Microscopio

 ¿Qué es?
El vocablo griego, microscopio, proviene de micro: (significa de tamaño
pequeño) y scopio (observar). Su función es agrandar una imagen.
El microscopio es un instrumento que ha posibilitado el desarrollo científico.
Su invención se debe presumiblemente a un holandés, Zacharias Jansen, de
dudosa reputación, moral y científica, siendo la época de su creación, los
albores del siglo XVII. En 1674, Antón Van Leewenhoeck, se preocupó de
perfeccionar el invento. Su función es la de servir para observar objetos
demasiado pequeños como para poder examinarlos a simple vista.
La función del microscopio también dependerá de la aplicación en cuestión;
los primeros modelos buscaban exponer simplemente detalles que no era
posible de advertir a simple vista en las cosas, pero luego históricamente
Leeuwenhoek lo aplicó para ser la primera persona que describió
organismos como bacterias y protozoos, entre otros. Para ciertas aplicaciones en biología puede bastar un
microscopio óptico, al estilo de los que utilizaron los fundadores de la microscopía (mejorados, claro, pero con
el mismo principio), mientras que aplicaciones más sofisticadas como el estudio de materiales o el
funcionamiento interno de chips sólo pueden ser captadas por un microscopio electrónico.

 Principio del microscopio

Se basa en un sistema de lentes, el microscopio óptico
más común hoy en día es el microscopio óptico
compuesto. Este microscopio combina al menos dos
juegos de lentes, el objetivo y el ocular. Por detrás de
la muestra hay una lámpara cuya luz atraviesa la
muestra y forma una imagen en el objetivo que es
ampliada y proyectada hacia el ocular. El
funcionamiento del objetivo podría asimilarse al
funcionamiento de la lente de un proyector de cine y la
forma en la que se proyecta la imagen sobre la
pantalla.
La imagen que proyecta el objetivo se forma en el aire entre el objetivo y el ocular. Esta imagen se conoce
como imagen primaria o imagen aérea. Esta imagen primaria alcanza el siguiente juego de lentes, el ocular,
que actúa como una lupa ampliando la imagen primaria.

 Historia del microscopio

El microscopio fue inventado por un fabricante de anteojos de origen holandés, llamado Zaccharias Janssen,
alrededor del año 1590.
En 1655, el inglés Robert Hooke creó el primer microscopio compuesto, en el cual se utilizaban dos sistemas
de lentes, las lentes oculares para visualizar y las lentes objetivos. Publicó Micrographia, el primer libro en
el que se describían las observaciones de varios organismos realizadas a través de su microscopio. En su
libro, Robert Hooke llamó a los numerosos compartimientos divididos por paredes “células”.
El descubrimiento de las células provocó el rápido avance del microscopio.
El holandés Antoni Van Leeuvenhoek fabricó sus propios microscopios simples,
que lo llevaron al descubrimiento de los glóbulos rojos en 1673, así como
también al descubrimiento de las bacterias y del esperma humano. En los siglos
XVIII y XIX, se hicieron esfuerzos para mejorar el microscopio, principalmente en
Inglaterra. Los microscopios desarrollados por las empresas alemanas Leitz y
Zeiss se popularizaron a partir de la segunda mitad del siglo XIX.
El primer microscopio fabricado por Olympus se llamó Asahi. fue lanzado en
marzo de 1920, el Asahi fue realizado por Takachiho Seisakusho, la empresa
precursora de la actual Olympus.

Con un precio de ¥ 125 yenes (alrededor de ¥ 1,25 millones de yenes o US$

12.000 a valores actuales), el modelo fue considerado un producto industrial
muy valioso, digno de su precio. Fue el único modelo hecho de bronce de
cañón, una aleación de zinc y bronce utilizada para los tubos de los cañones.
El Asahi se comercializó bajo el nombre de Tokiwa, no de Olympus. Se llamó así en honor a Tokiwa Shokai,
la empresa con la que Takeshi Yamashita, el fundador de Takachiho, había estado asociado anteriormente.
Tokiwa Shokai tenía una participación en Takachiho Seisakusho y también era responsable por la
comercialización de los productos de Takachiho en esa época. La marca Olympus, que debía reemplazar a
Tokiwa, se lanzó al año siguiente.

