific place and even within a determined time frame
& Horrocks, 2008). Sin embargo, la ropa sigue sien- (Zavada et al., 2007).
do una de las mejores fuentes de polen que poten- Regarding the methods for collecting palynomorphs
cialmente puede ser recogida por un sospechoso on clothing, one of the most efficient method is the use
de la escena del crimen (Mildenhall, 2003). El polen of adhesive tape and vacuum (Jantunen & Saarinen,
recuperado de la ropa puede sugerir la presencia 2011) and hand washing of the material with distilled
de especies de plantas o hábitats determinados, water and detergent (Zavada et al., 2007; Webb et al.,
pudiendo no sólo asociar la muestra a un lugar es- 2018). The use of adhesive tape for pollen recovery
pecífico, sino además referir un marco de tiempo from the surface of clothing has been highlighted by
determinado (Zavada et al., 2007). the advantages of its simplicity, speed and low cost
En cuanto a los métodos para recolectar pali- (Wu et al., 2006); and this has been shown by various
nomorfos de la ropa, se mencionan como los más authors (Flinn, 1992; Wu et al., 2006; Jantunen &
eficientes, el uso de cinta adhesiva y aspiradora Saarinen, 2011; Huanachin-Huayascachi & Santos
(Jantunen & Saarinen, 2011) y lavado a mano de Cuyutupac, 2017).
la tela con agua destilada y detergente (Zavada et The objective of the present study was to find out
al., 2007; Webb et al., 2018). El uso de la cinta ad- the pollen spectrum that can be recovered from the
hesiva para recuperación de polen de la superficie clothing of a hypothetical suspect using adhesive tape,
de la ropa, ha sido destacado por las ventajas de and then to verify that this permits the linkage of the
su simpleza, rapidez y bajo costo (Wu et al., 2006) findings with the forensic scenario.
y probado por varios autores (Flinn, 1992; Wu et
al., 2006; Jantunen & Saarinen, 2011; Huanachin- MATERIALS AND METHODS
Huayascachi & Santos Cuyutupac, 2017). Study site
El objetivo del presente trabajo fue conocer el The samples were taken from a reserve named
espectro polínico que puede ser recuperado de la “Parque General San Martín”, located within the
ropa de un hipotético sospechoso, a través del le- protected natural area known as “Parque Escolar Rural
vantamiento con cinta adhesiva, y comprobar si el Enrique Berduc” (31º 40’ S, 60º 33’ W). This site covers
mismo permite vincularlo con el escenario forense. 594 hectares and is 23 km from the city of Paraná, in
the province of Entre Ríos, Argentina (Fig. 1).
MATERIALES Y MÉTODOS Vegetation of the study site
Sitio de estudio The reserve’s vegetation corresponds with
Las muestras fueron tomadas en una reserva Ñandubay subregion whithin the Espinal ecoregion
denominada “Parque General San Martín”, localiza- (Burkart et al., 1999), with presence of species from
da dentro del área natural protegida “Parque Esco- the Atlantic Forest in the riparian forest by (Fig. 1).
lar Rural Enrique Berduc” (31º 40’ S, 60º 33’ O). Este The Espinal is characterised by deciduous xerophytic
sitio cuenta con 594 ha y se encuentra a 23 km de forests, dominated by species of the Prosopis genus
la ciudad de Paraná, provincia de Entre Ríos, Argen- (Matteucci, 2012). Báez (1956) describes three types of
tina (Fig. 1). natural floristic environments in the Park: native shrub
Vegetación del sitio de estudio with semi-xerophytic characteristics, dominated by
La vegetación del parque corresponde a la eco- low trees such as Prosopis alba Griseb., P. nigra (Griseb.)
región del Espinal, subregión Ñandubay (Burkart Hieron., P. affinis Spreng., Celtis ehrenbergiana (Klotzsch)
et al., 1999), con presencia de especies de la eco- Liebm., Schinus longifolia (Lindl.) Speg., Myrcianthes
región Selva Paranaense en el bosque ribereño de cisplatensis (Cambess.) O. Berg, Jodina rhombifolia (Hook.
los arroyos (Fig. 1). & Arn.) Reissek, Acanthosyris spinescens (Mart. & Eichler)
Griseb., Acacia caven (Hook. & Arn.) Reissek, and

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El Espinal se caracteriza por bosques xerófilos other, less dominant tree species. There is a noticeable
caducifolios, dominado por especies del género abundance of leaning shrubs of Ephedra triandra Tul
Prosopis (Matteucci, 2012). Báez (1956) describe en and E. tweediana Fisch et C. A. Mey (Jozami & Muñoz,
el Parque tres tipos de ambientes florísticos natu- 1984); the riparian vegetation, is characterised by the
rales: arbustal nativo con características semixeró- presence of Erythrina crista-galli L., Salix humboltiana
filas, dominado por árboles bajos tales como Pro- Willd. and Sapium haematospermum Mull. Arg., among
sopis alba Griseb., P. nigra (Griseb.) Hieron., P. affinis others; there are also Grasslands, mainly represented
Spreng., Celtis ehrenbergiana (Klotzsch) Liebm., by Panicum prionites Nees and marshy species and
Schinus longifolia (Lindl.) Speg., Myrcianthes cispla- aquatic, floating vegetation. The most common species
tensis (Cambess.) O. Berg, Jodina rhombifolia (Hook. are Sagittaria montevidensis Cham et Schlecht., Echinodorus
& Arn.) Reissek, Acanthosyris spinescens (Mart. & Ei- sp., Typha latifolia L., Equisetum arvense L., Pontederia
chler) Griseb., Acacia caven (Hook. & Arn.) Reissek cordata L., Eichhornia azurea Sw Kunth, Hydrocotyle sp.,
y otras especies arbóreas menos dominantes. Se Salvinia sp., among others.
destacan abundantes arbustos apoyantes de Ephe- The area has suffered a gradual invasion process
dra triandra Tul y E. tweediana Fisch et C. A. Mey by exotic trees that modify the natural habitat and give
(Jozami & Muñoz, 1984); la vegetación ribereña, ca- place to a forest dominated by Gleditsia triacanthos L.,
racterizada por la presencia de Erythrina crista-galli and other species such as Morus alba L., Melia azedarach
L., Salix humboltiana Willd. y Sapium haematosper- L., Ligustrum lucidum W. T. Aiton and L. sinense Lour.
mum Mull. Arg., entre otras; Pastizales principal- (Berduc et al, 2010).
mente representados por Panicum prionites Nees Sampling
y especies palustres y vegetación acuática flotan- The sampling was carried out on the 2nd of
te. Las más comunes son Sagittaria montevidensis November 2012, on items of clothing of a person
Cham et Schlecht., Echinodorus sp., Typha latifolia who walked along an internal park path surrounded by
L., Equisetum arvense L., Pontederia cordata L., Ei- vegetation (Tapémbyaza’s trail), for 1 hour (Fig. 1).
chhornia azurea Sw Kunth, Hydrocotyle sp., Salvinia For the collection of palynomorphs, an adhesive
sp., entre otras. “3M” Tartan tape used for wrapping (TM 301®),
El área ha sufrido un proceso gradual de inva- which had been previously tested and it was chosen
sión de árboles exóticos que modifican el hábitat over 9 others (see Appendix). Previous laboratory
natural y crean un bosque dominado por Gleditsia tests consisted of pollen removal on similar garments
triacanthos L., y otras especies como Morus alba L., texture to which pollen was intentionally incorporated;
Melia azedarach L., Ligustrum lucidum W. T. Aiton y mounting them on a slide and observing the pollen with
L. sinense Lour. (Berduc et al, 2010). a microscope. The aspects considered for the choice of
Muestreo tape include: sufficient width to lift off a large enough
La toma de muestras se realizó el 2 de noviem- surface in one application, transparency of the tape to
bre de 2012, sobre prendas de vestir de una perso- facilitate the observation of the palynomorphs through
na que caminó por un sendero (Tapémbyaza) ve- a microscope, scarcity or absence of bubbles and the
getado interno del parque durante 1 hora (Fig. 1). adhesion of the particles.
Para la recolección de los palinomorfos se utili- For the choice of clothes to be worn, it was taken
zó cinta adhesiva de embalar “3M” Tartan TM 301®, into account that they were commonly used in the
la cual fue previamente probada y elegida sobre region. So the selected clothing consisted of a cotton
otras 9 (ver Apéndice). Las pruebas de laboratorio T-shirt and a pair of jeans which had previously been
previas consistieron en el levantamiento de polen washed and dried in an enclosed area to minimise
sobre prendas de similar textura a las que se les contamination. These clothes were then transported to
incorporó intencionalmente polen; su montaje so- the sampling site in closed polyethylene bags
bre portaobjetos y observación al microscopio. Los The sampling was carried out using adhesive tape
aspectos considerados para la elección de la cinta pieces of 25-30 cm in length, in three zones of the body:
incluyeron: el ancho para levantar una mayor su- shoulders, thighs (front above the knee) and ankles, of
perficie en una sola aplicación, la transparencia de both limbs (Fig. 2A-C). Each tape piece leaned on the
la cinta para facilitar la observación de los palino- area sampled and finger-pressure was applied so that
morfos en el microscopio, la escasez o ausencia de the surface would remain in contact with the material
burbujas y la adhesión de las partículas. (of the clothing). Once the tape was removed from
the item of clothing, the garment was folded within

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Para la elección de las prendas de vestir, se tuvo itself to avoid later contamination and stored in a large
en cuenta que fueran ropas comúnmente utiliza- enough paper-envelope that was sealed and marked
das en la región. Las prendas elegidas consistieron adequately for its transport to the laboratory.
en una remera de algodón y un pantalón de jean, Processing
las cuales fueron previamente lavadas y secadas en The processing was carried out in a laboratory
un entorno cerrado para minimizar la contamina- that had been isolated from air circulation which
ción. Las mismas fueron transportadas al sitio en has a sealed window and one antechamber for entry
bolsas de polietileno cerradas. to minimise the contamination with pollen that is
El levantamiento de las muestras se realizó uti- suspended in the air that could come in with air
lizando trozos de 25-30 cm de largo, en tres áreas currents. The tapes that were folded inwards were
del cuerpo: hombros, muslos (parte delantera por separated with tweezers and then cut in pieces with a
encima de la rodilla) y tobillos, en ambos miem- scalpel (Fig. 2D-F). The pieces’ width was similar to
bros (Fig. 2A-C). Cada trozo se apoyó sobre el área the size of the slides and this facilitated their mounting
a muestrear y se ejerció presión con el dedo para (installation). Each piece was located in a test tube of
Figure 1. Location of study site. A: Sampling path “Tapembyaza”. B: Satellite image of location and limits of the (Park) Parque General San
Martín and sampling site.
Figura 1. Ubicación del área de estudio. A: Sendero de muestreo “Tapembyaza”. B: Imagen satelital con ubicación y límites del Parque
General San Martín y del sitio de muestreo.

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no dejar superficie sin contacto con la tela. Una 10 ml with the help of a glass rod; the upper side of
vez retirada la cinta de la prenda, se dobló sobre the tape was located towards the centre of the tube
sí misma para evitar posteriores contaminaciones y (Fig. 2E). Then, the tape was acetolysed, taking care to
se guardó en un sobre de papel, se selló y etiquetó cover the tape with an acetolythic mixture (Erdtman,
adecuadamente para su traslado al laboratorio. 1969). Once the acetolysis was finalised, the tapes were
Procesamiento removed from the tubes with the aid of tweezers and
El procesamiento se realizó en un laboratorio placed in a Petri dish (Fig. 2F). The liquid contained
que se halla aislado de la circulación de aire gene- in the tubes was centrifuged at a 1500 g (3000 rpm)
ral, cuenta con una ventana sellada y una antecá- for 15 minutes in a centrifuge, Rolco CM 2036, with
mara de ingreso para minimizar la contaminación a radius, from the centre of the rotor of the sample
con polen aerosuspendido que pudiese ingresar for the centrifugation of 15,4 cm (Pendleton, 2006),
por corrientes de aire. Las cintas dobladas sobre sí so as to take out the palynomorphs that could have
mismas fueron primeramente separadas con pin- remained suspended. The supernatant was eliminated
zas, y luego cortadas en porciones pequeñas con and the residue was placed in the slide with glycerine.
un bisturí (Fig. 2D-F). El ancho de los trozos fue si- The fragments of adhesive tape were extended over
milar al de los portaobjetos para facilitar su monta- the slide with the help of tweezers and the glue was
je. Cada pieza fue colocada en un tubo de ensayo applied upwards; some drops of glycerine were added,
de 10 ml con la ayuda de una varilla de vidrio; la a coverslip was placed and sealed with colourless nail
cara adhesiva fue ubicada hacia el centro del tubo, varnish (Fig. 2G).
evitando el contacto con las paredes del tubo (Fig. Identification of pollen and non-pollen types
2E). A continuación, la cinta fue acetolizada, cui- Each preparation was observed in its totality,
dando de cubrir toda la cinta con mezcla acetolítica recording all of the pollen and non-pollen types found.
(Erdtman, 1969). Una vez finalizada la acetólisis, las The counting was carried out in three lineal transects
cintas fueron removidas de los tubos con ayuda de (parallel lines of equal distance with boundaries
una pinza y colocadas en una placa de Petri (Fig. determined by the upper and lower borders of the
2F). El líquido contenido en los tubos fue centrifu- cover slip and distributed from the left hand to the
gado a 1500 g (3000 rpm) durante 15 min. en una right hand border of the cover slip).
centrífuga Rolco CM 2036, con un radio desde el The pollen types were determined with the
centro del rotor a la muestra durante la centrifu- help of the reference collection of the Laboratorio
gación de 15,4 cm (Pendleton, 2006), con el objeto de Actuopalinología of the CICYTTP and pollen
de recoger los palinomorfos que pudiesen haber atlases (Heusser, 1971; Markgraf & D’Antoni, 1978;
quedado en suspensión. El sobrenadante fue elimi- Wingenroth & Heusser, 1984; Roubick & Moreno
nado, y el residuo fue montado en un portaobjeto Patiño, 1991; Pire et al., 1998; 2002; 2006; 2013). For
con glicerina. Los fragmentos de cintas adhesiva se the identification of the spores, specific literature
extendieron sobre un portaobjetos con ayuda de and specialists in this field were consulted (Morbelli,
una pinza, colocando el pegamento hacia arriba; se 1980; Grant Smith, 2000; Nitiu et al., 2010; Guarín et
agregaron unas gotas de glicerina, se colocó un cu- al., 2015; di Pasquo et al., 2016; Wiltshire, 2016). The
breobjeto y se selló con esmalte para uñas incoloro palynomorphs were observed with a Leica DM 5000B
(Fig. 2G). optical microscope and illustrated with photographs
Identificación de los tipos polínicos y no po- taken by a digital Leica DMC 2900 camera, both
línicos pieces of equipment are located in the Laboratorio de
Cada preparado fue observado en su totalidad, Actuopalinología of the CICYTTP. The classification
registrando todos los tipos polínicos o no polínicos of the taxa is according to Zuloaga et al. (2008). The
observados. El conteo se realizó sobre tres transec- classification of the pollen types were established
tas lineales (líneas equidistantes paralelas determi- according to Joosten & De Klerk (2002) and De Klerk
nadas por los bordes superior e inferior del cubre- & Joosten (2007).
objeto y distribuidas desde el borde izquierdo al
derecho del cubreobjeto). RESULTS
Los tipos polínicos fueron determinados con Forty (40) palynomorphs were identified, 25
ayuda de la colección de referencia del Laboratorio corresponded with pollen types and 15 with non-pollen
de Actuopalinología del CICYTTP y atlas polínicos types (Table 1 and 2, see appendix). The pollen types

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(Heusser, 1971; Markgraf & D’Antoni, 1978; Win- were assigned to 18 different botanical families and the
genroth & Heusser, 1984; Roubick & Moreno Pati- non-pollen types were assigned to: Pteridophyta (1)
ño, 1991; Pire et al., 1998; 2002; 2006; 2013). Para and fungi (14).
la identificación de las esporas se consultó biblio-
grafía específica (Morbelli, 1980; Grant Smith, 2000; Pollen types found on different parts of the
Nitiu et al., 2010; Guarín et al., 2015; di Pasquo et body
al., 2016; Wiltshire, 2016) y se realizaron consultas Table 1 and Figure 3 show the pollen types found
a especialistas. Los palinomorfos fueron obser- on the shoulders, thighs and ankles from the samples
vados bajo microscopio óptico Leica DM 5000B taken from the study site. The shoulders recorded 14
e ilustrados con fotografías tomadas con cámara pollen types. Salix was the dominant type, followed by
digital Leica DMC 2900, ambos equipos ubicados Ligustrum and Ephedra; other important types with regard
en el Laboratorio de Actuopalinología del CICYTTP. to frequency were Celtis and Gleditsia triacanthos. On the
La nomenclatura de los taxones sigue a Zuloaga et thighs, 8 pollen types were identified, with Ligustrum,
al. (2008). La nomenclatura de los tipos polínicos being dominant and followed by Poaceae and Gleditsia
se estableció de acuerdo con Joosten & De Klerk triacanthos. The remaining pollen types were found with
(2002) y De Klerk & Joosten (2007). low values (< 3,5%). On the ankles, 19 pollen types
were identified, with Celtis being dominant, followed by
RESULTADOS Ligustrum and Gleditsia triacanthos; other important types
Fueron identificados 40 palinomorfos, de los with regard to frequency were Poaceae, Gomphrena
cuales 25 corresponden a tipos polínicos y 15 a perennis and Solanum.
tipos no polínicos (Tabla 1 y 2 ver apéndices). Los With regard to the pollen types found, the ankles
tipos polínicos fueron asignados a 18 diferentes fa- presented the greater quantity (249), followed by the
milias botánicas y los no polínicos se asignaron a: shoulders (135) and, lastly, the thighs (29).
Pteridophyta (1) y hongos (14). In relation to the species habit, those that were
Tipos polínicos encontrados en las distintas predominant –bearing in mind the totality of identified
partes del cuerpo pollens-, were herbs or grasses (60%), followed by
La Tabla 1 y Figura 3 muestran los tipos polí- trees (36%) and, more scarcely, shrubs (4%) (Table 1).
nicos encontrados en hombros, muslos y tobillos With respect to the pollination syndrome, the types
recogidos en el lugar de estudio. En hombros se re- that can be assigned to entomophilous species were
gistraron 14 tipos polínicos. Salix fue el tipo domi- predominant (44%), followed by anemophilous (40%),
nante, seguido por Ligustrum y Ephedra; otros tipos the more scarce being ambophilous (16%) (Table 1).
importantes en cuanto a su frecuencia fueron Celtis
y Gleditsia triacanthos. En muslos se identificaron Spore types found on different parts of the
8 tipos polínicos, siendo el dominante Ligustrum, body
seguido por Poaceae y Gleditsia triacanthos. Los Table 2 and Figure 3 show spore types taken from
demás tipos polínicos se encontraron en valores the study site that were recorded on the shoulders,
bajos (< 3,5%). En tobillos se identificaron 19 tipos thighs and ankles. On the shoulders, 8 spore types
polínicos, siendo Celtis el dominante, seguido por were recorded with Epicoccum being dominant and
Ligustrum y Gleditsia triacanthos; otros tipos impor- followed by Helminthosporium and Venturia. On the
tantes en cuanto a su frecuencia fueron Poaceae, thighs, 6 spore types were identified with Epicoccum
Gomphrena perennis y Solanum. also being dominant and followed by undetermined
En cuanto a la abundancia de tipos polínicos basidiospores and Venturia. On the ankles, 12 spore
hallados, los tobillos presentaron la mayor canti- types were recorded with Epicoccum being dominant,
dad (249), luego los hombros (135) y por último los followed by undetermined basidiospores and Bipolaris.
muslos (29). With respect to abundance of spore types found,
Respecto al tipo de hábito de las especies, pre- the ankles presented the greatest quantity (2560),
dominaron -teniendo en cuenta la totalidad de followed by the shoulders (108) and lastly the thighs
pólenes identificados-, las hierbas (60%), seguidas (28).
por los árboles (36%) y más escasos los arbustos
(4%) (Tabla 1). En relación al síndrome de poliniza- DISCUSSION
ción, predominaron los tipos asignables a especies The use of adhesive tape as a tool for the removal

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A B C

D E

F G
Figure 2.A-C: Samplings on shoulder, thigh and ankle. D: Separation of the adhesive tape folded within itself. E: segments of adhesive tape
cut for chemical treatment. F: extraction with tweezers of the adhesive tape segments after chemical treatment. G: mounted adhesive tape
Figura 2. A-C: Toma de muestras en hombro, muslo y tobillo. D: Separación de la cinta adhesiva doblada sobre sí misma. E: segmen-
tos de cinta adhesiva cortados para su tratamiento químico. F: extracción mediante pinza de los segmentos de cinta adhesiva luego
del tratamiento químico. G: montaje de la cinta adhesiva.

entomófilas (44%), seguidos por los de anemófi- of palynomorphs in clothes is well known (Flinn,
las (40%), siendo más escasos los tipos ambófilos 1992; Wu et al., 2006; Jantunen & Saarinen, 2011;
(16%) (Tabla 1). Huanachin-Huayascachi & Santos Cuyutupac, 2017);
Tipos esporales encontrados en las distintas however, in the majority of cases, the examination of
partes del cuerpo the tape is carried out through a slide using the tape
En la Tabla 2 y Figura 3 se pueden observar los without prior acetolysis. The treatment of the tape with
tipos esporales registrados en hombros, muslos y acetolysis proposed here, favours its examination. It
tobillos recogidos en el lugar de estudio. En hom- was checked the loss of palynomorphs due to chemical
bros se registraron 8 tipos esporales, dominando treatment and processing was minimal. The quantity
Epicoccum, seguido por Helminthosporium y Ven- of palynomorphs found in the concentrated residue
turia. En muslos se identificaron 6 tipos esporales, after the removal of tape fragments was practically
siendo dominante también Epicoccum, seguido por negligible.
basidiospora indeterminada y Venturia. En tobillos, Aeropalynological studies carried out in the

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Figure 3. Palynological diagram of percentages of the samples taken region in a natural reserve (National park Pre-Delta,
from shoulders, thighs and ankles. Entre Ríos) spanning one year with two gravitational
Figura 3.Diagrama palinológico porcentual de las muestras re-
colectadas en hombros, muslos y tobillos.
samplings (2 sub-regions), recorded values of 73
pollen types (Latorre & Caccavari, 2006). Here, the
richness of the pollen types found in the study was
considerable bearing in mind that the sampling
contemplated a walk along a path lasting just one hour.
The pollen types in the present study were recorded in
the previously mentioned work with the exception of
only 2 entomophilous species (Acicarpha tribuloides and
Gleditsia triacanthos); the first of these, a plant of scanty
bearing, and the second, a non-native tree species
found in the Parque San Martín as an invader. This
shows that in both natural environments, the pollen
spectrum reflects the botanical composition of the
sites, and are characteristic of the Espinal ecoregion.
With the method used here, the total quantity of
spore types recorded was six times higher to the pollen
types. The ankles recorded the highest quantity and
richness of palynomorphs. In this zone, the quantity
of spore types was ten times higher than the pollen
types. Regarding to plant habit, the herbaceous plants
predominated in richness (53%), while the trees
dominated representing 59.5% of the pollen spectrum
in frequency of apparition.
On the shoulders and thighs, the quantities
recorded for both types of palynomorphs were similar.
The thighs recorded lower values in quantity and
in richness. With regard to the habit of the species,
trees were predominant in richness (50%), as well as
in frequency of apparition (86.7%). The shoulders
gathered an intermediate quantity and this could also
be said of the richness of pollen and spore types
compared to other sampled body zones. Here too,
trees were predominant in richness (50%), as well as in
frequency of apparition (72.3%).
It is possible that the high level of richness as
well as the abundance of palynomorphs found on
the ankles is due to the removal of those deposited in
the sediment or the grasses that cover the path; which
happens when walking and facilitates re-suspension
or adherence. Jantunen & Saarinen (2011) also found
the highest levels of pollen in lower body zones (at
se registraron 12 tipos esporales, siendo Epicoccum the height of the ankle), underlining the fact that the
el dominante, seguido por basidiospora indetermi- gramineae and entomophilous species increase in
nada y Bipolaris. the upper clothing of a person (such as T-shirt) and
En cuanto a la abundancia de tipos esporales towards the shoe area, indicating that more pollen
hallados, los tobillos presentaron la mayor canti- adheres to the clothes in direct contact with the plants.
dad (2560), luego los hombros (108) y por último The low values found on the thighs is possibly due to
los muslos (28). the zone that does not favour the deposition and/or
retention of palynomorphs unlike the other areas that
DISCUSIÓN were sampled that had pleats or horizontal surfaces

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El uso de la cinta adhesiva como herramienta that facilitated these actions.


para el levantamiento de palinomorfos en ropa es The entomophilous species were slightly dominant
bien conocido (Flinn, 1992; Wu et al., 2006; Jantunen in richness (44% of the total), while the anemophilous
& Saarinen, 2011; Huanachin-Huayascachi & Santos species represented 40% and the remaining 16% was
Cuyutupac, 2017); sin embargo, en la mayoría de ambophilous. The dominant species in the pollen
los casos, el examen de la cinta se realiza mediante spectrum were trees, being Gleditsia entomophilous,
un montaje directo de la misma, sin previa while the other very abundant such as Ligustrum and
acetólisis. El tratamiento de la cinta con acetólisis Salix are ambophilous; and Celtis anemophilous. Also,
aquí propuesto, favoreció el examen de las mismas, other species with high values such as Poaceae and
comprobándose que la pérdida de palinomorfos Ephedra are anemophilous.
debida al tratamiento químico y procesamiento fue Adams-Groom (2015) had similar results, this study
mínima, siendo prácticamente nula la cantidad de states that there is higher frequency and abundance of
éstos hallados en el residuo concentrado luego de the taxa from trees and grasses pollinated by the wind
retirar los fragmentos de cinta. while the taxa pollinated by insects are, in general, poorly
Estudios aeropalinológicos desarrollados en represented though some plants that are common in
la región, en un área natural (Parque Nacional a particular environment can be entomophilous and
Pre-Delta, Entre Ríos) a través de un año, con 2 thus be highly represented in a pollen spectrum. This
muestreadores gravitacionales (2 subregiones), situation is exemplified by Gleditsia in this study. The
registraron valores de 73 tipos polínicos (Latorre species that are wind-pollinated have a high production
& Caccavari, 2006). Por ello, la riqueza de tipos of pollen which are generally small and light, while the
polínicos hallados en este estudio fue considerable insect-pollinated species have pollen that tends to be
teniendo en cuenta que el muestreo contempló un heavier (Pla Dalmau, 1961); the grains are bigger and
recorrido por un sendero en solo 1 hora. Los tipos have faster velocity of sedimentation which, when
polínicos del presente trabajo fueron registrados liberated by the plant tend to fall quickly to the ground.
en el estudio antes mencionado, con excepción de These taxa are under-represented in the pollen spectra
sólo 2 especies entomófilas (Acicarpha tribuloides y and can be of significance as evidence when they are
Gleditsia triacanthos); la primera de ellas, una hierba detected (Adams-Groom, 2015).
de escaso porte, y la segunda, una especie arbórea On the other hand, the height of the plant affects
adventicia sólo existente en el área del Parque San the dispersion range of the pollen but can dilute the
Martín como invasora; lo cual pone de manifiesto concentration close to the production source (Skjoth
que en ambos ambientes naturales, el espectro et al., 2013). Therefore, tall anemophilous trees tend
polínico refleja la composición botánica de los to disperse pollen with the length and breadth of the
sitios, característica de la ecoregión del Espinal. source while lower plants tend to have a smaller but
Con el método aquí empleado, la cantidad more concentrated range depending on the pollination
total de tipos esporales registrados fue seis veces strategy and the levels of pollen production (Adams-
superior a la de tipos polínicos. En tobillos se registró Groom, 2015). The relationship origin-distance of the
la mayor cantidad y riqueza de palinomorfos. En pollen varies according to the habitat, the height of the
esa zona, la cantidad de tipos esporales fue diez plants, the pollination strategy and the exposure to air
veces superior a la de tipos polínicos. En cuanto currents. For example, some studies suggest that in a
al hábito de las especies vegetales halladas, las closed canopy of trees, at a given time, the majority of
hierbas predominaron en riqueza (53%), mientras the pollen probably was originated within a range of 20
que los árboles dominaron representando un to 150 m. For wind-pollinated taxa, in an open space,
59.5% del espectro polínico en cuanto a frecuencia the pollen can move to greater distances with adequate
de aparición. meteorological conditions as demonstrated by Skjoth
En hombros y muslos las cantidades registradas et al. (2013).
para ambos tipos de palinomorfos fueron similares. At the study site, which was characterised by a low
En muslos se registraron los menores valores, canopy of trees and enclosed by an abundance of
tanto en cantidad como en riqueza. En cuanto al bushes, this would explain the strong connection of
hábito de las especies vegetales, predominaron the pollen types found on the pollen spectrum with the
los árboles tanto en riqueza (50%), como en environment in which the pollen originated as well as
frecuencia de aparición (86.7%). En hombros se the abundance of mainly anemophilous trees found to
be in flower at the time of sampling.

