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DEMOSTRACIÓN DE LA PRESENCIA DE MICROORGANISMOS EN

DIFERENTES AMBIENTES

Universidad del Valle

Resumen

La práctica se desarrolla con el fin de que el estudiante desarrolle la capacidad de

comprobar

la existencia de microorganismos en diversos ambientes comunes para el ser

humano, como

superficies corporales, superficies líquidas y objetos inanimados. Mediante el

cultivo de

diferentes muestras en diversos medios (Agar nutritivo, agar inclinado y caldo

nutritivo), se

logró observar la formación y caracterización de las morfologías de las colonias

obtenidas. Se

tomaron muestras provenientes de llaves de un carro, agua de un termo, vello

facial y una

planta herbácea para el cultivo en agar nutritivo en cajas de Petri a 37°C por 48
horas. Al

final de la práctica se hace evidente la existencia de cientos de microorganismos

adheridos
tanto a productos de uso diario, como subsistentes en nuestra propia carne, esto
debido al

contacto con cualquier entorno sin debida

asepsia.

Palabras claves: Llaves de carro, agua potable, vello facial, planta

herbácea.

I. Introducción

El conocimiento de la composición química de los alimentos es un requisito previo

para

conocer su microbiología. Las interacciones mutuas entre los microorganismos por

una parte

y las plantas y los animales por otra, son naturales y constantes. En la

naturaleza, está
C= 3,0
2

perfectamente comprobado el papel ecológico de los microorganismos y su

importancia en

todos los ciclos geoquímicos. Como quiera que los alimentos que consume el
hombre

proceden básicamente de las plantas y de los animales o de productos

derivados de los

mismos, resulta comprensible que dichos alimentos puedan contener

microorganismos que

interaccionan con ellos [1].

En la mayoría de los casos, los microorganismos utilizan nuestros alimentos como
fuente de

nutrientes para su propio crecimiento, hecho que, naturalmente, puede

ocasionar su

alteración. Los microorganismos pueden echar a perder un alimento porque se

multiplican en

é1, porque utilizan nutrientes, porque producen modificaciones enzimáticas, y

porque le

comunican sabores desagradables mediante el desdoblamiento de determinadas

sustancias o

mediante la síntesis de nuevos

compuestos.

El agar nutritivo es un medio de cultivo no selectivo sólido y de composición básica,

en el

cual la pluripeptona y el extracto de carne constituyen la fuente de carbono

nitrógeno

aportando nutrientes para el desarrollo bacteriano

[2].

El objetivo de la práctica es que el estudiante esté en la capacidad de comprobar la

existencia

de distintos tipos de microorganismo presentes en nuestro ambiente, superficies

corporales,

líquidos y objetos inanimados.

 II. Materiales

Para la realización de la práctica los estudiantes hacen

uso de:

- Cajas de Petri con agar nutritivo # 4

- Mechero
3

- Cinta vinipel para sellar cajas

- Caja con bacterias

- Goteros

- Aplicadores # 3

- Tubo de caldo nutritivo por 5 mL

- Tubo de agar inclinado aproximadamente 8 mL

III. Marco Experimental

Una vez identificadas 6 cajas Petri, entregadas por el laboratorio, se procedió a

marcarlas con

el número del grupo en la tapa de la placa, dos de ellas van a estar contenidas
con dos

especies de microorganismos (Pseudomonas aeruginosa y S. aureus) diseminadas

cada una

en dos tipos de líquidos diferentes. Las otras cuatro cajas Petri van a contener
muestras de

diferentes superficies u objetos, cada muestra se toma con un hisopo estéril transando
sobre la
caja varias veces en líneas paralela. Las muestras tomadas
fueron:

- Llaves de un carro: con ayuda de un hisopo se tomó muestra de las llaves

de un

carro (objeto de uso diario), por cada

hendidura.

- Agua potable de un termo: Mediante un gotero se extrajeron pocas gotas de

agua de

un termo, para generar un goteo y diseminarse por medio de

vaivén.

- Vello facial (barba): Con la ayuda de un hisopo, se tomó muestra del vello
facial

(barba), para luego trazar varias líneas sobre el

agar.

- Planta herbácea: Con ayuda de un hisopo se tomó muestra de una planta

herbácea,

por todas sus hojas, para luego trazar varias líneas sobre el
agar.
4

Después de terminado el muestreo, se tapó la placa y se incubó en posición invertida

a 37oC

durante 48 horas.

