INGENIERÍA QUÍMICA

MICROBIOLOGÍA INDUSTRIAL Y BIOTECNOLOGÍA

13 de mayo del 2020
Elaborado por: Ramiro Amari

CONSULTA 4

 Cite al menos 2 cultivos mixtos que se han probado a escala de laboratorio o

industrial para producir alcohol a partir de melaza de caña.

Por lo general la melaza se usa para la producción de Saccharomyces cerevisae a continuación se

describen dos tipos de cultivo mixto.

1. Para dibujar la curva de crecimiento, la melaza de caña de azúcar se trata para eliminar
contaminantes e impurezas que podrían interferir con el crecimiento óptimo de
Saccharomyces cerevisiae. Este procesamiento se realiza de la siguiente manera.
La concentración de melaza de caña seleccionada se pesa y disuelve en agua estéril,
calentando y agitando hasta diluir totalmente. Posteriormente, se centrifuga tres veces
con el fin de retirar gran parte de impurezas y contaminantes; se esteriliza por 20 minutos
a 20 libras de presión. Por último, se adiciona ampicilina a una concentración de (300
mg/L) (Pedroza, 2013) y se procede a realizar las curvas de crecimiento de
Saccharomyces cerevisiae.

2. Disolverlo en un vaso de precipitados que contenga 600 ml de agua destilada hasta que la
concentración alcance 16 ° Brix, luego centrifugar y filtrar para eliminar las impurezas,
luego esterilizar en autoclave a 20 PSI de presión durante 15 minutos y pasar a través de
un refractómetro Concentración de corrección de lectura. Se toma una muestra y se
realiza la lectura de los azúcares iniciales de la solución mediante la técnica de
cromatografía líquida de alta resolución HPLC.
La determinación se realiza tanto para azúcares como para etanol de la siguiente manera:
La muestra se centrifuga en tubos eppendorf por 10 minutos a 10000 rpm, el
sobrenadante se pasó a través de filtros de membrana 0,22 µm y se inyectaron 20 µl en
una columna (30 cm x 6,5 mm), tamaño de partícula de 8 µm, la temperatura de la
columna fue de 65°C.
El tiempo de corrida del análisis debe ser de 30 minutos durante los cuales la muestra
fluye a 0,4 mL min-1 con H2 SO4 (5 mL) de manera isocrática.

Referencias
[1 Pedroza, Manuel, « Produccion de Saccharomyces cerevisae a partir de la melaza de caña,
] Florida, Mac Graw Hill, 2013, p. 112.

[2 A. Blanco, de Química Biológica. , Buenos Aires, N/I, 2008 , p. 80.

]