ANEXO 3

Curso: Cromatografía
Código: 401542
Nombre de la Tarea: Tarea 3 – Técnicas específicas

Temáticas para desarrollar:

- Cromatografía iónica: generalidades, equilibrios en el intercambio
iónico, intercambiadores iónicos y aplicaciones.
- Cromatografía de fluidos supercríticos: generalidades, fase
estacionaria, fase móvil, instrumentación: sistemas de muestreo,
condiciones, detectores; eficiencia, resolución y aplicaciones.

Fecha de desarrollo: 31 de octubre al 27 de noviembre de 2019

Nombre del estudiante: Daison Paez Trujillo

Código: 1010038854
Programa: Ingeniería de Alimentos

EJERCICIO 1 – CROMATOGRAFÍA IÓNICA

Tabla 1. Ejercicio 1.1 – Generalidades de la cromatografía iónica

Oraciones
a. Cromatografía de intercambio aniónico.
b. Cromatografía de intercambio catiónico.
c. Intercambiadores iónicos.
d. La relación carga y fuerza del soluto es mayor.
e. Matriz aniónica.
f. Matriz catiónica.
g. Resina.
h. Solución amortiguadora de pH.

Mapa conceptual

H
G

F E

D B A
 Tabla 2. Ejercicio 1.1 – Generalidades de la cromatografía iónica
Afirmación
Según la influencia del pH, los
intercambiadores iónicos
pueden ser débiles o fuertes.
La cromatografía iónica se
caracteriza por su
reversibilidad.
La reacción que representa el
equilibrio en cromatografía de
intercambio aniónico es:
F V Argumento
Débiles: Las catiónicas débiles
presentan grupos carboxílicos solo
ionizables a valores altos de pH. Las
aniónicas débiles contienen grupos
amino primarios, secundarios o
terciarios de escaso poder
X intercambiador
Fuerte: las catiónicas fuertes, grupos
sulfónicos ionizados incluso a bajos
valores de pH.  las aniónicas fuertes
grupos amonio cuaternario, ionizados
a cualquier valor de pH.3,6,7
La cromatografía iónica es un proceso
que permite la separación
de iones y moléculas polares basado
en las propiedades de carga de las
X
moléculas. Puede ser usada en casi
cualquier tipo de molécula cargada,
incluyendo proteínas grandes
y nucleótidos y aminoácidos pequeños
X La cromatografía de intercambio
iónico conserva los analitos
basándose en las interacciones
de Coulomb. La fase estacionaria
R+A- + B+  R+B- + A+ muestra en la superficie grupos
funcionales iónicos (R-X) que
La reacción que representa el
interactúan con iones de carga
equilibrio en cromatografía de
opuesta del analito.
intercambio aniónico es:
R+C- + B+  R+B- + C+

Donde, R representa la
resina, A y C el ion de la fase
móvil, y B la carga del soluto.
Referencias bibliográficas:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-75152000000300007

https://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa_de_intercambio_i%C3%B3nico

Tabla 3. Ejercicio 1.2 – Análisis de nitritos y nitratos

Pregunta Respuesta
¿Por qué para la muestra del No se logró obtener una concentración de
Jamón no se logró obtener nitrato y nitrilo en el Jamón ya que no es
una concentración de nitrato y prescindible el uso de estos.
nitrito?
Muestra Nivel permisible
NO−¿¿
2 NO−¿¿
3

Salami No SI
Cábano No SI
Jamón - -
 EJERCICIO 2 – CROMATOGRAFÍA DE FLUIDOS SUPERCRÍTICOS

Tabla 4. Ejercicio 2.1 – Fluidos supercríticos

Pregunta
¿Por qué la cromatografía de
fluidos supercríticos es un
técnica en fase normal?
Respuesta
La cromatografía de fluidos supercríticos es
una técnica híbrida entre la cromatografía
de gases y la HPLC, que combina lo mejor
de ambas técnicas. Esta técnica es
importante porque permite la separación de
mezclas en las que no es adecuada la
aplicación de la GC ni de la HPLC.