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10 µm
A 10 µm
B 10 µm
C 10 µm D

10 µm
E 10 µm
F 10 µm
G 10 µm H

10 µm
I 10 µm J 10 µm K 30 µm
L

10 µm M 10 µm
N 10 µm O 10 µm
40 µm
P

10 µm Q 10 µm R 10 µm
S 10 µm T
Figure 4. Pollen and spore types recorded on the samples. A: Acicarpha tribuloides. B: Ammi visnaga. C: Asteroideae. D: Celtis. E: Cyperaceae. F:
Ephedra. G: Eucalyptus. H: Sonchus. I: Ligustrum. J: Gleditsia triacanthos. K: Gomphrena perennis. L: T. Poaceae. M: Epicoccum. N: Basidiomycota. O:
Spegazzinia cf. tessarthra. P: Tetraploa. Q: Bipolaris. R: Meliola. S: Pithomyces cf. chartarum. T: Alternaria.
Figura 4. Tipos polínicos y esporales registrados en las muestras. A: Acicarpha tribuloides. B: Ammi visnaga. C: Asteroideae. D: Celtis.
E: Cyperaceae. F: Ephedra. G: Eucalyptus. H: Sonchus. I: Ligustrum. J: Gleditsia triacanthos. K: Gomphrena perennis. L: T. Poaceae. M: Epi-
coccum. N: Basidiospora indeterminada. O: Spegazzinia cf. tessarthra. P: Tetraploa. Q: Bipolaris. R: Meliola. S: Pithomyces cf. chartarum.
T: Alternaria.

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halló una cantidad y riqueza de tipos polínicos y The presence of a pollen type in a sample supplies
esporales intermedia respecto a las demás regiones valuable information on the time of year, the way
muestreadas. Aquí también predominaron los in which the sample was contained, not only in a
árboles tanto en riqueza (50%), como en frecuencia place but also with regard to time as each plant has
de aparición (72.3%). a specific flowering period. Thus it is to be expected
Es posible que la alta riqueza y abundancia that in the sample, those taxa that had flowered at
hallada en tobillos se deba a la remoción de los the time of sampling would prevail (Adams-Groom,
palinomorfos depositados en el sedimento o las 2015). This concept was reaffirmed in this study, and
hierbas que cubren el sendero, que se produce al a close relationship was found between the species
caminar facilitando su re-suspensión y adherencia; whose flowering periods coincided with the sampling
asimismo muchas especies herbáceas que cubren period and those recorded in the pollen assemblage.
el sendero pudieron ser rozadas favoreciendo la The information on the flowering periods were taken
adherencia. Jantunen & Saarinen (2011) también from a study carried out in the region by Fagúndez et
hallaron los mayores niveles de polen en áreas al. (2016), who furthermore highlighted that there is
inferiores del cuerpo (a la altura de tobillo), a flowering peak in tree species in spring, which also
resaltando que la cantidad de gramíneas y de explains the high records found in the samples.
especies entomófilas se incrementa desde la prenda One of the factors that affects the deposition of
superior de una persona (remera) hacia la zona de pollen and spores in the environment is meteorological
los zapatos, indicando que más polen se adhiere a conditions (Madanes & Millones, 2004). The dispersion
la prenda en contacto directo con las plantas. Los of palynomorphs in the atmosphere is modulated by
bajos valores hallados en muslos, posiblemente meteorological parameters such as rainfall, humidity,
se deba a que la zona no favorece el depósito y/o temperature, velocity and force of wind (Ezike et
retención de los palinomorfos, a diferencia de las al., 2016). The rainfall that took place in the month
demás áreas muestreadas que presentan pliegues of October before the sampling was exceptionally
o superficies horizontales que facilitarían el mismo. higher (235.5 mm) than the historic mean (106 mm)
Las especies entomófilas fueron levemente (INTA, 2012). The abundance of pollen might have
dominantes en riqueza (44% del total), mientras been greater without these extraordinary rains. Ezike
que las especies anemófilas representaron el et al. (2016), indicate that a higher intensity of rainfall,
40% y las ambófilas el 16% restante. Las especies inferred by its quantity and duration, leads to lessening
dominantes en el espectro polínico fueron árboles, of pollen morphotypes as the rain sweeps away the
de los cuales sólo Gleditsia es entomófila, mientras pollen suspended in the atmosphere.
que otros tipos muy abundantes como Ligustrum With regard to fungi, the high humidity in the
y Salix son ambófilos; y Celtis anemófilo. También atmosphere generated by a month of abundant
otras especies con altos valores, como Poaceae y rain prior to the sampling month, favoured fungal
Ephedra presentan polinización anemófila. development; and the production of spores was also
Resultados similares fueron hallados por aided by the favourable temperatures of the season.
Adams-Groom (2015), quien afirma que los taxones According to Sánchez Espinosa & Almaguer Chávez
polinizados por el viento, de árboles y pastos (2011) values of 70-80 % of relative humidity favour
ocurren con mayor frecuencia y abundancia, the liberation of many fungal spores. It is currently
mientras que los taxones polinizados por insectos believed that the fungi grow and sporulate better at
están, en general, mal representados, aunque temperatures higher than 15 - 20°C (Carlile et al., 2001).
pueden algunas plantas entomófilas que son The relative humidity, in contrast to the temperature of
comunes en un determinado ambiente, estar the atmosphere, plays a clear role in fungal diversity
altamente representadas en el espectro polínico. and it is recognised that the production of spores in an
Gleditsia ejemplifica, en este trabajo, esa última ample range of fungi depends upon adequate rainfall
situación. Las especies polinizadas por el viento (Rúa Giraldo, 2013).
presentan alta producción de pólenes, los cuales There are plant species that indicate a specific
son generalmente pequeños y livianos, mientras environment and these are called indicator species
las especies polinizadas por insectos, presentan (Milne et al., 2005). In legal cases these can be essential
pólenes que tienden a ser más pesados (Pla to be able to associate a suspect, victim or an object
Dalmau, 1961); los granos son más grandes y with a specific place. In the samples analysed, the

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tienen velocidades de sedimentación más rápidas, pollen spectrum was characterised by a high number
por lo que al ser liberados por la planta tienden a of pollen types, with the predominance of types
caer rápidamente al suelo. Esos taxones estarán that can be assigned to representatives of trees that
sub-representados en los espectros polínicos are typical natives of semi-xerophytic forests such as
pero pueden ser de significancia como evidencia Schinus, Ephedra, Celtis and Prosopis.There were also
cuando se hallan presentes (Adams-Groom, 2015). abundant pollen of exotic tree species widespread in
Por otro lado, la altura de la planta afecta el the study site such as Ligustrum, Gleditsia and Morus.
rango de dispersión del polen, pero puede diluir Furthermore, pollen from species from wetlands such
la concentración cerca de la fuente de producción as Salix, Typha latifolia and ciperacea were found. With
(Skjoth et al., 2013). Por lo tanto, árboles anemófilos regard to the herbs found, some of them are indicative
altos, tenderán a dispersar el polen a lo largo y a lo of a natural environment such as Acicarpha tribuloides,
ancho de la fuente, mientras plantas bajas tendrán Gomphrena perennis and Eryngium.
un rango más pequeño, pero más concentrado The samples analysed are characterised by an
dependiendo de la estrategia de polinización y de abundance of fungal spores and a rich profile of
los niveles de producción polínica (Adams-Groom, fungal taxa. The spores of the majority of the fungi
2015). La relación origen-distancia del polen varía found are passively discharged and poorly dispersed
según el hábitat, la altura de las plantas, la estrategia and thus deposited a few centimetres from where they
de polinización de las mismas y la exposición a were produced. Various studies have demonstrated that
las corrientes de aire. En una canopia de árboles fungal spores that are recorded in an environment are,
cerrados, por ejemplo, las estimaciones de diversos in the majority of cases, strictly a local occurrence (van
estudios sugieren que, en un momento dado, Geel & Aptroot, 2006; Shumilovskikh et al., 2017).
la mayoría del polen probablemente se originó The majority of fungal spores fall close to fructiferous
dentro de un rango de 20 a 150 m. Para taxones bodies and it can thus be concluded that the spores
polinizados por el viento en un lugar abierto, el captured principally reflect the diversity of the local
polen puede recorrer distancias mucho mayores species and of a specific site (Kauserud et al., 2005).
en condiciones meteorológicas adecuadas como Their presence on an object could imply direct contact;
demuestra Skjoth et al. (2013). this could be the ground, wood or decomposing dead
Para el sitio de estudio, caracterizado por un leaves or many other materials upon which the fungi
ambiente de canopia arbórea baja y cerrada con could grow (Wiltshire et al., 2014). This would explain
abundancia de arbustos, esto explicaría la alta the high records found on the ankles.
vinculación de los tipos polínicos hallados en The most abundant spore type of the three sampled
el espectro polínico con el ambiente de origen regions and, clearly the most dominant was Epicoccum.
y a su vez la alta abundancia de los mismos, This genus was widely distributed and is commonly
principalmente árboles anemófilos, que se found in the air, soil and on the dead parts of plants
encontraban en floración en el momento del and fruit (Ellis, 1971; Domsch et al., 2007; Seifert et al.,
muestreo. 2011.). It has the behaviour of a saprophyte of global
La presencia de un tipo polínico en una muestra distribution but is also an important phythopathogen
brinda una valiosa información sobre un periodo affecting different types of plants and crops (Rúa
del año, de modo que permite acotar la muestra Giraldo, 2013). Nuñez Otaño et al. (2015), in studies
no sólo a un lugar sino también a un espacio de carried out in Entre Ríos (National park El Palmar),
tiempo, ya que cada planta presenta un periodo de indicate this genus as being characteristic of the soil
floración específico. Es por lo tanto esperable que and highlight it as one of the most abundant in the
prevalezcan en la muestra aquellos taxones que three analysed sites that correspond with grasslands,
estuvieran florecidos en el momento del muestreo palm savanna and mixed areas. Furthermore, it was
(Adams-Groom, 2015). Esto pudo comprobarse found to be amply dominant in samples coming from
en este estudio, hallándose una estrecha relación a park with cut gramineae – grass-type – (similar to the
entre las especies cuyos periodos de floración eran path taken by the person used for the sample collection
coincidentes con el momento de muestreo y las in the present study) in a forensic case in the South of
registradas en el espectro polínico. La información England (Wiltshire et al., 2014); highlighting that this
de los periodos de floración fue tomada de un fungi genus develops on the remains of lawn clippings
estudio realizado en la región por Fagúndez et al. (Poaceae).

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(2016), quienes destacan además que en primavera As can be observed in Table 2, the rest of the spore
existe un pico de floración de las especies arbóreas, types grow on substrates that are mainly herbaceous
lo cual explicaría también los altos registros and many of these are generally on cereals: Pithomyces
hallados en las muestras. chartarum (de Cunha et al., 2014); Helminthosporium
Uno  de  los  factores  que  afectan  la  deposi- in wheat, corn and oats (amply cultivated in the
ción de polen y esporas en el medio ambiente son region) (Deshpande & Deshpande, 1966); Spegazzinia
las condiciones meteorológicas (Madanes & Millo- tessarthra in wheat, corn and sorghum and gramineae
nes, 2004). La dispersión de los palinomorfos en la such as Cynodon, Panicum and Pennisetum (Ellis, 1971;
atmósfera es modulada por parámetros meteoro- Seifert et al., 2011), abound in the study site. Meliola
lógicos tales como lluvia, humedad, temperatura, develops on woody substrates in the tropics, acting as
velocidad del viento y fuerza (Ezike et al., 2016). Las phytopathogens; in genera such as Ligustrum (widely
precipitaciones ocurridas durante el mes de octu- distributed in San Martín Park) can typically be found
bre, previo al muestreo fueron excepcionalmente M. ligustri (Hosagoudar & Agarwal, 2008). Others,
superiores (235.5 mm) a la media histórica (106 such as Tetraploa aristata, are characteristic of aquatic
mm) (INTA, 2012). Posiblemente la abundancia de or sub-aquatic environments, indicating nearby water
polen hubiera sido mayor sin la ocurrencia de esas bodies (López & García, 2009), also present in the area.
precipitaciones extraordinarias. Ezike et al. (2016), As reflected, the study site (hypothetical crime scene)
indican que cuanto mayor es la intensidad de las has fungal spores that are characteristic of their plant
precipitaciones, inferida a través de su cantidad y communities.
duración, ella conduce a una disminución de los The fungal spores found in this study are different
morfotipos de polen, ya que las lluvias arrastran el to those mentioned in urban environments in Argentina
polen suspendido en la atmósfera. where genera such as Alternaria, Cladosporium, Periconia,
En cuanto a los hongos, la alta humedad am- Melanospora and Leptosphaeria stand out (Bianchi &
biente generada por las precipitaciones abun- Olabuenaga, 2006; Mallo et al., 2011; Nitiu & Mallo
dantes acontecidas durante el mes anterior al 2011; Torres & Flores, 2013).
muestreo, favorecieron el desarrollo fúngico y la In accordance with Wiltshire et al. (2014), who state
producción de esporas, sumado a las temperaturas that the palynology and mycology provide separate
favorables de la época. Según Sánchez Espinosa & classes of evidence from the same forensic samples,
Almaguer Chávez (2011) valores del 70-80 % de hu- in the present study both pollen and spore types
medad relativa favorecen la liberación de muchas recovered from the garments allow an association with
esporas fúngicas. Por consenso, se acepta que los the environment of origin of the samples (hypothetical
hongos crecen y esporulan mejor en temperaturas forensic scenario to which the subject was exposed).
mayores a 15 - 20°C (Carlile et al., 2001). La hume-
dad relativa, en contraste con la temperatura del CONCLUSIONS
ambiente, juega un papel más claro sobre la diver-
-The use of adhesive tape for the sampling on
sidad fúngica y es reconocido que la producción de
clothing proved to be efficient; allowing the collection
esporas en un amplio rango de hongos depende
of abundant palynomorphic material which remained
de una adecuada pluviosidad (Rúa Giraldo, 2013).
adhered during the chemical acetolysis treatment.
Existen algunas especies de plantas que indican
un entorno específico y se llaman especies indi- -The acetolysed palynomorphs, together with the
cadoras (Milne et al., 2005). En casos penales ello adhesive tape, could be observed clearly under the
puede ser esencial para poder asociar a un sospe- optical microscope, allowing a sound morphological
choso, víctima o un objeto a un lugar específico. interpretation of them.
En las muestras analizadas, el espectro polínico se
-The residue recovered after the acetolysis was very
caracterizó por un elevado número de tipos polí-
scarce and thus was not sufficient for analysis.
nicos, con predominancia de tipos asignables a re-
presentantes arbóreos nativos típicos del bosque -The body zones (of the hypothetical suspect) used
semixerófilo como Schinus, Ephedra, Celtis y Proso- in the sampling that allowed the taking of the greater
pis. También fueron abundantes pólenes de espe- quantity and also the richness of the palynomorphic
cies arbóreas exóticas muy difundidas en el sitio de material were the ankles and shoulders.
estudio como Ligustrum, Gleditsia y Morus. Se ha-
-The pollen and spore spectra found in the

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Scientia
Trujillo et al, Espectro polínico recuperado de la ropa... Interfluvius 10(1):80-99, 2019 Paraná

llaron, además, pólenes de especies indicativas de samples were a useful and valuable contribution for its
humedales como Salix, Typha latifolia y Ciperáceas. association with the study site.
En cuanto a las hierbas halladas, algunas de ellas
también son indicativas de un entorno natural, ACKNOWLEDGEMENTS
como Acicarpha tribuloides, Gomphrena perennis y We are thankful to the authorities of the Parque
Eryngium. Provincial General San Martin for allowing the use of
Las muestras analizadas se caracterizan por la this site for our study. Thanks also to the Technician,
abundancia de esporas fúngicas, y el rico perfil de Guillermo Martinez for assistance in the processing
taxones fúngicos. Las esporas de la mayoría de los of samples, to Lic. Paola Soñez and Agr. Eng. Daniela
hongos hallados son pasivamente descargadas y Chemez for their help taking photographs with the
pobremente dispersadas, y por lo tanto son depo- microscope. Special thanks to Doctors: María Gabriela
sitadas a pocos centímetros de donde fueron pro- Murray, Laura Dominguez and Noelia Núñez Otaño,
ducidas. Varios estudios han demostrado que las for the identification of some fungal spores and Lic.
esporas fúngicas que se registran en un ambiente Luciana Castillo, for valuable help with reference
son, en la mayoría de los casos, estrictamente de material. Also to the reviewers for their observations
ocurrencia local (van Geel & Aptroot, 2006; Shu- and suggestions that helped improve the final version
milovskikh et al., 2017). La mayoría de las esporas of this study. This study is part of the Diploma Thesis
fúngicas caen cerca de los cuerpos fructíferos y por of Lilian Albornoz and Sol Overtello, Graduates in
esto se puede concluir que las esporas capturadas Criminalistics and Road Accidentology of FCyT-
reflejan principalmente la diversidad de especies UADER.
local y sitio específico (Kauserud et al., 2005). Su
presencia en un objeto podría implicar contacto
directo; esto podría ser el suelo, madera u hojas
muertas en descomposición, o muchos otros ma-
teriales en los que el hongo podría crecer (Wiltshire
et al., 2014). Esto explicaría los elevados registros
hallados en tobillos.
El tipo esporal más abundante en las tres regio-
nes muestreadas y claramente dominante sobre
los demás fue Epicoccum. Este género está amplia-
mente distribuido y es comúnmente encontrado
en el aire, tierra y en las partes muertas de muchas
plantas y frutas (Ellis, 1971; Domsch et al., 2007;
Seifert et al., 2011). Se comporta como saprófito de
distribución mundial, pero además es un importan-
te fitopatógeno afectando diferentes tipos de plan-
tas y cultivos (Rúa Giraldo, 2013). Nuñez Otaño et
al. (2015), en estudios desarrollados en Entre Ríos
(Parque Nacional El Palmar), señalan este género
como característico del suelo y lo destacan como
uno de los más abundantes en los tres sitios anali-
zados que correspondían a pastizales, sabanas con
palmares y ambientes mixtos. Fue hallado como
ampliamente dominante en muestras provenien-
tes de un parque con gramíneas cortadas –tipo cés-
ped- (similar al sendero por el que caminó la per-
sona para la recolección de muestras del presente
estudio) en un caso forense en el sur de Inglaterra
(Wiltshire et al., 2014); destacando que este género
de hongos se desarrolla sobre los restos cortados
de los pastos (Poaceae).

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Trujillo et al, Espectro polínico recuperado de la ropa... Interfluvius 10(1):80-99, 2019 Paraná

Cómo se observa en la Tabla 2, los demás tipos muy escaso, y por ello no resultó adecuado para ser
esporales crecen sobre sustratos principalmente analizado.
herbáceos, muchos de ellos particularmente so-
-Las zonas del cuerpo muestreadas que
bre cereales: Pithomyces chartarum (de Cunha et
permitieron levantar mayor cantidad y riqueza de
al., 2014); Helminthosporium en trigo, maíz y avena
material palinomórfico fueron tobillos y hombros.
(ampliamente cultivados en la región) (Deshpan-
de & Deshpande, 1966); Spegazzinia tessarthra en -Los espectros polínico y esporal hallados en las
trigo, maíz y sorgo, y gramíneas como Cynodon, muestras resultaron una aproximación útil y valiosa
Panicum y Pennisetum (Ellis, 1971; Seifert et al., para su vinculación con el sitio de estudio.
2011), abundantes en el sitio de estudio. Meliola se
desarrolla sobre sustratos leñosos en los trópicos, AGRADECIMIENTOS
como fitopatógenos; en géneros como Ligustrum
(ampliamente distribuido en el Parque San Martín) Agradecemos a las autoridades del Parque
puede hallarse típicamente M. ligustri (Hosagoudar Provincial General San Martín por permitir el uso
& Agarwal, 2008). Otros como Tetraploa aristata, de este lugar para el estudio. Al técnico Guillermo
son característicos de ambientes acuáticos o sub- Martinez por su asistencia en el procesamiento de
acuáticos, indicando la presencia de cuerpos de las muestras. A la Lic. Paola Soñez y a la Ing. Agr.
agua cercanos (López & García, 2009), también pre- Daniela Chemez por sus asistencias en la obtención
sentes en el área. Como queda reflejado, el sitio de de las fotografías bajo el microscopio. Agradecemos
estudio (hipotético escenario del crimen) presenta especialmente a las Dras. María Gabriela Murray,
esporas de hongos característicos de sus comuni- Laura Dominguez y Noelia Núñez Otaño por la
dades de plantas. identificación de algunas esporas de hongos, y a la
Las esporas fúngicas halladas en este estudio se Lic. Luciana Castillo por facilitarnos valioso material
diferencian de las mencionadas en ambientes ur- bibliográfico. A las revisoras por sus observaciones
banos de la Argentina, donde se destacan géneros y sugerencias que permitieron mejorar la versión
como Alternaria, Cladosporium, Periconia, Melanos- final de este trabajo. El presente trabajo forma
pora y Leptosphaeria (Bianchi & Olabuenaga, 2006; parte de la tesina de graduación de las Licenciadas
Mallo et al., 2011; Nitiu & Mallo 2011; Torres & Flo- en Criminalística y Accidentología Vial de la FCyT-
res, 2013). UADER, Lilian Albornoz y Sol Overtello.
En concordancia con lo manifestado por Willts-
hire et al. (2014), quienes expresan que la palino-
logía y la micología proveen clases separadas de REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
evidencias probativas desde las mismas muestras Adams-Groom, B. 2015. Frequency and abundance of
forenses, en el presente estudio tanto los tipos po- pollen taxa in crime case samples from the United King-
línicos como esporales recuperados de las prendas dom. Grana 54: 146-155.
permiten una asociación con el ambiente de proce- Báez, J. R. 1956. La vegetación del Parque Provincial “Gene-
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ropa demostró ser eficaz; permitiendo recoger sic palynology in the United States of America. Palynolo-
abundante material palinomórfico, el cual gy 14: 193-208.
permaneció adherido durante el tratamiento Burkart, R.; Bárbaro, N.O.; Sánchez, R.O. & Gómez, D.A.
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interpretación morfológica de los mismos.
pp.
-El residuo recuperado luego de la acetólisis fue Da Cunha, K. C.; Sutton, D. A.; Gene, J.; Cano, J.; Capilla, J.;

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97
Total/
Familia Tipo Síndrome Hombros Muslos Tobillos

98
Hábito1 especie
botánica polínico polinización2 N° (%) N° (%) N° (%)
N° (%)
Oleaceae Ligustrum Aa Am 42 (31.1) 15 (51.7) 47 (18.9) 104 (25,2)
Celtidaceae Celtis A A 11 (8.1) 1 (3.4) 49 (19.7) 61 (14,8) APÉNDICES
Fabaceae Gleditsia triacanthos L. A E 11 (8.1) 5 (17.2) 42 (16.9) 58 (14,0)
Salicaceae Salix A Am 49 (36.6) - 3 (1.2) 52 (12,6)

no detectada en el recuento.
Poaceae h A 1 (0.7) 6 (20.7) 28 (11.2) 35 (8,5)
Ephedraceae Ephedra a A 13 (9.6) 1 (3.4) 12 (4.8) 26 (6,3)
Amaranthaceae Gomphrena perennis L. 1 h A - - 23 (9.2) 23 (5,6)
Solanaceae Solanum h E - - 20 (8.0) 20 (4,8)
Trujillo et al, Espectro polínico recuperado de la ropa...

