Universidad Nacional Abierta y a Distancia

Vicerrectoría Académica y de Investigación

Guía de actividades y rúbrica de evaluación – Tarea 3 – Técnicas
específicas

- Descripción general del curso

Escuela o Unidad Escuela de Ciencias Básicas, Tecnología e

Académica Ingeniería
Nivel de formación Profesional
Campo de Formación Formación disciplinar
Nombre del curso Cromatografía
Código del curso 401542
Tipo de curso Metodológico Habilitable Si ☐ No ☒

Número de créditos 3

- Descripción de la actividad
Número
Tipo de
Individual ☒ Colaborativa ☐ de 4
actividad:
semanas
Momento de la Intermedia,
Inicial ☐ ☒ Final ☐
evaluación: unidad 3:
Peso evaluativo de la Entorno de entrega de actividad:
actividad: 60 Seguimiento y evaluación
Fecha de inicio de la actividad: Fecha de cierre de la actividad:
jueves, 9 de abril de 2010 miércoles, 6 de mayo de 2020
Competencia a desarrollar:
El estudiante identifica las características y propiedades de la cromatografía
iónica y cromatografía de fluidos supercríticos, mediante el desarrollo de
ejercicios prácticos y teóricos, con el fin de aplicar el análisis químico
cualitativo y cuantitativo en analitos de interés en la industria de alimentos.

Temáticas a desarrollar:
- Cromatografía iónica: generalidades, equilibrios en el intercambio
iónico, intercambiadores iónicos y aplicaciones.
- Cromatografía de fluidos supercríticos: generalidades, fase
estacionaria, fase móvil, instrumentación: sistemas de muestreo,
condiciones, detectores; eficiencia, resolución y aplicaciones

Pasos, fases o etapa de la estrategia de aprendizaje a desarrollar

Tarea 3 – Técnicas específicas

La tarea la conforman actividades individuales y colaborativas que integran

la estrategia de aprendizaje basada en tareas, donde se desarrollan 2
ejercicios.

Ejercicio 1. Cromatografía iónica.

Ejercicio 2. Cromatografía de fluidos supercríticos.

Actividades a desarrollar

Antes de dar inicio al desarrollo de los ejercicios que conforman la Tarea 3,

es necesario que realice las siguientes acciones básicas:
- Lea detenidamente toda la guía de actividades.

- Los aportes para el desarrollo de esta actividad se realizarán en el

 entorno de Aprendizaje Colaborativo en el tema “Tarea 3 – Técnicas
específicas”.
- Haga una lectura comprensiva de la bibliografía asignada para esta
unidad, la cual se encuentra en el entorno de conocimiento.

A continuación, se presentan 2 ejercicios que debe desarrollar de manera

individual, donde deberá relacionar conceptos, características, propiedades y
aplicaciones de los temas de estudio de la tercera unidad del curso.

Ejercicio 1. Cromatografía iónica

Realice la lectura y análisis de las siguientes referencias bibliográficas que se

encuentran en el entorno de conocimiento, e identifique conceptos de
equilibrios en el intercambio iónico, intercambiadores iónicos y aplicaciones:

- Burriel Martí, F., Arribas Jimeno, S., Lucena Conde, F., & Hernández
Méndez, J. (2008). Cromatografía. En: Química analítica cualitativa (18a.
ed.). (pp. 328-334). Madrid: Paraninfo.
- Doria, G. (2013). Introducción general a la Cromatografía. En Módulo
Cromatografía (pp. 47-49). Bogotá, Colombia. UNAD - Universidad
Nacional Abierta y a Distancia.
- Gismera, G. M. J., Quintana, M. M. D. C., & Da, S. D. C. M. D. (2012).
Introducción a la cromatografía líquida de alta resolución. (pp. 119-124)
Madrid, ES: Editorial Universidad Autónoma de Madrid.
- Morante, Z. S., & Sierra, A. I. (2007). Generalidades de la Cromatografía.
En Desarrollo de métodos analíticos para la separación quiral y su
aplicación al estudio de procesos de síntesis asimétrica. (pp. 42-43).
Madrid, España: Dykinson.
- Zambrano, M. (2016). OVI – Aplicaciones de la Cromatografía. Bogotá,
Colombia: UNAD - Universidad Nacional Abierta y a Distancia.

