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Angulo (2015) Extracción Molle Supercríticos
Angulo (2015) Extracción Molle Supercríticos
ESCUELA DE POSGRADO
UNIDAD DE POSGRADO DE LA FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA
DOCTORADO EN INGENIERIA QUÍMICA Y AMBIENTAL
TESIS
PRESENTADA POR:
OLGA EUGENIA ANGULO GUTIÉRREZ
HUANCAYO - PERÚ
2015
1
ASESOR:
2
DEDICATORIA
meta trazada.
3
RESUMEN
4
ABSTRACT
THE MOLLE (SCHINUS LINNEO) is a plant that grows in the Junin region in the
wild family of Anacardiaceae, untapped. Since you have a number of
pharmacological properties sometimes used for ornamental purposes in gardens
and public places. By presenting the benefits molle (fruit) it has motivated research
work conducted drawn from around the District of Viquez Province Department of
Junin Huancayo (in times of fruit ripening). The great demand for the natural
essential oils used in cosmetics and food industry special essences extracted for
green technology such as using supercritical fluids will become a business
alternative. The technique used to extract the essential oil molle (schinuslinneo) is
by means of supercritical fluids, considering a clean process simple and extremely
effective way and also considered green technology to extract very specific
compounds without using toxic compounds and the purpose of shortening the
extraction time, reduce solvent consumption, increase the extraction yield, improve
quality and provide a viable extract to process and add value to all these varied
alternative botany of our region. and it is also marked with HPL equipment. We
have worked with the solvent CO2, because it has low viscosity, low surface
tension, high diffusion coefficient that leads to a high contact with the material
surface and can penetrate small pores and crevices thereof which ensures a good
efficiency extraction in a short time, with high performance, easy removal of the
solvent (also can be recycled because it is not toxic, nor explosive or incendiary),
the chemical properties of the substance are not altered by the low temperatures
used for extraction.
5
ÍNDICE DE CONTENIDOS
Carátula
Asesor
Dedicatoria
Agradecimientos
Resumen
Abstract
Introducción
CAPÍTULO I
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Caracterización del problema 12
Formulación del problema de investigación 15
Objetivos de la investigación 15
Justificación de la investigación 16
Delimitaciones de la investigación 18
CAPÍTULO II
MARCO TEÓRICO
Antecedentes de la investigación 20
Bases teóricas 25
Definición de conceptos 43
Hipótesis de la investigación 44
Variables de la investigación 45
Operacionalización de las variables 46
CAPÍTULO III
METODOLOGÍA
Tipo de la investigación 48
Nivel de la investigación 48
Métodos de investigación 48
Diseño de la investigación 49
6
Población y muestra 50
Técnicas e instrumentos de recolección de datos 51
Procedimientos de recolección de datos 52
Técnicas de procesamiento y análisis de datos 59
CAPÍTULO IV
RESULTADOS, ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN
Aspectos descriptivos de las variables 61
Contrastación de la hipótesis de la investigación 67
Discusión de resultados 69
CAPÍTULO V
APORTES DE LA INVESTIGACIÓN
Aporte teórico 72
Aporte práctico 73
CONCLUSIONES 74
RECOMENDACIONES 75
BIBLIOGRÁFICA 76
ANEXOS 79
7
ÍNDICE DE TABLAS
8
ÍNDICE DE FIGURAS
9
INTRODUCCIÓN
De acuerdo a los análisis fotoquímico del molle, revela que la planta contiene
taninos, alcaloides, flavonoides, saponinas, esteroides, esteroles, terpenos,
gomas, resinas, y aceites esenciales. Dado que tiene una serie de propiedades
farmacológicas a veces usado con fines ornamentales en jardines y lugares
10
públicos, tiene una larga historia de uso como astringente, depurativo, diurético,
balsámico, como colirio, diurético, en enjuagues, pesticida, depurativo, estomacal,
tónico, antiviral, sus usos por los indígenas en los países donde crece están
documentados.
11
CAPÍTULO I
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
12
tiempo de extracción, disminuir el consumo de solvente, aumentar el rendimiento
de extracción, conservará sus propiedades químicas, mejorar la calidad del
extracto y brindar una alternativa viable para procesar y dar valor agregado a
toda esa variada botánica de nuestra Región.
13
Provincia de Huancayo Departamento De Junín, (en épocas de maduración
de los frutos).
14
1.2. FORMULACIÓN DEL PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN
¿Cuáles son los pasos que presentan el método de los fluidos supercríticos
utilizado en el valle del Mantaro en el año 2012?
¿Qué características presenta el aceite esencial del molle (schinus linneo) del
valle del Mantaro en el año 2012?
¿Qué relación existe entre el método de los fluidos supercríticos y la
extracción del aceite esencial del molle (schinus linneo ) del valle del Mantaro
en el año 2012?
15
1.4. JUSTIFICACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN
16
material vegetal residual, una vez extraído el aceite, se utiliza como complemento
alimenticio de ganado vacuno, porcino o avícola o como abono natural(Martínez,
2003.
La ciencia moderna los procesa los aceites esenciales para prevenir o curar
diversas afecciones tanto del ser humano como de animales. Tienen propiedades
medicinales y fueron utilizados desde la antigüedad para curar enfermedades.
Con base en sus propiedades son ampliamente utilizados para el aparato
digestivo, respiratorio, nervioso y circulatorio.
Por este motivo, se están desarrollando nuevas tecnologías más respetuosas con
el medio ambiente, que no representan ningún riesgo para la salud y garantizan
una calidad superior de los productos.
17
1.4.4. JUSTIFICACIÓN SOCIAL
Como los aceites esenciales tienen propiedades medicinales curativas a muchas
enfermedades, y son de amplio beneficio y utilización en el mundo en
aromaterapia, en la industria química, en la industria cosmética.
18
insecticidas y desinfectantes en la industria cosmética para la fabricación de
colonias, perfumes, jabones de tocador, cremas de diversos tipos, champús,
desodorantes, acondicionadores y fijadores capilares,
La técnica utilizada para extraer el aceite esencial del molle (schinuslinneo) es
por medio de fluidos supercríticos, por considerar un proceso limpio de forma
simple y extremadamente eficaz, considerado también tecnología ecológica ya
que permite extraer compuestos muy específicos sin utilizar compuestos tóxicos
y con el propósito de acortar el tiempo de extracción, disminuir el consumo de
solvente, aumentar el rendimiento de extracción, mejorar la calidad del extracto y
brindar una alternativa viable para procesar y dar valor agregado a toda esa
variada botánica de nuestra Región.