Por otra parte, se cultivó en un medio de caldo nutritivo, con un aplicador

esterilizado, la

bacteria S. Aureus y, en un agar nutritivo inclinado, la bacteria P. Aeruginosa, para

luego de
ambos cultivos llevar a 37°C, igualmente por 48 horas, así posterior a esto, realizar su
debido

análisis de crecimiento.

IV. Resultados

4.1 Llaves de carro

En este cultivo se presentaron tres cultivos dispersos diferentes. El primero

de ellos

presentaba un tono de color bruno opaco, su elevación observada es nula y su borde

presenta

lobulación como se observa a continuación en la

Fig. 1

Fig. 1. Cultivo bacteriano procedente de las llaves, Fuente:

Propia

Otro de los cultivos encontrados, puede describirse como el más pequeño de los tres,
su tono

es blanco habano, su contorno ondulado y su elevación totalmente plana, como se

muestra a

continuación.
 5

Fig. 2. Cultivo bacteriano procedente de las llaves, Fuente:

Propia

Por último, se encuentra el cultivo más grande en diámetro, con un tono opaco,
rojizo/claro,

con una elevación umbilicada y un borde ondulado, como se observa a

continuación.

Fig. 3. Cultivo bacteriano procedente de las llaves, Fuente:

Propia

4.2 Agua potable de un

termo

Para el cultivo del agua, fue inexistente la propagación de algún microorganismo,

como se
logra observa en la Fig.4. Fig. 4. Cultivo bacteriano procedente del agua, Fuente:
Propia
6

4.3Vello facial (barba)

Para el cultivo microbiológico, respecto al vello facial, encontramos cientos de

cápsulas

bacterianas dispersas por todo el recipiente (Fig. 5), cada una de ellas aislada de la
otra. A

simple vista, fue posible la identificación de tres cultivos diferentes, uno de ellos
con

tonalidad amarilla/verdosa clara, superficie escamosa, borde ondulado y una sutil

elevación

como es posible intuir en la Fig. 6.

Fig. 5. Cultivo bacteriano procedente de vello facial, Fuente:

propia

Fig. 6. Cultivo bacteriano procedente de vello facial, Fuente:

Propia
Otra colonia distinguible y de igual manera la más abundante en toda la muestra,
conformada

por un pequeño diámetro, tono bruno, mínima elevación y forma circular, se ve

repetida en

múltiples ocasiones por toda la muestra, como es posible identificar, tanto en la Fig. 7,
como

en la Fig. 8, donde de igual manera se observa otra colonia de aspecto rojizo, borde
redondo,

sin elevación.
7

Fig. 7. Cultivo bacteriano procedente de vello facial, Fuente:

Propia

Fig.8. Cultivo bacteriano procedente de vello facial, Fuente:

Propia

4.4 Planta herbácea

Para el cultivo microbiológico respecto a la planta herbácea (Fig. 9), se

distinguen dos

cultivos bacterianos diferentes: en el primero encontramos un cultivo bacteriano con

forma

regular, borde redondo, tono amarillento y una elevación sutil como se muestra en la
Fig.10.

Fig. 9. Cultivo bacteriano procedente de una planta herbácea, Fuente:

propia
8

Fig. 10. cultivo bacteriano procedente de una planta herbácea, Fuente:

propia

Por último, se observa un cultivo en forma de roseta, con un borde tipo dentado,
una baja

elevación y una textura rugosa, como se observa en la Fig.11, presentada a

continuación:
 Fig. 11. cultivo bacteriano procedente de una planta herbácea, Fuente:
propia

4.5 Cultivo de S. aureus en caldo

nutritivo

En este cultivo se hizo evidente el crecimiento microbiano entorno a todo el

volumen del

caldo nutritivo. Se observa que pasa de una solución traslúcida y fluida, a ser una
solución

densa y turbia, con un botón en la parte inferior del tubo como se logra observar en las
Fig.12

y 13.

Fig. 12. Cultivo de S. aureus en caldo nutritivo, a 37°C por 48 h, Fuente:

propia
9

Fig. 13. Cultivo de S. aureus en caldo nutritivo, a 37°C por 48 h, Fuente:

propia
 4.6 Cultivo de P. Aeruginosa en agar
inclinado

En la Fig. 14, es posible observar un cultivo de P. Aeruginosa sobre un agar

inclinado. Se

distingue que el crecimiento del cultivo es superficial en su totalidad, se observa

una capa

delgada sobrepuesta en el agar, extendida sobre toda la

superficie.

