BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA

Facultad de Ciencias Biológicas

Lic. En Biología

Materia: Inmunobiología

Docente: Héctor Julio Flores

Presenta:
Castillo López Estrella del Mar

Título de Informe de Práctica 1:

OBSERVACIÓN DE LEUCOCITOS
(Cuenta Diferencial)
DETERMINACIÓN DE GRUPO
SANGUÍNEO
INTRODUCCIÓN
Observación de leucocitos (cuenta diferencial)

Leucocito en una palabra derivada de las voces latinas que significan célula blanca (o
glóbulo blanco) y éstos son nombres comunes alternativos para designarlo. Los
leucocitos tienen el color ordinario de todas las células cuando son teñidas con
colorantes; se les llama “blancas” en contrate con los glóbulos rojos y porque carecen de
pigmentos1. Los cinco principales tipos de leucocitos son los neutrófilos (50-70%), Los
eosinófilo (1-5%), basófilos (0.5-1.0%), linfocitos (20-30%), y monocitos (2-6%). Bueno por
cuenta diferencial por se entiende la determinación del porcentaje relativo de cada tipo
de leucocito en una muestra de sangre. Se realiza en extendidos (frotis) preparados
cuidadosamente y teñidos con colorantes tales como Wright, el cual tiene el núcleo de
los leucocitos de un color púrpura que facilita la diferenciación.

Neutrófilos. Constituyen la mayor parte de los leucocitos circulantes. En los humanos

normales, los neutrófilos sólo se producen en la médula ósea. El sistema hematopoyético
no sólo produce la cantidad necesaria de neutrófilos (aproximadamente 130,000,000,000
al día en una persona de 80 kg)1,2.

Eosinófilos. Se sabe muy poco acerca de la función natural y de la cinética de los

eosinófilos. Tienen una vida media mucho mayor que la de los neutrófilos, pero pasan
poco tiempo en la sangre periférica (de una a ocho horas) antes de emigrar a los tejidos,
en donde desempeñan sus funciones y de donde pueden entrar de nuevo a la circulación
y a la médula ósea.4

Basófilos. Son los granulocitos más pequeños y los leucocitos menos numerosos. Sus
gránulos contienen histamina (aproximadamente el 50% de la que hay en la sangre) y
heparina (entre otras sustancias) y han sido llamados “bolsas suicidas” porque la
liberación de grandes cantidades del contenido de estos gránulos en el choque
anafiláctico puede ocasionar la muerte del individuo.3

Linfocitos. Recibieron este nombre porque son el único tipo de célula sanguínea que se
observa de manera regular y abundante en la linfa al igual que en la sangre. Hay tres
clases de linfocitos: los pequeños y los medianos se encuentran en la sangre y los grandes
en la linfa. Hay además dos clases de linfocitos pequeños, los B y los T, que no pueden
diferenciarse entre sí por sus características morfológicas: sólo pueden diferenciarse por
métodos inmunológicos.3

Monocitos. Son los precursores inmediatos de los macrófagos. La transición de monocito

a macrófago implica ciertos cambios celulares, por lo cual en ocasiones es difícil definir
cuándo un monocito se convierte en macrófago, dado que dichos cambios son un
proceso. 5
Determinación de grupo sanguíneo

Alrededor de 1900 Karl Landsteiner descubrió que en el humano existen cuatro tipos de
sangres con respecto a la presencia o ausencia de dos antígenos específicos
denominados A y B. Estos cuatro grupos se conocen actualmente como tipos A, B, AB y
O. Este último se caracteriza por la ausencia de los antígenos A y B. En 1940 Landsteiner
y Wiener reportaron que el suero de conejo producido contra eritrocitos de mono Rhesus
podía aglutinar los eritrocitos del 85% de una población caucásica. Este antígeno se
designó inicialmente como factor Rh, posteriormente se encontró que existe como seis
antígenos a los cuáles Fisher y Race designaron con letras C, D E, c, d, e. Uno de estos
antígenos, el D es responsable de la condición Rh positivo. La tipificación de eritrocitos
en el laboratorio se realiza con antisueros específicos contra los antígenos A, B y D, y
puede realizarse por el método en el tubo o en portaobjetos
OBJETIVO

• Identificar los diferentes tipos de leucocitos en un frotis teñido

• Demostrar por medio de una reacción de aglutinación la presencia de los Ag
eritrocitarios A, B y D.