 Partes del microscopio

- Ocular: lente situada cerca del ojo del observador (por donde mira). Su misión es ampliar la imagen del
objetivo. Suelen tener dos oculares, por eso se llaman binoculares, si solo tiene uno se llama monocular.
- Tubo Óptico: el tubo óptico se puede acercar o alejar de la preparación (lo que se quiere ver) mediante
un tornillo macrométrico o de grandes movimientos que sirve para realizar un primer enfoque.
- Tornillo Macrométrico: permite hacer un movimiento
rápido hacia arriba o hacia abajo del tubo o la platina,
y se utiliza para localizar la imagen a observar. 
- Revólver: contiene los sistemas de lentes objetivos.
Permite, al girar, cambiar los objetivos. La esfera se
suele llamar cabezal y contiene los sistemas de lentes
oculares (monoculares o binoculares).
- Brazo: es una pieza metálica de forma curvada que
puede girar; sostiene por su extremo superior al tubo
óptico y en el inferior lleva varias piezas importantes.
- Platina: lugar donde se deposita la preparación que
se quiere observar. Tiene en su centro una abertura
circular por la que pasará la luz del sistema de
iluminación.
- Objetivo: lente situada cerca de la preparación.
Amplía la imagen de ésta determinando la cantidad de
aumentos con la que queremos observar.
- Pinzas De Sujeción: parte mecánica que sirve para
sujetar la preparación. La mayoría de los
microscopios modernos tienen las pinzas adosadas a un carro con dos tornillos, que permiten un avance
longitudinal y  transversal de la preparación. 
- Condensador: lente que concentra los rayos luminosos que inciden sobre la preparación. El condensador de
la parte de abajo también se llama foco y es el que dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
- Tornillos De Enfoque: macrométrico que aproxima el enfoque y micrométrico que consigue el enfoque
correcto.
- Base: sujeción de todo el microscopio.

 Tipos de microscopios

Microscopio Compuesto: es un aparato óptico hecho para agrandar objetos, consiste

en un número de lentes formando la imagen por lentes o una combinación de lentes
  posicionados cerca del objeto, proyectándolo hacia los lentes oculares u el ocular. El
microscopio compuesto es el tipo de microscopio más utilizado.

Microscopio Óptico: es un tipo de microscopio compuesto que utiliza una combinación

de lentes agrandando las imágenes de pequeños objetos. Los microscopios ópticos
son antiguos y simples de utilizar y fabricar.
Microscopio Digital: tiene una cámara CCD adjunta y está conectada a un LCD, o a
una pantalla de computadora. Un microscopio digital usualmente no tiene ocular para
ver los objetos directamente. El tipo triocular de los microscopios digitales tienen la  
posibilidad de montar una cámara, que será un microscopio USB.

Microscopio Fluorescente: es un tipo especial de microscopio liviano, que en vez de

tener un reflejo liviano y una absorción utiliza fluorescencia y fosforescencia para ver
las pruebas y sus propiedades.  

Microscopio Electrónico: es uno de los más avanzados e importantes tipos de

microscopios con la capacidad más alta de magnificación. En los microscopios de
electrones los electrones son utilizados para iluminar las partículas más pequeñas. El
 
microscopio de electrón es una herramienta mucho más poderosa en comparación a
los comúnmente utilizados microscopios livianos.

Microscopio Estéreo: utiliza dos objetivos y dos oculares que permiten ver un
espécimen bajo ángulos por los ojos humanos formando una visión óptica de tercera
  dimensión.

Microscopio Liviano Compuesto: contienen las siguientes partes: lentes oculares,

brazo, base, iluminador, tablado, resolving nosepiece, lentes de objetivo y lentes
condensadores. Detalles de las parte del microscopio. Partes del microscopio

Cámara De Microscopio es un aparato de video digital instalado en los microscopios

livianos y equipados con USB o un cable AV. Las cámaras de microscopio digitales
son habitualmente buenas con microscopios trioculares.  

