Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
Oceanográfica 11
Intergubernamental
DETERMINACION DE LOS
HIDROCARBUROS DEL PETRÓLEO
EN LOS SEDIMENTOS
1982 Unesco
PREFACIO
Los métodos presentados en este informe se han elaborado con el fin de servir
de métodos de referencia para determinar el petróleo en los sedimentos para el Pro-
grama MEDPOL. Sin embargo, como pueden tener una aplicación mucho más amplia que
una mera zona regional, se publican para uso de los cientfficos marinos interesados
de todo el mundo.
- 3 -
INDICE
1. INTRODUCCION ........................................................ 5
4. PRINCIPIO ........................................................... 7
5. REACTIVOS ........................................................... 7
7.1 Planificación................................................. 10
11 . APENDICE 1 ........................................................... 34
- 5 -
1. INTRODUCCION
?Qué tipo de metodologia debe utilizarse para obtener una estimación de los hi-
drocarburos del petróleo? Se han descrito numerosos métodos analíticos acerca de
cómo estimar estos hidrocarburos. Los métodos van desde los gravimétricos (extracta-
bles no volátiles), la absorción de rayos ultravioleta (poliolefinas conjugadas, com-
puestos aromáticos), la fluorescencia de rayos ultravioleta (compuestos no saturados,
compuestos aromáticos, etc., según la excitación, la emisión, la extracción y la vo-
latilidad), los métodos por rayos infrarrojos (IR) frecuencia de estiramiento de los
grupos CHz-, 2930 cm-', la cromatografia en fase gaseosa utilizando columnas de re-
lleno (hidrocarburos totales, alcanos normales especificos, relaciones parafina nor-
mal/isoprenoides) , la cromatografia en fase gaseosa utilizando columnas de capilares
de silice (fundida alcanos normales especificos e hidrocarburos aromáticos policicli-
cos después de su separación previa sobre silice o sílice cubierta con alúmina o alú-
mina solamente), a la cromatografia en fase gaseosa/espectrometria de masas sumadas
a un sistema de datos (componentes especificos, componentes preseleccionados) utili-
zando el sistema en el modo de vigilancia de iones determinados "selected ion monito-
ring mode" (SIM).
Los tipos de petróleo que pueden aparecer en el medio ambiente marino pueden di-
ferir considerablemente e ir desde el petróleo crudo hasta diferentes destilados co-
mo el petróleo combustible para buques, el petróleo o las precipitaciones atmosféri-
cas. Todos estos "tipos" de petróleo tienen algo en común: contienen componentes
que se disuelven en el agua de mar y componentes que son degradados por las bacterias
y por la luz ultravioleta. En consecuencia, no es el caso de tratar de efectuar aná-
lisis para determinar el contenido de "petróleo" como tal, ya que, una vez que ha
llegado al mar, ya no existe en su forma original. Por lo tanto, el método de la
fluorescencia por rayos ultravioleta puede utilizarse en este caso como un método de
separación para descubrir ''puntos calientes'' (es decir, zonas localizadas donde exis-
ten concentraciones sumamente elevadas de un contaminante) .
El fundamento teórico del análisis de los hidrocarburos del petróleo debe con-
sistir en plantear las siguientes preguntas: ¿qué tipo de componentes son los más
nocivos? ¿qué componentes derivados del petróleo terminan en los sedimentos? Una
vez contestadas estas preguntas, ha llegado el momento de analizar los componentes
específicos.
Anon, 1980. Guidelines for Data Acquisition and Data Quality Evaluation in Environ-
mental Chemistry. Analyt. Chem. 52 (1980) 2242-2249.
- l -
Friedrich, H., 1973. Marine Biology. An introduction to its problems and results.
Sidgwick & Jackson, Londres.
Futoma, D.J., Ruven Smith, S., Smith, T.E. y J. Tana.ka. 1981. Polycyclic Aromatic
Hydrocarbons in Water Systems. CRS Press, Inc., Boca Raton, Florida, 1981.
Hites, R.A., R.E. Laflamme y J.G. Windsor jr., 1980. Polycyclic Aromatic Hydrocar-
bons in Marine/Aquatic Sediments: Their Ubiquity, en Petroleum in the Marine
Environment, Advances in Chemistry Series 185, Leonid Petrakis y Fred T. Weiss
eds., American Chemical Society, Wa.shington D.C. 1980.
