INFORME DE LABORATORIO SOBRE TINCIN DE GRAM, TINCION DE HONGOS Y PRUEBAS

BIOQUIMICAS

Presentado por:

EDWARD ENRIQUE ROBAYO MARTINEZ

SILVIA NARVAEZ

Docente

GRUPO: AM

Universidad ECCI

BOGOTA D.C.

10/092018
 TINCION DE GRAM

PROCEDIMIENTO

Preparación del frotis:

Primero se agrega una gota de agua destilada encima de la lámina.

Se coge la aza redonda y tomamos un pedazo de la muestra de la bacteria asignada.

Realizar un frotis superficial encima de la lámina, hasta formar una película delgada

Dejar secar y pasar la lámina tres veces por la llama

EN SEGUIDA SE REALIZA LA TINCION DE GRAM

Coloree el frotis durante 1 minuto con cristal violeta de Gram

Lavar con agua destilada por 1 minuto o menos, secar el

exceso de agua sobre un papel absorbente con mucho
cuidado

Adicionar solución de Lugol y dejar actuar por 1 minuto

Lavar con agua destilada por 2 minuto o menos, secar el

exceso de agua sobre un papel absorbente con mucho
cuidado.
 Decolore por 20 segundos, adicionando alcohol cetona

Lavar con agua destilada por 1 minuto o menos, secar el

exceso de agua sobre un papel absorbente con mucho
cuidado.

Adicionar Safranina o fucsina como contraste durante 45 segundos.

Lavar con agua destilada por 2 minuto o menos, secar el

exceso de agua sobre un papel absorbente con mucho
cuidado

Seque y realice su observación en el microscopio con el objetivo de 4X, 10X, 40X, y

100X con aceite de inmersión.

RESULTADOS

La observación se realiza en el microscopio a los 8 días después de realizada la practica y los

resultados fueron los siguientes

4X
10X 40X

100X
CRITERIOS SOBRE DE NUESTRA OBSERVACION MICROSCOPICA SE PUEDE
DECIR QUE NUESTRO MICROORGANISMO ES UN COCO
LA OBSERVACION BACILO GRAM NEGATIVO.

TINCION DE HONGOS

PROCEDIMIENTO

Primero utilizamos el hongo con el que hemos venido trabajando desde el primer
laboratorio, con el fin de realizar una observación microscópica por medio del siguiente
procedimiento.

Posteriormente utilizamos un fragmento de cinta transparente de 4 a 5 cm y por el lado del

pegante se lo adherimos al hongo.

Se abre la caja de petri al lado del mechero y se coloca la cinta sobre una colonia del hongo a
observar. Haga presión suavemente sobre el micelio del hongo para tomar la muestra y luego
se retira.

Se ubica el fragmento de cinta encima de la lámina con 1 gota de azul de lactofenol.

Suavemente adherimos la cinta a la lámina y se presiona para eliminar burbujas que hayan
quedado al interior.

Se retiran los excedentes de azul de lactofenol de la lámina y se observa al microscopio con el

objetivo de 4 X, 10X, 40X y 100X.

Después llevamos al microscopio y observamos.

 RESULTADOS

4X

10X

40X
100X

PRUEBAS BIOQUIMICAS

En el laboratorio se realizaron 6 tipos de pruebas bioquímicas donde tenemos las IMVIC, TSI y LIA

IMVIC

Utilizamos pruebas IMVIC que se compone de cuatro pruebas: Indol, Rojo de

metilo, Voges-Proskauer y Citrato para la identificación de microorganismos
gram negativos, en este caso bacterias que anteriormente han sido aisladas por
un medio de cultivo.
La prueba Indol: estudia la capacidad de degradar el triptófano por medio del
caldo aminoácido que reacciona por medio de la encima triptofanasa, etano y
ácido clorhídrico.
Rojo de metilo: estudia la fermentación acido mixta, por vía de azucares mixtos,
además tienen una producción de ácidos estables en el tiempo.
Voges Proskaver: estudia la fermentación butanodiolica.
Citrato: los microorganismos pueden consumir Nitrato como una fuente de
carbono.
TSI
En las pruebas TSI (Triple sugar Irion) se utilizan 3 tres azucares, la sacarosa,
glucosa y lactosa sumándole hierro, esta prueba estudia la utilización de la
glucosa y lactosa, con producción de gas y ácido sulfúrico, puede hacer su
consumo de manera aerobia y anaerobia.

LIA

La prueba LIA que traduce lisina por el aminoácido y la lisina

descarboxinasa cuando la bacteria es capaz de metaboliza