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Manual Práctico

de Parasitología Veterinaria

Colección manuales uex - 69


(E.E.E.S.)

Unidad de Parasitología. Dpto. de Sanidad Animal


Fac. de Veterinaria. Universidad de Extremadura
69
PORTADA ÍNDICE ÍNDICE
PORTADA ÍNDICE
MANUAL PRÁCTICO
DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

PORTADA ÍNDICE
MANUALES UEX

69 (E.E.E.S.)
Espacio
Europeo
Educación
Superior
PORTADA ÍNDICE
FRANCISCO J. SERRANO AGUILERA (COORD.)

MANUAL PRÁCTICO
DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

2010

PORTADA ÍNDICE
MANUAL práctico de parasitología veterinaria / Francisco Javier
S­ errano Aguilera (Coord.). — Cáceres : Universidad de Extremadura, Ser-
vicio de Publicaciones, 2010
120 pp. ; 17 x 24 cm. – (Manuales UEX, ISSN 1135-870-X ; 69)
ISBN 978-84-7723-910-9
1. Parasitología veterinaria. I. Serrano Aguilera, Francisco Javier. II. Tít.
III. Universidad de Extremadura, Servicio de Publicaciones, ed.
576.89

La publicación del presente manual forma parte de las “Acciones para el Desarrollo del Espacio Europeo de
Educación Superior en la Universidad de Extremadura Curso 2008/09” en el marco de la VI Convocatoria
de Acciones para la Adaptación de la UEX al Espacio Europeo de Educación Superior (Proyectos Pilotos:
modalidad A1) del Vicerrectorado de Docencia e Integración Europea y financiada por la Junta de Extrema-
dura, el Ministerio de Educación y Ciencia y la Universidad de Extremadura.

Cualquier forma de reproducción, distribución, comunicación pública o transformación de esta obra sólo
puede ser realizada con la autorización de sus titulares, salvo excepción prevista por la ley. Diríjase a
CEDRO (Centro Español de Derechos Reprográficos, www.cedro.org) si necesita fotocopiar o escanear
algún fragmento de esta obra.

©  Los autores.
©  Universidad de Extremadura, para esta 1ª edición.

Edita:

Universidad de Extremadura. Servicio de Publicaciones


C/ Caldereros, 2 - Planta 2ª. 10071 Cáceres (España)
Tel. 927 257 041 ; Fax 927 257 046
E-mail: publicac@unex.es
http://www.unex.es/publicaciones

ISSN 1135-870-X
ISBN 978-84-7723-910-9
Depósito Legal M-16.788-2010

Impreso en España - Printed in Spain


Maquetación, fotomecánica e impresión: Dosgraphic, s.l. – 914 786 125

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AUTORES

Dr. Francisco Javier Serrano Aguilera


Dra. Eva María Frontera Carrión
Dr. Luis Carlos Gómez Nieto
Dr. Miguel Ángel Habela Martínez-Estéllez
Dr. Juan Enrique Pérez Martín
Dr. David Reina Esojo

Ldo. Rafael Calero Bernal


Dr. Jesualdo Carcelén Rodríguez
Ldo. Javier Fernández Cotrina
Ldo. José Antonio Gamito Santos
Dra. Virginia Iniesta Orozco
Ldo. Francisco Javier Pariente Palomino
Ldo. Isidro Suárez López

Técnico. Esp. Lab. Manuel Gómez Blázquez


Técnico Lab. Isabel Monroy Pérez
Técnico Lab. Victoria Baz Agudo
Técnico Lab. Pablo Pajares del Sol

MANUALES UEX

PORTADA ÍNDICE
PORTADA ÍNDICE
PRÓLOGO

La asignaturas que actualmente imparte nuestro grupo docente tienen un marcado


carácter experimental y práctico, en el que son imprescindibles la adquisición de diversas
competencias y destrezas prácticas por parte del alumno, que después deberán aplicar en su
quehacer profesional.
Sin embargo, estas competencias se basan con frecuencia en un conocimiento, que
debido a las limitaciones de tiempo, no es posible adquirir previamente a la práctica que
lo requiere. Esta dificultad, se dificultan aún más nuestra adaptación al Proceso de Bolonia,
y su filosofía tendente a primar más la adquisición de habilidades que los conocimientos
exhaustivos, lo que sin duda puede tener efectos positivos, pero también plantea retos docen-
tes importantes.
La dificultad para conjuntar conocimiento y práctica, requiere que los alumnos puedan
acceder en tiempo real y de forma efectiva, a fuentes de información que puedan que facili-
ten la adquisición de las habilidades y destrezas que en ese momento están desarrollando, y
que esta misma información le permita valorar la utilidad y alcance de la competencia que
está adquiriendo. Por ejemplo, adquirir destreza para encontrar un parásito microscópico
es difícil si no se dispone de una información básica sobre la morfología del parásito que
va a i­dentificar, y si esto es posible, será una competencia falta de interés y utilidad para el
­alumno, si carece de la información necesaria para comprender la relevancia y repercusiones
de ese diagnóstico en su practica profesional.
Una forma de proporcionar esta información adicional a las clases magistrales, cada vez
más necesaria, la ofrecen sin dudas las llamadas nuevas tecnologías, pero en entornos
como el laboratorio de prácticas, la consulta veterinaria o las prácticas de campo, no es
la mejor opción. Una guía o manual de prácticas sigue siendo una fuente de información
imprescindible e insustituible para el desarrollo de las mismas, especialmente, en asignaturas
como la Parasitología y las Enfermedades Parasitarias, que requieren un abundante material
iconográfico.
El manual está diseñado para que sea una fuente de consulta útil para los alumnos de las
dos asignaturas troncales, antes citadas, así como para la asignatura optativa de Diagnóstico
y Clínica de las Enfermedades Parasitarias, por la ventaja que supone tener la información
unificada en materias tan relacionadas, así como por la economía de medios que lleva im-
plícita. El manual se divide en tres partes principales. La primera está dedicada a la Para-
MANUALES UEX

sitología, de mayor interés para los alumnos de la asignatura del mismo nombre, donde se
describen los principales grupos taxonómicos de los parásitos y especies más representati-
vas, con así abundantes fotografías y dibujos esquemáticos que revelen sus características
morfológicas y biológicas principales. El objetivo principal de este capítulo es que el alumno
sea capaz de identificar y reconocer la morfología de los principales parásitos, así como
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F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

a­ sociarlos a unos hospedadores y vías de contagio concretos. La segunda parte, dedicada a


las Enfermedades Parasitarias, recoge especialmente la metodología de tomas de muestras
y técnicas diagnósticas que permitirán al alumno que éste sea capaz diagnosticar correcta-
mente las enfermedades parasitarias. La parte final recoge material iconográfico y anexos de
interés común para todos los alumnos.
Por último, queremos agradecer al Vicerrectorado de Calidad y Formación Continua por
su Plan de Adaptación de la UEx al Espacio Europeo de Educación Superior, que ha hecho
posible la edición de este libro.
Junio de 2009

Unidad de Parasitología
Departamento de Sanidad Animal
Facultad de Veterinaria
Universidad de Extremadura
MANUALES UEX

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ÍNDICE GENERAL
PRÓLOGO 9

ÍN
I. PARASITOLOGÍA
Reino protozoa 14
13

DI
Reino animalia 21
Phylum Plathyhelmintes 21
Phylum Nematoda 31
Phylum Arthropoda 40

CE
II. T ÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO
PARASITOLÓGICO 45
1.  Toma de muestras y envío al laboratorio 46
2.  Examen coprológico 47
3.  Examen de sangre 56
4.  Examen de tejido muscular 61
5.  Examen de piel 64
6.  Examen de vísceras 65
7.  Examen de orina y secreciones 67
8.  Realización y examen de biopsias 68
9.  Diagnóstico inmunológico 70
III. LÁMINAS DE IDENTIFICACIÓN 75

IV. LÁMINAS DE LESIONES 81

ANEXO 1. TAXONOMÍA 89

ANEXO 2. PRINCIPALES GÉNEROS PARÁSITOS


SEGÚN HOSPEDADORES
Y LOCALIZACIONES ORGÁNICAS 103

PORTADA ÍNDICE
PORTADA ÍNDICE
I. PARASITOLOGÍA

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F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Euglenozoa
Clase Kinetoplastea
Orden Trypanosomatida
Familia Trypanosomatidae
Géneros Trypanosoma y Leishmania

4
2

Amastigote 1

Epimastigote Tripomastigote
Promastigote

Morfología en Trypanosomatidae
1) Nucleo; 2) Kinetoplasto; 3) Flagelo; 4) Membrana ondulante.
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Trypanosoma brucei (tripomastigote). Leishmania infantum (amastigote).


14

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MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Myzozoa
Clase Conoidasida
Orden Eucoccidiorida
Suborden Eimeriorina
Familia Eimeriidae
Géneros Eimeria, Isospora y Cystoisospora

Opérculo Micropilo
esporocisto
Cuerpo esporozoito
de Stieda
Glóbulo gránulo polar
refractil residuo ooquístico
A residuo esporocístico B

Esporozoito Merozoito
Microgameto
MEROGONIA
GAMETOGONIA Macrogameto

Ooquiste
ESPOROGONIA

Dibujo esquemático de los oquistes de Eimeria (A) e Isospora (B) y ciclo evolutivo del género Eimeria.

MANUALES UEX

Dibujo e imagen microscópica de oquistes esporulados de Eimeria sp. y Cystoisospora sp. esporulando.
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F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Myzozoa
Clase Conoidasida
Orden Eucoccidiorida
Suborden Eimeriorina
Familia Cryptosporidiidae
Género Cryptosporidium

Infección endógena (autoinfección)

merozoitos II microgamentos
merozoitos I
esporozoito

trofozoito meronte I meronte II microgametocito macrogameto ooquiste ooquiste


esporulado

medio ambiente

Ciclo de Cryptosporidium sp.


MANUALES UEX

Ooquistes de Cryptosporidium sp. (Heine). Ooquistes de Cryptosporidium sp.


(Ziehl-Neelsen).

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MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Myzozoa
Clase Conoidasida
Orden Eucoccidiorida
Suborden Eimeriorina
Familia Sarcocystidae
Géneros Sarcocystis y Toxoplasma
Suborden Adeleorina
Familia Hepatozoidae
Géneros Hepatozoon

Hospedador definitivo

Esporocistos libres
Hospedador intermediario

Ciclo evolutivo de Sarcocystis miescheriana.

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Quiste de Sarcocystis miescheriana (corte Hepatozoon canis (gametocitos).


histológico teñido con hematoxilina-eosina).
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F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Myzozoa
Clase Aconoidasida
Orden Haemospororida
Familia Plasmodiidae
Géneros Plasmodium y Haemoproteus

11 22 33 44

55 66 77 88

Dibujo esquemático de algunas de las formas evolutivas del género Plasmodium en frotis sanguíneos:
•  Plasmodium malarie: trofozoito (1), esquizonte (2), esquizoitos y cuerpo residual dentro del eritrocito (3)
y libres (4), gametocito ♀ (5) y ♂ (6).
•  Plasmodium falciparum: gametocito ♀ (7) y ♂ (8).
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Haemoproteus columbae (gametocito). Plasmodium sp. (varias formas evolutivas).

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MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Myzozoa
Clase Aconoidasida
Orden Piroplasmorida
Superfamilia Babesioidea
Familia Babesiidae
Género Babesia

Babesia caballi (piroplasmas).

Hospedador invertebrado (garrapata)

Intestino
Gametogonia Esporogonia Musculatura
intestino Epidermis
T. Malpigi
Zigoto Esporocineto

Glándulas
Gametos Hemolinfa
salivares

Gametocitos Esporozoito

Huevo

Merogonia Larva

Merozoito
Ninfa

Adulto
MANUALES UEX

Ciclo biológico de Babesia caballi.


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F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Myzozoa
Clase Aconoidasida
Orden Piroplasmorida
Superfamilia Babesioidea
Familia Theileriidae
Género Theileria

Theileria annulata (piroplasmas).

Merogonia

linfocito

eritrocito
Glándulas
salivares
esporocineto

Esporogonia
merozoito

cigoto

intestino

Gametogonia
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Ciclo biológico de Theileria annulata.


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MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Trematoda
Clase Digenea
Género Fasciola

vo ci
in
pg
ac

ov cd

oo ut

gm h

ce vd

te vi

Fasciola hepatica. Tinción con carmín acético y dibujo esquemático:


•  Aparato de fijación: ventosa oral (vo) ventosa ventral o acetábulo (ac). Aparato digestivo: Boca (rodeada
por la vo), faringe muscular (no representada), esófago e intestinos ciegos ramificados (líneas negras).
• Aparato reproductor masculino: 2 testículos (te) ramificados, conductos eferentes (ce), conducto defe-
rente  (cd), bolsa del cirro con vesícula seminal interna y cirro rodeado de glándulas prostáticas (ci) y
poro genital (pg).
•  Aparato genital femenino: ovario (ov) ramificado, unido mediante un oviducto al ootipo (oo), rodeado de
glándulas de Mehlis (gm) al que también desembocan las glándulas vitelógenas (vi) mediante conductos
vitelógenos o viteloductos (vd) transversales, longitudinales y medios. Del ootipo parte el útero y metra-
MANUALES UEX

termo (ut), repleto de huevos (h) que desemboca en el poro genital (pg) antes citado.