MATERIAL Y EQUIPO

• Portaobjetos
• Algodón
• Lancetas desechables
• Colorante de Wright
• Solución reguladora pH 6.4
• Microscopio
• Muestras de sangre con anticoagulante
• Pipetas graduadas 1 y 5 ml
• Tubos de ensayo
• Solución salina
• Aplicadores de madera
• Sueros tipificadores anti-A, anti-B, anti-D (Rh)
DESARROLLO
Observación de leucocitos (cuenta diferencial)

1. A partir de la muestra de sangre preparar 2 extendidos (frotis) siguiendo las

indicaciones
2. dejar secar completamente los frotis colocar en un puente de tinción y cubrirlos
(contar el número de gotas) con colorante dejar el colorante Wright. Dejar el
colorante 1 minuto y añadir el mismo número de gotas de solución reguladora pH
6.4 durante 8 minutos.
3. Lavar suavemente la preparación por 30 segundos y secar el exceso de agua.
4. Cuando la preparación esté completamente seca, colocar una gota de aceite de
inmersión y observar al microscopio.
5. Para facilitar la identificación consultar las láminas a color que ilustran los
diferentes leucocitos.
Determinación de grupo sanguíneo

1. Depositar 2 gotas de sangre en tres diferentes divisiones de un portaobjetos.

2. Agregar a la izquierda a derecha una gota del antisuero anti-A, una gota de anti-
B y una gota de anti-D respectivamente.
3. Mezclar los reactivos con un aplicador de madera diferente para cada gota.
4. Agitar suavemente en la placa oscilatoria.
5. Buscar la presencia de aglutinación.
RESULTADOS

Imagen Leucocitos 6 2 linfocito

Por 1 basófilo
campo 3 neutrófilo
1 3 neutrófilo 7 2 linfocito
2 linfocito 5 neutrófilo
1 monocito 2 basófilo 11 3 neutrófilos
1 plaqueta 8 2 monocito 12 2 monocito
2 6 neutrófilo 3 neutrófilo 3 neutrófilo
4 linfocito 5 basófilo 13 2 linfocito
3 5 neutrófilo 9 2 linfocito 14 4 linfocito
4 4 neutrófilo 2 neutrófilo 1 monocito
5 6 linfocito 1 monocito 15 4 basófilo
3 monocito 10 6 neutrófilo 3 neutrófilo
6 neutrófilo 4 linfocito 5 basófilo

Neutrófilos 51 50%
Linfocitos 28 27.45%
Basófilos 13 12.75
Monocitos 10 9.80%

Total: 102

El grupo sanguíneo que se obtuvo mediante las pruebas fue O Rh+, la aglutinación se
presento en la gota de sangre que se le añadió el antisuero anti-D.

Imágenes anexadas.

DISCUSIÓN

Se observaron 15 campos a 40x, en los cuales se encontraron el 50% de neutrófilos,

27.45% linfocitos, 12.75 basófilos y 9.8% de monocitos, teniendo un total de 102 células.

Algunos de los porcentajes no concuerdan con lo ya referenciado, lo cuál puede deberse

al número de campos observados, tal vez incrementando la n de campos tendríamos
una mejor aproximación.
REFERENCIAS

1. Asimov I. (1989) El río viviente. 1a. Ed. México, D.F.: Limusa;

2. McKenzie SB. (2009). Hematología clínica. 1a. Ed. México, D.F.: El Manual
Moderno.
3. Ruíz AGJ. (2009) Fundamentos de hematología. 4a. Ed. México: Médica
Panamericana.
4. Arreguín OL, Meza MA, Blanco FF. (1995). Eosinófilos. Revista Alergia México;
42(1): 1-8.
5. Castaño D, Rojas M. (2010) Alteraciones en fagocitos mononucleares: un viaje
al significado de la muerte de monocitos y macrófagos en la inmunopatogénesis
de la tuberculosis. Biomédica; 30(Supl):45-64.