4.3.

La disminución de contaminantes orgánicos

La cantidad de PHC degrada más de 5 años es notablemente alto en las células ECOS (de 65 a 75% de las
iniciales ≈150,500 mg kg-1 en el suelo ECOS). Esto es notable no sólo por el ajuste de clima frío, pero
también porque los suelos contaminados con N50,000 mg kg-1 APS se ve generalmente como altamente
contaminado y culto di fi para limpiar en un entorno ción remediación biopila (Battelle y NFESC, 1996). la
eliminación de contaminantes a través Se esperaba que la atenuación natural porque el
suelo UNTRD se manipuló análogamente a la ECOS (la mezcla inicial airea el suelo y homog-
enizes contaminantes, que pueden incitar volatilización y estimular la biodegradación por
los microbios endémicas) (Tomei y Daugulis, 2013). Sin embargo, la eliminación de la APS
fue significativamente menor para el que la UNTRD ECOS. Además, la UNTRD tenía ninguna
disminución significativa en la fracción F4G en el transcurso del estudio (t-test, p N 0,05).
Algunos estudios fitorremediación climático en frío han demostrado que el uso de compost
y las plantas tuvieron éxito para la APS-degradación (Ferrera- Rodríguez et al., 2012; Palmroth
et al., 2002; Robichaud et al., 2019), Sin embargo, ninguno de estos estudios investigó la e fi
ciencia del suelo tan altamente contaminado con APS. Un estudio de campo en un sitio -
contaminantes mixtos en Finlandia encontró el compost con plantas (trébol y gramíneas, con
o sin árboles) condujo a la degradación de 57 a 60% de la inicial 11.400
± 4.300 mg kg-1 PHC edad (C21-C40) (Palmroth et al., 2006). En Suecia otro estudio de
campo encontró que un monocultivo de alfalfa fue más e fi ciente de co-siembra con de
girasol para la remediación de C10-C40 PHC en un sitio de mezclado-contaminante (40% de
la inicial 10.233
± 465 mg kg-1), Lo que indica explícitamente que la elección de la combinación
de plantaciones son importantes (Marchand et al., 2018).
fracciones de petróleo más pesadas son recalcitrantes a la degradación (Brown et al., 2017),
Por lo tanto, esperábamos una degradación notablemente más lenta de la PHC N C50 en
comparación con la gama de C6-C50. Nuestros resultados muestran que la degradación de la
fracción pesada de PHC fue ligeramente más lento (65% ver- SUS 75%) (modelo mixto, Pb
0,05). Teniendo en cuenta la fosa de aceite usado había estado en vigor durante más de 40
años, es probable que la comunidad indígena micro BIAL ya tenía la forma de tolerar la
toxicidad de estos contami- con- cuya biodegradación se había limitado debido a la falta de
parámetros óptimos tales como la estructura del suelo y la aireación (Roy et al., 2014). Las
enmiendas ECOS parecen haber favorecido la capacidad de biorremediación las comu-
nidades microbianas de la degradación de la luz a las fracciones de APS muy pesadas
inclusive.

En nuestro estudio, también medimos compuestos clorados y los hidrocarburos ArO- matic porque
son conocidos por ser altamente tóxicos en el medio ambiente y su degradación por microbios es muy
difícil (CCME, 2008). De los compuestos monitorizados, benceno, lene trichloroethy-, y xileno
cayó por debajo del límite de detección (BDL) en ambos los tratamientos, indicando que la
mezcla inicial de la tierra proporcionan las condiciones adecuadas para la disipación y / o
degradación por la micro- población BIAL indígena . El tolueno y el tetracloroetileno se
eliminaron a BDL en el ECOS, pero no desde el suelo UNTRD. Esto puede estar relacionado
con diferentes concentraciones de partida, pero se han encontrado plantas microbios de la
rizosfera para ser bueno tetracloroetileno y BTEX (benceno, tolueno, ilbenceno et- y xilenos)
degradadores (CCME, 2008; Wongbunmak et al.,

2017). Por lo tanto, es posible que la presencia de las plantas en el ECOS

 células favorecidas algunos de la eliminación tolueno y tetracloroetileno.

