Nombre: Diana Laura Lizárraga Lizárraga

Grupo: BT-33
Institución: Universidad Politécnica de Sinaloa
Carrera: Ingeniería en biotecnología
Docente: M.C. Maya Torres Sánchez
Materia: Microbiología
Medios de cultivo microbiológicos
Medios de cultivo. Son una mezcla de nutrientes que, en concentraciones adecuadas
y en condiciones físicas óptimas, permiten el crecimiento de los microorganismos.
Son esenciales en el Laboratorio de Microbiología por lo que un control en su
fabricación, preparación, conservación y uso, asegura la exactitud, confiabilidad y
reproducibilidad de los resultados obtenidos.
Historia
La primera noticia de la utilización de medios de cultivo llega del micólogo Brefeld,
que consiguió aislar y cultivar esporas de hongos en medios sólidos realizados a
base de gelatina. Este sistema no era adecuado para las bacterias (por su menor
tamaño) y no fue hasta el año 1878 cuando Lister popularizó un método enfocado al
cultivo puro basado en diluciones seriadas en un medio líquido.
Koch realizó sus investigaciones utilizando en un primer momento rodajas de patata
como soporte nutritivo sólido, pero no tardó en recurrir al caldo de carne líquido,
diseñado por Loeffler, al que, en 1881, añadió gelatina, logrando un medio sólido
transparente ideal para la observación de la morfología macroscópica de las colonias
microbianas. En el año 1882 tiene lugar uno de los grandes avances de la
microbiología en relación con los medios de cultivo: el médico alemán Walter Hesse
introduce el agar-agar (polisacárido extraído de algas rojas) como solidificante.
En 1887 un ayudante de Koch llamado Petri, comienza a utilizar placas de cristal
planas, que se llaman desde entonces placas de Petri, para sustituir a las clásicas
bandejas de vidrio cubiertas con campanas que se usaban hasta entonces. Beijerinck
y Winogradsky, que desde de 1888 realizaron sus investigaciones sobre las bacterias
quimioautótrofas (utilización de nitrógeno y azufre, sobre todo) tuvieron gran
importancia en el desarrollo de los medios selectivos y de enriquecimiento. Diseñaron
este tipo de medios de tal forma que su especial composición química favorecía el
crecimiento de ciertos tipos de microorganismos que, en función de sus procesos
metabólicos, eran los únicos capaces de utilizar para su desarrollo ciertos nutrientes
del medio. En 1892 Würtz impulsó el uso de los medios diferenciales, incorporando
indicadores de pH a la composición de ciertos medios con lo cual se podía observar
la producción de ácidos en la fermentación en ciertos microorganismos.
Ingredientes necesarios para un cultivo
 Agua
 Bases nutritivas
•Peptonas, hidrolizados y digeridos
•Extractos, infusiones y dializados
 Carbohidratos
•Azúcares
•Agua y derivados
•Almidones
•Otros
 Sales Minerales
•Macroelementos (fósforo, azufre, sodio, cloro, hierro y otros)
•Microelementos (zinc, cobre y otros)
 Colorantes e indicadores
 Factores de crecimiento
•Vitaminas
•Proteínas
•Otros
 Antibióticos y lípidos
Clasificación

De acuerdo a la naturaleza de sus constituyentes

 Medios naturales o complejos: constituidos por sustancias complejas de origen
animal o vegetal, las que son usualmente complementadas por la adición de
minerales y otras sustancias. En ellos no se conocen todos los componentes,
ni las cantidades exactas presentes de cada uno de ellos.
 Medios definidos o sintéticos: son los medios que tienen una composición
química definida cualitativamente y cuantitativamente. Generalmente se usan
en trabajos de investigación.

