LABORATORIO Nº 13:

PRELABORATORIO:

A fin de analizar el contenido de Na+ de una muestra de suero

sanguineo, se tomaron alicuotas de 5ml de la muestra y se la co-
locaron en 4 matraces de 50ml y se los numero de 1 al 4.Poste-
riormente se adicionaron cantidades crecientes(0ml,2ml,3ml,
5ml) de NaCl patron de concentracion 2N y se llevo a volumen
con agua bidestilada.Luego de una correcta agitacion se proce-
dio a medir las absorbancias de cada uno y se obtubieron los si-
guientes datos:      

SOLUCION V(ml) ppmFe/L ABSORVANCIA

1 0 0 0,352
2 2 0,4 0,435
3 3 0,6 0,534
4 5 0,8 0,751
Am=0,518

y=0,4651X+0,3087          
   
Am=0,4651Cm + 0,3087  
  Cm =0,4500 mL Na/Litros de sangre  
Am= 0,518  
   
  mL Na/Litros de sangre = Cm(50ml/2ml)*0,05 L  
    5Litros de sangre  
       
  mL Na/Litros de sangre = 0,4500*(50/2)*0,05L  
    5 Litros de sangre  
       
  mL Na/Litros de sangre = 0,1125 mL Na/L sangre.  
           
   
             
 ABSORVANCIA VS V(ml)
0.8
0.7
0.6 f(x) = 0.47 x + 0.31
R² = 0.85
0.5
absorvancia

0.4
0.3 Linear ()

0.2
0.1
0
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9
ml

CUESTIONARIO:

1. Porque otro método podría determinar el contenido de Fe de la muestra?

Determinación de Hierro

 Moler y homogeneizar la muestra ..

 Pesar exactamente en un crisol + 3 g de muestra dependiendo de la concentración

esperada del o los analitos. Registre el peso.

 Colocar el crisol con la muestra sin tapar en placa calefactora, estufa o mufla a 100ºC
por 30 minutos.

 Colocar el crisol con la muestra tapado en mufla a 550ºC por un periodo de 5 a 6 hrs
(< 8 hrs), hasta obtener cenizas blancas. De obtenerse cenizas grises dejar enfriar y
agregar al crisol de 0,5 a 3 mL aproximadamente de HCL 1:1 colocar el crisol
destapado en placa calefactora a unos 100ºC, hasta evaporar. (realizar procedimiento
bajo campana extractora de gases).Luego llevar nuevamente mufla a 550ºC por 1 a 2
hrs hasta cenizas blancas.

 Digerir las cenizas blancas contenidas en el crisol con 5 mL de HCL 1:1 en placa
calefactora cuantitativamente llevar el licor de cenizas a un matraz aforado de 50 mL,
a través de 2 lavados con porciones de alrededor de 3 mL de HCL 1:1, aforar con agua.
La solución esta lista para ser leída.

2. ¿ Que cantidad de espinaca considera que debería consumirse para cumplir

con los requerimientos diarios de Fe?

Alimento Porción Hierro

en mg (miligramos)
Espinaca, fresca, hervida, 1 taza 6.4
escurrida (180gr)
Dosis diarias recomendadas de hierro 
En la siguiente tabla se exponen los valores de la ingesta diaria recomendada de hierro según
el Departamento de Nutrición del IOM (Institute of Medicine: Instituto de Medicina) tanto
para infantes, niños y adultos.

Edad Hombres Mujeres

(mg/día) (mg/día)
0-6 meses 0.27 (IA)* 0.27
7-12 meses 11 11
1-3 años 7 7
4-8 años 10 10
9-13 años 8 8
14-18 años 11 15
19-50 años 8 18
>50 años 8 8
Embarazo 27
Lactancia 9-10

3. Explique claramente que diferencias existen entre calibración “ externa “ y

por sobreagregado .Para que se utilizan y en que casos se utilizan.

Calibración externa:

Se entiende como calibración externa aquella que es realizada por un laboratorio de

calibración externa que podrá ser realizada por instalaciones de la entidad emisora como in-
situ en las instalaciones de la empresa.

