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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL

CALLAO

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

TEMA: IDENTIFICACIÓN DE MOHOS Y
LEVADURAS

CURSO: Microbiología
PROFESOR: Dra. Sonia Herrera Sanchez
ALUMNOS:

CICLO: V
GRUPO HORARIO: 90G

2019
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LEVADURAS

I. INTRODUCCIÓN

Los mohos y levaduras comúnmente conocidos como hongos también se les

llama eumicetos, no producen flagelos, es decir son inmóviles la mayor parte
de ellos, la mayor parte de ellos se clasifican en mohos unicelulares
(Levaduras) y mohos filamentosos (mohos propiamente dichos).
Tanto los mohos como las levaduras presentan células eucariotas es decir con
cromosomas múltiples, membrana nuclear bien definida, mitocondrias, retículo
endoplasmático y pared celular.
Las levaduras son hongos de talo unicelular, capaces de reproducirse
asexualmente por gemación o fisión. Algunas especies pueden formar micelio,
y la mayoría de ellas fermentan uno o varios azúcares. Su identificación de
levaduras siguiendo pruebas morfológicas lo que nos permitirá aproximarnos al
género al que pertenecen teniendo en cuenta que la identificación definitiva se
hace en base a pruebas bioquímicas
Los hongos, en particular las levaduras, son esenciales para muchos procesos
industriales en los que está implicada la fermentación. Son ejemplos de ello la
elaboración del pan, el vino y la cerveza. También desempeñan un importante
papel en la preparación de algunos quesos, la salsa de soja y el sufu ; en la
producción comercial de muchos ácidos orgánicos (cítrico, gálico), de ciertos
fármacos (ergometrina, cortisona), y en la producción de muchos antibióticos
(penicilina, griseofulvina) y el inmunosupresor ciclosporina. Además, los
hongos constituyen importantes herramientas de investigación de procesos
biológicos fundamentales.

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II. OBJETIVOS

 Observar colonias de diferentes especies de mohos y levaduras

 Identificar los diferentes mohos y levaduras presentes en el maní en

bolsa

 Contabilizar el número de colonias con el uso del contador de colonias y

analizar si excede o no los límites máximos permisibles.

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III. MARCO TEÓRICO

a) OBSERVACIÓN DE LOS HONGOS

Frecuentemente pueden observarse crecimiento de hongos sobre los
alimentos y otros materiales. Se examinan estos sustratos con un lente simple
pueden distinguirse el cuerpo vegetativo formado por una masa de filamentos
ramificados e entrelazados denominada Micelio. Cada filamento de micelio
constituye una Hifa.

En algunos hongos, el protoplasma recorre las hifas en forma interrumpida,

constituyendo hifas Aceptadas o Cenocíticas. Las hifas de otros hongos
tienen paredes transversales llamadas septos con uno o varios poros que
permiten el paso del protoplasma. A este tipo de hifas se les denomina
Septadas. Los hongos se reproducen asexualmente a través de esporas
asexuales desarrolladas dentro de un esporangio, se denominan
Esporangiosporas. Si las esporas se reproducen libremente en el extremo o
allado de las hifas, se denominan Conidiosporas. Existen hongos unicelulares
que no forman estructuras filamentosas, estos reciben el nombre de levaduras
y pueden distinguirse de las bacterias por su mayor tamaño y por la presencia
de un núcleo simple. Ocasionalmente puede observarse el desarrollo de
estructuras conspicuas denominadas Cuerpos Fructíferos los cuales portan
las esporas sexuales de reproducción. Estas estructuras se utilizan como
base de la clasificación natural de los hongos. De esta manera se definen tres
divisiones:
Zygomicota, Ascomicota y Basidiomycota

El micelio de los Zygomycota es aceptado excepto en las estructuras de

reproducción. Los miembros de esta división forman esporas asexuales de
tipo esporangiosporas. Las esporas sexuales son la denominadas Zigosporas

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Que desarrollan en ausencia de un cuerpo fructífera. Los hongos al igual que