4.4. Establecimiento de las plantas

La presencia de la APS puede tener impactos negativos sobre la supervivencia de las plantas y que la
hipótesis de la mortalidad del 100% de nuestra Salix sp. esquejes en el primer año fue debido a las
condiciones hidrófobas causadas por altas concentraciones de APS, como se observa porZalesny et al.
(2005). Las diferencias entre las observaciones Sual VI- de agua estancada en la UNTRD frente a los datos analíticos
que muestran ECOS tenían un mayor porcentaje de humedad es más probable debido a la saturación de los poros
del suelo por el petróleo en el suelo inicial, que puede conducir a la exclusión de agua . Materia orgánica mentos
modifica- cambiar las propiedades de la matriz del suelo, que pueden facilitar el establecimiento de plantas (Brady
y Weil, 1996a; Guidi et al.,

2012). Algunos autores probaron con éxito cualquiera de esquejes de plantas enraizadas-pre,
o tierra limpia alrededor de los esquejes o semillas para promover estableci planta estable-
en los sitios de campo contaminado fi (Guidi et al., 2012; Palmroth et al.,

2006; Zalesny et al., 2005). En Finlandia, el compost también se ha demostrado para fomentar
una mayor cobertura vegetal (que los fertilizantes inorgánicos) en un sitio mixto de
contaminantes (Palmroth et al., 2006). El empleo de pequeñas cantidades de tierra limpia para
el establecimiento de plantas de alta contaminación suelos ha demostrado ser ventajoso en
múltiples sitios, incluyendo el nuestro. La “Vida bolsillos” se introdujo para ofrecer una zona de
amortiguación entre el Salix spp. esquejes y el suelo altamente contaminado tuvieron éxito, ya que
permite una mejor supervivencia y el crecimiento de la Salix spp. después de cuatro hijos creciente Sea-
. Nuestra hipótesis es que las mayores tasas de supervivencia fueron vinculados a la capacidad de las
plantas para formar raíces y establecerse antes del contacto directo con el suelo a cielo aceite usado. En
nuestro medio, encontramos los llenan bolsas de yute pre convenientes y fáciles de manejar en el campo.

Ambas especies de Salix utilizados en nuestra investigación contribuyeron a la vegetación de las células
ECOS y exhibieron las estrategias de enraizamiento gratuitos, desde la formación compacta a los corredores
de larga. S. planifolia extienden largas raíces infec- adventicia a través de las células, a menudo después de
la parte inferior de las células (Figura 2C), que fue intermitentemente inundado. Este tipo de crecimiento en- Ables
plantas se propaguen rápidamente y encontrar adecuados microhábitats (De Ye et al.,

2006). Las otras especies, S. alaxensis crecieron más cortos, raíces más compactos con una
formación de fi balón fibroso (Figura 2SEGUNDO). Este tipo de estrategia de monopolización puede
aumentar la tolerancia de las plantas a condiciones de estrés, mientras que hacer un mejor uso de los recursos
localmente abundantes (Ye y col., 2006). Estas estrategias diferentes pueden conferir diferentes
ventajas para cada uno cies espe- en entornos heterogéneos para la tolerancia de
contaminantes y de suministro de fuente de re- (Ye y col., 2006). Plantas nativas de cualquier
área de investigación determinado no siempre pueden ser tan performante como cultivares
y clones seleccionados, pero presentan las ventajas de estar integrado en el tem ecosis- local
y adaptado al clima, y no plantean el riesgo de ser invasivo especies (Kueffer de 2009; Leewis et al.,
2013; Rockwood et al., 2004).