21

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F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Trematoda
Clase Digenea
Género Dicrocoelium

vo

pg

ci

ac

te

ov

oo

vi

ut

Dicrocoelium dendriticum. Dibujo esquemático y tinción con carmín acético:


Se identifican fácilmente ventosa oral (vo), ventosa ventral o acetábulo (ac), testículos (te) ramificados, bolsa
del cirro y cirro (ci), poro genital (pg), ovario (ov), ootipo (oo), glándulas vitelógenas (vi) y útero y repleto
de huevos embrionados en su parte final (detalle). El aparato digestivo consta de boca, rodeada por la
­ventosa oral (vo), faringe muscular (engrosamiento visible bajo la vo), esófago y dos intestinos ciegos simples
laterales que llegan hasta el tercio posterior (líneas verde azuladas).
MANUALES UEX

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MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Trematoda
Clase Digenea
Géneros Paramphistomum y Schistosoma

Paramphistomum cervi (dibujo esquemático y tinción con carmín acético).

MANUALES UEX

Schistosoma bovis (macho).


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F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Cercomeromorpha
Clase Cestoidea
Orden Ciclophyllidea
Familia Taeniidae
Subfamilia Taeniinae
Género Taenia (= Taeniarhynchus, Multiceps, Hydatigera)

Hospedador definitivo 2
1

Anillo

Coenuro
grávido A
A
cerebralis 4
(metacestodo)

Huevo
Hospedador 11
intermediario 5

7 6

BB 14
Ciclo biológico de Taenia multiceps.
8
9
12 13

10
1. Ganchos.
2. Rostelo.
3. Ventosa.
4. Proglotis inmaduros.
5. Canales excretores.
6. Vagina.
7. Ootipo. 14
8. Ovario.
9. Glándulas vitelógenas.
10. Útero.
11. Cirro.
15
12. Conducto deferente.
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13. Testículos. C
C
14. Poro genital.
15. Huevos.
Dibujo esquemático de Taenia sp.
(A = escólex; B = proglotis maduro;
C = proglotis grávido).
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MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

Doble corona de ganchos


Forma de puñal árabe mango

guarda
hoja

{
Rostelo

Escólex Ganchos

Ventosas

Cuello

Estróbilo
(proglótides
inmaduros)

Dibujo esquemático del extremo anterior de Taenia sp.

A B C

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Esquema de las formas larvarias de Taenia (sensu lato):


A) Cisticerco.  B) Estrobilocerco.  C) Coenuro.

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F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

Escólex de Taenia sp. Proglotis maduros y grávidos de Taenia sp.

Proglotis grávido de Taenia sp. repleto de huevos.


MANUALES UEX

Cisticerco Taenia hydatígena (evaginado). Cenuro de Taenia multiceps (detalle).


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MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Cercomeromorpha
Clase Cestoidea
Orden Cyclophyllidea
Familia Taeniidae
Subfamilia Echinococcinae
Género Echinococcus

Echinococcus granulosus. Dibujo esquemático y tinción con carmín acético. El último anillo es grávido,
con un útero sacciforme, a diferencia de otros ténidos.

BB

A
A
MANUALES UEX

F. serrano © 2008

Dibujo esquemático de un metacestodo de Echinococcus granulosus (quiste hidatídico o Echinococcus


hydatidosus) con dos vesículas hijas, cápsulas prolígeras (A) con protoescólices inviables y viables (B) y
protoescólices libres, en los que se aprecia una corona, de ganchos con forma de puñal árabe.
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F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Cercomeromorpha
Clase Cestoidea
Orden Cyclophyllidea
Familia Anoplocephalidae
Género Moniezia

glándulas
interproglotídeas

B
Hospedador definitivo

Hospedador intermediario
(ácaro oribátido)

Huevo

A = Moniezia expansa; B = Moniezia benedeni. Ciclo biológico de Moniezia sp.


MANUALES UEX

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MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Cercomeromorpha
Clase Cestoidea
Orden Cyclophyllidea
Familia Davaineidae
Género Davainea
Género Railletina

Dibujo esquemático de Davainea proglottina.

MANUALES UEX

Railletina tetragona (proglotis maduros).

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PORTADA ÍNDICE
F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Cercomeromorpha
Clase Cestoidea
Orden Cyclophyllidea
Familia Dipylidiidae
Género Dipylidium

Hospedador
definitivo

Cápsula
ovígera

Adulto Huevo
Ctenocephalides
canis
(Hospedador intermediario)

Larva

Ciclo biológico de Dipylidium caninum.


MANUALES UEX

D. caninum (anillos maduros). D. caninum (anillo grávido).


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MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Clase Chromadorea (~ Secernentea)
Orden Rhabditida
Suborden Strongylida
Superfamilia Strongyloidea
Familia Strongylidae
Género Strongylus

corona radiada festones surco dorsal de la glándula esofágica

A B C

cápsula bucal dientes esófago

Strongylus vulgaris (A); S. equinus (B); S. edentatus (C) (vista lateral).

espícula
c. ventroventral
c. lateroventral
télamon

gubernáculo c. anterolateral
c. mediolateral
cloaca c. posterolateral

bolsa copuladora c. externodorsal

c. dorsal
costillas

Esquema del extremo posterior de los machos del Suborden Strongylida.


MANUALES UEX

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PORTADA ÍNDICE
F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Clase Chromadorea (~ Secernentea)
Orden Rhabditida
Suborden Strongylida
Superfamilia Strongyloidea
Familia Chabertiidae
Géneros Oesophagostomum y Chabertia

Oesophagostomum dentatum (extremo anterior).


MANUALES UEX

Chabertia ovina (extremo anterior).

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PORTADA ÍNDICE
MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Clase Chromadorea (~ Secernentea)
Suborden Strongylida
Superfamilia Ancylostomatoidea
Familia Ancylostomatidae
Géneros Ancylostoma, Uncinaria y Bunostomum

Ancylostoma sp. (extremo anterior). Uncinaria stenocephala (extremo anterior).

MANUALES UEX

Bunostomum trigonocephalum (extremo anterior).


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PORTADA ÍNDICE
F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Suborden Strongylida
Infraorden Trichostrongylina
Géneros Trichostrongylus, Teladorsagia, Haemonchus y Nematodirus

L3 (filariforme)
Hospedador huevo

cutícula muda L1 (rabditiforme) mórula


de la L2 L2 (rabditiforme)
cutícula de la L1 muda eclosión

Ciclo biológico general de los nematodos gastrointestinales del Suborden Strongylida.

Trichostrongylus retortaeformis (bolsa copuladora ♂). Ostertagia circumcincta (bolsa copuladora ♂).
MANUALES UEX

Haemonchus contortus (bolsa copuladora ♂). Nematodirus spathiger (bolsa copuladora ♂).
34

PORTADA ÍNDICE
MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Clase Chromadorea (= Secernentea)
Suborden Strongylida
Superfamilia Trichostrongyloidea
Familia Dictyocaulidae: Género Dictyocaulus

L3 L1

L2

Ciclo biológico de Dictyocaulus viviparus. Dictyocaulus viviparus (bolsa copuladora ♂).

Superfamilia Metastrongyloidea
Familia Metastrongylidae
Género Metastrongylus
Hospedador
definitivo
Hospedador
intermediario Huevo
larvado

Ciclo biológico Metastrongylus apri.

Hospedador
definitivo
MANUALES UEX

Hospedador
Metastrongylus apri (extremo posterior). intermediario
L1

Familia Protostrongylidae
Géneros Protostrongylus, Muellerius,
Neostrongylus y Cystocaulus Ciclo biológico Muellerius capillaris.
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PORTADA ÍNDICE
F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Orden Ascaridida (= Ascaridomorpha)

Superfamilia Ascaridoidea
Familia Ascarididae
Géneros Ascaris, Parascaris, Toxocara y Toxascaris

Toxocara mystax (extremo anterior). Ascaris suum en intestino delgado de cerdo.

Superfamilia Heterakoidea
Familia Heterakidae
Género Heterakis
Familia Ascaridiidae
Género Ascaridia
MANUALES UEX

Heterakis sp. (extremo posterior).


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PORTADA ÍNDICE
MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Orden Oxyurida (= Oxyuridomorpha)
Familia Oxyuridae
Géneros Oxyuris, Enterobius, Passalurus y Skrjabinema
Familia Heteroxynematidae
Género Aspiculuris

Aspiculuris tetraptera (extremo posterior ♀). Passarulus ambiguus (extremo anterior).

Passarulus ambiguus (zona uterina ♀ Passarulus ambiguus (huevo).


y extremo posterior ♂).
MANUALES UEX

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PORTADA ÍNDICE
F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Orden Spirurida (= Spiruromorpha)
Superfamilia Habronematoidea
Géneros Habronema y Draschia
Superfamilia Filarioidea
Géneros Dirofilaria y Onchocerca
Superfamilia Spiruroidea
Géneros Gongylonema, Spirocerca y Ascarops

Dirofilaria immitis (Microfilarias, L1). Gongylonema pulchrum (extremo anterior).


MANUALES UEX

Ascarops strongylina (extremo anterior). Ascarops strongylina (extremo posterior ♂).

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PORTADA ÍNDICE
MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Clase Enoplea (~ Adenophorea)
Orden Trichinellida
Superfamilia Trichinelloidea
Géneros Trichuris, Capillaria y Trichinella

Trichuris skrjabini (Esófago glandular). Capillaria aerophila (detalle útero ♀).

músculo
esquelético

L1 madura
quiste
MANUALES UEX

epitelio
Larvas intestinal
emigrantes

Ciclo biológico de Trichinella sp.


39

PORTADA ÍNDICE
F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Arthropoda
Clase Arachnida
Subclase Acari
Superorden Parasitiformes
Orden Mesostigmata (= Gamasida). Género Dermanyssus
Orden Metastigmata (= Ixodida)
Familia Argasidae (Garrapatas blandas)
Familia Ixodidae (Garrapatas duras)

Hyalomma lusitanicum ♀ y ♂ (Ixodidae) (vista dorsal).


MANUALES UEX

Ornithodoros erraticus (Argasidae) (vistas dorsal y ventral).

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PORTADA ÍNDICE
MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Arthropoda
Clase Arachnida
Subclase Acari
Superorden Acariformes
Orden Astigmata (~ Sarcoptiformes) (Ácaros de la sarna)
Orden Trombidiformes. Género Demodex (sarna demodécica)

Sarcoptes scabiei suis. Psoroptes equi cunicui.

Huevo de Sarcoptes scabiei suis. Demodex canis.


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REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Arthropoda
Clase Insecta
Orden Phthiraptera
Subórdenes Anoplura, Amblycera, Ischnocera
Orden Hemiptera
Orden Siphonaptera

Bovicola (~ Damalinia) caprae (Ischnocera). Haematopinus suis (Anoplura).

Triatoma infestans (Hemiptera). Ctenocephalides canis (Siphonaptera).


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REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Arthropoda
Clase Insecta
Orden Diptera
Suborden Nematocera
Suborden Brachycera (Tabanomorpha y Muscomorpha)

Gasterophilus sp. (L3 en estómago de équido). Oestrus ovis (diferentes estadios larvarios).

1. Imago. 2. Larvas 1 en esófago.


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3. Larvas 3 en dorso de vacuno. 4. Pupas.

Fases del ciclo biológico de Hypoderma lineatum.


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II. TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO

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1. TOMA DE MUESTRAS Y ENVÍO AL LABORATORIO

1.1.  Heces

Se debe intentar siempre que la recogida de heces se realice directamente del recto del
animal, para evitar así posibles contaminaciones por nematodos de vida libre que se encuen-
tran en el medio ambiente, dificultando a veces el diagnóstico coprológico.
Las heces se depositan en un frasco limpio con un algodón húmedo, o bien en bolsas her-
méticamente cerradas y en un ambiente de humedad. Si las heces están secas, no se pueden
utilizar para diagnóstico, ya que los elementos de diseminación pueden estar deteriorados. Una
vez realizada esta operación, se recomienda el envío rápido al laboratorio para su procesado.
Es muy importante que los botes o bolsas estén debidamente etiquetados, completamente
limpios, herméticamente cerrados y se les incorpore una anamnesis completa de la explota-
ción y/o del animal objeto de estudio.

