APUNTES LAB 3 CORTE

INDICADOR DE PH

Indicador Ph acido Ph alcalino

Rojo de metilo Rojo Amarillo
Rojo de fenol Amarillo Rojo
Azul de bromotimol Amarillo Azul
Rojo neutro Rojo Amarillo
Purpura de bromocresol Amarillo Rojo

EFECTOS DEL MEDIO AMBIENTE SOBRE EL CRECIMIENTO MICROBIANO

TEMPERATURA: Factor ambiental que influye en la expresión de ciertas características
de los m.o. Existe un rango de temperatura optima en donde su actividad enzimática es
activa. Un rango por debajo de la temperatura de crecimiento donde su actividad se ve
reducida y se inhibe el crecimiento, pero no llegándolo a matarlo y un rango por encima
de la temperatura optima donde inactiva las enzimas hasta el punto de desnaturalizarlas y
conseguir la muerte microbiana.
Con la temperatura se clasifica a los m.o- Destruye un m.o por calor húmedo(autoclave) y
calor seco (horno, materiales de vidrio)- Mantiene inactivos a m.o a bajas temperaturas
para inactivar su actividad metabólica- Actúa como coadyuvante de agentes químicos
optimizando el tiempo de exposición de los detergentes.
PH: Las enzimas están adecuadas para un ph óptimo.
Con el ph se puede clasificar a los m.o- Inactiva los m.o, difícilmente mata- Actúa como
coadyuvante de un agente químico para aumentar la eficiencia y reducir el tiempo de
exposición sobre el espacio a desinfectar o mucosa
OXIGENO: Permite clasificar a los m.o- Destruir un m.o actúa como letal por la
producción de radicales libres, daña sus enzimas y el m.o muere, ya que para algunos las
enzimas se activan en presencia de oxígeno y para otros resulta toxico.
CONCENTRACION DE SOLUTOS (Cloruro de sodio y glucosa): Se consigue muerte e
inactivación dependiendo de la concentración que se utiliza. La concentración que toleran
la mayoría de los m.o por efecto de sus membranas celulares varia de 0,90-0,95.
La concentración de sales y azucares se utiliza para conservar medicamentos por altas
concentraciones de azúcar y alimentos por altas concentraciones de sal y evitar su
contaminación.
Interpretación

 Medio hipotónico (baja concentración de sal o azúcar en el medio de cultivo), la

célula se hincha porque trata de equilibrar la concentración de solutos ingresando
agua al interior de la célula y a consecuencia de ello ocurre el proceso de
plasmoptisis.
  Medio hipertónico (alta concentración de sal o azúcar en el medio de cultivo), la
célula se deshidrata porque trata de equilibrar la concentración de solutos
liberando agua y a consecuencia de ello ocurre un proceso de plasmólisis.
 Medio ligeramente isotónico: Se evidencia crecimiento microbiano porque existe
permeabilidad de la membrana celular al permitir la entrada y salida de solutos del
interior al exterior y viceversa.

VARIACION MICROBIANA BACTERIAS

Temperatura:
Estructurales en la activación e inactivación de una estructura (flagelos- flagelina):
Algunas bacterias a temperatura de 37°C inactivan la proteína flagelina y a temperatura
ambientes es móvil, se activa.
La temperatura es factor ambiental que actúa sobre algunas bacterias activando o
suprimiendo la producción de un pigmento que a 37°C no produce pigmento y a
temperatura ambiente 25°C si se produce pigmento. Variación fenotípica
Condición nutricional afecta la producción de una estructura (endosporas):
Expresan en bacterias la formación de endosporas en medios desfavorables en déficit
nutricional, que en casos de condiciones nutricionales optimas, las endosporas se
reprimen y se generan formas vegetativas.
Condición nutricional (CH) para la expresión de una estructura (Capsula): La capsula
está formada principalmente de carbohidratos, se expresa mejor en un medio rico con
hidratos de carbono, y se reprime o no expresa cuando el porcentaje de CH es muy pobre
o bajo. Generalmente la característica de la colonia varia, si es mucoide se sabe que el
m.o presentara capsula y precisamente las colonias mucoides se presentan cuando el
medio es rico en hidratos de carbono, si no lo es, las colonias mucoides se reprimen.
HONGOS
Temperatura: Dimorfismo, presente en hongos patógenos primarios y se considera una
condición de virulencia. Un medio a temperatura ambiente y otro en temperatura de
incubación a 37°C en 24h. el medio a temperatura ambiente forma micelio e incubado a
37°C forman colonias de levaduras. Estos hongos poseen unos genes que se activan o
represan con base en la temperatura de incubación y cambia totalmente su forma
macroscópica y microscópicamente. Variación fenotípica y genotípica.

MUERTE MICROBIANA POR METODO FISICO Y QUIMICO.

Metodo físico: Calor. Dos tipos: Húmedo y seco.
Seco: Horno. Temperatura de 180°C por tiempo de 2 horas. Material de vidrio a utilizar.
Húmedo: Autoclave; Mezcla dos tipos de componentes: presión y temperatura. 121°C y
15 libras de presión por tiempo de 15 min. Esterilizar medios de cultivo para ser utilizados
o destruirlos, material y/o ropaje quirúrgico; pero las sustancias de naturaleza lipídica no
se pueden esterilizar en él, porque el agua y el aceite no se mezclan; solo en el horno.
Control de calidad: Existe un proceso biológico y químico. El primero corresponde a la
ampolla de sterikon; consiste en un caldo glucosado: glucosa, indicador de ph: purpura de
bromocresol y un m.o Bacillus Stearothermophilus (esporulado). A ph neutro: morado. Al
cabo del proceso de esterilización se espera encontrar la ampolla de color morado,
porque el m.o presente en él, no creció. Cuando la esterilización no es correcta vira de
color amarrillo. Las ampollas se utilizan para determinar la funcionalidad del autoclave
Pero la ampolla después del proceso de esterilización debe ser incubada a 50°C por
espacio de 24 h y posteriormente se interpretan los resultados.
Y el químico corresponde a la cinta testigo que posee un indicador químico de
esterilización impregnado en líneas que sobresalen y se activa a 121°C y 15 lb de presión
y viran de color negro o gris oscuro, todas parejas, cuando se ha alcanzado la
esterilización. Al material se le envuelven con 3-5cm para poder interpretar los resultados.

AGENTE QUIMICO. Alcohol, Yodo y Cloro: Desinfectantes más utilizados.

Antiséptico: Utilizados a piel y mucosas
Desinfectante: Utilizadas sobre superficies inanimadas.
Sus mecanismos de acción son iguales, pueden inhibir o matar a los m.o y actúan como
microbicidas y microbiostatico dependiendo de la concentración y tiempo de exposición.

ANTIMICROBIANOS: Son métodos químicos. Se realiza un antibiograma (siembra

masiva); se determina si la bacteria es sensible o resistente a un determinado antibiótico.
Para ello se utilizan los sensidiscos: Papel filtro impregnado con una determinada
concentración del antibiótico y se distribuyen 6 sensidiscos sobre la superficie sin que se
toquen. Se incuba a 37°C por espacio de 24h; al cabo del tiempo se realiza la lectura e
interpretación. Se observa alrededor del sensidisco un halo de sensibilidad que por lo
general se mide a través de su diámetro en mm, comparándolo con un listado estándar y
de esa manera se determina a que antibiótico es resistente o sensible.