FACULTAD DE CIENCIAS

EXACTAS Y NATURALES

GENETICA GENERAL
Práctica de Laboratorio

Manejo de Drosophila melanogaster y Reconocimiento de Mutaciones

I. Introducción: La Drosophila empezó a ser utilizada en 1909 para la investigación genética

por T. Morgan y desde entonces es el organismo más ampliamente utilizado en todos los
niveles, desde las más básicas demostraciones de los principios mendelianos, tales como
cruces monohíbridos, dihíbridos y herencia ligada al sexo, hasta las más refinadas
investigaciones en Genética Molecular. La preponderancia del uso de la Drosophila se debe
a que ofrece entre otras, las siguientes ventajas:
a. Ciclo de vida relativamente corto
b. Gran número de hijos
c. Cultivo a bajo costo
d. Espacio reducido para el mantenimiento de los cultivos
e. Gran número de cepas con marcas específicas o con cromosomas especiales
f. Además, para estudios de citogenética, tiene la importancia de poseer sólo cuatro pares
de cromosomas homólogos y de tener en sus glándulas salivares cromosomas
politénicos, los cuales pueden ser unas 1000 veces más gruesos y 100 veces más largos
que los cromosomas ordinarios.

II. Objetivos:
a. Familiarizar a los estudiantes con las técnicas necesarias para utilizar la Drosophila
melanogaster en la experimentación.
b. Reconocer en forma práctica las diferentes etapas del ciclo biológico de la Drosophila
melanogaster
c. Aprender a identificar los dos sexos en Drosophila melanogaster
d. Reconocer el fenotipo normal de Drosophila melanogaster e identificar algunas de las
mutaciones utilizadas como marcas genéticas

III. Materiales: para todos los experimentos con Drosophila melanogaster:

a. Pincel suave (#0 ó #1)
b. Embudo de plástico
c. Esponja de espuma, caucho u otro material blando (10x15x4cm)
d. Cartón o lámina de plástico de superfície lisa y clara (15x8cm)
e. Frascos de vidrio de boca ancha de aproximadamente 200 mL
f. Gasa y algodón para fabricar los tapones
g. Eter etílico
h. Estereomicroscopio o lupa
i. Cepas con marcas (mutaciones) específicas
 j. Medio de cultivo (Melasa 10%, harina de maíz 10%, ácido propiónico 0.5%, agar-agar
0.6%, levadura 3%)

IV. Procedimiento:
a. Manejo de Drosophila melanogaster
i. Eterización de las moscas: Para observar las moscas adultas se deben dormir por
medio de éter. Para el efecto se golpea suavemente la parte inferior del frasco de
cultivo sobre una superficie blanda y luego invierte, rápidamente y sin el tapón,
sobre la boca de un embudo que se ha introducido previamente por su parte
angosta a un frasco limpio, luego con golpes suaves se hacen precipitar las
moscas hacia el frasco limpio, una vez depositadas las moscas allí, rápidamente
se cambia el embudo por un tapón de algodón impregnado con éter hasta que las
moscas se hayan dormido (15-20 segundos).
ii. Obtención de hembras vírgenes: para poder llevar a cabo un experimento
controlado, es necesario obtener hembras que no hayan sido fecundadas. Esto se
garantiza separándolas de los machos antes de que transcurran 12 horas después
de su nacimiento.

b. Observación del ciclo de vida de la Drosophila melanogaster: el ciclo completo dura

diez días a temperatura promedio de 25°C, pero puede alterarse su duración si se cambia
la temperatura.

