Pequeño pero poderoso: tamaño celular y bacterias

Petra Anne Levin 1 y Esther R. Angert 2

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Resumen
La humanidad siempre ha experimentado el impacto de los microorganismos, más
obviamente a través de su capacidad para causar enfermedades devastadoras. Durante la
gran mayoría de la historia humana, desconocíamos su presencia, y mucho menos los
procesos microbianos fundamentales a los que debemos nuestra existencia: desde la
producción de energía por nuestros antiguos endosimbiontes bacterianos (las mitocondrias)
hasta la generación de oxígeno en nuestra atmósfera. . A pesar de su sorprendente
abundancia global (∼10 30 células) y su contribución sustancial a la biomasa total del
planeta tierra ( Whitman et al. 1998 ; Kallmeyer et al. 2012), nuestra incapacidad para ver
estas pequeñas formas de vida envolvió su diversidad casi ilimitada en el misterio. No fue
sino hasta el siglo XVII, con las cuidadosas observaciones e informes de Anton van
Leeuwenhoek, que nos dimos cuenta de este mundo previamente invisible que nos
rodeaba. Hoy, sabemos que hay más bacterias viviendo en nuestro tracto intestinal que
estrellas en la galaxia de la Vía Láctea (y que superan con creces a todas las personas que
alguna vez han vivido). También sabemos ahora que prosperamos debido a su soporte
metabólico. Aunque menos del 1% de las bacterias se pueden cultivar fácilmente en el
laboratorio ( Amann et al. 1995 ), la versatilidad bioquímica entre estas pequeñas criaturas
supera la de las plantas, animales y hongos combinados ( Pace 1997 ).
Las ilustraciones de Anton van Leeuwenhoek en una carta a la Royal Society de Londres a
fines del siglo XVII proporcionan uno de los primeros registros de la forma de células
bacterianas ( Dobell 1960) Visto a través de una sola lente, Leeuwenhoek fue pionero en
estudios del microbioma humano, describiendo bacilos móviles, cocos y espiroquetas que
encontró en raspados tomados de entre sus dientes (y los dientes de otros). Este triunfo fue
posible gracias a una curiosidad incomparable, construcción de lentes e iluminación
excepcional. La estructura celular simple y la naturaleza vítrea de la mayoría de las
bacterias no teñidas vistas con un microscopio óptico generaron poco interés en la biología
celular bacteriana, con la excepción de los objetos de contraste inusual, como las
endosporas descritas por Robert Koch y las cianobacterias maravillosamente coloridas y
grandes. La naturaleza bacteriana de este último solo se apreció a fines del siglo XX ( Oren
2004) En su mayor parte, las bacterias fueron vistas como "bolsas de enzimas" primitivas
hasta la década de 1990, cuando finalmente comenzó a surgir la complejidad de la
estructura subcelular bacteriana y los reguladores de la reproducción celular. Las
herramientas y los reactivos desarrollados para la biología de las células eucariotas (p. Ej.,
Manchas de ADN, membranas y etiquetas de proteínas fluorescentes), una vez aplicadas a
las células bacterianas, revelaron ideas sorprendentes, incluidos los patrones de localización
específicos e incluso dinámicos de las proteínas, y la precisión de la organización
cromosómica.
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TAMAÑO BACTERIANO
Bacillus subtilis , Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Caulobacter crescentus , los
modelos principales para la biología celular bacteriana, son más o menos típicos en tamaño,
con volúmenes de células individuales entre .40.4–3 µm 3 (o 0.4–3.0 femtolitros; femtolitro
o fL es igual a 10 −15 L). Las ultramicrobacterias marinas de vida libre, apropiadamente
llamadas Candidatus Actinomarina minuta, tienen un volumen celular promedio ∼1% del
de E. coli (0.013 µm 3 , rango 0.6 × 10 −2 a 2.4 × 10 −2 fL). En el otro extremo del
espectro, Thiomargarita namibiensis que habita en sedimentos marinos., la "perla de azufre
de Namibia", es un organismo esférico con un volumen de ocho órdenes de magnitud más
que el de E. coli (∼750 µm de diámetro, volumen 2.2 × 10 8 fL o 0.22 µL). Tiomargarita es
ligeramente más grande que un ojo de Drosophila ( Schulz et al. 1999 ) y lo
suficientemente grande como para ser visto por el ojo humano ( Fig. 1 ). Una mirada más
cercana a Thiomargarita revela una vacuola llena de líquido ubicada en el centro, que
ocupa aproximadamente el 98% del volumen celular y es un depósito de nitrato utilizado
para alimentar la oxidación de sulfuro. Incluso cuando se tiene en cuenta la vacuola
intracelular, una gran célula de Thiomargarita tiene un tremendo biovolumen para soportar
(∼4.4 × 10 6Florida). Epulopiscium spp., Simbiontes intestinales de ciertos peces cirujanos
marinos, son las bacterias heterotróficas más grandes conocidas. Estas células en forma de
cigarro tienen hasta 600 µm × 80 µm con un volumen citoplasmático activo de ∼2 ×
10 6 µm 3 o 0.02 µL ( Angert et al. 1993 ). A diferencia de Thiomargarita , las células
de Epulopiscium no contienen vacuolas de almacenamiento u otras inclusiones inertes
( Fig. 1 ). La diferencia de tamaño entre Candidatus Actinomarina minuta y estos gigantes
es equivalente a la diferencia entre un ratón y el Empire State Building ( E. colipodría estar
representado por una pequeña mofeta o un conejo en esta escala). Remitimos al lector
a Niklas (2015) , en el que analiza cómo las características de la celda y el factor de
geometría tienen en cuenta el tamaño de la celda.

