Bioquímica 122102-1

Informe de Laboratorio
Práctica No. 3-4, 25/09/2020

CARACTERIZACIÓN DE LAS FRACCIONES OBTENIDAS A

PARTIR DE TEJIDO ANIMAL:
PROTEÍNAS
YEIKOT STEVEN ESCOBAR AGUILAR
MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECINA FCARN
Universidad de los Llanos
Vereda Barcelona, km 12 vía a Puerto López, Villavicencio 500017, Meta, Colombia.
yeikot.escobar@unillanos.edu.co,

Resumen- En esta práctica se llevó la demostración cualitativa de la presencia de proteínas en unas muestras de
alimentos, a través de diferentes reacciones químicas características de cada proteína, al entrar en contacto con
los diferentes reactivos trabajados durante la práctica. La práctica se realizó de manera virtual con el apoyo de
unos softwares de laboratorio con el fin de evidenciar cada una de las reacciones (cambios de color) en cada
muestra, y lograr explorar la correcta manipulación de las micro pipetas en el laboratorio y el paso a paso para no
comprometer la naturaleza de la muestra ni el estado funcional de las mismas.
Palabras Clave- Proteínas, propiedades químicas, software, reacciones químicas características.

1. INTRODUCCIÓN oboalbumina, utilizando para ello reacciones

Las biomoléculas son la materia prima con que se caracteristicas de cada uno de los
encuentran compuestos los seres vivos. Las componentes anteriores.
biomoléculas son indispensables para el nacimiento,  Adquirir los conocimientos basicos para
desarrollo y funcionamiento de cada una de las células aprender a manipular adecuadamente las
que forman los tejidos, órganos y aparatos del cuerpo, y micropipetas.
su carencia, deficiencia, insuficiencia o desequilibrio,
provoca el deterioro de la salud y el surgimiento de la Para obtener unos buenos resultados se debe tener
enfermedad. Se pueden clasificar en: a) Biomoléculas en cuenta las siguientes recomendaciones:
inorgánicas: agua y sales minerales b) Biomoléculas  Medir con mucha exactitud las unidades
orgánicas: glúcidos (hidratos de carbono), lípidos, volumétricas indicadas en la guía.
proteínas y ácidos nucleicos.
 Seguir las indicaciones del software de simulación
Proteínas: para poder interiorizar los conocimientos y llegar a
Las proteínas son biomoléculas formadas básicamente realizarlos de forma mecánica.
por carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno. Pueden
además contener azufre y en algunos tipos de
proteínas, fósforo, hierro, magnesio y cobre entre otros 1. Sección experimental
elementos. Pueden considerarse polímeros de unas La práctica se llevó a cabo de manera virtual, es decir,
pequeñas moléculas que reciben el nombre de con el apoyo de distintos softwares y simuladores, para
aminoácidos y serían, por tanto, los monómeros unidad. lograr de esta forma llegar a observar las reacciones
Los aminoácidos están unidos mediante enlaces que se presentan al someter las muestras a las
peptídicos. La unión de un bajo número de aminoácidos diferentes pruebas químicas.
da lugar a un péptido; si el número de aminoácidos que
forma la molécula no es mayor de 10, se denomina Prueba de ninhidrina:
oligopéptido, si es superior a 10 se llama polipéptido y  En un tubo de ensayo depositar 0,5Ml de
si el número es superior a 50 aminoácidos se habla ya muestra.
de proteína.1  Agregar o,1Ml de ninhidrian a la muestra.
Para esta práctica se plantearon unos objetivos básicos  Someter a baño maría 5minutos
para desempeñar una práctica de manera adecuada y  Observe y anote cualquier cambio que se haya
con una ruta de acción en busca de una meta o en este presentado.
caso cumplir los objetivos plantead
 Comprobar la presencia de proteínas en unas Prueba Xantoproteica:
muestras como lo son la gelatina y la

1
  En un tubo de ensayo depositar 0,5Ml de El resultado de la reacción entre el reactivo de
muestra. ninhidrina con la gelatina y la ovoalbúmina indico
 Agregar 1Ml de HNO3 al tubo de ensayo con la positivo para la presencia de aminoácidos.
muestra. La prueba Xantoproteica indico positivo a la presencia
 Someter a baño maría (5-10 minutos). de aromáticos en las muestras.
 Tras enfriar, agregar 10 gotas de NH3. La prueba de Millón en gelatina indico que no
 Observe la coloración de la interfase. presentaba radicales de hidrobenceno mientras en la
muestra de ovo albumina si se hayan presentes.
Prueba de millón:
 En un tubo de ensayo, agregue 0,5Ml de la Grafico 1.
muestra.
 Agregue 5 gotas de reactivo millón al tubo de
ensayo con la muestra.
 Someter al baño maría (10 minutos)
 Tras enfriar, agregar 5 gotas NaNO 2 y agitar
suavemente.
 Observe y anote cualquier cambio que se haya
presentado.

Aunque no se usó el procedimiento del baño maría la

desnaturalización de las proteínas presentes en las
muestras trabajadas se llevó a cabo mediante el Proba de BIURET software
calentamiento de manera directa de las mismas en
mechero bunsen.
Grafico 2.