19
CAPÍTULO II
MARCO TEÓRICO
20
afectan significativamente la extracción de colorantes. Considerando los
resultados anteriores, se estudió entonces el efecto de temperatura del aire (40 -
60 °C), la potencia (0 - 230 W) y el tiempo (10 - 30 min) sobre la rapidez de
secado convectivo. Se observó que la potencia y la temperatura del aire son las
variables que más afectan la rapidez de secado, alcanzando su mayor valor a 200
W, 60 °C y 30 min. Se concluye que la aplicación de US en el procesamiento de
mora permite obtener un producto deshidratado de mejor calidad funcional y
resulta ser efectivo a la hora de reducir el tiempo necesario para lograr un valor de
humedad.
21
neutracéuticos. Las dos principales metodologías utilizadas en la presente tesis
son la extracción y fraccinamiento con fluidos supercrítico y la tecnología
enzimática, que ofrecen ventajas debido a su alta versatilidad, selectividad,
eficacia y respecto con el medio ambiente frente a métodos convencionales.
Los resultados descritos en la presente tesis han sido obtenidos en su mayor
escala de planta piloto, lo que confiere una mayor viabilidad y ampliabilidad en el
sector Industrial.
22
combinación óptima de niveles que maximiza (p<0.05) el rendimiento de
flavonoides es el proceso realizado en 1 h a 70±0.5 °C, con una proporción del
disolvente metanol:agua de 80:20 y un tamaño de partícula grande (>2.00 mm).
23
cobre (0) por descomposición del precursor que se autocataliza a (368 – 436K),
condiciones reductoras que permiten la transformación del Cu(II) a Cu(0).
Asimismo, se obtuvieron altos volúmenes de nanopolvos de Cu(0), empleando al
etanol como FSC, en una atmósfera reductora de H2 a una Tmax 270°C y una
Pmax de 2425 psi en un micro reactor PARR Modelo 4560 (100mL, 200bar, 3500
ºC) aplicando sobre el precursor de cobre. Los productos obtenidos fueron
caracterizados mediante UV, FTIR, FRX, DRX.
2.2.BASES TEÓRICAS
2.2.1 METODOS DE FLUIDOS SUPERCRÌTICOS
2.2.1.1. DEFINICION DE METODO FLUIDOS CRITICOS
El método de extracción con fluidos supercríticos, es de desarrollo más reciente.
El material vegetal cortado en trozos pequeños, licuado o molido, se empaca en
24
una cámara de acero inoxidable y se hace circular a través de la muestra un
líquido supercrítico (por ejemplo bióxido de carbono líquido), las esencias son así
solubilizadas y arrastradas y el líquido supercrítico que actúa como solvente
extractor y se elimina por descompresión progresiva hasta alcanzar la presión y
temperatura ambiente, y finalmente se obtiene una esencia pura. Aunque
presenta varias ventajas como rendimiento alto, es ecológicamente compatible, el
solvente se elimina fácilmente e inclusive se puede reciclar, y las bajas
temperaturas utilizadas para la extracción no cambian químicamente los
componentes de la esencia, sin embargo el equipo requerido es relativamente
costoso, ya que se requieren bombas de alta presión y sistemas de extracción
también resistentes a las altas presiones. (Stashenko, 1998).
25
Adicionalmente, puede cambiar rápidamente la densidad con pequeños cambios
en la temperatura o presión. Estas propiedades lo hacen conveniente como un
sustituto de los solventes orgánicos en los procesos de extracción.
Los fluidos supercríticos (FSC) tienen la capacidad de extraer ciertos compuestos
químicos con el uso de determinados solventes específicos bajo la combinación
de temperatura y presión (Brunner, 2005; Rozzi y Singh, 2002). En la Tabla 1 se
muestran las propiedades críticas de algunos compuestos comúnmente usados
como fluidos supercríticos. El CO2 es el fluido supercrítico más utilizado debido a
que es no tóxico, no inflamable, no corrosivo, incoloro, no es costoso, se elimina
fácilmente, no deja residuos, sus condiciones críticas son relativamente fáciles de
alcanzar y se consigue con diferentes grados de pureza, se puede trabajar a baja
temperatura y por tanto, se pueden separar compuestos termolábiles, se puede
obtener a partir de procesos de fermentación alcohólica y ayuda a prevenir la
degradación térmica de ciertos componentes químicos del alimento cuando son
extraídos (Brunner, 2005; Hurtado, 2002; Rosa y Meireles, 2005). Para realizarlo
existen varios métodos de los fluidos que aparecen en la Tabla 1, en comparación
con el CO2 es que hay ciertas dificultades en obtener solventes puros del fluido
(Rozzi y Singh, 2002; Wark, 1985).
Las ventajas de los fluidos supercríticos son: (Bruner, 2005; Hurtado, 2002;
Sánchez et al., 2005; Tonthubthimthong et al., 2001; Zkal et al., 2005).
26
Tabla 1.-Propiedades críticas de los FSC
1. Poseen alto coeficiente de difusión y viscosidad más baja que los líquidos;
2. Ausencia de tensión superficial, la cual aumenta la operación de extracción
dada la rápida penetración de estos al interior de los poros de la matriz
heterogénea;
3. La selectividad durante la extracción puede ser manipulada dada la variación
de las diferentes condiciones de operación temperatura y presión afectando la
solubilidad de varios componentes en el fluido supercrítico;
4. La extracción con fluidos supercríticos no deja residuos químicos;
5. La extracción con CO2 supercrítico permite su fácil recuperación por procesos
de reciclaje.
27
2.2.1.2. PROPIEDADES DEL METODO
En términos generales y científicos, un fluido supercrítico posee propiedades
entre las de un gas y las de un líquido. En la Tabla 2 se muestran las propiedades
de algunos compuestos usados comúnmente como fluidos supercríticos.
29
Diagrama de fases. En la parte superior derecha se ve el fluido supercrítico.
Como se puede apreciar, acostumbra a obtenerse a altas presiones y
temperaturas.
30
embargo simultáneamente a un incremento en la temperatura se disminuye la
densidad del CO2 con lo cual tiende a decrecer la solubilidad del soluto; Conforme
la presión se incrementa por encima del punto crítico del dióxido de carbono (7.38
MPa), la densidad del fluido se vuelve menos dependiente de la temperatura y la
presión de vapor del soluto se vuelve dominante, de manera que la solubilidad del
soluto se incrementa con la temperatura.