Descripción del ejercicio 1.1:

La cromatografía de iónica es un proceso que permite la separación de iones
y moléculas polares basadas en las propiedades de carga de las moléculas.
Puede ser usada en casi cualquier tipo de molécula cargada. En la actualidad
presenta varias aplicaciones dentro de las que se destacan las aplicaciones
en el análisis de aguas y medio ambiente.
Teniendo en cuenta lo anterior, en la Tabla 1 del Anexo 3, encontrará una
serie de oraciones marcadas con letras, asociadas a las generalidades de la
cromatografía iónica. Identifique las oraciones y complete la información del
mapa conceptual que aparece en la misma tabla. Para desarrollar este
ejercicio, es importante que realice una lectura comprensiva de las
generalidades de la técnicas, así como las características de la fase móvil y
fase estacionaria.

Con base en la lectura realizada y en la construcción del mapa conceptual,

indique si las afirmaciones que se encuentran en la Tabla 2 del Anexo 3 son
falsas (F) o verdaderas (V). Justifique su respuesta y registre las referencias
bibliográficas de consulta.

Descripción del ejercicio 1.2:

De acuerdo con el artículo de Merinoa, L., Darnerudd, P., Toldráb, F., &
Ilbäckd, N-G. (2006) Time-dependent depletion of nitrite in pork/beef and
chicken meat products and its effect on nitrite intake estimation. Food
Additives & Contaminants. 33(2), 186–192; y de D’Amore, T., Di Taranto, A.,
Vita, V., Berardi, G., & Iammarino, M. (2019) Development and Validation of
an Analytical Method for Nitrite and Nitrate Determination in Meat Products
by Capillary Ion Chromatography (CIC). Food Analytical Methods. 12,(8),
1813–1822; los alimentos procesados como los productos cárnicos emplean
−¿¿ −¿¿
especies iónicas como nitritos ( NO 2 ) y nitratos ( NO 3 ) para protegerlos de
microorganismos que pueden generar toxicidad alimentaria.

En un laboratorio de calidad alimentaria se realizó un análisis de nitritos y

nitratos de tres productos cárnicos empleando cromatografía iónica. La
concentración de los nitritos y nitratos deben monitorearse, debido al
carácter carcinógeno que puede generar la formación de nitrosaminas a
partir del nitrito. En la Tabla 1, se registran los resultados del estudio
realizado.

Tabla 1. Resultados del análisis de nitritos y nitratos por cromatografía

iónica.

Muestra
Concentración Concentración
Muestra Columna analizada
nitrito (μg/L) nitrato (μg/L)
(μg/kg)
Intercambio
Salami 52 27
aniónico
Intercambio
Cábano 46 33 500
aniónico
Intercambio
Jamón -- --
catiónico

A partir de la información anterior, indique cuál es la posible causa o razón

por la que no se logró obtener una concentración de nitrito y nitrato para la
muestra de Jamón, tenga en cuenta la instrumentación empleada para el
análisis. Registre su respuesta en la Tabla 3 del Anexo 3.

Según la Agencia de Protección Ambiental de los Estados Unidos (EPA), el

límite máximo permisible para nitrito es de 3,3 mg/L y para nitrato de 44
mg/L. Con base en los resultados del estudio, identifique si los productos
cárnicos analizados se encuentran o no en el nivel permisible de las especies
iónicas. Registre su respuesta en la Tabla 3 del Anexo 3.