McAuliffe, C.D., 1980. The Multiple Gas-Phase Equilibration Method and Its Applica-
tion to Environmental Studies en Petroleum in the Marine Environment, Advances
in Chemistry Series 185, Leonid Petrakis y Fred T. Weiss eds., American Chemi-
cal Society, Washington D.C., 1980.
Moore, H.B. y Neil, R.G., 1930. An instrument for sampling marine muds. J. Mar.
Biol. Ass. U.K. XVI: 589-594.
4. PRINCIPIO
Después de tomar una muestra del sedimento con una cuchara de van Veen o un sa-
catestigos de gravedad, los hidrocarburos del petróleo se aislan de las muestras de
sedimentos mediante saponificación con KOH metanolada durante 1,5 horas, seguida de
extracción con pentano. Se utiliza una submuestra para determinar el peso en seco.
En las muestras con un elevado grado de contaminación, la cantidad Yotal'' de hidro-
carburos del petróleo puede estimarse utilizando un método de examen mediante fluo-
rescencia por rayos ultravioleta (sección 8.7) y también por cromatografia en fase
gaseosa con columnas de relleno y detector de ionización de llama, integrando ambos
la mezcla compleja resuelta y no resuelta (sección 8.8). Como patrón externo se uti-
liza un petróleo, tan parecido al petróleo contaminante como sea posible. Determi-
nados hidrocarburos aromáticos no biogénicos '(por ejemplo, naftalenos, fenantrenos
y dibenzotiofenos) , que son los compuestos aromáticos predominantes en las muestras
contaminadas por los hidrocarburos del petróleo, se analizan cuantitativamente utili-
zando una columna capilar de silice fundida, tres patrones internos (es decir, dife-
nilo-dlO, antraceno-d10 y pireno-dl0 y un espectrómetro de masas como detector.
5. REACTIVOS
Todos los reactivos utilizados deben ser de la mejor calidad que pueda obtenerse;
grado p.a. o de cromatografia. Si los disolventes utilizados presentan blancos muy
elevados, deben redestilarse para garantizar la mejor calidad.
- 8 -
5.1.9 Gel de sílice (Kieselgel 60) tamaño de las particulas 0,63-0,125 mm (malla
ASTM 120-230) Merck 9386
5.2.1 Difenilo-dl0 MD-208 (99 átomos % D) Lot.nE B-1011. Merck & Co. Inc. Rahway,N.J.
5.2.2 Antraceno-di0 MD-46 (98 átomos % D) Lot. no C-570. Merck & Co.,Inc. Rahway,N.J.
5.2.3 Pireno-di0 MD-363 (98 átomos % D) Lot. no C-569. Merck & Co., Inc.Rahway, N.J.
5.2.4 Una mezcla que contenga aproximadamente 0,5 ng de 5.2.1, 5.2.2 y 5.2.3 por
ml disueltos en hexano. La mezcla puede prepararse de la siguiente manera:
pasar 100 mg de 5.2.1, 5.2.2 y 5.2.3 a un matraz aforado y diluir hasta 100
ml con hexano; solución A.
6. APARATOS Y EQUIPO
6.2 Congelador (-18 a-200C-),si los viajes para la extracción de muestras duran
más de 48 horas.
6.8 Isomantel, tipo FSEu/lL/6, 220/240 voltios 6x280 'watios, fase S/PH, cir-
cuitos 1, número de serie WB 4649, Isopad i.td., Bosehamwood, Herts.
6.15 Un par de pinzas para cerrar los viales; Wheaton 224301, Millville, N.J.
NOTA: Los objetos de vidrio que se utilicen por primera vez en el procedimiento
(sección 8) deben lavarse a fondo, utilizando el procedimiento siguiente:
- enjuagar con agua, por Último, varias veces con agua destilada y dejar
secar.
Es poco probable que los sedimentos contengan una cantidad apreciable de hidro-
carburos disueltos, ya que el petróleo habria pasado a través de la columna'de agua
antes de llegar a los sedimentos. Lo más probable es que los hicrocarburos solubles
hayan desaparecido antes de que las gotas hayan alcanzado los sedimentos (McAuliffe,
1980).
