Principio de autonomía[editar]
La autonomía expresa la capacidad para darse normas o reglas a uno
mismo sin influencia de presiones externas o internas. El principio de
autonomía tiene un carácter imperativo y debe respetarse como norma,
excepto cuando se dan situaciones en que las personas puedan no ser
autónomas o presenten una autonomía disminuida (personas en estado
vegetativo o con daño cerebral, etc.), en cuyo caso será necesario
justificar por qué no existe autonomía o por qué ésta se encuentra
disminuida. En el ámbito médico, el consentimiento informado es la
máxima expresión de este principio de autonomía, constituyendo un
derecho del paciente y un deber del médico, pues las preferencias y los
valores del enfermo son primordiales desde el punto de vista ético y
suponen que el objetivo del médico es respetar esta autonomía porque
se trata de la salud del paciente.
Principio de beneficencia[editar]
Obligación de actuar en beneficio de otros, promoviendo sus legítimos
intereses y suprimiendo prejuicios. En medicina, promueve el mejor
interés del paciente pero sin tener en cuenta la opinión de éste. Supone
que el médico posee una formación y conocimientos de los que el
paciente carece, por lo que aquél sabe (y por tanto, decide) lo más
conveniente para éste. Es decir "todo para el paciente pero sin contar
con él".
Un primer obstáculo al analizar este principio es que desestima la
opinión del paciente, primer involucrado y afectado por la situación,
prescindiendo de su opinión debido a su falta de conocimientos médicos.
Sin embargo, las preferencias individuales de médicos y de pacientes
pueden discrepar respecto a qué es perjuicio y qué es beneficio. Por ello,
es difícil defender la primacía de este principio, pues si se toman
decisiones médicas desde éste, se dejan de lado otros principios válidos
como la autonomía o la justicia.
Principio de no maleficencia[editar]
Abstenerse intencionadamente de realizar actos que puedan causar
daño o perjudicar a otros. Es un imperativo ético válido para todos, no
sólo en el ámbito biomédico sino en todos los sectores de la vida
humana. En medicina, sin embargo, este principio debe encontrar una
interpretación adecuada pues a veces las actuaciones médicas dañan
para obtener un bien. Entonces, de lo que se trata es de no perjudicar
innecesariamente a otros. El análisis de este principio va de la mano con
el de beneficencia, para que prevalezca el beneficio sobre el perjuicio.
Las implicaciones médicas del principio de no maleficencia son varias:
tener una formación teórica y práctica rigurosa y actualizada
permanentemente para dedicarse al ejercicio profesional, investigar
sobre tratamientos, procedimientos o terapias nuevas, para mejorar los
ya existentes con objeto de que sean menos dolorosos y lesivos para los
pacientes; avanzar en el tratamiento del dolor; evitar la medicina
defensiva y, con ello, la multiplicación de procedimientos y/o tratamientos
innecesarios.
Aparece por primera vez en el Informe Belmont (1978).
Principio de justicia[editar]
Tratar a cada uno como corresponda, con la finalidad de disminuir las
situaciones de desigualdad (ideológica, social, cultural, económica, etc.).
En nuestra sociedad, aunque en el ámbito sanitario la igualdad entre
todos los hombres es sólo una aspiración, se pretende que todos sean
menos desiguales, por lo que se impone la obligación de tratar igual a los
iguales y desigual a los desiguales para disminuir las situaciones de
desigualdad.
El principio de justicia puede desdoblarse en dos: un principio formal
(tratar igual a los iguales y desigual a los desiguales) y un principio
material (determinar las características relevantes para la distribución de
los recursos sanitarios: necesidades personales, mérito, capacidad
económica, esfuerzo personal, etc.).
Las políticas públicas se diseñan de acuerdo con ciertos principios
materiales de justicia. En España, por ejemplo, la asistencia sanitaria es
teóricamente universal y gratuita y está, por tanto, basada en el principio
de la necesidad. En cambio, en Estados Unidos la mayor parte de la
asistencia sanitaria de la población está basada en los seguros
individuales contratados con compañías privadas de asistencia médica.
Para excluir cualquier tipo de arbitrariedad, es necesario determinar qué
igualdades o desigualdades se van a tener en cuenta para determinar el
tratamiento que se va a dar a cada uno. El enfermo espera que el
médico haga todo lo posible en beneficio de su salud. Pero también debe
saber que las actuaciones médicas están limitadas por una situación
impuesta al médico, como intereses legítimos de terceros.
La relación médico-paciente se basa fundamentalmente en los principios
de beneficencia y de autonomía, pero cuando estos principios entran en
conflicto, a menudo por la escasez de recursos, es el principio de justicia
el que entra en juego para mediar entre ellos. En cambio, la política
sanitaria se basa en el principio de justicia, y será tanto más justa en
cuanto que consiga una mayor igualdad de oportunidades para
compensar las desigualdades.
