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PRACTICA 03
1. OBJETIVO
- Conocer las técnicas de determinación de grasa y humedad en carne fresca.
- Determinar el contenido de grasa y humedad en muestras de carne.
2. FUNDAMENTO TEÓRICO
Los lípidos son considerados como un grupo de compuestos orgánicos insolubles en agua y
solubles en solventes orgánicos (como por ejemplo éter y cloroformo), con una estructura
química formada por una cadena hidrocarbonada como parte principal de la molécula, y que
se encuentran o se derivan de organismos vivos.
Los ácidos grasos con una doble ligadura se denominan monoinsaturados y los que tienen más
de una doble ligadura en su cadena, se identifican como poliinsaturados. Dependiendo del
número del carbono donde se encuentren las dobles ligaduras (contando a partir del carbono
terminal más cercano a la doble ligadura), se denominan omega 3, 6 ó 9. Los lípidos complejos,
son aquellos que se asocian con otro tipo de compuestos, estos incluyen a los fosfolípidos, los
glucolípidos y los sulfolípidos.
Los términos lípidos, grasas y aceites en muchas ocasiones son utilizados indistintamente. El
término lípidos está asociado a las características de solubilidad, por lo que grasa se utiliza para
referirse a lípidos que son sólidos a temperatura ambiente, mientras que aceite se utiliza para
describir los lípidos que se encuentran en estado líquido a temperatura ambiente.
Comúnmente, para la extracción de grasa en muestras de carne, los éteres se utilizan como
solventes orgánicos que disuelven compuestos no polares (por ejemplo, triglicéridos), pero son
poco eficientes con los lípidos polares (por ejemplo, fosfolípidos) lo que explica por un lado
el por qué la extracción con los éteres resulta en una menor cantidad de grasa
(presumiblemente, no se extraen todos los fosfolípidos) y también porque, en muestras con
mayor cantidad de grasa neutra tienden a ser más eficientes (puesto que extraen una mayor
proporción de grasa).
Contrario a los éteres, las mezclas de cloroformo-metanol se caracterizan por ser una
combinación de un solvente no polar (cloroformo) y uno polar (metanol), lo que permite la
extracción de grasas tanto no polares como de aquellas polares (principalmente fosfolípidos
asociados a membranas celulares), por lo que su uso, permite colectar mayores cantidades de
lípidos en menor tiempo.
Los lípidos de la carne se encuentran principalmente en el tejido adiposo y en la grasa
intramuscular. En el tejido adiposo se localizan principalmente triglicéridos, mientras que en
el tejido intramuscular se encuentran triglicéridos y grasas ligadas a la membrana como
fosfolípidos y lipoproteínas. Entre menor es el contenido de grasa intramuscular, mayor es la
proporción de fosfolípidos de membrana y menor el de triglicéridos.
El contenido de lípidos en la carne fresca varía en función de especie, raza, edad, sistema de
alimentación, etc. pero podemos considerar que un valor cercano al 2.5% pudiera aplicar para
la mayoría de las carnes magras, aunque los valores pueden variar entre 1 y 13 % (USDA,
2008).
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TECNOLOGÍA DE CARNES – Guía de Prácticas 2018
Al decidir que método utilizar, el investigador deberá considerar si solo le interesa conocer la
cantidad total de grasa, o si la grasa recuperada será utilizada posteriormente para otros análisis.
En el caso de que la grasa se vaya a analizar posteriormente para determinar el perfil de ácidos
grasos, se deberá seguir una metodología de extracción en frío, debido a que las temperaturas
elevadas promueven la oxidación de las grasas.
Carmes con menor contenido de grasa Carnes con mayor contenido de grasa
Alimento Grasa Alimento Grasa
58 g de pierna de pollo sin sal 1.2 g 350 g de retazo de pollo 8.9 g
35 g de osobuco de res 1.6 g 25 g de T- bone 6.5 g
25 g de pechuga de pollo a la 1.0 g 38 g de alón de pollo con piel 6.4 g
plancha cocido
30 g de bistec de res 0.8 g 40 g de costilla de res 10.3 g
2 rebanadas de jamón 1.5 g 3 piezas de salchicha Vienna 9.3 g
El contenido medio (en peso) de la carne oscila entre un 70% de agua, un 20% de proteína,
un 7% de grasa y 1% de minerales, claro que las variaciones dependerán del tipo de animal, de
la raza y de su régimen alimentario.
Es por eso, que la determinación de humedad es uno de los análisis más importantes en la
industria cárnica tanto para la carne, las materias primas cárnicas como para los productos
cárnicos durante su elaboración y después de terminados. Entre los métodos más usados se
encuentran aquellos que se basan en la evaporación del agua de la muestra por medio del calor,
suponiendo que toda la materia volatilizada es agua. Si bien esto no es del todo cierto ni tan
simple, se considera para propósitos prácticos que el contenido de agua de la carne y de los
productos cárnicos son las cantidades obtenidas por los métodos oficiales para la
determinación de humedad por secado en estufa.