El método de extracción con fluidos supercríticos, es de desarrollo más reciente.
El material vegetal cortado en trozos pequeños, licuado o molido, se empaca en
una cámara de acero inoxidable y se hace circular a través de la muestra un fluido
en estado supercrítico (por ejemplo CO2), las esencias son así solubilizadas y
arrastradas y el fluido supercrítico, que actúa como solvente extractor, se elimina
por descompresión progresiva hasta alcanzar la presión y temperatura ambiente
finalmente se obtiene una esencia cuyo grado de pureza depende de las
condiciones de extracción.
31
se cultiva en las tierras tropicales y en áreas subtropicales a través del mundo
como planta ornamental (2). En el Perú, se encuentra con mayor frecuencia entre
los 100 a 3 200 msnm de la vertiente occidental, así también en la zona sur del
valle Mantaro.
32
La planta de molle tiene una larga historia de uso como astringente, depurativo,
diurético, balsámico, como colirio, diurético, en enjuagues, pesticida, depurativo,
estomacal, tónico, antiviral, sus usos por los indígenas en los países donde crece
están documentados. (2)
Nombre Científico Schinus molle
Porcentaje de Pureza 95 — 98
Porcentaje de Germinación (%) 50 — 80
Rango altitudinal óptimo 1,000 a 3,200 msnm
Propagación Semilla botánica.
Viabilidad de la semilla Media
Semilla por kilo promedio 30,600
Procedencia de la Semilla Cusco, Junin, La Libertad, Ancash
Familia: Anacardiaceas
2.2.1.1. CULTIVO
Hermoso árbol oriundo de los andes del Perú y se mantiene siempre verde,
crece de manera silvestre y cultivada en zonas secas de costa, sierra y selva
hasta los 3,500 msnm. Se desarrolla en suelos ligeros a rocosos y se
propaga por semillas.
33
2.2.1.2. DESCRIPCIÓN
Árbol de copa abierta, muy ramificado y con ramas colgantes; hojas
compuestas de 15 a 20 foliolos. Posee flores pequeñas en panículas y sus
frutos crecen en forma de racimos y color rosado, con una semilla. El tronco
con látex y las hojas del molle tienen un olor penetrante, muy característica
de la especie.
2.2.1.3. USOS:
Sus grandes propiedades, tintóreas, medicinales, ornamentales y
plaguicidas, fueron muy apreciadas por los antiguos peruanos que lo
denominaron "árbol virtuoso".
Los químicos prehispánicos obtuvieron del molle un tinte color amarillo,
usado en el teñido de textiles que se aprecian en la Cultura Wari.
También lograron, hacer con los frutos del molle una chicha fermentada muy
consumida y apreciada en esas épocas, que se convirtió en un bien a ser
(3)
trocado por pescado, ocas, papas deshidratadas y otros bienes.
a. Alimento: Las semillas molidas de usan como pimienta blanca (leer
más abajo), y las enteras como pimienta rosada. Con la cubierta dulce
de las semillas se prepara chicha y la leche de molle o upi, que es la
chicha sin fermentar que adelgaza sin debilitar. La miel de molle se
elabora hirviendo el líquido de los frutos maduros hasta que tome la
consistencia de jarabe.
b. Ornamental: Cultivado en muchas partes hasta los 3,000 m de altitud.
c. Medicinal: Es utilizado como antirreumático, purgante, cefalálgico,
cicatrizante, vermífugo, depurativo de la sangre, hemostático y
antiespasmódico. Es bueno contra los malestares del hígado, riñones y
34
vejiga, contra el dolor de garganta, muelas y piernas, así como contra la
hidropesía, la leucorrea y algunas afecciones respiratorias.
d. Abono: Cuando las semillas de maíz son remojadas en agua que
contiene ramas y frutos del molle, con el cual se adhiere un abono
catalítico.
e. Tinte: De la cocción de la corteza y hojas se obtiene un líquido amarillo,
al cual se le añade alumbre y se remojan los tejidos que obtendrán una
coloración amarilla permanente.
f. Plaguicida: Las ramitas del molle se entierran en los surcos para
repeler plagas. Las hojas se ponen entre la ropa para eliminar polillas.
g. USO TRADICIONAL
*Antirreumático: Frotación con tintura de los frutos o brotes tiernos
*Purgante: La resina y la infusión de los frutos maduros.
*Cefalálgico: Parches de resina en las sienes.
* Malestares del hígado, riñones y vejiga: La chicha.
* Dolor de Garganta: Gárgaras con el cocimiento de las hojas.
* Cicatrizante: La resina.
* Dolor de Muelas: Resina en la caries mata el nervio.
* Vermifugo: Infusión de las hojas o la resina disuelta.
* Gases: Infusión de las hojas.
* Bajar la Presión: Hojas, flores y frutos en infusión.
* Sangrado de Encías: Masticar las hojas.
* Dolor de Piernas: Baños con la resina disuelta en agua.
* Depurativo de la Sangre: Beber la infusión de las hojas o frutos
maduros.
* Leucorrea: Infusión de los fritos maduros.
* Hidropesía: Disolver la resina en vino, añadir azúcar y beber (vino de
molle).
* Afecciones Respiratorias: Hacer gárgaras con la infusión de las hojas
y brotes terminales.
* Hepatitis: Tomar en infusión de las hojas.
* Cicatrizante: Aplicar la resina a las heridas.
* Hemostático: Lavados con el cocimiento de los frutos.
35
* Antiespasmódico: Tomar la infusión de las hojas.
* Madera: Dura y resistente, que se usa en ebanistería y como
horcones.
* Agroforestería: Sombra, cortinas rompevientos.
* Abono: Las hojas secas, especialmente para los campos de maíz;
remojar las semillas de maíz en agua que contiene ramas y frutos del
molle, proceso mediante el cual se adhiere abono catalítico (en quechua
rokeska)
CULTIVO
Hermoso árbol oriundo de los andes del Perú y se mantiene siempre verde, crece
de manera silvestre y cultivada en zonas secas de costa, sierra y selva hasta los
3,500 msnm. Se desarrolla en suelos ligeros a rocosos y se propaga por semillas.
DESCRIPCIÓN
Árbol de copa abierta, muy ramificado y con ramas colgantes; hojas compuestas
de 15 a 20 foliolos. Posee flores pequeñas en panículas y sus frutos crecen en
forma de racimos y color rosado, con una semilla. El tronco con látex y las hojas
del molle tienen un olor penetrante, muy caractarística de la especie.