Asteraceae Sonchus h E 1 (0.7) - 5 (2.0) 6 (1,5)


Calyceraceae Acicarpha tribuloides Juss. h E - - 5 (2.0) 5 (1,2)
Myrtaceae Eucalyptus A Am - - 4 (1.6) 4 (1,0)
Anacardiaceae Schinus A Am 2 (1.5) - 1 (0.4) 3 (0,7)
Asteraceae Asteroideae h E - - 3 (1.2) 3 (0,7)
Cyperaceae h A 1 (0.7) - 2 (0.8) 3 (0,7)
Fabaceae Prosopis A E 1 (0.7) - 1 (0.4) 2 (0,5)
Moraceae Morus A A 1 (0.7) - 1 (0.4) 2 (0,5)
APPENDIX

Amaranthaceae Gomphrena perennis L. 2 h A - - 1 (0.4) 1(0,2)


Apiaceae Ammi visnaga (L.) Lam. h E - 1 (3.4) - 1(0,2)
Apiaceae Ammi majus L. h E - - 1 (0.4) 1(0,2)
Apiaceae Eryngium h E 1 (0.7) - - 1(0,2)
Scientia

Fabaceae Lotus h E 1 (0.7) - - 1(0,2)


Thyphaceae Thypha latifolia L. h A - - 1 (0.4) 1(0,2)
Asteraceae Ambrosia h A - x - x
Casuarinaceae Casuarina cunninghamiana Miq. A A - x - x
Iridaceae Cypella h E x - - x
        135 (100) 29 (100) 249 (100) 413
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Tabla 1. Tipos polínicos hallados en las muestras, discriminados por área del cuerpo muestreado. 1- Hábito: (h) hierba; (a) ar-
Table 1. Pollen types found in the samples, differentiated by body area sampled. 1- Habit (h) herbs; (a) shrub; (A) tree. 2- Pollination
syndrome: (A) Anemophilous; (E) Entomophilous; (Am) Ambophilous. (x): present – identified in the sampling, not detected in the recount.

busto; (A) árbol. 2-Síndrome de polinización: (A) Anemófila; (E) Entomófila; (Am) Ambófila. (x): presente -identificada en la muestra,
Scientia
Trujillo et al, Espectro polínico recuperado de la ropa... Interfluvius 10(1):80-99, 2019 Paraná

Table 2: Spore types found in the samples, differentiated by body area sampled. (x): present –identified in the sample, not detected in
the recount. Substrate: S: Ground; H: herbs; L: Woody; U: Ubiquitous; A-SA: Aquatic-Sub-aquatic environment.
Tabla 2. Tipos esporales hallados en las muestras, discriminados por área del cuerpo muestreado. (x): presente -identificada en
la muestra, no detectada en el recuento. Sustratos: S: Suelo; H: hierbas; L: Leñosas; U: Ubicua; A-SA: Ambiente Acuático-Sub-acuático.

Reino – Phylum/ Hombros Muslos Tobillos Total/ especie


Tipo esporal Sustrato
División N° (%) N° (%) N° (%) N° (%)
Fungi Ascomycota Epicoccum 89 (82.4) 17 (60.7) 2214 (86.5) 2320 (86.0) SH
Fungi Basidiomycota Indeterminado - 7 (25.0) 223 (8.7) 230 (8.5)
Fungi Ascomycota Bipolaris - - 52 (2.0) 52 (1.9) H
Fungi Ascomycota Paraphaeosphaeria - - 27 (1.1) 27 (1.0) H
Fungi Ascomycota Venturia 5 (4.6) 2 (7.1) 11 (0.4) 18 (0.7) HL
Fungi Ascomycota Tetraploa 1 (0.9) - 16 (0.6) 17 (0.6) A-SA
Fungi Ascomycota Helminthosporium 10 (9.3) - 3 (0.1) 13 (0.5) H
Fungi Ascomycota Melanomma - - 9 (0.4) 9 (0.3) HL
Fungi Ascomycota Meliola 1 (0.9) - 2 (0.1) 3 (0.1) HL
Spegazzinia  cf.
Fungi Ascomycota 1 (0.9) 1 (3.6) 1 (0.4) 3 (0.1) SH
tessarthra
Pithomyces cf.
Fungi Ascomycota 1 (0.9) - 1 (0.4) 2 (0.1) L
chartarum
Fungi Ascomycota Sporidesmiun - 1 (3.6) - 1 (0.04) U
Fungi Ascomycota Torula - 1 (0.4) 1 (0.04) U
Fungi Ascomycota Alternaria - x x U
Plantae-
x x
Pteridophyta
108 28 2560 2696

99
IMPACT OF DOMESTIC WASTEWATER DISCHARGE ON THE WATER
QUALITY OF EL CURA STREAM (GUALEGUAYCHÚ, ENTRE RÍOS)

IMPACTO DE LA DESCARGA DE EFLUENTES CLOACALES


DOMICILIARIOS SOBRE LA CALIDAD DE AGUA DEL ARROYO EL CURA
(GUALEGUAYCHÚ, ENTRE RÍOS)
Elizabeth Valentina Avila-Hernández1, Diamela Gianello1,2, Eduardo Chaves1, Irene Aguer1, Ricardo Ariel Juárez1 & Melina
Celeste Crettaz-Minaglia1,3*
1
Laboratorio de Indicadores Biológicos y Gestión Ambiental de Calidad de Agua (IBGA), Facultad de Ciencia y Tecnología, Universi-
dad Autónoma de Entre Ríos, Av. Tomás de Rocamora 117, Gualeguaychú, Entre Ríos, Argentina.
2
Grupo de Ecología de Sistemas Acuáticos a Escala de Paisaje, Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Medio Ambiente,
UNComahue-CONICET, Quintral 1250, San Carlos de Bariloche, Río Negro.
3
Área de Biología y Bioinformática, Instituto de Ciencias, Universidad Nacional General Sarmiento, Gutiérrez 1150, Los Polvorines,
Buenos Aires.

crettaz.melina@uader.edu.ar

ABSTRACT. This work is aimed at studying the effect of domestic wastewater discharge
on the water quality of El Cura stream (Gualeguaychú, Entre Ríos). Seven samplings were
taken from 3 sampling points namely: discharge, upstream and downstream on wastewater
discharge during September 2015 and May 2016. Physico-chemical and microbiological
parameters were analysed and they were compared with international standards for several
uses. In addition, an impact assessment of the processing facilities over the stream was
made. Processing facilities charged some phosphorus and organic matter compounds, and
according to microbiological parameters, the water quality did not meet with international
standards for all evaluated uses except in the discharge upstream where it was regular for
aquatic life conservation and public supply with previous conventional treatment. It was
observed that hydrological and climatological conditions were important influences, and
also that the Gualeguaychú River intrusion carried the pollutants of El Cura stream from
downstream to upstream. On the other hand, 558 impacts produced by processing facilities
were identified as being 70.6% negative, and of those, 20.1% as highly negative. This was the
first systematic work realized in the study area, which helped to determine that processing
facilities lead to poor water quality in El Cura stream thereby limiting its uses.

KEY WORDS. Microbiological contamination. Indicators. Environmental management.


Wastewater.

RESUMEN. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de la descarga de los


efluentes provenientes de la planta de tratamiento de efluentes cloacales domiciliarios
sobre la calidad del agua del arroyo El Cura (Gualeguaychú, Entre Ríos). Entre septiem-
bre de 2015 y mayo de 2016, se efectuaron 7 muestreos, en 3 puntos: en la desembo-
cadura, aguas arriba y abajo de la descarga de efluentes. Se determinaron parámetros
físico-químicos y microbiológicos, se compararon con los estándares internacionales
para los distintos usos y se realizó una evaluación de los impactos de la planta de tra-
tamiento sobre el arroyo. La planta de tratamiento aportó compuestos de fósforo y
materia orgánica y, de acuerdo a los parámetros microbiológicos, la calidad del agua
no cumplió con los estándares para todos los usos excepto aguas arriba, en donde fue
regular para la conservación de la vida acuática y el abastecimiento público con previo
tratamiento convencional. Se observó una importante influencia de las condiciones
climatológicas e hidrológicas, en donde la intrusión del río Gualeguaychú arrastra los
contaminantes de la desembocadura del arroyo El Cura, aguas arriba. Por otra parte,
se identificaron 558 impactos producidos por el funcionamiento de la planta de tra-
tamiento, de los cuales 70,6% fueron negativos y, de estos, el 20,1% corresponden a
impactos negativos altos. Este fue el primer trabajo sistemático realizado en el área de

100
Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

estudio, el cual permitió determinar que la planta de efluentes genera perjuicios sobre
la calidad de agua del arroyo El Cura, limitando sus usos.

PALABRAS CLAVES. Contaminación microbiológica. Indicadores. Gestión ambiental.


Aguas residuales.

Recibido: 24 de agosto de 2018


Aceptado: 29 de enero de 2019

INTRODUCCIÓN INTRODUCTION
Water, in addition to being a substance that is
El agua, además de ser una sustancia impres- indispensable for life, is one of the most important
cindible para la vida, es uno de los recursos natu- natural resources being used amply in daily activities
rales más importantes utilizados ampliamente en carried out by man (Arcos-Pulido et al., 2005). One
actividades realizadas diariamente por el hombre of these functions is its use in evacuating spills, which
(Arcos-Pulido et al., 2005). Una de ellas, es su uti- can cause sanitary and environmental problems (Silva
lización como medio de evacuación de vertidos, et al., 2008). In the case of liquid effluent discharges
lo cual puede generar problemas sanitarios y am- of domestic origin, the contaminating charge is
bientales (Silva et al., 2008). En el caso del vertido represented by high percentages of organic matter and
de efluentes líquidos de origen doméstico, la carga microorganisms of faecal origin (Arcos-Pulido et al.,
contaminante está representada por altos porcen- 2005). For this the environmental care constituted by
tajes de materia orgánica y microorganismos de domestic systems of sewage discharge, the external
origen fecal (Arcos-Pulido et al., 2005). Para ello, treatments and the ultimate destiny of the residual
el saneamiento ambiental constituido por los sis- domestic water aims finally at minimising and/or
temas domiciliarios de desagües cloacales, los ex- eliminating the harmful effects of anthropogenic
ternos de tratamiento y destino final de las aguas contamination (Aguilar, 2005; Campos, 2003 in
residuales domésticas tienen como fin último mi- González-Fernández, 2008).
nimizar y/o eliminar los efectos nocivos de la con- With this type of effluent, determining the types
taminación antropogénica (Aguilar, 2005; Campos, and concentrations of microorganisms present in the
2003 en González-Fernández, 2008). water is an indispensable aid to gaging water quality
Ante este tipo de efluente, determinar los tipos which in turn becomes essential for decision making
y la concentración de microorganismos presentes related to controlling discharges, water treatment and
en el agua proporciona una herramienta indispen- conservation of ecosystems, thus avoiding the risk of
sable para conocer la calidad de ésta, a su vez, re- environmental contamination and its effect on people’s
sulta esencial para la toma de decisiones en rela- health (Campos, 2003 in González-Fernández, 2008).
ción al control de vertidos, tratamiento de aguas y In this sense, the use of enteric bacteria as indicators
conservación de ecosistemas; evitando así el riesgo of faecal contamination is accepted worldwide (Marín-
de la contaminación del ambiente y su efecto sobre Galvín, 2003; Rossen et al., 2008).
la salud de las personas (Campos, 2003 en Gonzá- On the other hand, the need to preserve, protect
lez-Fernández, 2008). En este sentido, el empleo de and conserve the environment is currently one of
bacterias entéricas como indicadores de contami- the most important motives to be considered when
nación fecal está mundialmente aceptado (Marín- managing territories such as hydrographic riverbeds.
Galvín, 2003; Rossen et al., 2008). The management of hydric resources must be closely
Por otra parte, la necesidad de preservar, pro- linked to the policies of territorial management and
teger y conservar el ambiente es actualmente uno development; this allows the establishment of priorities
de los motivos más importantes para considerar regarding soil uses and the development of different
activities, considering the functioning of the hydric

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Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

las cuencas hidrográficas como territorio para la system and its vulnerability to being adversely affected
gestión. La gestión del recurso hídrico debe estar by contaminating discharges (Ruiz de Galarreta et al.,
estrechamente ligada a las políticas de ordenación 2010). The ideal tool to protect hydric resources and
y desarrollo territorial, ya que permiten establecer thus maintain their quality and provide solutions to
prioridades en cuanto a los usos de suelo y el desa- many problems related to the constitutive elements
rrollo de distintas actividades, teniendo en cuenta is the environmental management of the level of the
el funcionamiento del sistema hídrico y su vulne- river basins (Umaña-Gómez, 2002). The province of
rabilidad a ser adversamente afectado por cargas Entre Ríos in particular has a profuse hydrographic
contaminantes (Ruiz de Galarreta et al., 2010). Una network with over 7000 hydric tributaries from an
herramienta idónea para proteger los recursos hí- autochthonous system (The Entre Ríos Water Board,
dricos, y de esta forma, poder mantener su calidad Dirección de Hidráulica de Entre Ríos). However,
y proveer soluciones a muchos problemas relacio- water quality studies have centred on the principal
nados con sus elementos constitutivos es la gestión rivers such as the Uruguay and the Paraná. As such, it is
ambiental a nivel de cuenca (Umaña-Gómez, 2002). fundamental to know the water quality of the interior
Particularmente, la provincia de Entre Ríos posee hydric courses that are vital for living beings and the
una profusa red hidrográfica con más de 7000 tra- development of activities.
zados hídricos de régimen autóctono (Dirección de The city of Gualeguaychú has a plant for the
Hidráulica de Entre Ríos). Sin embargo, los estudios treatment of domestic wastewater effluents for
de calidad de agua se han centrado en los principa- purifying residual water that is both residential and
les ríos como el Uruguay y Paraná. En este sentido, commercial. Given the characteristics with which the
es fundamental conocer la calidad de agua de los facility now operates, it is unique in the province of
cursos hídricos interiores que son vitales para los Entre Ríos and along the coast of the Uruguay River
seres vivos y el desarrollo de actividades. (see Appendix 1). However, because of multiple
La ciudad de Gualeguaychú cuenta con una factors, in recent years there has been discussion on
planta de tratamiento de efluentes cloacales domi- the efficacy of the treatment of wastewater effluents.
ciliarios para depurar las aguas residuales residen- Presently, the flow of the effluents treated daily in the
ciales y comerciales. Dadas las características con plant is approximately 26,000-27,000 m3 (com. pers.,
las que opera actualmente, es única en la provin- May, 2016); an estimate based on the production of
cia de Entre Ríos y en la costa del río Uruguay (ver 300L/person/day (com. pers., May, 2016). Previously,
Apéndice 1). No obstante, por múltiples factores, Cardini et al. (2007) reported a variable daily flow that
en los últimos años se ha discutido la eficiencia del was lesser than the present one and was between 9,600-
tratamiento de los efluentes cloacales. Actualmen- 19,200 m3. The discharge of the effluents treated is
te, el caudal de efluente tratado por día en la planta carried out at the glen Las Achiras, at 570 m from the
es aproximadamente de 26.000-27.000 m3 (com. peri-urban stream El Cura, located to the south of the
pers., mayo, 2016) estimado a partir de la produc- city of Gualeguaychú (Avila-Hernández, 2017). This
ción de 300L/persona/día (com. pers., mayo, 2016). stream is used by the residents of the city and tourists
Previamente, Cardini et al. (2007) reportó un caudal for primary and secondary recreational activities such
diario variable menor al actual entre 9.600-19.200 as fishing, conservation of aquatic life, and to a lesser
m3. El vertido de los efluentes tratados se produce degree, for drinking (com. pers, January 2016) and the
en la cañada Las Achiras, a 570 m del arroyo peri- farming irrigation (obs. pers.) For the above mentioned
urbano El Cura, ubicado al sur de la ciudad de Gua- reasons, it is important to know the state of the water
leguaychú (Avila-Hernández, 2017). Este arroyo es for the different uses and to evaluate the alternatives
utilizado por los habitantes de la ciudad y turistas for improving the system.
para usos recreativos de contacto primario/secun- The objective of the present study is researching the
dario, pesca, conservación de la vida acuática y, en impact of the discharge of the wastewater effluents of
menor medida, es utilizada para bebida (com. pers, the treatment plant in the El Cura stream and proposing
enero, 2016) y riego agrícola (obs. pers.). Por lo an- guidelines for the environmental management of the
tes mencionado, resulta importante conocer el es- basin of this (El Cura) stream.
tado de la calidad del agua para los diferentes usos METHODOLOGY
y evaluar las alternativas de mejora para el sistema. The study area is located in the Mesopotamia
El presente trabajo tiene como objetivo es- Pampas (Morello et al., 2012), within the lower basin

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Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

tudiar el impacto de la descarga de los efluentes of El Cura stream, in the suburbs of the city of
cloacales de la planta depuradora sobre el arroyo El Gualeguaychú. This city is one of the most populated
Cura y proponer lineamientos para un plan de ges- in the province of Entre Ríos with 83,116 residents
tión ambiental de la cuenca baja del arroyo El Cura. (INDEC, 2010 in Crettaz-Minaglia et al., (2018).
MATERIALES Y MÉTODOS Hydrographically it constitutes a sub-basin in the
Área de estudio inferior sector of the basin of the Gualeguaychú
El área de estudio se encuentra en la Pampa River. This basin is made up of 30 principal streams
Mesopotámica (Morello et al., 2012), comprendida (Malgor et al., 2018) with an extension of 6,690
dentro de la cuenca baja del arroyo El Cura, ubica- km2, being the second most important basin of the
do en el periurbano, al sur de la ciudad de Gua- province of Entre Ríos and flowing through the
leguaychú. Esta ciudad es uno de los centros po- departments of Gualeguaychú, Uruguay and Colón.
blados más grandes de la provincia de Entre Ríos The principal canal measures approximately 250 km
que concentra 83.116 habitantes (INDEC, 2010 in longitude. The average flow is 63 m3/s (data from
en Crettaz-Minaglia et al., (2018). Hidrográficamen- the Secretary of Infrastructure and Hydric policy of
te, constituye una subcuenca del sector inferior de the Nation’s Integrated Hydrological Database for the
la cuenca del río Gualeguaychú. Esta cuenca, está period 06/05/2015-08/05/2018), with a maximum of
conformada por 30 arroyos principales (Malgor et between 120 m3/s (Cardini et al., 2007) and 150 m3/s
al., 2018), posee una extensión de 6690 km2 sien- (Zabalett et al., 2017) and a minimum of 1,5 m3/s.
do la segunda cuenca interior más importante de The sub basin of El Cura stream presents an area of
la provincia de Entre Ríos abarcando los departa- 94.8 km2 and the longitude of the principal channel
mentos de Gualeguaychú, Uruguay y Colón. El ca- is 9 km. Its principal tributaries that spring from the
nal principal tiene 250 km de longitud, aproxima- left margin are the two streams, Manantiales and Las
damente. El caudal promedio es de 63 m3/s (datos Achiras (Boujon & Sanci, 2014). Given that the data
de Secretaría de Infraestructura y Política Hídrica on the basin of the El Cura stream is unavailable, as
de la Nación en su Base de Datos Higrológica In- a means of reference, the Gualeyán stream, which is
tegrada, período 06/05/2015-08/05/2018), con nearby to the study area was taken into consideration;
un máximo entre 120 m3/s (Cardini et al., 2007) y it has similar characteristics and a flow of 30 m3/s with
150 m3/s (Zabalett et al., 2017) y un mínimo de 1,5 a minimum of 0.4 m3/s (Cardini et al., 2007).
m3/s. La subcuenca del arroyo El Cura presenta un Three sampling points were established (Point 1:
área de 94,8 km2 y la longitud del cauce principal 33° 02’ 34.13” S - 58° 31’ 23.32” W, Point 2: 33° 02’
es de 9 km. Sus principales afluentes, provenientes 25.43” S - 58° 30’ 55.94” W, Point 3: 33° 02’ 31.82”
del margen izquierdo, son el arroyo Manantiales y S - 58° 30’ 32.59” W) situated at an equal distance,
cañada Las Achiras (Boujon & Sanci, 2014). Dado one where Las Achiras glen meets El Cura stream
que no se dispone de datos del caudal del arroyo and the two remaining points were at approximately
El Cura, a modo de referencia, el arroyo Gualeyán, 1 km of water above and below the point of the El
que se encuentra cercano al área de estudio y con Cura stream’s mouth (Fig. 1). The existing distance
características similares, tiene un caudal de 30 m3/s between point 3 and the mouth of the El Cura stream
con un mínimo de 0,4 m/s (Cardini et al., 2007). in the Gualeguaychú river is of approximately 40 m.
Se establecieron 3 puntos de muestreo (Punto Previously, the presence of contaminating sources was
1: 33° 02’ 34,13” S - 58° 31’ 23,32” O, Punto 2: 33° 02’ evaluated as were the relevant stagnation zones and
25,43” S - 58° 30’ 55,94” O, Punto 3: 33° 02’ 31,82” accessibility to the points.
S - 58° 30’ 32,59” O) situados a una distancia equi- Frequency of sampling
distante, uno en la desembocadura de la cañada Samplings were established to fix periods with and
Las Achiras en el arroyo El Cura y los dos restantes without a floating population, the months of study
aproximadamente a 1 km aguas arriba y aguas being: September, October, November, and December
abajo del punto de la desembocadura (Fig. 1). La of the year 2015 and January, March, and May of the
distancia existente entre el punto 3 y la desembo- year 2016.
cadura del arroyo El Cura en el río Gualeguaychú es Meteorological data and state of the
de aproximadamente 40 m. Previamente, se evaluó Gualeguaychú River
la presencia de fuentes contaminantes, las zonas Hydrometric level data of the Gualeguaychú
de estancamiento relativo y la accesibilidad a los River were provided by the Naval Prefecture of

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Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

Figure 1. Location of sampling points within the basin of El Cura Stream and the treatment plant for wastewater effluents, situated in the
sector of the lower basin of the Gualeguaychú River.
Figura 1. Ubicación de los puntos de muestreo dentro de la cuenca del arroyo El Cura y planta de tratamiento de efluentes cloacales,
situados en el sector inferior de la cuenca del rio Gualeguaychú.

puntos. Argentina, and the meteorological data of the


Frecuencia de muestreo Automatic Meteorological Station of Gualeguaychú
Se establecieron muestreos con el fin de abar- “EMA-GUALEGUAYCHU” were contributed by
car períodos con y sin población flotante, siendo the Hydraulic Centre of Entre Ríos (Dirección de
los meses de estudio: septiembre, octubre, no- Hidráulica de Entre Ríos).
viembre y diciembre del año 2015 y enero, marzo y Physico-chemical and bacteriological
mayo del año 2016. parameters
Relevamiento de datos meteorológicos y es- For the sampling, conservation, transport and
tado del río Gualeguaychú storing of samples the criteria of the authors Guevara-
Se registraron los datos de altura del río Gua- Vera (1996) were followed, and in each sampling point
leguaychú provistos por la Prefectura Naval Ar- an original and replica samples were taken. The sub-
gentina y los datos meteorológicos de la Estación superficial samples were taken from the left margin
Meteorológica Automática de Gualeguaychú of the stream using a sampling bottle. All the samples
“EMA-GUALEGUAYCHU” aportados por la Dirección were conserved at 4°C (Salas, 2000) until they were
de Hidráulica de Entre Ríos. analysed in the Laboratory of Biological Indicators
Parámetros fisico-químicos y bacteriológi- and Environmental Management for Water Quality
cos (Laboratorio de Indicadores Biológicos y Gestión
Para la toma de las muestras, conservación, Ambiental de Calidad de Agua, IBGA) of the Faculty
transporte y almacenamiento se siguieron los cri- of Science and Technology of the UADER within
terios reunidos en Guevara-Vera (1996) y, en cada 12 hours following extraction in accordance with the
punto de muestreo, se tomó una muestra original y norms of APHA-AWWA-WPCF (1992).
una réplica. Las muestras sub-superficiales fueron In situ parameters such as air temperature using a
tomadas de la margen izquierda del arroyo utilizan- mercury thermometer, and water temperature, pH,
do botella muestreadora. Todas las muestras fueron electrical conductivity (EC), and total dissolved solids
(TDS) using the multi-parametric measuring apparatus

