HISTOPATOLOGÍA

ANGELA JOHANA ANGULO RODELO

ANGELA MARIANA CARRILLO OROZCO

ANGELI SUAREZ RODRIGUEZ

CAMILA SANTOS MONTAÑEZ

LAURA KATHERINE GAONA FERNANDEZ

LUZ ELENA RESTREPO VÉLEZ

MASHIEL DIYERI SUAREZ BOLAÑO

NAFER ANDREY GUILLIN BALDIÓ

ROXANA VALENTINA PALACIO RUIZ

VALENTINA PALMEZANO MIRANDA

RENE JAVIER SANCHEZ PRADA

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA

PROGRAMA DE PREMEDICO

GRUPO B

PAMPLONA

2019
 HISTOLOGÍA E HISTOPATOLOGÍA

También microanatomía, es la rama de la biología que estudia

los tejidos de animales y plantas mediante microscopía. Comúnmente se estudia con

un microscopio de luz o microscopio electrónico , ya que la muestra

se seccionó , tiñó y montó en un portaobjetos . Se pueden realizar estudios histológicos

utilizando cultivo de tejidos., donde las células de animales vivos se aíslan y se mantienen en un

entorno artificial para diversos proyectos de investigación. La capacidad de visualizar o

identificar de manera diferencial las estructuras microscópicas se mejora frecuentemente

mediante el uso de tinción . La histología es uno de los principales sujetos preclínicos en la

escuela de medicina . Se espera que los estudiantes de medicina estén familiarizados con las

características morfológicas y la función de todas las células y tejidos del cuerpo humano desde

una etapa temprana de sus estudios, por lo que la histología a menudo se extiende a lo largo de

varios semestres.

La histopatología , el estudio microscópico de tejido enfermo, es una herramienta importante

en patología anatómica, ya que el diagnóstico preciso de cáncer y otras enfermedades

generalmente requiere un examen histopatológico de las muestras. Los médicos

capacitados, patólogos con frecuencia con licencia, son el personal que realiza el examen

histopatológico y proporciona información de diagnóstico basada en sus observaciones. El

personal capacitado que prepara las muestras histológicas para el examen son histotécnicos,

histotecnólogos, técnicos en histología (HT), tecnólogos en histología (HTL),

científicos médicos, técnicos de laboratorios médicos o científicos biomédicos., y sus

trabajadores de apoyo. Su campo de estudio se llama histotecnología.

 HISTORIA

En el siglo XVII, el italiano Marcello Malpighi inventó uno de los primeros microscopios

para estudiar pequeñas entidades biológicas. Malpighi analizó varias partes de los órganos de los

murciélagos, ranas y otros animales bajo el microscopio. Malpighi, mientras estudiaba la

estructura del pulmón, notó sus alvéolos membranosos y las conexiones de pelo entre venas y

arterias, a las que llamó capilares. Su descubrimiento estableció cómo el oxígeno inhalado, entra

en el torrente sanguíneo y sirve al cuerpo.

En el siglo XIX, la histología era una disciplina académica por derecho propio. El anatomista

francés Bichat introdujo el concepto de tejido en anatomía en 1801, y el término "histología"

apareció por primera vez en un libro de Karl Meyer en 1819.

Bichat describió veintiún tejidos humanos, que pueden ser incluidos en las cuatro categorías

actualmente aceptadas por los histólogos. El uso de ilustraciones en histología, considerado

inútil por Bichat, fue promovido por Jean Cruveilhier .

Durante el siglo XIX, muchas técnicas de fijación fueron desarrolladas por Adolph Hannover

(soluciones de cromatos y ácido crómico ), Franz Schulze y Max Schultze ( ácido

ósmico ), Alexander Butlerov ( formaldehído ) y Benedikt Stilling ( congelación ). A principios

de 1830, Purkynĕ inventó un micrótomo con alta precisión.

Las técnicas de montaje fueron desarrolladas por Rudolf Heidenhain ( goma

arábiga ), Salomon Stricker (mezcla de cera y aceite), Andrew Pritchard (goma e isinglass )
y Edwin Klebs ( bálsamo de Canadá ). El laboratorio de Koelliker desarrolló la tinción

con hematoxilina y, en la década de 1870, Vysockij introdujo la eosina como tinción doble o

opuesta.