Los puntos de muestreo se determinan, por lo común, sobre una amplia cuadrícu-
la que abarque la zona geográfica afectada por un derramamiento de petróleo, que se
elige como zona de referencia, o donde vayan a tener lugar en el futuro las activida-
des de perforación (Fig.1) -
Como el análisis de las muestras de hidrocarburos del petróleo es costoso, han
de seleccionarse cuidadosamente tanto el número de muestras recogidas como los pun-
tos de muestreo. Las muestras deben seleccionarse de manera que permitan el logro
de los objetivos fijados; por lo común, esto significa recoger muestras en exceso
cuando sólo se seleccionara un número determinado de muestras para su análisis, en
una etapa posterior.
- 11 -
Siempre que sea posible han de recogerse muestras por duplicado en cada punto de
la cuadrícula. El análisis de los duplicados permitirá determinar la varianza en
los parámetrcs medidos. Esta varianza puede utilizarse luego para indicar el número
de muestras duplicadas necesario para detectar un cambio estadístico en los valores
medidos dentro de unos límites de confianza especificados. El número de muestras
duplicadas calculado para fines estadísticos da por supuesto que losvalores presentan
una "distribución normal" (es decir, que son Gaussianos, Fig. 2 ) .
3 n.m.
70!!
---- --
I
I
1
I
I
l
I
I 2 n.m.
I
I
- X
T X a
Las muestras de sedimentos pueden tomarse con una cuchara de van Veen.
Fig. 3-Cuchara de van Veen para recoger muestras de sedimentos (según H. Friedrich).
agua
a.
sedimento
b.
i
Fig. 4 - a. Revestimiento de vidrio de un sacatestigos de gravedad. El sedimento
de la parte superior puede utilizarse para el análisis de tendencias.
b. Esquema del sacatestigos completo.
S O U R C E OF S A M C L E FRESERVATIVC
;> OlfPOSlTlOH O F S A H P L L
:
a
: SIGHATURC
SIGHATURE
O
L 1
8. PROCEDIMIENTO DE ANALISIS
Se determinan cuidadosamente el peso del frasco de pesadas deL tapón y del se-
dimento. El peso obtenido es el peso en húmedo del sedimento más el peso del frasco
y del tapón.
Fig. 6. Vista de conjunto del equipo necesario para tratar las muestras de sedimen-
tos, A = N (5.1.7), B = vial (6.13), C = KOH (5.1.31, D = metanol (5.1.2)
2
E = cuerpos sólidos de ebullición (5.1.4), F = patrones internos (5.21,
G = -pentano (5.1.5), H = muestra de sedimento-1 = embudo de separación (6.10)
y J = montaje para el reflujo de muestras (6.8).
Se llena hasta unos 5 cm (1,15 9.) con Óxido de aluminio (5.1.10) una pipeta
de Pasteur provista de un tapón de lana de vidrio. La columna se lava tres veces
con 2 ml de pentano (5.1.5) y se agrega el extracto de la muestra a la parte supe-
rior de la columna. La elución se efectúa como se indica en el Cuadro 1. Los dife-
rentes eluatos se evaporan a sequedad utilizando un chorro de N 2 gaseoso. Para el
método de fluorescencia por rayos ultravioleta, se disuelven los residuos que
- 16 -
contienen los compuestos aromáticos (es decir, las fracciones 3 y 4) en hexano libre
de compuestos aromáticos y se trasvasan cuantitativamente a un matraz graduado de
1 ó 5 ml y se añade hexano hasta la marca. Para el análisis cromatográfico en fase
gaseosa, se disuelven los residuos en una cantidad conocida de hexano (entre 40 ml
y 1 ml, según la concentración de los hidrocarburos).
Fig. 7. El matraz que contiene el sedimento, el metanol, el KOH y los cuerpos sóli-
dos de ebulliciónestánlistos para el reflujo.
