Universidad de Carabobo

Facultad Experimental de Ciencias y Tecnología

Laboratorio de Química Instrumental

Manual para uso del

espectrofotómetro UV-
VISIBLE HP 8452
Paso 1. La interfase de menús más tradicional que aparece en la parte superior de la ventana del
software utilizado para esta práctica es Agilent ChemStation que permite controlar todas las
operaciones. Cuando se elige una opción en la barra de menús, aparece una lista de comandos y
submenús. En este caso, se realizó “click” sobre el bóton de “Method”.

Figura 1. Tabla de menú del Software Agilent ChemStation.

Paso 2. De manera siguiente, se pulsó la ventana “Task” con la finalidad de ofrecer una
representación gráfica del contexto actual con que el que desea trabajar. Este ofreció acceso al
cuadro de diálogos de configuración donde se puede seleccionar la tarea a realizar. Para este caso,
se seleccionó “Spectrum/Peaks”.

Figura 2. Ventana de “tarea” que se desea realizar.

Paso 3. “Spectrum/peaks”. En esta tarea se examinan las absorbancias mínimas y máximas. Aquí
se hace hincapié en la escala de la longitud de onda, y además se obtienen las lecturas de
absorbancias consiguientes.

Figura 4. Opción de “Spectrum/Peaks”

Paso 4. Luego de configurar las modalidades a las que se desean trabajar, se realiza “click” en el
contenedor de “Data type” que son los datos que se especificarán para lo que deseamos obtener.
Éste método define cómo se analizaran los datos. En esta ventana, se seleccionó la opción
“Absorbance”

Figura 5. Ventana para seleccionar el método para analizar los datos.

Paso 5. El siguiente paso del proceso de análisis es el acceso a los datos para una evaluación
posterior especificada en términos de operaciones de longitud de onda y corrección de fondo.

Figura 6. Configuración para introducir los datos del rango de longitud de onda y su corrección.

Paso 6. En este paso, se introduce el blanco y en la pantalla principal (panel de instrumento) del
Software, se observarán varias áreas activas donde se mostrará una figura del funcionamiento del
espectrofotómetro. En este cuadro se dará “click” en la opción “Blank” donde arrojará un espectro
cercano a 0.

Figura 7. Pantalla principal. Figura 8. Medida de un blanco (agua) con buena

Línea de base
Paso 7. Luego de obtener el espectro del blanco, se retira la celda del equipo y se prosigue a
introducir las muestras patrones y seleccionar la opción “Sample” (como se muestra en la figura
7).

Figura 9. Espectro de las muestras. Figura 10. Curva de calibración.

PD: si se desea, en las configuraciones de “menú” (figura 1) se puede obtener de manera

simultánea la curva de calibración donde mostrará en otra ventana inferior, los datos de
correlación (R2), las concentraciones que se están determinando y las absorbancias.

Figura 11. Datos relevantes sobre la muestra y patrones.