Sobreagregados:

El supuesto subyacente del método de sobreagragado o adición de patrón es que la matriz

ejerce el
mismo efecto sobre el mismo analito añadido que sobre el que hay en la muestra problema.
Este
método consiste en añadir cantidades conocidas de un analito al problema, cuyo contenido se
quiere
determinar. A partir del aumento de la señal se deduce cuanto analito había en la muestra.
Este método
requiere una respuesta lineal frente al analito.
La ecuación de la [x]i = Ix
Adición de patrón [s]f + [x]f I s+x
Donde:
[x]i es la concentración del analito en la disolución inicial.
[s]f es la concentración de patrón en la disolución final.
[x]f es el patrón en la disolución final.
Ix es señal de la disolución inicial.
I s+x es señal de la disolución final.
Procedimiento gráfico para la determinación mediante sobreagregado de patrón
 Se graficará la señal analítica respecto a la concentración de patrón añadido después de
haber sido
mezclado con la muestra. La abscisa en el origen de la recta extrapolada con signo cambiado
es la
concentración desconocida después de diluir la muestra al volumen final. El intervalo más útil
de
adiciones de patrón debe aumentar la señal analítica entre 1,5 y 3 veces el valor original.
Los puntos tomados deben ajustarse por cuadrados mínimos. La incertidumbre de la
abscisa en el
origen es:
Desviación estándar de [X]f ═ Sy/m √ [1/n + <y>2/(m2∑ (xi -<x>)2)]

Sabiendo que:
<y>= 1/n ∑ yi y <x>= 1/n ∑ xi
Donde:
Sy es la desviación estándar de y.

m es la pendiente de la recta.

n es el número de puntos.
<y> es el valor medio de los datos y.
<x> es el valor medio de los datos x

4. Deducir razonablemente la formula utilizada en los cálculos.

RAZA FUNCIONES
Hierro(Fe) Sus cationes(Fe2+, Fe 3+)participan actúan como:

 cofactores enzimáticos

 constituyentes de hemoglobina y mioglobina (para el transporte y

almacenamiento de O2)

 constituyen los citocromos y otros transportadores de electrones

Cobre Sus cationes (Cu+, Cu2+)actúan como:

(Cu)
 cofactores enzimáticos

 constituyentes de pigmentos respiratorios de algunos animales

 Síntesis de sangre y elastina

Laboratorio Nº14

CUESTIONARIO

1. Indique Ud. Cuales serían los principales interferentes para el análisis espectrofotométrico del
cromo (VI).

REACTIVOS

Durante el análisis se utilizarán reactivos de grado analítico, como mínimo.

 Agua destilada o desionizada

 De grado 2 de pureza como mínimo, según ISO 3696 (10.11). Su conductividad eléctrica será menor de
0,1 mS/m, o la resistividad eléctrica será mayor de 0,01 Mohm x m (a 25oC).
 Ácido nítrico, HNO3
 Concentrado, mínimo 65% (m/m), densidad aproximada 1,40 g/ml.
 Nitrato de lantano (III),La(NO3)3
 Nitrato de cesio, CsNO3
 Disolución de ácido nítrico al 10% (V/V)
 Se toman 100 ml de ácido nítrico concentrado (3.2) y se afora a un litro con agua destilada.
 Disolución de lantano de 50 mg/ml
 Se disuelven 156,32 g de nitrato de lantano en ácido nítrico (3.2) al 2% (V/V) y se completa hasta un
litro con ácido nítrico (3.2) al 2% (V/V). Esta disolución almacenada en botella de polipropileno es estable
como mínimo durante un año.
 Posibles interferencias son, el hierro, cobre, níquel y vanadio; 10 ug de cualquira de estos causa una
absorción equivalente a 0.02 ug de Cr(VI) debido a la formación de complejos d e colores. Las interferencias
debido a agentes reductores (e.g. Fe, Fe ++) esta minimizados por la extracción alcalina.

2._ Establezca una relación de aplicaciones de este análisis en la industria.

