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ISSN 0123-7799
Vol. 20, No. 38, pp. 85-96
Enero -junio de 2017
Resumen
La producción sostenible de biorrefinerías a partir de microalgas presenta varias
complicaciones técnicas a diferentes niveles, entre los que se encuentra la maximización de
la productividad de bloques energéticos, como carbohidratos y lípidos, que sean materia
prima para biodiesel y bioetanol. Una alternativa para aumentar la productividad de
bloques energéticos es el uso de cultivos alternativos a los medios químicos tradicionales, los
cuales se han basado en fuentes de carbono, fosforo, nitrógeno y microelementos. Este
trabajo presenta el diseño de dos medios de cultivo mixotrófico con diferentes fuentes de
carbono, nitrógeno y fósforo, a fin de evaluar la producción de carbohidratos y lípidos a
partir de Chlorella vulgaris. Los medios de cultivo se diseñaron a diferentes concentraciones
de nitrato de sodio, fosfato de potasio y acetato de sodio/carbonato de amonio como fuente de
carbono. Además, se realizaron diagramas de Pareto y Superficies de Respuesta utilizando
el software estadístico STATISTICA 7.0, a fin de conocer la influencia significativa de las
variables de estudio sobre la producción de metabolitos. Los resultados mostraron que la
concentración de los nutrientes en los cultivos mixotroficos afecta la producción de
metabolitos, para el caso de la obtención de carbohidratos, el acetato, el carbonato y el
fosfato ejercieron un efecto positivo en su producción. Para la producción de lípidos, cuando
el medio de cultivo contenía acetato, no se presentó variable alguna que influyera
significativamente, mientras que, para el cultivo con carbonato de amonio, el nitrato y las
interacciones carbonato-fosfato, nitrato-fosfato ejercieron una influencia significativa en la
producción de este metabolito.
Palabras clave
Cultivos mixotróficos, chlorella vulgaris, nutrientes, carbohidratos, lípidos.
Abstract
Sustainable production of microalgae biorefineries presents several technical bottlenecks
in different levels, including maximization of productivity of energy blocks as carbohydrates
and lipids, which can be used as feedstocks for biodiesel and bioethanol production. An
alternative for increasing productivity of energy blocks is the use of alternative crops to
traditional chemical media, which are based on carbon, phosphorus, nitrogen sources and
microelements. This work presents the design of two mixotrophic crops were designed at
different concentrations of carbon, nitrogen and phosphate sources with the aim of
evaluating the carbohydrates and lipids production from Chlorella vulgaris. The culture
media were designed at different concentrations of sodium nitrate, potassium phosphate
and sodium acetate / ammonium carbonate as carbon source. In addition, Pareto charts and
Response Surface were performed using the statistical software STATISTICA 7.0, in order
to know the significant influence of study variables on metabolites production. Results
showed that the concentration of nutrients in the mixotrophic cultures affect the production
of metabolites, for the case of carbohydrates production, acetate, carbonate and phosphate
had a positive effect on it. Regarding lipids production, when the culture media contained
acetate, there was not any variable that influenced significantly, whereas for the cultivation
with ammonium carbonate, nitrate and interactions carbonate-phosphate, nitrate-
phosphate had a significant influence on production of this metabolite.
Keywords
Mixotrophic cultures, chlorella vulgaris, nutrients, carbohydrates, lipids.
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Obtención de lípidos y carbohidratos a partir de microalgas mediante el diseño de medios de cultivo selectivos
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Obtención de lípidos y carbohidratos a partir de microalgas mediante el diseño de medios de cultivo selectivos
Tabla 1. Composición del medio de cultivo Bold Basal Fuente: Autores modificado [13]
NaNO3 -3
2,94x10
MgSO4.7H2O -4
3,04x10
-4
NaCl 4,28x10
Macronutrientes
K2HPO4 -4
4,31x10
KH2PO4 -3
1,29x10
CaCl2.2H2O -4
1,70x10
-4
EDTA 1,71x10
Solución Alcalina EDTA
-4
KOH 5,53x10
FeSO4.7H2O
5
Solución acidificada de Hierro 1,79x10
H2SO4
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Obtención de lípidos y carbohidratos a partir de microalgas mediante el diseño de medios de cultivo selectivos
Tabla 3. Diseño experimental para el medio de cultivo con acetato de sodio, nitrato de sodio
y fosfato de potasio. Fuente: Autores.
Número de tratamiento Acetato de sodio, mM Nitrato sodio, mM Fosfato de potasio, mM Relación C/N/P
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Obtención de lípidos y carbohidratos a partir de microalgas mediante el diseño de medios de cultivo selectivos
100
90
80
70
60
% p/p
50
40
30
20
10
Tratamiento
Fig. 1. Concentración de carbohidratos totales empleando acetato de sodio y carbonato de amonio
después de 15 días. Fuente: Autores.