Figura 1.
Bacterias gigantes A la izquierda hay una cadena de células Thiomargarita namibiensis . En esta
imagen de campo brillante, se pueden ver gránulos de azufre en el citoplasma. El panel de
la derecha muestra una célula Epulopiscium excepcionalmente grande con dos grandes
descendientes internos. Barras de escala, 100 µm.
¿Qué limita el tamaño de las células bacterianas? Las células más pequeñas necesitan un
volumen suficiente para acomodar recursos genéticos adecuados para apoyar el estilo de
vida de la célula ( Koch 1996 ). La célula también debe contener la maquinaria básica
necesaria para expresar esos genes, así como las proteínas y productos bioquímicos para
mantener su metabolismo y reproducción celular. La racionalización genómica y
metabólica se observa en simbiontes intracelulares obligados, patógenos y orgánulos que
han renunciado a las capacidades metabólicas porque el huésped abastece esas necesidades
( McCutcheon y Moran 2012 ; Wernegreen 2012 ). La pérdida de genes para detectar el
cambio ambiental y responder a esas contingencias puede permitir una reducción sustancial
del genoma pero no siempre una reducción correspondiente en el tamaño celular.
La estructura y la función de todas las células grandes parecen estar limitadas por los
límites de difusión ( Schulz y Jorgensen 2001 ). Los encuentros con nutrientes, la
eliminación de desechos y el movimiento oportuno de biomoléculas dentro de la célula para
apoyar las necesidades metabólicas afectan la capacidad de una gran bacteria para
sobrevivir en su entorno. La compartimentación de las funciones celulares, el tráfico
facilitado por proteínas motoras a través de una red citoesquelética compleja, la expansión
de los recursos genómicos y la adquisición de endosimbiontes que se convirtieron en
orgánulos generadores de energía han sido reconocidos por el avance del tamaño y la
complejidad de las células eucariotas. ( Angert 2012 ).
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EL PROBLEMA DE LA DIFUSIÓN
La identificación de bacterias gigantes requirió un nuevo examen de las creencias
arraigadas sobre el tamaño máximo de células bacterianas. Para todas las células, el
crecimiento y la reproducción están limitados por la velocidad de la comunicación química
y la disponibilidad de nutrientes para alimentar el metabolismo. La difusión es el
movimiento aleatorio tridimensional de una molécula. Para el movimiento de moléculas
dentro de una célula, es el medio de transporte más eficiente en una distancia corta de unas
pocas micras. Incluso una proteína grande puede atravesar de manera confiable esta
distancia en el citoplasma en mucho menos de un segundo. Por lo tanto, una biomolécula
sintetizada o que ingresa a una bacteria típica tiene una alta probabilidad de que alcance su
sitio de actividad casi instantáneamente. Pero teniendo en cuenta una pequeña distancia por
nuestra escala, a través de un espacio de un milímetro, aproximadamente la longitud de
un epulopisciocélula y una fracción de la circunferencia de Thiomargarita : el transporte
difusivo se vuelve muy poco confiable. Una molécula pequeña como el oxígeno a
temperatura ambiente normalmente tardaría aproximadamente una hora en difundirse 1 mm
( Schulz y Jorgensen 2001 ). Del mismo modo, la adquisición de nutrientes se basa en la
difusión y captura de moléculas en la superficie de una célula. En consecuencia, las células
de vida libre tienden a ser pequeñas, con una gran área de superficie en relación con su
volumen citoplasmático, de modo que la captura de nutrientes, en bajas concentraciones,
puede satisfacer las necesidades metabólicas de la célula. La forma y la función de la celda
han sido sometidas a estas restricciones. A modo de comparación, E. coli tiene una relación
de área de superficie a volumen de ∼3.7 µm 2 a 1 µm 3, mientras que
la célula Thiomargarita más grande tiene una relación superficie-volumen de 8.2 ×
10 −3 µm 2 a 1 µm 3 . Claramente, estas bacterias grandes están doblando las reglas.

