TEMA 7 HEMOAGLUTINACIÓN POR VIRUS

7.1. DEFINICIÓN

Este  fenómeno  fue  descrito  por  primera  vez  por  Hirst  en  1941,  quien  observo  en  un  embrión  de  pollo  la  aglutinación  de 
glóbulos rojos en un vaso sanguíneo roto, mientras realizaba pases de virus de influenza en el líquido alantoideo.
Hirst reconoció la importancia de este hallazgo y describió la hemoaglutinación como un método para ensayo de virus. 
Se  denomina  aglutinación  a  la  interacción  in  vitro  de  un  antígeno  particulado  (  por  lo  general  células)  con  su  anticuerpo 
específico.
Hemoaglutinación es la propiedad que tienen ciertos virus para unir y aglutinar eritrocitos de mamíferos y aves, debido a  las 
proteínas que poseen en su capa externa  Esta hemoaglutinación inducida por virus puede usarse para facilitar la identificación 
de un virus desconocido.

7.2. VIRUS HEMOAGLUTINANTES
Son microorganismos hemoaglutinantes los ortomixovirus y paramixovirus, alfavirus, flavivirus y bunyavirus, así como algunos 
adenovirus, reovirus, parvovirus, y coronavirus.
Familia Género o especie Eritrocitos
Adenoviridae La mayoría de las especies Mono y/o rata, 37°C
Poxviridae Ortopoxvirus Pollo, 37°C
Parvoviridae La mayoría de las especies Cobayo,  hámster,  cerdo, 
humano, mono, 4°C.
Togaviridae Alfavirus Ganso,  paloma,  pollito;  pH  y 
Flaviviridae Flavivirus temperaturas críticos.
Orthomyxoviridae Influenza A Pollito, humano, cobayo, 4°C.
Paramyxoviridae Parainfluenza Pollito, humano, cobayo, 4°C.
Enfermedad de Newcastle
Coronaviridae Varias especies Rata, ratón, pollito.
Bunyaviridae Varias especies Ganso; pH crítico.
Rhabdoviridae Rabia Ganso, 4°C.
Reoviridae Reovirus Humano
Rotavirus
Otros virus que sabemos que causan hemaglutinación  son papovavirus, adenovirus, poxvirus, togavirus , reovirus, coronavirus, 
enterovirus, y rhabdovirus. La hemaglutinina en estos virus es una parte integral del virión, pero en poxvirus es separable del 
virión intacto.

7.3. MECANISMO DE HEMOAGLUTINACIÓN Y HEMOADSORCIÓN.
La actividad enzimàtica de las proteínas virales (hemaglutininas) produce hemaglutinaciòn en la cual  los eritrocitos se unen por 
medio de puentes. Se ha demostrado que el glóbulo rojo contiene cerca de 300 sitios en los cuales se puede adsorber un virus.
Muchos virus contienen proteínas en su capa externa que los capacitan para aglutinar glóbulos rojos de varias especies. En 
influenza  y  algunos  paramixovirus,  la  hemaglutinación  de  la  superficie,  que  es  una  glucoproteína,  se  fija  al  glóbulo  rojo  que 
posee receptores complementarios. 
Elusión  es  la  liberación  del  virus.  El  virus  produce  elusión  sobre  el  glóbulo  rojo  a  37°  C  debido  a  la  destrucción  del  ácido 
neuramínico en sus receptores  por la neurominidasa del virión, El virus eluido puede aglutinar un glóbulo rojo fresco, pero éste, 
una vez eluido ya no puede ser aglutinado por la misma especie de virus, debido a la pérdida de sus receptores. Sin embargo 
el glóbulo rojo eludido puede ser aglutinado por el virus de la influenza y algunos paramixovirus. Sobre esta base, estos virus 
han  sido  dispuestos  o  incluidos  en  una  serie  llamada  el  “gradiente  de  receptor”.    Las  enzimas  destructoras  de  receptor   
producidas por Vibrio  cholerae y otras bacterias impiden la aglutinación de glóbulos rojos susceptibles por mixovirus. 

HEMOADSORCIÓN.
Es un fenómeno que sucede al aplicar glóbulos rojos a una capa de células en un cultivo previamente infectado con un virus 
hemoaglutinante. 
La  hemadsorción    se  debe  a  la  presencia  de  hemaglutinina  específica  del  virus  de  la  membrana  plasmática  de  las  células 
infectadas,  en  la  cual  tiene  lugar  la  adsorción  de  los  glóbulos  rojos.    Los  cultivos  de  células  infectados  con  algunos  virus 
hemaglutinantes  pueden adsorber glóbulos rojos en la superficie celular. Algunos virus productores de hemaglutinación, como 
adenovirus,  no  causan  hemadsorción,  pero  el  virus  de  la  fiebre  porcina  africana,  agente  no  hemaglutinante  produce 
hemadsorción  del glóbulo rojo porcino. 