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Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

conservadas a 4°C (Salas, 2000) hasta ser analizadas Hanna HI991003 were measured, while the dissolved
en el Laboratorio de Indicadores Biológicos y Ges- oxygen (DO) was measured with a polarographic
tión Ambiental de Calidad de Agua (IBGA) de la Fa- oximeter YSI model 55 (at mg.l-1, and % of saturation).
cultad de Ciencia y Tecnología –UADER- dentro de For the chemical samplings, wide-mouthed flasks
las 12 horas posteriores a su extracción de acuerdo were used (Guevara, 1996) and the Chemical Oxygen
a las normas APHA-AWWA-WPCF (1992). Demand (COD) was determined with the digestion
Se determinaron parámetros in situ tales como method for potassium dichromate, Soluble Reactive
temperatura del aire con termómetro de mercu- Phosphorous (SRP), and Total Phosphorous (TP)
rio. Por otro lado, para la temperatura del agua, with the spectrophotometric ammonium molybdate
pH, conductividad eléctrica (CE) y sólidos totales method (APHA-AWWA-WPCF, 1992).
disueltos (SDT) se utilizó el medidor multipara- For the microbiological samplings, sterile flasks were
métrico Hanna HI991003, mientras que el oxígeno used and a sterile solution of sodium thiosulphate was
disuelto (OD) fue medido con el oxímetro polaro- added (Na2S2O3) at 10% (10% v/v) and a sterile solution
gráfico YSI modelo 55 (en mg.l-1 y % de saturación). of EDTA (sodic salt of the ethylenediaminetetraacetic
Para las muestras químicas, se utilizaron frascos acid) at pH 6.5 at 15% (15% v/v) (APHA-AWWA-
de boca ancha (Guevara, 1996) y se determinaron WPCF, 1992) to eliminate the residues of chlorine
demanda química de oxígeno (DQO) con el mé- and metal ions, respectively. Total mesophyll aerobic
todo digestión por dicromato de potasio, fósforo bacteria (TMAB) were quantified with the recounting
reactivo soluble (PRS) y fósforo total (PT) con el mé- method in plates using Plate Count Agar and the result
todo espectrofotométrico molibdato de amonio was expressed as CFU in 100 ml (APHA-AWWA-
(APHA-AWWA-WPCF, 1992). WPCF, 1992). Furthermore, the total coliform bacteria
Para las muestras microbiológicas, se utilizaron (TC) and thermotolerant coliform bacteria (TTC)
frascos estériles y se adicionaron solución de tio- were measured with the multiple tubes fermentation
sulfato de sodio (Na2S2O3) estéril al 10% (10% v/v) technique and the result was expressed as MPN in
y solución de EDTA (sal sódica del ácido etilendia- 100 ml (APHA-AWWA-WPCF, 1992). In each tube
minotetracético) estéril a pH 6,5 al 15% (25% v/v) of positive TTC bacteria obtained in the confirmation
(APHA-AWWA-WPCF, 1992) para eliminar los resi- stage, a tentative qualitative exam (presence/absence)
duos de cloro e iones metálicos, respectivamente. of Escherichia coli with the technique of sowing in
Se cuantificaron bacterias aerobias mesófilas tota- grooves on the surface of Eosin Methylene Blue Agar
les (AMT) por el método de recuento en placa con (EMB) (APHA-AWWA-WPCF, 1992).
Plate Count Agar y su resultado se expresó en UFC Data analysis
por 100 ml (APHA-AWWA-WPCF, 1992). Además, se The data obtained were analysed using parametric
cuantificaron las bacterias coliformes totales (CT) statistics with prior analysis of the homoscedasticity
y bacterias coliformes termotolerantes (CTT) con and normalcy requirements (Hammer et al., 2001) using
la técnica de tubos múltiples de fermentación y the PAST programme (Paleontological Statistic, Hammer
su resultado se expresó en NMP en 100 ml (APHA- et al., 2001) and Microsoft Excel®. To detect significant
AWWA-WPCF, 1992). De cada tubo positivo de bac- differences (p < 0.05), the parametric ANOVA of one
terias CTT obtenido en la etapa de confirmación, se factor was applied (Custodio-Villanueva & Chanamé-
realizó un examen presuntivo cualitativo (presen- Zapata, 2016), previously verifying the fulfilling of pre-
cia/ausencia) de Escherichia coli por medio de la requisites for the physico-chemical and microbiological
técnica de siembra por estría en superficie en Agar parameters between the sampling points between
Eosina y Azul de Metileno (EMB) (APHA-AWWA- periods with and without the influence of climatic-
WPCF, 1992). hydrological conditions (rainfall and wind) and
Análisis de datos between periods with and without a floating population
Los datos obtenidos fueron analizados utilizan- (tourists).
do estadísticos paramétricos con previo análisis de Evaluation of water quality through guidelines
los requisitos de homoscedasticidad y normalidad The impact of the discharge of domestic
(Hammer et al., 2001) utilizando para ello el progra- effluents treated based on water quality analyses in
ma PAST (Paleontological Statistic, Hammer et al., different uses (currently made possible according to
2001) y Microsoft Excel ®. Para detectar diferencias guidelines and microbiological and physico-chemical
significativas (p < 0,05), se aplicó ANOVA paramé- standards) was evaluated. At a national level, there are

105
Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

Normas con niveles guías y


Uso del agua Valor
estándares de calidad
1.000 UFC CTT/100 ml**

SDT 700 mg/l


Riego agrícola*
pH 6,5-9,0

OD > 5,6 mg/l


500 UFC CTT/100 ml ****

Contacto primario*** pH 6,5-8,3


Comisión Administradora del Río
Uruguay-CARU (1986) OD 5,6 mg/l
3.000 UFC CTT/100 ml
Conservación del ambiente
pH 6,5-9,0
acuático
OD > 5,6 mg/l
5.000 UFC CTT/100 ml****
Abastecimiento público con SDT 500 mg/l
tratamiento convencional***** pH 6,5-9
OD > 5,6 mg/l
Organización Panamericana de la
Contacto primario 1.000 NMP CTT/100 ml
Salud- OPS (2003)
Riego agrícola 1.000 NMP CTT/100 ml
2.000 NMP CT/100 ml
Contacto primario
1.000 NMP CTT/100 ml
Organización Mundial de la Salud- Contacto secundario****** 5.000 NMP CT/100 ml
OMS (1998) 20.000 NMP CT/100 ml
Abastecimiento público con
tratamiento convencional 2.000 NMP CTT/100 ml
Abastecimiento público con
2.000 NMP CT/100 ml
tratamiento de desinfección
*Para los cultivos de hortalizas o alimentos a ser consumidos crudos (CARU, 1986).
** Media logarítmica.
*** Son las actividades recreativas para las cuales se produce la inmersión del cuerpo humano en el agua; natación, buceo, ski acuático,
surfing (National Health and Medical Research Council, 1990; WHO, 2003 en INA, 2011).
**** Límite impuesto para más del 20% de las muestras.
*****Comprende el tratamiento de potabilización mediante coagulación, decantación, filtración y desinfección (CARU, 1986).
****** Son las actividades recreativas para las cuales existe un eventual contacto con el agua, pero en donde es improbable que se
produzca su ingesta: remo, vadeo, navegación, pesca (National Health and Medical Research Council, 1990; WHO, 2003 en INA, 2011).
Table 1. Water level guidelines and physico-chemical and microbiological quality standards established by international organisations related
to water use.
Tabla 1. Niveles guías y estándares de calidad físico-químicos y microbiológicos establecidos por organismos internacionales de
acuerdo al uso del agua.
trico de un factor (Custodio-Villanueva & Chanamé- no limits yet established for the presence of a group
Zapata, 2016) para los parámetros fisico-químicos of microorganisms that indicate contamination in
y microbiológicos entre los puntos de muestreo recreational waters (Folabella et al., 2006 en Nadal et al.,
entre períodos con y sin la influencia de las con- 2012), and for this reason value guidelines established
diciones climáticas-hidrológicas (precipitaciones y by international organisations and standards imposed
vientos) y entre periodos con y sin población flo- for the Uruguay River were used for the section of that
tante (turistas). river shared by Argentina-Uruguay given that the study
Evaluación de la calidad del agua a través de area is found within the lower basin of the Gualeguaychú
niveles guía. River close to the river mouth in the Uruguay River
Se evaluó el impacto ocasionado en el arroyo (Iriondo & Kröhling, 2008). Guidelines regarding
El Cura por la descarga de los efluentes domicilia- levels and water quality standards are contemplated in
rios tratados en base al análisis realizado sobre la keeping with current and future uses in the study area

106
Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

calidad del agua para los diferentes usos actuales and destined towards agricultural watering, public and
y posibles de acuerdo a los niveles guía y estánda- recreational use and the conservation of aquatic life
res de calidad microbiológicos y físico-químicos. (Table 1).
A nivel nacional aún no se han establecido límites Because some of the guideline values contemplated
para la presencia de ningún grupo de microorga- in Table 1 are expressed in CFU/100 ml to carry out
nismos indicadores de contaminación en aguas the comparative analysis, given the methodology used
recreacionales (Folabella et al., 2006 en Nadal et al., in the present study for the bacteriological settings, a
2012), motivo por el cual se utilizaron valores guías unit of MPN was considered the equivalent of one
establecidos por organizaciones internacionales y colony (Kehr et al., 2004; O´Mill et al., 2009 in Nadal
los estándares impuestos para el río Uruguay en el et al., 2012).
tramo compartido Argentina-Uruguay dado que el Evaluation of impacts using the matrix method
área de estudio se encuentra dentro de la cuenca The impacts produced as a result of the execution
baja del río Gualeguaychú próximo a su desembo- of all the activities included in the stage of functioning
cadura en el río Uruguay (Iriondo & Kröhling, 2008). of the treatment plant of the wastewater effluents
Se contemplaron niveles guías y estándares de ca- were calculated using the Leopold matrix modified
lidad para aguas, de acuerdo a los usos actuales y method (Gomez-Orea, 2002). For this, the criteria
futuros del área de estudio, destinadas a riego agrí- of Blanco et al. (2007) were used, where the impact
cola, abastecimiento público, recreación y para la causing actions were identified with the environmental
conservación de la vida acuática (Tabla 1). factors that were affected; these were described in
Debido a que algunos de los valores guías the upper row and left hand column respectively of
contemplados en la Tabla 1 están expresados the matrix. Then, all the existing interactions were
en UFC/100 ml, para poder realizar el análisis identified (environmental impacts), calculating a value
comparativo dada la metodología empleada denominated as the importance of the impact (l) using
en el presente trabajo para las determinaciones the equation 1 (Eq. 1) and these were given a hierarchy
bacteriológicas, se consideró como equivalente according to Table 2 (Blanco et al., 2007). In the same
una colonia como una unidad de NMP (Kehr et al., table, it can be observed that the range of variation
2004; O´Mill et al., 2009 en Nadal et al., 2012). corresponds from 0 to10, for impacts that are both
Evaluación de impactos mediante método negative and positive.
matricial I= SI*PO*(IN + CA + IA + PE + RE) Eq. 1
Se valoraron los impactos producidos como Where SI is a sign of the impact, PO is the
resultado de la ejecución de todas las actividades probability of occurrence, IN is the intensity, CA is the
comprendidas en la etapa de funcionamiento de causality, IA is the interaction, PE is the persistence
la planta de tratamiento de efluentes cloacales, and RE is the reversibility.
mediante el método matricial modificado de Guidelines of the environmental management
Leopold (Gomez-Orea, 2002). Para ello, se siguieron plan
los criterios de Blanco et al. (2007) dónde se These are based on the most significant negative
identificaron las acciones impactantes y los factores impacts, the principal measures needed to carry out the
ambientales impactados, estos se describieron en plans referring to environmental management, follow
la fila superior y columna izquierda de la matriz, up and monitoring of El Cura stream in order to
respectivamente. Luego, se identificaron todas las improve water quality (Gomez-Orea, 2002; Fernández-
interacciones (impactos ambientales) existentes, Vitora, 2003).
calculando un valor denominado importancia RESULTS
del impacto (I) utilizando la Ecuación 1 (Ec. 1) y se Meteorological data and the state of the
jerarquizaron según la Tabla 2 (Blanco et al., 2007). Gualeguaychú River
En la misma tabla, puede observarse que el rango Table 3 shows the details of the data registered at
de variación corresponde de 0 a -10 y 0 a 10, para each sampling. The samples were developed in regular
impactos negativos y positivos, respectivamente. conditions under the influence of climatological and
hydrological factors with the increase in rainfall and
I= SI*PO*(IN + CA + IA + PE + RE) Ec. 1 variation of the velocity-direction of the winds; which
previously conditioned the direction of the water
Donde SI es el signo del impacto, PO es la bodies causing the rising levels of the Gualeguaychú
probabilidad de ocurrencia, IN es la intensidad,

107
Scientia
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Impacto Bajo Valor de importancia del impacto de 0 a -3


Medio Valor de importancia del impacto de -4 a -7
negativo Alto Valor de importancia del impacto de -8 a -10
Bajo Valor de importancia del impacto de 0 a 3
Impacto Medio Valor de importancia del impacto de 4 a 7
positivo Alto Valor de importancia del impacto de 8 a 10
Table 2. Impact qualification according to its importance.
Tabla 2. Calificación del impacto en función del valor de importancia del impacto.

CA es la causalidad, IA es la interacción, PE es la River. Only the samplings carried out on the days
persistencia y RE es la reversibilidad. 17/10/2015 and 19/12/2015 were performed under
Lineamientos del plan de gestión ambiental the influence of these factors where there was a rise
A partir de los impactos negativos más in the level of the Gualeguaychú River that cause a
significativos, se definieron las principales medidas “dilution” effect at the sampling point 3 because of the
necesarias a llevar a cabo en los planes de manejo increase in the flow of the El Cura stream caused by
ambiental, seguimiento y monitoreo sobre el the flowing in of water from the river; such a situation
arroyo El Cura a fin de mejorar la calidad del agua previously caused a displacing of the mass of water
(Gomez-Orea, 2002; Fernández-Vitora, 2003). in the course below the stream towards the upper
waters, this is seen in sampling points 2 and 1. The
RESULTADOS effects can be observed when evaluating the results of
Relevamiento de datos meteorológicos y the physico-chemical and microbiological parameters
estado del río Gualeguaychú in the three sampling points.
En la Tabla 3, se detallan los datos registrados Physico-chemical and microbiological
durante cada muestreo efectuado. Los muestreos parameters
fueron desarrollados bajo condiciones regulares A total of 42 samples and 42 replicates: 21
y bajo la influencia de factores climatológicos e bacteriological samples and 21 replicates, and 21
hidrológicos con el aumento de precipitaciones y physico-chemical samples with 21 replicates were
variación de la velocidad-dirección de los vientos; analysed, obtaining 450 data. Table 4 shows the average
los cuales posteriormente condicionaron la (x), number of samples (n), standard deviation (SD),
dirección de escurrimiento de los cuerpos de agua minimum (m), and maximum (M) of the physico-
provocando un crecimiento de la altura del nivel del chemical and microbiological parameters.
río Gualeguaychú. Sólo los muestreos realizados The averages of water temperature were maintained
los días 17/10/2015 y 19/12/2015 fueron llevados almost constantly at the range of 21-23°C, as well as the
a cabo bajo la influencia de estos factores, donde pH (7.09-7.29) and the COD (47-67 mgO2/l) values.
existió un aumento del nivel del río Gualeguaychú They did not present significant differences (p < 0.05)
que provocó un efecto de “dilución” en el punto de between the sampling points nor under the influence
muestreo 3 por el aumento del caudal del arroyo of the climatological hydrological conditions (Table 4)
El Cura producto del ingreso del agua proveniente and of the floating population factor.
del río, tal situación posteriormente ocasionó un With respect to the EC, TDS, DO, SRP, TP, TMAB,
desplazamiento de las masas de agua del curso TC, and TTC, there were significant differences (p
bajo del arroyo hacia aguas arriba, esto es en los < 0.05) between periods of regular and irregular
puntos de muestreo 2 y 1. Los efectos pueden climatological-hydrological conditions between the
ser observados al evaluar los resultados de los sampling points (Table 4). Furthermore, significant
parámetros físico-químicos y microbiológicos en influences were detected (p < 0.05) between periods
los tres puntos de muestreo. with and without floating population for TP,
Parámetros físico-químicos y TMAB, TDS, and EC. During the period of regular
microbiológicos climatological-hydrological conditions, significant
Se analizaron un total de 42 muestras y 42 differences were seen between the sampling points,
réplicas: 21 muestras bacteriológicas y 21 réplicas showing the maximum concentrations at point 2 of
y 21 muestras físico-químicas y 21 réplicas, EC (665 µS/cm), TDS (334 mg/l), SRP (1.41 mgP-
obteniéndose así más de 450 datos. La Tabla 4 PO4-3/l), TP (3.40 mgP-PO4-3/l), and the maximum
muestra el promedio (x), número de muestras geometric means of TMAB, TC,and TTC (2.03E+06
(n), desviación estándar (DS), mínima (m) y CFU/100ml, 4.5E+04 MPN/100ml,and 3.39E+04

108
Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

MPN/100ml respectively), point 1 presents the lesser


concentrations of SRP (0.73 mgP-PO4-3/l), TP (1.87

Disminuyendo
14/05/2016

mgP-PO4-3/l), and the minimum geometric means

12,2
NO
0,2

3,7
NE
of TMAB, TC, and TTC (4.12E+05 CFU/100ml,
2,52

2.76E+03 MPN/100ml, and 1.75E+03 MPN/100ml,


respectively). The reverse situation occurred under

Table 3. Meteorological data and state of the water-level of the Gualeguaychú River registered at each sampling..
irregular climatological-hydrological conditions, where
Disminuyendo
5/03/2016

point 1 presented higher concentrations of EC (831


1,80

21,2

Tabla 3. Datos meteorológicos y del estado-altura del río Gualeguaychú registrados durante cada muestreo.
NO
µS/cm), TDS (409 mg/l), SRP and TP (1.44 mg P-PO4-
0,4

6,4
S

3
/l and 4.90 mg P-PO4-3/l respectively), and the higher
densities of TCand TTC (2.33E+04 MPN/100ml and
2.55E+04 MPN/100ml respectively).
25/01/2016

With respect to the levels of DO, under regular


Estable
1,98

25,5
NO
3,6

6,9
SO

climatological-hydrological conditions there was no


significant difference presented between points and the
same became smaller along the water course presenting
Aumentando
19/12/2015

maximum concentrations at point 1 with 4.24 mgO2/l


67,6

2,72

19,8

and a percentage of saturation close to 48%, followed


SSE
7,2

SI

by those found at point 3 with 3.73 mgO2/l and 42%


saturation and ending with the lows seen at point 2 with
a concentration of 3.70 mgO2/l and approximately 44%
Disminuyendo
28/11/2015

saturation. Under irregular climatological-hydrological


2,70

20,7
7,2

NO

conditions there are significant differences (p < 0.05),


3,8

principally between points 2 and 3, and in this last 5.66


mgO2/l and 67% saturation were found.
On the other hand, significant influences were
Aumentando
17/10/2015

detected (p < 0.05) between periods with and without


10,0

2,90

13,3
SSE
8,9

floating population for TP, TMAB, TDS,and EC


SI

in the concentrations of TP seen in point 3, in the


geometric means of TMAB found in point 2 and in
the concentrations of TDS and EC present in point 1.
Disminuyendo
26/09/2015

The tentative results of the search for E. coli are seen


31,4

2,28

15,5
SSE

NO
3,9

in Table 5. In all of the samplings, positive tentative


results were obtained with evidence of the formation
of typical colonies on the nutritional EMB agar,
leading to the finding of high dilutions in the sampling
del agua superficial
Tendencia del nivel
la semana previa al

tres días antes del


Lluvia acumulada

del viento (km/h)


velocidad media

Temperatura del
climatológicos e

(1/1,000) carried out in the three points. Furthermore,


muestreo (mm)

Gualeguaychú

Condicionado
muestreo (m)
Altura del río

hidrológicos
por factores
Dirección y
Muestreo:

the tentative formation of typical colonies was seen,


aire (°C)

of other genera of TTC (enterics): Shigella, Enterobacter,


Klebsiella, and Salmonella, through observation with a
microscope of the morphology and colouring of the
colonies.
máxima (M) de los parámetros físico-químicos y Evaluation of the impacts related to water
microbiológicos. quality in El Cura Stream
Los promedios de temperatura del agua se Given the high percentages of meeting with
mantuvieron casi constantes en el rango de los 21- the pH levels for actual uses and/or those that are
23°C, al igual que el pH (7,09-7,29) y la DQO (47-67 possibly evaluated, water presents itself as being apt
mgO2/l). No presentaron diferencias significativas for such uses (Fig. 2). Water quality in relation to
(p < 0,05) entre los puntos de muestreo ni bajo the TDS content is found apt for use in agricultural
la influencia de las condiciones climatológicas- irrigation and public supply with previous conventional
hidrológicas (Tabla 4, ver apéndice online) y del treatment in the 3 sampling points evaluated in the
factor de población flotante.

109
Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

Con respecto a la CE, SDT, OD, PRS, PT, AMT, CT study (Fig. 3). The evaluation of the averages of DO
y CTT hubo diferencias significativas (p < 0,05) en- detected in the 3 sampling points indicate that the
tre periodos de condiciones climatológicas-hidro- water of El Cura stream does not present the optimal
lógicas regulares e irregulares entre los puntos de concentration for aquatic species to develop well and
muestreo (Tabla 4, ver apéndice online). También, for being used in recreational activities involving direct
se detectaron influencias significativas (p < 0,05) contact, agricultural irrigation and public supply with
entre períodos con y sin población flotante para PT, previous conventional treatment (Fig. 4).
AMT, SDT y CE. Durante el período de condiciones According to levels in guidelines taken as references
climatológicas-hidrológicas regulares, se hallaron in the present work, the concentrations of TC seen in
diferencias significativas (p < 0,05) entre puntos de all of the recollected samplings indicate that the stream
muestreo encontrándose las máximas concentra- water at point 1 could present a risk for recreational
ciones en el punto 2 de CE (665 µS/cm), SDT (334 use if used coming into direct contact with it owing to
mg/l), PRS (1,41 mgP-PO4-3/l), PT (3,40 mgP-PO4-3/l), the fact that 5 samplings of a total of 14 presented low
y las máximas medias geométricas de AMT, CT y microbiological quality, while in points 2 and 3 this is
CTT (2,03E+06 UFC/100ml, 45822 NMP/100ml y inadequate. On the other hand, in all of the sampling
33914 NMP/100ml respectivamente). Bajo estas points the water, with prior disinfection treatment,
mismas condiciones, el punto 1 presentó las me- was of an inappropriate standard (Fig. 5). In addition,
nores concentraciones de PRS (0,73 mgP-PO4-3/l), the high percentages of the results not meeting with
PT (1,87 mgP-PO4-3/l), y las mínimas medias geomé- the guidelines and quality standards, TTC bacteria
tricas de AMT, CT y CTT (4,12E+05 UFC/100ml, (for water destined for recreational use through direct
2,76E+03 NMP/100ml y 1,75E+03 NMP/100ml res- contact and agricultural watering) make this water
pectivamente). Situación contraria ocurrió bajo inadequate for its use in the three sampling sites.
condiciones climatológicas-hidrológicas irregula- Only point 1 presented water quality that could be
res, donde el punto 1 presentó las mayores con- considered regular for the conservation of the aquatic
centraciones de CE (831 µS/cm), SDT (409 mg/l), environment and for public needs with previous
PRS y PT (1,44 mgP-PO4-3/l y 4,90 mgP-PO4-3/l res- conventional treatment according to the quality
pectivamente), y las mayores densidades de CT y standards imposed by the (Administrative Commission

Figure 2. Percentage of cases where the pH level meets the quality standards imposed by CARU. n=sample number. In
green, % of coincidence and, in red, % of non-coincidence. 1, 2 and 3 respectively are the sampling points of upstream and
downstream waters with discharge.
Figura 2. Porcentaje de cumplimiento del nivel pH con los estándares de calidad impuestos por la CARU. n=número
de muestra. En verde, el % de cumplimiento y, en rojo, el % de incumplimiento. 1, 2 y 3 son los puntos de muestreo
aguas arriba, en la descarga y aguas abajo, respectivamente.

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Scientia
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CTT (2,33E+04 NMP/100ml y 2,55E+04 NMP/100ml of the Uruguay River) Comisión Administradora del
respectivamente). Río Uruguay (CARU) (Fig. 6).
Respecto a los niveles de OD, bajo condiciones Evaluation of the impacts through the matrix
climatológicas-hidrológicas regulares no presenta- method
ron diferencia significativa entre los puntos, y los Figure 7 shows all of the impacts identified in the
mismos fueron decreciendo a lo largo del curso de stage related to the functioning of the treatment plant
agua, presentándose las máximas concentracio- of wastewater effluents. In the evaluation carried out,
nes en el punto 1 con 4,24 mgO2/l y un porcenta- a total of 558 impacts were identified of which 164
je de saturación cercano al 48%, seguidas por las correspond to positive impacts (29.4% of the total)
encontradas en el punto 3 con 3,73 mgO2/l y un and 394 correspond with negative impacts (70.6% of
42% de saturación y terminando por las mínimas the total). Of the total of the latter, which is the most
halladas en el punto 2 con una concentración de important in the present study, 40.1% correspond with
3,70 mgO2/l y aproximadamente 44% de satura- a low negative impact (158 impacts), 39.8% correspond
ción.  Bajo condiciones climatológicas-hidrológicas with a medium negative impact (157 impacts) and
irregulares existieron diferencias significativas (p 20.1% correspond with a high negative impact (79
< 0,05), principalmente entre el punto 2 y 3, al en- impacts) (see Appendices 2 and 3).
contrarse en este último 5,66 mgO2/l y un 67% de Guidelines of the environmental management
saturación. plan
Por otra parte, se detectaron influencias signifi- The evaluation of the impacts carried out allowed
cativas (p < 0,05) entre períodos con y sin población identify those critical situations in which control is
flotante para PT, AMT, SDT y CE. en las concentra- a priority. Table 6 describes the actions of the plan
ciones de PT halladas en el punto 3, en las medias for environmental management with the respective
geométricas de AMT encontradas en el punto 2 y measures necessary to be executed in the plan for
en las concentraciones de SDT y CE presentes en managing the environment to revert, prevent and
el punto 1. attenuate the significant negative impacts identified.
Los resultados de la prueba presuntiva de E. coli DISCUSSION
se muestran en la Tabla 5 (ver apéndice). En todos The determined parameters and water quality

Figure 3.Percentage of cases where the TDS concentrations meet the quality standards imposed by CARU. n=sample
number. In green, the % of coincidence and, in red, the % of non-coincidence. 1, 2 and 3 are the sampling points of upstream
and downstream waters with discharge, respectively.v
Figura 3. Porcentaje de cumplimiento de las concentraciones de SDT con los estándares de calidad impuestos por
la CARU. n=número de muestra. En verde, el % de cumplimiento y, en rojo, el % de incumplimiento. 1, 2 y 3 son los
puntos de muestreo aguas arriba, en la descarga y aguas abajo, respectivamente.