Corrientes y tendencias en la bioética[editar]
a) Bioética personalista. Parte de la dignidad como valor propio de la
persona, la cual se manifiesta en su capacidad intrínseca de realizar los
valores. El fundamento de las orientaciones que deben apoyar las
propuestas de solución a los dilemas éticos se encuentra en la
naturaleza humana ya que la persona es el centro.
b) Bioética consensualista o civil. En esta corriente se busca establecer
un mínimo de principios aplicables dentro de una sociedad pluralista y
secular. Se basa en los postulados de la llamada “Ética de mínimos” que
propone un conjunto de normas a cumplir por todos los miembros de la
sociedad y que sería producto del consenso social en torno a ciertos
parámetros mínimos de convivencia.
c) Bioética clínica. Esta escuela sigue el enfoque biomédico que se da a
partir de Hellegers con su trabajo en el Kennedy Institute of the Bioethics.
Su centro de atención son los problemas suscitados por el avance en el
conocimiento científico y tecnológico respecto de su aplicación en los
diferentes ámbitos de la salud humana.
d) Bioética social. Su centro de interés es la problemática de la justicia y
el desarrollo social como el mejoramiento de las condiciones de vida de
la población en equilibrio con el medio en que interactúa. Hay un énfasis
en la promoción de los derechos humanos en una sociedad plural.
e) Bioética transdisciplinar, como ciencia de la complejidad. Esta
corriente es menos conocida y surge desde la perspectiva de las
ciencias de la complejidad. Dentro de los sistemas dinámicos de los que
se ocupa la complejidad como ciencia, está la vida, la cual es analizada
por la bioética que tiene carácter inter y transdiplinario, no lineal. Este
estudio abarca no solo la vida humana, sino las demás existentes y su
interacción con los sistemas dinámicos.
Ámbitos de la bioética[editar]
Aunque la bioética está muy relacionada con la ética no son lo mismo.
En el caso de la medicina, la ética médica no es idéntica a la bioética
médica: la ética médica trata los problemas planteados por la práctica de
la medicina mientras que la bioética es un tema más amplio que aborda
los problemas morales derivados de los avances en las ciencias
biológicas en general. La bioética se diferencia de la ética, según
algunos autores, en que no necesita la aceptación de ciertos valores
tradicionales que son fundamentales para la ética. 12
 Problemas éticos derivados de las profesiones
sanitarias: transfusiones de sangre, eutanasia, trasplantes de
órganos, reproducción asistida o mediante fertilización in vitro,aborto,
todos los asuntos implicados en la relación médico-paciente.
 Problemas de la investigación científica, en particular
la investigación biomédica, que tanto pueden transformar al
hombre: manipulación genética, tecnologías reproductivas como la
fecundación in vitro o la (por ahora sólo
hipotética) clonación humana, etc.
 Los problemas ecológicos, del medio ambiente y la biosfera:
necesidad de conservación del medio ambiente, como mantener el
equilibrio entre las especies y el respeto hacia los animales y la
naturaleza, impedir el uso de energía nuclear, controlar el
crecimiento de la población mundial y el incremento del hambre en
los países pobres, etc.
 Influencia social y política de las cuestiones anteriores, en cuanto
a legislación, educación, políticas sanitarias, religión, etc.
 Temáticas relativas a la relación entre neurología y ética, que
daría lugar a lo que se conoce como neuroética.
La Dra. María Dolores Vila-Coro Barrachina, en su libro La vida humana
en la encrucijada, establece una clasificación de la bioética en cuatro
aspectos: 13
 La bioética teórica, o «meta-bioética», que trata los fundamentos
conceptuales de la bioética en el marco de las teorías morales y la
justificación de sus nociones básicas (persona, dignidad, autonomía,
etc.).
 La bioética clínica, referida a las decisiones éticas que se toman
en la práctica profesional, vinculada a la deontología médica clásica
y que se focaliza en los casos individuales de los pacientes que
plantean la resolución de un problema ético.
 La bioética normativa, conocida también como «bioderecho», en
la que tienen una participación directa juristas y autoridades públicas
y que se orienta hacia la adopción de reglas generales en la política
sanitaria y el sistema jurídico. Centra su interés en la racionalidad de
las decisiones colectivas en las áreas donde confluyen la salud
pública, los derechos humanos y la regulación de los avances
científicos.
 La bioética cultural, que trata del esfuerzo sistemático en
relacionar los nuevos dilemas bioéticos con el contexto histórico y
sociocultural en el que se dan. Trata de evitar la imposición de
determinadas visiones de la bioética en sociedades que tienen
valores distintos.
Manipulación de las células en cultivo[editar]
Al estar generalmente las células en continua división durante el cultivo,
es normal que crezcan hasta ocupar toda el área o volumen disponible.