3, Resultados y análisis
Pruebas cualitativas de presencia de proteínas:
La tabla 1, contiene el resultado de las pruebas
cualitativas de las pruebas: Millón, Ninhidrina,
Xantoproteica. Lugol +HCl, Benedict. Con diferentes
sustancias: Gelatina sin sabor en agua y ovoalbúmina
(clara de huevo)
(+) Prueba Positiva (-) Prueba Negativa Prueba positiva de biuret y gelatina.
Tabla 1. Pruebas cualitativas
Grafico3.
Gelatina Ovoalbúmina

Biuret + +

Ninhidrina + +

Xantoproteic + +
a
Prueba positiva de biuret y ovoalbúmina
Millón - +
Grafico4.
Aunque no se usó el procedimiento del baño maria la
desnaturalización de las proteínas presentes en las
muestras trabajadas se llevó a cabo mediante el
calentamiento de manera directa de las mismas en
mechero bunsen.
El resultado de la reacción entre el Reactivo Biuret en la
gelatina y la ovoalbúmina, indicó positivo para la
presencia proteínas. Pues la muestra se tornó de color
violeta, debido a la formación de un complejo de
coordinación entre los iones Cu+2 y los pares de
electrones no compartidos del nitrógeno que forma Pruebas de la ninhidrina software (derecha
parte de los enlaces peptídicos. ovoalbúmina, izquierda dispersión de gelatina).

2

Grafico 5.
Prueba Xantoproteica en software (izquierda
ovoalbúmina, derecha dispersión de gelatina).
Grafico 6.
Prueba de millón en software (izquierda
ovoalbúmina, derecha dispersión de gelatina).
Observaciones
La prueba de biuret es básicamente una prueba algo
general que busca determinar la presencia o ausencia
de proteínas, en una muestra. En este caso las dos
muestras resultaron positivas es decir presentaron un
cambio casi inmediato de color tras el proceso de
desnaturalización y la adición del reactivo de biuret,
este cambio de color se debido al complejo de
coordinación formado entre el átomo de cobre del
reactivo de Biuret, y cuatro átomos de hidrogeno
peptídicos presentes en las cadenas poli peptídicas.
Aunque no se llevó a cabo la desnaturalización por
medio del baño maría al someter el tubo de ensayo al
calor del mechero bunsen se lograba el mismo efecto.
La prueba de la ninhidrina ya es una prueba más
compleja pues nos permite determinar la presencia o
ausencia de un tipo de aminoácidos como la
hidridantina, como en este caso que presento un tono
fucsia debido a que La molécula de hidridantina, en
presencia de otra de ninhidrina, condensa a través del
amoniaco produciendo una estructura denominada
indanona o púrpura de Ruhemann, manifestando un
color rojizo, excepto para la prolina, hidroxiprolina y en
menor medida para la histidina.2
La prueba xanto proteica, nos indicó en ambos casos
positivo lo que nos indica que las dos muestras
presentan proteínas solubles en una solución, es decir
presenta proteínas con aminoácidos portadores de
3
grupos bencénicos, tirosina, felalanina y triptófano.
Cuando el ácido nítrico entra en contacto con las
mismas se debe a la formación de un compuesto
aromático nitrado de color amarillo.
La prueba de millón nos dio un resultado diferente en
cada muestra, en el caso de la gelatina el resultado fue
negativo pues no presento la coloración rojo ladrillo,
mientras la muestra de ovoalbúmina si lo que nos indica
que la ovoalbúmina presentaba aminoácidos con
grupos fenólicos, y su coloración de debe a que En una
primera instancia se procede a la nitración del anillo
fenólico con el ácido nítrico del reactivo. La tirosina
nitrada forma complejos con los iones mercurio Hg (I) y
Hg (II) del reactivo produciendo un precipitado rojo o
una solución roja.3
4. Conclusiones
 Las muestras trabajadas durante la
practica eran muy similares tan solo
diferian en la composicion de sus
proteinas dado que la ovoalbumina,
presento aminoacidos con grupos
fenolicos mientras la dispersion de
gelatina no.
 Se logro observar como mediante las
pruebas quimicas empleadas se puede
identificar el tipo de proteinas de cada
sustancia o tejido animal.
 Se logro el adecuado reconocimiento,
practica y mecanizacion de la correcta
manipulacion de las micropipetas en el
software de laboratorio virtual.
6. REFERENCIAS
1. Boatella Riera Josep. Química y Bioquímica de
los alimentos II. Edicions Universitat. Barcelona
(2004). Biología Molecular de la Célula. Alberts
y col. Edit. Omega.
2. Tuñez F. Departamento de Bioquímica y
Biología Molecular, Facultad de Medicina,
Universidad de Córdoba, Avda. Menéndez Pidal
s/n, 14004 – Córdoba.
3. TRABAJO PRACTICO N° 3. PROTEÍNAS,
PÉPTIDOS Y AMINOÁCIDOS.
http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/farmacognosia/w
p-content/uploads/2017/03/TP3-_PROTE
%C3%8DNAS-PEP-AA-2017.pdf
Anexo.

Resultados trabajo, software.

RESULTADOS

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