1.2. Sangre

La sangre debe enviarse entera y/o con anticoagulante, conservándose refrigerada a 4 °C
hasta su remisión al laboratorio. Al igual que las heces, debe mandarse debidamente identi-
ficada añadiéndose la correspondiente anamnesis.
En la extracción se debe evitar por todos los medios que los eritrocitos se hemolicen, ya que
en estos casos se dificulta en gran medida el diagnóstico de algunos parásitos intraeritrocitarios.
También se puede enviar al laboratorio frotis sanguíneos fijados previamente con metanol
u otro medio.
Para diagnósticos serológicos se toma sangre entera y se espera hasta que se forme un coá-
gulo, extrayéndose el suero sanguíneo y se procede a su congelación. También en los casos
de sangre con anticoagulante se realiza una centrifugación, extrayéndose el plasma y conge­
lándose hasta el momento de su uso.

1.3.  Vísceras y tejido muscular

Las vísceras deben remitirse debidamente identificadas al laboratorio, refrigeradas y en el


menor tiempo posible, o bien en frascos con glicerina, creando un ambiente anaerobio que
evite la putrefacción. En el caso del tejido muscular, la remisión debe hacerse debidamente
identificada y con la muestra refrigerada.
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1.4.  Piel

Primeramente se procede al raspado con bisturí en los bordes de las depilaciones hasta
que brote un poquito de sangre. El material recogido, incluida la cuchilla de raspado, se
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manda al laboratorio en bolsa de plástico, placa de Petri o frasco herméticamente cerrado e


identificado. Sería conveniente el envío de dos raspados por animal para remitir muestra del
mismo también al laboratorio de patología infecciosa.

2.  EXAMEN COPROLÓGICO

2.1. Examen directo de heces frescas

–– En un portaobjetos, sobre una gota de suero fisiológico templado (38-40 °C), se coloca una
pequeña cantidad de heces, a ser posible tomada del centro de la masa fecal.
–– Se mezclan perfectamente hasta conseguir una capa fina. La extensión debe tener un grado
de transparencia suficiente para que un texto, colocado debajo del portaobjetos, se pueda
leer sin dificultad.
–– Se coloca un cubreobjetos y se observa al microscopio.
–– Para una mejor visualización de protozoos móviles (trofozoitos de Giardia, ­Chilomastix, etc.)
o sus quistes, alternativamente se puede poner una gota de lugol en el portaobjetos para
hacer la extensión con las heces, así como otras técnicas de tinción (hematoxilina-cristal
violeta, etcétera).

Indicaciones

Esta técnica permite reconocer cualquier elemento de diseminación de los parásitos, pero
en caso de no observar ninguna forma parasitaria por este método, no debe descartarse la
posibilidad de una parasitosis, ya que el tamaño de la muestra es tan pequeño que el resul-
tado negativo no es excluyente. Sin embargo, no es sustituible por su sencillez, rapidez y
fundamentalmente porque algunos parásitos no son evidenciables por otras técnicas, que
en general son mucho más sensibles, siendo de especial utilidad para la detección de pro-
tozoos móviles.

2.2. Métodos de enriquecimiento (cualitativos)

2.2.1. Flotación

Este sistema se basa en lograr la concentración de los elementos de diseminación (huevos,


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larvas y quistes) por flotación en un líquido de mayor densidad que ellos.

La densidad de los elementos de diseminación de los parásitos oscila generalmente entre


1,05 y 1,10. La densidad de las soluciones empleadas, no debe ser excesivamente alta para
que no deformen los elementos parasitarios y para que no floten otras partículas sólidas pre-
sentes en las heces.
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a)  Flotación en solución saturada de NaCl

Probablemente sea la solución más empleada y la que ofrece más ventajas. Tiene una
densidad de 1,18 y se prepara hirviendo una solución en exceso de sal común durante unos
minutos. Se deja enfriar, se filtra y se ajusta a la densidad indicada.

Técnica
–– Se mezcla una pequeña cantidad de heces con solución saturada de NaCl en un vial de
paredes rectas (Fig. 1, dibujo 1, 2 y 3).
–– Con unas pinzas se disgregan perfectamente las heces (Fig. 1, dibujo 4).
–– A continuación se agrega suficiente solución para que se forme un menisco convexo en la
superficie del vial (Fig. 1, dibujo 5).
–– Sobre este menisco convexo, se coloca un cubreobjetos con una superficie mínima
de 18 × 18 mm, teniendo la precaución de evitar que se formen burbujas de aire en la
superficie del líquido de flotación, o que floten porciones de heces sin disgregar (Fig. 1,
dibujo 6). Si esto último resulta difícil de evitar, la suspensión de heces se puede realizar
en otro recipiente y tras filtrarla mediante una doble gasa, se coloca en el vial mediante
una pipeta Pasteur.

1 2 3 4 5 6

Figura 1.  Secuencia para la realización de la técnica coprológica de flotación.

–– Se esperan 45 minutos y se recoge el cubreobjetos, manteniéndolo en posición horizontal


para que no se desprenda la gota de solución salina que queda adherida al mismo. Con
un movimiento suave se coloca sobre un portaobjetos (Fig. 2) y se examina a 40x y 100x
con el diafragma cerrado. Debe examinarse sin dilación, ya que la solución salina de la
preparación se cristaliza por completo en pocos minutos.
–– Cuando se dispone de una centrífuga, la suspensión se puede centrifugar a 1.500 rpm
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durante 3 minutos. En los tubos de centrífuga se coloca un cubreobjetos de la misma


manera que se ha descrito anteriormente. Se recoge el cubreobjetos, se deposita sobre
un porta y se observa al microscopio. Para la investigación de Giardia, Chilomastix, etc.,
se colorea la preparación con lugol. Este procedimiento, si bien es más rápido, es menos
preciso que el anterior.
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Figura 2.  Colocación del cubre sobre el portaobjetos.

Indicaciones
Es la técnica más empleada en cualquier laboratorio de parasitología. Con ella se pueden
observar la mayoría de los huevos y larvas de nematodos, los ooquistes de coccidios y algu-
nos huevos de cestodos.
Sin embargo, no flotan los huevos de trematodos, los cestodos seudofilideos, ni las larvas
de nematodos pulmonares, para los que habría que utilizar soluciones de mayor densidad.

b)  Otras soluciones empleadas para métodos de flotación

Solución al 33% de Sulfato de Zinc (densidad de 1,33), solución al 35% de Sulfato Mag-
nésico (densidad de 1,28), solución de N2O3Na (densidad de 1,360), solución de sacarosa
(densidad 1,2). Estas soluciones están recomendadas para el diagnóstico de las formas de
diseminación de mayor densidad, como Fasciola hepática en rumiantes, Metastrongylus en
cerdos, de Spirocerca lupi en el perro, etcétera.

2.2.2. Sedimentación

Se trata de concentrar los posibles elementos de diseminación existentes en las heces por
simple gravedad.

Técnica
–– Se mezclan varios gramos de heces con agua hasta que la disgregación sea completa.
–– Se pasa la suspensión a través de un tamiz (doble gasa) en una copa de 500 cc y se llena
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seguidamente de agua hasta aproximadamente 2,5 cm del borde.


–– Añadir 2-3 gotas de Azul de Metileno o Verde Malaquita (opcional). Esto teñirá los restos
vegetales, pero no los elementos de diseminación parasitarios, facilitando en gran medida
su búsqueda al microscopio óptico.
–– Se deja reposar 30-40 minutos.
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–– Quitar el sobrenadante hasta la marca de 100 cc y volver a llenar con agua hasta el mismo
nivel.
–– Se repite el procedimiento hasta que el sobrenadante permanezca más o menos transpa-
rente (lo ideal es repetirlo 3 ó 4 veces).
–– Para terminar este procedimiento, se elimina el sobrenadante y se examina el sedimento al
microscopio. Para ello, se recogen al menos 9 gotas del sedimento con una pipeta Pasteur,
las cuales se depositan en un portaobjetos y se les coloca un cubreobjetos, visualizándose
al microscopio con el diafragma cerrado. También puede examinarse todo el sedimento
restante a pocos aumentos en una placa de Petri, buscando en el esteromicroscopio (o un
trichinelloscopio de pantalla) los huevos de Fasciola u otros elementos de diseminación de
tamaño considerable.

Indicaciones
Se recomienda el método de sedimentación para el diagnóstico de quistes de amebas y
ciliados, huevos de trematodos y de cestodos seudofilídeos, ya que por su elevado peso no se
detectan por las técnicas usuales de flotación, anteriormente mencionadas.
Esta técnica tiene la ventaja de recuperar todos los huevos de helmintos, larvas de nema-
todos, y quistes de protozoos en condiciones de viabilidad y sin distorsión; no obstante tiene
el inconveniente de consumir excesivo tiempo y concentrar muy poco las formas parasitarias;
de tal forma, que es más difícil visualizarlas.
Los métodos de flotación y sedimentación son técnicas cualitativas de concentración que
se complementan y se utilizan sistemáticamente ambas para el diagnóstico coprológico.

2.3. Coprocultivos o incubación de heces

Se trata de mantener las heces en condiciones adecuadas de humedad, temperatura y


oxigenación para que los elementos parasitarios evolucionen y alcancen estadios en que la
identificación resulte más fácil y exacta, simulando las condiciones que se producen en el
medio ambiente.

2.3.1.  Esporulación de ooquistes de coccidios

Para la identificación correcta de coccidios son necesarios ooquistes esporulados. Para


que dicho proceso se desarrolle (esporulación-esporogonia) se procede como sigue:
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–– En una placa de Petri, se mezclan las heces que contienen los ooquistes con una solución
de dicromato potásico al 2%, el cual, además de dar humedad al medio, posee acción
bactericida y fungicida.
–– La placa se introduce en una estufa a temperatura adecuada (20-25 °C).
–– Se ventilará a diario para proporcionar a los ooquistes el oxígeno necesario.
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–– Diariamente se podrán examinar por flotación los ooquistes para controlar el desarrollo de
los esporozoitos.

2.3.2.  Incubación de huevos de Strongylida

En muchas parasitosis producidas por agentes pertenecientes al Orden Strongylida, el


estudio de los huevos encontrados en las heces no es suficiente para determinar la familia y/o
el género de los parásitos implicados, por falta de peculiaridades morfológicas y morfomé-
tricas diferenciadoras. En tales casos, las heces positivas se depositan en un medio que imite
las condiciones medioambientales naturales, en las que los huevos embrionan (embriogéne-
sis), eclosionan y experimentan una doble muda hasta alcanzar la fase o estadio de larva 3.
Éstas tienen unas características morfológicas y morfométricas diferenciadoras entre géneros
y especies.

Técnica
–– La muestra de heces de introduce en una placa de Petri y se le adiciona agua templada para
proporcionarle humedad suficiente.
–– Se lleva a una estufa (20-25 °C) durante 7-10 días. Si no se dispone de estufa, la embrio-
génesis también se producirá, pero dependiendo de la temperatura ambiental. A mayor
temperatura, menor tiempo y viceversa.
–– Cada día se controlará la humedad y se ventilará el coprocultivo durante unos minutos.
–– Una vez transcurrido este tiempo, las heces se colocan en el aparato de Baermann para el
aislamiento de las larvas y su posterior identificación (ver a continuación).

2.4. Método de Baermann para el aislamiento de larvas de nematodos en heces

Se monta el aparato de Baermann. El embudo se llena de agua templada y sobre ésta es


depositada la muestra (sobre gasas y tamiz), de manera que se produzca un contacto suave
entre las heces y agua.

–– Las larvas son muy activas y presentan hidrotropismo positivo, migrando de las heces y
sedimentándose en el fondo del tubo de goma conectado al embudo.
–– A partir de 3-6 horas (tiempo máximo necesario 12-24 horas) se depositan sobre un vidrio
de reloj las primeras gotas del sedimento, examinándose al estereomicroscopio.
–– Con una pipeta se recogen algunas larvas y se depositan entre porta y cubre, examinándose
a microscopía óptica.
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–– La muestra objeto de análisis se puede mezclar con una o dos gotas de lugol para fijar y
colorear las larvas y hacer así más fácil su identificación.

Si no disponemos de aparato Baermann, el aislamiento de las larvas se puede realizar en


una copa de sedimentación llena de agua templada sobre la que depositaremos un colador
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y una gasa. Sobre ésta se deposita la muestra, de tal forma que las larvas migren hasta el
fondo de la copa. Finalmente, con cuidado se retira el sobrenadante y se recogen las larvas
del sedimento.

