CUESTIONARIO 12

1. Es un parámetro que compara la actividad de un desinfectante dado con la del fenol y es

utilizado para medir si un producto es más o menos eficiente para destruir microorganismos
que el fenol

*Determinación: consiste en poner dos series de tubos de ensaye diluciones deldesinfectante,

del que va a probarse su capacidad antimicrobiana. Se ponen cantidadesmedidas de un cultivo
bacteriano de Staphylococcus aureus (u otra bacteria deimportancia medica) en las dos series
de tubos. Se obtienen muestras de cada tubu a los2, 10 y 15 segundos. Se determina entre la
más alta dilución que inhibe el crecimiento bacteriano. Si al final inhibe a la bacteria a una
dilución de 1:100 y el producto a probar lo inhibe a 1:200 quiere decir que es doble de fuerte
que el fenol: mayor a uno son más activos, menor a uno son más débiles que el fenol. Un buen
desinfectante debe tener índice fenólico superior a uno.

2. Detergente: son humectantes y emulsivos, disminuyendo la tensión de dos líquidos no miscibles

para formar una emulsión. Los detergentes aniónicos son bactericidas, perolos catiónicos son
excelentes bactericidas (entre los cuales están los cuaternarios deamonio).

Por lo tanto los detergentes son mejores desinfectantes.

3. *Platinol: Farmaco que utiliza el ion platico como principio activo para tratamientos contra el
cáncer.
*Antiparasitario: La mayoría utilizan el antimonio como principio activo.

4. *Concentracion y tiempo de exposicion: La concentración para obtener un determinado efecto,

así como el rango de concentraciones en que se puede demostrar un determinado efecto,
dependen de:

-tipo químico del desinfectante,

-tipo de microorganismos a eliminar,

-método de ensayo del efecto.

Existe una estrecha relación entre la concentración del agente y el tiempo necesario para matar
una determinada fracción de la población bacteriana
 *Temperatura: Normalmente, al aumentar la temperatura aumenta la potencia de los
desinfectantes. Para muchos agentes la subida de 10 grados supone duplicar la tasa de
muerte. Pero con el fenol, la subida de 10 grados representa multiplicar por 5 o por 8
la eficacia.

*Ph: El pH afecta tanto a la carga superficial neta de la bacteria como al grado de ionización del
agente. En general, las formas ionizadas de los agentes disociables pasan mejor a través de las
membranas biológicas, y por lo tanto son más efectivos.

-los agentes aniónicos suelen ser más efectivos a pH ácidos;

-los agentes catiónicos muestran más eficacia a pH alcalinos.

*Presencia de materiales extraños: La existencia de materia orgánica en el material a tratar afecta

negativamente a la potencia de los desinfectantes de tipo oxidante (como los hipocloritos) y de
tipo desnaturalizante de proteínas, hasta el punto que pueden llegar a hacerlos inactivos en
cuanto a su poder desinfectante y/o esterilizante.

Los principales mecanismos por los que se pierde actividad son:

-adsorción (o sea, absorción superficial) del desinfectante a coloides de proteínas;

-formación de complejos inertes o poco activos;

-unión de grupos activos del desinfectante a proteínas extrañas.

*Naturaleza del microorganismo y otros factores asociados a la población bacteriana:

-Según la especie empleada: p. ej., el bacilo tuberculoso resiste los hipocloritos mejor que otras
bacterias;
-Según la fase de cultivo;
-Dependiendo de la presencia de cápsulas o de esporas (suelen conferir más resistencia);
-Número de microorganismos iniciales.

5.
6.

7.

8. *Superficie o material a desinfectar

*Tipo de microorganismos presentes (Resistencia innata)
 * Edad de los microorganismos
*Numero y localizacion de los microorganismos
*
9. Debido a que las esporas poseen multiples capas que les permite sobrevivir a ambientes
adversos, por lo tanto la presencia de estas estructuras de resistencia que poseen les
confiere la capacidad de poder oponer resistencia a los métodos físicos para su
eliminación y por ello solo pueden ser eliminadas por esterilización o con agentes
químicos que poseen actividad esporicida. Ademas también suelen ser de difícil
eliminación porque muchas esporas permanecen debajo de la superficie dentro de los
poros pequeños, por lo cual tienen poco contacto con el agente quimico.
 10.

*Cabello

*Tortora

*Murray

*Ponce

CUESTIONARIO 13

1. recomendó su uso en forma rutinaria para la realización del antibiograma en medio

sólido, debido a una serie de factores que se detallan a continuación: presenta buena
reproducibilidad lote a lote en las pruebas de sensibilidad, su contenido en inhibidores
 de sulfonamidas, trimetoprima y tetraciclina es bajo, la mayoría de los patógenos crece
satisfactoriamente y una gran cantidad de datos han sido evaluados y avalados usando
este medio de cultivo.