Cómo Epulopisicum ha superado el problema de la difusión

La mayoría de las bacterias grandes mantienen una alta relación superficie-volumen al ser
largas y delgadas como Spirochaeta plicatilis (una bacteria con forma de sacacorchos de
250 µm de largo y 0,75 µm de diámetro) o adoptar una morfología en la que ninguna parte
del citoplasma está mucho más que a un micrón del entorno externo. Tiomargarita es un
ejemplo de esto último, manteniendo una capa delgada de citoplasma que rodea una gran
vacuola llena de líquido. Epulopiscium spp. son la excepción a esta regla.
Aunque su forma alargada indudablemente ayuda a aumentar su relación superficie /
volumen ( Koch 1996 ), el Epulopiscium más grande tiene una relación de 0.6 µm 2 a 1
µm 3 , ∼1 / 6 la de E. coli. A pesar de esta diferencia, Epulopiscium mantiene una alta tasa
metabólica. Epulopiscium spp. use una serie de otras modificaciones estructurales para
avanzar el tamaño de la celda. Las células de epulopiscio tienen una membrana celular
altamente invaginada que puede compensar el área superficial aparente pequeña de la
envoltura celular ( Angert 2006 ). Epulopiscio grandespp. están cubiertos de flagelos y son
muy móviles, lo que ayuda a la célula a mantener su posición en el intestino cerca de un
abundante suministro de nutrientes. La rotación coordinada de flagelos ayuda a agitar el
medio circundante, facilitando el movimiento de moléculas a través de la superficie celular,
refrescando el entorno inmediato. De esta manera, Epulopiscium puede reducir la
dependencia de la difusión de moléculas en un gradiente de concentración. Los
transportadores ubicados en la membrana celular inflada probablemente faciliten la captura
de nutrientes.
Las células de epulopiscio muestran poliploidía extrema a lo largo de su ciclo de vida, una
adaptación que también puede contribuir a su capacidad de alcanzar una masa tan grande
( Ward et al. 2009 ). La poliploidía es una característica común de las células grandes. Los
ejemplos de eucariotas incluyen endoreduplicación en células salivales de Drosophila y,
como se discutió en Czesnick y Lenhard (2015) , células vegetales con funciones
especializadas que incluyen tricomas, los apéndices finos parecidos al pelo visibles en las
hojas y tallos de ciertas especies. Gillooly y colegas (2015) discuten un papel potencial para
la endorreplicación y el aumento del contenido de ADN nuclear como determinante del
tamaño en las células humanas. Sin embargo, las bacterias grandes han llevado la
poliploidía a un nivel extremo (Angert 2012 ). Aunque el cromosoma de Epulopiscium es
bastante típico en tamaño (∼4 Mb), cada célula contiene decenas de miles a cientos de
miles de copias ( Mendell et al. 2008 ). A diferencia de la mayoría de las bacterias, en las
que el cromosoma altamente organizado o "nucleoide" ocupa casi todo el citoplasma,
los nucleoides de Epulopiscium se encuentran en la periferia del citoplasma ( Fig. 2 ). Esta
es probablemente una característica organizativa importante que permite
que Epulopiscium responda inmediatamente a los estímulos ambientales. También puede
acomodar el crecimiento de células internas de la descendencia (que se describe a
continuación).
Figura 2.
ADN en Epulopiscium sp. tipo B. Este grupo de células de Epulopiscium se tiñe con el tinte de
ADN DAPI. Cada una de las dos grandes células madre en el centro de este campo contiene dos
grandes descendientes. El ADN está ubicado en la periferia del citoplasma en las células madre y la
descendencia. En esta etapa tardía del desarrollo, el ADN de las células madre es difícil de ver
porque gran parte se ha degradado. Las células descendientes contienen estructuras polares
brillantemente teñidas; Estos son el comienzo de las "celdas de la nieta". Barra de escala, 100 µm.
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REPRODUCCIÓN ENTRE LOS GIGANTES

Las bacterias grandes muestran diversas estrategias reproductivas, algunas de las cuales
pueden ayudar a maximizar su potencial reproductivo, así como la producción y liberación
de grandes descendientes. Todos los mayores Epulopiscium spp. reproducirse una vez al
día, formando dos o más descendientes intracelulares. Sorprendentemente, el inicio y
desarrollo interno de la descendencia sigue un ciclo diario predecible y cualquier población
dada dentro de un pez huésped está bien sincronizada con respecto al desarrollo. El
crecimiento de la descendencia ocurre durante el día y coincide con los momentos en que el
huésped se está alimentando.
La reproducción comienza con la división bipolar de la célula madre. Las células polares
están completamente envueltas y estas crías crecen dentro de un compartimento unido a la
membrana en el citoplasma de las células madre, hasta que llenan completamente la célula
madre. En una etapa tardía del desarrollo, la célula madre parece sufrir una forma de
muerte celular programada, un proceso que probablemente conserva los recursos
bioquímicos acumulados durante el crecimiento ( Ward et al. 2009 ). En las etapas finales,
la descendencia emerge a través de una división en la envoltura de la célula madre. A pesar
de la sincronía del desarrollo, los habitantes de una sola población varían en volumen hasta
en un factor de cinco ( Mendell et al. 2008 ).