USOS:
Sus grandes propiedades, tintóreas, medicinales, ornamentales y plaguicidas,
fueron muy apreciadas por los antiguos peruanos que lo denominaron "árbol
virtuoso".
Los químicos prehispánicos obtuvieron del molle un tinte color amarillo, usado en
el teñido de textiles que se aprecian en la Cultura Wari.
También lograron, hacer con los frutos del molle una chicha fermentada muy
consumida y apreciada en esas épocas, que se convirtió en un bien a ser trocado
por pescado, ocas, papas deshidratadas y otros bienes.
* Alimento: Las semillas molidas de usan como pimienta blanca (leer más abajo),
y las enteras como pimienta rosada. Con la cubierta dulce de las semillas se
prepara chicha y la leche de molle o upi, que es la chicha sin fermentar que
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adelgaza sin debilitar. La miel de molle se elabora hirviendo el líquido de los frutos
maduros hasta que tome la consistencia de jarabe.
* Ornamental: Cultivado en muchas partes hasta los 3,000 m de altitud.
* Medicinal: Es utilizado como antirreumático, purgante, cefalálgico, cicatrizante,
vermífugo, depurativo de la sangre, hemostático y antiespasmódico. Es bueno
contra los malestares del hígado, riñones y vejiga, contra el dolor de garganta,
muelas y piernas, así como contra la hidropesía, la leucorrea y algunas
afecciones respiratorias.
* Abono: Cuando las semillas de maíz son remojadas en agua que contiene
ramas y frutos del molle, con el cual se adhiere un abono catalítico.
* Tinte: De la cocción de la corteza y hojas se obtiene un líquido amarillo, al cual
se le añade alumbre y se remojan los tejidos que obtendrán una coloración
amarilla permanente.
* Plaguicida: Las ramitas del molle se entierran en los surcos para repeler
plagas. Las hojas se ponen entre la ropa para eliminar polillas.
Los aceites esenciales tienen propiedades medicinales y fueron utilizados desde
la antigüedad para curar enfermedades. La ciencia moderna los procesa para
obtener drogas o remedios específicos para prevenir o curar diversas afecciones
tanto del ser humano como de animales. Con base en sus propiedades son
ampliamente utilizados para el aparato digestivo, respiratorio, nervioso y
circulatorio (10)
37
material vegetal residual, una vez extraído el aceite, se utiliza como complemento
alimenticio de ganado vacuno, porcino o avícola o como abono natural(Martínez,
2003.
38
sometida a una corriente de vapor de agua sobrecalentado, la esencia así
arrastrada es posteriormente condensada, recolectada y separada de la
fracción acuosa. Esta técnica es muy utilizada especialmente para esencias
fluidas y perfumería. También se utiliza en la industria debido a su alto
rendimiento, alta pureza del aceite obtenido y la baja exigencia tecnológica.
c. Extracción con solventes volátiles. La muestra seca y molida se pone en
contacto con solventes tales como alcohol o cloroformo. Estos solventes
solubilizan la esencia pero también solubilizan y extraen otras sustancias tales
como grasas y ceras, obteniéndose al final una esencia impura. Se utiliza a
escala de laboratorio, pues en la industria por el valor comercial de los
solventes resulta costoso y se obtienen esencias impurificada con otras
sustancias. Además por el riesgo de explosión e incendio característicos de
muchos solventes orgánicos volátiles.
d. Enflorado o enfleurage. El material vegetal (generalmente flores) es puesto
en contacto con una grasa, la esencia se mezcla con la grasa que actúa como
agente extractor. Se obtiene inicialmente una mezcla de aceite esencial y
grasa la cual se separa después por otros medios físico-químicos.
Normalmente se utiliza el agregado de alcohol caliente que luego de enfriarse
separa la grasa (insoluble) y el extracto aromático (absoluto). Esta técnica es
empleada para la obtención de esencias florales (rosa, jazmín, azahar, etc.),
pero su bajo rendimiento y la difícil separación del aceite extractor la hacen
costosa.
39
puede reciclar, y las bajas temperaturas utilizadas para la extracción no cambian
químicamente los componentes de la esencia, sin embargo, el equipo requerido
es relativamente costoso, ya que se requieren bombas de alta presión y sistemas
de extracción también resistentes a las altas presiones y a los ácidos (Humboldt,
2003; Sánchez, 2006).
2.2.2.4- Calidad del aceite esencial.- Para obtener una buena calidad del aceite
de molle depende de varios factores como:
Edad del cultivo: Relacionado con la existencia y disponibilidad de nutrientes del
cultivo
Condiciones climáticas: Relacionado con la luminosidad, temperatura,
pluviosidad, altitud, latitud.
Labores agrícolas: Relacionado con la distancias de siembra, abonos, podas.
Postcosecha: Lavado, secado, empaque, almacenado, transporte.
Métodos de extracción: Relacionado al método empleado para la extracción del
aceite esencial.
a. Características organolépticas Las características a tener en cuenta en este
son el olor, el color, y la apariencia. El primero de ellos reviste especial
importancia, ya que muchos usos de los aceites esenciales se relacionan con el
olor (Bandoni, 2000)
b. Determinaciones físicas.- Se trata principalmente de la determinación de
constantes físicas, entre las que se destacan la densidad, el índice de refracción y
el poder rotatorio, miscibilidad en etanol, punto de inflamación, punto de
congelación. La densidad puede determinarse con un picnómetro, o un
densímetro electrónico. Debe indicarse la temperatura de trabajo (normalmente
20°C). Casi todas las esencias poseen una densidad menor que el agua. El índice
de refracción puede determinarse mediante un refractómetro electrónico y suele
medirse también a 20°C, o de lo contrario se realiza una corrección por diferencia
de temperatura. Este parámetro tiene interés para detectar adulteraciones. Los
componentes de los aceites esenciales con frecuencia son ópticamente activos,
siendo un isómero óptico el que predomina.
40
Por esta razón, la determinación del poder rotatorio puede ser de gran utilidad
para la detección de adulteraciones o falsificaciones. La miscibilidad en etanol se
estudia en alcohol de determinada graduación. Este se va añadiendo a razón de
0,5 ml sobre una muestra de 1 ml de esencia, observando el comportamiento de
esta última. Según la Farmacopea Europea, para un alcohol de una graduación
dada, el aceite esencial puede ser soluble, soluble con enturbiamiento al diluir,
soluble con enturbiamiento entre n1 y n2 volúmenes, o bien soluble con
opalescencia. La solubilidad de las esencias en alcohol da una idea de su
contenido en monoterpenos, cuanto mayor sea la solubilidad, menor será el
contenido de éstos en la esencia, o mayor será su contenido de compuestos
oxigenados, como alcoholes y fenoles.