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Scientia
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los muestreos, se obtuvieron resultados presun- were seen to be particularly influenced by climatic-
tivos positivos al evidenciarse la formación de co- hydrological conditions existing in the hydrographic
lonias típicas sobre el agar nutritivo EMB, llegando basin by the southwesterly phenomenon. Comparisons
a encontrarse en elevadas diluciones realizada a were made of physico-chemical parameters in El
la muestra (1/1.000) en los tres puntos muestrea- Cura stream with studies developed in water bodies in
dos. También, se observó la formación presuntiva the medium-lower basin of the Gualeguaychú River
de colonias típicas de otros géneros de bacterias developed by Crettaz-Minaglia et al. (2014) and Juarez
termotolerantes (entéricas); Shigella, Enterobacter, et al. (2018) in the Santa Bárbara stream, and Juárez
Klebsiella y Salmonella a través de la observación et al. (2016) and Gianello et al. (2016) in the streams
en microscopio de la morfología y coloración de las called Los Perros, Santa Bárbara, La Cañada,and
colonias. García, where it was observed that the values of
Evaluación de impactos en función de la EC, TDS, TP, SRP, and COD were higher in El Cura
calidad del agua del arroyo El Cura stream while the pH was similar and the DO was
Dado los altos porcentajes de cumplimiento found to be notably lower in El Cura stream. In this
del nivel de pH para los usos actuales y/o posibles sense, the high concentrations of TP, SRP,and COD,
evaluados, el agua se presenta apta para ser as well as the low concentration of DO in El Cura
utilizada en tales usos (Fig. 2). La calidad del agua stream could be linked to the organic contamination
en relación al contenido de SDT se encuentra and, in particular, with the discharge of the domestic
apta para utilizarla en actividades agrícolas y para wastewater effluents (Metcalf & Eddy Incorporated,
abastecimiento público con previo tratamiento 1995). The unstable organic matter retains the available
convencional en los tres puntos de muestreos DO in the aquatic medium by its later stabilisation/
evaluados (Fig. 3). La evaluación de los promedios decomposition provoking a lessening of the same
de OD detectados de los tres puntos de muestreo and compromising the survival of aquatic organisms
indican que el agua del arroyo El Cura no presenta (Avila-Hernández, 2017). However, the relative high
la concentración óptima para el buen desarrollo concentrations of TP and SRP also seen in the waters
de las especies acuáticas, y para ser utilizada en above the discharge, allows the presumption of diffuse
actividades recreativas de contacto directo, riego sources of contamination, Pomposiello et al. (2009);
agrícola y abastecimiento público con previo also, CEAMSE & INCOCIV (2014) mention the
tratamiento convencional (Fig. 4). sources of contamination in the study area as being the

Figure 4. Percentage of cases where the concentrations of DO meet with quality standards imposed by CARU. n=sample
number. In Green, the % of coincidence and, in red, the % of non-coincidence. 1, 2 and 3 respectively are the sampling points
of upstream and downstream waters with discharge.
Figura 4. Porcentaje de cumplimiento de las concentraciones de OD con los estándares de calidad impuestos por
la CARU. n=número de muestra. En verde, el % de cumplimiento y, en rojo, el % de incumplimiento. 1, 2 y 3 son los
puntos de muestreo aguas arriba, en la descarga y aguas abajo, respectivamente.

112
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De acuerdo a los niveles guías tomados como residue from the old waste dump of the city and the
referencias en el presente trabajo, las concentracio- superficial runoff of the surrounding areas that could
nes de CT halladas en todas las muestras recolec- contain nutrients and agrochemicals.
tadas indican que el agua del arroyo en el punto 1 On the other hand, comparing microbiological
podría presentar riesgo alguno para uso recreativo studies carried out in the middle-lower basin of the
de contacto indirecto debido a que 5 muestras de Gualeguaychú River, Rodriguez et al. (2014) found
un total de 14 presentaron una mala calidad mi- similar values of TMAB, TC,and TTC in the Santa
crobiológica, mientras que para el punto 2 y 3 es Barbara stream, which has an influence on livestock
inadecuada. Por otro lado, es inapropiada en todos activity, as in point 1 of El Cura. At points 2 and 3
los puntos muestreados para abastecimiento pú- of El Cura stream, high concentrations of the bacteria
blico con previo tratamiento de desinfección (Fig. TMAB, TC, and TTC that also could be linked to
5). Por otra parte, los altos porcentajes de incum- wastewater discharge were found. This provokes an
plimiento con los niveles guías y estándares de important microbiological alteration showing also, the
calidad de bacterias CTT para aguas destinadas al presumptive presence of highly diluted E. coli.
uso recreativo de contacto directo y riego agrícola A completed study in this area by Cardini et al.
la convierten inadecuada para su utilización en los (2001) before the construction of the plant for the
tres sitios muestreados. Sólo el punto 1 presentó treatment of wastewater effluents mentions that El
una calidad del agua que podría considerarse re- Cura stream presented maximum TTC values of
gular para la conservación del ambiente acuático 2.40E+07 CFU/100 ml. After the construction of the
y para el abastecimiento público con previo trata- treatment plant, Cardini et al. (2007) mentions that in
miento convencional de acuerdo a los estándares the case of the south-easterlies with an inversion of
de calidad impuestos por la Comisión Administra- the current of the of the hydric system, the treatment
dora del Río Uruguay (CARU) (Fig. 6). plant would function adequately without altering the
Evaluación de impactos mediante método quality of the water for direct contact recreational use,
matricial having found 2.00E+03 CFU/100ml of TTC in the
La Figura 7 muestra todos los impactos identi- exit of the treatment plant. In the present study, this
ficados en la etapa de funcionamiento de la planta level of TTC concentration was only found at point
de tratamiento de efluentes cloacales. De la eva- 1, this same quantity being much exceeded in points
luación realizada, se identificaron un total de 558 2 and 3. This shows that, after more than 10 years of

Figure 5. Percentage of cases where the concentrations of TC meet the quality standards imposed by the WHO. n=sample
number. In green, the % of coincidence and, in red, the % of non-coincidence. 1, 2 and 3 respectively are the sampling points
of upstream waters and downstream waters with discharge.
Figura 5.Porcentaje de cumplimiento de las concentraciones de CT con los estándares de calidad impuestos por la
OMS. n=número de muestra. En verde, el % de cumplimiento y, en rojo, el % de incumplimiento. 1, 2 y 3 son los puntos
de muestreo aguas arriba, en la descarga y aguas abajo, respectivamente.

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impactos, de los cuales 164 corresponden a impac- functioning, the treatment plant of wastewater effluents
tos positivos (29,4% de total) y 394 corresponden a would represent a low effect at the stage of disinfection
impactos negativos (70,6% del total). Del total de of the effluents. Similar studies were developed by
éstos últimos, los más importantes en el presente Rodríguez et al. (2002) in the Chocancharava River,
estudio, el 40,1% corresponden a un impacto ne- Costagliola et al. (2003) in the Baradero River and
gativo bajo (158 impactos), 39,8% corresponden a Streitenberger & Baldini (2010) in the estuary of Bahia
un impacto negativo medio (157 impactos) y 20,1% Blanca. The studies that have evaluated the influence
corresponden a un impacto negativo alto (79 im- of discharges of wastewater effluents have concluded
pactos) (ver Apéndice 2 y 3). in a similar way (to the present study), indicating that
Lineamientos del plan de gestión ambiental microbiological indicators of faecal contamination
La evaluación de impactos realizada permi- (TC and TTC) surpassed the international guideline
tió identificar aquellas situaciones críticas que re- levels for recreational use. For their part, Costagliola
quieren un control prioritario. La Tabla 6 describe et al. (2003) found TTC values lower than those
las acciones del plan de gestión ambiental con las registered in EL Cura stream and detected transmitters
respectivas medidas necesarias a ejecutar en los of illnesses such as E. coli, Vibrio chlolerae number O1
planes de manejo ambiental para revertir, preve- and potentially toxic bacteria such as Aeromonas sp. In
nir y atenuar los impactos negativos significativos this study, only the indicator E. coli was studied, being
identificados. found presumptively with high frequency and in high
DISCUSIÓN dilutions; its presence could indicate the possible
Los parámetros determinados y la calidad del existence of other indicators and possible pathogens.
agua se vieron particularmente influenciados por In this sense, it is necessary to study them and link
condiciones climáticas-hidrológicas existentes them to hydric illnesses of the population and evaluate
en la cuenca hidrográfica por el fenómeno de su- the potential sanitary risks of the discharging of
destada. Comparando parámetros fisico-químicos wastewater effluents.
obtenidos en el arroyo El Cura con estudios desa- With respect to quality standards, this study not

Figure 6. Percentage of cases where the concentrations of DO meet with quality standards imposed by CARU. n=sample
number. In Green, the % of coincidence and, in red, the % of non-coincidence. 1, 2 and 3 respectively are the sampling points
of upstream and downstream waters with discharge.
Figura 6. Porcentaje de cumplimiento de las concentraciones de OD con los estándares de calidad impuestos por
la CARU. n=número de muestra. En verde, el % de cumplimiento y, en rojo, el % de incumplimiento. 1, 2 y 3 son los
puntos de muestreo aguas arriba, en la descarga y aguas abajo, respectivamente.

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Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

Figure 7. Percentage of cases where the concentrations of DO meet with quality standards imposed by CARU. n=sample
number. In Green, the % of coincidence and, in red, the % of non-coincidence. 1, 2 and 3 respectively are the sampling points
of upstream and downstream waters with discharge.
Figura 7. Porcentaje de cumplimiento de las concentraciones de OD con los estándares de calidad impuestos por
la CARU. n=número de muestra. En verde, el % de cumplimiento y, en rojo, el % de incumplimiento. 1, 2 y 3 son los
puntos de muestreo aguas arriba, en la descarga y aguas abajo, respectivamente.

rrollados en cuerpos de agua de la cuenca media- only provides evidence of the absence of the national
baja del río Gualeguaychú por Crettaz-Minaglia et normative that ought to establish guidelines for
al. (2014) y Juarez et al. (2018) en el arroyo Santa microbiological parameters according to the use and
Bárbara, Juárez et al. (2016) y Gianello et al. (2016) characteristics of the water body but also the lack of
en los arroyos Los Perros, Santa Bárbara, La Cañada epidemiological studies in the region that link illnesses
y García, se observan que los valores de CE, SDT, PT, of hydric origin with the indicative organisms. This
PRS y DQO fueron superiores en el arroyo El Cura, coincides with the observations that were made 15 years
mientras que el pH fue similar y el OD se encontró ago by Costagliola et al. (2003). In this sense, Branco
notablemente más bajo en el arroyo El Cura. En (1984) mentions that the use of water recreationally
este sentido, las altas concentraciones de PT, PRS through direct contact requires a high pattern of
y DQO, así como la baja concentración de OD en bacteriological quality due to the innumerable illnesses
el arroyo El Cura podrían vincularse con la conta- of the skin, ears and eyes that can be transmitted by
minación orgánica y, en particular, con la descarga water. As the values of the microbiological parameters
de los efluentes cloacales domiciliarios (Metcalf & increase with temperature, this also generates a higher
Eddy Incorporated, 1995). La materia orgánica ines- potential risk in recreational waters during the warmer
table capta el OD disponible en el medio acuático months (Hunter et al., 1999). Additionally, in this study,
para su posterior estabilización/descomposición differences in physical-chemical and bacteriological
provocando una disminución de éste, comprome- parameters were observed in the tourist and non-
tiendo la supervivencia de los organismos acuáti- tourist seasons, as the sanitary risks in the areas of
cos (Avila-Hernández, 2017). No obstante, dadas las influence of the wastewater discharge effluents could
relativas altas concentraciones de PT y PRS halladas have an even higher potential in the summer. On the
también aguas arriba de la descarga, permiten pre- other hand, the risk of consuming fish from these
sumir la presencia de fuentes de contaminación waters could be minor even though it was not possible
difusas. Pomposiello et al. (2009) y CEAMSE & INCO- to relate the quantities of coliform bacteria in the water
CIV (2014) mencionan como fuentes de aporte de with those present in the muscles of the fish (Slabbert
contaminación en el área de estudio a los lixiviados et al., 1989 en Rodriguez et al., 2002). With regard to
del antiguo basural de la ciudad, y a la escorrentía this, the limit of the bacterial density in water that
superficial de áreas circundantes que podría conte- allows colonisation within the muscle is variable given
ner nutrientes y agroquímicos. that the grade of invasion that can be suffered by the
Por otro lado, comparando resultados microbio- fish is characteristic of each species and depends on the
lógicos de estudios realizados en la cuenca media- immunological state of each individual colonisation.
baja del río Gualeguaychú, Rodriguez et al. (2014) (Bianchi et al., 2014). This is an aspect to be evaluated
encontró en el arroyo Santa Bárbara, el cual tiene in the future given the consumption for survival that

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Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

influencia de la actividad ganadera, valores simila- exists in the study area and in the zone.
res de AMT, CT y CTT al punto 1 del arroyo El Cura. In evaluating the impact made, negative impacts
En los puntos 2 y 3 del arroyo El Cura, se hallaron were observed principally in the water quality of
altas concentraciones de bacterias AMT, CT y CTT the stream water, in the physico-chemical and
que también podrían estar vinculadas a la descar- bacteriological characteristics of the ground cover, in
ga de los efluentes cloacales; esto provocaría una the quality of wild life, in air quality and scenic views,
alteración microbiológica importante hallándose, for irregularities detected in the stages of “Secondary
también, la presencia presuntiva de E. coli en ele- Treatment” and “Tertiary Treatment” and in the “Final
vadas diluciones. Disposition of the Treated Wastewater Effluent”. This
Un trabajo llevado a cabo en el área de estudio is a fundamental aspect for studying and marking the
por Cardini et al. (2001) previo a la construcción confines of the area of influence of the discharges of
de la planta de tratamiento de efluentes cloacales, the effluents on the stream to evaluate the potential
menciona que el arroyo El Cura presentó valores environmental and sanitary risks. This is related
máximos de CTT de 2,40E+07 UFC/100 ml. Poste- with the results of the study and evaluations of
riormente a la construcción de la planta de trata- environmental impacts carried out on treatment plants
miento, Cardini et al. (2007) menciona que en caso of residential residual waters in contexts that are similar
de sudestadas con una inversión de la corriente del to those of the present study, where Orta-Zambrano &
sistema hídrico, la planta de tratamiento funcio- Chang (2007) declared that the environmental “Water”
naría adecuadamente no alterando la calidad del would be the most negatively affected, with a high
agua para uso recreativo de contacto directo al ha- impact, for the development of activities pertaining
llarse 2,00E+03 UFC/100ml de CTT en la salida de la to the “Treatment and Disposition of Residual
planta de tratamiento. En el presente trabajo, este Waters”, a similar situation to one that was declared
nivel de concentración de CTT sólo fue hallado en el by ETAPA & GREELEY AND HANSEN-ACSAM
punto 1, siendo superando de modo importante en CONSULTORES (2017) and Molina-Bravo (2014),
los puntos 2 y 3. Esto evidencia que, luego de más where possible impacts in the “Final Discharges into
de 10 años de funcionamiento, la planta de trata- the River Basin” and “Final Discharges to the Valdivia
miento de efluentes cloacales presentaría una baja Estero”, respectively, were studied for deficiencies in
efectividad en la etapa de desinfección del efluen- the treatment of residual water. The study of Molina-
te. Trabajos similares desarrollados por Rodríguez Bravo (2014) recognises a possible “Sanitary Risk” for
et al. (2002) en el río Chocancharava, Costagliola an incorrect disposition in these waters. Also, possible
et al. (2003) en el río Baradero y Streitenberger & impacts on “Ground cover quality” were detected and
Baldini (2010) en el Estuario de Bahía Blanca, en Molina-Bravo (2014) associated this with an inadequate
los que han evaluado la influencia de descargas de availability of mud and ETAPA & GREELEY AND
efluentes cloacales, han concluido, de modo similar HANSEN-ACSAM CONSULTORES (2017) in the
a este trabajo, que indicadores microbiológicos de “Secondary Treatment System” for the generation of
contaminación fecal (CT y CTT) superaron niveles residual mud, and, where the “System of Treatment
guías internacionales para uso recreacional. Por su of Mud” would have an impact on “Aesthetic and
parte, Costagliola et al. (2003) hallaron valores de Landscape components” for its negative disposition,
CTT menores a los registrados en el arroyo El Cura and also on “ Air Quality” and “Quality of Life” for
y detectaron transmisores de enfermedades como generating bad odours and gases.
E. coli, Vibrio chlolerae no O1 y bacterias potencial- As for the general guidelines of the environmental
mente tóxicas como Aeromonas sp. En este traba- plan for the lower basin of El Cura stream, in the
jo, sólo se estudió el indicador E. coli hallándose drawing up of the base lines of information, with
presuntivamente con alta frecuencia y en elevadas control measures, the objective is to create and update
diluciones; su presencia podría est2ar indicando la information of the system of the basin to identify existing
posible existencia de otros indicadores y posibles problems and to correctly carry out the management
patógenos. En este sentido, es necesario estudiar- of this hydric resource. On the other hand, in the
los para permitir vincularlos a las enfermedades hí- physico-chemical and microbiological quality control
dricas de la población y evaluar el riesgo sanitario plan, with specific control measures, there is the search
potencial de la descarga de los efluentes cloacales. to develop a systematic monitoring to create an analysis
Respecto a los estándares de calidad, el pre- profile and thus discover the superficial water quality

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Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

sente trabajo no sólo evidencia la ausencia de and the sediments on the basin bed in a detailed form
normativa nacional que establezca niveles guía using contamination indicators. Lastly, the objective
de parámetros microbiológicos de acuerdo al uso of the plan is also to educate the community on
y características del cuerpo de agua, sino también measures relating to prevention, control and mitigation
la falta de estudios epidemiológicos en la región and inform the population on the importance at
que vinculen las enfermedades de origen hídrico regional level on the contamination of water bodies
con organismos indicadores. Esto coincide con las to generate populational conscience reflecting good
observaciones que realizaron hace 15 años Costa- environmental habits. All this is in keeping with the
gliola et al. (2003). En este sentido, Branco (1984) guidelines of the environmental management proposal
menciona que el uso recreacional del agua con of ETAPA & GREELEY AND HANSEN-ACSAM
contacto directo requiere un elevado patrón de CONSULTORES (2017) and Molina-Bravo (2014),
calidad bacteriológica debido a las innumerables In their respective studies, environmental impact is
enfermedades de piel, oídos y ojos que pueden contemplated along with monitoring and follow up in
ser transmitidas por el agua. Dado que los valores the receptive body of the effluents aimed at controlling
de los parámetros microbiológicos se incrementan contamination by the deficiencies in the functioning of
con la temperatura; esto generaría un mayor riesgo the plant. On the other hand, both studies establish
potencial en aguas recreacionales durante los me- a plan in communitarian relations with a programme
ses cálidos (Hunter et al., 1999). Adicionalmente, en of environmental education and training for the
este trabajo se observaron diferencias en los pará- community.
metros físico-químicos y bacteriológicos estudia- CONCLUSION
dos durante la época turística y no-turística, por lo Despite the influence of climatological and
que los riesgos sanitarios en las áreas de influencia hydrological influences, the methodology of the
de la descarga de los efluentes cloacales podrían sampling and indicators of contamination used were
potenciarse aún más durante el período estival. Por sufficient to conclude that the treatment plant for
otra parte, el riesgo en el consumo de pescado po- wastewater effluents of the city of Gualeguaychú alters
dría ser menor, aunque no se ha podido relacionar the quality of the superficial water of El Cura stream
la cantidad de bacterias coliformes del agua con las negatively.
presentes en los músculos de los peces (Slabbert The indicators of microbiological and physico-
et al., 1989 en Rodriguez et al., 2002). En relación a chemical quality helped explain the risk for the biota
esto, el límite de densidad bacteriana en agua que that lives in the stream and the health of humans beings
permite la colonización en músculo es variable ya because of the non-fulfilling of the guidelines and
que el grado de invasión que pueden sufrir los pe- standards of quality. Thus, under regular climatological-
ces es característico de cada especie y depende del hydrological conditions, the three sampling points are
estado inmunológico de cada individuo (Bianchi et inadequate for recreational activities of primary and
al., 2014). Este es un aspecto que debe ser evalua- secondary contact, agricultural watering and public use
do a futuro dado el consumo de supervivencia que with previous disinfection. Only point 1 is regular for
existe en el área de estudio y en la zona. the preservation of the aquatic environment and public
De la evaluación de impacto realizada, se obser- use following a previous conventional treatment.
varon impactos negativos principalmente en la cali- It could be observed that the plant spilled
dad del agua del arroyo, en las características físico- the wastewater effluents with a high organically
químicas y bacteriológicas del suelo, en la calidad biodegradable and non-biodegradable charge. While
de vida silvestre, en la calidad del aire y en las vistas the spilling of the treated effluents alter the superficial
escénicas, por irregularidades detectadas en las quality of the stream water, the presence of other
etapas de “Tratamiento Secundario” y “Tratamiento possible sources of contamination, be they precise
Terciario” del efluente, y en la “Disposición Final del of diffuse, cannot be ignored when considering the
Efluente Cloacal Tratado”. Este es un aspecto funda- stream’s basin. Thus, more exhaustive research on the
mental al estudiar y delimitar el área de influencia study area is recommended.
de la descarga de los efluentes sobre el arroyo para The indicators of contamination demonstrate that
evaluar riesgos potenciales ambientales y sanita- the stream does not present the necessary flow for
rios. Esto se relaciona con resultados de estudios self-purification and absorption of the contamination
y evaluaciones de impacto ambiental efectuados by the spilling of wastewater effluents. Bearing this

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Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

sobre plantas de tratamiento de aguas residuales in mind, studying Las Achiras (glen) which has a
residenciales en contextos similares al del presen- lesser flow is recommended as being the medium of
te estudio, donde Orta-Zambrano & Chang (2007) evacuation for these, given the possible existence of a
declararon que el componente ambiental “Agua” contamination that is far more significant.
sería el más afectado negativamente, con un alto As there is a need to establish an environmental
impacto, por el desarrollo de actividades pertene- control destined at reducing and/or avoiding the
cientes al “Tratamiento y Disposición de Aguas Re- contamination of the streams to achieve environmental
siduales”, situación similar a lo declarado por ETAPA conservation of the zone, it is important to consider
& GREELEY AND HANSEN-ACSAM CONSULTORES the measures proposed in the environmental plan for
(2017) y Molina-Bravo (2014), donde reconocen the lower basin of El Cura.
posibles impactos de la “Descarga final al Rio Cuen- In this work, a primary study was made evaluating
ca” y “Descarga final al Estero Valdivia”, respectiva- the impacts produced by the discharge of treated
mente, por deficiencias en el tratamiento del agua wastewater effluents in the city of Gualeguaychú on
residual. Por su parte, Molina-Bravo (2014) recono- the quality of the superficial water in El Cura stream
ce un posible “Riesgo Sanitario” por una incorrecta and to propose a primary plan for environmental
disposición de estas aguas. También, se detectaron management for the stream and the lower basin of the
posibles impactos sobre la “Calidad del Suelo”, don- Gualeguaychú River. The results provide information
de Molina-Bravo (2014) lo asocia a una inadecuada on the quality and sanitary state of the water so that
disponibilidad de lodos y ETAPA & GREELEY AND possible health risks for living beings and the aquatic
HANSEN-ACSAM CONSULTORES (2017) al “Sistema biota that live in the stream can be evaluated.
de Tratamiento Secundario” por la generación de ACKNOWLEDGEMENTS
lodos de desecho, y, donde el “Sistema de Trata- Our thanks to the Universidad Autónoma de
miento de Lodos” impactaría sobre el componente Entre Ríos (UADER) for funding through the PIDA
“Estético y Paisajístico” por su mala disposición, y Project “Development of an integrated biotic index
sobre la “Calidad del Aire” y “Calidad de Vida” al ge- using bentonic macro invertebrates (proposal)” (Res.
nerar malos olores y gases. CS 050/2015), andhe Project PIDAC, Determining
En cuanto a los lineamientos generales del plan the environmental quality of El Cura stream
de gestión ambiental para la cuenca baja del arro- (Gualeguaychú, Entre Ríos)” (Res. CS 271/2017) and
yo El Cura, en el plan de generación de línea de the financing provided for initiation to research to:
base de información, con medidas de control, el “Study of the microbiological quality of the El Cura
objetivo es crear y actualizar información del sis- stream (Gualeguaychú, Entre Ríos)” (Res. CS 221/15).
tema de la cuenca para identificar problemáticas Thanks also to the members of the Laboratory for
existentes y efectuar una correcta gestión de este Biological Indicators and Environmental Management
recurso hídrico. Por otra parte, en el plan de con- of Water Quality, for collaborating with the sampling.
trol de la calidad físico-química y microbiológica, And, finally, to the anonymous reviewers who helped
con medidas específicas de control, se busca de- improve this manuscript.
sarrollar un monitoreo sistemático para crear un
perfil de análisis y conocer así la calidad del agua
superficial y de los sedimentos del lecho de la
cuenca de forma detallada utilizando indicadores
de contaminación. Por último, el objetivo del plan
de educación y comunicación hacia la comunidad,
con medidas tendientes a la prevención, al control
y a la mitigación, es informar a la población sobre
la importancia a nivel regional de la contaminación
de los cuerpos de agua para generar una concien-
cia en la población que se reflejen en buenos hábi-
tos ambientales. En sintonía con los lineamientos
del plan de gestión ambiental propuestos, ETAPA
& GREELEY AND HANSEN-ACSAM CONSULTORES
(2017) y Molina-Bravo (2014), contemplan en sus

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Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

respectivos estudios de impacto ambiental, planes del arroyo El Cura.