Esto puede generar varios problemas:
 Agotamiento de los nutrientes del medio
 Acumulación de células apoptóticas o necróticas
 Inhibición de la división celular por contacto: los contactos entre
células pueden desencadenar un arresto del ciclo celular
 Diferenciación celular promiscua provocada por los contactos
intercelulares
Estos problemas pueden afrontarse mediante métodos de cultivo celular
en esterilidad. El objetivo de estos métodos es evitar la contaminación
con bacterias o levaduras que competirían por los nutrientes y/o podrían
infectar y así eliminar las células. Toda manipulación se lleva a cabo,
típicamente, en una campana de flujo laminar para evitar la entrada
de microorganismos contaminantes. También pueden
añadirse antibióticos al medio de cultivo.
Entre las manipulaciones más comunes llevadas a cabo en cultivos cabo como mecanismos adecuados para suprimir la expresión de un
celulares, se encuentran los cambios de medio, el pase de las células y particular gen.
la transfección.
El DNA también puede ser introducido en las células usando virus, en
Cambios de medio[editar] métodos llamados transducción, infección o transformación. Los virus,
como agentes parásitos, son adecuados para introducir DNA en células,
El objetivo de los cambios de medio es renovar los nutrientes y evitar la
ya que esto forma parte de su ciclo normal de reproducción.
acumulación de productos metabólicos potencialmente tóxicos y de
células muertas. En el caso de las suspensiones celulares, las células se Líneas celulares humanas establecidas[editar]
separan del medio mediante centrifugación y se resuspenden en medio
fresco. En los cultivos adherentes, el medio puede eliminarse
directamente mediante aspiración y reemplazarse por el fresco.

Pase de las células[editar]

El pase de las células supone transferir un pequeño número de células a

un nuevo continente. Las células pueden cultivarse más tiempo si se
pasan regularmente, ya que así se evita la senescencia asociada a
situaciones prolongadas de alta densidad celular. Con cultivos en
suspensión el pase se hace fácilmente, tomando una pequeña cantidad
de cultivo que contenga unas pocas células y diluyéndola en un volumen
mayor de medio fresco. En cultivos adherentes, las células han de ser Una de las primeras líneas celulares humanas, obtenida de Henrietta Lacks,
inicialmente despegadas; esto se efectúa comúnmente con una mezcla quien falleció de cáncer de útero a partir del cual se obtuvieron estas células. El
de tripsina y EDTA, aunque actualmente existen otras mezclas de cultivo de células HeLa que se muestra en la imagen fue teñido con Hoescht que
enzimas para esto. Un pequeño número de las células despegadas se une al ADNcoloreando de azul el núcleo.
pueden sembrarse en un nuevo continente.
Las líneas celulares originadas a partir de tejido de seres
Transfección y transducción[editar] humanos presentan controversias bioéticas, ya que pueden sobrevivir a
Artículos principales: Transfección  y Transducción (genética). los organismos parentales y ser utilizadas para el descubrimiento de
tratamientos médicos muy lucrativos después del falleciemiento de las
Otro método común en la manipulación de las células es la introducción
personas que las produjeron. Una decisión pionera en este aspecto fue
de un DNA externo por transfección. Esto se lleva a cabo a menudo para
el fallo de la Suprema Corte de California que en 1990 determinó que los
conseguir que las células expresen una proteína de interés. Más
pacientes no tienen derechos propietarios sobre las líneas celulares
recientemente, la transfección de RNA interferentes se han llevado a
derivadas de órganos retirados con su consentimiento. 5 Se estima que
aproximadamente el 20% de las líneas celulares humanas no
corresponden al tipo de células que generalmente se asume que
6
son.  Esto se debe a que algunas líneas celulares crecen más rápido que
otras y pueden contaminar cultivos de otras líneas celulares y, con el
tiempo, sobrecrecer y desplazar a las células originales. El contaminante
más común es la línea celular HeLa. Este hecho no es significativo
cuando se estudian la propiedades generales del metabolismo celular
pero es muy importante en la investigación médica enfocada en un tipo
específico de células. Los resultados de tales investigaciones contendrán
errores, si no están completamente equivocados en sus conclusiones,
con posibles consecuencias para los desarrollos terapeúticos basados
7 8
en ellos.   Ventajas y desventajas de los cultivos
Generación de hibridomas[editar]
Artículo principal: Hibridoma
Es posible fusionar células normales con una línea celular inmortalizada.
Con este método se produce anticuerpos monoclonales. Brevemente, los
linfocito aislados del bazo o médula ósea de un ratón inmunizado se
combinan con una línea celular de mieloma inmortalizada (células del
linaje B) para producir un hibridoma el cual posee la especificidad de
anticuerpos de los linfocito primarios y la inmortalidad de la línea celular
de mieloma. Las células de mieloma sin fusionar se seleccionan en
un medio de cultivo selectivo (HA o HAT), de esta manera los linfocitos
primarios mueren rápidamente y solamente las células fusionadas
sobreviven. Los hibridomas productores del anticuerpo deseado se
seleccionan a partir de grupos hasta llegar a colonias individuales.