En metalurgia Metal de aleación 56%

En refractarios en forma de cromita 20%
En productos químicos como materia prima para obtener múltiples derivados del cromo de 15%
además de estos otros uso industriales en colombia.
Las sales de cromo hexavalente Cr (VI) se utilizan ampliamente en procesos industriales del acero,
pinturas, colorantes y cerámicas.
Las sales de cromo trivalente se utilizan en la industria textil para colorantes, en la industria de la
cerámica y el vidrio, en la industria curtidora y en fotografía.
El cromo en sus dos estados de oxidación se utiliza en diversos procesos industriales por tanto
puede estar presente en las aguas residuales de dichas empresas.
El estado hexavalente es tóxico para los humanos, los animales y la vida acuática.
Puede producir cáncer de pulmón cuando se inhala y fácilmente produce sensibilización en la piel.
Sin embargo no se conoce si se produce cáncer por la ingestión de cromo en cualquiera de sus
estados de oxidación.
 Actividad Industrial 
Curtidurías, talleres de acabado. 
Industria de preparación y curtido de pieles .
Curtiembre de pieles.
Fabricación de pulpa de madera, papel 
Imprenta, editoriales 
Industrias básicas del hierro y acero Proceso Industrial de Galvanoplastia 
Fabricación de cuchillería. Herramientas.

3._ Indique cual sería otro método de análisis para la cuantificación de cromo(VI) y haga un análisis de la
eficiencia y calidad de resultados.

PROCESOS EN LAMPARA DE CATODO HUECO

 Atomizador

La espectroscopía de absorción atómica requiere que los átomos del analito en fase de gas. Los iones ó átomos
de la muestra deben de estar disueltos y vaporizados en una fuente de alta temperatura como una llama u horno
de grafito. La llama de AA puede analizar solamente disoluciones, mientras que el horno de grafito de AA puede
aceptar disoluciones, lodos y muestras sólidas

La llama de AA utiliza un quemador tipo slot para incrementar la longitud de paso a su través y por lo tanto para
incrementar la absorbancia total. Las disoluciones de muestra se aspiran junto con el flujo de gas en una cámara
de nebulización y mezclado para formar pequeñas gotas antes de entrar a la llama.

La cámara u horno de grafito tiene alguna ventaja sobre la llama. Es mucho mejor un atomizador (eficiente) que
una llama y puede aceptar cantidades muy pequeñas de muestra. También suministra un ambiente reductor para
elementos fácilmente oxidables. Las muestras se colocan directamente en un horno de grafito y el horno se
calienta eléctricamente en varias etapas para secar la muestra, calcina la muestra orgánica y vaporiza los átomos
de analito.

Separación de luz y detección

Los espectrómetros utilizan monocromadores y detectores para luz UV y visible. El propósito m,ás importante
del mono cromador es aislar la línea de absorción de la luz de fondo debida a las interferencias . Los tubos de
fotomultiplicador son los detectores más comunes utilizados en la espectroscopia de AA
Metodo para determinar el Cr por espectrometria de Absorción Atómica

Metodo de determinación de Cromo de forma directa

El rango de aplicación comprende concentraciones entre 0.1 a 10 mg/l de cromo. Este rango puede extenderse a
concentraciones mayores de 10 mg/l por dilución de la muestra.

El cromo disuelto se determina aspirando una porción de la muestra filtrada sin pretratamiento. El cromo
insoluble se determina disolviendo la muestra en nitrico-clorhídrico.

Interferencias

 Hierro, niquel y cobalto a una concentración de hasta 100ðg/l y magnesio hasta 30 mg/l interfiere
disminuyendo la absorción del Cromo. Estas interferencias se suprimen en disoluciones conteniendo
10000 mg/l de 8-hidroxiquinolina. Las muestras ajustadas a esta concentración no muestran
interferencias desde 700 mg/l de hierro y 10mg/l de niquel y cobalto, o desde 1000mg/l de magnesio.

 Potasio por encima de 500mg/l incrementa la absorción del cromo.

 Sodios, sulfatos, y cloruros (9000 mg/l) cada uno), calcio y magnesio(4000mg/l cada uno), nitrato (2000
mg/l), y cadmio, plomo, cobre y cinc,(10 mg/l cada uno) no interfiere.