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Obtención de lípidos y carbohidratos a partir de microalgas mediante el diseño de medios de cultivo selectivos
(a)
(b)
Fig. 2. Diagrama de Pareto para la producción de carbohidratos con a) acetato de sodio y
b) carbonato de potasio como fuente de carbono. Fuente: Autores.
celulares esenciales, por lo que una parte de lípidos (0,0081 g/L) correspondiente al
del contenido de dióxido de carbono se 0,34% de la biomasa. Por otra parte, se
convierte en lípidos y carbohidratos [20], observa que los tratamientos T1 y T13 con
en un estudio previo desarrollado por los carbonato de amonio permitieron obtener
autores se muestra que para el desarrollo los mayores contenidos de concentración de
de una biorefinería basada en microalgas lípidos (0,0041 g/L y 0,0031 g/L, respecti-
atendiendo una composición mínima ren- vamente). El bajo porcentaje obtenido para
table bajo los parámetros establecidos el ambos casos (0,28 y 0,3%) el cual no es
contenido de carbohidratos para la produc- superior al obtenido en el cultivo sin modi-
ción de la fracción bioetanol debe ser tan ficar (10% p/p para el control) es atribuido
alta como sea posible y complementada con a las condiciones del medio de cultivo (dos
la obtención de algún producto de valor fuentes de nitrógeno, carbonato de amonio
agregado como ácidos grasos poliinsatura- y nitrato de sodio) y a la forma en que la
dos en una relación mínima de 1 microalga se adapta a las condiciones de
(PUFAs):27,4 (bioetanol) [21].] cultivo. El porcentaje de lípidos obtenido
en este trabajo es bajo comparado con el
3.2 Producción de lípidos obtenido por Porras & Prada, (2012) [22]
(21%) en un medio de cultivo Bold Basal
En la Tabla 5 se observa que con el tra- modificado con nitrato de sodio y acetato de
tamiento T13 para el cultivo con acetato de sodio.
sodio, se alcanzó la máxima concentración
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0,9
0,8
0,7
Concentración %p/p
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
Tratamiento
Fig. 3. Concentración de lípidos totales empleando acetato de sodio y carbonato de amonio después de 15 días.
Fuente: Autores.
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Obtención de lípidos y carbohidratos a partir de microalgas mediante el diseño de medios de cultivo selectivos
(a)
(b)
Fig. 4. Diagrama de Pareto para la producción de lípidos con a) acetato de sodio y
b) carbonato de potasio como fuente de carbono. Fuente: Autores.
Por otra parte, para el medio de cultivo con mM acetato, 0,32 mM nitrato y 1,15 mM
acetato, el mayor porcentaje de carbohidra- fosfato, mientras que 3,22 mM de carbona-
tos equivalente 73% de la biomasa se obtu- to, 2,94 mM de nitrato y 1,71 mM de fosfa-
vo el día 15 de cultivo con un tratamiento to permitieron obtener 0,3% de lípidos,
de 20 mM acetato, 1,96 mM nitrato y 1,15 dado el bajo contenido de lípidos en compa-
mM fosfato, y para el cultivo con carbonato ración con el de carbohidratos, el aprove-
de amonio, se obtuvo 66% de carbohidratos chamiento de esta biomasa debe estar
a concentraciones de 1,074 mM de carbona- orientada a las vías térmicas y de trans-
to de amonio, 0,98 mM de nitrato y 1,721 formación de carbohidratos, y la vía lípidos
mM de fosfato. Finalmente, se alcanzó una se debe reservar a la presencia de ácidos
concentración de lípidos del 0,34% con 20 grasos valiosos.
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Obtención de lípidos y carbohidratos a partir de microalgas mediante el diseño de medios de cultivo selectivos
[20] J. Fábregas, J. Abalde, and C. Herrero, Rodríguez, “Efecto del tiempo de cultivo en la
“Biochemical composition and growth of the productividad de metabolitos de valor
marine microalga Dunaliella tertiolecta agregado en Chlorella vulgaris UTEX 1803,”
(Butcher) with different ammonium nitrogen Universidad Industrial de Santander, 2012.
concentrations as chloride, sulphate, nitrate [23] Á. D. G.-D. V. Kafarov, M. El Halwagi,
and carbonate,” Aquaculture, vol. 83, no. 3–4, “Development of a topology of microalgae-
pp. 289–304, Dec. 1989. based biorefinery: process synthesis and
[21] V. K. A. Y. Pinzón, Á. D. González-Delgado, optimization using a combined forward–
“Optimization of microalgae composition for backward screening and superstructure
development of a topology of biorefinery approach,” Clean Technol. Environ. Policy,
based on profitability analysis,” Chem. Eng. vol. 17, no. 8, pp. 2213–2228, 2015.
Trans., vol. 37, pp. 457–462, 20014. .
[22] L. T. Porras Cárdenas and C. E. Prada
[96] Tecno Lógicas, ISSN 0123-7799, Vol. 20, No. 38, enero-junio de 2017, pp. 85-96