Además de las plantas de Salix, permitimos que la colonización natural por otras especies que se
produzca en todas las parcelas (SI, Tabla C3). El agregado beneficio de una cubierta vegetal espontánea
(es decir: la evapotranspiración, microbiomas de raíz, la estructura del suelo) se juzgó a pesar más que la
ventaja de escarda (reducción de la competencia a la Salix spp.). ECOS suelos fueron colonizados a
mayores tasas y más especies que el UNTRD. Esta gran diferencia en la colonización vegetal y la
diversidad sugiere una toxicidad reducida de la ECOS. La mayoría de los microbios ciales a especies de
plantas de crianza bene fi en su esfera rhizo-, que puede ayudar a una mayor degradación de
contaminantes, lo que más colonización planta a través de un bucle de retroalimentación positiva
(Asemoloye et al., 2017). Este enfoque de especies de plantas mezclado con el soporte
deDesjardins et al. (2018)quien demostró que la complementariedad planta era el método más robusto
para la remediación de múltiples TE concomitantemente.

4.5. Presencia hongos

El hongo Trametes versicolor no produjo cuerpos fructíferos en nuestro sitio experimental. A pesar de su
micelio puede permanecer en el suelo en nuestro proyecto, este no es el primer experimento de ficción en
las traducciones de los resultados del laboratorio al campo no son un evidente éxito debido a di fi cultades
destinado a mantener la parámetros adecuados para el crecimiento en un entorno de campo (aireación,
humedad, sustrato de crecimiento, temperatura, etc.). T. versicolor es un agresivo hongo de la pudrición
blanco-(WRF). Es un conocido degradador orgánico contaminante y tiene TCE con éxito mineralizada
(Marco-Urrea et al., 2008), Así como los HAP en un entorno de suelo (Borràs et al., 2010), Incluso
a escala de campo (Winquist et al., 2014). El uso de FRM en vivo en proyec- tos a gran escala
de biorremediación de suelos es notoriamente difícil, puesto que este ambiente no es su nicho
mal Opti (Gao et al., 2010). Sin embargo, es posible en climas sub-ártico, como lo
demuestraRobichaud et al. (2019)que obtuvo grandes cuerpos de fructificación hongos con otra
especie blanco-Rot, pero en un sitio donde la aireación no estaba tan restringido (contenedores sobre el
suelo y más gruesa granulometría del suelo). Aunque Trametes versicolor hace pera que no esté
aprobado para ser el buen candidato para este estudio, no podemos afirmar si su presencia puede haber
favorecido o disuadido el establecimiento de otros hongos, ya que no es la colonización secuencial de
hábitats leñosas en los sistemas naturales (Rajala et al., 2012). Tal vez Pleurotus ostreatus u otros
hongos más adecuado para las condiciones del suelo densos habrían sido una alternativa
mejor. La presencia espontánea de cuerpos fructíferos la psathyrellaceae' en las células de tratamiento
ECOS es digno de mención, y tal vez vinculado a la ción adiciones de las astillas de madera no
esterilizadas. Por lo que sabemos, Psathyrella spp. Nunca se han utilizado ni considerado en los estudios
mycoremediation. Nuestro experimento aporta nuevas pruebas de que Psathyrella spp. puede crecer en
suelos altamente contaminados con hidrocarburos de petróleo, aunque su eficiencia fi- ef para la
degradación de hidrocarburos de petróleo que queda por strated demostrado. Aunque sus cuerpos
fructíferos son pequeñas (≈2 cm de altura), otros hongos pequeñas han demostrado la capacidad de
acumular metales de interés (Cu, Cd, Pb, Zn concomitantemente) hasta 10 veces la concentración del
suelo (Damodaran et al., 2013). Poco se sabe acerca de tales Agaricomycetes que crecen en
sitios contaminados del norte y otros experimentos con- Sidering se necesitan hongos
indígena en la biorremediación. Esta nueva informa- ción aporta una nueva familia clima frío,
tolerante a altos niveles de metales y PCH, a la floración campo de mycoremediation.