2.5. Examen cuantitativo (Método de McMaster)

Sirve para realizar una estimación aproximada de la carga parasitaria, y por tanto se su
posible significación clínica, a través del número de ooquistes, huevos o larvas por gramo
de heces.
La cámara de McMaster consta de dos compartimentos independientes y abiertos lateral-
mente que están cubiertos por un cubreobjetos.
Cada compartimento tiene una altura de 0,15 cm y en el cubreobjetos tiene trazado un
cuadrado de 1 cm de lado, dividido en calles para facilitar el contaje. Por tanto, el volumen
que se examina de cada cámara es de 0,15 cc (volumen total de 0,3 cc).
Su procedimiento es como sigue:

–– Suspender cuidadosamente 2 gramos de heces en solución saturada de NaCl hasta un


volumen final de 60 ml (aproximadamente 58 ml).
–– Filtrar la suspensión por una doble gasa, presionando finalmente sobre la malla. De esta
forma, son eliminadas las partículas más groseras.
–– Agitar suavemente la suspensión, para homogeneizarla perfectamente, con el objeto de
distribuir uniformemente los elementos de diseminación.
–– Inmediatamente, llenar con una pipeta los compartimentos de la cámara de McMaster,
evitando que se formen burbujas de aire (Fig. 3).
–– Colocar la cámara de McMaster en el microscopio, y dejarla reposar unos 5 minutos para
que los elementos parasitarios floten y acumulen en la parte superior de la cámara.
–– Enfocar a 40 aumentos (objetivo 4x) las líneas dibujadas en la parte superior de la cámara
y centrar el campo en el extremo de la primera calle. Sin mover la cámara, cambiar el
objetivo de 4x a 10x (100 aumentos) y ajustar el enfoque. No debe intentar enfocar la
cámara a mayores aumentos, ni intentar enfocar su parte inferior, ya que podría romperla
con el objetivo del microscopio. Sólo debe realizar ligeras correcciones de enfoque du-
rante el recuento, tomando únicamente como referencia las líneas de la cámara. No in-
tente enfocar partículas que vea borrosas cuando las líneas están bien enfocadas, ya que
eso implica que están en un plano inferior de enfoque (y que por tanto no están en el parte
superior de la cámara).
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–– Realizar el contaje siguiendo las calles o columnas marcadas en ambas cámaras. Como
la suspensión de heces está en la relación 1 g en 30 cc (2 g en 60 cc), y se examina un
volumen total de 0,3 cc, este contaje equivale al examen de 0,01 g de heces. Por tanto,
la cantidad de elementos de diseminación por gramo de heces es la suma del contaje de
ambos compartimentos multiplicado por 100.
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Figura 3.  Cámara McMaster.

–– Si el número de huevos u ooquistes en cada calle es muy bajo, es conveniente repetir el


contaje varias veces y obtener la media. Por el contrario si es muy alto y difícil de contar,
se pueden contar una sola cámara, o sólo algunas calles, extrapolando el resultado a las
calles restantes, o bien repetir el contaje diluyendo parte de la suspensión sobrante a un
volumen apropiado según la intensidad de la infestación, y multiplicar el contaje final por
ese factor de dilución (por ejemplo si diluimos la suspensión a examinar al 1/10, en contaje
final se deberá multiplicar por 10).

Con este método, por tanto, el recuento mínimo es de 100 elementos de diseminación
por gramo de heces. Esta sensibilidad suele ser suficiente en la práctica, dado que los contajes
inferiores se corresponden a cargas parasitarias muy leves que no suelen tener significación
clínica.
Si se requiere una mayor sensibilidad, un simple modificación consiste en duplicar el
tamaño de la muestra de heces sin modificar el volumen final (4 g de heces en 56 ml de solu-
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ción salina) por lo que el contaje de ambas cámaras se debe multiplicar por 50. Una ventaja
adicional de esta modificación es que la suspensión de heces sobrante se puede emplear
para rellenar unos viales con una pipeta Pasteur y realizar la técnica de flotación a partir del
punto indicado en el dibujo 5 de la figura 1. Esto permite simplificar la rutina en el laborato-
rio, al aunar los primeros pasos de ambos métodos y poder realizar simultáneamente ambas
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técnicas, con el consiguiente ahorro de tiempo. Además, la flotación realizada de esta forma
es preferible, ya que se parte siempre de la misma cantidad de heces, y gracias al filtrado se
evita que algunas heces no se disgregan fácilmente en el vial o queden partículas gruesas que
floten y dificulten el examen del cubreobjetos.
Para una mayor sensibilidad se ha descrito (FAO Animal Health Manual) otra modifica-
ción de este método cuantitativo con una sensibilidad de hasta 20 huevos/g heces, con la
ventaja adicional de que tras la recogida y un procesamiento inicial, las muestras se pueden
mantener refrigeradas a 4 °C hasta 1 semana sin que se altere el número de huevos en la
muestra, lo que puede resultar conveniente cuando el número de muestras a procesar es muy
alto. El procedimiento es como sigue:

–– Pesar 4 g de heces y añadirle 56 ml de agua.


–– Mezclar adecuadamente con una espátula y dejar reposar 30 minutos para su correcta
homogeneización.
–– Filtrar la mezcla a través de una gasa a un segundo vaso de precipitado e inmediatamente
después verter 10 ml de esta solución a un tubo de centrifuga.
–– Centrifugar 7 minutos a 1.200 rpm.
–– Retirar el sobrenadante, teniendo cuidado de no remover el sedimento (en este paso se
puede interrumpir el proceso, conservando estos tubos con el sedimento en el refrigerador,
hasta 7 días).
–– Añadir al sedimento 4 ml de una solución de flotación (solución salina sobresatura-
da + glucosa) mezclando cuidadosamente usando una pipeta Pasteur.
–– Finalmente, rellenar la cámara McMaster evitando la formación de burbujas y dejar
3-5 minutos para permitir la flotación de todos los huevos. Se cuentan el total de huevos
y el resultado se multiplica por 20.

2.6. Identificación de ooquistes de Cryptosporidium sp.

Los ooquistes de Cryptosporidium son difíciles de identificar por su pequeño tamaño


(próximo a 5 µm), falta de estructuras claramente visibles y su similitud con otros elementos
normales de las heces, en especial las levaduras.
Existen varios métodos de tinción aceptables, pero es conveniente que vayan precedidos
de un método de concentración, dado que pueden eliminarse en concentraciones muy bajas
en enfermos leves o portadores. No obstante, por su rapidez, la tinción directa de las heces
puede utilizarse como cuando se trata de comprobar si están implicados en las diarreas neo-
natales o diarreas de animales inmunodeprimidos.
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2.6.1. Tinción por el Método de Heine

–– Depositar una pequeña porción de heces sobre un porta y extender un poco.


–– Teñir con fuchsina básica fenicada durante unos segundos.
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–– Eliminar el colorante sobrante y dejar secar.


–– Observar a microscopía con objetivo de 40x o de inmersión (100x).

2.6.2. Tinción por el Método de Kinyoun modificado

–– Realizar una extensión fina de heces en un portaobjetos.


–– Dejar secar.
–– Fijar a la llama durante unos 6 segundos.
–– Fijar con metanol durante 5 minutos. Dejar secar.
–– Teñir con fuchsina básica fenicada durante 10 minutos.
–– Lavar con agua.
–– Decolorar el exceso de fuchsina con alcohol-clorhídrico hasta que la parte más fina de la
extensión sea transparente (aproximadamente 10 segundos).
–– Lavar con agua para arrastrar el exceso de colorante.
–– Teñir con una solución de verde malaquita al 5% durante 20-30 segundos.
–– Lavar de nuevo con agua.
–– Dejar secar y observar al microscopio óptico con el objetivo de inmersión.

2.6.3. Tinción por el Método de Ziehl-Neelsen modificado

–– Extensión muy fina de heces en un portaobjetos. Dejar secar.


–– Fijación con metanol o alcohol absoluto durante 5 minutos. Dejar secar.
–– Teñir con fuchsina básica fenicada durante 60 minutos.
–– Lavar con agua.
–– Decolorar con ácido sulfúrico al 2% durante 10-15 segundos con el porta en agitación, o
con alcohol clorhídrico hasta alcanzar una coloración pálida (de 5 a 10 segundos).
–– Lavar con agua.
–– Tinción de contraste con Verde Malaquita o Azul de Metileno al 5% durante 30 segundos.
–– Lavar, secar y observar al microscopio.

2.6.4. Tinción con Giemsa

–– Extensión muy fina de heces en un portaobjetos.


–– Dejar secar.
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–– Fijación con metanol o alcohol absoluto durante 5 minutos.


–– Dejar secar.
–– Teñir con Giemsa (3 gotas/litro de H2O) durante 25 a 30 minutos.
–– Lavar con agua.
–– Dejar secar.
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Preparación de colorantes
–– Fuchsina básica fenicada

Fuchsina básica.............................................................................. 1g
Alcohol etílico al 95%................................................................... 10 ml

Mezclar con 5 ml de fenol (fundir los cristales previamente al “baño maría”) en 95 ml de


agua destilada.

–– Verde malaquita

Verde malaquita............................................................................. 5g
Agua destilada................................................................................ 100 ml

3.  EXAMEN DE SANGRE

3.1. Técnicas para el diagnóstico de microfilarias

3.1.1.  Examen en fresco

Se deposita una gota de sangre fresca (con anticoagulante) entre porta y cubre, examinán-
dose a microscopía con luz poco intensa. La existencia de microfilarias (larvas 1) es observa-
da por los activos movimientos de éstas entre los elementos formes.
Es una técnica fácil y que no requiere prácticamente material. Es importante observar
varias preparaciones debido a la poca cantidad de sangre que es observada. La no obser-
vación de microfilarias no es excluyente, habiendo de recurrir a otros métodos más fiables
(métodos de concentración).

3.1.2.  Método del tubo microhematocrito

Este método consiste en realizar un hematocrito con la muestra de sangre. Posteriormente


se observa al microscopio óptico la zona del tubo microhematocrito situada entre los glóbu-
los blancos y plasma, localización donde se sitúan las microfilarias (Fig. 4).

3.1.3.  Método de Knott


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Se trata de un método de concentración de microfilarias.

–– Se mezcla 1 ml de sangre con 9 ml de formalina al 2%.


–– Centrifugación durante 8 minutos a 1.500 rpm. Posteriormente, se desecha el sobrenadante
y se examina el sedimento al microscopio (adicionar una gota de colorante).
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x100

Figura 4.  Localización de las microfilarias en el tubo microhematocrito.

3.1.4.  Método de filtración

Es también un método de concentración de microfilarias, que consiste en:

–– Se mezcla, agitando, 1 ml de sangre con 9 ml de formalina al 2% en una jeringa de


10-12 ml para lisar los eritrocitos.
–– Se prepara la cámara de filtración, colocando sobre la rejilla metálica del portamem-
branas una membrana de policarbonato de 5 µm de diámetro de poro (Fig. 5). Sobre esta
se coloca una arandela y la parte superior de la cámara, que se enrosca sobre el porta-
membranas.

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Figura 5.  Cámara de filtración y membrana de policarbonato.


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–– Se introduce el cono de la jeringa en la parte superior de la cámara de filtración y se inyecta


despacio la solución lisada a través del filtro (si se atasca no se debe forzar la inyección de
líquido, sino aspirar un poco, mezclar el lisado restante en un tubo apropiado con 10 ml
de formalina, agitar nuevamente, y filtrarlo nuevamente, o en una segunda membrana).
–– Enjuagar el filtro lentamente con 10-15 ml de agua para eliminar el exceso de células y
detritus.
–– Posteriormente, se desenrosca la cámara de filtración y se retira el filtro, colocándolo en un
portaobjetos manteniendo el material filtrado hacia arriba.
–– Teñir con una o dos gotas de colorante en el centro de la membrana y se coloca un cubre-
objetos de tamaño apropiado sobre el filtro. Es conveniente esperar 30 segundos para
obtener la máxima tinción.
–– Finalmente, para visualizar las microfilarias teñidas, se observa la membrana al microsco-
pio óptico a 100 aumentos.
–– Si se observan microfilarias, deben diferenciarse por las características morfológicas y
morfométricas que no se aprecian bien por este método, por lo que deben estudiarse
mediante tinción en Giemsa o similar, previa concentración por el método de Knott si es
necesario. Dado que algunas de estas características no son fáciles determinar, y varios
autores señalan cierto solapamiento de tamaños entre las distintas especies de microfilarias,
es interesante la tinción diferencial mediante el método de la fosfatasa ácida, ya que éste
permite obtener una tinción diferencial de esta enzima en cada una de las microfilarias
comunes en los cánidos.

3.1.5.  Método de la fosfatasa ácida

Reactivos
Reactivo I
Tampón acetato veronal de Michaelis o solución de Glicina-NaOH 50 mM
pH = 10.
Reactivo II (guardar a 4 °C, pues se mantiene estable algunas semanas)
Naphtol AS-TR-phosphato.............................................................. 0,05 g
N,N-dimetilformamida................................................................... 5 ml
Reactivo III (Disolver en agua, calentándolo. Añadir HCl y enfriar. Guardar a 4 °C)
Pararosanilina................................................................................. 1g
Agua destilada................................................................................ 20 ml
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HCl................................................................................................ 5 ml
Reactivo IV (A 4 °C o temperatura ambiente)
NaNO2........................................................................................... 4g
Agua destilada................................................................................ 100 ml
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Reactivo V (Verde Metilo 1%; se mantiene a temperatura ambiente)


Sol. a)  Na2HPO4............................................................................ 28,396 g
Agua destilada................................................................................ 1.000 ml
Sol. b)  ácido cítrico. H2O.............................................................. 21,011 g
Agua destilada................................................................................ 1.000 ml
Sol. de trabajo: a)........................................................................... 77,1 ml
b)........................................................................... 122,9 ml
Verde metilo................................................................................... 2g
Sustrato
20 ml de sol I
50 ml de agua destilada
4 ml de sol II

Mezclar 3,2 ml de sol III y IV y añadir a lo anterior (estables a 4 °C más de 6 meses) y
ajustar a pH 5 con sosa 0,1 N. Hacer justo antes de su uso.