Se llena con 0,5 g de sílice (5.1.9) una pipeta de Pasteur provista de un tapón
de lana de vidrio. Se lava la columna 3 veces con pentano (5.1.51, luego se coloca
la muestra en la parte superior de la columna y se lava el vial 3 veces con 1,O ml
de pentano. Se eluyen los componentes del petróleo totalmente con 12 ml. de pentano
en total. Se reduce el extracto de pentano a sequedad utilizando un chorro de N
gaseoso. 2
- 17 -
1 4 pentano alcanos
2 4 pentano disolveñte sola-
mente
3 4 pentano: diclorometano 7: 3 compuestos aro-
máticosa)
4 4 diclorometano compuestos aro-
máticos supe-
rioresb)
~~~ ~ ~~~ ~ ~
b)
b)
Para el equivalente del eluato
Para el equivalente del eluato
3, véase la Fig. 14 a.
4, véase la Fig. 14 b.
Para los análisis cromatográficos en fase gaseosa que utilizan una columna de
relleno y también para la cromatografía en fase gaseosa/espectrometría de masas en
la modalidad SIM, se disuelve el residuo en una cantidad conocida de hexano (entre
40 ml y 1 ml según la concentración de los hidrocarburos).
Fig. 9. Reducción del extracto de pentano bajo presión reducida utilizando el Rota-
vapor (6.11).
Se introduce una muestra del extracto disuelto en n-hexano, en una célula de sí-
lice de 1 cm tapada. Se mide la intensidad de la fluorescencia a 360 nm (excita-
ción a 310 nm). A ser posible, se investigarán los espectros de excitación y de emi-
sión de cada muestra. La mezcla de sustancias fluorescentes (esto es, los bencenos
sustituidos, los naftalenos y los compuestos aromáticos policíclicos) contenidos en los
aceites combustibles brutos y residuales se excita más intensamente a 310 nm y emi-
ten una fluorescencia más intensa en la proximidad de 360 nm.
- 19 -
Fig. 10. Trasvase del volumen reducido del extracto de pentano a un vial (6.13) uti-
lizando una pipeta de Pasteur.
Fig. 11. Se utilizan unos alicates (6.15) parE sellar el vial que contiene el extrac-
to que ha de inyectarse en el cromatógrafo de fase gaseosa.
- 20 -
8.7.1 Calibración
...
fenantreno
fenantrenos - C 1
fenantrenos - C,
Fig. 13. Separación del extracto de una muestra de sedimento de Spitsbergen (derra-
mamiento de petróleo en la mina de carbón de Svea (1979)).
a) antes de la separación sobre alhina ácida
b) 1. eluato 4 ml de pentano; fraccrón de alcanos
c) 2. eluato 4 ml de pentano
d) 3. eluato 4 ml de pentano; CH2C12 (7:3): fracción de compuestos
aromáticos
(véase la pág. 17, Cuadro 1, sección 8.5).
- 22 -
O
d
a,
w
O
4J
u
(d
iH
a,
ci
k
(d
..
n
o
1
II>
w
I
ÚO AOQC
1
Flg. 14b. Una mezcla de hidrocarburos aromáticos policTclicos (PAH) cromatografia-
dos sobre alúmina ácida (8.5), 4. eluato (4 ml de CH2Cls).
- 23 -
A=--.--
B x C
D
iii) se mezclan volúmenes iguales del extracto de la muestra y del patrón cri-
seno y se mide la fluorescencia de la mezcla;
Temp. de inyección: 2 8 0 ~
Temp. de inyección: 2 8 0 ~
Las Figs. 15a y 15b en las páginas 28 y 29 son ejemplos de cromatogramas de hi-
drocarburos aromáticos seleccionados obtenidos por la modalidad de vigilancia de
iones determinados (SIM).
Cuadro 5. Hidrocarburos aromáticos seleccionados para los análisis
m/z 128
Naftaleno
m/z 142
Metii-naftalenos (C
1 m/z 156
Naftalenos-C
2 m/z 170
Naftalenos-C3
m/z 178
Fenantreno
m/z 192
Metii-fenantrenos (C
1 m/z 206
Fenantrenos-C
2 m/z 198
Metil-dibenzotiofenos (C
1 m/z 212
Dibenzotiofenos-C
2 m/z 226
Dibenzotiofenos-C
3
Las áreas comprendidas bajo los diferentes picos se calculan utilizando una com-
putadora Finnigan 6100.