4.6. Oligoelementos

elementos traza (TE) se midieron las concentraciones en el suelo en el inicio del experimento para obtener
concentraciones basales. TEs no puede degradarse y el revestimiento impermeable en la parte inferior de
nuestras células de tratamiento significaba que no podían ser lixiviados. En el último período de muestreo
del estudio, las concentraciones de TE en Salix spp. Se midieron las hojas para determinar si había habido
translocación desde el suelo, y si representan una amenaza para la vida silvestre local. Los 19 TE hemos
examinado en los tejidos vegetales rara vez son volátiles.
 Aunque se requieren numerosas iones TE para las necesidades metabólicas básicas de
plantas y microorganismos del suelo, las altas concentraciones de iones esenciales y no
esenciales puede ser perjudicial para procesos bióticos (Nordberg et al., 2007). El sistema de
raíces es el punto principal para su entrada y se acumulen tapones en los brotes se
controla en gran medida por la actividad de la raíz y estrategias, así como la
presencia bacteriana y la translocación aunque micelios de hongos simbiótica tales
como hongos micorrícicos y endófitos (Hrynkiewicz et al., 2018). La información sobre la
distribución de TE a través de los sistemas de raíces es deficiente (Vondráčková et al., 2017),
Pero los diferentes sistemas de raíces descubiertas entre las dos especies de Salix en este
proyecto pueden estar relacionados con los patrones de acumulación diferentes TE de las
plantas. Salix spp. se sabe que se acumulan iones TE (Roy et al., 2005) Y se inter esting tomar
nota de las concentraciones de Cu, Cd y Zn se encuentran en nuestras hojas estaban dentro
de los intervalos que han encontrado los Pugh et al. (2002)para Salix nativo (spp. fi no especi ed)
en general sitio de la mina Yukon (Faro), un entorno notablemente diferente. la movilidad TE puede
influir en su absorción por las plantas. Elementos de movilidad Lower- tales como Pb se almacenan
generalmente en las raíces y no se EF- cazmente trasladadas a la biomasa aérea, (Verbruggen y
Hermans, 2013; Vondráčková et al., 2017), Como se observó en nuestro sam- ples. Desde un
punto de vista de gestión, si las plantas acumulan suficientes TEs, pueden entonces ser
cosechadas y manipulados adecuadamente (por cineration in- controlada por ejemplo) para
eliminar gradualmente estos iones desde el sitio y menor toxicidad en el tiempo (Vanek et al.,
2010).

4.7. El riesgo para los herbívoros locales

Debido Salix spp. puede actuar como acumuladores de ciertos TEs en sus hojas y brotes, pueden actuar
como vectores de contaminantes a otros sistemas ological bi-, que puede causar efectos adversos en
laciones animales pobla- locales (Pugh et al., 2002). En este estudio, debido a que estaban
presentes en altas concentraciones en las hojas, los metales de interés Cr y Zn eran los más
propensos a causar riesgos inaceptables para los herbívoros locales que utilizan Salix spp.
como forraje (alces y liebre). Errar por el lado de la precaución, los peores escenarios se
consideran a menudo cuando se realiza una evaluación de riesgos. En primer lugar, se utilizó
concentraciones totales de TEs en lugar de las fracciones biodisponibles (que no se midieron),
que pueden inflar los riesgos. En segundo lugar, los TRVs utilizados en nuestros cálculos
implican los receptores herbívoros deben consumir el Salix spp contaminada. deja todos los
días durante el resto de sus vidas, y que las hojas deben constantemente compensar el 11 y
el 21% de su dieta diaria (liebre y alces, respectivamente) (Seccombe-Hett y Turkington, 2008;
Welch et al., 2015). Relativamente pocos estudios han medido los efec- tos
toxicológicas de Cr sobre la vida silvestre o de granja en experimentos controlados
(CCME,

1999). Ni valores agudos ni crónicos para Cr mostraron una HQ N 1, por lo tanto, se dedujo
que la probabilidad de Cr en que el riesgo es bajo. Nuestra riesgo Assessment indicó que los
valores HQ crónicas de Zn en tanto Salix spp. por liebre ser superior a 1, lo que implica la
probabilidad de riesgo podría ser inaceptable y una evaluación adicional puede ser requerido
para un proyecto de mayor escala. Es poco probable que la fauna estaría expuesto a
contaminar el follaje nados de remediación in situ sobre una base diaria para el resto de sus
vidas, pero la mejora de nuestros valores TRV para la fauna, tanto para Zn y Cr sería útil para
estimar el riesgo. Desde herbívoros también navegar por los brotes, que pueden componer
el 62% de la masa vegetal (Courchesne et al.,

2017), La investigación futura también debe examinar su contenido TE.