Metodología
–– Se incuban las muestras utilizando el sustrato 1 h a 37 °C o 2 h a 25 °C.
–– Lavar con agua destilada.
–– Contratinción con sol V 2 ó 3 minutos (opcional).
–– Deshidratar con alcohol etílico de 95°.
–– Lavar en xileno y montar.

Diferenciación de microfilarias
•• Dirofilaria immitis tiene un tamaño medio de 308 × 7 µm (299 × 5-6,5), de movimientos
no progresivos, que una vez fijadas y teñidas (hematoxilina) aparecen con el cuerpo
extendido, con un estrecho extremo cefálico de 11,5 µm y un recto extremo caudal de
28 µm de media. Además, posee estriaciones cuticulares, evidenciables una vez teñidas
con hematoxilina. Por la técnica histoquímica antes descrita se detecta la presencia de
actividad de la fosfatasa ácida de forma concreta y marcada en poro anal y poro excretor
(Fig. 6, dibujo 1).
•• Dirofilaria repens aparece en el método de la fosfatasa ácida con una zona con colora-
ción roja en el poro anal, si bien puede aparecer alguna coloración rojiza en el centro del
MANUALES UEX

cuerpo y otras zonas (Fig. 6, dibujo 2).


•• Dipetalonema dracunculoides aparece con este método con una tinción intensa el poro
anal y una zona superior del cuerpo, así como coloraciones de menor intensidad en otras
zonas, como el poro excretor, espacio cefálico (Fig. 6, dibujo 3) y es de menor tamaño
que las microfilarias de D. immitis.
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Figura 6.  Tinciones 1 2 3 4


histoquímica
de distintas especies
de microfilarias por método
fosfatasa ácida.

•• Las microfilarias de Dipetalonema reconditum son también más pequeñas y con movi-
mientos de progresión rápida a intervalos, con un prominente gancho cefálico y un extre-
mo anterior obtuso. Varios autores señalan solapamiento de tamaño con las de D. immitis,
lo que hace interesante su tinción con esta técnica para demostrar la actividad de fos-
fatasa ácida prácticamente por todo el cuerpo (Fig. 6, dibujo 4), en tres o cuatro áreas
extensas, o sólo en los dos tercios distales, con mayor intensidad en los poros anales y
excretores.

3.2. Técnicas para el diagnóstico de protozoos hemáticos: frotis de sangre teñidos


con Giemsa

–– Para realizar el frotis sanguíneo, se deposita una gota de ésta aproximadamente a 2 mm


del extremo del porta.
–– Se contacta con la gota el extremo de otro porta, dejando que se extienda la sangre a lo
largo de la superficie de contacto.
MANUALES UEX

–– A continuación, se desliza rápidamente el porta formando un ángulo de 30-45°; con lo


cual, se logra una extensión fina de sangre.
–– Dejar secar y, a continuación, proceder a la fijación con metanol (durante aproximadamen-
te 5 minutos) y tinción con Giemsa mediante técnicas de tinción hematológicas rápidas
(Panóptico rápido, Diff-Quick, etcétera).
60

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4.  EXAMEN DE TEJIDO MUSCULAR

4.1. Triquineloscopia o trichinelloscopia

Esta técnica diagnóstica consiste en una inspección microscópica de tejido muscular para
la búsqueda de larvas 1 de Trichinella spp. enquistadas.
El Reglamento 2075/2005 de la Comisión Europea obliga a tomar muestras en cerdos
domésticos de los pilares del diafragma, concretamente de la zona de transición muscular y
tendinosa del mismo, debiendo tomar 28 muestras del tamaño de un grano de avena por cada
pilar del diafragma. Cuando no se disponga de los dos pilares, se pueden tomar 56 muestras
de diferentes zonas de ese único pilar. Para el caso de jabalíes, las muestras se tomarán de
cada uno de los pilares del diafragma, en la zona de transición entre la parte muscular y la
tendinosa y, además, de los maseteros, de los músculos de la parte inferior de la pierna, de
los músculos intercostales y de los músculos de la lengua, hasta un total de 6 muestras por
individuo. En estos animales, además del número de trozos de carne de diafragma a examinar
comentado anteriormente, se analizarán 7 trozos de cada uno de los 4 músculos restantes,
lo que hacen un total de 84 trozos a examinar. Se debe procurar que los cortes, en todos los
casos, vayan dirigidos en el sentido de las fibras musculares. Posteriormente, se comprimen
los trozos de tejido muscular entre las dos placas compresoras y se observa detenidamente
en el estereomicroscopio, que permita un aumento mínimo de 30 a 40 veces. El examen de
las muestras deberá ser cuidadoso y durará un mínimo de 6 minutos por trichinelloscopia.
Además, un veterinario no deberá examinar en el trichinelloscopio más de 840 trozos por
día. En este Reglamento, se expone que este método debe ser sustituido por otro más fiable
antes del 31 de diciembre de 2009.

4.2. Digestión artificial (pépsica) para el diagnóstico de Trichinella spp.

En la actualidad, el método oficial es la digestión de muestras colectivas con utilización


de agitador magnético (digestión artificial pépsica). La digestión artificial es, sin duda, un
método de mayor sensibilidad que la trichinelloscopia.
La legislación actual en España, según el Reglamento 2075/2005 de la Comisión Europea,
establece que se deben emplear de 1 a 5 gramos de tejido muscular por cerdo sacrificado,
según su sistema de producción. En jabalíes, se deben digerir 5 g por animal. Al igual que la
trichinelloscopia, el músculo de elección son los pilares del diafragma.
El fundamento de la digestión pépsica es simular el proceso fisiológico al que es some-
tida la carne en el estómago de un animal, y su objetivo es liberar las larvas musculares de
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Trichinella spp. enquistadas en el tejido muscular. Como resultado se obtiene un líquido de


digestión en el que se encuentran las larvas en suspensión. Este método, acorde con el Regla-
mento 2075/2005, se basa fundamentalmente en una digestión en el agitador magnético, en
el cuál se coloca un vaso de precipitado con las siguientes proporciones de reactivos (para
100 g de carne):
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–  Agua a 46-48 °C.......................................................................... 2l
–  Pepsina de 2000 U/g. FIP (1:10.000 NF)..................................... 10 g
–  Ácido clorhídrico al 25%............................................................ 16 ml

Este vaso de precipitado debe permanecer en el agitador magnético unos 30 minutos.


P­osteriormente, se filtra el líquido de digestión a través de un tamiz colocado sobre un
­embudo de decantación. Este tamiz debe tener una malla de 180 micrómetros de diámetro
de poro y un diámetro exterior de 11 cm. Tras otros 30 minutos, se pasan 40 mililitros a un
nuevo embudo de decantación, de menor tamaño, dejando precipitar 10 minutos. Tras este
tiempo se retiran 30 mililitros de sobrenadante y los 10 mililitros restantes de sedimento se
vierten en una placa de Petri junto con 10 mililitros de agua que se utilizan para enjuagar la
pared de este segundo embudo de decantación. Este filtrado se observa al estereomicroscopio
con un aumento de 15 a 20 veces. En caso de observar algo sospechoso de confundirse con
parásitos, deberán aplicarse aumentos superiores, de entre 60 y 100 veces.
El Reglamento CE 2075/2005 establece unos métodos equivalentes de detección de
­Trichinella spp. que son:

1. Método de digestión de muestras colectivas con asistencia mecánica/técnica de sedimen-


tación.
2. Método de digestión de muestras colectivas con asistencia mecánica técnica de aislamien-
to por filtración.
3. Método de digestión automática para muestras colectivas de hasta 35 g.

No obstante, no será necesario investigar la presencia de este nematodo en la carne


de cerdos domésticos que hayan sido sometidas a un tratamiento de congelación regulado
en el Reglamento 2075/2005, ni que procedan de explotación o región declarada libre de
­Trichinella spp.

4.3. Digestión artificial (trípsica) para el diagnóstico de Sarcocystis spp.

En el diagnóstico de Sarcocystis spp. se sigue el método de Erber (1977) modificado


a posteriori por nosotros a raíz de la experiencia adquirida a través de un gran número de
digestiones de musculatura esquelética, corazón e incluso cerebro; ya que, en todas estas
estructuras pueden albergarse los quistes producidos por este protozoo parásito.
La técnica se basa en una digestión trípsica muy suave, simulando la digestión que se
produce en el duodeno de los hospedadores, ya que la tripsina producida en el páncreas se
vierte al duodeno y no al estómago. De esta forma, los quistes de Sarcocystis spp. quedan
libres de las fibras musculares o tejidos en los que se alojen, para que puedan ser observados
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al microscopio.
El material necesario para llevar a cabo la técnica es el siguiente:

•• Picadora eléctrica.
•• Báscula digital.
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•• Recipiente de al menos 500 ml de capacidad con tapadera.


•• 10 gramos de muestra problema.
•• 0,13 gramos de tripsina.
•• 50 ml de PBS. Esta solución tampón debe tener un pH básico o neutro, con lo que debe
oscilar entre un pH de 7 a 7,2 (ajustar si el pH resultante es diferente). Los componentes
necesarios son:

NaCl............................................................................................... 8,77 g
Na2HPO4.2H2O.............................................................................. 1,37 g
NaH2PO4.H2O................................................................................ 0,318 g
H2O destilada................................................................................. 1.000 ml

•• Agitador orbital.
•• Embudo.
•• Gasa o filtro de 600-700 micrómetros.
•• Tubo de centrífuga de 50 ml con tapadera.
•• Centrífuga.
•• Pipetas Pasteur.
•• Portas y cubres.
•• Microscopio óptico.

Los pasos a seguir son los siguientes:

1. El primer paso consiste en preparar la muestra que vamos a digerir, para lo cual, procede-
mos a triturar aproximadamente 10 gramos (pesados con anterioridad en la báscula) del
tejido muscular o nervioso que queremos someter a estudio. A estos 10 gramos de mues-
tra, le añadimos 0,13 gramos de tripsina y 50 ml de PBS en el recipiente con tapadera, y
lo homogeneizamos adecuadamente.
2. Una vez hecho todo lo anterior, en los casos de musculatura esquelética y corazón, se
procede a incubar la mezcla a 22 °C en agitación suave (100 rpm) durante 8 minutos en
el agitador orbital (simulando las condiciones de la digestión en el hospedador). En el
caso del cerebro, se procede a simple agitación manual durante sólo 4 minutos. En caso
de no disponer de incubador o centrífuga refrigerada, la incubación puede realizarse a
temperatura ambiente.
3. Pasados los 8 minutos de digestión, se filtra el contenido de la digestión través de una gasa
de 600-700 micrómetros (aproximadamente doble gasa) y embudo, pasando el material
filtrado al tubo de centrífuga de 50 ml con tapadera. Es conveniente presionar la gasa
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una vez filtrado el líquido, para exprimir el jugo e incrementar el número de los posibles
quistes de Sarcocystis spp.
4. El líquido de digestión resultante del filtrado se centrifuga a 1.000 rpm durante 10 minutos
a una temperatura baja (entre 1 y 3 °C) para detener la digestión de la muestra ya que los
quistes son muy lábiles y se rompen con facilidad. Finalmente, se elimina el sobrenadante
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y se van tomando pequeñas gotas del sedimento con una pipeta Pasteur para observarlas
(colocadas entre portaobjetos y cubreobjetos) al microscopio óptico. La observación al
microscopio debemos realizarla con el diafragma cerrado en busca de quistes septados
completos o zoítos libres.

5.  EXAMEN DE PIEL

La identificación de los parásitos existentes en la piel, puede verificarse a simple vista


tras su recogida con pinzas o simple cepillado (piojos, pulgas, garrapatas, etc.), o bien tener
que recurrir a exámenes microscópicos después de un procesamiento en el laboratorio de la
muestra obtenida por el raspado.

5.1. Investigación microscópica para el diagnóstico de ácaros: raspado de piel

Toma de muestra
El raspado debe realizarse de las zonas enfermas o sospechosas de la piel, a ser posible
de las regiones últimamente atacadas o bien de los límites entre zonas sanas y enfermas.
Después de cortar con las tijeras el pelo o la lana, conviene eliminar las costras o escaras
más gruesas y superficiales antes de realizar el raspado. Se raspa con la ayuda de un bisturí,
haciéndolo profundamente hasta que se produzca una leve hemorragia. Este material se
recogerá en una placa de Petri u otro recipiente de boca ancha, para asegurarse que nada
del material raspado se pierda. El material debe tomarse, a ser posible, de distintos lugares y
en cantidad suficiente.