la mayoría de las bacterias son heterótrofos, ningún hongo es capaz de crecer
bien en ausencia de sustancias alimenticias orgánicas. Ningún hongo posee
pigmentos fotosintetizantes y ninguno es capaz de utilizar el dióxido de
carbono. Sin embargo, en presencia de un suministro exterior de azucares de
otro alimento orgánico, muchos hongos exhiben una sorprendente capacidad
de síntesis y produce una gran variedad de sustancias orgánicas complejas.
La mayor parte de hongos son filamentosos. Los filamentos conocidos por
hilos están ordinariamente muy ramificados y forman colectivamente el talo
vegetativo o Micelo. En los hongos superiores las hifas pueden agregar
separa formar estructuras sólidas complejas que en algunas especies pueden
alcanzar un tamaño muy considerado. Los Ascomycotas tienen micelio
septado. La reproducción asexual es muy variada involucrando procesos de
fisión, gemación, fragmentación, formación de Clamidiosporas o formación de
conidias, dependiendo de las especies y delas condiciones ambientales. La
fisión y la gemación son comunes en levaduras mientras que la mayoría de
ascomicetos forman uno o varios grupos de esporas terminales llamadas
Conidia que desarrollan a partir de hifas ramificadas llamadas Conidioforos y
Esterigmas. Las esporas sexuales son llamadas Ascosporas desarrolladas
dentro de sacos y protegidos en cuerpos fructíferos denominados
Ascoscarpos.

b) HABITAT:
Los hongos ocupan una amplia variedad de ambientes. La mayoría ocupa los
lugares húmedos de la tierra, aunque algunos en particular las especies de
Aspergillus, Penicillum pueden resistir unas condiciones de mayor sequedad.
Muchos hongos son parientes activos de plantas, incluso de las más
importantes plantas cultivadas y algunas especies causan enfermedades en
el hombre y en los animales domésticos.

C) REPRODUCCIÓN:

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La reproducción en los hongos se realiza habitualmente por esporas. Los más

frecuentes son unas células aisladas incoloras, pero pueden poseer gruesas
membranas esculpidas pueden llamar apéndices o pueden estar rodeadas de
una cubierta gelatinosa. La mayor parte de los hongos producen más de una
especie de esporas, cuando las condiciones son favorables al crecimiento de
estas. La mayoría de los hongos son muy variables, tanto en condiciones
naturales como en el cultivo de laboratorio. Algunas veces la variación esta
inducida por cambios en las condiciones ambientales y el hongo regresa a la
forma manual cuando revierten los cambios ambientales.

IV. CONCLUSIONES

 Aprendimos la importancia de un medio de cultivo y los tipos que existen

de ellos.
 Con la finalidad de que se desarrollen un tipo de bacterias, conocimos
sus nutrientes y el medio que estos requieren.

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IV. MATERIALES Y MEDIOS DE CULTIVO

solución salina Agar Sabouraud

Placas Petri Contador de colonias

Balanza Mechero

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Desinfectantes Probeta

Fiola Pipeta

V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

V.1. Para la muestra de Maní Sembrado

1. Preparar 1L de solución salina

2. Pesar 10 g de muestra

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3. Colocar la muestra pesada en un matraz esterilizado y adicionar 90 ml

de la solución salina esta muestra es equivalente a 10^-1

4. Realizar dos diluciones, tomar 1ml de la muestra y 9 ml de solución

salina que equivale a 10^-2

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5. Colocar el medio de cultivo Sabouraud hasta fusión completa y luego

dejar enfriar hasta 60 °C

6. Tomar 1ml de la muestra problema colocarlo en la placa Petri y

adicionar el medio de cultivo, homogenizar la muestra y dejar enfriar
hasta que el medio y la muestra al darle la vuelta a la placa no se caiga
o desarme. En todo momento se debe tener el mechero encendido
para evitar la contaminación con el medio ambiente.

7. Colocar la placa bien identificada en la incubadora a 37°C por 24, 48 o

72 horas según la ficha técnica de medios de cultivo.

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V.2. Para muestras de observar el aspecto de la colonia de

levaduras

Contar el número de colonias con el uso del contador de colonias, eso

está registrado en la parte VI en los resultados

VI. RESULTADOS

Para los Mohos:

 N° de colonias: 375

Para las Levaduras:

 N° de colonias: 457

En ambos casos se hizo una dilución de 10^ (-1)

RESULTADOS
 
(UFC/ml)

MOHOS 375x10^ 1

LEVADURAS 457x10^ 1

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VII. DISCUSIÓN

1. De la práctica se lograron contabilizar 375 colonias de mohos y 457

colonias de levaduras gracias al contador de colonias.

2. Se obtuvieron resultados de 375x10^ 1 UFC/ml y 48x10^ 1 UFC/ml de

mohos y levaduras respectivamente.

3. De acuerdo a la NORMA RM 591-2008-MINSA los resultados obtenidos

excedían el LMP por lo cual se les consideró no aptos.

4. Este resultado posiblemente se deba a la falta de énfasis al momento de

manipular la muestra y dejamos que se mezcle con los microorganismos
del medio ambiente.

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VIII. RECOMENDACIONES

- Esterilizar correctamente los materiales en la estufa a excepción de los

matraces graduados.