Ejercicio 2. Cromatografía de fluidos supercríticos

Realice la lectura y análisis de las siguientes referencias bibliográficas que se

encuentran en el entorno de conocimiento, e identifique conceptos de fase
estacionaria, fase móvil, sistemas de muestreo, condiciones, detectores,
eficiencia, resolución y aplicaciones:

- Doria, G. (2013). Introducción general a la Cromatografía. En Módulo

Cromatografía (pp. 50-53). Bogotá, Colombia. UNAD - Universidad
Nacional Abierta y a Distancia.
- Santamaria, M. R. (2003). Extracción con fluidos supercríticos. En
Industria alimentaria: tecnologías emergentes. (pp. 129-136;140-141;
162-163) Barcelona, ES: Universitat Politécnica de Catalunya.

Descripción del ejercicio 2.1:

La cromatografía de fluidos supercríticos es una técnica de separación de

compuestos no volátiles o inestables térmicamente, así como la separación
de compuestos que tienen grupos funcionales que no se pueden detectar en
un cromatógrafo de gases o en un cromatógrafo líquido de alta eficiencia. En
esta técnica, la separación de los componentes de una mezcla se da en fase
normal y se caracteriza por tener como fase móvil un fluido supercrítico y no
generar residuos.

Diligencie de manera individual la Tabla 4 del Anexo 3 justificando por qué

la cromatografía de fluidos supercríticos es un técnica en fase normal y
defina los conceptos de temperatura crítica y presión crítica, con el fin de
completar la oración que aparece en la tabla. Relacione las referencias
bibliográficas de consulta.

Un cromatógrafo de fluidos supercríticos se caracteriza por tener ocho

componentes: 1) región supercrítica (fase móvil), 2) fluido modificador, 3)
bombas, 4) sistema de inyección, 5) horno termostatizado, 6) columna, 7)
regulador de presión y 8) detector.

1. En la región supercrítica se calienta la fase móvil hasta alcanzar la

temperatura supercrítica. El agua y el dióxido de carbono supercríticos
son los más empleados como fase móvil, ya que pueden tener
características de líquido al lograr disolver compuestos, así como
características de gas al penetrar los poros de un sólido.

2. El fluido modificador tiene la función de mejorar la separación

cuando el fluido supercrítico empleado es incapaz de separar analitos
con altas polaridades.

3. La bomba se emplea para transferir el dióxido de carbono líquido al

cromatógrafo. Existe dos tipos de bombas, la reciprocante y la jeringa;
la primera se emplea para columnas cuya fase móvil tiene un
comportamiento como un líquido y la segunda para columnas cuya
 fase móvil tienen un comportamiento como un gas.

4. El sistema de inyección se realiza para un volumen fijo o para un

volumen variable.

5. El horno termostatizado es el encargado de controlar la temperatura

de la fase móvil al recorrer la columna.

6. La columna se caracteriza por tener adsorbentes como sílice,

poliestireno o alúmina. Existen dos tipos de columnas capilar o tubular
y de relleno o empaquetada.

Con el fin de completar la información anterior, diligencie la Tabla 5 del

Anexo 3 e indique la longitud, material y las características de cada
tipo de columna empleada para el análisis de fluidos supercríticos.
Incluya las referencias bibliográficas de consulta.

7. El regulador de presión tiene la función de mantener la fase móvil a

una temperatura supercrítica mediante un limitador de presión.

8. El detector permite que la técnica tenga un alto nivel de sensibilidad y

reproducibilidad. Son compatibles con los detectores de cromatografía
de gases y cromatografía líquida de alta eficiencia. Existe varios tipos
de detectores, entre los más utilizados se encuentran los detectores de
ionización de llama, absorción visible- UV, espectrometría infrarroja y
espectrometría de masas.

Diligencie la Tabla 6 del Anexo 3 con el fin profundizar en los tipos de

detectores descritos. Incluya las referencias bibliográficas de consulta.