Es la temperatura límite por encima de la

¿Qué es temperatura crítica?
¿Qué es presión crítica?
cual un gas miscible no puede
ser licuado por compresión. Por encima de
esta temperatura no es
posible condensar un gas aumentando
la presión.
Es una característica de cualquier sustancia,
que define el campo en el que ésta puede
transformarse en vapor en presencia
del líquido correspondiente.

Referencias bibliográficas:
http://www.cie.unam.mx/~ojs/pub/Liquid3/node9.html
https://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa_de_fluidos_supercr
%C3%ADticos

Relación de conceptos
Cuando en la fase móvil está compuesta por un fluido supercrítico que está
por debajo de su presión crítica y por encima de su temperatura critica,
actúa como un líquido.

Cuando en la fase móvil está compuesta por un fluido supercrítico que está
por encima de su presión crítica y por debajo de su temperatura critica,
actúa como un gas.

Tabla 5. Ejercicio 2.1 – Tipos de columna en cromatografía de fluidos

supercríticos
Tipos de Longitud Material Características
columna
Respuesta: 2 a Respuesta: están Respuesta:
60 metros construidas
Estas son más
de acero
comunes en la
inoxidable, vidrio, sí
actualidad (2005)
lice fundida o teflón.
debido a su mayor
rapidez y
Capilar o
eficiencia.
tubular
Las presiones de
entrada varían
entre 10 y 25 psi lo
que da lugar a 1 a
25 mL/min en
columnas capilares.
De relleno o Respuesta: Respuesta: Respuesta:
  Longitud de 2 consisten en unos  El interior se
a 3 metros tubos de vidrio, rellena con un
metal (inerte a ser material sólido,
posible como el finamente dividido
acero inoxidable, para tener una
níquel, cobre o máxima superficie
aluminio) o teflón. de interacción y
recubierto con una
capa de espesores
entre 50 nm y 1
μm. El material de
empaquetada relleno ideal
s consiste en
pequeñas
partículas,
esféricas y
uniformes, con una
buena resistencia
mecánica, para
tener una máxima
superficie donde
interaccionar la
fase estacionaria y
el analito. 
Referencias bibliográficas:
https://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa_de_gases
 Tabla 6. Ejercicio 2.1 – Detectores
Tipo de muestra para
Detectores Características
analizar
Respuesta: Respuesta:
Hidrógeno/oxígeno
 Altamente sensible.
Detector casi universal.
 Ámbito lineal (106).
Ionización de  Límites de detección (1
llama pg./s)
 Realiza medidas
absolutas.
 Emplea un gas auxiliar
(make up).

Absorción Respuesta: Respuesta:

visible- UV  Las muestras en
 involucra la absorción
solución se ponen en
de radiación ultravioleta –
una pequeña celda de
visible por una molécula,
silicio.
causando la promoción de
 Se utilizan dos
un electrón de un estado
lámparas: una de H o
basal a un estado excitado,
deuterio para la región
liberándose el exceso de
UV, y una de W /
energía en forma de calor.
halógeno para la región
La longitud de
visible
onda comprende entre 190
 Se utiliza también una
y 800 nm.
celda de referencia que
contiene solo solvente.
 La luz pasa
simultáneamente por la
celda de muestra y la
celda de referencia.
  El espectrómetro
compara la luz que pasa
por la muestra con la
que pasa por la celda de
referencia.
 La radiación transmitida
es detectada y el
espectrómetro obtiene el
espectro de absorción al
barrer la longitud de
onda de la luz.


Respuesta: Respuesta:
es su representación gráfica Esta espectroscopia se
de la longitud de onda o de fundamenta en la absorción
frecuencia, cambiando de la radiación IR por las
continuamente en una moléculas en vibración. Una
pequeña proporción del molécula absorberá la
espectro electromagnético energía de un haz de luz
contra un % de infrarroja cuando dicha
Espectrometría transmitancia o energía incidente sea igual
infrarroja absorbancia. a la necesaria para que se
dé una transición
vibracional de la molécula.
Es decir, la molécula
comienza a vibrar de una
determinada manera
gracias a la energía que se
le suministra mediante luz
infrarroja.
Espectrometría Respuesta: Respuesta:
de masas es posible obtener Permite estudiar
información de la masa compuestos de naturaleza
molecular del compuesto diversa: orgánica,
analizado, así como obtener inorgánica o biológica
 información estructural del (incluyendo biopolímeros y
mismo, o simplemente macromoléculas naturales o
detectar su presencia y/o artificiales) y obtener
cuantificar su información cualitativa o
concentración.  cuantitativa.