41
tengan una especial tendencia para la calidad (responsabilidad en las
propiedades olfativas, por ejemplo). El mayor valor de un perfil cromatográfico es
permitir, ante la presencia de un componente inusual, o ante la ausencia de un
constituyente típico, el rechazo de un aceite esencial.
42
Son sustancias aromáticas que se encuentran en numerosas plantas estos
pueden ser extraídos de diferentes formas.
43
NH3 133 112
MeOH 240 80
H2O 374 217
44
Niveles experimentales de las variables independientes:
----------------------------------------------------------------------------------
Variable independiente Niveles
Bajo Alto
---------------------------------------------------------------------------------
Cantidad de solvente, CO2, (L) 3 5
Temperatura crítica (ºC) -30 -32
Presión Crítica para el CO2 (bar) 73 74
----------------------------------------------------------------------------------
2.5. OPERACIONALIZACIÓN DE LAS VARIABLES
La operacionalización de variables e indicadores, permitirá llevar a unas
condiciones operativas de presión elevada y temperatura moderada, por encima
de su punto crítico.
45
Varia Dimensiones Indicadores Valoración
-ble1 Mínimo Máximo
Recolección Cantidad de semilla 5 Kg 12 Kg
requerida
Calidad de semilla Maduro 5% de Maduro10%
requerida humedad humedad
El mètodo de extracciòn por fluidos supercrìticos
46
Varia Dimension Indicadores Items Valoración
-ble1 es Siemp A Nunca
re veces
Recolecciòn Cantidad de semilla 5 kls
requerida
Calidad de semilla buena
requerida
Selección Tamaño de selección 5 – 9 mm
Color rosado
Aceite esencial del molle
47
CAPÍTULO III
METODOLOGÍA
Es explicativo
48
serie de operaciones y reglas prefijadas que nos permiten alcanzar un resultado
u objetivo. En otras palabras es el camino para llegar a un a fin o una meta”. En
tal sentido toda labor de procedimiento humano de información requiere asumir
el camino más adecuado y viable para lograr el objetivo trazado.
El diseño específico fue el dos grupos aleatorizados de pre y post que según
Sánchez y Reyes (2006, p. 131) “requiere que los sujetos incluidos en los grupos
de estudio hayan sido previamente asignados de manera aleatoria a cada uno de
ellos. Luego de este paso, el investigador realiza una medición previa o post de la
variable dependiente; posteriormente la variable independiente (X), es aplicada al
49
grupo designado como experimental, y finalmente se hace una nueva evaluación
o post de la variable dependiente en ambos grupos”.
GE A X O1
GC A O2
Donde:
X es la variable independiente (Método fe fluidos supercríticos) comparado con el
método soxhlet.
O1, y O2 son las mediciones realizadas del porcentaje de aceite de molle.
A significa que los grupos han sido asignados aleatoriamente.
Víquez 10 50%
Huamancaca 10 50%
TOTAL 10 100%
Fuente: Elaboración propia.
3.5.2. MUESTRA
La muestra será de tipo probabilístico, la técnica a utilizarse será aleatoria
simple. Para Carrasco (2009, p. 236) la muestra “es una parte o fragmento
representativo de la población cuyas características esenciales son las de ser
objetiva y reflejo fiel de ella de tal manera que los resultados obtenidos en la
50
muestra pueden generalizarse a todos los elementos que conforman dicha
población”.
51
sobre el concepto subyacente no observable que fue representado por la
respuesta tal como lo describe Hernández, Fernández y Baptista (2014).
3.6.2. INSTRUMENTOS
Se utilizó una Ficha de Análisis documental, que según Sierra (1999, p.
161) permite “todas las operaciones que se realizan con los documentos hasta
que tienen lugar su integración plena en el sistema documental, con el fin de
hacer posible su localización y búsqueda rápida cuando se necesite”, el cual es
importante para toda investigación. A medida que se lee, que se estudia, que se
observa, surgen dudas, incertidumbres, comprobaciones, discrepancias,
comentarios, etc. Que debe anotarse apenas vengan a la mente. Si no se anotan
en el momento preciso, se pueden perder para siempre. Estas fichas son las más
valiosas para la redacción del trabajo.
52
2º. Estudio de muestreo: aleatorio. Se ha escogido al azar
3º. Instrumentos de investigación. Equipo de Fluidos supercríticos
4º. Elaboración del material experimental y descripción del tratamiento
experimental.
5º. Tratamiento experimental. Se realizó con método de los fluidos supercríticos
con solvente CO2
RECEPCION
SECADO
ENVASADO
ALMACENADO
54
supercrítica, el CO2 es una molécula muy apolar y la adición de modificadores
orgánicos está muy extendida en las aplicaciones de esta técnica.
Almacenado
Luego se almacenó bajo condiciones de refrigeración (4-5 °C), y fueron sometidos
a los análisis y evaluaciones correspondientes.
Con ésta técnica logramos realizar un proceso con una tecnología limpia y se
cuenta con la característica de alta efecto de extracción, de alta calidad, la
extracción de baja temperatura, bajo consumo de energía. Y sin contaminación,
especialmente indicado para la extracción de calor - sensible y sustancia activa.
La mayor ventaja de la extracción mediante este método con fluidos supercríticos
es su menor impacto en el medio ambiente. Es una tecnología limpia porque, al
usar sustancias como el CO2 los residuos que se producen no son tóxicos y se
reciclan fácilmente. La posibilidad de eliminar de forma rápida el exceso del fluido
supercrítico por simple despresurización y recolección de los analitos
concentrados es otra ventaja importante.
Los fluidos supercríticos ofrecen una alternativa ventajosa a los disolventes
industriales tradicionales. Los procesos basados en fluidos supercríticos suelen
consumir mucho menos energía que los que utilizan disolventes orgánicos porque
no necesitan altas temperaturas ni las transiciones entre destilación y
condensación. Además los disolventes orgánicos tienen riesgos laborales y
medioambientales porque muchos son volátiles, muy inflamables y tóxicos. Todo
55
lo contrario de las propiedades del dióxido de carbono (CO 2), que tanto se usa en
estado supercrítico.
3.8.-PROCEDIMIENTOS DE RECOLECCIÓN DE DATOS Y EXTRACCION DEL
ACEITE ESENCIAL DE MOLLE POR EL METODO DE EXTRACCIÓN
SOXHLET.