Con base en la información anterior y considerando que existen dos tipos de

cromatógrafos de fluidos supercríticos según el comportamiento de la fase
móvil, relacione la imagen que se presenta en la Tabla 7 del Anexo 3, con la
lista de componentes del cromatógrafo de fluidos supercríticos que se ha
descrito.

Descripción del ejercicio 2.2:

Al conocer el sistema de operación de un cromatógrafo de fluidos

supercríticos, un grupo de estudiantes decide construir un diagrama de
fases, con el fin de comprender la relación que existe entre presión y
temperatura para que el dióxido de carbono se comporte como un fluido
supercrítico. En la construcción del diagrama, calcularon los puntos de
interfase sólido-líquido, líquido-gas y sólido-gas (Tabla 2).

Tabla 2. Puntos de interfase para el dióxido de carbono.

Puntos de Puntos de Puntos de

T (° C) interfase sólido- interfase líquido- interfase sólido-
líquido (bar) gas (bar) gas (bar)
-73     2
-68     3
-63     4
-57 5 5 5
-53 60    
-48 101 7  
-43   10  
-38   15  
7   45  
 27   58  

  75  
31

A partir de la información suministrada, construya el diagrama de fases para

el dióxido de carbono e indique la presión (bar) y la temperatura (K) del
punto crítico, así como la presión (bar) y la temperatura (K) del punto triple.
Realice una análisis con base en la información solicitada, con el fin de
argumentar el estado supercrítico del dióxido de carbono. Diligencie la Tabla
8 del Anexo 3 e incluya las referencias bibliográficas de consulta.

Descripción del ejercicio 2.3:

La cromatografía de fluidos supercríticos se puede aplicar en la separación de

polímeros, compuestos organometálicos, ácidos grasos, lípidos, triglicéridos,
así como su aplicación en la industria farmacéutica, petrolera, de productos
naturales y alimentos; para esta última, un grupo de estudiantes de
Ingeniería de Alimentos emplea la cromatografía de fluidos supercríticos para
hacer una identificación de lípidos mediante la separación de compuestos en
diferentes aceites para determinar la concentración del ácido
docosahexaenoico (DHA) y ácido eicosapentaenoico (EPA), ácidos grasos
esenciales del Omega 3, ya que contribuyen al normal funcionamiento del
corazón, así como a la conservación de los niveles normales de presión y
triglicéridos. Los resultados obtenidos por los estudiantes se presentan en la
siguiente Tabla:

Tabla 3. Resultados de concentración de EPA y DHA en muestras de aceites

comerciales.
 %
Fase Presión Temperatura Concentración
Muestra
móvil (bar) (K)
EPA DHA

CO2 145 338 50 90

Aceite de atún
Agua 121 221 69 90
CO2 80-200 313 93 92
Aceite de sardina
Agua 100-200 234 88 79
CO2 100-150 313-333 95 --
Aceite de pescado
Agua 50-100 150 -- --
CO2 170 333 86 72
Aceite de algas
Agua 150-250 267 63 44

Con base en la información anterior, en la Tabla 9 del Anexo 3 realice un

análisis comparativo entre la fase móvil empleada y los porcentaje de
concentración obtenidos. Si asocia la concentración de EPA y DHA como la
cantidad pura obtenida después del análisis; indique cómo se pueden
relacionar las condiciones de análisis con los resultados obtenidos.

Entornos para
su desarrollo
Entorno de Conocimiento
− Consulta el Syllabus para conocer la estructura del
curso y el material bibliográfico de la unidad.

Entorno de Aprendizaje Colaborativo

− Realiza aportes e intervenciones en el tema titulado
“Unidad 3: Tarea 3 – Técnicas específicas”.
 Entorno de Seguimiento y Evaluación
− El estudiante que desarrolle las funciones del rol de
Supervisor deberá hacer la entrega de la actividad en
el recurso titulado “Unidad 3: Tarea 3 – Técnicas
específicas – Entrega de la actividad”.
− Registra en el E-portafolio los avances, logros y
dificultades que presente en el desarrollo de la
actividad.