Fig. 14 .Cultivo de P. Aeruginosa en agar inclinado, a 37°C por 48 h, Fuente:

propia

V. Discusión

5.1 Llaves de carro

La llave de un automóvil es un objeto que, al estar constantemente en contacto con

la mano

humana, se encuentra en contaminación constante. En las figuras 1, 2, 3, se

evidenciaron y

reconocieron las diferentes formas bacterianas. También se pudo observar que

algunas

bacterias crecieron en mayor proporción que otras, esto debió ser gracias a la
presencia o
ausencia de oxígeno, la temperatura, o la esterilidad del medio que cada cápsula
bacteriana

maneje.[4]
10

5.2 Agua potable de un

termo

La presencia de microorganismos en agua es un indicador de calidad, ya que

muchos de los

organismos encontrados en ella representan un interés sanitario, pues afectan la salud

humana

y la de otros organismos que utilizan el recurso hídrico. Para el expendio de agua

potable,

brindado por nuestro servicio de recursos hídricos, son necesarios distintos

métodos de

purificación al agua para su debido consumo. La desinfección de esta asegura los

parámetros

para el consumo humano.

5.3 Vello facial (barba)

El vello facial puede presenciar microorganismos que llegan a acumularse en ella

debido a las

condiciones favorables presentadas por las cavidades entre los vellos. La

existencia de
bacterias en su superficie se explica por el contacto directo que tiene con el
entorno.

Adicionalmente, una persona decide dejar crecer su barba únicamente por su aspecto
estético,

dejando atrás la asepsia, derivando así, el crecimiento bacteriano, por las condiciones
aptas de

humedad, temperatura y nutrición que genera este vello facial.

[5]

5.4 Planta herbácea

En este cultivo se identificó la mayor diversidad de colonias microbianas, esto se dio

por la

facilidad de contacto con el entorno que puede tener una planta diariamente y,
de igual

manera la facilidad de contaminación se incrementa debido al nivel del suelo en

que se

encuentran las plantas.

11

4.5 Cultivo de S. aureus en caldo

nutritivo

Para el debido crecimiento de este cultivo, se debe incubar durante 18-24 horas,
formando

colonias de 0.5-1.5 mm de diámetro. Las colonias de S. aureus se observan lisas,

elevadas,

brillantes y de bordes enteros, presentan consistencia cremosa y pigmentación

que va del
amarillo a dorado debido a la producción de carotenoides, la mayoría de las cepas
producen

β-hemólisis o hemólisis total alrededor de las colonias cuando se cultivan en agar

sangre. S.

aureus se diferencia de las demás especies por producir coagulasa que se

manifiesta por su

capacidad para coagular el plasma, es resistente al calor, a la desecación y puede

crecer en

medios con grandes cantidades de NaCl (7.5%).

[6]

En la Fig.13, logramos observar un botón que se acumula en la parte inferior del

cultivo, esto

es debido al peso molecular que logra alcanzar el staphylococcus, generando

precipitación en

el medio líquido, demostrando de igual manera su capacidad como bacteria

anaerobia.

4.6 Cultivo de P. Aeruginosa en agar

inclinado

En el cultivo de Pseudomonas aeruginosa, se apreció una intensificación del color en

el lugar

donde se realizó el cultivo, en el medio del agar inclinado la bacteria conservó la

forma en la

cual fue cultivada y se expandió por todo el agar, creando una delgada capa en
toda la

superficie del agar.

VI. Conclusiones

Se determina la importancia del aislamiento de microorganismos en diferentes

ambientes, con

el fin de tener una población de microorganismos que habitan en dichos medios, pero
que son

imposibles de observar e identificar, obteniendo un cultivo que nos permita

identificarlo.
12

Se obtuvó un cultivo de forma mixta, por lo que se dio la proliferación de

microorganismos

de todo lo que se encontraba en los ambientes estudiados. A partir de

allí, los

microorganismos se encontraban en condiciones viables de caracterización (forma,

borde,

elevación y superficie), observación e

identificación.

Se hace evidente la facultad y facilidad que puede alcanzar cualquier objeto, en un

entorno

cotidiano, de albergar microorganismos patógenos, si no se realiza una debida y

constante

asepsia.

VII. Referencias bibliográficas

[1] W.C.Frazier, y Westhoff, D. (1993). MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS.

Zaragosa,

España: Acribia, S.A.

[2] Los medios de cultivo en microbiología, disponible

en

http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioMedios.htm recuperado el 22 de
Agosto

de 2017

[3] Madigan M, Martinko J, Parker J. Brock, BIOLOGÍA DE LOS

MICROORGANISMOS.

10a edición. 10 España: Prentice Hall Iberia; 2003. p.

1089.

[4] Luis A. Merino, 2009, Fisiología Bacteriana, Universidad Nacional del

Nordeste:

Facultad de Medicina.