Debido a su tamaño, métodos inusuales de reproducción y la dificultad para determinar las
relaciones evolutivas entre microbios basadas en características
fenotípicas, Epulopiscium fue originalmente clasificado como un protista novedoso. La
filogenia molecular corrigió este descuido, agrupando a Epulopiscium spp. con Clostridia
( Angert et al. 1993 ), organismos grampositivos formadores de endosporas (del filo
Firmicutes) que incluyen el patógeno intestinal Clostridium difficile, Clostridium
perfingens, la causa de la gangrena y el patógeno transmitido por los alimentos Clostridium
botulinum del cual adquirimos Botox Producción interna de descendencia
en Epulopiscium spp. surgió de la formación de endosporas (Miller y col. 2012 ). La
adaptación de la formación de endosporas como modo de reproducción parece haber
sucedido varias veces en los Firmicutes formadores de esporas ( Angert 2005 ).
A pesar del modo inusual de reproducción que muestra Epulopiscium, otras bacterias
gigantes usan estrategias más "peatonales". Thiomargarita namibiensis en particular sufre
fisión binaria en un solo plano, posiblemente el modo más común de reproducción entre las
bacterias. Sin embargo, las células de tiomargarita no se separan, quedando en cambio
como cadenas de células alojadas en una matriz mucosa común ( Fig. 1 ). Al mismo
tiempo, los organismos estrechamente relacionados se reproducen utilizando otras
estrategias, que incluyen la gemación de la descendencia de una célula madre sésil y la
producción de múltiples descendientes internos ( Bailey et al. 2011 ). Queda por determinar
cómo la forma reproductiva afecta la aptitud de bacterias extremadamente grandes.
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EL IMPACTO DEL MEDIO AMBIENTE EN EL TAMAÑO DE LAS

ESPECIES
Las bacterias grandes abundan en ciertos entornos en los que los nutrientes están
constantemente disponibles y las concentraciones son altas. Creemos que estas asociaciones
nos dan algunas pistas sobre las condiciones que pueden ayudar a los organismos a
liberarse de las limitaciones de difusión en el tamaño celular. Las espiroquetas gigantes se
pueden encontrar en sedimentos ricos en nutrientes y en algunos sistemas intestinales,
como el intestino posterior de las termitas. Se han visto grandes células en forma de bastón
en los tractos intestinales de varios herbívoros. Células bacterianas oxidantes de azufre
como Tiomargaritaabundan los sedimentos marinos. Están distribuidos de forma casi
ubicua en todo el mundo y llevan consigo minerales para alimentar su respiración. Un
suministro abundante de energía es un tema común en todos estos sistemas y puede ser una
característica unificadora. La poliploidía está muy extendida en bacterias pero es costosa de
mantener. En entornos ricos en nutrientes o cuando la energía es prácticamente ilimitada, la
selección para reducir a una sola copia del genoma puede ser relajada y permitir que
abundan los microbios poliploides. Las modificaciones posteriores a la arquitectura celular
pueden acomodar una mayor expansión de tamaño.
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HOMEOSTASIS DE TAMAÑO CELULAR

En condiciones de estado estacionario, las poblaciones de bacterias isogénicas mantienen el
tamaño celular dentro de parámetros sorprendentemente estrechos. Aunque un histograma
de células de E. coli o B. subtilis muestreadas en la fase exponencial media está sesgado
hacia la izquierda, como consecuencia del mayor número de células recién nacidas más
pequeñas, solo en casos raros los organismos más grandes tienen más del doble del tamaño
de la célula. más pequeño ( Fig. 3 ).

Figura 3.
Histograma del tamaño de las células de Escherichia coli durante el crecimiento en medio rico en
nutrientes. El tamaño de las celdas de tipo salvaje (negro) está restringido dentro de un estrecho
rango doble. El gráfico está sesgado ligeramente hacia la izquierda debido al mayor número de
células recién nacidas, consecuencia de la fisión binaria. Los mutantes de biosíntesis de UDP-
glucosa ( pgm :: kan) (líneas discontinuas) son más pequeños que los de tipo salvaje en
promedio; sin embargo, el tamaño de estas celdas está restringido de manera similar dentro de un
rango doble. (Datos cortesía de Norbert Hill.)
Al igual que los eucariotas, las bacterias inician y finalizan una ronda de replicación de
ADN para cada evento de división. Sin embargo, a diferencia de los eucariotas, la
replicación del ADN, la segregación cromosómica y el ensamblaje de la maquinaria de
división no son eventos discretos, sino que se superponen en mayor o menor grado
dependiendo de la tasa de crecimiento ( Fig. 4 ).
Figura 4.