Individuales:
Productos a
entregar por
el estudiante
- Desarrollar los ejercicios 1 y 2.

- Entregar el documento final con las indicaciones de la

guía, en el entorno de seguimiento y evaluación.

Lineamientos generales del trabajo colaborativo para el desarrollo

de la actividad

Planeación de
actividades
para el
No aplica.
desarrollo del
trabajo
colaborativo
Roles a
desarrollar por
el estudiante
No aplica.
dentro del
grupo
colaborativo
Roles y
responsabilida
des para la
producción de No aplica.
entregables
por los
estudiantes
Las Normas APA es el estilo de organización y presentación
de información más usado en el área de las ciencias
sociales. Estas se encuentran publicadas bajo un Manual
que permite tener al alcance las formas en que se debe
presentar un artículo científico. Aquí podrás encontrar los
Uso de aspectos más relevantes de la sexta edición del Manual de
referencias las Normas APA, como referencias, citas, elaboración y
presentación de tablas y figuras, encabezados y seriación,
entre otros. Puede consultar como implementarlas
ingresando a la página http://normasapa.com/

Políticas de En el acuerdo 029 del 13 de diciembre de 2013, artículo 99,

plagio se considera como faltas que atentan contra el orden
académico, entre otras, las siguientes: literal e) “El plagiar,
es decir, presentar como de su propia autoría la totalidad o
parte de una obra, trabajo, documento o invención
realizado por otra persona. Implica también el uso de citas
o referencias falsas, o proponer citas donde no haya
coincidencia entre ella y la referencia” y liberal f) “El
reproducir, o copiar con fines de lucro, materiales
educativos o resultados de productos de investigación, que
 cuentan con derechos intelectuales reservados para la
Universidad.

Las sanciones académicas a las que se enfrentará el

estudiante son las siguientes:
a) En los casos de fraude académico demostrado en el
trabajo académico o evaluación respectiva, la calificación
que se impondrá será de cero punto cero (0.0) sin perjuicio
de la sanción disciplinaria correspondiente.
b) En los casos relacionados con plagio demostrado en el
trabajo académico cualquiera sea su naturaleza, la
calificación que se impondrá será de cero punto cero (0.0),
sin perjuicio de la sanción disciplinaria correspondiente.

