Practica III.

Determinación de alcohol en sangre y orina

Habilidades
Determinar la presencia de alcohol etílico en sangre y orina utilizando el método
semicuantitativo de Conway.

Fundamento
Esta basado en un sistema de micro-difusión, en la cual reacciona químicamente el
dicromato de potasio con cualquier sustancia volátil incluyendo el alcohol etílico, si
se encuentran presentes en los fluidos biológico y en material postmortem. Dicha
reacción consiste en la reducción del dicromato de potasio produciendo un cambio
en su coloración de amarillo a verde, en caso de que el alcohol etílico se encuentre
presente en la muestra analizada el cambio de coloración será evidente. La
concentración de alcohol es expresada en gramos por ciento (g%), y esta se obtiene
mediante la comparación del resultado de la muestra con una curva de calibración
previamente realizada y medida con un espectofotometro de ultravioleta-visible, a
una longitud de onda de 600 nm; la intensidad del cambio de coloración del reactivo
de amarillo a verde será directamente proporcional a la concentracion de alcohol.

Material y métodos
Equipo
 Espectofotometro de ultravioleta-visible
 Balanza analítica
 Agitador magnético
 Parrilla eléctrica

Material
 Matraz aforado de 500 ml
 Vasos de precitados de 50, 250 y 500 ml
 Pipetas volumétricas de 1, 5 y 10 ml
 Probetas graduadas de 50, 100, 250 y 500 ml
 Camara de Conway
 Pipetas pasteur
 Varillas de vidrio
 Tubos de ensayo de 13X100 mm
 Espatula
Soluciones, biológicos y reactivos
 Acido sulfúrico
 Dicromato de potasio
 Carbonato de potasio anhidro
 Alcohol etílico al 95%
 Agua destilada