de monitoreo y seguimiento del cuerpo receptor En este trabajo se realizó el primer estudio de la
del efluente con el objetivo de controlar la conta- evaluación de impactos producidos por la descar-
minación por deficiencias en la operatividad de la ga de los efluentes cloacales tratados de la ciudad
planta. Por otro lado, ambos trabajos establecen un de Gualeguaychú sobre la calidad del agua superfi-
plan de relaciones comunitarias con un programa cial del arroyo El Cura, y se propone el primer plan
de educación ambiental y capacitaciones destina- de gestión ambiental para un arroyo de la cuenca
do a la comunidad. baja del río Gualeguaychú. Los resultados aportan
CONCLUSIONES conocimiento de la calidad y estado sanitario del
A pesar de la influencia de las condiciones cli- agua a fin de evaluar los posibles riesgos para la
matológicas e hidrológicas, la metodología de salud de los seres vivos y la biota acuática que al-
muestreo e indicadores de contaminación utiliza- berga el arroyo.
dos fueron suficientes para concluir que la planta AGRADECIMIENTOS
de tratamiento de efluentes cloacales de la ciudad A la Universidad Autónoma de Entre Ríos por
de Gualeguaychú altera negativamente la calidad el financiamiento a través del proyecto PIDA “De-
del agua superficial del arroyo El Cura. sarrollo de un índice biótico integrado regional de
Los indicadores de calidad microbiológicos y calidad de agua utilizando macroinvertebrados
físico-químicos permitieron explicar el riesgo para bentónicos (propuesta)” (Res. CS 050/2015), del
la biota que alberga el arroyo y la salud de los seres proyecto PIDAC “Determinación de la Calidad Am-
humanos al existir incumplimientos con los niveles biental en el arroyo El Cura (Gualeguaychú, Entre
guías y estándares de calidad. Así, bajo condiciones Ríos)” (Res. CS 271/2017) y beca de iniciación a la
climatológicas-hidrológicas regulares es inadecua- investigación “Estudio de la calidad microbiológica
da en los tres puntos de muestreo para actividades del arroyo El Cura (Gualeguaychú, Entre Ríos)” (Res.
recreativas de contacto primario/secundario, riego CS 221/15).
agrícola y abastecimiento público con previa des- A los integrantes del Laboratorio de Indicadores
infección. Solo en el punto 1 es regular para la pre- Biológicos y Gestión Ambiental de Calidad de Agua
servación del ambiente acuático y abastecimiento por la colaboración en los muestreos. Finalmente, a
público con previo tratamiento convencional. los evaluadores anónimos que permitieron mejorar
Se pudo observar que la planta vierte los efluen- el presente trabajo.
tes cloacales tratados con alta carga orgánica al no REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
ser efectiva en la remoción de sustancias orgánicas Aguilar, M. 2005. Las defunciones por enfermedades in-
biodegradables y no biodegradables. Si bien el ver- fecciosas y parasitarias en relación con las condiciones
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perficial del agua del arroyo, no se descartan otras
20 pp.
posibles fuentes contaminantes puntuales/difusas APHA-AWWA-WPCF. 1992. Standard Method for the Ex-
en la cuenca del arroyo. Así, se recomienda hacer amination of Water and Wastewater. 17°. Díaz de Santos
un análisis más exhaustivo del área de estudio. S.A. (Ed). Madrid, España. 235 pp.
Los indicadores de contaminación demostraron Arcos-Pulido, M. del P., Ávila-Navia, S. L., Estupiñán-Torres,
que el arroyo no presenta el caudal necesario para S. M. & Gómez-Prieto, A. C. 2005. Indicadores microbio-
autodepurar y absorber la contaminación por el lógicos de contaminación de las fuentes de agua. NOVA
vertido de efluentes cloacales. Teniendo en cuenta - Publicación Científica en Ciencias Biomédicas de la Univer-
esto, se recomienda estudiar la cañada Las Achiras sidad Nacional Abierta y a Distancia (4):69-79.
Avila-Hernández, E. V. 2017. Impacto de la descarga de
al presentar un caudal menor y ser el medio de eva-
efluentes cloacales sobre la calidad de agua del arroyo
cuación de éstos, dada la posible existencia de una El Cura (Gualeguaychú, Entre Ríos). Entre Ríos, Argentina,
contaminación mucho más significativa. 312 pp.
Al existir la necesidad de establecer un control Bianchi, V., Varela, P., Flores, D. & Durando, P. 2014. Eva-
ambiental con medidas destinadas a reducir y/o luación de Escherichia Coli resistente a antibióticos como
evitar la contaminación de la cañada y del arroyo especie bioindicadora de contaminación fecal en agua y
para lograr la conservación del ambiente, resulta peces en la cuenca inferior del río San Juan. Natura Neo-
importante considerar las medidas propuestas en tropicalis 45 (2): 45-69.
el plan de gestión ambiental para la cuenca baja Blanco, G., Wagner, L. & Santalla, E. 2007. Estudio de im-
pacto ambiental: aplicación de la capacidad de las plan-

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Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

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Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

APÉNDICES
1. Información complementaria de la planta de tratamiento de efluentes cloacales domiciliarios
de la ciudad de Gualeguaychú

Porcentaje aproximado de la población abastecida con el servicio: 95%


Cantidad de efluente tratado por día 26.000 m3 – 27.000 m3 aproximadamente
Etapas contempladas en el tratamiento del efluente
Pre-tratamiento y tratamiento primario
Se llevan a cabo procesos y operaciones para eliminar constituyentes del efluente cuya
presencia pueda provocar problemas de mantenimiento y funcionamiento en los procesos y
operaciones posteriores. En esta etapa se elimina una fracción de los sólidos en suspensión y
materia orgánica mediante un sistema de rejas de acero inoxidable, seguido por un sistema
desarenador.

Tratamiento secundario
Se busca remover sólidos en suspensión y compuestos orgánicos biodegradables mediante
tratamientos biológicos llevados a cabo por la acción de microorganismos que transforman
y degradan la materia orgánica presente en el efluente cloacal. El objetivo final es convertir
la materia orgánica y compuestos inorgánicos del efluente entrante en materia orgánica y
compuestos inorgánicos más sencillos.
Este tratamiento consta de cuatro piletas, donde en dos de ellas se lleva a cabo el proceso de
digestión aeróbica y en las dos restantes el proceso de digestión anaeróbica.

Tratamiento terciario
Dado que las etapas anteriores poseen bajo rendimiento en la eliminación de microorganismos
fecales, el efluente es sometido a un tratamiento de desinfección mediante la adición de cloro
gaseoso para disminuir así la carga microbiológica que contiene.
Destino final del El efluente cloacal tratado es vertido en la cañada Las Achiras, recorren así
efluente cloacal aproximadamente 570 m hasta desembocar en el arroyo El Cura.
Fuente: Avila-Hernández, 2017

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Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

APPENDIX
1. Complimentary information on the treatment plant for domestic wastewater effluents in the city
of Gualeguaychú

Approximate percentage of the population making use of the service: 95%


Quantity of Effluents 26.000 m3 – 27.000 m3 approximately
treated per day
Stages contemplated in the effluent treatment
Pre-treatment and primary treatment
Processes and operations are carried out to eliminate constituents of the effluent whose presence can
provoke maintenance and functional problems in the subsequent processes and operations. At this stage
a fraction of the solids in suspension and organic matter are eliminated through a system of stainless steel
bars and a sand filtering system.
Secondary treatment
Deals with the removal of solids in suspension and organic biodegradable components through
biological treatments completed by the action of microorganisms that transform and degrade the organic
matter present in the wastewater effluent. The final aim is to convert the organic matter and inorganic
components of the effluent coming in into simpler organic material and inorganic components.
This treatment has four sinks; two of them carry out the aerobic digestion process and the two remaining
sinks deal with the anaerobic digesting process.

Tertiary treatment
Given that the previous steps have a low performance level in the elimination of faecal microorganisms,
the effluent undergoes a disinfection treatment through the addition of gaseous chlorine to thus diminish
the contained microbiological charge.
Final destination of the The treated wastewater effluent is spilled into Las Achiras stream, thus it flows
wastewater effluent approximately 570 m until it arrives as the mouth of EL Cura stream.

Source: Avila-Hernández, 2017.

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Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

2. Impactos hacia el ambiente originados por actividades desarrolladas en la planta de


tratamiento de efluentes

Acción impactante Generación de barros – Recolección de barros


Etapa en la que se produce Tratamiento secundario
Factores Calidad del agua superficial y subterránea, depositación, olores, plantas acuáticas,
ambientales microfauna acuática, peces y moluscos, organismos bénticos, vida silvestre y
implicados espacios abiertos, calidad de vida silvestre, vistas escénicas, manejo de residuos
Descripción Incide en los fenómenos de depositación presentados en las piletas de tratamiento
secundario al no existir una adecuada frecuencia de extracción de los barros
generados,. Esto interfiere negativamente en la calidad del efluente tratado que
es vertido, al presentar éste dado que el efluente tiene un período de retención
hidráulico inferior al teórico, ocasionando que la decantación de los barros no se
lleva a cabo de forma correcta. Es así que la cañada Las Achiras y el arroyo El Cura
presentan grandes masas de materia orgánica flotante (barros) que afectan la
calidad del agua superficial y subterránea, disminuye la calidad de la vistas escénicas
e incide sobre la biota que alberga la cañada Las Achiras y el arroyo El Cura.

Acción impactante Tratamiento de barros- Disposición final de barros


Etapa en la que se produce Tratamiento secundario
Factores Características físico-químicas y microbiológicas de la tierra, calidad del agua
ambientales superficial y subterránea, olores, salinización del terreno, manejo de residuos,
implicados calidad de vida silvestre, vistas escénicas, vida silvestre y espacios abiertos
Descripción Incide directamente sobre la calidad de la tierra al existir un deficiente aislamiento
inicial, tratamiento y disposición final de los barros removidos teniendo en cuenta
el grado de peligrosidad que presentan. El playón utilizado para el tratamiento de
los barros –secado-, no cuenta con las medidas de seguridad necesarias y con un
tamaño acorde a la generación teórica mensual de barros.
Por otro lado, la disposición final es defectuosa, produciéndose principalmente
sobre el playón.
Esto plantea una situación preocupante en cuanto a la posible existencia de una
fuente puntual de contaminación, inicialmente sobre la tierra y posteriormente en
la calidad del agua de la cañada Las Achiras y del arroyo El Cura.

Acción impactante Desinfección del efluente


Etapa en la que se produce Tratamiento terciario
Factores Características físico-químicas y microbiológicas de la tierra, calidad del agua
ambientales superficial y subterránea, peces y moluscos, organismos bénticos, insectos,
implicados microfauna acuática, vistas escénicas, calidad de vida silvestre y espacios abiertos,
agricultura, pesca, navegación, zona de recreación, salud pública

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Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

2. Impacts on the environment due to the activities originating in the effluent treatment plant

Impacting action Residue generation – Residue recollection


Stage at which it is produced Secondary treatment
Implied Superficial and subterranean water quality, deposits, odours, aquatic plants, aquatic micro-
environmental fauna, fish and molluscs, benthic organisms, wild life and open spaces, quality of wild life,
factors scenic views, residue management
Description Related to the phenomena of deposits presented in the secondary treatment sinks as the
extraction of residue is not carried out with adequate frequency. This action interferes
with the quality of the effluent that is spilled as it presents a period of hydraulic retention
that is inferior to that presented theoretically. This in turn affects the breaking down
of the residue which does not happen as it ought to. It is thus that the streams El Cura
and Las Achiras present large masses of floating organic matter (residue) that affect
superficial and subterranean water quality, lessening the quality of scenic views and
adversely affecting the biota residing in these two streams.

Impacting action Residue treatment- Final disposition of residue


Stage at which it is produced Secondary treatment
Environmental Physico-chemical and microbiological characteristics of the soil, quality of superficial and
factors affected subterranean water, odours, addition of salt to terrain, management of residue, quality of
wild life, scenic views, wild life and open spaces
Description Acts directly on the quality of the soil by the existence of an initial isolating factor,
treatment and final deposit of the residue carried considering the possible dangers that
can arise. The treatment area of the matter- dry- does not have the necessary not the size
in keeping with the monthly generation of residue theoretically.
On the other hand, the final deposit is imperfect, and takes place principally on the
treatment site.
This presents a problematic situation as there is a source of contamination on the soil
that later affects the water quality of the streams, namely, El Cura and Las Achiras.

Impacting action Disinfection of the effluent


Stage at which it happens Tertiary treatment
Environmental Physico-chemical and microbiological factors of the soil, quality of superficial and
factors implied subterranean water, fish and molluscs, benthic organisms, insects, aquatic micro-fauna,
scenic views, quality of wild life and open spaces, agriculture, fishing, navigation,
recreation zone, public health
Description The evaluation of the results helps affirm that the bacteriological quality of the wastewater
effluent is irregular, as its spill affects the microbiological quality of the superficial water
of Las Achiras and El Cura streams. It is necessary that this water be used in various ways,
one of them being the preservation of the aquatic biota.
It remains to be said that the impact must be considered for the control of the spread
of diarrhoea and other gastrointestinal illnesses produced by indigestion (voluntarily or
not) caused by water with a high density of faecal coliform microorganisms. Also to be
considered is the control of the proliferation of insects that are vectors of illnesses.
Impacting action Discharge of wastewater effluent treated in Las Achiras stream

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Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

Descripción La evaluación de los resultados permite afirmar que la calidad bacteriológica


del efluente cloacal tratado es irregular, donde su vertido afecta la calidad
microbiológica del agua superficial de la cañada Las Achiras y del Arroyo El Cura
necesaria para poder ser utilizada en distintos usos, incluso el de la preservación de
la biota acuática.
Cabe destacar que es un impacto a tener en cuenta para el control de brotes de
diarreas y demás enfermedades gastrointestinales producidas por la ingestión
(voluntaria o no) de agua con elevada densidad de microorganismos coliformes
fecales, como así también para el control sobre la proliferación de insectos vectores
de enfermedades.
Acción impactante Vertido del efluente cloacal tratado en la cañada Las Achiras
Etapa en la que se produce Disposición final del efluente cloacal tratado
Factores Características físico-químicas y microbiológicas de la tierra, calidad del agua
ambientales superficial y subterránea, peces y moluscos, organismos bénticos, microfauna
implicados acuática, vistas escénicas, calidad de vida silvestre y espacios abiertos, agricultura,
pesca, navegación, zona de recreación, diseño del paisaje, salud pública
Descripción En base a la evaluación realizada sobre los datos obtenidos, se concluye que
el vertido de los efluentes cloacales tratados altera la calidad físico-química y
microbiológica del agua superficial de la cañada Las Achiras y del arroyo El Cura.
Esta alteración interfiere negativamente en la calidad necesaria para la utilización
del agua en los diferentes usos actuales y posibles evaluados, incluido el de la
preservación del ambiente acuático.
Por otro lado, en menor medida incide negativamente sobre la calidad de la tierra
circundante al área de la planta de tratamiento de efluentes.
Fuente: Avila-Hernández, 2017.

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Scientia
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Stage at which it is produced Final destination of the wastewater effluent treated


Implied Physico-chemical and microbiological characteristics of the soil, superficial and
environmental subterranean water quality, fish and molluscs, benthic organisms, aquatic micro-fauna,
factors scenic views, quality of wild life and open spaces, agriculture, fishing, navigation,
recreation zone, landscape design, public health
Description Based on the evaluation carried out on the obtained data, it can be concluded that the
spilling of the wastewater effluents treated alters the physico-chemical and microbiological
quality of the superficial water of the streams, EL Cura and Las Achiras. This alteration
has a negative influence on the quality needed to use the water of these sources as they
are presently used and in evaluated contexts, including the preservation of the aquatic
environment.
On the other hand, in a lesser scale, it negatively affects the quality of the soil around the
area of the treatment plant of the effluents.
Source: Avila-Hernández, 2017.

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Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

3. Matriz de impacto que expresa aquellos producidos por las actividades desarrolladas en la planta de
tratamiento de efluente sobre los factores ambientales contemplados en función de su nivel bajo-medio-alto.
3. Impact matrix expressing those produced by the activities carried out in the effluent treatment plant on the
environmental factors contemplated at its low-medium-high level.

128
CE PRS
T OD SDT PT (mgP- DQO AMT CT CTT
Punto pH OD (mgO2/l) (µS/ (mgP-
(°C) (%) (mg/l) PO4-3 /l) (UFC/100ml) (NMP/100ml) (NMP/100ml)
cm) PO4-3 /l) (mgO2/l)

x 21,8a 7,25a 4,24a 47,71 611a 307a 0,73a 1,87a 47a 4,12E+05a 2761a 1753a
n 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 8
DS 5,44 0,24 1,72 17,72 340 173 0,48 0,94 16 1871.23 2412 1092
Cond.
m 14,35 6,84 2,75 29,1 396 194 0,20 0,70 31 1,71E+05 910 910
Reg.
M 28,7 7,51 7,14 74,2 1430 718 1,60 3,04 81 7,60E+05 9300 4300

x 23,1a 7,55a 4,82a 57,27 831d 409d 1,44d 4,90d 76a 3,51E+05d 23309d 25489d
1 n 3 3 3 3 3 3 4 4 4 4 4 3
Cond. DS 3,59 0,10 2,01 26,41 103 43 0,17 0,25 17 1826.26 19681 15948
Irreg. m 19 7,45 2,52 27 770 382 1,24 4,56 61 1,66E+05 9300 15000
M 25,3 7,64 6,25 75,6 950 459 1,61 5,17 91 6,13E+05 46000 46000
x 22,2a 7,29a 3,70a 44,41 665b 334b 1,41b 3,40b 66a 2,03E+06b 45822b 33914b
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater...

n 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 9
DS 5,26 0,20 2,44 32,35 184 92 0,35 1,06 26 27503.12 49201 50556
Cond. m 14,9 6,95 0,87 8,5 488 247 0,86 1,89 31 4,21E+05 4300 9300
Reg.
M 29,0 7,57 6,58 87,10 1050 524 1,79 4,93 111 9,46E+06 >110000 >110000

x 22,0a 7,33a 2,02b 22,98 588e 292 e 1,04 e 3,68 e 86a 5,40E+05 e 8015 e 5026 e
2 n 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 3
Cond. DS 3,95 0,06 0,18 3,26 211 106 0,16 0,72 33 807.40 9320 12528
Irreg. m 18,4 7,28 1,76 18,6 400 199 0,86 2,62 61 4,50E+05 4300 2300
M 25,5 7,42 2,14 26 779 384 1,18 4,20 130 6,15E+05 24000 24000
x 22,8a 7,09a 3,73a 42,94 442c 221c 1,12c 2,72c 67a 1,35E+06c 36356c 23939c
n 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 8
DS 5,44 0,19 1,40 16,28 208 104 0,54 1,49 32 22432.46 42159 33996
Cond.
m 15,03 6,67 1,32 13,9 127 60 0,45 1,04 21 5,16E+05 9300 9300
Reg.
M 30,1 7,31 5,21 62,60 658 324 1,73 4,93 111 7,15E+06 >110000 110000

x 23,9a 7,51a 5,66c 67,15 430f 217 f 0,46 f 1,76 f 58a 2,29E+05 f 1692 f 1527 f
Scientia

n 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 3
3 DS 3,97 0,13 0,25 7,57 166 83 0,12 0,58 10 1506 1603 1957
Cond. m 20,36 7,39 5,37 60,3 266 137 0,32 1,24 51 1,29E+05 910 910
Irreg.
M 27,5 7,70 5,90 73,90 594 299 0,58 2,38 71 4,35E+05 4300 4300
*Letras diferentes significan diferencias significativas p<0,05.
Tabla 4. Estadísticos calculados para cada parámetro físico-químico y microbiológico discriminados por punto de muestreo de acuerdo a la influencia de las condiciones
climatológicas e hidrológicas. Cond. Reg.: Condición Regular, Cond. Irreg.: Condición Irregular.

Table 4. Statistics calculated for each physico-chemical and microbiological parameter at each sampling point according to the influence of climatic and hydrological conditions. Reg.

129
Cond: Regular Condition, Irreg. Cond.:Irregular Condition.
Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná
Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

Tabla 5. Resultados obtenidos del análisis presuntivo cualitativo de E. coli en los tres puntos de muestreo. MO:
muestra original, RC: réplica de campo √: resultado positivo, diluc.:dilución, s.d.: sin dato.
Table 5. Results obtained in the tentative qualitative analysis of E. coli in the three sampling points. MO: original
sampling, RC: replicate of field √: positive result, diluc.:dilution, s.d.: without data.

Colonias de
26/09/2015 17/10/2015 28/11/2015 19/12/2015 25/01/2016 05/03/2016 14/05/2016
E. coli
√ (hasta diluc. √ (diluc. √ (diluc. √ (diluc. √ (diluc. √ (diluc.
Punto MO s.d.
1/10) 1/1.000) 1/10) 1/10) 1/100) 1/10)
1 √ (diluc. √ (diluc. √ (hasta √ (hasta √ (hasta
RC s.d. s.d.
1/1.000) 1/100) diluc. 1/10) diluc. 1/100) diluc. 1/10)
√(diluc. √(diluc. √(diluc. √(diluc. √(diluc.
MO s.d. s.d.
1/10) 1/1.000) 1/1.000) 1/1.000) 1/100)
Punto
2 √(diluc. √(diluc. √(diluc. √(diluc. √(diluc. √(diluc.
RC √ (diluc. 1/100)
1/10) 1/1.000) 1/100) 1/1.000) 1/1.000) 1/100)

√ (hasta √(diluc. √(diluc. √(diluc. √(diluc. √(diluc. √(diluc.


MO
Punto diluc.1/1.000) 1/10) 1/1.000) 1/100) 1/1.000) 1/100) 1/100)
3
√(diluc. √(diluc. √(diluc. √(diluc.
RC s.d. s.d. s.d.
1/10) 1/1.000) 1/100) 1/100)
*Los valores son presuntivos.

Tabla 6. Plan de gestión ambiental


Table 6. Plan for environmental management

Plan de gestión ambiental para la cuenca baja del arroyo El Cura


Planes de
Planes de monitoreos
seguimiento
Planes de manejo ambiental
Frec./Resp. Frec./ Resp.
Generación de línea de base de información de la cuenca

Contexto Ecológico: Trimestral/ Trimestral/ Resp. del área de


Caracterización morfométrica y del ciclo hidrológico, ambiente de Gualeguaychú e instituciones
bioquímico y físico. Relevamiento de la flora, fauna y organizaciones dedicadas al cuidado
y del relieve y red de drenaje de la cuenca. Evaluar ambiental.
vulnerabilidades y capacidad de carga de la cuenca.

Contexto social:
Trimestral/ Trimestral/
Actores y usuarios involucrados. Usos, frecuencia y
Resp. del área de ambiente de Gualeguaychú
cantidad utilizada del agua. Relevamiento del servicio
e instituciones y organizaciones dedicadas al
de recolección y disposición final de excretas en áreas
cuidado ambiental.
circundantes.

Contexto económico:
Trimestral/ Trimestral/
Relevamiento de actividades económicas desarrolladas
Resp. del área de ambiente de Gualeguaychú
en la cuenca. Evaluación de los usos, frecuencia, cantidad
e instituciones y organizaciones dedicadas al
utilizada y competencias del agua por las actividades
cuidado ambiental.
productivas.

Continúa...

130
Scientia
Ávila-Hernández et al., Impact of domestic wastewater... Interfluvius 10(1):100-131, 2019 Paraná

Anual/ Semestral/ Resp. del área


Contexto político:
de ambiente de Gualeguaychú e instituciones y
Realizar un marco legal aplicable al arroyo.
organizaciones dedicadas al cuidado ambiental.

Anual/ Semestral/
Elaborar un informe del contexto ecológico, social, económico Resp. del área de ambiente de Gualeguaychú
y político. e instituciones y organizaciones dedicadas al
cuidado ambiental.

Control de la calidad físico-química y microbiológica de la


cuenca

Anual/ Anual/
Establecer puntos de muestreo en función de las actividades Resp. del área de ambiente de Gualeguaychú
identificadas en áreas circundantes. e instituciones y organizaciones dedicadas al
cuidado ambiental.

Establecer campañas de muestreo para evaluar en muestras de Trimestral/ Trimestral/


agua superficial parámetros físico-químicos, microbiológicos Resp. del área de ambiente de Gualeguaychú
y orgánicos. También se deben contemplar residuos de e instituciones y organizaciones dedicadas al
compuestos fitosanitarios y metales. cuidado ambiental.

Semestral/ Semestral/
Establecer campañas de muestreo para analizar metales y Resp. del área de ambiente de Gualeguaychú
compuestos orgánicos en muestras de sedimentos del lecho. e instituciones y organizaciones dedicadas al
cuidado ambiental.

Trimestral/ Trimestral/
Realizar estudios eco-toxicológicos de la calidad del agua Resp. del área de ambiente de Gualeguaychú
superficial y de los sedimentos del lecho. e instituciones y organizaciones dedicadas al
cuidado ambiental.

Trimestral/ Trimestral/
Establecer campañas de muestreo para tomar muestras
Resp. del área de ambiente de Gualeguaychú
de bentos a fin de evaluar la calidad mediante indicadores
e instituciones y organizaciones dedicadas al
bentónicos.
cuidado ambiental.

Anual/ Anual/
Resp. del área de ambiente de Gualeguaychú
Elaborar un informe de la calidad de la cuenca
e instituciones y organizaciones dedicadas al
cuidado ambiental.

Educación y comunicación hacia la comunidad

Cuatrimestral/ Cuatrimestral/
Realizar una educación ambiental destinada a toda la población Resp. del área de ambiente de Gualeguaychú
sobre las problemáticas de los ríos, arroyos y cañadas. e instituciones y organizaciones dedicadas al
cuidado ambiental.

Cuatrimestral/ Cuatrimestral/
Programar entrevistas con personas asentadas en áreas
Resp. del área de ambiente de Gualeguaychú
cercanas a la cuenca del arroyo a fin de detectar problemáticas
e instituciones y organizaciones dedicadas al
ambientales.
cuidado ambiental.

Anual/ Anual/
Elaborar un informe de la situación ambiental de la cuenca baja Resp. del área de ambiente de Gualeguaychú
del arroyo El Cura de libre consulta pública e instituciones y organizaciones dedicadas al
cuidado ambiental.