Remisión de la muestra
El raspado debe mandarse al laboratorio en la placa de Petri o el recipiente utilizado para
la recolección, cerrado e identificado adecuadamente, junto con la hoja de bisturí empleada.

Tratamiento de la muestra: aclarado en KOH al 5-10%


El raspado se coloca en un vidrio de reloj y se añade potasa para ayudar a la disgrega-
ción y aclarado de las costras y restos de la piel, y así poder visualizar más fácilmente los
posibles ácaros (huevos, formas larvarias y/o adultas) al estereomicroscopio. Mediante una
pipeta Pasteur, algunos ejemplares deben trasladarse a un portaobjetos para su observación
microscópica e identificación morfológica.
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En el caso de posible sarna por Octodectes cynotis (sarna auricular), la muestra se tomará
con un bastoncillo de algodón de los pabellones auditivos afectados.
La mayoría de los ácaros de la sarna se diagnostican con la ayuda del estereomicrosco-
pio. No obstante, ante la dificultad que entraña el diagnóstico de la sarna ocasionada por
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Demodex spp., el material del raspado se aclarará directamente sobre el portaobjetos y se


observará también al microscopio óptico (con los objetivos de 4x o 10x) para la observación
de estos ácaros.
Una vez realizada la mezcla, se calienta a la llama del mechero al mismo tiempo que
se disgregan y rompen las escaras y costras con la hoja del bisturí. Posteriormente, se observa
al estereomicroscopio y finalmente se recogen con una pipeta Pasteur una porción de la
muestra conteniendo ácaros para identificarlos a mayores aumentos al microscopio.

5.2. Miasis

Para conocer la especie causante de la miasis, se deben recoger las larvas III y enviarlas
a un laboratorio especializado para su identificación. Para ello debemos extraer las larvas
con unas pinzas de la herida y meterlas en un recipiente que permita la entrada de aire, ya
que son aerobias, y enviarlas en condiciones de refrigeración si van a estar expuestas a altas
temperaturas.

6.  EXAMEN DE VÍSCERAS

Mediante ella pretendemos hallar formas parasitarias adultas, larvarias o elementos de


diseminación de los parásitos en su localización orgánica.

6.1. Investigación de parásitos intestinales

–– Se procede a la apertura de distintos tramos, tanto del intestino grueso como el delgado.
Además de esto, se realiza un lavado de la mucosa intestinal filtrándose el contenido y
recogiéndose en recipientes adecuados.
–– El material anterior se visualiza al estereomicroscopio, y posteriormente se realiza la iden-
tificación del parásito y contaje.
–– Hay casos clínicos en los que es necesario realizar un raspado de la capa mucosa intesti-
nal, e investigar la posible presencia de formas parasitarias al microscopio (Por ejemplo,
los coccidios).

6.2. Investigación de parásitos en abomaso y estómago de monocavitarios


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–– Se procede a la apertura de la víscera por su curvatura mayor y se observa sobre la mucosa


la presencia de parásitos adultos o formas larvarias.
–– Posteriormente, se realiza un lavado de dicha mucosa, procediéndose del mismo modo
que en el apartado 6.1.
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6.3. Investigación de parásitos en pulmón

–– Se lleva a cabo la apertura del aparato respiratorio, comenzando por tráquea, posterior-
mente bronquios grandes, medianos y bronquiolos, hasta llegar a la parte apical del pul-
món, tratando de evidenciar nematodos broncopulmonares en ese recorrido.
–– Así mismo, se realiza un raspado con un cubreobjetos sobre el parénquima pulmonar y luz
bronquial, se coloca sobre un portaobjetos y se examina al microscopio para hallar larvas
de nematodos, fáciles de evidenciar, en caso de positividad, por sus activos movimientos.
–– Para aislar 3 ó 4 larvas de diferentes parásitos pulmonares puede procederse a la digestión
pépsica del órgano (o parte proporcional del mismo) siguiendo el método descrito en el
apartado 4.2.

6.4. Investigación de parásitos en hígado

–– Observación y palpación de la víscera.


–– Recoger con la ayuda de una jeringuilla el líquido biliar, previamente homogeneizado,
para posteriormente examinar varias gotas de éste al microscopio óptico y poder visualizar
elementos de diseminación de los parásitos hepáticos.
–– Abrir los canalículos biliares y presionar para que salgan los distintos parásitos.
–– Recogida de los mismos e identificación al microscopio.
–– Al igual que en pulmón se pueden aislar larvas parasitarias en el hígado mediante digestión
pépsica del órgano.

6.5. Investigación de parásitos en corazón

–– Apertura de la víscera según necropsia reglada.


–– Visualización directa de las formas parasitarias adultas y jóvenes de Dirofilaria immitis en
carnívoros. Además de lo anterior, se realiza una observación de la arteria pulmonar, donde
también se localiza este nematodo.

6.6. Investigación de formas larvarias de la familia Taeniidae

Cisticerco
–– Observación directa en su localización habitual (hepatoperitoneo o musculatura). R
­ ecogida
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del material sospechoso y visualización al estereomicroscopio.

Coenuro
–– Apertura de la cavidad craneana y observación de la superficie encefálica. Posteriormente,
se identifica la forma parásita del mismo modo que en el caso anterior.
66

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Estos dos parásitos pueden comprimirse e incluirse en un recipiente con formol al 10%
con el fin de obtener preparaciones permanentes.
Posteriormente, se incluirían en una cadena de montaje de cestodos (adultos o este tipo
de formas larvarias), la cual incluye:

1. Inclusión en alcohol de 70°.


2. Tinción con Carmín acético durante 24 horas (fórmula magistral).
3. Decoloración con alcohol-clorhídrico (hasta que se visualicen adecuadamente las estruc-
turas del parásito).
4. Pases de 5 minutos por una cadena ascendente de alcoholes (70°, 80°, 90°, 90°, alcohol
absoluto y xileno).
5. Montaje en portaobjetos con bálsamo de Canadá o “Eukitt”.

Quiste hidatídico
–– Observación macroscópica del quiste en los distintos órganos donde es frecuente su pre-
sencia (hígado, pulmón, riñón, corazón).
–– Punción de la membrana quística con la ayuda de una jeringuilla para la extracción del
líquido hidatídico.
–– Rotura de la membrana quística y raspado de la arenilla hidatídica con un cubreobjetos.
–– Todo el material anteriormente recogido se lleva al microscopio donde:

•• Si hay existencia de protoescólex es un quiste fértil.


•• Si no hay protoescólex es un quiste infértil.

Finalmente, en el caso de que sea FÉRTIL, la preparación se colorea con una gota de
violeta de Genciana, y:

•• Si los protoescólex se tiñen, son no viables.


•• Si los protoescólex no se tiñen, son viables.

Las formas larvarias de Taeniidae spp. pueden conservarse en formol al 10% o en alcohol-
formol (10% de formalina al 35%-40% y 90% de alcohol de 70°). Por otra parte, los protoes-
cólex procedentes del quiste hidatídico se conservan en formol al 5%.

7.  EXAMEN DE ORINA Y SECRECIONES


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7.1. Orina

La vejiga urinaria de los carnívoros es asiento del nematodo Capillaria plica, aunque
más raramente se puede encontrar en los riñones y pelvis renal otro nematodo denominado
Dioctophyma renale.
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Los huevos de ambos nematodos parásitos son evidenciables en orina. Para ello, se deja
sedimentar en una copa de base acuminada (o tubo de ensayo), o bien se realiza una centri-
fugación rápida, observando en ambos casos el sedimento al microscopio óptico, tal y como
se hace en las técnicas de coprología.

7.2. Secreciones vaginal, uterina y prepucial

La obtención de este material biológico está justificado en orden a la búsqueda de distin-


tas especies del género Trichomonas y Trypanosoma equiperdum.
Las secreciones son obtenidas mediante el lavado con solución fisiológica templada de
cloruro sódico, o bien mediante cucharilla. El producto resultante conviene mantenerlo a
refrigeración (no inferior a 5 °C), ya que si se produce la desecación, los protozoos se conser-
van vivos poco tiempo (menos de 24 horas).
El estudio de las secreciones se lleva a cabo a través del microscopio óptico y mediante
cultivos.

7.3. Secreción nasal

El estudio de la secreción nasal está indicado en pequeños rumiantes y cánidos que


presentan un abundante flujo nasal, para la búsqueda de larvas de Oestrus spp. en ovejas y
cabras, y huevos de Linguatula serrata en perros (este último caso clínico es de muy escasa
frecuencia).
El examen se realiza directamente al microscopio, teniendo en ocasiones que mezclar el
exudado con ácido acético.

7.4. Saliva

Se toman muestras de saliva en el caso de la evidencia en la mucosa de la boca y faringe


de palomas y pavos de Trichomonas gallinae. El diagnóstico debe realizarse lo más rápida-
mente posible, ya que se deterioran con prontitud, haciéndose frotis a partir de buche, boca
y faringe, siendo fácil la investigación por el movimiento vivaz del parásito.

8.  REALIZACIÓN Y EXAMEN DE BIOPSIAS


MANUALES UEX

En este apartado estudiamos diferentes técnicas de obtención de muestras sobre el animal


vivo para el diagnóstico de posibles parasitosis. Va sobre todo encaminado al diagnóstico de
leishmaniosis canina y de theileriosis (fase linfocítica), ambas de elevada presentación en
nuestro entorno. Se fundamentan en la obtención de tejido procedente de ganglio linfático,
médula ósea y piel.
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8.1. Biopsia ganglionar

En concreto, se trata de una biopsia de aspiración, ya que se obtienen muestras de un


órgano de consistencia elevada, teniéndose que dislacerar el tejido para obtener una pequeña
muestra celular. Va encaminada al diagnóstico de las formas viscerales de leishmaniosis y
fase linfoide de la theileriosis.

Técnica
–– Los dos posibles ganglios para la toma de muestras más importantes son el poplíteo (en el
perro situado en la cara flexora de la articulación de la rodilla, muy superficial y sobre
el músculo gastronemio) y el preescapular sobre la articulación del encuentro.
–– Rasurar la zona de intervención y desinfectar.
–– Fijar el ganglio perfectamente con una mano, intentando que la piel quede bien tensa.
–– La aguja o trocar que se emplee podrá ser de diferentes calibres en función del volumen
del ganglio, la cual se introduce mediante un acto rápido y se coloca aproximadamente en
el centro de la masa ganglionar.
–– Dislacerar el tejido mediante movimientos rotacionales y laterales.
–– Conectar la jeringa (estéril y de amplio volumen; de 5 a 10 ml) y aspirar con el émbolo al
máximo.
–– Por último, sólo queda extraer mediante un movimiento rápido el conjunto aguja-jeringa en
la que quedará alojada las suficientes células para posteriormente realizar el frotis y tinción
por métodos hematológicos usuales.

8.2. Biopsia medular

Se trata de otra biopsia de aspiración, que da mejores resultados para el diagnóstico de la


leishmaniosis visceral. Las agujas a emplear (trocar) son de tipo Salah.
Es preciso elegir para la punción un hueso que contenga médula hematopoyética activa
(roja). Si por error, la punción recae sobre médula grasa (amarilla), la muestra obtenida con-
tará solamente de grasa y algunas gotas de sangre.

Técnica
–– Colocar al animal en decúbito lateral derecho, con la extremidad izquierda sobre el costi-
llar, para así poder evidenciar el esternón. También puede realizarse sobre la cresta ilíaca.
–– Cortar el pelo, afeitar y desinfectar la zona a intervenir, que suele ser la 2ª-3ª esternebra o la
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cresta ilíaca, la cual se anestesia localmente por infiltración en zonas subcutáneas próximas
del periostio, el cual es muy sensible.
–– Desinfectar de nuevo la zona e insertar la aguja hasta alcanzar el hueso.
–– Retirar el fijador o mandril, conectar la jeringa y retirar el émbolo bruscamente. Brotará en
pequeño chorro fragmentos de médula ósea con algo de sangre.
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8.3. Biopsia de piel

Va encaminada a la detección de leishmaniosis cutánea, onchocercosis, etcétera.


Podrá realizarse con bisturí para obtener una pequeña porción de tejido (Onchocercosis)
o con la punta de una aguja tomando la muestra de la base de la úlcera.