Representación circular del ciclo celular en células bacterianas de rápido crecimiento (tiempo de
duplicación de masa <60 min). Tenga en cuenta que la replicación y el crecimiento del ADN son
más o menos constantes, una consecuencia de la replicación de múltiples equipos. Una nueva ronda
de replicación se inicia solo una vez por ciclo. Al menos una ronda de replicación debe terminarse
antes de la división. Aunque la maquinaria de división se ensambla mucho antes de la citocinesis (el
anillo FtsZ existe durante aproximadamente el 90% del tiempo de duplicación de masa en células
cultivadas en un medio muy rico), la constricción en sí misma toma solo unos pocos minutos.
Es importante destacar que, a tasas de crecimiento rápidas respaldadas por condiciones
ricas en nutrientes, las bacterias pueden mantener períodos de interdivisión de menos de la
mitad del tiempo requerido para la replicación de su ADN cromosómico. Por ejemplo, E.
coli puede duplicarse en masa y dividirse en tan solo 20 min; sin embargo, incluso en
condiciones ideales, la replicación de todo el cromosoma E. coli de 4 Mb tarda
aproximadamente 60 minutos. Las células que crecen rápidamente resuelven este conflicto
aparente sintetizando constantemente el ADN e iniciando nuevas rondas de replicación
antes de completar la antigua. Dichas células pueden tener 4, 8 o incluso 16 horquillas de
replicación en curso ( Yoshikawa et al. 1964 ; Cooper y Helmstetter 1968) Aunque el inicio
se restringe a una vez por ciclo de división, solo se necesita completar una ronda de
replicación antes de la división. Dentro de un solo ciclo de división, los eventos de
iniciación y terminación, por lo tanto, no corresponden necesariamente a la misma
bifurcación de replicación.

Trabajo temprano sobre la homeostasis del tamaño de una celda

En 1968, William Donachie propuso que la homeostasis del tamaño de la célula estaba
vinculada a la progresión del ciclo celular ( Donachie 1968 ). Combinando datos
sobre Salmonella del laboratorio de Maaløe con datos de E. coli de Cooper y Helmstetter
( Schaechter et al. 1958 ; Cooper y Helmstetter 1968 ), Donachie dedujo que las células
bacterianas inician la replicación del ADN al alcanzar una masa específica. Donachie
sugirió que la acumulación dependiente del crecimiento de un factor de acción positivo, o
la inhibición de un factor de acción negativo, sería suficiente para coordinar el inicio del
ciclo celular con el tamaño de la célula.
El trabajo posterior implicó el AAA + ATPasa DnaA altamente conservado , un activador
de la replicación del ADN dependiente de la dosis, en el control del tamaño de células de E.
coli ( Løbner-Olesen et al. 1989 ). La reducción de los niveles de DnaA retrasa el inicio de
la replicación del ADN y aumenta el tamaño celular, mientras que el aumento de los niveles
de DnaA da como resultado un inicio prematuro y un tamaño celular reducido.
A primera vista, vincular el inicio de la replicación al tamaño de la célula es una forma
ideal de corregir cualquier defecto en el tamaño de la célula al comienzo del ciclo
celular. Las células cortas tendrán que crecer más antes de que acumulen suficiente DnaA
para iniciar la replicación del ADN, mientras que las células más largas se iniciarán antes (y
por lo tanto, en tamaños más pequeños) porque los niveles críticos de DnaA se alcanzan
antes en el ciclo celular. La observación de que en Saccharomyces cerevisiae se requiere
alcanzar un tamaño específico antes de que las células no unidas puedan pasar por START
en la transición G 1 / S sugiere que este tipo de control puede ser ampliamente aplicable
( Pringle y Hartwell 1981 ). (Curiosamente, el gen dnaA de Epulopisciumsp. el tipo B
codifica un tracto de mononucleótido excepcionalmente largo, un punto caliente para el
deslizamiento de la polimerasa y la posible expresión de un péptido truncado y no funcional
[ Mendell et al. 2008 ]. Aunque no se conoce la contribución específica de esta estructura
genética inusual a la regulación de DnaA, es posible que juegue un papel en el aumento de
la relación volumen-ADN citoplásmico de Epulopiscium al reducir los niveles de DnaA y
retrasar la replicación).
A pesar del atractivo de este modelo, los datos recientes sugieren que la acumulación de
DnaA es poco probable que sea el único o incluso el principal determinante del tamaño de
las células bacterianas. Pequeños mutantes de B. subtilis muestran perfiles de ciclo celular
de tipo salvaje con respecto a la iniciación y la replicación del ADN, lo que sugiere que la
iniciación es independiente del tamaño de la célula en este organismo modelo Gram-
positivo ( Hill et al. 2012 ). Incluso en E. coli , en el que la iniciación es muy sensible a los
cambios modestos en la cantidad de DnaA activa ( Løbner-Olesen et al. 1989 ), la
regulación de la masa al inicio es solo una parte de la historia. Las mutaciones que resultan
en un inicio temprano o tardío parecen ajustar su tasa de síntesis de ADN para compensar
los cambios en el tiempo de inicio ( Hill et al. 2012) Juntos, estos datos sugieren la
presencia de un mecanismo homeostático e independiente de DnaA para mantener períodos
normales de interdivisión.