El Premio Nobel de Fisiología o Medicina de 1906 fue otorgado a los histólogos Camillo

Golgi y Santiago Ramón y Cajal . Tenían interpretaciones conflictivas de la estructura neural del

cerebro basadas en diferentes interpretaciones de las mismas imágenes. Cajal ganó el premio por

su teoría correcta y Golgi por la técnica de tinción de plata que inventó para hacerlo posible.

HISTOPATILOGÍA

(compuesto de tres palabras griegas : ἱστός histos "tejido", πάθος pathos "sufrimiento", y -

λογία -logia"estudio de") se refiere al examen microscópico del tejido para estudiar las

manifestaciones de la enfermedad . Específicamente, en medicina clínica, histopatología se

refiere al examen de una biopsia o de una muestra quirúrgica por un patólogo , después de que la

muestra haya sido procesada y se hayan colocado secciones histológicas en portaobjetos de

vidrio. Por el contrario, la citopatología. Examina (1) células libres o (2) micro-fragmentos de

tejido (como "bloques de células").

TIPOS DE TEJIDO

Hay cuatro tipos básicos de tejidos animales: tejido muscular , tejido nervioso , tejido

conjuntivo y tejido epitelial . Todos los tipos de tejidos son subtipos de estos cuatro tipos de

tejidos básicos (por ejemplo, la sangre se clasifica como tejido conectivo, ya que las células de la

sangre están suspendidas en una matriz extracelular, el plasma).

  Epitelio : el revestimiento de las glándulas, el intestino, la piel y algunos órganos

como el hígado, los pulmones y los riñones.

 Endotelio : el revestimiento de la sangre y los vasos linfáticos.

 Mesotelio : el revestimiento de los espacios pleurales y pericárdicos

 Mesénquima : las células que llenan los espacios entre los órganos, incluidas las

células de grasa, músculo, hueso, cartílago y tendón

 Células sanguíneas : los glóbulos rojos y blancos, incluidos los que se encuentran

en los ganglios linfáticos y el bazo

 Neuronas : cualquiera de las células conductoras del sistema nervioso.

 Células germinales : células reproductivas ( espermatozoides en

hombres, ovocitos en mujeres)

 Placenta : un órgano característico de los mamíferos verdaderos durante el

embarazo, que se une a la madre y la descendencia, proporcionando secreción endocrina e

intercambio selectivo de sustancias solubles en la sangre, pero no en partículas, a través de

una aposición de partes vascularizadas uterinas y trofoblásticas.

 Células madre : células con la capacidad de desarrollarse en diferentes tipos de

células.

Los tejidos de plantas, hongos y microorganismos también pueden examinarse

histológicamente. Su estructura es muy diferente de los tejidos animales. Para las plantas, el

estudio de sus tejidos se conoce más comúnmente como anatomía de las plantas , con los

siguientes tipos principales:

 Tejido dérmico

 Tejido vascular
  Tejido de tierra

 Tejido meristemático

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Fijación

Fijación química con formaldehído u otros productos químicos

Los fijadores químicos se utilizan para preservar el tejido de la degradación y para mantener

la estructura de la célula y de los componentes subcelulares, como los orgánulos celulares (por

ejemplo, el núcleo, el retículo endoplásmico , las mitocondrias). El fijador más común para la

microscopía óptica es el 10% de formalina tamponada neutra (4% de formaldehído en solución

salina tamponada con fosfato ). Para la microscopía electrónica, el fijador más comúnmente

usado es el glutaraldehído , generalmente como una solución al 2.5% en solución salina

tamponada con fosfato . Estos fijadores conservan los tejidos o las células, principalmente

mediante la reticulación irreversible de proteínas. La acción principal de estos fijadores de

aldehído es reticular grupos amino en proteínas a través de la formación

de puentes de metileno.(-CH 2 -), en el caso de formaldehído, o por enlaces cruzados C 5 H 10 en

el caso de glutaraldehído. Este proceso, al tiempo que preserva la integridad estructural de las

células y los tejidos, puede dañar la funcionalidad biológica de las proteínas, particularmente

las enzimas , y también puede desnaturalizarlas en cierta medida. Esto puede ser perjudicial para

ciertas técnicas histológicas. A menudo se usan otros fijadores para microscopía electrónica,

como tetróxido de osmio o acetato de uranilo .

 La fijación de formalina conduce a la degradación del ARN m, mi ARN y ADN, así como a la

desnaturalización y modificación de proteínas en los tejidos. Sin embargo, la extracción y el

análisis de ácidos nucleicos y proteínas de tejidos fijados con formalina e incluidos en parafina

es posible utilizando los protocolos apropiados.