2.
La concentración mínima inhibitoria es importante en diagnósticos de laboratorio para
confirmar la resistencia de microorganismos a un agente antimicrobiano y además para
monitorizar la actividad de los nuevos agentes antimicrobianos

3.

*Eritromicina:

*Tetraciclina:
4.

5. *Alteran la permeabilidad: -Polimixinas: Son polipéptidos catiónicos y básicos que

actúan solamente sobre bacterias Gram negativas. Contienen una cola liposoluble, que
se une a los fosfolípidos de la membrana, y una cabeza hidrofílica. Se comportan como
detergentes catiónicos que desorganizan la superficie externa de la membrana celular
modificando sus propiedades osmóticas por la alteración de los sistemas de transporte
activo y la barrera de permeabilidad selectiva.
-Imidazoles: Alteran la permeabilidad de la membrana celular provocando la filtración
de iones K+ y compuestos con fósforo. Estos cambios en la membrana se deben a una
interferencia en la síntesis de ergosterol del hongo por la inhibición de la enzima 14-
alfa-desmetilasa y la acumulación de 14-alfa-metilesteroles. Son agentes antimicóticos
de amplio espectro, activos contra hongos, levaduras, ciertas bacterias y protozoarios.
-Polienos: Son macrólidos y actúan selectivamente sobre microorganismos que
contienen esteroles en la membrana (hongos, levaduras, micoplasmas, etc). Los
polienos se unen a los esteroles provocando que la membrana sea permeable al K+ y a
moléculas del tamaño de la glucosa a causa de la formación de poros.
6.
Ver copias

7. *Sulfonamidas: Las sulfamidas son bacteriostaticas, es decir, detienen el crecimiento de

las colonias bacterianas. Son antagonistas del ácido paraminobenzoico, imprescindible
para la síntesis del ácido fólico bacteriano. Los microorganismos que son susceptibles a
las sulfamidas requieren del PABA extracelular para la producción del ácido dihidrofólico,
un paso esencial en la producción de las purinas y la síntesis de ácidos nucleicos.6 Las
sulfamidas actúan como análogos estructurales del PABA, inhibiendo competitivamente
a la enzima dihidropteroato sintasa.5 Al bloquear la síntesis del ácido fólico, se inhibe el
crecimiento y reproducción del germen.
*Ceftriaxona: El anillo betalactámico es parte de la estructura de las cefalosporinas, por
lo tanto, la ceftriaxona es un antibiótico betalactámico. El modo de acción de estos
antibióticos es la inhibición de la síntesis de la pared celular de las bacterias,
específicamente por unión a unas proteínas bacterianas llamadas "proteínas ligandos de
la penicilina (PBPs).
*Acido nalidixico: El ácido nalidíxico selectiva y reversiblemente bloquea la replicación
del ADN bacteriano, por medio de la inhibición de la subunidad A de la enzima girasa del
ADN induciendo la formación de un complejo enzimático ineficaz. Sus acciones también
pueden causar que el empaquetamiento ultratorcional del ADN se vea relajado, causando
inestabilidad en las moléculas genéticas.
8.

9.

10. La asepcia en la toma de muestra, el uso de antibioticos antes de tomar la

muestra, el manejo de la muestra o del sembrado, temperaturas adecuadas durante
el cultivo

Componentes del medio de cultivo

Las propiedades que debiera tener un medio ideal para antibiograma son las siguientes:
1. Debe permitir el crecimiento de la mayoría de los patógenos

2. Deben estar definidos sus componentes básicos

3. Las pruebas de sensibilidad deben ser reproducibles con diferentes lotes del medio
preparados por diferentes productores

4. Debe estar libre de componentes que antagonicen a los antimicrobianos

5. No debe sufrir oscilaciones importantes del pH durante el crecimiento de los

microorganismos

6. Las versiones en caldo y sólida del medio debe tener la misma composición excepto en la
presencia de un agente solidificante

7. Debe ser aproximadamente isotónico para las bacterias y permitir la adición de sangre cuando
se requiere el estudio de microorganismos de difícil crecimiento

Se han desarrollado una serie de medios químicamente definidos (SAAM: Synthetic Amino Acid
Medium, DM: Defined medium ) que pretenden cumplir la mayor parte de las exigencias antes
indicadas, aunque estos medios no se han popularizado.

En un estudio en colaboración internacional se decidió la utilización del Mueller-Hinton (MH),

por tener una buena reproducibilidad, la sencillez de su composición y su bajo contenido en
ácido paraaminobenzoico, que antagoniza la actividad de las sulfamidas. También se utilizan en
la actualidad los medios DST (Diagnostic Sensitivity Test ) e Isosensitest.

