LABORATORIO DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL 2019

PRÁCTICA N°11: DETERMINACIÓN DE VITAMINA C EN BEBIDAS

NO ALCOHÓLICAS POR HPLC

DATOS GENERALES:
1. OBJETIVO:

 Identificar un compuesto orgánico mediante Cromatografía Líquida de Alto

Rendimiento (HPLC).

2. MATERIAL Y EQUIPO:

MUESTRA:

 Bebida no alcohólica: Néctar Frugos Durazno.

MATERIAL:

 Jeringas descartables
 Filtro de membrana (microfiltro)
 Cartucho (precolumna)
 Vasos de precipitación
 Micropipeta
 Columna
 Bomba al vacío
 Agua destilada
CARTUCHO
(PRECOLUMNA)

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JERINGAS DESCARTABLES

FILTRO DE MEMBRANA BOMBA AL VACÍO

REACTIVOS:

 Ácido Ascórbico grado reactivo

 Fase móvil: Ácido Tricloroacético 0.1%

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EQUIPO:

 Cromatógrafo líquido HPLC (HP 1050)

SISTEMA DE
DETECCIÓN

SISTEMA
CROMATOGRÁ
FICO
(SOLVENTES)

REGISTRADOR
DE DATOS

3. PARTES DEL CROMATÓGRAFO LÍQUIDO HPLC:

SISTEMA DE
INYECCIÓN
MUESTRAS PARA
FRACCIONAR

INYECTOR DE
MUESTRAS

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COLUMNA DE
SEPARACIÓN

VIAL COLOR
ÁMBAR

AUTOMUESTRIADORES
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PROCESO DE
INYECCIÓN:
 Colocación de
la muestra en el
vial color
ámbar.
 Luego será
colocado en un
automuestread
or.

4. DATOS EXPERIMENTALES:

-Temperatura ambiental: T=25°C

-Presión ambiental: P= 1 atm

 ESTÁNDAR:

1000 µL 3.5 µg
20 µL x

X = 0.07 µg

1 mL 3.5 µg
10 mL x

X = 35 µg

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 MUESTRA:

DATOS:

-Contenido de vitamina C: 18 mg
-Volumen total de la muestra: 235 mL

235 mL 18 mg
1 mL x

X = 0.07 mg/mL = 70 µg/mL

1000 µL 70 µg
20 µL x

X = 1.4 µg

5. CONCLUSIONES:

 Se identificó las partes y el funcionamiento del Cromatógrafo líquido HPLC.

 Se cuantificó la cantidad de vitamina C presente en una bebida no alcohólica (Néctar

Pulp Durazno), que en un volumen de 235 mL tiene 18 mg de vitamina C; de lo cual

solo hay 0.07 mg en 1 mL.