[5] XIMENA LUZMILA BORJA CELI, 2016, ANÁLISIS COMPARATIVO DEL EFECTO

ANTIMICROBIANO Y ANTISÉPTICO PREQUIRÚRGICO DE PIEL CON BARBA Y

PIEL SIN BARBA ENTRE YODOPOVIDONA, CLORHEXIDINA/ALCOHOL Y

CLORHEXIDINA/CETRIMIDA EN LOS ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE

13

ODONTOLOGÍA DE LA UNIVERSIDAD DE LAS AMÈRICAS, UNIVERSIDAD

CENTRAL DEL ECUADOR: Facultad de

odontología.
[6] Estrella Cervantes-García, Rafael García-González, Paz María Salazar-Schettino,
2014,

Características generales del Staphylococcus

aureus.

VIII. Anexos

1. Existen microorganismos beneficiosos y perjudiciales en diferentes

ambientes,

nombre dos beneficiosos y dos perjudiciales y

ejemplifique.

R/= Los dos tipos de microorganismos beneficios tenemos: Lactobacillus

reuteri y

Streptococcus thermophilus, estos dos se encuentran presentes en algunos productos

lácteos.

En los microorganismos perjudiciales tenemos los virus y

parásitos.

2. ¿Podría usted observar colonias bacterianas en un medio líquido?

Justifique.

R/= No se puede presentar el crecimiento de colonias bacterianas en un medio

líquido, el

cultivo se hace en un medio sólido para impedir el posible movimiento de los individuos
de la

colonia y favorecer su
agrupamiento.

3. Investigue qué tipo de microorganismos son encontrados con mayor

frecuencia en los

ambientes escogidos en la práctica y que beneficios/problemas pueden

acarrear para

nuestra salud.
14

R/= El agua de la red contiene cantidades pequeñas de microorganismos,

habitualmente

menos de 300 ml-1, por ejemplo, en el agua, zonas húmedas y, a veces, en productos
estériles

o desinfectantes (Pseudomonas, Acinetobacter, Mycobacterium). Estudios ya han

certificado

que los hombres con vello en la cara son más propensos a padecer infecciones de la
piel y a

transmitirlas a otros. La llave es un objeto se utilizan una y otra vez a lo largo del
día, y

suelen ser los grandes olvidados cuando se hace la limpieza general del hogar. Por
ello, son

lugares propicios para que los gérmenes se acumulen. Es más, los expertos los
consideran

claves en la transmisión del virus de la gripe y de otros que provocan

enfermedades

respiratorias.

Adicionalmente a esto, gracias a cientos de estudios, se puede inquirir

que los

microorganismos más comunes en nuestra vida cotidiana son: E. coli, Salmonella,

bacillus

cereus, listeria monocytogenes, clostridium perfringens, nocardia,

streptomyces ,

leuconostoc, entre muchos otros, los cuales pueden causar síntomas como la diarrea,
vómito,

cansancio , fiebre, dolor abdominal, deshidratación, entre otros tantos que

dependerán del

microorganismo hospedado.

4. ¿Cómo evitaría que los trabajos del laboratorio se

contaminen?

R/= Teniendo en cuenta las normas del laboratorio, tendría que ser acatadas
para evitar

posibles contaminaciones, las cuales probablemente sean por nuestro propio

cuerpo como

cabello, las manos, saliva entre otro. Usando los implementos de seguridad como
tapabocas,

bata y cofia, así mismo evitar tocar las muestras, en el caso de las cajas de Petri,
sellarlas

adecuadamente con papel film. Después de realizar el cultivo y en el caso de tubos,

flamear la

boca del tubo antes y después de realizar el cultivo y cerrarlo inmediatamente. De

este modo
se podrá mantener segura la práctica durante el procedimiento que se debe
realizar
15

5. ¿Al incrementar el tiempo de incubación se presenta un aumento

indefinido en el

tamaño de las colonias?

Justifique.

R/= No se presenta aumento indefinido en el tamaño de las colonias, aunque el

tiempo de

generación dependa de diferentes factores, y también depende del tipo de

microorganismo

que sea. El crecimiento bacteriano este definido en 4 etapas principales: la fase de

latencia, la

fase estacionaria donde disminuye el crecimiento de las bacterias, la fase de

crecimiento

exponencial donde las bacterias crecen aceleradamente hasta que llegan a la fase
estacionaria,

y la fase de muerte, donde se agotan las reservas de energía (nutrientes) y las

condiciones se

vuelven desfavorables así que las bacterias

mueren.