 Resolución o Poder de resolución

El poder de resolución es la capacidad que tiene el microscopio de poder ver dos puntos en forma separada.
Cuando la distancia entre los puntos disminuye se llega a un límite a partir del cual ya que no se ven los
puntos en forma separada, sino unidos. En ese momento se ha alcanzado el límite de resolución del
microscopio.
El poder de resolución está determinado en parte por la longitud de onda de la radiación empleada para
iluminar el espécimen y es inversamente proporcional a la misma, es decir, a menor longitud de onda, mayor
poder de resolución. El haz de electrones puede tener longitudes de onda variables, las cuales influyen en el
límite de resolución que a su vez dependerá del voltaje empleado para acelerar los electrones. 

Voltaje de Aceleración Limite de resolución teórico

Longitud de onda (Å)
(kV) (Å)
10 0.122 (0.122nm) 3.7 (0.37nm)
20 0.086 (0.0086nm) 2.9 (0.29nm)
 50 0.054 (0.0054nm) 2.1 (0.21nm)
100 0.037 (0.0037nm) 1.7 (0.17nm)
200 0.025 (0.0025nm) 1.3 (0.13nm)
500 0.014 (0.0014nm) 0.9 (0.9nm)
1000 0.009 (0.0009nm) 0.7 (0.07nm)

Con el microscopio electrónico se puede alcanzar una resolución de aproximadamente 40.000 veces más que
el poder de resolución del microscopio de luz y 2 x 106 veces el poder de resolución del ojo humano.

 Aumento y ¿Cómo se calcula el aumento?

El poder de aumento de una lente está determinado por el grado de curvatura
de su superficie y la distancia focal. En las lentes convexas mientras mayor sea
la curvatura, menor será la distancia focal y mayor será el aumento. El
microscopio compuesto aumenta en dos etapas y puesto que una sola lente no
es suficiente se deben colocar varias lentes una detrás de la otra, potenciando
de esta manera el poder de aumento. El primer juego de lentes, cercano al
objeto en estudio, se denomina objetivo y el segundo juego, cercano al ojo del
observador se denomina ocular (11). Cada sistema de lentes es capaz de
producir una imagen aumentada cuyo valor se enuncia con la letra x, así que
10x significa que la imagen está aumentada 10 veces.
Para conocer en el microscopio compuesto el aumento definitivo de una
imagen se aplica la siguiente fórmula:

AUMENTO TOTAL: Aumento del objetivo x Aumento del ocular

Aunque esta fórmula básica permite obtener el aumento total de una imagen, con las técnicas de fotografía
clásica o fotografía digital y el uso de software de procesamiento de imágenes es posible lograr un aumento
suplementario. Para obtener el aumento definitivo habría que considerar los factores de ampliación que se
realizan en la pantalla del computador (para luego imprimirla) o al copiar la foto a papel mediante la técnica de
fotografía clásica.
El poder de aumento de un sistema óptico tiene sus límites y el aumentar las imágenes acarrea pérdida de
información o detalles del objeto estudiado. Esto puede ser resuelto mediante otro principio: La resolución.
Con el microscopio compuesto clásico es posible alcanzar un aumento máximo de 1000x. Esta limitación ha
sido resuelta empleando un haz de electrones en lugar de un rayo de luz visible, y se abrió así una nueva era
con la microscopía electrónica aplicada al estudio morfológico.

 ¿Qué es refringencia?
La refringencia es cuando un cuerpo produce refracción es decir la refracción es el cambio de dirección que
experimenta una onda al pasar de un medio material a otro. Sólo se produce si la onda incide oblicuamente
sobre la superficie de separación de los dos medios y si éstos tienen índices de refracción distintos. La
refracción se origina en el cambio de velocidad de propagación de la onda.

 Bibliografía

- http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo3_4.htm
- http://www.areaciencias.com/partes-microscopio.htm
- https://sites.google.com/site/timesolar/ondas/refraccion
- https://quinto18de5.wikispaces.com/Zacharias+Janssen