~alutl l'übl. l\Iéx.
F.poea V. Volumen 11. Nlílll. 2.
Ahrtl-Junto. Méxíco, D. F.
METODOS Y'PRUEBAS DE LABORATORIO PARA EL
DIAGNOSTICO DE LA TOXOPLAMOSIS
Actualmente se considera a la toxoplasmo-
sis humanas, como una de las infecciones más
extendidas en el mundo. Según datos epide-
miológicos y estadísticos, dicha infección se
observa en
todas las altitudes y latitudes d,:i
glJho, en lN' clímas más variados desde los
más Líos (Alasb), a lo" más cálidos (Bra-
sil, Ecuad .r, Congo Belgd). Se han registra-
do caos tanto en el hcmbre como en la mu-
j er desde el estado fetal hasta la edad de ·10... -
70 años o más. La infección natural en los
animales está también muy extendida; se he.
aislado el toxoplasma en mamíferos, aves, rep-
tiles y artrópodos. En México, en personas 'es-
tudiadas al azar en diversas entidades de la
República con la prueba del colorante, el 28.5 %
resultaron positivas; 'en enfermos con sospe-
chas clínicas de toxoplasmosis el 43.9 resulta-
ron positivas: en ratas del Distrito Federal el
36.3 % y en gatos el 54.0 %.
El desarrollo del toxoplasma en el orga-
nismo humano es generalizado, lesiona todos
los tejidos y órganos de la economía, es una
enfermedad sistémica. Se desarrolla en las cé-
lulas normales procedentes de las tres cepas
blastodérmícas y aun en las altamente dife-
renciadas, como las del miocardio, de la reti-
na, del cristalino, en las células reticulo en dote-
liales y en el tejido placentario; donde no se
reproduce es dentro de los eritrocitos.
* Instituto de SaTubril1ad y Enfermedades T'roplcales
Eustaquio ROCH*
La toxoplasmosis presenta un polímorfís-
m.o sintomático, dando cuadros clínicos diver-
sos de difícil interpretación. Hay síndromes
que pueden orientar al clínico fácilmente hacia
la sospecha de toxoplasmosis, tenernos el caso
de la "coriorretínitis". En 115 enfermos con
diagnóstico . clínico de ..coriorretinitis" estu-
diados en el Instituto de Salubridad y Enfer-
medades Tropicales, resultaron positivos a la
prueba del colorante de Sabín y Feldman 77
o sea el 67.0 %; en personas tomadas al azar
el porcentaje varíó del 16.0 al 37.4 %.
La toxoplasmosis es pues una infección im-
portante en salud pública y el objeto de este
trabajo es presentar los diversos métodos y
pruebas de laboratorio con que se -cuenta pa-
ra el diagnóstico de esta enfermedad.
METODOS DIRECTOS.
Primero.- Observación directa del pará-
sito en exudados orgánicos como líquido .ce-
falorraquídeo, exudado perítoneal, pleural, pla-
centario, bronquial; o bien de biopsias de gan-
glios, de lesiones papulosas cutáneas, humor
acuoso del ojo, de órganos después de inter-
venciones quirúrgicas o postmortem en impron-
tas de órganos o en estudios histopatolóqicos.
Segundo .. =-Aíslamiento del parásito por
inoculación en animales de laboratorio (ratón,
cobayo, conejo, harnster. etc), con los especí-
menes mencionados o siembra de los mismos
en cultivo de tejidos o en embrión de pollo,
361
EÜ:-5'l'AQUIO HOCH.
Estas pruebas consideradas como las de ma-
yor valor diagnóstico. no son fáciles de rea-
lizarse en todos los laboratorios por requerir
material y personal" especializado.
METO DOS INDIRECTOS.
Díaqnóstíco serolóqíco por medio de la
prueba de fijación del complemento (Warren
y Sabino 1942). con antígeno obtenido por
electroforesis del cultivo de toxoplasmas en
coríoalantoídes de embrión de pollo. técnica de
Westphal 1951. Esta reacción es poco sensi-
ble y de técnica complicada.
La hemoaplutinación (Jacobs y L u n d e.
1957); ha sido empleada para el diagnóstico
de esta enfermedad. pero presenta los incon-
venientes de la preparación: del antígeno. cuya
normalización es difícil de gobernar hasta la
fecha por no disponer de métodos que nos per-