7.4. INHIBIDORES DE LA HEMOAGLUTINACIÓN.
La inhibición de la hemoaglutinación (IHA) es la unión de anticuerpos a la hemoaglutinina del virus.
Las  pruebas  de  IHA  constituyen  métodos  de  diagnóstico  e  investigación  sencillos  y  útiles  en  la  identificación  de  virus, 
determinación de la relación antigénica de virus aislados, identificación y cuantificación de anticuerpos contra virus.
 Caracteristicas:
● Pruebas altamente específicas y sensibles.
● Se pueden adaptar fácilmente a laboratorios de escasa infraestructura por el bajo costo de los reactivos.
● Son simples y rápidas.
            Hay  dos  métodos  para  realizar  la  IHA,  en  uno  se  realizan  diluciones  decrecientes  de  virus  y  se  enfrentan  a  cantidades 
constantes  de  suero  (alfa)  y  diluciones  decrecientes  de  suero  que  se  enfrentan  a  cantidades  constantes  de  virus  (beta).  El 
método beta es el más comunmente utilizado
Las pruebas de IHA constituyen métodos de diagnóstico e investigación sencillos y útiles en la:
a. Identificación de virus.
b. Determinación de la relación antigénica entre virus aislados.
c. Identificación y cuantificación de anticuerpos contra virus.

Anticuerpos  Ag­Ac  bloquean 

Antígeno viral  Inhibición de HA 
específicos  aglutininas 

Inhibidores específicos e inespecíficos:
Actúan inhibiendo competitivamente con los anticuerpos la hemaglutinina del virus.
El suero de muchas especies contienen inhibidores inespecíficos o aglutininas inespecíficas que pueden conducir a errores en 
los resultados, por los que deben ser destruidos antes de realizar una prueba de IHA, para permitir la determinación del nivel 
de anticuerpos específicos en un suero o para la correcta identificación de un virus aislado.
De acuerdo a la naturaleza del receptor de virus el suero puede inactivarse con los siguientes tratamientos: caolín, peryodato, 
tripsina, enzima destructora de los receptores (EDR), calor a 56° por 30 min.
La adsorción del suero para eliminar aglutininas inespecíficas en las pruebas de IHA en la cuál se emplean glóbulos rojos de la 
misma especie del suero a probar, generalmente no es necesaria. 

7.5. USOS DE LA HEMOAGLUTINACIÓN 

7.5.1. Investigación virológica.
El diagnóstico de las entidades virales es uno de los mayores retos a los que se enfrenta la medicina actual.
Durante  las  últimas  décadas,  el  desarrollo  progresivo  de  nuevas  y  mejores  herramientas  para  evidenciar  las  causas  de  tipo 
viral,  hace  posible  que  estas  entidades  se  puedan  descubrir  y  estudiar  no  sólo  a  nivel  de  laboratorios  especializados,  sino 
también en los comunes. Las pruebas diagnósticas simples, rápidas y poco costosas para la demostración de antígenos han 
reemplazado  las  técnicas  tradicionales,  largas  y  dispendiosas  y  esto  ha  producido  una  mayor  agilidad  en  la  definición  del 
diagnóstico.
Una capa delgada difusa de glóbulos rojos en el fondo del  receptáculo (capa de microtítulo) o del tubo, indica hemaglutinación 
positiva,  mientras  que  una  compacta  corresponde  a  hemaglutinación  negativa.  La  dilución  más  alta  de  virus  que  causa 
hemaglutinación completa contiene una unidad HA. 
1. El diagnostico para la identificación de un virus aislado.
2. Sirve para titular partículas virales activas o inactivas en una suspensión.
3. Permite purificar y concentrar virus.
4. En  investigación  es  de  gran  importancia  biológica  en  la  unión  de  los  virus  a  células  hospedadoras,  su  liberación  y 
posibles mecanismos de infección.
5. La prueba en placa permite determinar la presencia de virus hemoaglutinantes en el líquido infectado.
La  característica  principal  de  la  técnica  de  hemoaglutinación  viral  es  la  rapidez,  además  del  bajo  costo  de  los  reactivos  y  la 
simplicidad de su realización, por lo que determina su fácil adaptación al laboratorio de escasa infraestructura.

7.5.2. Investigación epidemiológica. 
Para ejercer en forma eficiente el control o erradicación de una enfermedad, es imprescindible realizar el diagnóstico preciso y 
oportuno de la misma.
Descubrir anticuerpos es importante para documentar la prevalencia de una infección en individuos y poblaciones.

En  México,  se  instituyeron  campañas  de  control  y  erradicación  de  enfermedades  de  carácter  epidémico,  las  cuales  están 
normalizadas.
Por ejemplo la NORMA Oficial Mexicana NOM­056­ZOO­1995, Especificaciones técnicas para las pruebas diagnósticas que 
realicen los laboratorios de pruebas aprobados en materia zoosanitaria. Explica los procedimientos de laboratorio para la 
identificación de virus tales como influenza aviar y enfermedad de Newcastle.