- Desinfectar el área de trabajo para un buen desarrollo de la práctica.

- Lavarse las manos y utilizar guantes, mascarilla y cofia.

- Tratar de contabilizar las colonias de mohos y levaduras lo más correcto

posible.

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IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

 Cerra, H. et al (2013). Manual de Microbiología Aplicada a las Industrias

Farmacéutica, Cosmética y de Productos Médicos. Buenos Aires.
Argentina.

 Morales, M. et al (2012). Manual de Microbiología. Departamento de

ciencias básicas academicas de Biología

 -Cuervo, A.(2010). Manual de Protocolos de Microbiología General.

Universidad de San Buenaventura seleccional Cali

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X. ANEXOS
Cuestionario

1. Dibujar las estructuras de reproducción del moho.

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2. Anota el nombre del moho identificado: Aspergillus flavus y

Aspergillus

3. Anotar la composición y utilidad de los medios de cultivo:

Saboraud, agar de papa dextrosa y agar de rosa bengala.

AGAR SABORAUD

 Composición

FÓRMULA (en gramos por litro)

Peptona 5.00
Tripteína 5.00
Glucosa 40.00
Cloranfenicol 0.05
Agar 15.00
pH (final) 5.6 ±0.2

 Utilidad

Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y desarrollo de

hongos, particularmente los asociados con infecciones cutáneas
(piel, pelo).

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En el medio de cultivo, la peptona, la tripteína y la glucosa son los

nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El alto
contenido de glucosa, la presencia de cloranfenicol y el pH ácido
inhiben el desarrollo bacteriano y favorecen el crecimiento de
hongos y levaduras. El agar es el agente solidificante.

AGAR PAPA DEXTROSA

 Composición

FÓRMULA (en gramos por litro)

Infusión de papa 4.00
Dextrosa 20.00
Agar 15.00
pH (final) 5.6 ±0.2

 Utilidad

El Agar Papa Dextrosa (Potato Dextrose Agar, PDA, por sus

siglas en inglés) es un medio de propósito general para levaduras
y mohos que puede ser suplementado con ácidos o antibióticos
para inhibir el crecimiento bacteriano.
Es recomendado para uso con métodos de conteo en placa para
alimentos, productos lácteos y pruebas realizadas en cosméticos.
El Agar Papa Dextrosa (PDA) puede ser usado para el cultivo de
levaduras y mohos clínicamente significativos. La base (infusión

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de papa) nutricionalmente rica, estimula la esporulación de los

mohos y la producción de pigmentos en algunos dermatofitos.

AGAR ROSA DE BENGALA

 Composición

FÓRMULA (en gramos por litro)

Digerido enzimático 5.00
animal y vegetal
Fosfato potásico 1.00
Sulfato de magnesio 0.50
Dicloran 0.002
Rosa de Bengala 0.025
Glucosa 10.00
Cloranfenicol 0.10
Agar 15.00
pH (final) 5.6 ±0.2

 Utilidad

Medio ideal para la máxima recuperación de hongos (levaduras y

mohos). Las bacterias acompañantes son inhibidas por el
cloranfenicol, antibacteriano de amplio espectro. Gracias al pH
neutro, las células y esporas dañadas crecen sin problemas, de

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ahí su magnífica recuperación. El Rosa Bengala y el dicloran

limitan la invasión de la placa por mohos de crecimiento rápido.
Pero la luz intensa lo hace inhibitorio. No utilizar medios
irradiados a dosis normales ni incubar fuera de estufas o armarios
cerrados.

4. ¿Por qué es necesario realizar la técnica de microcultivo para

identificar mohos?

El microcultivo es el procedimiento idóneo para la identificación de

estructuras fúngicas, pues te permite visualizar al microscopio el
micelio en su conjunto no solo una parte del mismo, como ocurre con el
método de disociación.
5. Dibujar las estructuras de reproducción de una levadura.

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6. Nombre de la levadura identificada.

El Saccharomyces exiguus (también conocido como S. minor), una
levadura silvestre que se encuentra en plantas, frutas, granos y el maní.

7. ¿Cuáles son los componentes de cada uno de los medios de

.cultivo y por qué se utilizan?

Medio más utilizados:

 Agar Sabouraud
Presenta Cicloheximida y Clorafenicol, se utiliza para el
aislamiento e identificación de dermatofitos y cándidas.
 Agar Dextrosado
Presenta Cicloheximida y Clorafenicol, se utiliza para el
aislamiento e identificación de patógenos ambientales y
oportunistas.
 Agar de Urea
Se utiliza para identificar levaduras e identificar diferentes
especies de trichophyton.

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