4.8. Disminución de la toxicidad del suelo con el “microsistema ecológico”

Evaluación de la toxicidad del suelo es importante porque incluso una vez inants contami- están por debajo de las
directrices ambientales, aún pueden ser problemáticas para la vida vegetal y animal. Esto es especialmente cierto cuando
varios Nants minantes están presentes de forma concomitante, ya que pueden tener aditivos acciones toxicológicos
(Millward et al., 2004) Y las predicciones de toxicidad basadas únicamente en estudios de
laboratorio anteriores compilados rara vez son realistas (Chapman,

2007). Además, las concentraciones de contaminantes por sí solos no proporcionan datos

biodisponibilidad, que es fundamental en la determinación si un contaminante será
inmovilizado a la matriz del suelo, o fácilmente disponible para microbiana y absorción de la
planta. valores de pH más bajos aumentarán la solubilidad de algunos TEs (a saber, Cu, Cd,
Pb, Zn), mientras que un pH cercano al neutro conducirá a su más alta de adsorción y
reducción de la disponibilidad (Brady y Weil, 1996b). La materia orgánica en el suelo aumenta
la retención de TE mediante el aumento de la capacidad de cambio de cationes ex (CEC) y a
través de la formación de gands li- organometálicos (Antoniadis et al., 2017). La materia orgánica
se añadió a la tierra ECOS y su pH fue significativamente más alta que la UNTRD (pb 0,05),
po- reducir cialmente biodisponibilidad de contaminantes. Esto es por qué, después de medi-
suring la disminución de contaminantes orgánicos y translocación de algunos TEs en las
plantas, se evaluó el potencial tóxico del suelo. El suelo UNTRD todavía tenía efectos
perjudiciales evidentes tanto en la planta y el gusano de la salud y la vivencia sur-, a pesar
del hecho de que Eisenia sp. pueden vivir y reproducirse en el suelo contaminado en la APS
(Martinkosky et al., 2017). Los resultados longitud de la planta son dignos de mención,
porque mientras LIMPIEZA C no contiene ningún crecimiento conocidos in- hibitors también
no tiene nutrientes añadidos. El hecho de que ECOS superó su rendimiento en longitudes de
plantas y fue similar a él en términos de biomasa, son buenos indicadores de que la toxicidad
general del suelo ECOS se ha reducido considerablemente en comparación con UNTRD. Por
otra parte, incluso ECOS contiene suficientes nutrientes para apoyar el crecimiento activo, si
tiene éxito establecimiento inicial, tal como se observó en el campo con los bolsillos “Vida”.
En general, nuestro enfoque “Ecological Microsystem” condujo a una reduc- ción de la
toxicidad del suelo a las plantas y animales del suelo, así como la promoción de revegetación
espontánea por especies vecinas, que pueden conducir el camino al aumento TE
fitoextracción y la degradación de contaminantes orgánicos.