Aplicaciones del cultivo celular[editar]
El cultivo masivo de líneas celulares animales es fundamental para la
manufactura de vacunas virales y diversos productos biotecnológicos.
Los productos biológicos producidos mediante la tecnología del ADN
recombinante en cultivo celular
incluyen enzimas, hormonas sintéticas, inmunobiológicos (anticuerpos
monoclonales, interleucinas, linfoquinas yagentes anticancerígenos). A
pesar de que muchas proteínas pueden producirse mediante ADN
recombinante en cultivos bacterianos, las proteínas más complejas que
son glicosiladas (modificadas mediante el agregado de carbohidratos)
deben producirse en células animales. Un ejemplo relevante de tales
proteínas complejas es la hormonaeritropoyetina. Actualmente, se están
realizando investigaciones para producir tales proteínas complejas en
células de insectos o de plantas superiores, debido al alto costo que
implica producir tales proteínas complejas en células de mamíferos.
celulares[editar]
Los cultivos celulares tienen una serie de ventajas innegables, pero al
mismo tiempo tienen desventajas que hay que tener en consideración.
Como ventajas podemos citar:
- Permiten un control preciso y fino del medio ambiente. En un cultivo se
pueden controlar todos los factores del medio: Físico-químicos (pH,
temperatura, presión osmótica, niveles de O2, CO2, tensión
superficial...), y fisiológicos (hormonas, factores de crecimiento, densidad
celular,...)
- Caracterización y homogeneidad de la muestra. Las células en cultivo
de una línea celular, o de una línea continua son homogéneas, con
morfología y composición uniformes. Se pueden obtener con facilidad un
número elevado de réplicas idénticas, con lo que se supera el grave
problema de heterogeneidad de las muestras inherente asociado al uso
de animales de experimentación.
- Economía. Suponen una economía en el uso de reactivos o drogas a
estudiar pues al realizarse en volúmenes reducidos, y con un acceso
directo de las células a la droga las concentraciones requeridas son
mucho más bajas que en el animal completo.
En cuanto a las desventajas del cultivo celular:
- Técnica sensible. El crecimiento de las células animales es mucho más
lento que el de los contaminantes más habituales (hongos, levaduras,
bacterias, micoplasmas...) y además dado que proceden de organismos
pluricelulares son incapaces de crecer en ausencia de una compleja
mezcla de nutrientes que simula el plasma o el fluido intersticial. Esto
supone la necesidad de mantener las condiciones de asepsia en todo
momento, lo cual es limitante a nivel tanto del instrumental requerido
como del personal calificado para su manipulación.
- Cantidad y costo. El costo de producción de 1 g de tejido en cultivo es
más de 10 veces superior al obtenido en el animal. Asimismo existe una
limitación de producción, que es del orden de 10 g de células en un
laboratorio normal, y que para ser superior a 100 g requiere instalaciones
de tipo industrial.
- Inestabilidad. Muchas de las líneas celulares continuas son inestables,
como consecuencia de la dotación cromosómica aneuploide. La
población celular puede variar su composición si alguna de las
subpoblaciones celulares es capaz de crecer con una tasa ligeramente
superior, es decir podemos encontrar diferencias significativas en la línea
celular de una generación a la siguiente. La única manera de evitarlo es
emplear líneas estables que se resiembran a partir de un stock
congelado cada determinado tiempo, o después de un determinado
número de generaciones.
- La investigación biomédica supone el sacrificio cada año de muchos
miles de animales de experimentación. El cultivo celular no puede
reemplazar siempre el ensayo "in vivo" pero es una alternativa válida en
muchas situaciones.
Estudios que emplean cultivos celulares[editar]
Los estudios que emplean cultivos celulares abarcan gran número de
disciplinas y aproximaciones al estudio del fenómeno celular. Son:
Actividad celular. Estudia los mecanismos implicados en los diferentes
procesos intracelulares, como por ej: transcripción de DNA, síntesis de
proteínas, metabolismo energético...
Flujo intracelular. Estudia los movimientos intracelulares de sustancias y
señales asociadas a los diferentes procesos fisiológicos, como por
ejemplo: ensamblaje y desensamblaje de los diferentes componentes
intracelulares, movimientos del RNA: núcleo-citoplasma, movimiento de
proteínas.
Ecología celular. Estudio de las condiciones ambientales responsables
del mantenimiento de la funcionalidad celular, de su diferenciación...,
como por ej. estudio de las necesidades nutricionales, infecciones,
estudio de la transformación celular (inducidad por virus o agentes
químicos), cinética de la población celular,...