Los pasos principales fueron los siguientes:
1º. Determinación del lugar o ambiente experimental. Fue de la localidad parte
sur de Huancayo, Valle del Mantaro del Distrito de Viques.
2º. Estudio de muestreo: aleatorio. Se ha escogido al azar
3º. Instrumentos de investigación. Equipo de extracción soxhlet
4º. Elaboración del material experimental y descripción del tratamiento
experimental.
5º. Tratamiento experimental. Se realizó con el método clásico de extracción
soxhlet con solvente n-hexano.
DIAGRAMA DEL PROCESO POR EL METODO ES
COLECCIÓN DE MATERIA PRIMA
RECEPCION
SECADO
ENVASADO
56
ALMACENADO
3.7.1.- PROCEDIMIENTO:
El proceso de extracción con el equipo Soxhlet se trabajó en el laboratorio de
química orgánica de la Facultad de Ingeniería química de la UNCP se siguió el
siguiente Proceso:
1. COLECCIÓN DE MATERIA PRIMA (FRUTOS).-La colección del fruto se
realizó de la localidad de Víquez zona sur del valle del Mantaro-Huancayo.
2. RECEPCIÓN DE MATERIA PRIMA.- En esta operación se hizo uso de la
balanza eléctrica y se evaluó la madurez organoléptica por color.
3. SELECCIÓN.-Se procedió a la selección de acuerdo al mismo tamaño,
según el grado de deterioro o que no presentaba ningún daño físico, se
realizó manualmente.
4. LAVADO.- Se realizó limpieza para eliminar los azucares y residuos
presentes en la semilla.
5. SECADO.- Tiene como objetivo eliminar el contenido de agua de la materia
prima hasta obtener una humedad final del 13 % se secaron a temperatura
ambiente con intervención de rayos solares, una vez seca la semilla se le
retiró la cascarilla que las cubría así como las hojas y los palillos.
6. TRITURACIÓN.- El fruto pasó por un proceso de trituración moderada para
reducir el tamaño de 0,4 a 0,6 cm aproximadamente con propósito de facilitar
el paso del vapor y mayor área de contacto y obtener rendimientos óptimos de
aceite ; liberando el aceite en su interior, siendo favorable para la extracción,
se utilizó el tamiz de diámetro Nº 14.
7. EXTRACCIÓN. Tiene como objetivo de obtener el aceite de la materia prima
se utilizó el equipo de extracción soxhlet, con solvente n-hexano, se utilizó
1 k de muestra durante todo el proceso
57
en peso del aceite esencial por espacio de 2 horas, y luego filtrarse y esté apta
para el análisis.
Almacenado
Luego se almacenó bajo condiciones de refrigeración (4-5 °C), y fueron sometidos
a los análisis y evaluaciones correspondientes.
Donde:
d = densidad relativa
P = Peso en gramos del picnómetro vacío a 20ºC
P1= Peso en gramos del picnómetro más agua a 20ºC
P2 = Peso en gramos del picnómetro lleno con la esencia a 20ºC
58
DETERMINACIÓN DE ÍNDICE DE REFRACCIÓN
Se determina mediante la relación del seno del ángulo de incidencias, al seno del
ángulo de refracción de un rayo luminoso de longitud de onda determinada, que
pasa del aire al aceite manteniendo su temperatura constante, se procede
midiendo el ángulo de refracción del aceite esencial con el equipo Refractómetro
RFM 340
BELLINGHAN STANLEY Ltd.
Se utilizó en:
59
la distribución en dos aspectos: referente a forma de la distribución (asimetría),
para saber si la distribución de los datos tiende a la derecha, a la izquierda o es
simétrica; y al apuntamiento de la distribución (curtosis) para comparar la
dispersión de los datos observados al valor central con la dispersión de los datos
cercanos a ambos extremos de la distribución; así como a las medidas de
posición (percentiles) para describir las variables respectivamente. Finalmente
utilizamos la r de Pearson para determinar la asociación entre ellas. Todos estos
aspectos de la estadística descriptiva las desarrollamos según Miller, Freund y
Johnson (2008), Kerlinger y Lee (2002), Baron y Tellez (2004); y el programa
estadístico IBM SPSS Statistics 22 y el Statgraphics Centurión XVI.
60
CAPÍTULO IV
RESULTADOS, ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN
REPORTE DE ANALISIS
Muestra Aceite de Molle
Procedencia Calidad
TABLA Nº 8
COPSA
LAB. CENTRAL
26/07/2012
REPORTE DE ANALISIS
Procedencia Calidad
62
columna capilar de 60 m x 0.32 mm ID x 4.2 um de película, llevándose a 250 °C
el detector, el Horno de columna con gradiente (temperatura máxima de 220 °C).
Con esta técnica se realizó con éxito sin cambios de fase, simplemente variando
las condiciones de presión y/o temperatura de los FSC.
Los compuestos encontrados son:
2-(4-Methyl-1-cyclohex-3-enyl)propan- 2-ol
α: 2-Methyl-5-(1-methylethyl)-1,3-cyclohexadiene
β: 3-Methylene-6-(1-methylethyl)cyclohexene
63
Los picos fueron reconocidos como:
Tabla Nº 7: Espectro de masas del aceite esencial de molle (Shinus Linneo)
Extraido por el método de Fluidos supercríticos con solvente CO2
64
Terpineol (m/z = 154.2), con un 3.2 %
2-(4-Methyl-1-cyclohex-3-enyl)propan- 2-ol
α: 2-Methyl-5-(1-methylethyl)-1,3-cyclohexadiene
β: 3-Methylene-6-(1-methylethyl)cyclohexene
65
Estas concentraciones pueden variar de acuerdo a la Familia y sub-clase de Molle
y la riqueza de los nutrientes del suelo en los que se cultive el Molle, sin embargo
esas
Son las concentraciones usualmente aceptadas
Hipótesis general:
Hipótesis Alterna ( H aC ) :
66
La media del porcentaje de extracción del aceite de molle mediante el método de
los fluidos supercríticos es mayor a la media del porcentaje de extracción del
aceite de molle mediante el método de soxhlet, muestreadas de la zona sur del
valle del Mantaro (Viquez) en el año 2013.
Nivel de significancia:
Será el de α = 0,05.
Criterio:
Rechazar la hipótesis nula si p < 0,05.
Aceptar la hipótesis nula si p > 0,05.