9.  DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO

En la actualidad muchas de las enfermedades parasitarias son diagnosticadas gracias a


la utilización de técnicas que ponen de manifiesto la existencia de respuesta inmunológica
(anticuerpos específicos) en sangre frente a los agentes extraños.
Los parásitos generan desde las primeras semanas una fuerte respuesta de anticuerpos que
pueden ser puestas de manifiesto mediante estas técnicas de inmunodiagnóstico.
La detección precoz de las infecciones parasitarias a través de dichos métodos, se muestra
como una de las medidas de control más efectivas, ya que posibilita una mayor efectividad
terapéutica de los medicamentos empleados, al ser utilizados en fases precoces de la infec-
ción. También se consigue una mejor monitorización del proceso parasitario a través del
análisis de las respuestas inmunológicas, ya que la evidencia de la efectividad terapéutica se
ve reflejada en un descenso de la cantidad de anticuerpos en sangre como consecuencia de
la muerte de los parásitos.
Existen diferentes métodos de inmunodiagnóstico, entre los que se encuentra la técnica
inmunoenzimática micro-ELISA indirecto de dobles anticuerpos, que ha demostrado ser
una de las más eficaces y fiables en multitud de estudios seroepidemiológicos, permi-
tiendo en diferentes países el conocimiento de la distribución de las parasitosis y de su pre-
valencia.
Su realización sólo requiere de una pequeña muestra de sangre del animal sospechoso
para su análisis en el laboratorio.

9.1. ELISA indirecto

Mediante la técnica ELISA indirecto se determinan diferentes tipos y subtipos de inmuno-


globulinas (anticuerpos) producidas frente a distintos antígenos del parásito (Fig. 7).
Así, el antígeno soluble empleado en dicha técnica puede ser la totalidad de las proteí-
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nas del parásito (proteína total del parásito), determinadas fracciones del mismo o diferentes
proteínas recombinantes obtenidas por ingeniería genética.
Tras tapizar las placas con el antígeno parasitario a la concentración deseada, a cada
pocillo se le añaden 100 µl del fluido problema, diluido a la concentración adecuada en
buffer carbonato, PBS u otra solución de pH apropiado, según el tipo de antígeno. Dichas
70

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diluciones son seleccionadas durante la estandarización de la técnica, y tras la titulación


del nivel de anticuerpos de distintos sueros positivos y negativos (controles) que permiten,
en cada caso, la obtención de la mejor y mayor diferenciación entre valores de reactividad
positivos y negativos.
Tras la incubación a 37 °C durante 30 minutos y posterior lavado, se añaden 100 µl del
conjugado anti-especie de elección en cada caso (anti-inmunoglobulina marcada con peroxi-
dasa); y a la concentración idónea previamente determinada. Se somete a una nueva incuba-
ción de 30 minutos a 37 °C, y después a un nuevo lavado para eliminar las inmunoglobulinas
que no hayan reaccionado con el complejo antígeno-anticuerpo.
Posteriormente, se añaden 100 µl de substrato cromógeno a cada pocillo. Dicho substra-
to, en presencia de peroxidasa, tomará una coloración que variará según el substrato usado
(TMB, OPD, ABTS, etcétera) con una intensidad proporcional a la cantidad de anticuerpos
fijados al antígeno. Este substrato se elabora como máximo quince minutos antes de ser uti-
lizado, debido a la poca estabilidad del preparado.
La reacción enzimática debe leerse cuando el control positivo alcanza una DO idónea,
generalmente al cabo de unos 10-30 minutos de incubación a temperatura ambiente. La
reacción puede pararse añadiendo a cada pocillo 50 µl de H2SO4 3N. La lectura se realiza
en un espectrofotómetro a la longitud de onda determinada según el sustrato utilizado (A490,
A450, etc.) en un lector de placas de ELISA después de haber observado a simple vista si existen
errores o coloraciones anormales.
Para comprobar que todos los pasos de la técnica han sido realizados correctamente,
es necesario reservar unos pocillos en cada placa para realizar los controles de conjugado,
positivos y negativos (Fig. 7).

MANUALES UEX

Figura 7.  Placa de ELISA


con pocillos
de distinta coloración,
en función
de la seroreactividad
frente a Leishmania
infantum.
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Para el control del conjugado, se utilizan pocillos sin suero problema, siendo éste susti-
tuido por PBS 1x con Tween-20 y continuando los demás pasos rutinariamente. Este control
nos puede dar información sobre errores de procedimiento tales como procesos de lavado
inadecuado o reactivos en mal estado. Como control positivo (introducido en cuatro pocillos)
se utiliza un suero conocido obtenido de un animal infectado por el parásito. Como control
negativo, se utiliza el suero de un animal sano y libre de la infección por el parásito, intro-
duciéndose ambos en varios pocillos. Las muestras se realizan por duplicado o triplicado por
el mismo motivo.
La correcta realización de la técnica queda garantizada por la repetitividad mostrada por
estos controles tras la lectura de las placas.
Es importante señalar que la seropositividad de un animal sospechoso, implica que tiene
anticuerpos específicos contra un parásito, y que por tanto ha tenido algún contacto con éste,
pero no necesariamente refleja una infección actual, y en caso de existir, puede ser inde-
pendiente de que se manifieste o no la enfermedad, o de gravedad de la misma. La interpre-
tación correcta de la seropositividad y su intensidad depende en extremo del tipo de parásito,
su prevalencia, su ciclo biológico y la interacción con el sistema inmune del hospedador
que se deriva del mismo. Así, en enfermedades como la leishmaniosis, será además nece-
sario el análisis en profundidad del paciente, para comprobar a qué estado de enfermedad
se corresponde el diagnóstico serológico positivo, que puede variar desde el asintomático u
oligosintomático al claramente patente, con daños orgánicos severos que imposibiliten su
recuperación total.

9.2. Inmunofluorescencia indirecta

La técnica de Inmunofluorescencia Indirecta (IFI) es una prueba inmunológica de carác-


ter diagnóstico que se utiliza para la detección de anticuerpos específicos frente a parásitos,
bacterias, virus, etc. Estos anticuerpos son producidos por el individuo tras su contacto con
un determinado microorganismo. Entre estos agentes podemos destacar algunos parásitos
como Leishmania infantum y piroplásmidos, tales como Theileria spp. y Babesia spp. en los
que esta técnica es muy útil.
Esta técnica es básicamente similar a la del ELISA indirecto, en la que el conjugado no
está marcado con una enzima, sino con una sustancia fluorescente que detecta el inmuno-
complejo resultante de la unión Antígeno-Anticuerpo (Ag-Ac). Podremos constatar la existen-
cia de esta reacción mediante un microscopio de epifluorescencia.
Los pasos a seguir para realizar esta prueba son:
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–– En primer lugar, debemos preparar una serie de diluciones, que varían normalmente entre
1/40 y 1/1.280, con la ayuda de una solución tampón fosfato (PBS) de pH neutro o ligera-
mente básico (compuesta por agua bidestilada, NaCl, NaH2PO4.2H2O y Na2HPO4.2H2O) y
añadiendo posteriormente el suero o plasma problema.
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–– Enfrentaremos estas diluciones al antígeno correspondiente que tendremos fijado en un


portaobjetos con acetona y conservado en congelación.
–– Incubaremos durante 30 minutos a temperatura ambiente para favorecer así la unión entre
el antígeno y el anticuerpo.
–– Posteriormente, realizaremos tres lavados de los portaobjetos de cinco minutos cada uno
a 37 °C con la solución PBS. De esta manera, se eliminarán restos de suero o plasma y
antígeno sobrante.
–– Después añadiremos el conjugado e incubaremos 30 minutos más a temperatura ambiente
para que, de esta manera, se realice la fijación con el inmunocomplejo (si lo hubiera).
–– Seguidamente, haremos otros tres lavados de cinco minutos cada uno con PBS a 37 °C,
eliminándose así el exceso de conjugado que no se ha unido de forma específica al inmu-
nocomplejo.
–– Tras estos pasos, añadiremos sobre el portaobjetos una pequeña cantidad de Glicerina
tamponada con PBS (pH = 7,2) y pondremos un cubreobjetos encima.

Por último, se observarán los portaobjetos en el microscopio de epifluorescencia para


realizar la lectura de las muestras.
Para comprobar que la prueba ha sido realizada correctamente, se utilizan dos controles
testados previamente. Uno de ellos negativo y el otro positivo. Además, estos sueros se utili-
zan como referencia para la determinación del título del resto de las muestras.

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Figura 8.  Resultado positivo mediante IFI de un caballo frente a Theileria equi.
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En la Unidad de Parasitología de nuestra Facultad se aplica este tipo de diagnóstico


principalmente para la detección de anticuerpos frente a Theileria equi y Babesia caballi en
équidos, T. annulata y B. bigemina en bóvidos y B. ovis en pequeños rumiantes. También se
utiliza para la detección de Leishmania infantum en cánidos.
MANUALES UEX

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III. LÁMINAS DE IDENTIFICACIÓN

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Ooquistes de Cryptosporidium sp. (tinción de Ooquistes de Cryptosporidium sp. (tinción de


Heine). Ziehl-Neelsen).

Ooquistes de Eimeria sp. Quiste de Balantidium coli (1) y ooquiste de


Eimeriidae sp. (2).
MANUALES UEX

Huevos de Dicrocoelium dendriticum. Huevos de Fasciola hepatica y D. dendriticum.


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Cápsulas ovígeras de Dipylidium caninum. Huevos de Taeniidae sp.

3 3
2

Huevos de Moniezia benedeni (1), Strongylida Huevos de Moniezia benedeni (1), Strongylida
sp. (2) y ooquistes de Eimeriidae sp. (3). sp. (2) y Nematodirus sp. (3).

MANUALES UEX

Larva 1 de Dictyocaulus viviparus. Larva 1 de Muellerius capillaris.


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Huevo de Passalurus ambiguus. Huevo de Trichuris vulpis.

Huevo de Capillaria plica (en orina). Huevo de Ascaris suum.

1
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Huevos de Toxascaris leonina (1) y Toxocara Huevo de Ascaridia galli.


canis (2).
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Babesia canis (piroplasmas). Theileria annulata (piroplasmas).

Haemoproteus columbae (gametocitos). Hepatozoon canis (gametocitos).

MANUALES UEX

Larva 1 de Dirofilaria immitis (microfilaria). Leishmania infantum (promastigotes


y amastigotes).
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Sarcocystis miescheriana. Trichinella spiralis.

Demodex canis. Psoroptes equi cuniculi.


MANUALES UEX

Sarcoptes scabiei suis. Ctenocephalides canis (Siphonaptera).


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IV. LÁMINAS DE LESIONES

MANUALES UEX

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Perro afectado de Leishmaniosis. Cultivo celular de Leishmania sp.

Bazo de un perro con Leishmaniosis. Lesiones dérmicas por Leishmaniosis.


MANUALES UEX

Coccidiosis hepática en conejo. Coccidiosis intestinal en cordero (hiperplasia de


placas de Peyer).
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Diarrea en cordero y lesiones entéricas e hipertrofia de la cadena ganglionar causadas


por Cryptosporidium spp.

Pseudoquiste de Toxoplasma gondii. Quistes de Sarcocystis gigantea en esófago ovino.

MANUALES UEX

Hígado de un cabrito de 3 meses con fasciolosis Moniezia spp. (Cestoda) en intestino de cordero.
aguda (Fasciola hepatica). Hepatitis hemorrágica
traumática.
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F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

Adultos de Taenia sp. en intestino de perro. Nódulos en intestino de jabalí causados


por Macracanthorhynchus hirudinaceus.

M. hirudinaceus en la mucosa del intestino de Quistes hidatídicos en pulmón de cerdo


un porcino. (Echinococcus granulosus).
MANUALES UEX

Quiste hidatídico en hígado de cerdo. Cisticercosis hepatoperitoneal por Taenia ­pisiformis


en una liebre.
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Coenuro de Taenia multiceps en cerebro de oveja Adultos de Dirofilaria immitis en el corazón de


(Coenuro cerebralis). un perro.

Adultos de Ascaridia galli en el intestino de una gallina. Adultos de Ascarops strongylina en la mucosa
gástrica de un cerdo.

MANUALES UEX

Lesiones hepáticas en un lechón, causadas por la Nódulos en pared gástrica de un perro con adultos
migración larvaria de Ascaris suum (“Manchas de de Spirocerca lupi.
leche”).
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Adultos de Dictyocaulus filaria en vías respiratorias Lesiones pulmonares en cerdo causadas


altas de ovino. por Metastrongylus spp.

Sarna psoróptica ovina (Psoroptes ovis). Sarna sarcóptica ovina (Sarcoptes scabiei var. ovis).
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Hiperqueratosis generalizada en sarna sarcóptica Sarna demodécica en perro: alopecia, ­descamación


porcina (Sarcoptes scabiei var. suis). y ulceración de la dermis (Demodex canis).
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Sarna demodécica generalizada (fase pustulosa). Hembras de Ixodes ricinus en una cabra montesa.

Ictericia en la conjuntiva, edema subcutáneo, y hemoglobinuria intensa en un équido con piroplasmosis


por Theileria equi.
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Descarga nasal en una oveja por oestrosis Edema submandibular (“papo”) en un ovino
(Oestrus ovis). ­causada por Haemonchus contortus.
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Miasis cutánea furuncular en perro. Miasis cutánea prepucial en ovino (Wohlfahrtia


magnífica).