Interacciones celulares. Estudia los procesos de inducción embrionaria,
cooperación metabólica, inhibición por contacto o por adhesión,
interacciones célula-célula.
Como ejemplo de áreas de investigación fuertemente dependientes de
las técnicas de cultivo celular son:
- Virología: establecimiento de condiciones de cultivo de virus animales y
de plantas, producción de vacunas antivirales,...
- Investigación del cáncer
- Inmunología
- Ingeniería de proteínas. Por la producción de proteínas en líneas
celulares: interferón, insulina, hormona de crecimiento.
- Estudios de interacción y señalización celular, en la diferenciación y en
el desarrollo.
- Aplicaciones diagnósticas. Por ejemplo en medicina y farmacología
destacan el análisis cromosómico de células crecidas a partir de
muestras de amniocentesis, detección de infecciones virales, ensayos de
toxicidad,...
- Aplicaciones médicas: mantenimiento y producción de tejido para
trasplantes.
- Aplicaciones industriales y agronómicas: producción pro reproducción
"in vitro" de clones de plantas de interés cormecial.
Salud ocupacional: Mediante ensayos citogenéticos que permiten
detectar daño genético a nivel celular, donde los cultivos de linfocitos de
sangre periférica son una herramienta para aplicar ensayos como:
Ensayo de Micronucleos(MN), aberraciones cromosómicas (AC),
Intercambio de Cromatides Hermanas (ICH, a trabajadores expuestos a
algún agente citotóxico.
Cultivo de tejidos e ingeniería[editar]
El cultivo celular es un componente fundamental del cultivo de tejidos y
la ingeniería de tejidos, ya que establece los conocimientos básicos del
crecimiento y mantenimiento de células ex vivo.
Vacunas[editar]
En la actualidad las vacunas para enfermedades como
el polio, sarampión, paperas, rubéola y varicela se producen en cultivos
de células de mamíferos. El peligro que representa una
posible pandemia de influenza por la cepa H5N1 se están realizando
activas investigaciones con el fin de producir dicho virus en cultivos
celulares, financiadas por el gobierno de Estados Unidos. En marzo del
2009 se usó esta técnica para producir la primer partida de vacunas
(destinadas al testeo) para la influenza H1N1 en El D.F.9Entre las ideas
novedosas se encuentra el uso de vacunas basadas en ADN
recombinante con vectores derivados de adenovirus humanos,
causantes del resfrío común,10 11 o el uso de adjuvantes.12
Un operón se define como una unidad genética funcional formada por un
grupo o complejo de genes capaces de ejercer una regulación de su propia
expresión por medio de los sustratos con los que interaccionan
las proteínas codificadas por sus genes. Este complejo está formado por
genes estructurales que codifican para la síntesis de proteínas
(generalmente enzimas), que participan en vías metabólicas cuya expresión
generalmente está regulada por otros 3 factores de control, llamados:
 Factor promotor: zona que controla el inicio de la transcripción del
operón, ya que la ARN polimerasa tiene afinidad por ella. Realmente,
como un gen es cada unidad de transcripción independiente, y puesto
que el operón tiene un único promotor que controla toda su expresión,
no hay elementos para decir que se trate de "varios genes" de expresión
coordinada; más correcto sería decir que el operón es un único gen que
codifica un ARNm policistrónico (es decir, con muchos codones de inicio
y término, con lo que a la hora de traducirse dará lugar a varias
proteínas independientes). Sin embargo, es común referirse a los
"genes" del operón para hacer referencia a las regiones que, una vez
transcritas, codificarán proteínas independientes.
 Operador: zona de control que permite la activación/desactivación
del promotor a modo de "interruptor génico" por medio de su interacción
con un compuesto inductor. Esto lo logra porque tiene secuencias
reconocibles por proteínas reguladoras. Tras su unión, por plegamientos
tridimensionales interacciona con la zona del promotor, donde las
proteínas reguladoras que se han unido contactan con la ARN
Polimerasa, aumentando o disminuyendo su afinidad por el promotor, y
con ello dando lugar a la expresión/represión del resto de los genes
estructurales.
 Gen regulador: alguno de los genes del operón pueden codificar
factores de transcripción que se unan al promotor, regulando así la
propia expresión del operón. A toda regulación de la expresión realizada
desde dentro del gen u operón se le llama "regulación en cis", pero
 puede haber también genes muy alejados del operón que codifiquen
factores de transcripción para uno o varios otros genes u operones, y en
este caso se hablaría de "regulación en trans".
La ingeniería genética es la tecnología del control y transferencia
de ADN de un organismo a otro, lo que posibilita la corrección de los
defectos genéticos y la creación de nuevas cepas (microorganismos),
variedades (plantas) y razas (animales) para una obtención más eficiente de
sus productos.