El petróleo bruto ligero de Arabia se trata del mismo modo para obtener una mez-
cla aromática rica en dibenzotiofenos.
Ejemplo :
17l3 1m
!TMN
1 c12
I
164
. 1s
128
N
1 TMD
226
212
I 192
188
Para garantizar la mejor calidad posible de las mediciones analíticas del me-
dio ambiente que se llevan a cabo, el Comité para el Mejoramiento del Medio Ambiente
de la Sociedad Americana de Química (ACS) encargó a su Subcomité sobre Quimica Anali-
tica Whientallaelaboraciónde unaserie dedirectrices: "DirectricesparalaAdquisición
de Datos y la Evaluación de la Calidad de los Datos en materia de Química Ambiental".
Estas directrices son útiles para la realización de análisis químicos fiables de las
muestras ambientales y, por lo tanto, deberían permitir un intercambio y utilización
de mayor confianza entre laboratorios de los datos obtenidos. Este capítulo se basa
principalmente en las ideas expuestas en las citadas directrices.
-
9..3.4 La exactitud de un método analítico químico es el qrado
- en el que el valor me-
dio Ze las mediciones obtenido por el método se aproxima al valor verdadero
de la sustancia medida (eliminándose fisica o matemáticamente los efectos de otras
sustancias que interfieren).
MUESTRA DE SEDIMENTO
Total extractables
Separación
l .
Separación
en pentano
en pentano
Peiada
1 Material lipido
extractable
l
Pesada
iii! G,
saponificable
Desecho
1
no saponificable
Cromatografía en columna
Separación del azufre
r
L
Pesada
I
Hidrocarburos
Aromáticos Aromáticos
(<3 anillos)
Tr.metilcetonas
Fluorescencia de
rayos ultravioleta
l /
I
Cromatografía en fase gaseosa
(caracterización de la mezcla)
l
Cromatografía en fase gaseosa.- espectrometría de masas
- 33 -
APENDICE 1
Todas las técnicas de medición son sólo parte del plan global de vigilancia,
que comprende la planificación, el muestreo, la extracción, la medición, la comuni-
cación y la interpretación de datos. Muchas de estas etapas son idénticas o se ase-
mejan, independientemente de la técnica de medición utilizada en el programa de vi-
gilancia. Una evaluación completa de la simplicidad, la sensibilidad y el costo debe
tener en cuenta todas estas etapas.
El Grupo Ad hoc estimó que se deben tener presentes las siguientes considera-
ciones cuando se tome la decisión de utilizar la fluorescencia de rayos ultravioleta
para la vigilancia deloshidrocarburos del petróleo disueltos/dispersos:
ii) Se trata de una técnica fácil de transferir a los paises que cuentan con
una capacidad en desarrollo, y ello constituye una consideración de pri-
mera importancia para elegirla para el MARPOLMON como método para deter-
minar los hidrocarburos del petróleo disueltos/dispersos en el agua del
mar. Empero, los países desarrollados que cuentan con capacidad y cali-
ficación en otros métodos distintos del de la fluorescencia de rayos ultra-
violeta, como son la cromatografía en fase gaseosa y la cromatografía en
fase gaseosa/espectrometria de masas (GCGC-MS), que permiten análisis más
detallados, deben ser alentados a aplicar estos métodos a los problemas
relativos a la contaminación, en la esperanza de aumentar la comprensión
no sólo acerca de lo que se mide por la técnica de la fluorescencia de
rayos ultravioleta, sino de la distribución general de los diversos tipos
de compuestos concretos en los hidrocarburos del petróleo disueltos/dis-
persos. Además, el Grupo Ad hoc estimó que los países desarrollados debe-
rían prestar ayuda a los países en desarrollo en cuanto a la adquisición
de esos instrumentos más sofisticados y en la capacitación en materia de
análisis en el marco del componente de TEMA de la COI.
iii) El acopio de datos constituye tan sólo la primera etapa de semejante pro-
grama de vigilancia y debe preverse lo necesario para una evaluación pe-
riódica de los datos y, en base a esas evaluaciones, para la formulación
de recomendaciones. Esto es de aplicación en el caso de cualquier método
que se emplee.
- 35 -