http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/Genenzima/ciclovid.htm

i. Huevo: su tamaño aproximado es de 0.2 a 0.5 mm, se les encuentra en la

superficie del medio de cultivo. Los huevos fecundados presentan, en la parte
 anterior, dos filamentos para flotar sobre el alimento y tienen una duración de un
día. Es suficiente una sola fecundación para que la hembra continúe depositando
huevos.
ii. Larvas: se alimentan a expensas del medio de cultivo abriendo surcos en éste.
Existen tres estadios larvales, a saber: primer estadio, duran un día, sufren una
muda y se convierten en larvas de segundo estadio, las cuales duran igualmente
un día, éstas sufren otra muda y se convierten en larvas de tercer estadio, estas
últimas duran dos días.
iii. Pupas: las larvas de tercer estadio migran del medio de cultivo a las paredes
secas del recipiente y allí se transforman en pupas, las cuales no se alimentan y
duran cuatro días.
iv. Adultos: salen directamente de la pupa y miden aproximadamente 0.3 cm. Las
moscas recién nacidas son pálidas y poseen alas arrugadas, poco a poco las alas
van abriendo y el cuerpo se va oscureciendo. Los adultos pueden vivir de uno a
tres meses de acuerdo con los cuidados que tengan.
Para la observación de los distintos estadios, retire del cultivo huevos, larvas,
pupas y adultos, y obsérvelos bajo un estereomicroscopio.
c. Diferencias entre machos y hembras

http://web.educastur.princast.es

i. En los machos existe el “peine sexual”, formado por cerdas más oscuras y
localizado en el primer par de patas.
ii. En el abdomen de la hembra se observan siete segmentos, mientras que el macho
sólo se observan cinco y presenta un oscurecimiento de la parte Terminal del
abdomen.
iii. Los machos poseen arco genital en el extremo posteroventral del abdomen.
iv. Los machos tienen menor tamaño que las hembras.
d. Fenotipo normal en Drosophila melanogaster:
i. Cuerpo: color miel
ii. Ojos: redondos, color rojo
 iii. Alas: rectas, con venas longitudinales y transversales
iv. Quetas: “rectas” orientadas hacia la parte trasera
v. Halterios: vesículas para el balanceo durante el vuelo
e. Reconocimiento de mutaciones: una vez que usted ha estudiado el ciclo vital de la
Drosophila melanogaster, ha aprendido a diferenciar los machos y las hembras y que ha
reconocido las características morfológicas del adulto norma (silvestre o Canton)
podemos estudiar algunas características diferentes debidas a mutaciones.

Mutación Nombre Ubicación Fenotipo

vg vestigial Crs 2 Alas vestigiales
dp dumpy Crs 2 Alas truncadas y cuerpo más redondo y corto
v vermillion Crs 1 (X) Ojo bermellón
se sepia Crs 3 Ojo color pardo oscuro
w white Crs 1 (X) Ojo blanco
pm plum Crs 2 Ojo más oscuro que el silvestre, pero menos
que el sepia
y yellow Crs 1 (X) Cuerpo de color amarilo
e ebony Crs 3 Cuerpo oscuro (ébano)
bw brown Crs 2 Ojo color café
B Bar Crs 1 (X) Ojo estrecho, en barra
Cy Curly Crs 2 Alas crespas
m miniatura Crs 1 (X) Alas y cuerpo pequeño
f forked Crs 1 (X) Quetas ahorquilladas y recortadas
cv crossveinless Crs 1 (X) Alas sin venas transversales

f. Símbolos utilizados para designar las mutaciones en Drosophila melanogaster: los

genes que producen fenotipo normal se representan con el símbolo de la mutación
acompañado del signo (+). Ej. e+ indica alelo normal para el color del cuerpo; las
mutaciones recesivas se representan con letras minúsculas y las dominantes con letras
mayúsculas. Las mutaciones que están en diferentes cromosomas se separan por punto y
coma, ej. (♀ w;e = hembra de ojos blancos y cuerpo oscuro, ♂ w+;e+ = macho de ojos
rojos y cuerpo miel)

V. Referencias
a. Moreno J, Zuleta M. 1973. Técnicas empeladas en el manejo de la Drosophila y estudio
de su ciclo biológico. Actual. Biol. vol 2, # 4.
b. Demerc and Haufman. 1969. Drosophila guide. Washington D.C. Crnegie Institution of
Washington.
c. Hudock GA. 1967. Experiments in genetic. New Yor, John Wiley and Sons, Inc.
d. Strickberger MW. 1962. Experiments in genetics with Drosophila. New York, John
Wiley and Sons, Inc.