Artículo principal:  ADN recombinante
A. tumefaciens adhiriéndose a una célula de zanahoria.
La tecnología del ADN recombinante consiste en aislar y manipular un
fragmento de ADN de un organismo para "recombinarlo" con el de otro
organismo.
Generalmente se trata el ADN con una endonucleasa de restricción que
origina en este caso un corte escalonado en las dos hebras dobles de ADN.
Los extremos escalonados de ambas hebras de ADN son complementarios,
una condición que tienen que tener si se quieren unir. Los dos ADNs así
cortados se mezclan, se calientan y sé enfrían suavemente. Sus extremos
cohesivos se aparearán dando lugar a un nuevo ADN recombinado, con
uniones no covalentes. Las uniones covalentes se forman añadiendo ADN
ligasa y una fuente energética para formar los enlaces.
Otra enzima clave para unir ADNs es la transferencia terminal, que puede
adicionar muchos residuos de desoxirribonucleótidos sucesivos al extremo 3
´de las hebras del ADN. De este modo pueden construirse colas de poli
Guanina en los extremos 3´ de una de las hebras de ADN y colas de poli
Citosina en los extremos de la otra cadena. Como estas colas son
complementarias, permitirán que los dos ADNs se unan por
complementariedad. Posteriormente, se forman los enlaces covalentes por la
ADN ligasa.
El ADN recombinado se inserta en un ADN vector que actúe como vehículo
para introducirlo en una célula hospedadora que lo replique, los vectores o
transportadores más utilizados son los plásmidos y el ADN del fago lambda.
La secuenciación del ADN[editar]
Artículo principal:  Secuenciación del ADN
Es un conjunto de técnicas que permiten conocer el orden en que aparecen
los nucleótidos en el ADN, que es la base de la información genética de los
organismos . Mediante esta técnica tiene aplicaciones médicas, como la
búsqueda de algún polimorfismo genético que se asocie con una
enfermedad; básicas: comparar la historia evolutiva de un organismo; o
forenses.
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR)[editar]
Artículo principal:  Reacción en cadena de la polimerasa
La técnica de la PCR aprovecha la actividad enzimática por la que
se replica el ADN en las células para conseguir una gran cantidad de copias
de ADN a partir de cantidades pequeñas. Se utiliza una polimerasa o una
mezcla de varias que puedan resistir temperaturas elevadas, siendo la más
común la polimerasa taq.
La técnica consiste en realizar varios ciclos de temperaturas elevadas para
conseguir la desnaturalización del ADN y temperaturas más bajas para la
amplificación del ADN desnaturalizado mediante la polimerasa.
Biotecnología genética[editar]
En la década de 1970 se abrieron nuevas perspectivas en el campo de
las biotecnologías gracias a la elaboración de nuevas técnicas que
permiten llegar directamente al material que está en el origen de todas las
características y procesos vitales, es decir, el ADN. Este conjunto de
técnicas moleculares de manipulación genética recibe el nombre de
ingeniería genética.
Su objetivo es la manipulación in Vitro del ADN, la introducción de este ADN
así modificado en células vivas y la incorporación del mismo como parte del
material hereditario de dichas células. De este modo, ADN de diversas
procedencias, por ejemplo, la fracción de ADN humano regula la síntesis de
insulina, puede introducirse en bacterias de manera que pasa a formar parte
de su genoma y lograr así que la bacteria adquiera la capacidad de elaborar
insulina.
Terapia genética[editar]
La terapia genética consiste en sustituir o añadir, según el caso, una copia
normal de la región defectuosa del ADN para poder solucionar y restablecer
la función alterada, evitando el desarrollo de enfermedades de origen
genético, como por ejemplo la facultad defensiva ante las enfermedades
infecciosas. Las enfermedades con las que se ha empezado a trabajar son,
entre otras, la deficiencia de la enzima ADA (adenosina desaminasa),
conocida como la de los niños burbuja y la DMD o distrofia muscular de
Duchenne.
La posibilidad de curar las enfermedades genéticas con un tratamiento
específico justifica los esfuerzos que se están realizando en este sentido.
Implicaciones éticas[editar]
La ingeniería genética tiene aplicaciones en campos muy diversos; dos de
los más importantes son la medicina y la creación de nuevas especies o
mejora de las existentes. El progreso en estos ámbitos puede aportar
resultados capaces de aliviar algunos problemas de gran importancia, pero
no se debe olvidar que la explotación comercial de las tecnologías
requeridas sólo está al alcance de unas pocas empresas multinacionales.
Como era de esperar, la tradicional dependencia económica de los países
subdesarrollados tiene en la ingeniería genética un nuevo elemento de
desequilibrio. En otro orden de cosas, la ingeniería genética puede plantear
graves problemas éticos. Hay opiniones muy diversas sobre dónde han de
situarse los límites de manipulación del material que está en la base de
todos los procesos vitales.