La sección de fijación congelada

El procedimiento de sección congelada es una forma rápida de arreglar y montar secciones de

histología usando un dispositivo de refrigeración llamado criostato . A menudo se usa después de

la extirpación quirúrgica de los tumores para permitir una rápida determinación del margen (que

el tumor se ha eliminado completamente).

Procesamiento: deshidratación, limpieza e infiltración

El objetivo del procesamiento de tejidos es eliminar el agua de los tejidos y reemplazarla con

un medio que se solidifique para permitir que se puedan cortar secciones delgadas. El tejido

biológico debe apoyarse en una matriz dura para permitir el corte de secciones lo suficientemente

finas, generalmente de 5 μm (micrómetros; 1000 micrómetros = 1 mm) de grosor para

microscopía óptica y de 80 a 100 nm (nanómetro; 1, 000,000 nanómetros = 1 mm) de grosor para

microscopio de electrones. Para microscopía de luz, la cera de parafina es la más utilizada. Dado

que es inmiscible con el agua, el principal constituyente del tejido biológico, el agua debe

eliminarse primero en el proceso de deshidratación. Las muestras se transfieren a través de baños

de etanol cada vez más concentrado para eliminar el agua. A esto le sigue un agente de limpieza

hidrofóbico (como el xileno).) para eliminar el alcohol, y finalmente la cera de parafina fundida,

el agente de infiltración, que reemplaza al xileno. La cera de parafina no proporciona una matriz
suficientemente dura para cortar secciones muy delgadas para microscopía electrónica. En su

lugar, se utilizan resinas. Las resinas epoxi son los medios de inclusión más comúnmente

empleados, pero también se usan resinas acrílicas, particularmente cuando se

requiere inmunohistoquímica . Las secciones más gruesas (0,35 μm a 5 μm) de tejido incrustado

con resina también se pueden cortar para microscopía óptica. Nuevamente, la inmiscibilidad de

la mayoría de las resinas epoxi y acrílicas con agua requiere el uso de deshidratación,

generalmente con etanol.

Incrustar

Una vez que los tejidos se han deshidratado, limpiado e infiltrado con el material de inserción,

están listos para la inserción externa. Durante este proceso, las muestras de tejido se colocan en

moldes junto con material de inclusión líquido (como agar, gelatina o cera) que luego se

endurece. Esto se logra enfriando en el caso de la cera de parafina y calentando (curando) en el

caso de las resinas epoxi. Las resinas acrílicas se polimerizan por calor, luz ultravioleta o

catalizadores químicos. Los bloques endurecidos que contienen las muestras de tejido están listos

para ser seccionados.

Debido a que los tejidos fijados con formalina e incluidos en parafina (FFPE) pueden

almacenarse indefinidamente a temperatura ambiente, y los ácidos nucleicos (ADN y ARN)

pueden recuperarse de ellos décadas después de la fijación, los tejidos de FFPE son un recurso

importante para los estudios históricos en medicina.

 La incrustación también se puede lograr utilizando tejido no fijo congelado en un medio a

base de agua. Los tejidos pre-congelados se colocan en moldes con el material de inclusión

líquido, generalmente un glicol a base de agua, OCT, TBS, Cryogel o resina, que luego se

congela para formar bloques endurecidos.

Seccionar

Para microscopía óptica, se utiliza una cuchilla de acero montada en un microtomo para

cortar secciones de tejido gruesas de 4 micras que se montan en un portaobjetos de microscopio

de vidrio. Para la microscopía electrónica de transmisión, se utiliza un cuchillo de diamante

montado en un ultramicrotomo para cortar secciones de tejido gruesas de 50 nanómetros que se

montan en una rejilla de cobre de 3 milímetros de diámetro. A continuación, las secciones

montadas se tratan con la mancha adecuada.

Las secciones se pueden cortar a través del tejido en varias direcciones. Para la evaluación

patológica de los tejidos, el método habitual es el corte vertical (corte perpendicular a la

superficie del tejido para producir una sección transversal). La sección horizontal (también

conocida como transversal o longitudinal), cortada a lo largo del eje largo del tejido, se usa a

menudo en la evaluación de los folículos pilosos y las unidades pilosebáceas. La sección

tangencial a la horizontal se utiliza en la cirugía de Mohs y en los métodos de CCPDMA .