Aparatos y material

 Espectrometro de absorción atómica utilizado a 357,9 nm

 Lámpara de cromo de cátodo hueco

 Oxidante:

 *Aire (si se le ha pasado por un filtro para eliminar agua, aceite y otras sustancias extrañas)

 *Oxido Nitroso, grado médico es satisfactorio

 *Combustible : acetileno

Preparación de reactivos

Solución de cromo reserva( 1ml = 1.0 mg de Cr). Disolver 2,828 g de dicromato potásico (K2Cr2O7) en 200 ml de
agua y disolver hasta 1 l

Solución de cromo standard(( 1 ml= 0.1 mg de Cr): Disolver 100 ml de la disolución reserva y 1 ml de HNO3
(densidad 1,42) hasta 1 ml con agua.

Acido clorhídrico (densidad 1,19): Acido clorhídrico concentrado (HCL).

Disolución de 8-hidroxiquinolina(100g/l): Disolver 50 g de 8-hidroxiquinolina en 35 ml de HCl (densidad 1,19).

Calentar la mezcla suavemente para facilitar la disolución. Transferirlo a un recipiente de 500 ml de capacidad y
llevarlo hasta este volumen.

Acido nítrico (densidad 1,42): Acido nítrico concentrado (HNO3)

Acido nítrico (1+499): Añadir un volumen de HNO3 (densidad 1.42) a 499 volúmenes de agua.

Estandarización
Preparar 100 ml de cada blanco y por lo menos 4 disoluciones patrón, conteniendo 1 ml de disolución de 8-
hidroxiquinolina (100g/l)10ml de patrón, para contener el rango de concentración de cromo esperadaen las
muestras a analizar, por dilución de la disolución patrón de cromo con HNO3 (1 +499). Preparar los patrones
cada vez que se vaya a realizar un análisis.

Para determinar el cromo total recuperable(no disuelto) añadir 0,5 ml de HNO3 (densidad 1,42) y proceder a
añadir HCl como se indica más adelante. Para el cromo disuelto poceder como se indica a continuación.

Aspirar la muestra de blanco y registrar la absorbancia a 357.9 nm. Aspirar HNO3 (1+499) entre cada muestra.

Preparar la curva analítica por ploteo de la absorbancia frente a la concentración de cada muestra. Como
alternativa puede leerse directamente la concentración si el instrumento dispone de ello.

Procedimiento

Medir 100 ml de una muestra acidificada bien agitada en un recipiente de 125 ml.

Añadir 5 ml de HCl( densidad 1,19) a cada muestra

Calentar las muestras en un baño de vapor o en un plato caliente en una zona dotada de campana de ventilación
hasta que el volumen de la muestra se haya reducido a 15-20 ml, asegurandose de que la muestra no hierve.

Enfriar y filtrar las muestras a través a través de un filtro de textura fina, lavado con ácido y exento de
cenizas, en un recipiente de 100 ml. Lavar el filtro dos o tres veces con agua y llevarlo al volumen.

Pipetear 10,0 ml de la muestra en un recipiente de 50 ml y añadir 1,0 ml de disolución de 8 hidroxiquinilina.

Aspirar cada muestra filtrada y acidificaday determinar la absorbancia o concentración. Aspirar HNO3 (1+499)
entre cada muestra.

Calculo

Calcular la concentración de cromo en cada muestra, en miligramos por litroutilizando la curva analítica
preparada. Alternativamente puede leerse directamente la concentración, si el instrumento dispone de ello.

Precisión

La precisión de este método (St) con el rango designado por 5 laboratorios, que incluye un total de nueve
operadores analizando cada muestra en tres dias diferentes, varía linealmente con la concentración de cromo, X,
en miligramos por litro, siendo:

Para muestras de agua

St = 0.097X+0.10

Para otras matrices de agua seleccionadas

St = 0.079X+0.019

Donde:

St = precisión total, en mg/l, y

X = concentración de Cr en mg/l
La precisión en análisis unitarios no difiere significativamente de la precisión total.

En resumen de la Manipulación de las muestras:

Si únicamente se trata de determinar el metal disuelto, fíltrese la muestra a través de un filtro de membrana de 0,45
μm en el momento de su toma. Después de la filtración, acidúlese el filtrado con ácido nítrico concentrado hasta pH
< 2.
Si lo que se desea es el contenido de cromo total acidúlese la muestra sin filtrar con acido nítrico concentrado hasta
pH < 2 en el momento de tomarla