Cálculo del estadístico:
Tabla Nº 12 – Prueba t
Prueba de
Levene de
igualdad de
varianzas prueba t para la igualdad de medias
95% de
Diferen intervalo de
cia de confianza de
Sig. Diferen error la diferencia
(bilatera cia de estánd Inferi Superi
F Sig. t gl l) (p) medias ar or or
% Se asumen
2,6151 ,0274 12,088
varianzas 1,260 1,294 2,317 8 0,049 6,05800
4 7 53
iguales
No se asumen -
2,6151 12,796
varianzas 2,317 4,960 0,069 6,05800 ,6808
4 80
iguales 0
Fuente: Elaboración propia.
Decisión:
Puesto que la prueba t de Student presenta que p es < 0,05. Se acepta la
Ha, y se rechaza la H0.
Conclusión:
Siendo la diferencia significativa, queda demostrado que El método de los
fluidos supercríticos extrae eficazmente el aceite esencial del molle
(schinus linneo) del valle del Mantaro en el año 2013.
67
4.3. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Los resultados de los análisis empleando el equipo GC/MS con respecto a m/z
son los mismos pesos moleculares de los compuestos encontrados en ambos
métodos, en cuanto al % varían significativamente en ambos métodos.
68
Los rendimientos obtenidos es cercano en ambas métodos
La rapidez en la extracción de FSC específicamente con solvente CO2
marcó la diferencia con respecto al método de extracción soxhlet con
solvente orgánico n- hexano utilizado en la extracción.
La extracción con FSC, resulta una alternativa interesante porque ofrece
ventajas favorables al ser no tóxico, no inflamable, no corrosivo, incoloro,
no es costoso, se elimina fácilmente, no deja residuos en sus productos,
no cambian químicamente los componentes de la esencia, en cambio la
extracción con disolventes orgánicos siempre deja un residuo inherente
en el aceite, particularmente cuando la extracción se realiza con n-hexano.
Con ésta técnica logramos realizar un proceso con una tecnología limpia y
se cuenta con la característica de alta efecto de extracción, de alta calidad,
la extracción de baja temperatura, bajo consumo de energía. Y sin
contaminación es una alternativa ventajosa al disolvente orgánico
utilizado porque no necesitan altas temperaturas ni las transiciones entre
destilación y condensación. Además los disolventes orgánicos tienen
riesgos laborales y medioambientales porque muchos son volátiles, muy
inflamables y tóxicos. Todo lo contrario de las propiedades del dióxido de
carbono (CO2), que tanto se usa en estado supercrítico.
69
CAPÍTULO V
APORTES DE LA INVESTIGACIÓN
70
Hablar del ozono como una herramienta estrictamente estética sería incurrir en un
error ya que éste, a diferencia de otro tipo de aplicaciones, trabaja modulando los
procesos biológicos que dan origen a diversos trastornos estéticos.
VI.CONCLUSIONES
71
Con éste método se promueve la prevención de la contaminación y el
estudio de la química verde o química sustentable, sostenible o armónica
con el medio ambiente consiste en el diseño de productos o procesos que
reducen o eliminan el uso o la producción de sustancias peligrosas
Por el método de fluidos supercríticos ofrecen una alternativa ventajosa a
los disolventes industriales tradicionales. Donde el solvente ( CO 2) se
elimina con facilidad e inclusive se puede reciclar, y las bajas temperaturas
utilizadas para la extracción no cambian químicamente los componentes de
la esencia,
Los procesos basados en fluidos supercríticos suelen consumir mucho
menos energía que los que utilizan disolventes orgánicos porque no
necesitan altas temperaturas ni las transiciones entre destilación y
condensación.
Además los disolventes orgánicos tienen riesgos laborales y
medioambientales porque muchos son volátiles, muy inflamables y tóxicos.
Todo lo contrario de las propiedades del dióxido de carbono (CO 2), que
tanto se usa en estado supercrítico.
Esta técnica cuenta con la característica de alta efecto de extracción, de
alta calidad, la extracción de baja temperatura, bajo consumo de energía. Y
sin contaminación, especialmente indicado para la extracción de calor -
sensible y sustancias activas
Cada vez se conocen mejor las propiedades de los fluidos supercríticos
que son útiles para los diferentes campos de aplicación de la agroindustria
alimentaria. Permanentemente se están produciendo nuevas
investigaciones en este campo y con ejemplos exitosos que pueden
convertirse en agroindustrias para la región Central. Esta revisión busca
despertar el interés en nuestras poblaciones para su utilización en los
desarrollos de nuevos producto y procesos a partir de materias primas
autóctonas.
VII.RECOMENDACIONES
72
Se recomienda profundizar esta tecnología porque es muy importante para
los sectores industriales
Se deberían emplearla en todas empresas industriales para reducir la
contaminación ambiental.
Se recomienda utilizar este método para evitar la oxidación de los
productos y el afecto de contenido efectivo de extractos. Rápida velocidad
de extracción, ninguna toxicidad, no - inflamable, de aplicación segura y
ninguna contaminación al medio ambiente. No deja residuos de solvente.
Al ser sustancias volátiles, los aceites esenciales se han de estabilizar y
proteger para asegurar la conservación de sus propiedades durante el
almacenamiento.
Efectuar estudios sobre la densidad poblacional silvestre de la especie
Schinus molle para someterlas a futuras investigaciones con el fin de
aprovechar su potencial en diversos campos de la industria.
Procurar en lo posible hacer una recolección y selección adecuada de la
materia vegetal silvestre de lo contrario se podría afectar en lo posterior la
obtención de resultados.
Desarrollar otros estudios sobre la caracterización de nuevas especies
silvestres que aún no han sido evaluadas y conocer sus potencialidades
para el aprovechamiento integral.
Realizar estudios posteriores con el fin de aislar compuestos mayoritarios
para la elaboración de fitofármacos en el tratamiento de enfermedades y
otros usos industriales.
73
VIII.REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA
74
and extract characterization, Journal of High Resolution Chromatography, 20,
431– 436 (1997).
13. Danielski, L., C. Zetzl., H. Hense. y G. Brunner, A process line for the
production of raffinated rice oil from rice bran, J. Supercrit. Fluids, 34 (2), 133-
141 (2005).
14. Danielski. y R. S. Ferreira, Experimental data and modeling the supercritical
fluid extraction of marigold (Calendula officinalis) oleoresin, J.Supercrit. Fluids,
34 (2), 163-170 (2005)
15. Esquivel F. Angélica, Vargas Pedro.Uso de aceites esenciales extraídos por
medio de fluidos supercríticos para la elaboración de alimentos funcionales.