131
Scientia
Interfluvius 10 (1): 132-143, 2019 - Paraná ISSN 1853-4422 (printed) ISSN 1853-4430 (on line)

MONITORING OF AEDES AEGYPTI LINNEAUS (DIPTERA: CULICIDAE)


IN THE URBAN RADIUS OF THE CITY OF DIAMANTE– ENTRE RÍOS

MONITOREO DE AEDES AEGYPTI LINNEAUS (DIPTERA: CULICIDAE)


EN EL RADIO URBANO DE LA CIUDAD DE DIAMANTE – ENTRE RÍOS
María Paula Campos-Soldini1, Melania Edith Safenraiter1, Leandro Sebastián Wagner1 & Estrella Natalín Fernández1

Laboratorio de Entomología FCYT-UADER/CICYTTP-CONICET. Matteri y España, Diamante, Entre Ríos.


1

mariapaulacampos@gmail.com, melaniaes@gmail.com

ABSTRACT. Vector transmitted diseases are a priority problem and have become relevant
in places where they were not previously important. In recent years, our country has seen an
increase in the number of Dengue cases. For the efficient control of this disease, it is essential
to monitor the vector by means of sensitive methods that favor early and sure detection with
precise, rapid decision making that gives rise to efficient control strategies. The objective of
this study was to follow the population of A. aegypti in the town of Diamante (Entre Ríos)
and also to study the oviposition behavior of the female. For this, 11 campaigns were carried
out between the months of February and April 2015 in a total of 32 sites per sampling; a
total of 352 samples collected. The IDO and IPO (indices) were applied and analyzed; as
well as analysis of variance (ANOVA) and simple linear regression. The relative humidity,
temperature and rainfall data were obtained from the meteorological station of CICYTTP-
CONICET. We observed that the oviposition of the female A. aegypti and therefore its
spatial distribution is similar in the urban center as in the city’s peripheral surroundings.
Even so, the spatial distribution of the infestation occurs in the city center area. The strict
dependent variable for the oviposition of the female is the rise in temperature. Also, an
effective reduction of the reservoirs was obtained, since this information was transmitted
to official agencies to coordinate and implement control strategies destined at reducing the
population of the insect vector.
KEY WORDS. Dengue, Diamante Department, IPO, IDO, oviposition

RESUMEN. Las enfermedades transmitidas por vectores constituyen un problema


prioritario y han tomado relevancia en lugares en donde antes no eran temas impor-
tantes. En los últimos años, en nuestro país se ha visto un aumento en el número de
casos de Dengue. Para un eficiente control de esta enfermedad es imprescindible la vi-
gilancia del vector mediante métodos sensibles que favorezcan la detección temprana
y confiable para una toma de decisiones acertada, rápida y que dé lugar a estrategias
de control eficientes. El presente trabajo tuvo como objetivo realizar un seguimiento
poblacional de A. aegypti en la localidad de Diamante (Entre Ríos) y como así también
estudiar el comportamiento de oviposición de la hembra. Para esto se realizaron 11
campañas entre los meses de febrero y abril de 2015 en un total de 32 sitios por mues-
treo, sumando un total de 352 muestras recolectadas. Se analizaron los índices IDO e
IPO y se aplicaron análisis de la varianza (ANOVA) y de regresión lineal simple. Los datos
de humedad relativa ambiente, temperatura y precipitaciones fueron obtenidos de la
estación meteorológica de CICYTTP-CONICET. Observamos que la ovoposición de la
hembra de A. aegypti y por lo tanto su distribución espacial es similar para el casco
urbano como en los barrios periféricos de la ciudad, aun así, la distribución espacial de
la infestación se da en el casco céntrico; la variable dependiente estricta para que se
produzca la ovoposición de la hembra es la elevación de la temperatura. Además, se

132
Scientia
Campos-Soldini et al, Monitoreo de Aedes aegypti Linneaus… Interfluvius 10(1):132-143, 2019 Paraná

logró una efectiva disminución de los reservorios, ya que esta información fue trans-
mitida a los organismos oficiales para coordinar e implementar estrategias de control
destinadas a disminuir la población del insecto vector. minar que la planta de efluentes
genera perjuicios sobre la calidad de agua del arroyo El Cura, limitando sus usos.

PALABRAS CLAVES. Dengue, Departamento Diamante, IPO, IDO, oviposición

Recibido: 24 de Julio de 2018


Aceptado: 21 de Noviembre de 2019

INTRODUCCIÓN INTRODUCTION
Illnesses transmitted by vectors constitute a priority
Las enfermedades transmitidas por vectores problem, not only in tropical countries but also, more
constituyen uno de los problemas prioritarios no recently, in places where they were not once relevant
solo de los países tropicales, sino que en los últimos due to climatic changes.
tiempos y teniendo en cuenta los cambios climáti- Dengue (DEN) is a viral illness transmitted by
cos estas enfermedades han tomado relevancia en mosquitoes caused by a virus of the Flavivirus genre;
lugares en donde antes no eran relevantes. and this has been clinically known for the last 200
El Dengue (DEN) es una enfermedad viral trans- years, but its etiology was discovered recently in 1944.
mitida por mosquitos causada por un virus del ge- Various cases of DEN were reported in the Republic
nero Flavivirus; se conoce clínicamente desde hace of Argentina in the beginning of the Twentieth Century
más de 200 años, pero su etiología se descubrió (1905 - 1911). In 1916 it was registered in provinces to
recién en 1944. Varios casos de DEN fueron repor- the North of our country: Chaco, Corrientes, Formosa
tados para la República Argentina a principios del and Misiones; this same year a Dengue epidemy
Siglo XX (1905 - 1911). En 1916 se registró en las affected the province of Entre Ríos along the coasts
provincias del norte de nuestro país: Chaco, Co- of the Uruguay and Paraná Rivers, where 15,000
rrientes, Formosa y Misiones; ese mismo año ocu- cases of classic DEN were reported. Ten years later a
rrió una epidemia que afectó a la provincia de Entre probable epidemy was registered in the North of our
Ríos a lo largo de las costas de los ríos Uruguay y country with a presumptive case in Rosario. Since then,
Paraná, en donde se registraron 15.000 casos de autochthonous cases were not notified until the year
DEN clásico. Diez años después se registró una pro- 1997 when it reappeared in Salta (Uribe, 1983; Avilés
bable epidemia en el Norte de nuestro país, con el et al., 2000). The presence of A. aegypti in the major
reporte de un caso presuntivo en Rosario. Desde part of the country and the reappearance of Dengue
entonces no se notificaron casos autóctonos has- fever in neighbouring countries increases the risk of
ta el año 1997, que se detectó un nuevo brote en infection by dengue in Argentina (Áviles et al., 2000).
Salta (Uribe, 1983; Avilés et al., 2000). La presencia The vector is dispersed in the most populated zones of
de A. aegypti en la mayor parte del país y la rea- Argentina with a distribution that touches on fourteen
parición de la fiebre del dengue en los países ve- of the 23 Argentine jurisdictions including the city
cinos aumenta el riesgo de infección por dengue of Buenos Aires (Seijo, 2001). Actually, the vector
en Argentina (Áviles et al., 2000). El vector se ha Aedes aegypti is found in the provinces of Buenos
dispersado en las zonas más pobladas de la Argen- Aires, Capital Federal, Catamarca, Chaco, Córdoba,
tina, con una distribución que abarca catorce de las Corrientes, Entre Ríos, Formosa, Jujuy, La Pampa, La
23 jurisdicciones argentinas, incluida la ciudad de Rioja, Misiones, Salta, Santa Fe, Santiago del Estero
Buenos Aires (Seijo, 2001). Actualmente, el vector and Tucumán (Domínguez & Lagos, 2001). Its biology
Aedes aegypti está presente en las provincias de in the continent is closely associated with the residence
Buenos Aires, Capital Federal, Catamarca, Chaco, and its abundance must be sufficient for the illness to
Córdoba, Corrientes, Entre Ríos, Formosa, Jujuy, La be transmitted. This transmission is produced through
Pampa, La Rioja, Misiones, Salta, Santa Fe, Santiago the stings of the adult females who must suck blood to

133
Scientia
Campos-Soldini et al, Monitoreo de Aedes aegypti Linneaus… Interfluvius 10(1):132-143, 2019 Paraná

del Estero y Tucumán (Domínguez & Lagos, 2001). complete the development of the eggs: as such, if eggs
Su biología en el continente se asocia en forma es- are deposited it is because there was mating and, later,
trecha con la vivienda, y su abundancia debe ser nourishment. (Chistophers, 1960).
suficiente para que la enfermedad sea transmitida. According to Carbajo et al. (2004) the city of
Esta transmisión se produce a través de picaduras Diamante is located within the country’s Dengue
de hembras adultas, que deben succionar la sangre transmission area and also within that of the global
para completar el desarrollo de los huevos; por lo distribution of its mosquito vector, A. aegypti (Sabattini
tanto, si depositan huevos es porque previamente et al, 1998). The transmission of dengue in a city would
se aparearon y se alimentaron (Chistophers, 1960). depend on the following risk factors: a) the arrival of
Según Carbajo et al. (2004) la ciudad de Dia- viremic persons; b) the existence of a population that is
mante se encuentra dentro del área de transmisión vulnerable to contracting dengue owing to the presence
del dengue en el país y también de la distribución of A. aegypti; c) the abundance of vectors; d) adequate
mundial de su mosquito vector A. aegypti (Sabat- or favourable temperatures for the development of the
tini et al, 1998). La transmisión del dengue en una virus in the mosquito (Prothero, 1989). In recent years
ciudad estaría supeditada a los siguientes factores in our country a rise in the number of cases of Dengue
de riesgo: a) la llegada de personas virémicas; b) has been observed and this would be influenced by
la existencia de una población vulnerable de con- the spatial and temporal distribution of these factors.
traer dengue debido a la presencia de A. aegypti; Abundance thresholds for the transmission of the
c) la abundancia de vectores; d) temperaturas ade- illness are very variable but small densities of the
cuadas para el desarrollo del virus en el mosquito vector are sufficient for this to take place (Carbajo et
(Prothero, 1989). En los últimos años en nuestro al., 2004) and as mentioned by Seijo (2009) it has not
país se ha observado un aumento en el número de been possible to control the progress of Dengue over
casos de Dengue, esto estaría influenciado por la these years.
distribución espacial y temporal de estos factores. It is fundamental to control mosquito vectors to
Los umbrales de abundancia para que ocurra la prevent the disease; this being the only efficient way to
transmisión de la enfermedad son muy variables, fight it. For this, surveillance methods that are sensitive
pero bastan pequeñas densidades del vector para and detect the presence of these insects, even when
que sucedan (Carbajo et al., 2004) y como mencio- they are in low density populations, are required. Early
na Seijo (2009) la progresión del Dengue no ha sido and reliable detection of the insects permit correct
posible de controlar a lo largo de estos años decision making and pave the way for efficient control
Para la prevención de la enfermedad es funda- strategies such as, for example, knowing ‘when’ and
mental el control de los mosquitos vectores, sien- ‘where’ it is necessary to apply selective intervention
do esta la única herramienta eficiente. Para esto measures.
se requieren métodos de vigilancia para detectar The aim of this study was the carrying out of a
sensiblemente la presencia de estos insectos, aun population surveillance of A. aegypti in the locality of
cuando se presenten a bajas densidades poblacio- Diamante, in the province of Entre Ríos as well as
nales. La detección temprana y confiable de los in- studying the behaviour of oviposition to know if the
sectos permite una toma de decisiones acertadas population distribution of this mosquito is different
y da lugar a estrategias de control eficientes; como in the urban area of the city to that of the peripheral
por ejemplo saber ‘cuándo’ y ‘dónde’ es necesario neighbourhoods.
aplicar medidas de intervención selectivas. MATERIALES Y MÉTODOS
El presente trabajo tuvo como objetivo general Aiming at evaluating the presence/absence,
realizar un seguimiento poblacional de A. aegyp- distribution and abundance of the females of A.
ti en la localidad de Diamante, provincia de Entre aegypti, these features were followed up through its
Ríos como así también estudiar el comportamiento laying of eggs. For this, simple, low cost ovitraps
de oviposición, con la finalidad de conocer la distri- were used (Burroni et al, 2013). This contraption is
bución poblacional de este mosquito es diferente a glass jar, painted black, 13 cm in height x 6 cm in
en el casco urbano de la ciudad que en los barrios diameter with a capacity of 250 ml. Inside each of the
periféricos. recipients a wooden tongue (13 cm in length, 2 cm
MATERIALES Y MÉTODOS wide and 0,1 cm thick) was placed vertically against
Con la finalidad de evaluar la presencia/ the wall of the jar and held by a clip. Here, 200 ml
of water was introduced at the time of their being

134
Scientia
Campos-Soldini et al, Monitoreo de Aedes aegypti Linneaus… Interfluvius 10(1):132-143, 2019 Paraná

ausencia, distribución y abundancia de las hembras placed at the location of the experiment’s location.
de A. aegypti, se realizó el seguimiento de las These ovitraps are an essential tool to determine the
mismas a través de las puestas de sus huevos. Para distribution of the mosquito to measure the seasonal
esto, se emplearon ovitrampas simples de bajo fluctuations of its populations and to evaluate the
costo (Burroni et al, 2013). Consisten en un frasco efficacy of the application of insecticides. Moreover,
de vidrio de 13 cm de alto x 6 cm de diámetro y they allow the realisation of population monitoring
con una capacidad de 250 ml, pintados de color (determining presence and abundance of mosquitoes
negro. En el interior de cada recipiente se colocó and population size) while fulfilling control functions
un bajalenguas de madera (13 cm de largo, 2 cm de as they collaborate in reducing the natural population
ancho y 0,1 cm de espesor) dispuesto verticalmente of mosquitoes. The advantages of this method is
junto a la pared del frasco y sujeto con un clip, se found in its sensitivity (they detect the vector in low
le introdujeron 200 ml de agua al momento de ser density), and its urban practicality along with its low
colocadas. Estas ovitrampas son una herramienta cost (Service, 1993; Badano & Regidor, 2002; Carbajo,
esencial para determinar la distribución del 2004; Stein et al., 2005; Domínguez Galera, 2010;
mosquito, para medir las fluctuaciones estacionales Masuh et al, 2003).
de sus poblaciones y para evaluar la eficacia de Study site
la aplicación de insecticidas, además permiten The Delta of the Paraná River is one of the
la realización de monitoreos poblacionales biggest in South America, and a very particular
(determinando presencia y abundancia de and productive ecosystem that, despite being in a
mosquitos y tamaño poblacional) y cumpliendo temperate latitudinal climate, contains fauna and flora
también con funciones de control ya que colaboran with marked subtropical elements (Bonomo et al.,
en la reducción de las poblaciones naturales de 2016). The city of Diamante (which comes beneath
mosquitos. Las ventajas de este método además the heading of the Department of Diamante – Entre
radican en su sensibilidad (detectan el vector en Ríos), is situated to the West of the province of Entre
baja densidad), en su practicidad urbana y en su Ríos, on the left bank of the Paraná River, with an
bajo costo. (Service, 1993; Badano & Regidor, 2002; average height of 80 metres from the level of the river.
Carbajo, 2004; Stein et al., 2005; Domínguez Galera, Located at 32º 04 latitude and 60º 39 longitude, it
2010; Masuh et al, 2003). is only 50 km away from the provincial capital. The
Sitio de estudio climate of this region is temperate of the Pampas and
El Delta del Paraná es uno de los deltas más the temperatures have an average of 18º C. Rainfall
grandes de América del Sur, es un ecosistema muy is abundant all year and frost is a very frequent
productivo y particular ya que a pesar de estar en occurrence. The hillocks lend a particular characteristic
una latitud de clima templado, contiene una fauna to the landscape. It is known for its port, a horse
y una flora con marcados elementos subtropicales riding and folklore festival, the international motorbike
(Bonomo et al., 2016). La ciudad de Diamante encounter and the National Pre- Delta Park.
(Cabecera del Departamento Diamante – Entre Ríos), In the urban area of the city of Diamante 32
Está situada en el oeste de la Provincia de Entre Ríos, ovitraps were placed at transects every three or four
sobre la margen izquierda del Río Paraná, con una blocks at different points of the city. They were placed
altura promedio de 80 metros, sobre el nivel del río. on the sidewalks outside houses and their locations
Ubicada a 32º 04 de latitud y 60º 39 de longitud, were geo-referenced using a GPS (Garmin Etrex 10)
y a solo 50 km. de la capital provincial. El clima (See Annexe I). Egg collection and the changing of
de esta región es el templado pampeano y las water in the ovitraps was done weekly over the months
temperaturas poseen un promedio 18º C. Las of February, March and April in 2015 which is the
precipitaciones son abundantes todo el año y las period of high biological activity of the mosquito.
heladas muy frecuentes. Las lomadas dan al paisaje Then, the samples were moved to the laboratory
una característica particular. La distinguen de in labelled bags and counted, using a Stereoscopic
otras ciudades el Puerto de Ultramar, un Festival Binocular Microscope (Bausch & Lomb).
Nacional de Jineteada y Folclore, El Motoencuentro Data Analysis
Internacional, Y el Parque Nacional Pre Delta. The preference for oviposition and the abundance
En el casco urbano de la ciudad de Diamante of female mosquitoes of A. aegypti in each site was
se realizó la colocación de 32 ovitrampas sobre determined through the quantification of the eggs
deposited in the ovitraps. The ovitraps containing at

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Scientia
Campos-Soldini et al, Monitoreo de Aedes aegypti Linneaus… Interfluvius 10(1):132-143, 2019 Paraná

transectas cada tres o cuatro cuadras en diferentes least one egg, larva or pupa were considered positive
puntos de la ciudad. Las mismas fueron ubicadas ovitraps: those exposed were the total of the ovitraps
en las aceras, fuera de las viviendas. Estos sitios placed. The number of eggs per site was used to
en los cuales se colocaron las trampas fueron determine the following indices:
georeferenciados utilizando un GPS (Garmin Index of the density of eggs (IDO): consists in dividing
Etrex 10) (Ver Anexo I). La recolección de los the number of eggs found by the number of positive
huevos y el recambio de agua en las ovitrampas ovitraps and indicates the periods of highest and
se realizó semanalmente durante los meses de lowest reproduction of the female mosquito. The
febrero, marzo y abril del 2015 periodo de mayor range of this index, using the classification of Calvo,
actividad biológica del mosquito. Las muestras se Schweigmann and Burroni (2007), is as follows:
trasladaron al laboratorio en bolsas debidamente IDO
rotuladas para su posterior recuento, utilizando Low 0-25
Lupa Binocular Estereoscópica (Bausch & Lomb).
Análisis de datos Medium >25-45
Se determinó la preferencia de oviposición y la High >45
abundancia del mosquito hembra de A. aegypti en
cada sitio mediante la cuantificación de los huevos Positivity index (IPO): is obtained by dividing the
depositados en las ovitrampas. Se consideran number of positive ovitraps by the number of exposed
ovitrampas positivas aquellas con presencia de ovitraps x 100. It represents the spatial distribution
al menos un huevo, larva o pupa; las ovitrampas of the infestation within a spatial location. The
expuestas son el total de ovitrampas colocadas. range of this index using the classification of Calvo,
El número de huevos por sitio se utilizó para Schweigmann and Burroni (2007) is as follows:
determinar los siguientes índices: IPO
Índice de densidad de huevos (IDO): consiste Low 0-40%
en dividir el número de huevos encontrados
entre el número de ovitrampas positivas, indica Medium >40%-70%
los períodos de mayor o menor reproducción de High >70%
las hembras de mosquito. El rango de este índice
utilizando la clasificación de Calvo, Schweigmann y Statistical Analysis
Burroni (2007), es el siguiente: In order to evaluate oviposition variation through
IDO months of sampling an analysis was made of the
variance (ANOVA) taking the months as a variable
Bajo 0-25 independent and the number of eggs as the variable
Medio >25-45 dependent, IPO and IDO. To determine the presence/
Alto >45 absence, distribution and abundance of female
mosquitoes in the different sampling sites a Variance
Índice de positividad (IPO): se obtiene de dividir Analysis (ANOVA) was made taking the 32 sites
el número de ovitrampas positivas entre el número sampled as the variable independent and the number
de ovitrampas expuestas x 100. Representa la of eggs as the variable dependent, IPO and IDO.
distribución espacial de la infestación dentro de Furthermore, with the finality of evaluating the effect
una localización espacial. El rango de este índice of the climatic variables on the population dynamic
utilizando la clasificación de Calvo, Schweigmann of the mosquito, an analysis of the Simple Lineal
y Burroni (2007) es el siguiente: Regression was made taking the temperature, relative
humidity and rainfall as the independent variable,
IPO
and the variable reply to those obtained through the
Bajo 0-40% number of eggs collected.
Medio >40%-70% The relative humidity, temperature and rainfall data
Alto >70% were obtained at the automatic meteorological station
(Long: 60° 38’ 38” W; Lat: 32° 03’ 43” S Alt: 43 m)
Análisis estadístico located at CONICET, (Centro de Investigaciones
Con la finalidad de evaluar la variación de la Científicas y Transferencia de Tecnología a la

136
Scientia
Campos-Soldini et al, Monitoreo de Aedes aegypti Linneaus… Interfluvius 10(1):132-143, 2019 Paraná

oviposición a través de los meses de muestreo se Producción – Consejo Nacional de Investigaciones


realizó un análisis de la varianza (ANOVA) tomando Científicas y Técnicas), Diamante (http://www.cicyttp.
como variable independiente los meses y como org.ar/climatologiafca/met2/mb5lr.htm).
variable dependiente el número de huevos, IPO

Tabla 1. Promedio de huevos y larvas, índice de positividad (IPO) e índice de densidad de ovitrampas (IDO)

Table 1. Average eggs and larva, positivity index (IPO) and density index of ovitraps (IDO) determined for A. aegypti
e IDO. +Para determinar la presencia/ausencia,

determinados para A. aegypti durante los meses de febrero, marzo y abril en la ciudad de Diamante, Argentina.
IPO

33,34

35,16

31,25
distribución y abundancia de mosquitos hembras

(%)
en los diferentes sitios muestreados se realizó un
Análisis de la Varianza (ANOVA) tomando como
variable independiente los 32 sitios muestreados y

IDO

21,52

11,98

11,38
como variable dependiente el número de huevos,
IPO e IDO. Además, con la finalidad de evaluar el
efecto de las variables climáticas sobre la dinámica
poblacional del mosquito, se realizaron análisis de

Promedio
total de
huevos
Regresión Lineal Simple tomando como variable

690

685

472

in the months of February, March and April in the city of Diamante in Argentina.
independiente la temperatura, humedad relativa
y las precipitaciones, y como variable respuesta
a las obtenidas mediante el número de huevos
recolectados. Relativa media
Humedad

Los datos de humedad relativa ambiente,

72,6

69,6

64,6
temperatura y precipitaciones fueron obtenidos
(%)

de la estación meteorológica automática (Long:


60° 38’ 38” W; Lat: 32° 03’ 43” S Alt: 43 m) ubicada
en el Centro de Investigaciones Científicas y
Transferencia de Tecnología a la Producción –
Temperatura media

Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y


Técnicas de Diamante (http://www.cicyttp.org.ar/
climatologiafca/met2/mb5lr.htm).
23,7

22,9

22,2
(ºC)

RESULTADOS
Se recolectaron 324 ovitrampas de un total
de 352 en las 11 campañas realizadas durante
los meses de febrero, marzo y abril (Tabla 1, 2 y
Apéndice). Solo se hallaron huevos de A. aegypti
muestreo
Meses de

Febrero

Marzo

en 117 ovitrampas sumando un total de 1648.