De acuerdo al uso del medio de cultivo

 Medios de enriquecimiento: son medios líquidos que favorecen el crecimiento
de un tipo de microorganismo en particular. Permiten aumentar el número de
microorganismos de ese tipo. Usualmente contienen una o más sustancias
inhibidoras del crecimiento de los microorganismos con excepción de los que
se quieren cultivar.
 Medios selectivos: son parecidos a los de enriquecimiento, se diferencian por
ser medios sólidos y están diseñados para el aislamiento de microorganismos
específicos.
 Medios diferenciales: son medios que contienen indicadores de productos
derivados de la actividad microbiana de los microorganismos. No contienen
ningún tipo de sustancia con actividad antimicrobiana. Permiten revelar
características fisiológicas de los microorganismos.
Estado físico
 Solido
 Semisólido
 Liquido
Preparación
Los medios de cultivo se pueden preparar en el laboratorio a partir de cada uno
de sus constituyentes básicos, o por simple rehidratación de productos asequibles
comercialmente (medios de cultivo deshidratados). Generalmente se prefiere el
uso de los medios de cultivo deshidratados porque, además de simplificar el
trabajo, con ellos se tiene mayor probabilidad de obtener resultados reproducibles.
Condiciones generales para el cultivo
Disponibilidad de nutrientes adecuados
Un medio de cultivo adecuado para la investigación microbiológica ha de contener,
como mínimo, carbono, nitrógeno, azufre, fósforo y sales inorgánicas. En muchos
casos serán necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias inductoras del
crecimiento. Siempre han de estar presentes las sustancias adecuadas para
ejercer de donantes o captadores de electrones para las reacciones químicas que
tengan lugar.
Consistencia adecuada
Partiendo de un medio líquido podemos modificar su consistencia añadiendo
productos como albúmina, gelatina o agar, con lo que obtendríamos medios en
estado semisólido o sólido. Los medios solidificados con gelatina tienen el gran
inconveniente de que muchos microorganismos no se desarrollan adecuadamente
a temperaturas inferiores al punto de fusión de este solidificante y de que otros
tienen la capacidad de licuarla.
Actualmente los medios sólidos son de uso universal, por su versatilidad y
comodidad, pero hay también gran cantidad de medios líquidos cuyo uso está
ampliamente extendido en el laboratorio.
Presencia (o ausencia) de oxigeno
Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmósfera con tensión de
oxígeno normal. Algunas pueden obtener el oxígeno directamente de variados
sustratos. Pero los microorganismos anaerobios estrictos sólo se desarrollarán
adecuadamente en una atmósfera sin oxígeno ambiental. En un punto intermedio,
los microorganismos microaerófilos crecen mejor en condiciones atmosféricas
parcialmente anaerobias (tensión de oxígeno muy reducida), mientras los
anaerobios facultativos tienen un metabolismo capaz de adaptarse a cualquiera
de las citadas condiciones.
Humedad
Un nivel mínimo de humedad, tanto en el medio como en la atmósfera, es
imprescindible para un buen desarrollo de las células vegetativas microbianas en
los cultivos. Hay que prever el mantenimiento de estas condiciones mínimas en
las estufas de cultivo a 35-37ºC proporcionando una fuente adecuada de agua que
mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar así
que se deseque el medio.
Luz
La mayoría de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que en
presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como sería el caso de los
microorganismos fotosintéticos.
pH
La concentración de iones hidrógeno es muy importante para el crecimiento de los
microorganismos. La mayoría de ellos se desarrollan mejor en medios con un pH
neutro, aunque los hay que requieren medios más o menos ácidos. No se debe
olvidar que la presencia de ácidos o bases en cantidades que no impiden el
crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar sus procesos
metabólicos normales.
Temperatura
Los microorganismos mesófilos crecen de forma óptima a temperaturas entre 15
y 43 C. Otros como los psicrófilos crecen a 0 C y los temófilos a 80 C o incluso a
temperaturas superiores (hipertemófilos). En líneas generales, los patógenos
humanos crecen en rangos de temperatura mucho más cortos, alrededor de 37
oC, y los saprofítos tienen rangos más amplios.
Esterelidad
Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estériles para evitar la