mitan' tener el parásito exento de proteínas
extrañas.
La prueba 'alérgica o. iniiedetmo-reeccián
a la toxoplasmina (Fr.ankel 1948) usando li-
sados de toxoplasma, presenta nruchas reac-
ciones falsas de tipo alérgico .. por eso su im-
portancia como método diagnóstico se ha li-
mitado a encuestas epidemiológicas.
La reacción del colorante o modificación ci-
toplásmíca [Sabín. Enchenwal, Feldman y [a-
cobs, 1952) modificada en su fase final por
Pan galos y col. (1956) que consiste en teñir
los toxoplasmas con colorante de May-Grun-
wal-Giemsa, Esta prueba es una de las que
más se usan actualmente por considerársela
de gran valor clínico por su sensibilidad.
comprobada su efectividad por una gran can-
tidad de investigadores. Esta prueba presenta
por ahora 'el inconveniente de que. se requiere
para el antígeno, conservar. el toxoplasma vi-
vo por pases sucesivos en ratones y ~n' buen
registro de factor. -accesorio.
La reacción V (Lr), p r u e b a biológica uti-
lizando el pez, Lebístes reticulatus (Guppy).
Varela y col. 1957. Esta prueba, .seqún los re-
sultados de sus autores. es muy sensible. su
técnica es muy sencilla y su costo muy bajo.
lo que permite practicarla en cualquier labo-
ratorio de análisis clínicos.
Por considerar hasta la fecha. estas dos
últimas pruebas como de mayor utilidad de
diagnóstico haremos una breve descripción de'
sus técnicas.
362
Prueba del colorente.:« Con' el suero san-
guíneo problema. sin desensibílizar, se hacen
diluciones con solución salina (CL Na al
0.9 %) del 1/8 al 1/4096 o más; a cada tu-
bo conteniendo 0.1 ml., de antígeno [toxo-
plasmas vivos obtenidos del exudado perito-
neal de ratones de tres días de inoculados. re-
cogidos en tubo con anticuagulante. heparina
o citrato de sodio al 3.8 % y agregándole por
cada 0.2 mI. de exudado. 0.8 ml de factor ac-
cesorio. (suero humano negativo a toxoplas-
mosis). Los tubos se agitan y se colocan a ba-
ño maría a 379 C. durante una hora. Luego
seguirnos:
10.-- La modificación de Pan galos y col.
que consiste. en tomar con asa de platino una
pequeña cantidad de cada tubo y hacer una
extensión en porta objetos. dejarla: secar. fi-
jarla y colorearla por May-Grunwal-Gíemsa.
20.- La técnica clásica. depositando en
cada tubo. 0.02 de azul de metileno (éste se
prepara poniendo 9.73 ml de sol. (Na2 C03)
al 0.53 % más 0.27 mI. de (N a2 B40. 7-10
H20) al 1.91 %. más 3 ml., de solución alco-
hólica saturada de azul de metileno).
Se coloca una gota sobre portaobjetos. se
cubre y se observa en el microscopio con ob-
jetivo seco fuerte.
La reacción se considera positiva. cuando
el protoplasma del parásito no se colorea. En
la práctica. en el campo del microscopio se
observan toxoplasmas coloreados y no co-
loreados. en este caso contarnos 100 a 200 pa-
rásitos y si en la suma hay mas de 50 % de
y
toxoplasmas sin colorear la consideramos po-
sitiva. en el caso contrario. la damos como
negativa. En la técnica de Pan galos y Col. la
observación se. hace con objetivo de inmersión.
lo cual nos permite apreciar. aparte de los
cambios de coloración. ciertas modificaciones
estructurales (cromatolísís}.
Prueba (Lr ) técnica Varela.- Se toman
dos o tres mI. de líquido cefalorraquídeo. se
colocan en un tubo de ensayo de 195 por 22
mrn., se' le añade 6 Ó 9 mI. de pírídína (C5
H 5 N). inmediatamente se coloca en baño
maria a 559C haciendo pasar al mismo tiem-
po una corriente de aire por el tubo a fin de
eliminar toda la pírídina. El residuo que que-
da se disuelve en 20 mI. de agua de la llave
y se introducen uno o dos peces hembras' (Le-
.bístes 'retículatus }. Estos peces que son de
D\~6~05\\(O de \6 \OjOPl~~~O~\2>.
':¡)rueb \....r. 1ecoica \jare\a.
a