Varía dependiendo de la especie, la edad, sexo y zona anatómica del tejido. La variación de la
cantidad de agua está directamente relacionada con la variación de la cantidad de grasa (lo
mismo pasa en todos los alimentos). La cantidad de agua en la carne oscila entre 60 y el 80%
y está relacionada con la jugosidad y otros atributos sensoriales como la textura el color o la
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dureza de la carne. El 70% de agua es libre que se encuentra entre los espacios de los filamentos
de actina y miosina, el otro 5% es agua ligada a proteínas.
El método gravimétrico que emplea una estufa, es ampliamente utilizado, sin embargo, existen
otros métodos basados en el calentamiento con microondas o rayos infrarrojos. También
pueden utilizarse métodos no destructivos y rápidos, como los basados en la espectroscopia
de cercano infrarrojo (NIR) y la resonancia magnética nuclear (RMN).
3. MATERIALES Y MÉTODOS
Determinación de grasa
3.1. Materiales y equipos
MÉTODO SOXHLET
- Papel filtro
- Balanza analítica
- Estufa eléctrica
- Hornillas eléctricas
- Baño de agua
- Dispositivo de extracción de Soxhlet con matraz de 250 ml y refrigerante de 250
ml y refrigerante de reflujo.
- Pinza metálica
- Cápsula de porcelana
- Espátula
- Perlas de vidrio
MÉTODO BUTIROMÉTRICO
- Balanza
- 02 Butirómetro de Gerber (0-35)
- Baño maría
- 02 vasos de precipitación de 250 mL
- Centrífuga de Gerber
- Cuchillos
- 01 Tabla de picar
- Agua destilada
- 01 piceta
3.2. Reactivos
Éter di etílico/ éter de petróleo (Método Soxhlet)
Ácido Sulfúrico en solución a 50% (Método Butirométrico).
3.3. Muestras
100 gramos de carne fresca (vacuno, porcino, ovino, aves) identifica de qué tipo de corte
proviene la muestra.
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3.4. Método
A. Método Soxhlet
Metodología
a. Moler y pesar porciones de 2 a 5 g de la muestra seca por duplicado.
b. Colocarlas en el dedal de extracción previamente pesado (M).
c. Pesar los vasos para extracción del sistema de extracción utilizado, previamente
secados y tarado a 102-105 °C por 30 min (M1).
d. Adicionar un volumen apropiado de éter etílico o de petróleo, o la mezcla
cloroformo-metanol 2:1 en el vaso, y colocarla en el sistema de extracción.
e. Dependiendo de la eficiencia del equipo y de si se trabaja o no con presión
modificada, el proceso de extracción puede variar desde 40 min, hasta 6 horas en el
equipo de extracción a una velocidad de condensación de 3 a 6 gotas/seg.
f. Una vez terminada la extracción, eliminar el solvente por evaporación en
rotaevaporador o baño maría bajo campana, hasta que no se detecte olor a éter en
los vasos que contienen la grasa extraída.
g. Secar el vaso de extracción con la grasa en estufa a 103+ 2 °C por 20 a 30 min.
h. Enfriar en desecador y pesar hasta peso constante (M2).
Cálculos
El porcentaje de grasa cruda se calcula de la siguiente manera:
Donde:
M = peso de la muestra
M1= peso del vaso
M2= peso del vaso con la grasa extraída
La concentración de grasa también puede expresarse como porcentaje de grasa en base
húmeda, para lo cual se realiza el cálculo de acuerdo a lo siguiente:
B. Método butirométrico
- Se pesan 3 g de la muestra previamente molida y homogenizada en el vaso especial del
butirómetro.
- Se añade Ácido Sulfúrico en solución a 50% en el butirómetro hasta completar el vaso
que contiene la muestra, después de cual se cierra con un tapón de goma y se coloca
a baño maría a temperaturas entre 65°C-70°C durante 20 minutos. En este tiempo se
toma el butirómetro 3-4 veces y se agita.
- Pasado este tiempo se extrae el butirómetro y se le añade 1 ml de alcohol amílico y
ácido sulfúrico solución 50% hasta la marca 35 del butirómetro. Después de esto se
tapa y agita, virando varias veces.
- Colocar nuevamente a baño maría durante 5 minutos, a la misma temperatura, y
pasado este tiempo se centrifuga 5 min. Después de la centrifugación se coloca sin
agitación el butirómetro a baño maría durante 5 minutos leyéndose posteriormente el
porcentaje de la grasa separada en la escala.
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Determinación de humedad
Materiales y equipos
Espátula.
Crisoles identificados a peso constante.
Pinzas para crisoles.
Metodología
La diferencia entre los resultados de las repeticiones no debe ser superior a 0.1 g de
agua por 100 g de muestra (0.1%).
Cálculos
Los porcentajes de materia seca (%MS) o humedad (%H) se calculan por diferencia
de pesos, de la siguiente manera:
4. RESULTADOS Y DISCUSIONES
Reportar los resultados obtenidos y discutirlos en base a la bibliografía.
5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
Emitir sus conclusiones y recomendaciones en base a los objetivos planteados.
6. BIBLIOGRAFÍA
7. CUESTIONARIO
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