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EFECTO COOPERATIVO
Figura 1 Figura 2
12 2,0
Cooperatividad
Cooperatividad positiva positiva (no lineal)
10
No cooperativa (hipérbola) 1,5
8
No cooperativa
(lineal)
1/v
Cooperatividad negativa
v
6 1,0
4 Cooperatividad
0,5 negativa (no lineal)
2
0 0,0
0 200 400 600 800
0,00 0,05 0,10 0,15 0,20
[S] 1/[S]
Secuencial
Concertado
Figura 4
t r
Ks Ks
S S
t r
Ks Ks
S S S S
Forma T Forma R
(baja afinidad) (alta afinidad)
Ecuación de Hill
E + n S ↔ ESn (1)
v
= ´
[S] n
(2)
Vmax K S + [S]n
donde:
K ´s = [S]0,5
n
(5)
[S]0,5 = n K ´s (6)
v
=
[S]n (7)
Vmax [S]0n,5 + [S]n
En esta ecuación entonces, S0,5 define la concentración de sustrato que da una
velocidad semimáxima, y corresponde al punto de inflexión de la curva
sigmoidea.
En la cooperatividad positiva, n será mayor que 1, y menor que 1 si es
negativa.
Así la representación de v/ Vmax-v frente al log [S] es una recta con pendiente
n. Cuando log v/( Vmax -v)= 0, v/( Vmax -v)= 1 y la posición correspondiente
sobre el eje log [S] nos dará el log [S] 0,5 . K’ puede calcularse a partir de la
ecuación (6).
Enzimología – Efecto cooperativo 5
Figura 5
n=4 n=2
1
n=1
log (v/Vmax-v)
n = 0,5
-1
log [S] = 2 ⇒ [S]0,5 = 100
-2
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5
log [S]
gráfico debería ajustar mejor a una recta. Con el valor de Vmax obtenido de
este gráfico, regraficar Hill.
Indice de cooperatividad
v
= ´
[S] n
(2)
Vmax K S + [S]n
[S]0n,9
0,9 = (9)
K ´S + [S]0 ,9
n
cuando v = 0,1
[S]0n,1 (10)
0,1 = ´
K S + [S]0 ,1
n
[S]0,9 (11)
= n 81
[S]0,1
A este cociente se lo denomina Rs, o índice de cooperatividad. Si la enzima es
no cooperativa (n = 1), este índice será de 81. Valores mayores a 81 indican
cooperatividad negativa y valores menores cooperatividad positiva. En el
ejemplo anterior, a un n = 0,5 le corresponde un Rs de 6561, mientras que
para un n = 4 el Rs es de 3. Una ventaja clara de este parámetro como medida
de cooperatividad es que de valores de importancia para medir la relevancia de
una enzima en una vía metabólica, dado que da una idea de la respuesta de la
misma a cambios en el nivel de sustrato (o efector).