1.8 aleta dor~81,después de haber -

o
-1 J L-¡";f,+rl. ....' _,,//7 puesto el pez. en ey.tracl delre5LCQ
Aleta dor/J81de ~ d fermo con
egrafajoplasmo:;i:>.-
~ Cf)nlos :romaloforoS que aparecen. eL': e;a"cha§'n & cor pon-
corno pe9uenas !¡neas.· den 8 los crorfl8lóforolf.

peZ después de haber sido puesto

en ejtredo de LCQ de un enfermo -
con fOjoplasmosj~.
pez. normal.
EU~TAQ\} lO HOCH.

color gris verduzco, cuando la prueba es po- obrando sobre los cromatóforos de las aletas
sitiva se enegrecen poco a poco hasta obscu- y de las escamas que están situados en finas
recerse, la prueba comienza a los lOa 15 mino hileras. estallan y se aglutinan (figura anexa);
y se dá por terminada a las dos horas. (figu~ ésta observación se lleva a cabo con ayuda
ra anexa ). El fenómeno de ennegrecimiento del microscopio. cortando la aleta dorsal o
es debido a la acción de determinadas subs- extrayendo las escamas y colocándolas sobre
tancias, tales como el ácido Iisérqíco o la díe- pcrtaobjetos y viendo con objetivo seco fuerte.
tílamida., del ácido Iisérgico (LSD 25), que

SUMARIO

Revisión de los métodos de laboratorios ra el diagnóstico de fa toxoplasmosis.

directos e indirectos utilizados actualmente pa-

REFERENCIAS.

ABRAMSON H. A. y EVANs L. T. 1954.- (toxoplasma). Science. 108~660.

Lysergic acid diethylamide L S 25 11 Psy- SABIN A. B., ElcHENwALD H., FELDMAN
chobiological effects on the síamese fíghting H. A. y J A C O B S L. 1952.- Present status
fish.- Science 120. 31z9: 990~991. of clinícal manifestations of toxoplasmosis in
BIAGI F. F. 1953.- Intradermo-reaccíones mano Indications and provisíon Ior rutine se-
con tuberculina y toxoplasmina en Escárcega, rological diagnosis. J. amo medo Ass. 150, 1053~
Campeche, México. Trasmisión de la Toxo- 1064.
plasmosis. Medicina Mex. 678: 269~272. VARELA G., MARTÍNEZ RODRÍGUEZ A. E.
CERLETTI, A. y BERLE, B. 1955.- Expe- Y TREVIÑO A. 1953.- ToxopJasmosis en la
ricntie. 11; 312. República Mexicana. Rev. Inst. SaIub. En].
I JACOBS. L. Y LUNDE. M. N. 1957.- He~ Trop. Méx. 12, 3 217~224.
maqqlutlnation test for toxoplasmosis. Science. VARELA G., VÁZQUEZ A. Y TORROELLA J.
i 25. 3256-1035. 1956.- Probable existencia de la dietilamida
PANGALOS. G. E., PAVLATOS, M. Y MER~ del ácido d-lisérqico en la infección por To~
CIER, P. 1956.- 'fhe Sabín Feldman dye test xoplasma gondii. Reo, Inst. Salub. Enf. Trap.
Trans. ray. Soc. tropo Med. Hyg. 50, 6, 583~ Méx. 16, 4 29~32.
586. .
ROCIJ:. E. 19:;6.- Exploración de la inci- VARELA G., PALENCIA L. Y VÁZQUEZ A.
1957.- Utilizació[n del pez Lebistes reticuletus
dencia de toxoplasmosis en la República Me-
( Guppy) en el diagnóstico de la toxoplasmo-
xicana 'por pruebas de laboratorio. (Trabajo
presentado en el Primer Congreso Nacional siso Rev. l nst. Salub. En], Trop. México, 12
2.75~80.
de Microbiología de México).
Ro cHE .. 1956.- Consideraciones a la I WARREN J. AND SABIN A. B. 1942.- The
prueba del colorante o modificación cítoplás- I [complernent fixation reaction in toxoplasmo-
mica en el diagnóstico de la toxoplasmosis. sis infections. Proc. Soc. exp, Biol. Med. 51.
(Trabajo presentado en el Primer Congreso 11.
Nacional de Microbiología de México). -WINTER C. A. Y FLATAKER L. 1 956.-
SABIN A. y FELDMAN. H. A. 1948.- Dyes Effects of lysergic a cid diethylamíde upon
as microchemícal indicator of a new immuníty perfomance of trained r a t S. Proc. Soc. exp.
phenomenon affecting a protozoon parasite Biol. Med. 92, 285.

364