División celular y control de tamaño de celda

En la mayoría de las bacterias, la división se inicia mediante el ensamblaje de la GTPasa
FtsZ esencial en una estructura similar a un anillo en el sitio de la división futura. El "anillo
Z" sirve como marco para el ensamblaje del resto de la maquinaria de división celular. Los
datos estructurales sugieren que FtsZ es un precursor evolutivo de la tubulina, aunque las
dos proteínas comparten una similitud de secuencia limitada. Aproximadamente un tercio
de FtsZ en la celda está en el anillo FtsZ en un momento dado con tasas de rotación de
subunidades del orden de segundos. (Para revisiones de FtsZ y división celular bacteriana,
ver Erickson et al. 2010 y Lutkenhaus et al. 2012 ).
La alteración de los niveles de FtsZ tiene un impacto directo en el tamaño celular, lo que
hace que la proteína del citoesqueleto sea un objetivo ideal para los factores que rigen la
homeostasis del tamaño celular. El agotamiento de FtsZ no afecta el crecimiento celular o
la replicación del ADN, al menos inicialmente, y resulta en un rápido aumento de la
longitud. Incluso reducciones modestas (∼20%) en la concentración intracelular de FtsZ
conducen a un gran aumento (> 50%) en la longitud celular en condiciones de estado
estacionario ( Palacios et al. 1996 ).
Si uno imagina el anillo citocinético como un edificio de ladrillos, entonces es fácil ver
cómo los cambios en el suministro de ladrillos influirían en el tamaño de la celda. Cuando
la concentración de FtsZ es alta, los ladrillos están fácilmente disponibles, lo que reduce el
tiempo de transporte y facilita el ensamblaje de un anillo Z estable y funcional. Sin
embargo, las reducciones en FtsZ disponibles ralentizan el transporte de ladrillos al sitio de
construcción, retrasando el ensamblaje de la maquinaria de la división y con ella la
citocinesis. A medida que las células continúan aumentando de tamaño a velocidades
normales, los retrasos en el ensamblaje del anillo citocinético se traducen directamente en
aumentos del tamaño de las células.
Debido a que los niveles de FtsZ son proporcionales al tamaño celular en E. coli y B.
subtilis , independientemente de la tasa de crecimiento ( Weart y Levin 2003 ), las
variaciones estocásticas en el tamaño celular deberían mitigarse en gran medida por la
disponibilidad de FtsZ. Las celdas cortas requerirán períodos más largos para acumular
suficientes FtsZ para dividirse, aumentando su tamaño en la división. Por el contrario, las
células más largas tomarán menos tiempo para acumular suficiente FtsZ para soportar el
ensamblaje de la maquinaria de división y, en consecuencia, mostrarán períodos de
interdivisión más cortos que reducen la longitud de las células hijas.
Así como la acumulación de DnaA por sí sola es insuficiente para explicar la homeostasis
del tamaño de la célula, la acumulación de FtsZ por sí sola es insuficiente para
desencadenar la división. Aunque la sobreexpresión doble de FtsZ reduce el tamaño celular
en aproximadamente un 10% tanto en E. coli como en B. subtilis , no afecta
significativamente el momento de la división ( Ward y Lutkenhaus 1985 ; Weart y Levin
2003 ; Hill et al. 2012) La incapacidad del exceso de FtsZ para desencadenar la división
sugiere la presencia de factores aún no identificados necesarios para autorizar el ensamblaje
de FtsZ en el sitio de división naciente. Cómo se integran estos factores con la progresión
del ciclo celular sigue siendo una pregunta abierta. También vale la pena señalar que FtsZ
es uno de los muchos componentes de la maquinaria citocinética, algunos de los cuales
también limitan la velocidad de división y, por lo tanto, candidatos potenciales para los
reguladores homeostáticos del tamaño celular ( Lutkenhaus et al. 2012 ).
Aunque un modelo en el que la homeostasis del tamaño de la célula depende de la
acumulación de un componente del ciclo celular limitante de la velocidad es consistente
con lo que sabemos sobre la división en E. coli , B. subtilis y Caulobacter , es más difícil
ver cómo sería aplicar a organismos que se dividen por brotación o crecimiento de la punta,
así como a aquellos que muestran patrones de crecimiento no
lineales. Las células individuales de E. coli se alargan a una velocidad más o menos
constante en condiciones de estado estacionario ( Wang et al. 2012 ). En contraste,
el alargamiento de la punta de Mycobacterium smegmatis ocurre a diferentes velocidades
dependiendo de si la célula heredó un viejo polo que está preparado para el crecimiento, o
un nuevo polo que no lo está ( Aldridge et al. 2012) En casos que involucran asimetría de
crecimiento en células hijas, otros mecanismos deben estar en juego. Los mecanismos que
rigen la homeostasis del tamaño de las células son igualmente misteriosos para aquellos
organismos que se reproducen por gemación, como Hyphomicrobium , Planctomyces spp.,
Etc .; organismos coloniales que ajustan los niveles de ploidía y la longitud celular durante
las transiciones del desarrollo, como los estreptomicetos; bacterias que desacoplan períodos
de replicación y crecimiento del ADN de rondas de citocinesis como en algunas
cianobacterias y Bdellovibrio ; y, finalmente, aquellos que se reproducen por producción
interna de células hijas, como Epulopiscium ( Angert 2005 ).