Al inicio de los experimentos del ADN recombinante, varios investigadores
mostraron su preocupación por los riesgos que se pueden realizar con
dichas técnicas. En varios países se crearon comités para discutir el uso y la
aplicación de técnicas de ingeniería genética.
Ingeniería genética en seres vivos[editar]
Ingeniería genética en bacterias[editar]
Son los seres vivos más utilizados en Ingeniería Genética. La más utilizada
es la Escherichia coli. Se usa prácticamente en todos los procesos de I.G.
Otra de las aplicaciones más actuales que se han hecho, ha sido modificar
genéticamente bacterias que vivan en el sistema digestivo del ser humano
en un lapso mínimo de 6 meses a 1 año, con el objetivo de disminuir el
apetito. Esta investigación se basa en N-acil-fosfatidiletanolamina, y N-acil-
etanolamina, encargadas de mandar señales alhipotálamo, que es el
encargado de la ingesta de alimentos.
Ingeniería genética en levaduras y hongos[editar]
Son junto con las bacterias los sistemas más utilizados. El Saccharomyces
cerevisiae fue el primer sistema eucariota secuenciado completamente. Otra
levadura importante es P. pastoris, utilizada para conseguir proinsulina en
cultivo discontinuo y quitinasa en cultivo continuo. En el campo de los
hongos destaca por su labor médica el Penicillium.
Otra aplicación ha sido la levadura P. pastoris se ha usado para producir
grandes cantidades de proteínas, gracias a que es capaz de crecer en los
reactores hasta alcanzar muy altas densidades celulares. Por ejemplo, se ha
utilizado para producir quitinasa humana en cultivo continuo (0,3 g/L/día) o
proinsulina humana en un sistema discontinuo (1,5 g/L).
Ratones knockout.
Ingeniería Genética en animales[editar]
La manipulación genética de los animales persigue múltiples objetivos:
aumentar el rendimiento del ganado, producir animales con enfermedades
humanas para la investigación, elaborar fármacos, etc.
Producción animal por ingeniería genética:
Peces transgénicos: las principales aplicaciones en animales se han
realizado en peces, debido a que la fecundación es externa, lo cual permite
la introducción del gen en el cigoto antes de que se unan el núcleo del
espermatozoide y el del óvulo. Se han producido carpas transgénicas que
crecen mucho más rápido, debido a la incorporación del gen de la hormona
del crecimiento de la trucha, y salmones transgénicos, que resisten mejor las
bajas temperaturas. Mamíferos: se han obtenido ratones transgénicos, con
distintos genes modificados. Sin embargo, todavía su aplicación para la
mejora de especies es preliminar, enfocándose el estudio desde un punto de
vista más bien puramente científico
Ingeniería Genética en plantas[editar]
Actualmente se han desarrollado plantas transgénicas de más de cuarenta
especies. Mediante ingeniería genética se han conseguido plantas
resistentes a enfermedades producidas por virus, bacterias o insectos. Estas
plantas son capaces de producir antibióticos, toxinas y otras sustancias que
atacan a los microorganismos. También se han conseguido otro tipo de
mejoras, como la producción de distintas sustancias en los alimentos que
aumentan su calidad nutricional, mejorar las cualidades organolépticas de un
producto o que ciertas plantas sean más resistentes a determinados factores
ambientales, como el frío.
Las técnicas de ingeniería genética también permiten el desarrollo de
plantas que den frutos de maduración muy lenta. Así, es posible recoger
tomates maduros de la tomatera y que lleguen al consumidor conservando
intactos su sabor, olor, color y textura. La mejora de la calidad de las
semillas es también un objetivo.
Las aplicaciones farmacéuticas son otro gran punto de interés. La
biotecnología permite desarrollar plantas transgénicas que producen
sustancias de interés farmacológico, como anticuerpos, ciertas proteínas y
hormonas, como la hormona del crecimiento.
Aplicaciones de la Ingeniería Genética en medicina e industria
farmacéutica[editar]
Obtención de proteínas de seres vivos[editar]
Una serie de hormonas como la insulina, la hormona del crecimiento,
factores de coagulación, etc., tienen un interés médico y comercial muy
grande. Antes, la obtención de estas proteínas se realizaba mediante su
extracción directa a partir de tejidos o fluidos corporales. En la actualidad,
gracias a la tecnología del ADN recombinante, se clonan los genes de
ciertas proteínas humanas en microorganismos adecuados para su
fabricación comercial. Un ejemplo típico es la producción de insulina que se
obtiene a partir de la levadura Sacharomyces cerevisae, en la cual se clona
el gen de la insulina en humanos.