Referencias bibliográficas:
https://prezi.com/v9evwumdf82a/cromatografia-de-gases-con-detector-
de-ionizacion-de-llama/
https://es.wikipedia.org/wiki/Espectroscopia_ultravioleta-visible#Caracter%C3%ADsticas_del_sistema

http://www.ehu.eus/imacris/PIE06/web/IR.htm

http://laboratoriotecnicasinstrumentales.es/analisis-qumicos/espectrometra-de-masas

Tabla 7. Ejercicio 2.1 – Tipos de cromatógrafos de fluidos supercríticos

Cromatógrafo A Cromatógrafo B

Figura 1. Cromatógrafo A Figura 2. Cromatógrafo B

(Zambrano, M. 2019) (Zambrano, M. 2019)
 Componentes
A: Fase móvil A: Registrador
B: Regulador de presión B: Detector
C: Bomba de jeringa C: Región supercrítica
D: Columna de relleno o D: Bomba reciprocante
empaquetada
E: Flujo modificador
E: Flujo modificador
F: Sistema de inyección
F: Sistema de inyección
G: Regulador de presión
G: Detector
H: Columna capilar o tubular
H: Registrador
I: Fase móvil
I: Horno termostatizado
J: Bomba de jeringa
J: Región supercrítica
K: Horno termostatizado
K: Bomba reciprocante
Lista de componentes
Bomba de jeringa. Flujo modificador.
Bomba reciprocante. Horno termostatizado.
Columna capilar o tubular. Región supercrítica.
Columna de relleno o empaquetada. Regulador de presión.
Detector. Sistema de inyección.
Fase móvil.

Tabla 8. Ejercicio 2.2 – Diagrama de fases

Inserte el diagrama de fases para dióxido de carbono
 Análisis
Respuesta:
Se deduce que por debajo del punto triple no existe la sustancia en fase
líquida, y a la presión atmosférica, el CO2 sublima por encima de -78ºC. A
diferencia del agua su curva de equilibrio de fusión-congelación tiene
pendiente positiva, porque el CO2, al igual que prácticamente el resto de
las sustancias, aumenta de volumen al fundirse. En un planeta cuya
presión atmosférica fuese mayor que 5,1 atm terrestres, los habitantes
podrían nadar en lagos de dióxido de carbono líquido. A una presión, Pc,
superior a 72,8 atm y a una temperatura, Tc, de 31ºC, (punto
crítico), donde finaliza la línea de equilibrio L-V, desaparece la distinción
entre líquido y gas, y solo existe una fase fluida, es decir por mucho que se
comprima el gas este no se puede licuar.
Presión triple (bar): 5.17 Presión crítica (bar): 74.5
Temperatura triple (K): 216.55 Temperatura crítica (K): 304.15

Tabla 9. Ejercicio 2.3 – Purificación de EPA y DHA en muestras de aceites

Análisis comparativo
EPA DHA
Respuesta:
Aceite de atún la concentración varía
de acuerdo con la fase móvil es decir
aumenta la concentración si se
utiliza el agua.
Respuesta:
En el aceite de atún se mantiene la
concentración de DHA sin importar
la fase móvil, la presión o
temperatura.

En el aceite de sardina el EPA varia Aceite de sardina baja la

dependiendo la fase móvil, pero no concentración si la fase móvil es
es tan notable dicha variable cuando agua.
se utiliza agua como fase móvil.

Aceite de pescado no se encuentra

En el aceite de pescado solamente concentración de DHA sin importar
se encuentra concentración de EPA la fase móvil.
en fase móvil con dióxido de
carbono.
Aceite de algas baja la concentración
cuando se utiliza la fase móvil de
Aceite de algas baja la concentración agua.
cuando se utiliza como fase móvil el
agua