5. Resumen y conclusiones

En este estudio se evaluó el desempeño concertada de sauces locales, hongos y compost municipal
(ECOS) para la remediación de un pozo de petróleo del suelo los residuos contaminados con ambas TES
y niveles extremadamente altos de atención primaria de salud, en un clima sub ártico. Aunque la mayoría
de las fracciones se mantienen por encima de las directrices CCME-I, el enfoque ECOS dado excelentes
resultados. Dentro de cinco años la estructura del suelo era claramente modificada, y se midió
considerable de eliminación de contaminantes Ganic o-, a pesar de la interferencia potencial por la
presencia de TEs. Las dos especies de Salix utilizados han mostrado tasas de supervivencia satisfactorios
(especialmente S. planifolia) y los patrones de acumulación TE exhibido dife- rentes, así como diferentes
estrategias de enraizamiento. Al- aunque el HQ liebre calculado para toxicidad Zn crónica fue N1, la
probabilidad de estos animales que complementa la totalidad de sus necesidades dietéticas de Salix spp.
Únicamente en este pequeño sitio, no está demostrada. Sin embargo, en el caso de una operación de
ampliación, las consideraciones deben incluir medidas de precaución para minimizar la fauna
acceder al sitio. Establecimos los bolsillos “Vida” que desarrollan son una buena estrategia
para la implementación temprana planta que conduce a la colonización a largo plazo de la
tierra a cielo aceite de desecho altamente contaminados. Aumento de la planta natural
colonización ción en comparación con el control (UNTRD), así como ensayos en lings y
lombrices de tierra cebada seed-, confirmó la toxicidad del suelo había sido fi cativamente
signi reduce. Este sitio se ha mantenido altamente contaminada por más de 40 años, y en
menos de cinco años hemos alcanzado excelentes resultados APS radation deg- la vez que
fomenta la revegetación. El uso del enfoque de “Microsystem ecológica” para tratar el
volumen sustancial de suelo restante ing en el pozo de aceite de desecho sería un buen
primer paso para la eliminación minantes orgánicos Nants. Seguir trabajando en este sitio
debe centrarse en el aumento de la biomasa vegetal y en la fitoextracción de TE. La presencia
de un sp Psathyrella. hongo indica que puede haber hongos más al norte a considerar en
futuras empresas de biorremediación. Pocos proyectos de clima frío han abordado estos
sitios fuertemente contaminados y mezclado. El alta en la APS remediación e fi ciencia de
este enfoque abre la puerta a más basada localmente y métodos de biorremediación libre de
fertilizantes en climas subárticas.

Expresiones de gratitud

A nivel de la comunidad, este proyecto trabajó en estrecha colaboración con el Centro de

Investigación del Yukón (particularmente Stephen Mooney), la ciudad de Whitehorse (Wayne Tuck y Dan
Jordan), y Boreales compost Enterprises Ltd. (Garret Gillespie). botánico local Bruce Bennett gene-
ormente ayudó en la identificación de la especie Salix locales. Este pro yecto integrado más de dos
docenas de estudiantes locales en el trabajo de campo, con especial participación de Kira Beukeboom,
Robert McPhee, Da- vid Silas, Isobel Ness, Corey Theoret y la gente de Y2C2. Nos gustaría reconocer y
agradecer a Nicolas Gruyer que contribuyó fuertemente a la faceta bioensayo de este proyecto. Gracias
a todos, sus generosas contribu- ciones y el apoyo continuo que hicieron que este proyecto vienen a la
vida.

La financiación y la declaración de interés

Este proyecto fue financiado a través de CRSNG College y Comunidad Innovación (CCI) conceder a S.
Mooney (clima frío Innovación, YRC); un CRSNG CREAR mina de beca conocimiento para KR; CRSNG
descu- ery subvención a MA, Suplemento CRSNG del Norte y Canadá Cátedras de Investigación
subvenciones a MA; el Programa de Formación Cientí fi co Norte a Kr, y contribuciones en especie de
compost boreal Enterprises Ltd. y la ciudad de Whitehorse, que también proporciona espacio de la tierra.

Contribuciones de autor

Los experimentos diseñados y aportó su experiencia en el diseño: KR, MA, ML, MH, KS.
Realizado los experimentos: KR, JC (hoja TE). Los datos fueron analizados por KR. Escribió el
documento: KR, MA. Todos los autores han editado y dado el visto bueno a la versión final del
manuscrito.
 Apéndice A. Los datos complementarios

Los datos complementarios a este artículo se pueden encontrar en línea en https: // doi. org / 10.1016 /
j.scitotenv.2019.03.447.

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