BIOTECNOLOGIA VEGETAL

PRACTICA DE LABORATORIO No. 1

TECNICAS BASICAS DE LABORATORIO

I. INTRODUCCION
El cultivo de tejidos vegetales es una técnica que busca el mantenimiento de
plantas o partes de estas tales como meristemos, embriones, hojas, células,
semillas, etc., en condiciones asépticas, en medios de cultivo artificial contenidos
en recipientes estériles y bajo condiciones controladas de luz y temperatura.
Dentro del proceso de micropropagación, la aplicación de una excelente técnica
estéril comienza con la adecuada selección de la planta madre y sigue con la
desinfección superficial, el trabajo en un ambiente estéril y el manejo correcto de
las condiciones de trabajo. Esto implica en términos prácticos aislar explantes de
plantas sanas, el uso de concentraciones y tiempos adecuados de desinfección,
trabajos en cámaras de flujo laminar y un buen uso de las prácticas de manejo. En
el presente trabajo práctico, los estudiantes tendrán la oportunidad de conocer,
caracterizar y aplicar las técnicas básicas de manejo en el laboratorio.

II. MATERIALES Y METODOS

1. Materiales
Medios de cultivo Bisturíes
Cámara de flujo laminar Cristaflex
Etanol 90% Pinzas
Cajas de petri
Agua destilada
Cultivos establecidos

2. Técnica estéril
El procedimiento general comprende:
 Lavarse las manos profusamente con agua y jabón.
 Encender la cámara de flujo laminar 15 minutos antes de iniciar a trabajar.
 Limpiar la superficie de la cámara con etanol y dejar secar.
  Encender los mecheros y colocar los materiales de soporte esterilizados.
 Flamear las pinzas a utilizar por un tiempo prudente y dejar enfriar.
 Asperjar con alcohol todos los objetos antes de introducir en la cámara.
 Al finalizar la labor, lavar todos los instrumentos utilizados y déjelos secar,
apagar los mecheros y asperjar la superficie de la cámara con alcohol y
secarla con una toalla de papel, finalmente apagar la cámara.

3. Prueba de esterilidad del aire de la cámara

 Tome cuatro recipientes con medio de cultivo esterilizado.
 Marque dos como aire de la cámara (AC) y dos con aire del laboratorio (AL)
e identifíquelos con sus nombres.
 Coloque los platos marcados como AC dentro de la cámara y remueva la
cubierta cuidadosamente sin tocar el interior y tome los dos platos
marcados como AL y colóquelos abiertos fuera de la cámara de flujo
laminar.
 Espere 5 min, cierre los platos y séllelos con cinta.
 Colóquelos en los estantes de la parte posterior del laboratorio.
 Evalúe en una semana.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Tabla para evaluación de Calidad de aire.

Plato Contaminación Tipo de Contaminación Observaciones
AC
AC
AN
AN