Miasis cutánea vulvar en ovino (Wohlfahrtia mag- Conejo con lesiones por Psoroptes sp.
nífica).
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Miasis cavitaria por Oestrus ovis. Infestación por Rhipicephalus bursa en un toro.
88

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ANEXO 1. TAXONOMÍA

INTRODUCCIÓN

La clasificación taxonómica de los parásitos está cambiando considerablemente en las


últimos años gracias al desarrollo de la biología molecular y los estudios ultraestructurales,
que han permitido conocer mucho mejor la filogenia de los eucariotas.
Los protozoos o protistas no se consideran ya una rama separada ni de organismos
celulares autotróficos como las algas o los cromistas, ni de los clásicos reinos Animalia,
Fungi y Plantae. No hay un consenso sobre
la clasificación concreta de los grandes gru- Eukaryota
pos taxonómicos, pero en cualquier caso se Amoebozoa
aceptan diversos grupos, de los que surgen
Archaeplastida
formas de vida heterótrofa, autotrófica o mixta,
Plantae
y en algunos, ramas evolutivas multicelulares
en diversos momentos. Chromalveolata
Excavata
Así por ejemplo, en los seis grupos princi-
Opisthokonta
pales (equivalentes a reinos) de la clasificación
de Adl et al. (2005) que se muestran en el cua­ Animalia
dro siguiente, hay protozoos en todos ellos, Fungi
junto a seres multicelulares y protistas no con- Rhizaria
siderados como protozoos. Así por ejemplo,
el protozoo parásito Toxoplasma gondii ­tiene Clasificación, según Adl et al. (2005), de los
un ancestro común más cercano con un alcor- grandes grupos de eucariotas (en azul) mos-
trando la ubicación en ellos de los clásicos
noque o una diatomea, que con otros pro- reinos de seres multicelulares (en rojo).
tozoos parásitos como Entamoeba histolytica,
o Leishmania infantum, a su vez más empa-
MANUALES UEX

rentada con las algas verdes unicelulares (Euglena spp.) que con todos los anteriores. En
otras palabras, el reino Protozoa es parafilético, ya que se excluye a ciertos descendientes
protozoos. No obstante, siguiendo a Cavalier-Smith seguiremos considerándolo un reino
independiente, aunque sin olvidar que, en puridad, tal reino no existe, al menos desde un
punto de vista filogenético.
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ANEXO 2. PRINCIPALES GÉNEROS PARÁSITOS
SEGÚN HOSPEDADORES Y LOCALIZACIONES ORGÁNICAS

RUMIANTES
APARATO DIGESTIVO Teladorsagia
Protozoos Strongyloides
Cryptosporidium Trichostrongylus
Eimeria Trichuris
Trematodos
Paramphistomum HÍGADO
Cestodos Trematodos
Avitellina Dicrocoelium
Moniezia Fasciola
Stilesia Cestodos
Thysaniezia Echinococcus
Nematodos Cysticercus
Bunostomun
Capillaria APARATO RESPIRATORIO
Chabertia Cestodos
Cooperia Echinococcus
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Gongylonema Nematodos
Haemonchus Cystocaulus
Nematodirus Dictyocaulus
Neoascaris Muellerius
Oesophagostomun Neostongylus
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Protostrongylus Artrópodos
Artrópodos Arácnidos
Insectos Ácaros de la sarna
Oestrus Chorioptes
Demodex
APARATO UROGENITAL Psoroptes
Protozoos Sarcoptes
Tritrichomonas Dermanyssus
Ixódidos
SANGRE Boophilus
Protozoos Dermacentor
Babesia Haemaphysalis
Theileria Hyalomma
Trypanosoma Ixodes
Rhipicephalus
MÚSCULO Insectos
Protozoos Anopluros
Sarcocystis Haematopinus
Toxoplasma Linognathus
Cestodos Ischnoceros
Cysticercus Damalinia (Bovicola)
Columbicola
SISTEMA NERVIOSO Goniodes
Protozoos Dípteros
Sarcocystis Calliphora
Toxoplasma Culex
Neospora Haematobia
Cestodos Hyppobosca
Coenuro Hypoderma
Lucillia
SACO CONJUNTIVAL Melophagus
Nematodos Sarcophaga
Thelazia Simulium
Stomoxys
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PIEL Y TEJIDO SUBCUTÁNEO Wohlfahrtia


Nematodos
Onchocerca
Parafilaria

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ÉQUIDOS
APARATO DIGESTIVO APARATO UROGENITAL
Protozoos Protozoos
Cryptosporidium Trypanosoma
Eimeria
Cestodos SANGRE
Anoplocephala Protozoos
Paranoplocephala Babesia
Nematodos Theileria
Cyathostomun Trypanosoma
Cylicocylus
Draschia MÚSCULO
Habronema Protozoos
Oxyuris
Sarcocystis
Parascaris
Nematodos
Strongyloides
Trichinella
Strongylus
Trichostrongylus
SACO CONJUNTIVAL
Triodontophorus
Nematodos
Artrópodos
Thelazia
Gasterophilus

CAVIDAD ABDOMINAL
HÍGADO
Nematodos
Trematodos
Dicrocoelium Setaria
Fasciola
Cestodos PIEL Y TEJIDO SUBCUTÁNEO
Echinococcus Nematodos
Habronema
APARATO RESPIRATORIO Onchocerca
Cestodos Artrópodos
Echinococcus Arácnidos
Nematodos Ácaros de la sarna
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Dictyocaulus Chorioptes
Artrópodos Demodex
Insectos Psoroptes
Rhinoestrus Sarcoptes

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Ixódidos Dípteros
Dermacentor Culicoides
Hyalomma Hypoderma
Ixodes Hyppobosca
Rhipicephalus Musca
Haemaphysalis Sarcophaga
Insectos Stomoxys
Anopluros Wohlfahrtia
Haematopinus
Ischnoceros
Damalinia
Sifonápteros
Ctenocephalides
Pulex
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PORCINOS
APARATO DIGESTIVO APARATO UROGENITAL
Protozoos Nematodos
Balantidium Stephanurus
Eimeria
Cryptosporidium SANGRE
Isospora Protozoos
Cestodos Babesia
Diphyllobothrium
Nematodos MÚSCULO
Ascaris Protozoos
Ascarops Sarcocystis
Globocephalus Cestodos
Gongylonema Cysticercus
Hyostrongylus Nematodos
Oesophagostomun Trichinella
Physocephalus
Simondsia PIEL Y TEJIDO SUBCUTÁNEO
Strongyloides Artrópodos
Trichuris Arácnidos
Acantocéfalos Ácaros de la sarna
Macracanthorhynchus Demodex
Sarcoptes
HÍGADO Argásidos
Trematodos Ornithodoros
Dicrocoelium Ixódidos
Fasciola Boophilus
Cestodos Dermacentor
Echinococcus Hyalomma
Cysticercus Ixodes
Rhipicephalus
APARATO RESPIRATORIO Insectos
Cestodos Anopluros
Echinococcus Haematopinus
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Nematodos Sifonápteros
Metastrongylus Pulex
Ctenocephalides

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CARNÍVOROS
APARATO DIGESTIVO APARATO UROGENITAL
Protozoos Nematodos
Cystoisospora Capillaria
Giardia Dioctophyma
Sarcocystis
Toxoplasma SANGRE
Neospora Protozoos
Entamoeba Babesia
Trematodos Nematodos
Alaria Dirofilaria
Plagiorchis Dipetalonema
Cestodos
Diphyllobothrium SISTEMA MONONUCLEAR FAGOCÍTICO
Diplopylidium Protozoos
Dipylidium Hepatozoon
Echinococcus Leishmania
Joyeuxiella
Mesocestoides MÚSCULO
Multiceps Nematodos
Taenia Trichinella
Nematodos
Ancylostoma PIEL Y TEJIDO SUBCUTÁNEO
Capillaria Nematodos
Physaloptera Dipetalonema
Spirocerca Dirofilaria
Strongyloides Artrópodos
Toxascaris Arácnidos
Toxocara Ácaros de la sarna
Trichuris Cheylletiella
Uncinaria Demodex
Notoedres
APARATO RESPIRATORIO Otodectes
Nematodos Sarcoptes
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Capillaria Ixódidos
Aelustrongylus Rhipicephalus

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Insectos Dípteros
Anopluros Calliphora
Linognathus Lucillia
Ischnoceros Sarcophaga
Trichodectes Wohlfahrtia
Sifonápteros
Ctenocephalides
Pulex

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AVES
APARATO DIGESTIVO APARATO RESPIRATORIO
Protozoos Protozoos
Cryptosporidium Cryptosporidium
Eimeria Nematodos
Hexamita Cyathostoma
Histomonas Syngamus
Isospora Artrópodos
Tetratrichomonas Arácnidos
Trichomonas Ácaros de la sarna
Cestodos Cytodites
Amoebotaenia Gamásidos
Choanotaenia Sternostoma
Davainea
Railletina APARATO UROGENITAL
Nematodos Trematodos
Amidostomun Prosthogonimus
Ascaridia
Capillaria SANGRE
Epomidiostomun Protozoos
Heterakis Haemoproteus
Tetrameres Leucocytozoon
Trichostrongylus Plasmodium

HÍGADO
Protozoos
Histomonas
MANUALES UEX

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PIEL Y TEJIDO SUBCUTÁNEO Insectos


Artrópodos Ischnoceros
Arácnidos Columbicola
Ácaros de la sarna Menacanthus
Knemidocoptes Gonicotes
Laminosioptes Gonioides
Gamásidos Lipeurus
Dermanyssus Menopon
Ornithonyssus Hemípteros
Argásidos Cimex
Argas Sifonápteros
Ixódidos Ceratophylus
Haemaphysalis Echidnophaga
Hyalomma
Ixodes

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F. J. SERRANO, E. Mª. FRONTERA, L. C. GÓMEZ, M. Á. HABELA, J. E. PÉREZ, D. REINA…

LAGOMORFOS
APARATO DIGESTIVO APARATO UROGENITAL
Protozoos Nematodos
Cryptosporidium Capillaria
Eimeria
Encephalitozoon MÚSCULO
Giardia Protozoos
Cestodos Sarcocystis
Andrya Toxoplasma
Cyttotaenia
Hymenolepis PIEL Y TEJIDO SUBCUTÁNEO
Mosgovoyia Artrópodos
Nematodos Arácnidos
Capillaria Ácaros de la sarna
Graphidium Notoedres
Nematodirus Psoroptes
Passarulus Sarcoptes
Strongyloides Cheyletiella
Trichostrongylus Gamásidos
Trichuris Ornithonyssus
Ixódidos
HÍGADO Haemaphysalis
Protozoos Hyalomma
Eimeria Ixodes
Trematodos Rhipicephalus
Fasciola Insectos
Dicrocoelium Anopluros
Cestodos Haemodipsus
Echinococcus Sifonápteros
Cysticercus Spilopsyllus
Nematodos Echidnophaga
Capillaria Xenopsylla

APARATO RESPIRATORIO
MANUALES UEX

Nematodos
Protostrongylus

112

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PECES
APARATO DIGESTIVO MÚSCULO, TEJIDO CONECTIVO
Protozoos Y CARTÍLAGO
Ceratomyxa Protozoos
Eimeria Ceratomyxa
Entamoeba Glugea
Glugea Henneguya
Hexamita Myxosoma
Trematodos Pleistophora
Diplostomun Sphaerospora
Cestodos
Bothriocephalus CAVIDAD CORPORAL
Khawia Cestodos
Eubothrium Diphyllobotrium
Nematodos Ligula
Capillaria Nematodos
Acantocéfalos Anisakidae
Echinorhynchus Philometra
Acanthocephalus

SISTEMA VASCULAR Y AGALLAS


Protozoos
Cryptobia
Nosema
Pleistophora
Henneguya
Haemogregarina
Myxosoma
Chilodonella
Trichodina
Tripanoplasma
Trypanosoma
Trematodos
Sanguinicola
MANUALES UEX

Nematodos
Philometra

113

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PIEL Y TEJIDO SUBCUTÁNEO Monogeneos


Protozoos Benedenia
Amyloodinium Dactylogirus
Ceratomyxa Gyrodactylus
Chilodonella Trematodos
Costia (Ichtyobodo) Cryptocotyle
Cryptocarion Moluscos
Dermocystidium Unionidae
Epistylis Anélidos
Glugea Piscicola
Henneguya Artrópodos
Ichthyophtrius Crustáceos
Kudoa (Cloromyxum) Argulus
Oodinium Ergasilus
Pleistophora Lernaea
Sphaerospora
Trichodina
MANUALES UEX

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PORTADA ÍNDICE
MANUAL PRÁCTICO DE PARASITOLOGÍA VETERINARIA

ABEJAS
APARATO DIGESTIVO ECTOPARÁSITOS
Protozoos Artrópodos
Malpighamoeba Arácnidos
Varroa
APARATO RESPIRATORIO Insectos
Artrópodos Dípteros
Arácnidos Braula
Acarapis Senotainia

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115

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69

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