aparición de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el
crecimiento microbiano normal del o de los especímenes inoculados en dichos
medios. El sistema clásico para esterilizar los medios de cultivo es la autoclave
(que utiliza vapor de agua a presión como agente esterilizante).
Otros aspectos
 Prepararlos sólo a partir de productos que provengan de fabricantes o
proveedores que suministren productos de calidad.
 Utilizar agua destilada o desmineralizada con una calidad microbiológica y
fisicoquímica adecuada.
 Utilizar materiales de vidrio bien lavados y enjuagados con agua destilada o
desmineralizada.
 Controlar el tiempo y la temperatura recomendada durante su esterilización.
Nunca se deben exceder las condiciones señaladas por el fabricante.
 Almacenamiento
Los medios de cultivo deshidratados se deben almacenar en envases sellados bajo
las condiciones que señale el fabricante. Generalmente se almacenan en un lugar
fresco (entre 15 y 25 C), con poca humedad y protegidos de la luz solar directa. Nunca
se deben almacenar cerca de autoclaves, hornos, ni otra fuente de calor o vapor. Los
medios de cultivo deshidratados son higroscópicos. Cuando los envases de estos
medios de cultivo deshidratados son abiertos para su uso inicial, se debe tener la
precaución de cerrarlos tan pronto como sea posible y mantenerlos bien cerrados
para prevenir la entrada de humedad. La absorción de agua produce cambios de pH,
formación de grumos, decoloraciones del polvo, etcétera, lo cual indica que deben ser
descartados porque pueden haber sufrido cambios químicos o estar contaminados.
Una vez que el medio de cultivo ha sido preparado y esterilizado, puede almacenarse
a temperatura ambiente por un periodo máximo de 2 semanas protegido de la luz, o
por periodos mayores a 12–15 C. Sin embargo, almacenados bajo refrigeración entre
2 y 8 C se prolonga la vida útil de los mismos, (nunca por debajo de 0oC porque se
destruye la estructura del gel). Los medios de cultivo se deben mantener en
recipientes bien cerrados para evitar su deshidratación y cuando se usa tapón de
algodón, se debe colocar por encima una envoltura de papel (Craft). Otro punto
importante a tomar en cuenta, es que cada lote de medio de cultivo preparado debe
pasar por un riguroso proceso de control de calidad, en donde se determinan sus
propiedades fisicoquímicas (apariencia, pH) y microbiológicas (esterilidad y
promoción de crecimiento) verificando que cumplan con los requisitos de calidad
establecidos y por ende demostrar que son aptos para su uso.
Utilización
Diagnóstico clínico en medicina humana y veterinaria
 Detección de microorganismos patógenos a partir de muestras de fluidos,
tejidos y excretas y sus toxinas causantes de enfermedades.
Industria farmacéutica y biotecnológica
 Cultivo masivo de microorganismos productores de metabolitos (proteínas,
factores de crecimiento, aminoácidos, péptidos, antibióticos, etc.)
 Control de la calidad (control de proceso, materias primas, productos
terminados, aguas, residuales y ambiente)
Industria alimenticia
 Cultivo masivo de microorganismos productores de sustancias nutritivas y
alimentos (proteínas y compuestos saborizantes entre otros)
  Obtención de alimentos fermentados (yogurt, otros productos lácteos y
alimenticios)
 Control de la calidad (control de proceso, materias primas, productos
terminados, y ambiente)
Otras industrias y sectores productivos (agricultura, química)
 Cultivo masivo de microorganismos (obtención de polímeros, azúcares y otros)
 Control de la calidad (control de proceso, materias primas, productos
terminados y ambiente)
 Control del medio ambiente
 Control de las aguas y fuentes de abasto
 Control ambiental (aire, suelos)
 Control de residuales
Investigaciones
 Estudios morfológicos, funcionales, sistemáticos y de otro tipo, dirigidos al
conocimiento de la flora microbiana.
 Investigaciones relacionadas con el desarrollo de sustancias o productos en
las industrias y sectores anteriormente señalados.

Bibliografía
 Wilian Sanchez. (2003). Medios de cultivo. En Manual de medios de
cultivos(267). USA: Panread.
 Daniel Valenzuela. (2008). Los medios en la microbiologia. 2019, de UBA Sitio
web: http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioMedios.htm
 Mariana Carrillo. (2011). Medios de cultivo. 2019, de ECURED Sitio web:
https://www.ecured.cu/Medio_de_cultivo_(Microbiología)