Abril

Los análisis de la varianza (ANOVA) demostraron


que durante los 3 meses de muestreo el promedio
de huevos, IDO e IPO no varió significativamente
(F2,8= 2,04, p = 0,193; F2,8= 1,69, p = 0,244; RESULTS
F2,8= 2,28, p = 0,164; F2,8= 0,09, p = 0,917, Three hundred and twenty four ovitraps were
respectivamente) (Figuras 1 A-C); por otra parte collected from a total of 352 in the 11 campaigns
los valores de IPO e IDO durante los tres meses de carried out over the months of February, March and
muestreo fueron relativamente bajos (22 y 36%, April (Table 1, 2 and Appendix). Only A. aegypti eggs
respectivamente) (Tabla 1). were found, in 117 ovitraps amounting to a total of
En cuanto a los datos obtenidos sobre el 1648.
numero de huevos de A. aegypti se encontró mayor The variance analyses (ANOVA) demonstrated
número los sitios 10,14, 21, 26 y 30 a lo largo de that during 3 months of sampling the average of eggs,
toda la campaña y el menor número de huevos IDO and IPO do not vary significantly (F2,8= 2,04, p
en los sitios 1, 2, 7, 15, 28, 23, 29, 31 y 32 (Tabla 2). = 0,193; F2,8= 1,69, p = 0,244; F2,8= 2,28, p = 0,164;
Mientras que en el IDO se mantuvo en niveles bajos F2,8= 0,09, p = 0,917, respectively) (Figures 1 A-C);
(menores al 25); el IPO reflejó que en los sitios 14, on the other hand the values of IPO and IDO over the
19, 20, 21, 22 y 26 altos valores, lo que nos indica three months of sampling were relatively low (22 and

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Scientia
Campos-Soldini et al, Monitoreo de Aedes aegypti Linneaus… Interfluvius 10(1):132-143, 2019 Paraná

que la distribución espacial de la infestación se da 36%, respectively) (Table 1).


en zona céntrica (Tabla 2). As for the data obtained on the number of eggs of
Los análisis de regresión lineal simple A. aegypti, the greater number was found in the sites
demostraron que el promedio total de huevos 10,14, 21, 26 and 30 throughout the campaign as was
recolectados por campaña y el índice de the least number of eggs in the sites 1, 2, 7, 15, 28, 23,
positividad (IPO %) aumentan significativamente 29, 31 and 32 (Table 2). While the IDO maintained
ante incrementos de la temperatura (F1,9= 7,43, R2 itself at low levels (lesser than 25); the IPO reflected
= 45,2, p = 0,023;F1,9 = 10,26, R2 = 53,3, p = 0,011, high values in the sites 14, 19, 20, 21, 22 and 26, which
respectivamente) (Fig. 1 A-C). indicate that the spatial distribution of the infestation
is in a centric zone (Table 2).
Tabla 2. Abundancia de huevos y larvas, índice de positividad
The analyses of simple lineal regression
(IPO) e índice de densidad de ovitrampas (IDO) determinados
demonstrate that the total average of the eggs collected
para A. aegyptien la ciudad de Diamante, Argentina. (Sitios 1 al
per campaign and the positivity index (IPO %) increase
32).
significantly with the rise in temperature (F1,9= 7,43,
R2 = 45,2, p = 0,023;F1,9 = 10,26, R2 = 53,3, p =
Table 2. Abundance of eggs and larva, positivity index (IPO) and
0,011, respectively) (Fig. 1 A-C).
density index (IDO) of ovitraps determined for A. aegypti in the city
of Diamante in Argentina. (Site 1 to 32)
DISCUSSION
Puntos de Abundancia de IDO IPO (%) The number of ovitraps collected was optimal
Muestreo Huevos and it is important to point out that the residents of
Sitio 1 0 0 0 Diamante collaborated in taking care of them, having
Sitio 2 7 3,5 18,18 been informed of their presence on the sidewalk in
Sitio 3 7 7 9,09 front of their houses and their importance. Thus a
Sitio 4 24 4,8 45,45 significant number of ovitraps were collected.
Sitio 5 47 9,4 45,45
Sitio 6 34 17 18,18
The statistical analysis demonstrated that during
Sitio 7 18 3,2 45,45 the three months of the sampling the average number
Sitio 8 19 8,5 18,18 of eggs, IDO and IPO did not vary significantly,
Sitio 9 48 9,6 45,45
Sitio 10 169 22,29 63,64 probably due to the fact that climatic conditions were
Sitio 11 19 3,5 36,36 also optimal for egg laying by A. aegypti.
Sitio 12 40 12,67 27,27 The low values found in IDO and IPO over the
Sitio 13 85 21 36,36
Sitio 14 122 10,4 90,91 three months of sampling showed that the population
Sitio 15 8 4 18,18 of A. aegypti stayed at low levels over the periods
Sitio 16 93 17,4 45,45 analysed. The IPO at 21%, would be an indicator
Sitio 17 90 22,5 36,36
Sitio 18 54 9 54,55 that the adults were somewhat scattered and not in
Sitio 19 68 5,22 81,81 abundance, but even so, they were detected by the
Sitio 20 60 5,12 72,73
Sitio 21 271 14,5 145,45 ovitraps.
Sitio 22 87 10,38 72,73 As for the high values of the IPO population,
Sitio 23 0 0 0 it is probably owing to the abundant vegetation in
Sitio 24 58 9 54,55
Sitio 25 46 6 45,45 front of houses because, as mentioned by Fisher
Sitio 26 161 12 90,91 (2016), vegetation has a fundamental influence on the
Sitio 27 18 3,2 45,45
Sitio 28 2 1 18,18 permanence of water as soil with more roots tends to
Sitio 29 1 1 9,09 have the higher rate of drainage. Furthermore, those
Sitio 30 179 15,91 100 same plants contribute to the loss of water through
Sitio 31 4 1 27,27
Sitio 32 9 9 9,09 evapo-transpiration; and indicate that the spatial
distribution of the infestation is found in the centric
DISCUSIÓN zone (Table 2). Moreover, it is the centric zone that
El número de ovitrampas recolectadas fue has the totality of the streets with a curb and this, as
óptimo, siendo importante destacar que los mentioned by Stein et al. (2005) can result in a habitat
pobladores de Diamante colaboraron en el cuidado that is very rich in species, Aedes aegypti being the only
de las mismas, ya que eran alertados de la presencia species found in the manmade recipients.
de estas las aceras en sus hogares y la importancia The IDO made clear that the oviposition in the

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Campos-Soldini et al, Monitoreo de Aedes aegypti Linneaus… Interfluvius 10(1):132-143, 2019 Paraná

A B

C Figura 1A: Abundania de huevos, durante los meses de


muestreo.
Figure 1A:Abundance of eggs in the sampling months
Figura 1B: IDO durante los meses de muestreo
Figure 1B: IDO in the sampling months
Figura 1C: IPO durante los meses de muestreo
Figure 1C: IPO in the sampling months

city of Diamante was carried out as it had been in the


different places where sampling had already been done,
while the IPO indicated that the spatial distribution
of the infestation was in a determined locality in the
centric zone. This would reveal that even though
differences regarding the spatial selection of the female
for oviposition were not encountered, infestation
de las mismas. Lo que permitió obtener un número did take place in the centric zone of the city. As in
significativo de ovitrampas recolectadas. Domínguez Galera (2010), the estimation of the risk
Los análisis estadísticos demostraron que was related with the approximate number of females in
durante los tres meses de muestreo el promedio oviposition according to the collected eggs, which is to
de huevos, IDO e IPO no varió significativamente, say the highest number of eggs stands for the highest
probablemente debido a que las condiciones number of females in the area.
climáticas fueron igualmente óptimas para la The statistical analyses show that the average total
puesta de huevos por parte de A. aegypti. of eggs collected in the campaign and the positivity
Los valores bajos encontrados para el IDO e IPO index increase significantly before the increase in
durante los tres meses de muestreo manifiestan temperature making it clear that the days with higher
que la población de A. aegypti se mantuvo en temperatures are advantageous to the laying of eggs
niveles bajos durante los periodos analizados. El and the distribution of females of A. aegypti in the
IPO de 21%, sería un indicador de que los adultos city of Diamante. We have not found, as Domínguez
están algo dispersos y poco abundantes, pero aun Galera (2010) did, a direct relationship between the
así fueron detectados por las ovitrampas. increase in rainfall and the ovipositions.
En cuanto a los altos valores del IPO It is important to mention that the supervision
probablemente se deba a que los frentes de las of the epidemy includes focus on prevention that
viviendas contaban con abundante vegetación, ya allows detect and attend to potential emergence of the
que como menciona Fisher (2016) la vegetación illness and also to proportionally present a systematic
tiene una influencia fundamental sobre la register of the data and opportune detection of the
permanencia del agua, ya que los suelos con vectors according to the risk areas. So it is fundamental
mayor cantidad de raíces suelen tener tasas de that this surveillance be sustained in time to achieve
drenado más altas, y además las mismas plantas an effective optimisation of economic and human

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Scientia
Campos-Soldini et al, Monitoreo de Aedes aegypti Linneaus… Interfluvius 10(1):132-143, 2019 Paraná

contribuyen a la pérdida de agua mediante la resources. Therefore the present study has served as
evapotranspiración; e indica que la distribución a wake-up call in creating awareness among governing
espacial de la infestación se da en zona céntrica entities on the importance of carrying out this type of
(Tabla 2). Además, es la zona céntrica la que posee “epidemological emergency care”, this being especially
la totalidad de las calles con cordón cuneta, esto important when temperatures begin to rise.
como menciona Stein, et al. (2005) puede resultar
un hábitat muy rico en especies, siendo Aedes CONCLUSIONS
aegypti la única especie encontrada en recipientes The research revealed that the oviposition of
fabricados por el hombre. the female of A. aegypti and its spatial distribution is
El IDO dejó en claro que la oviposición en la higher in the centric zone that ends at the peripheral
ciudad de Diamante se realiza de forma similar neighbourhoods of the city of Diamante.
en los diferentes sitios muestreados, mientras It was proved that the temperature is found to be
que el IPO indicó que la distribución espacial closely linked to the oviposition of the female and thus
de la infestación se da en una determinada for significant increases in the populations of Aedes
localización en la zona céntrica. Esto expondría subsequently a higher transmission of the illness; while
que por más que no se hallaron diferencias en the same did not occur with rainfall.
cuanto a la elección espacial de la hembra para la We have obtained new data on the temporal/
oviposición, si encontramos que la infestación se spatial distribution of oviposition activity of the
da en la zona céntrica de la ciudad. Al igual que female of A. aegypti and thereby been able to know the
Domínguez Galera (2010), la estimación del riesgo displacement of the same in the city of Diamante. This
fue relacionada con el número aproximado de has allowed us to communicate the results obtained
hembras ovipositando, de acuerdo con los huevos to official organisms. Furthermore, with this study, it
recolectados, es decir a mayor número de huevos, was demonstrated that entomological supervision with
mayor cantidad de hembras por área. ovitraps (a method used for the first time in the city) is
Los análisis estadísticos demostraron que a useful, quick and economical method for describing
el promedio total de huevos recolectados por the population densities of A. aegypti in locations
campaña y el índice de positividad aumentan distributed in the city.
significativamente ante incrementos de la
temperatura, dejando en claro que los días de ACKNOWLEDGEMENTS
mayor temperatura benefician la puesta de huevos This study was carried out with funds from a PIDIN
y la distribución de las hembras de A. aegypti en la grant (for research) from the (Faculty of Science and
ciudad de Diamante. No hemos encontrado como Technology of the UADER) Facultad de Ciencia y
Domínguez Galera (2010) una relación directa entre Tecnología UADER entitled “Monitoring of Aedes
el aumento en las precipitaciones y las oviposturas. aegypti Linnaeus (Diptera: Culicidae) within the urban
Es importante mencionar que la vigilancia radius of the city of Diamante”, Res. UADER CS N°
epidemiológica posee un enfoque de prevención 377/15. We thank the students preparing the Degree in
que permite detectar y atender potenciales brotes Biology (FCYT - UADER) Virginia Piani and Mailen
de la enfermedad y proporcionar un registro García for their collaboration in sample collecting;
sistemático de los datos y una detección oportuna and the Health Department of the Municipality of
de vectores según áreas de riesgo, por lo que es Diamante for its collaboration throughout this study.
fundamental que esta vigilancia sea sostenida en
el tiempo para lograr una efectiva optimización de
los recursos económicos y humanos. Con lo cual, el
presente trabajo ha servido como disparador para
la concientización de las áreas gubernamentales
sobre la importancia de realizar este tipo de
“guardias epidemiológicas” principalmente cuando
comienza a elevarse la temperatura.

CONCLUSIONES
El trabajo de investigación reveló que la

140
Scientia
Campos-Soldini et al, Monitoreo de Aedes aegypti Linneaus… Interfluvius 10(1):132-143, 2019 Paraná

ovoposición de la hembra de A. aegypti y por lo Revista Colombiana de Entomología 39 (1): 56-60 (2013)
tanto su distribución espacial es mayor para la zona Calvo, N., Schweigmann, N. & Burroni, N. E. 2007. Análisis
céntrica que para los barrios periféricos de la ciudad de la variación espacial y temporal de la abundancia de
de Diamante. Aedes aegypti (Díptera: Culicidae) en una zona piloto de
la Ciudad Autónoma de Buenos Aires. V Jornadas Regio-
Se ha podido comprobar que la temperatura
nales sobre Mosquitos. La Plata.
se encuentra estrechamente relacionada a la Carbajo, A., Gómez, S., Curto, S. & Schwegmanni, N. 2004.
ovoposición de la hembra y por ende incrementos Variación espacio - temporal del riesgo de transmisión de
significativos en las poblaciones de Aedes y por lo Dengue en la ciudad de Buenos Aires. Medicina (Buenos
tanto una mayor transmisión de la enfermedad; no Aires) Nº 64: 231-234 ISSN 0025-7680
sucediendo lo mismo con las precipitaciones. Christopher, S.R. 1960. Aedes aegypti (L.). The Yellow Fe-
Hemos logrado obtener nuevos datos acerca ver Mosquito., Cambridge University Press, London, 739
de la distribución temporo/espacial de la actividad pp
de ovipostura de la hembra de A. aegypti y de este Domínguez Galera, M.A. 2010. Evaluación de ovitrampas
como sistema de vigilancia entomológica en sitios públi-
modo conocer el desplazamiento de la mismas
cos de Chetumal, Quintana Roo. Tesis Doctor en ciencias
en la ciudad de Diamante. Esto nos ha permitido biológicas con especialidad en Entomología Médica. Uni-
comunicar a los organismos oficiales los resultados versidad Autónoma de Nuevo León. Facultad De Ciencias
obtenidos. Además, con este trabajo se demostró Biológicas
que la vigilancia entomológica con ovitrampas Domínguez, C. & Lagos, S. 2001. Presencia de Aedes ae-
(método por primera vez utilizado en la ciudad) es gypti (Diptera: Culicidae) en la provincia de Mendoza, Ar-
un método útil, rápido y económico para describir gentina. Nota Científica Revista Sociedad Entomológica
las densidades poblacionales de A. aegypti en sitios Argentina, 60 (1-4): 79-80.
distribuidos en la ciudad. Fisher, S. 2016. Mosquitos que crían en cuerpos de agua
temporarios. En Investigaciones sobre mosquitos de
Argentina. Berón, C. M, Campos, R. E., Gleise, R. M., Díaz-
AGRADECIMIENTOS Nieto, L. M., Salomón, O. D. & N. Schweigmann, editado
Este trabajo fue realizado con el financiamiento por Berón, C. M, Campos, R. E., Gleise, R. M., Díaz-Nieto,
de proyecto de investigación PIDIN otorgado por L. M., Salomón, O. D. & N. Schweigmann- 1a ed. - Mar del
la Facultad de Ciencia y Tecnología UADER titulado Plata: Universidad Nacional de Mar del Plata.
“Monitoreo de Aedes aegypti Linnaeus (Diptera: Masuh, H., Coto, H., Licastro, S. & Zerba, E. 2003. Control
Culicidae) en el radio urbano de la ciudad de de Aedes aegypti (L.) en Clorinda: un modelo para áreas
Diamante” Res. UADER CS N° 377/15. Agradecemos urbanas. Entomología y Vectores. 10(4).
a las estudiantes de la Licenciatura en Biología Serive, M. W. 1993. Mosquito Ecology Field Sampling
Methods (2nd edition). Barking, Essex, UK: Elsevier Scien-
(FCYT - UADER) Virginia Piani y Mailen García por su
ce Publishers, ISBN 1-85166-798-9.
colaboración en la recolección de las muestras; al Prothero, R.M. 1989. Problems of human mobility and di-
Área de Salud de la Municipalidad de Diamante por seases, pp. 1-16. In Service Michael W (ed.). Demography
su colaboración a lo largo de este trabajo. and vector-borne diseases. CRC Press, Inc. Boca Raton,
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141
Scientia
Campos-Soldini et al, Monitoreo de Aedes aegypti Linneaus… Interfluvius 10(1):132-143, 2019 Paraná

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142
Scientia
Campos-Soldini et al, Monitoreo de Aedes aegypti Linneaus… Interfluvius 10(1):132-143, 2019 Paraná

APÉNDICES APPENDIX

Distribución de las ovitrampas en la Ciudad de Diamante.

Distribution of the ovitraps in the city of Diamante.

143
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ber sido publicados anteriormente ni enviados a can be invited to publish previously edited articles.
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mas podrán ser aceptados para la publicación a
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144
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and analysis…
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ción las primeras palabras del título que permitan
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work with key words in English and Spanish , followed
Villalonga, et al.,: Avanzar en la alfabetización
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científica: Descripción y análisis…
of these items are mentioned below.
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will be included, the latter preceded by the title of the
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luego resumen en ingles, key words, resumen en
present the principal aspects and conclusions of the
español y palabras clave, y a continuación el resto
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tos ítems se detallan seguidamente.
KEY WORDS
RESÚMENES
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cisos y presentarán los aspectos principales y las
conclusiones del trabajo. La extensión máxima será
TEXT
de 200 palabras y no debe incluir referencias biblio-
The principal body of the work will be divided
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As far as possible, and when allowed by the theme,
PALABRAS CLAVE Y KEY WORDS
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Se incluirán cinco palabras clave y key words, en
sequence: Introduction, Materials and Methods,
lo posible, que no estén presentes en el título del
Results, Discussion, Conclusion, Acknowledgements,
trabajo, separadas cada una por punto.
Bibliography and Appendices.
TEXTO
If the collocation of subtitles should be necessary,
El cuerpo principal del trabajo se dividirá en
they should be written by the left margin.
secciones, cada una con título escrito y centrado.
En la medida de lo posible y cuando la temática
lo permita, los trabajos deberán ser estructurados
ILLUSTRATIONS
con la siguiente secuencia: Introducción, Materia-
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les y Métodos, Resultados, Discusión, Conclusiones,
and photos) and Tables: They will be numbered
Agradecimientos, Bibliografía y Anexo.
independently in correlative form with Arabic numbers
for figures and roman numbers for tables. The text will
En caso de ser necesario colocar subtítulos, se
include references of figures and tables, in the form:
los deberá escribir al margen izquierdo.
(Fig 4) or (Table II). The illustrations will be in black
and white, and/or full colour (online version), scanned
ILUSTRACIONES
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dos en forma correlativa e independientemente,
with definition, not inferior to 500 dpi. The images or

145
con números arábigos las figuras y con números ro- graphics in Word, Excel or Corel Draw must be sent
manos las tablas. El texto incluirá referencias de las in original files to enable reproduction of the designs.
figuras y tablas, en la forma: (Fig. 4) o (Tabla II). Las All of the tables and figures must be mentioned at least
ilustraciones serán en blanco y negro, y/o full color once in the text.
(versión on line) y estar escaneadas con buena de-
finición. Todas las ilustraciones deberán estar inser- ACKNOWLEDGEMENTS
tadas en el texto y debe armar un archivo, a parte, Will follow the last section of the text and precede
en formato pdf que incluya todas las figuras. Se so- Bibliography.
licita a los autores que el envío de las imágenes sea
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Draw, deberán ser enviadas en sus archivos origina- TECHNOLOGICAL SCIENCES)
les para poder trabajar sobre los diseños. Todas las The citations in the text will show, within brackets,
tablas y figuras deben estar mencionadas al menos the surname of the author/s and the year corresponding
una vez en el texto. to the publication. If the surname of the author forms
part of a sentence , only the year of publication will
AGRADECIMIENTOS appear between brackets. The manner in which the
Se incluirán a continuación de la última sección citation is made will depend on the number of authors,
del texto y antes de Bibliografía. in accordance with the following examples:
1. one author: Perez (2008), or (Perez, 2008);
CITAS Y REFERENCIAS DENTRO DEL TEXTO 2. two authors: (Perez & Gomez 2006);
(PARA CIENCIAS EXACTAS, NATURALES Y 3. more than two authors: (Perez et al., 2008);
TECNOLÓGICAS) 4. various simultaneous citations, in
Las citas en el texto señalarán entre paréntesis chronological order: (Perez,2005; Lopez et al., 2007).
el apellido del autor o autores, y el año correspon- 5. various simultaneous citations the same
diente al trabajo. Si el apellido del autor forma par- author, in chronological order: (Pérez, 2005, 2006;
te de una frase, sólo se colocará entre paréntesis el López et al., 2007).
año de publicación. La forma de citar en el texto
dependerá del número de autores, de acuerdo con CITATIONS AND REFERENCES WITHIN
los siguientes ejemplos: THE TEXT (FOR SOCIAL SCIENCES AND
HUMANITIES)
1. un autor: Pérez (2008) o (Pérez, 2008); The textual citations in the body of the article will
2. dos autores: Pérez & Gómez (2006) o (Pé- be included within inverted commas, in italics. They
rez & Gómez, 2006); must be followed by the corresponding bibliographic
3. más de dos autores: Pérez et al. (2008) o reference, in which will be included within brackets the
(Pérez et al., 2008); surname/s of the author/s, and the year corresponding
4. varias citas simultáneas, por orden crono- to the publication.
lógico: (Pérez, 2005; López et al., 2007);
5. varias citas simultáneas del mismo autor The manner in which the citation in the text is made
por orden cronológico: (Pérez, 2005, 2006; López et will depend on the number of authors, following the
al., 2007). example given for Exact, Natural and Technological
Sciences, immediately preceding this section.
CITAS Y REFERENCIAS DENTRO DEL TEXTO
(PARA CIENCIAS SOCIALES Y HUMANIDADES) Notes and asides at the bottom of the page and
Las citas textuales en el cuerpo del artículo se notes on the text are NOT permitted.
incluirán entre comillas de apertura y cierre y es-
critas en cursiva. Deberán ser seguidas por su co- CITED BIBLIOGRAPHY
rrespondiente referencia bibliográfica, en la que All the papers cited in the text must figure in the
se incluirá entre paréntesis el apellido del autor o cited bibliography and vice versa. These references
autores, y el año correspondiente al trabajo. will be presented at the end of the text, in alphabetical
order with the surname of the first author. References

146
El modo de citación en el texto dependerá del to one author will be mentioned chronologically, if the
número de autores, seguir el ejemplo dado en el author has more than one publication in the same year,
apartado anterior distinguishing the same with a letter.

NO se permiten llamadas a pie de página ni no- The way of consigning the references will be as
tas al texto. follows:

BIBLIOGRAFÍA CITADA a) Books: The surnames and initials of the names


Todas las obras citadas en el texto deben figurar of the authors will be indicated as will be the year of
en la bibliografía citada y viceversa. Estas referen- publication, title of the book (in cursive), the edition,
cias se presentarán al final del texto, ordenadas al- place of publication and the number of pages.
fabéticamente por el apellido del primer autor. Las
referencias de un mismo autor se ordenarán crono- Garcia, L. 2004. Education and something more. Paidos Educador.
Buenos Aires. 198 pp.
lógicamente, en caso de poseer un autor, más de
una publicación en un mismo año, diferenciar las Garcia, L. & Lopez P. 2010. Education. A paradigm for the future.
mismas con una letra. Paidos Educador. Buenos Aires, 340 pp.

La forma de consignar las referencias será la si- Garcia, L.F.; Lopez P. & Acosta, S. 2011. Introduction to food
toxicology. Paidos Educador. Buenos Aires, 320 pp.
guiente:
In the case of books that unite works of different
a) Libros: Se indicará el apellido e iniciales de authors, the year of publication, complete title of the
los nombres de los autores, año de la publicación, work, name of the review without abbreviation (in
título del libro (en cursiva), edición, editorial, lugar cursive), volume and pages. For example:
de publicación y número de páginas.
Thom. A.S. 1975. Momentum, mass and heat exchange of plant
García, L. 2004. Educación y algo más. Paidós Educador. Bue- communities. En: Monteith, J.L. (ed). Vegetation and the atmosphere.
nos Aires,198 pp. Academic Press, Vol 1:57-109.pp.

García, L. & Lopez, P. 2010. Educacion. Un paradigma para el b) Reviews: The surnames and initials of the
futuro. Paidós educador. Buenos Aires, 340 pp.
names of the authors will be indicated, also the year of
García, L. F.; Lopez, P. & Acosta, S. 2011. Introducción a la toxi- publication, complete title of the work, name of the
cología de los alimentos. Paidós educador. Buenos Aires, 320 pp. review without abbreviation (in cursive), volume and
pgs. For example:
Para el caso de libros que reúnen trabajos de
distintos autores, se indicará el título del artículo o Huang, H.S. 1980. Control Sclerotium wilt of Sunflower by
capítulo antes de citar el título del libro. Por ejem- hyperparasites. Canadian Journal of Plant Pathology, 2: 26-32.
plo:
c) Articles, chronicles and information
Thom, A.S. 1975. Momentum, mass and heat exchange of appearing in a newspaper:
plant communities. En: Monteith, J. L. (ed.), Vegetation and the
atmosphere. Academic Press, Vol 1:57-109. Reste, A 1998. Poverty in Argentina. La voz del interior.
Cordoba, Argentina. Year 11, Number 6.pp 8.
b) Revistas: se indicará el apellido e iniciales de
los nombres de los autores, año de publicación, tí- ABBREVIATIONS
tulo completo del trabajo, nombre de la revista sin The example of abbreviations must be restricted
abreviar (en cursiva), volumen y si hubiera número to those of common knowledge and usage, so that
o parte, estas entre paréntesis y por último las pági- the articles will be accessible to professionals of other
nas totales del articulo. Por ejemplo: disciplines.

Huang, H.S. 1980. Control Sclerotium wilt of Sunflower by Acronyms can be used to avoid repeating extensive
hyperparasites. Canadian Journal of Plant Pathology, 2: 26-32. names of institutions, projects, etc., but the first
mention made to any of these will be with the complete

147
c) Artículo, crónica e información aparecida name followed by brackets bearing the corresponding
en un diario. Por ejemplo: initials.

Reste, A. 1998. La pobreza en la Argentina. La Voz del Inte- SCIENTIFIC NOTES


rior. Córdoba, Argentina, Año ll, Nº 6, 8 pp. Scientific notes are short contributions that do not
exceed five pages. Discoveries and brief contributions
ABREVIATURAS based on results of recent investigations, deemed
El empleo de abreviaturas debe restringirse a sufficiently novel and deserving of publication by the
las de uso y conocimiento general, de modo que reviewers and editors, will be published under this
los artículos sean accesibles a profesionales de denomination.
otras disciplinas. They must contain:
1) Title;
Las siglas pueden usarse para no repetir nom- 2) Name/s the author/s;
bres extensos de instituciones, proyectos, etc., pero 3) author/s postal and electronic address;
la primera mención será con el nombre completo 4) Title in English,
y a continuación, entre paréntesis, la sigla corres- 5) Summary;
pondiente. 6) Keywords;
7) Abstract;
NOTAS CIENTÍFICAS 8) Key words,
Las notas científicas serán contribuciones cor- 9) Text with all information (without subtitles)
tas que no superen las cinco páginas. Se aceptarán 10) Acknowledgements;
hallazgos y aportaciones breves basados en resul- 11) Bibliography.
tados de investigación reciente que a juicio de ár-
bitros y editores, son suficientemente novedosos y
ameriten ser publicados bajo esta denominación.
Deberán contener:
1) Título;
2) Nombre del/los autor/es;
3) dirección postal y electrónica del/los autor/es;
4) título en ingles,
5) Resumen;
6) Palabras clave;
7) Abstract;
8 ) Key words,
9) Texto único con toda la información (sin títulos,
respetando en la secuencia de de la información las
partes de un trabajo científico),
10) Agradecimientos;
11) Bibliografía citada.

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