Laboratorio N° 5

AISLAMIENTO Y TINCION DE BACTERIAS ESPORULADAS

Facultad de ingenierías
Departamento de Ingeniería ambiental
Universidad de Córdoba, Montería
Microbiología
Leidy Lorena Mendoza Nova

RESULTADOS
MUESTRA DE ESTIERCOL DE BURRO 104 OBJETIVO 100X

MUESTRA DE ESTIERCOL DE BURRO 105 OBJETIVO 100X

 Diego Alejandro López Páez
Daniel Felipe Sánchez López
Cristian Camilo Pérez Fernández
Génesis Salcedo Márquez

MUESTRA ESTIERCOL GRUPO DE KATHERIN OBJETIVO 100X

DE BURRO (MUESTRA POSITVIA)

MUESTRA DE MUESTRA OBJETIVO 100X

ESTIERCOL DE SUMINISTRADA POR
BURRO PROFESORA
(POSITIVA)
 Diego Alejandro López Páez
Daniel Felipe Sánchez López
Cristian Camilo Pérez Fernández
Génesis Salcedo Márquez

DISCUSIÓN
En esta práctica utilizamos estiércol de burro, debido a que este se encuentra en un estado en
el cual las bacterias se han encontrado expuestas a una serie de factores medioambientales
que en algunos casos no son aptos para muchas bacterias, dado esto sería conveniente utilizar
esto par encontrar bacterias que puedan ser esporuladas.
Usamos un colorante que era nuevo para nosotros, denominado verde de malaquita o
coloración de esporas de Shaeffer–Fulton. Esta técnica de coloración, también conocida
como Wirtz-Conklin, utiliza el verde de malaquita para teñir las esporas dentro y fuera de la
célula y safranina para contrateñir a la célula vegetativa. Por tanto, la espora se tiñe de verde
y la célula vegetativa de rojo.
Luego del montaje al microscopio se observaron, bacilos esporulados también se pueden
observar bacterias solitarias y grupos de bacterias de tipo (bacilo, coco, streptococo), a la
muestra se le aplico tinción con verde de malaquita y safranina.
En dos de las muestras que observamos en el laboratorio no encontramos bacterias
esporuladas, aunque hicimos el debido proceso paso por paso, esto pudo haberse debido a
que las bacterias o las formas vegetativas de las bacterias esporuladoras sometidas a 80 ºC
durante diez minutos (pasteurización) mueren.
Mientras que en dos de los casos estudiados en el laboratorio dieron resultados positivos, es
decir, se observaron bacterias esporuladas, podemos decir que estas bacterias generan una
termo resistencia al calor, la desecación, la radiación y las influencias químicas. Contienen
un genoma y toda la maquinaria metabólica esencial.
Después de realizada esta práctica podemos concluir que las endosporas:
 No presentan actividad metabólica
 Gran resistencia al efecto del calor
 Gran resistencia al efecto de las radiaciones
 Gran resistencia al efecto de los productos químicos
 Diego Alejandro López Páez
Daniel Felipe Sánchez López
Cristian Camilo Pérez Fernández
Génesis Salcedo Márquez

CUESTIONARIO
1. Explique el fundamento de la tinción de esporas.

La envuelta de la endospora es más compleja e impermeable que la envuelta de las células

vegetativas en las que se forma. Solo se puede teñir el contenido de la espora alterando
su envuelta. La impermeabilidad de las cubiertas dificulta que las endosporas se decoloren
una vez teñidas, El verde de malaquita es un colorante débilmente básico (tiene una carga
positiva débil) y por tanto, se une débilmente a la bacteria. Penetra en las células vegetativas.
Cuando se calienta la preparación también penetra las endosporas. Durante el lavado con
agua, el verde de malaquita se elimina de las células vegetativas, pero no de la endospora.
El colorante de contraste (la safranina) solo puede teñir a las células vegetativas (decoloradas
por el agua
1. ¿Por qué se debe calentar la preparación?
Para eliminar los microorganismos no generadores de esporas y afecten el resultado final de
la tinción de esporas.
2. ¿Qué dificultades se tendrían si no se adiciona safranina al final de la tinción?
Como la safranina es un colorante de contraste, es decir solo puede colorar las células
vegetativas si estas no se tiñen quedarían incoloras.
 Diego Alejandro López Páez
Daniel Felipe Sánchez López
Cristian Camilo Pérez Fernández
Génesis Salcedo Márquez

Bibliografía
GIL, M. (04 de 11 de 2019). LIFEDER.COM. Obtenido de lifeder.co :
https://www.lifeder.com/verde-malaquita/

Gonzalez, D. J. (04 de 11 de 2019). hipertextos del area de la biologia . Obtenido de HIPERTEXTOS

DEL AREA DE LA BIOLOGIA : http://www.biologia.edu.ar/bacterias/micro7.htm

INSTITUTO SUPERIOR DE FORMACION PROFESIONAL Claudio Galeno . (4 de 11 de 2019). Obtenido

de INSTITUTO SUPERIOR DE FORMACION PROFESIONAL Claudio Galeno :
https://www.fpclaudiogaleno.es/blog/tecnica-de-tincion-de-espora-bacteriana-con-verde-
malaquita-en-laboratorio
 Diego Alejandro López Páez
Daniel Felipe Sánchez López
Cristian Camilo Pérez Fernández
Génesis Salcedo Márquez