Criosección

El tejido fijo o no fijado se puede congelar y cortar en rodajas utilizando un microtomo

montado en un dispositivo de refrigeración conocido como criostato. Las secciones congeladas

se montan en un portaobjetos de vidrio y pueden teñirse para mejorar el contraste entre los

diferentes tejidos. Las secciones congeladas sin fijar también se pueden usar para estudios que

requieren la localización de enzimas en tejidos y células. Es necesario reparar el tejido para

ciertos procedimientos, como la tinción de inmunofluorescencialigada a anticuerpos. La sección

congelada también se puede usar para determinar si un tumor es maligno cuando se encuentra

incidentalmente durante la cirugía en un paciente.

Tinción

El tejido biológico tiene poco contraste inherente, ya sea en el microscopio óptico o

electrónico. La tinción se emplea tanto para contrastar el tejido como para resaltar las

características particulares de interés. Cuando se comprende la química mecánica subyacente de

la tinción, se utiliza el término histoquímica . La hematoxilina y la eosina ( tinción H&E ) es la

tinción microscópica de luz más utilizada en histología e histopatología. La hematoxilina,

un colorante básico , tiñe los núcleos de color azul debido a una afinidad con los ácidos nucleicos

en el núcleo celular; La eosina, un colorante ácido , tiñe de rosa el citoplasma . Acetato de

uranilo y el citrato de plomo se usan comúnmente para impartir contraste al tejido en el

microscopio electrónico.

Existen muchas otras técnicas de tinción que se han utilizado para teñir selectivamente células

y componentes celulares. Una de estas técnicas consiste en marcar tumores periféricos o

márgenes quirúrgicos, en los que se aplica un cierto color de tinte al borde posterior de una

muestra, otro al anterior, etc., para poder identificar la ubicación de un tumor u otra patología

dentro de un espécimen. Otros compuestos utilizados para colorear secciones de tejidos

incluyen safranina , rojo de aceite , rojo de Congo , FCF verde rápido , sales de plata y

numerosos tintes naturales y artificiales que generalmente se originaron en el desarrollo de tintes

para la industria textil.

La histoquímica se refiere a la ciencia del uso de reacciones químicas entre sustancias

químicas de laboratorio y componentes dentro del tejido. Una técnica histoquímica comúnmente

realizada es la reacción del azul de Prussian de Perls , utilizada para demostrar depósitos de

hierro en enfermedades como la hemocromatosis .

Las muestras de histología a menudo han sido examinadas por técnicas

radioactivas. En historadiografía , una diapositiva (a veces teñida histoquímicamente) es

radiografiada. Más comúnmente, la autorradiografía se usa para visualizar las ubicaciones a las

que se ha transportado una sustancia radiactiva dentro del cuerpo, como las células en fase

S (que se someten a la replicación del ADN ) que incorporan timidina tritiada , o sitios a los que

se unen in situ las sondas de ácido nucleico radiomarcadas. Hibridación. Para autorradiografía a

nivel microscópico, el portaobjetos se sumerge típicamente en una emulsión líquida del tracto

nuclear, que se seca para formar la película de exposición. Los granos de plata individuales en la

película se visualizan con microscopía de campo oscuro .

Recientemente, los anticuerpos se han utilizado para visualizar específicamente proteínas,

carbohidratos y lípidos. Este proceso se llama inmunohistoquímica , o cuando la mancha es

una molécula fluorescente , la Inmunofluorescencia . Esta técnica ha aumentado

considerablemente la capacidad de identificar categorías de células bajo un microscopio. Otras

técnicas avanzadas, como la hibridación insitu no radiactiva , se pueden combinar con la

inmunoquímica para identificar moléculas específicas de ADN o ARN con sondas fluorescentes

o marcas que se pueden usar para la inmunofluorescencia y la amplificación de fluorescencia

ligada a enzimas (especialmente la amplificación de la señal de fosfatasa alcalina y

tiramida). Microscopio fluorescente y la microscopía confocal se utiliza para detectar señales

fluorescentes con buen detalle intracelular. Las cámaras digitales se utilizan cada vez más para

capturar imágenes histológicas e histopatológicas.

 BIBLIOGRAFÍA

https://pt.wikipedia.org/wiki/Histopatologia

https://es.slideshare.net/julianazapatacardona/histopatologa

https://es.wikipedia.org/wiki/Histolog%C3%ADa

https://definicion.de/patologia/

https://en.wikipedia.org/wiki/Histology

https://en.wikipedia.org/wiki/Histopathology