4. Formato de Rubrica de evaluación

Formato rúbrica de evaluación
Tipo de Actividad Actividad
☒ ☐
actividad: individual colaborativa
Momento de
Intermedia,
la Inicial ☐ ☒ Final ☐
unidad 3
evaluación
Niveles de desempeño de la actividad individual
Aspectos Puntaj
Valoración Valoración Valoración
evaluados e
alta media baja
Relación de El estudiante El estudiante El estudiante 10
conceptos relaciona de relaciona de no relaciona de
asociados a la forma correcta manera conceptos de la
cromatografía conceptos de la incorrecta cromatografía
iónica cromatografía conceptos de la iónica en un
(Ejercicio 1.1) iónica en un cromatografía mapa
mapa iónica en un conceptual, por
conceptual, mapa conceptual, lo que no
mediante la mediante la confirma o
confirmación o confirmación o niega los
 negación de negación errada postulados
postulados. de postulados. propuestos.
(Hasta 5 (Hasta 2
(Hasta 10
puntos) puntos)
puntos)
El estudiante El estudiante
El estudiante
relaciona no relaciona los
relaciona los
incorrectamente tipos de
dos tipos de
los tipos de columnas con
columnas con
columna con la la
la
concentración de concentración
concentración
especies iónica, al de especies
Análisis de de especies
presentar iónicas, ya que
nitritos y iónicas,
dificultades en la no presenta la
nitratos en mediante un 10
interpretación de interpretación
alimentos análisis
un análisis de un análisis
(Ejercicio 1.2) cuantitativo y
cuantitativo y cuantitativo y
cualitativo al
cualitativo cualitativo
aplicar
aplicado a aplicado a
cromatografía
cromatografía cromatografía
iónica.
iónica. iónica.
(Hasta 10 (Hasta 5 (Hasta 2
puntos) puntos) puntos)
Reconocimient El estudiante El estudiante El estudiante 5
o operacional identifica las identifica no identifica las
de la características parcialmente las características
cromatografía de las dos características de de las dos
de fluidos columnas las dos columnas columnas
supercríticos empleadas en empleadas en empleadas en
(Ejercicio 2.1) cromatografía cromatografía de cromatografía
de fluidos fluidos de fluidos
supercríticos, supercríticos, supercríticos, al
mediante la mediante la no realizar la
descripción de descripción descripción de
fase normal, incompleta de la fase normal,
temperatura fase normal, temperatura
crítica y temperatura crítica y presión
presión crítica. crítica y presión crítica.
crítica.
 (Hasta 5 (Hasta 3 (Hasta 1
puntos) puntos) puntos)
El estudiante El estudiante
El estudiante
identifica el identifica de
no identifica el
tipo de manera
tipo de muestra
muestra que se incorrecta el tipo
que se puede
puede analizar de muestra que
analizar en
en se puede analizar
cromatografía
cromatografía en cromatografía
de fluidos
de fluidos de fluidos 5
supercríticos, y
supercríticos y supercríticos, al
no las relaciona
las relaciona no relacionarlas
mediante las
mediante las mediante las
características
características características del
del detector.
del detector. detector.
(Hasta 5 (Hasta 3 (Hasta 1
puntos) puntos) puntos)
El estudiante
El estudiante El estudiante
identifica de
identifica dos no identifica los
manera
cromatógrafos dos
incorrecta los dos
de fluidos cromatógrafos
cromatógrafos de
supercríticos de fluidos
fluidos
según el supercríticos,
supercríticos, al
comportamient por lo que no
relacionar con
o de la fase relaciona el
dificultad el
móvil, comportamient 10
comportamiento
mediante los o de la fase
de la fase móvil,
componentes móvil, ni los
y los
que caracteriza componentes
componentes que
cada que los
caracteriza cada
cromatógrafo. caracterizan.
cromatógrafo.
(Hasta 10 (Hasta 5 (Hasta 1
puntos) puntos) puntos)
Construcción El estudiante El estudiante El estudiante 10
de diagramas construye y presenta errores no construye ni
de fases analiza un en la construcción analiza un
(Ejercicio 2.2) diagrama de y análisis del diagrama de
 diagrama de
fases para el fases para
dióxido de dióxido de
fases para
carbono, carbono,
dióxido de
ubicando ubicando de
carbono, y no
correctamente manera
ubica la presión
la presión y incorrecta la
y temperatura
temperatura presión y
crítica, ni la
crítica, así temperatura
presión y
como la crítica, así como
temperatura
presión y la presión y
triple.
temperatura temperatura
triple. triple.

(Hasta 10 (Hasta 5 (Hasta 2

puntos) puntos) puntos)
El estudiante El estudiante El estudiante
relaciona el relaciona de no relaciona el
tipo de fase manera tipo de fase
móvil con la incorrecta el tipo móvil con la
presión y de fase móvil con presión y
Aplicación de temperatura la presión y temperatura
la crítica, a partir temperatura crítica, y no
cromatografía de los crítica, al considera los
de fluidos porcentajes de considerar los resultados de 10
supercríticos concentración resultados de concentración
en alimentos de analitos concentración de de analitos
(Ejercicio 2.3) obtenidos por analitos obtenidos obtenidos por
cromatografía por cromatografía cromatografía
de fluidos de fluidos de fluidos
supercríticos. supercríticos. supercríticos.
(Hasta 10 (Hasta 5 (Hasta 2
puntos) puntos) puntos)
Calificación final 60