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REGULACIÓN DEPENDIENTE DE NUTRIENTES DEL TAMAÑO DE

CÉLULAS
La disponibilidad de nutrientes es el determinante principal del tamaño celular en muchas
bacterias. En un artículo clásico, Schaechter, Maaløe y Kjeldgaard determinaron que el
tamaño de las células de Salmonella varía hasta dos veces según la tasa de crecimiento
( Schaechter et al. 1958) Las células cultivadas en medio rico en nutrientes con tiempos de
duplicación de ∼20 min tenían más del doble del tamaño de sus contrapartes cultivadas en
medio pobre en nutrientes con tiempos de duplicación de masa de más de una
hora. Significativamente, la relación entre la tasa de crecimiento y el tamaño se mantuvo
independientemente de si el crecimiento se desaceleró al limitar el carbono, el fosfato o el
nitrógeno sugirió que el tiempo de duplicación, en lugar del contenido específico de
nutrientes del medio, era el determinante principal del tamaño celular. Sin embargo, un
trabajo más reciente sugiere que el tamaño bacteriano es un fenómeno complejo, que
depende de un conjunto de circuitos reguladores orquestados con precisión, cada uno de los
cuales responde a señales dependientes de nutrientes diferentes y potencialmente
superpuestas.
En E. coli y B. subtilis , UDP-glucosa, un azúcar nucleótido sintetizado en dos pasos a
partir de glucosa-6, sirve como una señal intracelular para la disponibilidad de carbono y la
tasa de crecimiento. Los defectos en la fosfoglucomutasa requerida para la interconversión
de Glc-6 y Glc-1 y la pirofosforilasa responsable de sintetizar UDP-glc a partir de Glc1
reducen el tamaño de las células de E. coli y B. subtilis hasta en un 30% en condiciones
ricas en nutrientes ( Weart et al.2007 ; Hill et al.2013) De acuerdo con un mecanismo
dependiente de la tasa de crecimiento, la pérdida de la síntesis de UDP-glc tiene poco
impacto en el tamaño de las células cultivadas en medio pobre en nutrientes. Su proximidad
al metabolismo central del carbono hace que UDP-glc sea una señal ideal para la
disponibilidad de carbono.
Los niveles de glucosa UDP son detectados y transmitidos a la maquinaria de división por
dos glucosiltransferasas no relacionadas, OpgH y UgtP, en E. coli y B.
subtilis.respectivamente. Aunque UDP-glucosa estimula las interacciones entre OpgH,
UgtP y FtsZ, los mecanismos moleculares por los cuales funcionan son altamente
divergentes. OpgH es una proteína de membrana integral. Los datos genéticos y
bioquímicos sugieren que la unión UDP-glc impulsa un cambio conformacional que revela
un sitio de unión para FtsZ. Al secuestrar los monómeros de FtsZ, OpgH reduce
efectivamente la cantidad de FtsZ disponible para ensamblar en el anillo citocinético. UgtP,
por otro lado, solo se asocia transitoriamente con la membrana. UgtP interactúa consigo
mismo o con FtsZ en lo que parece ser una manera mutuamente excluyente. La homo-
oligomerización de UgtP se ve favorecida en ausencia de UDP-glucosa, mientras que el
aumento de los niveles intracelulares de UDP-glucosa durante el crecimiento en medio rico
en nutrientes promueve la interacción con FtsZ ( Chien et al. 2013) Los niveles de UgtP son
altos durante el crecimiento en medio rico en nutrientes, pero bajos en medio pobre en
nutrientes, lo que alivia aún más la inhibición de la división durante el crecimiento lento
( Weart et al. 2007 ). UgtP inhibe el ensamblaje de FtsZ pero no tiene impacto en la
hidrólisis de GTP, lo que sugiere que puede tener una actividad similar a las proteínas que
cortan los microtúbulos como Katanin ( Chien et al. 2013 ).