Tecnología en Marcha. Vol. 20-4 - Octubre - Diciembre 2007 P. 41-50
16. Kaufmann, B. y P. Christen, Recent extraction techniques for natural products:
Microwaveassisted extraction and pressurized solvent extraction, Phytochem.
Anal., 13, 105-113 (2002). [ Links ] suiz
17. Kaufmann, B. y P. Christen, Recent extraction techniques for natural products:
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Anal., 13, 105-113 (2002). [ Links ] suiz
18. Madrid GP. El fruto de 1. Schinus molle L. su interés bromatológico en la
elaboración de la llamada chicha de molle. Trabajo de Aptitud Profesional
para optar el Título de Químico Farmacéutico. UNMSM. Lima 1992.
19. Nacional Mayor de San Marcos. Boletín 50.
20. Palomino, A. alfpalomino@hotmail.com 2003. Construcción modular de un
equipo de extracción supercrítica de aceites esenciales y avances en el
modelo matemático. Consejo Superior de investigaciones. Universidad
21. (Rozzi, N. L. y R. K. Singh, Supercritical Fluids and the Food
Industr, Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety, 1, 33-44
(2002).
22. Simón, C., Ibáñez, E., Señorans, F., Barbas, C.,Reglero, G. & Cifuentes, A.
2002. Analysis of antioxidants from orange juice obtained by countercurrent
supercritical fluid extraction, using micellar electrokinetic chromatography and
reverse-phase liquid cromatography. Journal of agricultural and food
chemistry. 50: 6648-6652
75
23. Supercrítico en la elaboración de alimentos de origen vegetal. Otras
aplicaciones, Alimentación, equipos y tecnología, 16 (8), 55-63 (1997).
24. Velasco, HS Villada, JE Carrera - Información tecnológica, 2007 - SciELO
Chile. analíticos como detector del contenido de grasa por medio de la fase
móvil.
25. Vinatoru, M, An overview of the ultrasonically assisted extraction of bioactive
principles from herbs, Ultrasonics Sonochemistry, 8, 303-313 (2001).
26. Vinatoru, M, An overview of the ultrasonically assisted extraction of bioactive
principles from herbs, Ultrasonics Sonochemistry, 8, 303-313 (2001).
76
IX.ANEXO
Anexo Nº 01
-Piezas del equipo de fluidos supercrítico
- Preparando la celda con muestra
- Celda con muestra lista para instalar en el equipo
- Equipo instalada con celda
- Solvente extraído
-Reporte del análisis del aceite de molle
77
78
PARTE EXPERIMENTAL: CON EL EQUIPO DE FLUIDOS SUPERCR´TICOS
79
CELDA CON MUESTRA LISTA PARA INSTALAR EN EL EQUIPO
80
S0LVENTE EXTRAIDO
81
EQUIPO DE EXTRACCIÓN SOXHLET
84
\par \f2 Application Advanced Reads 4.10(461)
\par Operator
\par \f1
\par \f0\fs24 Instrument Settings
\par \f2\fs16 Instrument Cary 50
\par Instrument version no. 3.00
\par Ordinate Mode Abs
\par Ave Time (sec) 0.1000
\par Replicates 3
\par Sample averaging OFF
\par \f1
\par User Result = (Read(670)-(Read(630)+Read(710))/2)/(0.1086)*1 'ClorofilaBqdos
\par Comments:
\par \f0\fs24 Zero Report
\par \f1\fs16
\par \f2 Read Abs(670.0) Abs(630.0) Abs(710.0)
\par
_______________________________________________________________________
____________________________________
\par Zero 0.1079 0.1058 0.0902
\par \f1
\par \f0\fs24 Analysis
\par \f2\fs16 Collection time 7/16/2012 6:26:49 AM
\par \f1
\par \f2 Sample F Mean SD %RSD Results Abs(670.0)
Abs(630.0) Abs(710.0)
\par
_______________________________________________________________________
____________________________________
\par Sample 1 0.1100 0.0565
0.0635 0.0257
\par 0.1089 0.0563
0.0632 0.0257
\par 0.1092 0.0006 0.51 0.1092 0.0563
0.0633 0.0257
\par \f1
\par \f2 Sample 2 0.1117 0.0562
0.0631 0.0251
\par 0.1134 0.0564
0.0628 0.0253
\par 0.1130 0.0012 1.03 0.1140 0.0562
0.0628 0.0249
\par \f1
\par \f2 Sample 3 0.1119 0.0559
0.0628 0.0247
\par 0.1085 0.0557
0.0629 0.0250
\par 0.1097 0.0019 1.73 0.1088 0.0559
0.0630 0.0251
\par \f1
\par \f2 Sample 4 0.1104 0.0556
0.0625 0.0248
\par 0.1112 0.0557
0.0625 0.0249
85
\par 0.1102 0.0011 1.02 0.1089 0.0556
0.0626 0.0249
\par \f1
\par \f2 Sample 5 0.1112 0.0557
0.0624 0.0248
\par 0.1117 0.0555
0.0623 0.0245
\par 0.1107 0.0014 1.27 0.1091 0.0553
0.0623 0.0246
\par \f1
\par \f2 Sample 6 0.1087 0.0554
0.0626 0.0247
\par 0.1082 0.0555
0.0625 0.0250
\par 0.1089 0.0008 0.71 0.1097 0.0557
0.0628 0.0248
\par \f1
\par \f2 Sample 7 0.1074 0.0556
0.0630 0.0248
\par 0.1106 0.0558
0.0626 0.0250
\par 0.1093 0.0017 1.55 0.1100 0.0557
0.0625 0.0251
\par \f1
\par \f2 Sample 8 0.1131 0.0562
0.0627 0.0251
\par 0.1129 0.0562
0.0628 0.0250
\par 0.1122 0.0013 1.17 0.1107 0.0559
0.0627 0.0251
\par \f1
\par \f2 Sample 9 0.1115 0.0560
0.0629 0.0250
\par 0.1100 0.0559
0.0628 0.0250
\par 0.1114 0.0012 1.11 0.1125 0.0562
0.0629 0.0251
\par \f1
\par \f2 Sample 10 0.1082 0.0558
0.0630 0.0252
\par 0.1081 0.0557
0.0631 0.0248
\par 0.1100 0.0032 2.92 0.1137 0.0562
0.0628 0.0249
\par \f1
\par
\par \f0\fs24 ResultsFlagsLegend
\par \f2\fs16 R = Repeat reading
86
87