Obtención de vacunas recombinantes[editar]
El sistema tradicional de obtención de vacunas a partir de microorganismos
patógenos inactivos, puede comportar un riesgo potencial. Muchas vacunas,
como la de la hepatitis B, se obtienen actualmente por ingeniería genética.
Como la mayoría de los factores antigénicos son proteínas lo que se hace es
clonar el gen de la proteína correspondiente.
Vacunas atenuadas: Se eliminan los genes de virulencia de un agente
infeccioso para provocar una respuesta inmune. El organismo modificado
genéticamente puede usarse como lo que es llamado una vacuna “viva” sin
que exista riesgo de que se revierta al tipo virulento. Actualmente se está
ensayando una vacuna de cepas estables del Vibrio cholerae, éste se
encuentra desprovisto del gen que codifica para su enterotoxina, la cual
provoca la enfermedad. Otro ensayo existente ha sido en la Salmonella, a la
cual se le han quitado ciertos genes que aunque no son virulentos,
convierten a la cepa en atenuada una vez desaparecidos, es decir que
disminuyen su virulencia 1, 000, 000 de veces. Su efectividad ha logrado
demostrarse en ovejas, bovinos, pollos y hasta en humanos recientemente
Vacunas de organismos recombinantes vivos: Para estas se utilizan
microorganismos no patógenos a los cuales se incorporan genes de agentes
patógenos que codifican para los antígenos que desencadenan la respuesta
inmune. El virus vacunal tiene un genoma amplio y secuenciado que permite
acomodar varios genes foráneos en su interior por lo que es un vector
recombinante muy utilizado. A partir de éste método se ha logrado
desarrollar la vacuna contra la rabia insertando el genoma del virus,
provocando la respuesta inmune en el organismo del hospedador. De igual
manera se han ensayado las expresiones de genes que codifican para
antígenos de virus de la hepatitis B, de la gripe y del herpes simple. Con este
método, se podría lograr el desarrollo de vacunas que inmunicen
simultáneamente para varias enfermedades, insertando en el virus
recombinante varios genes de distintos organismos patógenos a la vez.
Vacunas de subunidades: Para agentes infecciosos que no se pueden
mantener en cultivo, se aíslan los genes que codifican para las proteínas
causantes de la respuesta. Dichos genes se pueden clonar y expresar en un
huésped alternativo tales como bacterias, levaduras o líneas celulares de
mamíferos. Luego de insertado el gen de interés, la bacteria o levadura
recombinante inicia con la producción de subunidades de proteínas en
grandes cantidades, mismas que son recolectadas y purificadas para
utilizarlas como vacunas. La vacuna contra la hepatitis B fue la primera
puesta en el mercado y siendo producida por este método.
Vacunas de ADN: Consisten en plásmidos en los que se introduce tan sólo
una diminuta cantidad del material genético del patógeno contra el que se
pretende. Al inyectar el plásmido en el músculo o la piel, éste penetra dentro
de la célula y llega al núcleo, comandando entonces la producción de los
antígenos del patógeno que desencadenarán la respuesta inmune. Así, se
traslada la fábrica de la vacuna a los tejidos del huésped. En la actualidad se
realizan ensayos de diversas vacunas de este tipo, algunos ejemplos son la
vacuna para la hepatitis B, para la malaria, para la gripe, para el herpes
simple y para el SIDA.
Diagnóstico de enfermedades de origen genético[editar]
Artículo principal:  Diagnóstico genético preimplantacional
Conociendo la secuencia de nucleótidos de un gen responsable de una
cierta anomalía, se puede diagnosticar si este gen anómalo está presente en
un determinado individuo.
Hasta ahora ha sido posible la localización de los genes responsables de la
fibrosis quística, la distrofia muscular, la hemofilia o el Alzheimer. Para
identificar estos genes se usan sondas de ADN.

La clonación de genes puede rendir dos tipos de productos: el DNA clonado,

útil como reactivo específico en ensayos de diagnóstico por hibridación o
bien los productos proteicos de los genes clonados (antígenos purificados
para inmunodiagnostico en producción de vacunas). Hay descritas cerca de
500 enfermedades hereditarias producidas por mutaciones recesivas. Las
técnicas de ingeniería genética han servido para diagnosticar algunas de
ellas, por ejemplo, la anemia flaciforme.
Obtención de anticuerpos monoclonales[editar]

Este proceso abre las puertas para luchar contra enfermedades como el
cáncer y diagnosticarlo incluso antes de que aparezcan los primeros
síntomas.

El interferón fue el primer medicamento producido por ingeniería genética.

Es utilizado como medicamento complementario a la quimioterapia para la
cura del cáncer. Su producción era cara hasta 1980, pero genes de
interferón fueron introducidos en bacterias usando tecnología de
recombinación del ADN permitiendo así el cultivo masivo y purificación de
las emisiones bacterianas