Llama la atención que dos de estos organismos evolutivamente divergentes ( E. coli y B.
subtilis están más relacionados que el Homo sapiens y S. cerevisiae ) usan UDP-glucosa y
glucosiltransferasas no relacionadas para ayudar a coordinar el tamaño celular con la tasa
de crecimiento y la disponibilidad de nutrientes. OpgH y UgtP son proteínas de "luz de
luna" con funciones en la biogénesis de la envoltura celular. OpgH participa en la síntesis
de los glucanos periplásmicos osmoregulados (OPG), glucanos grandes que se encuentran
entre las membranas internas y externas de las bacterias Gram negativas, mientras que UgtP
sintetiza el ancla Di-Glc-diacilglicerol para el ácido lipoteicoico, un componente aniónico
importante de la pared celular grampositiva ( Lazarevic et al. 2005 ;Lequette y
col. 2008 ). Se cree que tanto los OPG como los LTA desempeñan un papel en la respuesta
celular a los cambios en la osmolaridad, una respuesta al estrés que conduce a un arresto
temporal de la división celular. La síntesis de OPG o LTA es la fuente principal de
diacilglicerol (DAG) en E. coli y B. subtilis ( Zhang y Rock 2008) Aunque el diacilglicerol
es un mensajero secundario bien estudiado en eucariotas, aún no se ha implicado en la
señalización en bacterias. Una posibilidad es que la acumulación de DAG sirva como proxy
de la biogénesis de la envoltura celular, transmitiendo información sobre la tasa de
crecimiento real (en lugar de la disponibilidad de nutrientes) a la maquinaria de
división. Curiosamente, FabH, una enzima responsable de catalizar un primer paso en la
biosíntesis de ácidos grasos, también se ha implicado en el control del tamaño celular
dependiente de nutrientes; aunque, si FabH juega un papel directo o indirecto aún no se ha
establecido ( Yao et al. 2012 ).
Al mismo tiempo, es poco probable que la disponibilidad de carbono sea el único
determinante del tamaño celular. Como Schaechter et al. mostradas en su artículo seminal
de 1958, limitando no solo el carbono, sino también otros nutrientes, incluidos el nitrógeno
y el fosfato, conduce a reducciones tanto en la tasa de crecimiento como en la masa celular
( Schaechter et al. 1958 ). Además, las células de crecimiento rápido defectuosas en la
biosíntesis de UDP-glucosa siguen siendo significativamente más grandes que sus
contrapartes de crecimiento lento ( Weart et al. 2007 ; Hill et al. 2013 ). Estas
observaciones sugieren fuertemente la presencia de moléculas de señalización intracelular
adicionales y sensores afines, algunos de los cuales probablemente están acoplados a la
utilización de nitrógeno y fosfato, que también contribuyen al aumento del tamaño celular
dependiente de la tasa de crecimiento.
No se sabe con precisión por qué las células aumentan de tamaño en respuesta a los
aumentos de la tasa de crecimiento dependientes de nutrientes. Sin embargo, el análisis de
la formación de anillos de FtsZ y la segregación cromosómica en cepas mutantes de tipo
salvaje y cortas sugiere que los aumentos en el tamaño de las células durante el crecimiento
rápido ayudan a garantizar que haya espacio suficiente para acomodar el ADN adicional
generado por la replicación de múltiples equipos. Tanto E. coli como B. subtilis mantienen
una relación constante de masa celular a ADN independientemente de la tasa de
crecimiento ( Sargent 1975 ; Donachie y Begg 1989 ; Sharpe et al. 1998 ). Esto también
parece ser cierto para las bacterias gigantes ( Mendell et al. 2008) Debido a que la
segregación y división cromosómica no están acopladas como lo están en los eucariotas, los
defectos en el tamaño de las células bacterianas conducen a un aumento en la frecuencia de
los anillos de FtsZ y los tabiques de división sobre los nucleoides no segregados en
condiciones que apoyan el crecimiento rápido ( Weart et al. 2007 ; Hill et al. 2013 ). (La
viabilidad se preserva en estos casos por las transferasas de ADN que bombean el ADN
cromosómico lejos del tabique invasor).
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PENSAMIENTOS CONCLUYENTES
Al igual que con nuestra apreciación de los papeles vitales y diversos que juegan las
bacterias en los ciclos biogeoquímicos de la tierra, apenas estamos comenzando a
comprender las fuerzas moleculares y físicas que gobiernan el tamaño de las bacterias. La
catalogación de la naturaleza diversa de la vida bacteriana, tanto en términos físicos como
metabólicos, y la caracterización de los aspectos más manejables de su fisiología ha llevado
a avances en nuestra comprensión no solo de las bacterias, sino también de los aspectos
fundamentales de la biología comunes a todas las formas de vida.
Significativamente, los mecanismos que han estado implicados en el control del tamaño
celular en eucariotas, incluida la endoreduplicación (revisado en Lee et al. 2009 ), la
señalización de nutrientes (revisado en Davie y Petersen 2012 ) y, por supuesto, el control
del ciclo celular (ver revisiones) por Jorgensen y Tyers 2004 ; Goranov y Amon 2010 )
están repitiendo temas en el control del tamaño de las células bacterianas. Anticipamos que
la aplicación de técnicas, tanto las probadas como las verdaderas (p. Ej., El increíble poder
de la genética microbiana), y las nuevas (p. Ej., Microfluídica [ Wang et al. 2012 ], análisis
de imágenes de alto rendimiento [ Cabeen et al. 2009 ; Russell et al. 2013 ], y
metabolómica unicelular [Zenobi 2013 ]) revelará información sobre el control del tamaño
celular en bacterias que se aplican a todos.