Concentración en cationes y osmolaridad

Las concentraciones de Ca2+ y Mg2+ tienen un efecto importante en la actividad de los

aminoglicósidos; en medios no suplementados con estos cationes pueden obtenerse valores de
CMI falsamente bajos, sobre todo en Pseudomonas.

Las concentraciones de Mg2+, Ca2+ y Fe2+ también influyen en la CMI de tetraciclinas. Éstas
son más elevadas cuando el MH se suplementa con estos cationes.

Los cationes monovalentes (Na+ y K+) afectan la actividad de bacitracina, ácido fusídico y
novobiocina frente a Staphylococcus aureus y las de penicilinas frente a Proteus.

El aumento de la osmolaridad del medio, condicionado por una alta concentración de ClNa,
determina un aumento en la CMI de los aminoglicósidos. La detección de resistencia a meticilina
en S. aureus se manifiesta con una concentración elevada de ClNa en el medio de cultivo; estas
cepas se detectan fácilmente con la técnica de difusión con disco en agar tripticasa de soja con
ClNa al 5 %.
Carbohidratos

Los carbohidratos del medio de cultivo pueden influir en el tamaño de los halos de inhibición:
en el método de difusión el almidón disminuye la zona de inhibición de Enterococcus faecalis
con penicilina y ampicilina y aumenta la de Haemophilus influenzae con cefalosporinas.

Sangre

El medio de cultivo con sangre suele producir en la técnica de difusión con disco, diámetros
menores y CMI más altas que el método de dilución en medio sólido.

pH del medio y atmósfera de incubación

El pH del medio debería mantenerse próximo al pH fisiológico. Para algunos antimicrobianos los
cambios de la CMI ocasionados por las variaciones del pH del medio entre 6 y 8 tienen
importancia clínica; sobre todo con macrólidos y aminoglicósidos, más activos en un medio
ligeramente básico, y las tetraciclinas y penicilinas que son más activas en un medio ácido. Sin
embargo, las cefalosporinas se ven poco afectadas.

La existencia de glucosa puede ocasionar una disminución del pH durante el crecimiento de

cepas que la metabolizan, la adición de un tampón al medio determina alteraciones que afectan
más la actividad de los antimicrobianos que los cambios de pH que se pretenden corregir.

La atmósfera de incubación es importante para la estabilidad del pH del medio, sobre todo en
el antibiograma en medio sólido debido a la gran superficie expuesta. La incubación en
atmósfera de C02 tiende a disminuir el pH del medio de cultivo; en ella la CMI de
aminoglicósidos y eritromicina es mayor que en atmósfera aerobia sin C02. Cuando el
microorganismo requiera para su crecimiento atmósfera con C02 deben compararse los
resultados de las cepas patrón en estas condiciones y en aerobiosis, paralelamente, para evitar
errores de interpretación.

Densidad del inóculo

El inóculo del antibiograma ha de ser lo suficientemente alto para detectar las tasas bajas de
mutación hacia la resistencia en el microorganismo problema y no debe ser inferior al número
de microorganismos que se encuentran normalmente en las infecciones clínicas.

La densidad del inóculo es una de las variables más importantes, por ello debe ser
cuidadosamente estandarizada para asegurar la reproducibilidad del antibiograma.

El inóculo de las técnicas de dilución en caldo, en particular, puede plantear otros problemas;
por ejemplo, las cepas de S. aureus resistentes a meticilina (MRSA) no se detectan con facilidad
con un inóculo reducido. Se pueden observar discrepancias importantes en la CMI de S. aureus
productor de b-lactamasa cuando se empleen inóculos pequeños respecto a inóculos elevados.

Para preparar el inóculo se aconseja ajustar la turbidez de un cultivo en caldo en fase de

crecimiento activo con la del estándar 0,5 de McFarland (aprox. 10 e8 UFC/ml). Esta suspensión
inicial debe ajustarse luego hasta conseguir un inóculo final de más o menos
5 x 10 e6 UFC/ml.

Para los sistemas de microdilución se ajusta habitualmente la turbidez por nefelometría,

siguiendo una posterior dilución en agua destilada o en caldo. También se puede preparar
tomando 5 colonias, que se emulsionan en suero salino.

Temperatura y tiempo de incubación

La temperatura óptima de incubación en la mayoría de los patógenos humanos es de 35 °C. Se

ha comprobado que un aumento de la temperatura de 35 a 41,5 °C disminuye
significativamente los valores de la CMI en un 20 % de los casos.

Las subpoblaciones heterorresistentes a meticilina de S. aureus (MRSA) se detectan fácilmente

a 30 °C y con dificultad a 37 °C. Para la detección de MRSA se ha propuesto prolongar la
incubación durante 24 o 48 h.